Bactérias quitinolíticas desenvolvem papel fundamental no ciclo de nutrientes através da degradação da quitina no ecossistema marinho. A hidrólise da quitina é realizada por quitinases, as quais podem ser utilizadas em processos biotecnológicos. O estudo teve como objetivo avaliar as condições ótimas de cultivo de bactérias quitinolíticas selecionadas do gênero Aeromonas e a degradação de quitina durante 96 horas de cultivo. Além disso, caracterizá-las pelo sequenciamento total do gene 16S rRNA e por MLSA. O estudo mostrou que os isolados representam duas espécies do gênero Aeromonas. Os isolados comportaram-se de diferentes maneiras em relação às condições de cultivo pré-determindas. Os halos de hidrólise de quitina não estão relacionados à atividade enzimática ou aos produtos de hidrólise de quitina quantificados. As maiores atividades de quitobiosidases e endoquitinases foram observadas em 24 horas e de N-acetil-glicosaminidases em 96 horas. Os perfis enzimáticos diferem entre os isolados e ao longo das 96 horas de cultivo mostrando diversidade enzimática. / Chitinolytic bacteria have key role in nutrient cycling through the chitin degradation in the marine ecosystem. The hydrolysis of chitin is performed by chitinases, which can be used in biotechnological processes. The study aimed to evaluate the optimal conditions for cultivation of selected chitinolytic bacteria of the Aeromonas genus and the degradation of chitin during 96 hours of culture. Moreover, characterize them by 16S rRNA gene full sequencing and MLSA. The study showed that the isolates represent two species of the Aeromonas genus. The isolates had different behavior in relation under conditions pre-determined. The halos of chitin hydrolysis were not related to enzymatic activity or to their products of chitin hydrolysis quantified. The hightest activities of chitobiosidases and endochitinases were observed in 24 hours and the N-acetyl-glicosaminidases in 96 hours. The enzyme profiles differ between isolates and during 96 hours of cultivation showing diversity enzyme.

Universidade Federal do Cearà / Para a detecÃÃo de Aeromonas foram coletadas 90 amostras de Ãgua de superficie e 30 de peixes no estuÃrio do rio Bacanga em SÃo LuÃs/MA, no perÃodo de marÃo a outubro de 2004. As amostras foram submetidas, simultaneamente, ao mÃtodo de plaqueamento direto em Agar Gelatina Fosfato Sal (Agar GSP acrescido de 20flglrnL de ampicilina) para a contagem (UFC/rnL ou g) e a determinaÃÃo do NÃmero Mais ProvÃvel (NMP/100rnL ou g) pela tÃcnica dos tubos mÃltiplos, utilizando-se o Caldo Tripticase Soja (Caldo TSB com 20flglrnL de ampicilina). As espÃcies de peixes analisadas foram: Bagre (Pimelodus maculatus), Tainha (Mugil cephalus), Solha (Pleuronectes platessa), Prata (Hemigrammus rodwayi), Sardinha (Opisthonema oglinum). Os resultados obtidos retratam uma ampla disseminaÃÃo de Aeromonas no estuÃrio. Para as amostras de Ãgua e peixes as contagens variaram de 40 a 1,3x108 UFC/rnL e de 3,2x102 a 5,8x106 UFC/g respectivamente, sendo que os maiores Ãndices foram obtidos nos pontos prÃximos Ãs emissÃes de esgotos domÃsticos. Os valores para o NMP/lOOrnL de Ãgua oscilaram entre 2,3x104 e 1,6x107 e de 230 a 24000/g para peixe. Os maiores Ãndices de Aeromonas foram constatados no mÃs de maior intensidade de chuvas, abril, e os menores em outubro, correspondente ao pico de estiagem na regiÃo, evidenciando assim uma possÃvel sazonal idade na incidÃncia da bactÃria no ambiente estudado. Das 751 cepas isoladas das amostras de Ãgua, 582 foram positivas para Aeromonas, sendo que 52,70. 10 eramA. caviae, 23,8% A. hydrophila, 19,5%,A. veronii e 3,7%A. sobria. Para as isoladas do pescado (245 cepas) 184 foram identificadas como Aeromonas sendo 43,4% de A. caviae, 28,2% de A. hydrophila, 26,6% A. veronii e 1,6% de A. sobria. Com relaÃÃo aos parÃmetros fisico-quÃmicos medidos nas Ãguas de superficie do estuÃrio do rio Bacanga, apenas a temperatura, a salinidade e o pH, tiveram correlaÃÃes significativas. De modo geral, as cepas de Aeromonas sp. foram sensÃveis a maioria dos antimicrobianos testados, com exceÃÃo de ampicilina, ao qual 100% das cepas foram resistentes. / For the detection of Aeromonas were collected 90 samples of surface water and 30 fish in the estuary of the river in St. Louis Bacanga / MA in the period March to October 2004. The samples were submitted, while the method of direct plating on Gelatin Phosphate Salt Agar (Agar GSP plus 20flglrnL of ampicillin) to count (CFU / g or RNL) and the determination of Most Probable Number (NMP/100rnL or g) by the multiple tube technique, using trypticase soya broth (TSB broth with ampicillin to 20flglrnL). The fish species examined were: Bagre (Pimelodus maculatus), Mullet (Mugil cephalus), plaice (Pleuronectes platessa), Silver (Hemigrammus Rodway), Sardines (Opisthonema oglinum). The results show a wide spread of Aeromonas in the estuary. For samples of water and the fish counts ranged from 40 to 1.3 x108 CFU / NLOs and 3.2 x102 to 5.8 x106 CFU / g respectively, and the highest rates were obtained at points close to the emission of domestic sewage. The values for the NMP / lOOrnL of water ranged from 2.3 x104 and 1.6 x107 and 230 to 24,000 / g for fish. The highest rates of Aeromonas were observed in the month of highest intensity of rainfall, April, and lowest in October, corresponding to the peak of drought in the region, thus a possible seasonal effect in the age of the bacteria in the environment studied. Of the 751 strains isolated from water samples, 582 were positive for Aeromonas, with 52.70. 10 were. caviae, 23.8% A. hydrophila, 19.5%, A. A. veronii and 3.7% sobria. For the isolated fish (245 strains) 184 were identified as Aeromonas and 43.4% of A. caviae, 28.2% of A. hydrophila, 26.6% A. veronii and 1.6% of A. sobria. Regarding the physico-chemical parameters measured in surface waters of the estuary of the river Bacanga, only the temperature, salinity and pH, had significant correlations. In general, the strains of Aeromonas sp. were sensitive to most antimicrobials tested, except ampicillin, to which 100% of strains were resistant.

Bactérias quitinolíticas desenvolvem papel fundamental no ciclo de nutrientes através da degradação da quitina no ecossistema marinho. A hidrólise da quitina é realizada por quitinases, as quais podem ser utilizadas em processos biotecnológicos. O estudo teve como objetivo avaliar as condições ótimas de cultivo de bactérias quitinolíticas selecionadas do gênero Aeromonas e a degradação de quitina durante 96 horas de cultivo. Além disso, caracterizá-las pelo sequenciamento total do gene 16S rRNA e por MLSA. O estudo mostrou que os isolados representam duas espécies do gênero Aeromonas. Os isolados comportaram-se de diferentes maneiras em relação às condições de cultivo pré-determindas. Os halos de hidrólise de quitina não estão relacionados à atividade enzimática ou aos produtos de hidrólise de quitina quantificados. As maiores atividades de quitobiosidases e endoquitinases foram observadas em 24 horas e de N-acetil-glicosaminidases em 96 horas. Os perfis enzimáticos diferem entre os isolados e ao longo das 96 horas de cultivo mostrando diversidade enzimática. / Chitinolytic bacteria have key role in nutrient cycling through the chitin degradation in the marine ecosystem. The hydrolysis of chitin is performed by chitinases, which can be used in biotechnological processes. The study aimed to evaluate the optimal conditions for cultivation of selected chitinolytic bacteria of the Aeromonas genus and the degradation of chitin during 96 hours of culture. Moreover, characterize them by 16S rRNA gene full sequencing and MLSA. The study showed that the isolates represent two species of the Aeromonas genus. The isolates had different behavior in relation under conditions pre-determined. The halos of chitin hydrolysis were not related to enzymatic activity or to their products of chitin hydrolysis quantified. The hightest activities of chitobiosidases and endochitinases were observed in 24 hours and the N-acetyl-glicosaminidases in 96 hours. The enzyme profiles differ between isolates and during 96 hours of cultivation showing diversity enzyme.

Virulent Aeromonas hydrophila (vAh) is an important emerging bacterial pathogen causing motile Aeromonas septicemia (MAS) in farmed catfish. Understanding the pathogenicity of the disease is essential for the development of preventive measures. In this study, we aimed to develop a bioluminescent virulent A. hydrophila (BvAh) strain to understand the pathogen-host interactions during infection. To achieve this, a new bioluminescence expression plasmid, pAKgfplux3, was constructed and mobilized to vAh. Catfish were challenged with BvAh using immersion, injection, and adipose fin clip procedures, and bioluminescence signal was tracked in live catfish during infection. We developed a novel BvAh strain for the first time, conducted imaging of BvAh in live fish, detected infection routes and attachment sites of the pathogen, and determined target organs, which provided new insights on the pathogenesis of vAh. MAS progressed better in fish when protection of skin was bypassed. Abraded skin seems to provide a potential portal of entry during vAh infection.

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Graduate

Thesis (PhD)--University of South Australia, 1997

Thesis (PhD (Health Science) in Medical Laboratory Science)--University of South Australia, 1995

Thesis (PhD (Health Science) in Medical Laboratory Science)--University of South Australia, 1995

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Aquicultura, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T03:12:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 287814.pdf: 1361242 bytes, checksum: 00ad5778017d4b1ee1b28a15eaa40b49 (MD5) / O presente trabalho objetivou o isolamento e seleção de bactérias com potencial probiótico para o híbrido resultante do cruzamento entre "pintado", Pseudoplatystoma corruscans e "cachara", Pseudoplatystoma fasciatum, bem como avaliação de diferentes estratégias de aplicação destas bactérias associadas à utilização de prebióticos em dietas comerciais. Na primeira etapa foi isolada e selecionada a cepa Weissela cibaria (CPQBA 001-10 DRM 02) como potencial probiótico após ser avaliada in vitro na inibição de patógenos bacterianos conhecidos para aquicultura e in vivo, colonizando o trato intestinal aumentando o numero total de eritrócitos sanguíneos e alterando a microbiologia do trato intestinal. Após esta etapa foi estudada a inclusão de 0,5 % do prebiótico (Inulina) em dieta comercial, a qual não alterou a estabilidade da dieta e proporcionou aumento na concentração bacteriana inoculada. Na avaliação in vivo, os animais alimentados com as dietas contendo apenas a bactéria probiótica e dieta suplementada com bactéria probiótica e inulina (dieta simbiótica) apresentaram aumento na concentração de imunoglobulina total sérica quando comparados aos animais suplementados somente com inulina e sem suplementação. Na última etapa do projeto após 24 horas da infecção experimental com Aeromonas hydrophila subsp hydrophila, os animais suplementados com W. cibaria apresentaram índices de mortalidade inferiores aos dos grupos controle e tratados com a cepa probiótica para tilápias Lactobacillus plantarum (7,55±3,78; 31,48±9,32 e 33,06±7,94% respectivamente). Foi observado aumento na atividade de lisozima e proteína sérica total nos peixes suplementados em relação aos não suplementados, porém as concentrações de imunoglobulinas totais dos peixes alimentados com simbiótico W. cibaria foram superiores do que as dos peixes suplementados com L. plantarum (8,34±0,19 mg.mL-1 e 7,36±0,95 mg.mL-1). Este produto biotecnológico desenvolvido neste trabalho tem como obetivo melhorar a sanidade no cultivo do surubim híbrido, melhorando os índices de sobrevivência e a imunocompetencia dos peixes.