Magíster en Alimentos mención Gestión, Calidad e Inocuidad de los Alimentos / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / Las micotoxinas son metabolitos secundarios de los cuales se destacan las aflatoxinas (AFLAs) producidas por los hongos Aspergillus flavus y Aspergillus parasiticus. Las principales AFLAs son cuatro: B1, B2, G1 y G2. La AFLA B1, se encuentra generalmente en mayores concentraciones y es la más potente. Las aflatoxinas se encuentran contaminando muchos productos vegetales utilizados en la elaboración de alimentos para humanos y animales como: maíz, harinas de maíz, sorgo, arroz, trigo, cebada, avena, cacahuate, semilla de algodón, nueces, almendras, entre otros. En el presente estudio, se determinó la presencia de AFLAs mediante el uso del método de Cromatografía Líquida de Alta Resolución con detección por fluorescencia (HPLC-FL), desarrollado y validado por el Laboratorio de Toxicología (LABTOX) de la Facultad de Medicina de la Universidad de Chile. Las muestras de nueces y almendras se recolectaron en tres segmentos: a) Árbol, b) Cosecha y c) Almacén, en Centros de Producción Nacional de la región de Valparaíso y O'Higgins respectivamente y se consideraron como muestras analíticas la semilla, la cáscara y el pelón en ambas matrices. El porcentaje de recuperación promedio de AFLAs G1, B1, G2 y B2 en nueces fortificadas en tres niveles: alto, medio y bajo (2,0; 5,0 y 8,0 ng/g) fue de 95,5; 97,2; 96,1 y 97,5 % respectivamente. En la matriz fortificada de almendras en los tres niveles, se obtuvieron los siguientes porcentajes de recuperación promedio 95,1; 96,6; 95,3; 97,3% para AFLAs G1, B1, G2 y B2 respectivamente. Se aplicó un Protocolo de aseguramiento de la calidad para respaldar los resultados de los análisis. La totalidad de las muestras de semilla, cáscara y pelón de las matrices en estudio (nueces y almendras), estuvieron Bajo el Límite de Detección (BLD). El método HPLC-FL y el uso de columnas de inmunoafinidad aplicado en el presente estudio, fue un método fácil, reproducible y robusto. Permitió identificar con exactitud y especificidad las aflatoxinas

Orientador: Jaime Amaya-Farfan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-16T12:28:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sylos_CeliaMariade_M.pdf: 2854429 bytes, checksum: 931a017aac76f6e5f3bc5a3f2e97d2be (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: Com o objetivo de avaliar o efeito de torração, fritura e fervura na destruição de aflatoxinas em amendoim (Arachis hipogaea L.), vários lotes de amendoim naturalmente contamina dos com aflatoxinas foram submetidos a esses processos.Foram verificadas reduções médias de 95,0 e 98,7% no teor de aflatoxinas Bl e 96,2 e 92,3% no teor ,de G1, após o amendoim ter sofrido processos de torração (190 - 200 C/20 minutos) e de fritura (190 C/10 minutos), respectivamente. Para a aflatoxina B2 foram registradas perdas médias de 96,3% após torração e de 99,1% após fritura. Torração a 130 C por uma hora, em escala laboratorial, resultou em reduções médias de apenas 5,5 e 2,3% para aflatoxinas Bl e B2, respectivamente. Em escala industrial, nenhuma redução foi observada. Cocção do amendoim contaminado em água e em sal 5%, durante uma hora, resultou em perdas médias de aflatoxinas Bl e B2 de 77,5 e 83,1%, respectivamente, quando o meio foi água, e de 81, 7 e 78,5 %, respectivamente, quando o meio foi água com sal. A aflatoxina Gl sofreu reduções médias de 88,1% durante a cocção em água. As aflatoxinas perdidas durante o cozimento não foram encontradas na água de cocção. Já a aflatoxina G2 não foi detectada em nenhuma amostra torrada, frita ou cozida. A susceptibilidade de quatro cultivares de milho (Zea mays, L.; Maya Normal, Maya Opaco, Doce Cubano e Nutrimaiz) à contaminação por aflatoxinas foi verificada em estudos de incubação in vitro. Nesses estudos, os grãos dos cultivares no estádio seco foram inoculados com Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus e incubados a 30 C, em umidade relativa de 90%. O cultivar Maya Normal apresentou maior susceptibilidade à produção de aflatoxinas por Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus, enquanto que o Cubano mostrou a maior resistência. Os cultivares Opacos e o Nutrimaiz mostraram susceptibilidades alta e média, respectivamente, quando o fungo usado foi Aspergillus flavus. Por outro lado, esses dois cultivares exibiram baixa susceptibilidade perante o Aspergillus parasiticus. Em termos de composição química, observou-se que os aminoácidos livres fenilalanina, treonina, valina, isoleucina e leucina mostraram efeito positivo na síntese de aflatoxinas por Aspergillus flavus. Por outro lado, somente valina e metionina influíram positivamente na produção de toxinas por Aspergillus parasiticus. Já os ácidos graxos livres, tanto saturados como insaturados, apresentaram correlação negativa com a síntese de aflatoxinas pelos dois fungos.A variação de íon cobre teve, aparentemente, efeito negativo na síntese de aflatoxinas por Aspergillus flavus enquanto que o manganês apresentou efeito negativo para Aspergillus parasiticus. Os açúcares totais influíram negativamente na produção de toxinas pelos dois fungos. Os açúcares redutores, por sua vez, mostraram efeito negativo apenas para Aspergillus flavus / Abstract: The effect of dry roasting, oil roasting and boiling on aflatoxin (AF) destruction in several lots of naturally contaminated peanuts (Arachis hipogaea L.) was studied. Mean destructions for AFBl were 95,0 and 98,7 %, whereas AFGl losses were 96,2 and 96,3%, after dry (190 - 200 C, 20min.) and oil (190 C, 10 min) roasting, respectively. Mean losses of AFB2 were in turn 96,3 and 99,1% for the above processes, respectively. Dry roasting at 130 C for one hour, laboratory scale, brought about average reductions of only 5,5 and 2,3% for AFBl and AFB2, respectively. No reduction was observed at industrial scale. Boiling (98 C) in water for one hour caused mean losses of AFBl and AFB2 of 77,5 and 93,1% respectively, whereas boiling in water with 5% salt brought about corresponding losses of 81,7 and 78.5%. AFGl decreased 88,1% upon boiling. Toxins lost with this process cou1d not be found in the residual water either. Insofar as AFG2 was concerned, no traces were after treatment by either of the three processes. The susceptibility to contamination by AF of four corn detected (Zea mays L.) cultivars (Maya Normal, Maya Opaque-2, Surary-l Cubano and Nutrimayz} was assessed by inoculating the kernels with either Aspergillus flavus or Aspergillus parasiticus prior to incubation at 30 C and 90 RH. The Maya Normal cultivar proved to be the most susceptible when challenged by either fungs. Whereas the Cubano cultivars exhibited the lowest production. The other two cultivars, Opaque-2 and Nutrimaiz, showed high and moderate responses to Aspergillus flavus, respectivelly, and alow susceptibility to Aspergillus parasiticus. In terms of the chemical composition, a positive effect in the synthesis of AF, by Aspergillus flavus was observed for free phenylalanine, threonine, valine, isoleucine and leucine. Meanwhile, valine and methionine correlated positively with AF production by Aspergillus parasiticus. On the other hand, both saturated and unsaturated free fatty acids showed a negative correlation with the synthesis of AF by both species of fungi. Copper variation, within the pre-established range, bore an apparently negative relationship with AF synthesis by Aspergillus flavus. This relationship was also observed for manganese when the fungus used was Aspergillus parasiticus. A clear-cut inverse relationship between total sugars and the bioproduction of AF was found for both fungi. In terms of the reducing sugars, however, such correlation only held true for Aspergillus flavus / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Tesis para optar al grado de Magíster en Ciencias Animales y Veterinarias, con Mención en Medicina Veterinaria Preventiva / Las aflatoxinas son tóxicos de efectos carcinogénicos y mutagénicos, producidas por diferentes especies de Aspergillus. La aflatoxina B1 (AFB1) es la más frecuente de encontrar en tejidos vegetales, al ser consumida por los animales se transforma en aflatoxina M1 (AFM1), que puede ser eliminada por la leche de vacas expuestas a alimento contaminado. En orden a contribuir al estudio del riesgo de eliminación láctea de AFM1 y la posible exposición de la población consumidora de lácteos, se realizó un estudio orientado a validar un método analítico de HPLC-FL para su detección en leche y mediante su utilización, la detección de la toxina en predios lecheros de la zona central de Chile. Durante 2008 y 2009 se analizó la leche proveniente estanques de almacenamiento de 44 predios de las Regiones Metropolitana y Valparaíso, Chile, detectándose la presencia de AFM1 en 33 lecherías, en 16 de ellas los niveles de la toxina superaron los niveles aceptados por la norma nacional de 0,05 μg/l. La presencia de AFM se asoció positivamente a predios de mayor tamaño, mayor producción individual y alimentación con raciones completas que incluían concentrado.

Estudos têm mostrado que a contaminação com aflatoxinas esta distribuída de forma extremamente heterogênea numa massa de grãos contaminada e que algumas frações especificas apresentam maior concentração. No Brasil, apesar da importância econômica e da possibilidade já demonstrada da contaminação com aflatoxinas no milho, não existem estudos da distribuição desta toxina em frações granulométricas, obtidas nos processos de pré-limpeza utilizados no Brasil e também, nas frações visualmente separáveis e consideradas no processo de classificação do milho. Assim, este trabalho teve como objetivo estudar a distribuição da contaminação, com aflatoxinas, em frações de milho, obtidas após peneiragem e separação visual de 30 amostras contaminadas. O procedimento de preparo das amostras para análise de aflatoxinas consistiu-se em passar cada amostra na peneira de crivos circulares de 4,5 mm de diâmetro obtendo-se uma fração &#8805; 4,5 mm e outra < 4,5 mm. A fração < 4,5 mm foi moída e analisada. A fração &#8805; 4,5 mm foi subdividida em duas: uma subamostra foi analisada e a outra passada por peneira de crivos circulares de 5,0 mm de diâmetro, sendo em seguida separada em grãos sadios (correspondendo a grãos regulares) e grãos não sadios (correspondendo a grãos ardidos, avariados, brotados, carunchados, chochos e quebrados), conforme a classificação oficial brasileira. Os resultados mostraram que embora a concentração com aflatoxinas nas frações granulométricas tenha sido estaticamente maior em media para a fração < 4,5mm, a fração &#8805; 4,5mm apresentou para amostras especificas níveis de concentração mais elevados. Entretanto, se for considerado o peso e a concentração com aflatoxinas de cada fração, a contribuição da fração &#8805; 4,5mm para a concentração estimada nas amostras seria sempre maior em comparação a fração < 4,5 mm. Foram encontrados índices de correlação entre as percentagens dos grupos de defeitos definidos pela Classificação Oficial: a) grãos ardidos, queimados e brotados e b) grãos avariados, significativos com relação aos níveis de contaminação estimados para as frações granulométricas. Entretanto, outros estudos em nosso laboratório, ainda não publicados, não mostraram correlação significativa entre estes parâmetros. Portanto o uso dos índices de classificação para estimativa do nível de contaminação com aflatoxinas deve ser melhor estudado. A distribuição da contaminação observada nas frações separadas visualmente mostrou que a contaminação dos grãos não sadios foi estatisticamente maior que dos grãos sadios e em nenhuma amostra os grãos sadios apresentaram maior contaminação que os grãos não sadios. Os níveis de contaminação dos grãos sadios foram menores de 20 &#956 g/kg, máximo nível permitido pela Legislação no Brasil (Brasil, 1996) em 87% das amostras. Todas as frações de grãos sadios apresentaram contaminação maior que este nível. Considerando o peso e a concentração com aflatoxinas de cada fração, a contribuição dos grãos sadios para a concentração estimada seria sempre maior e a retirada dos grãos não sadios contribuiria para reduzir os níveis de contaminação das amostras. Foram encontrados índices de correlação entre a s percentagens dos grupos de defeitos pela Classificação Oficial; a) grãos ardidos, queimados e brotados e b) grãos avariados, significativos com relação aos níveis de contaminação estimados para as frações de grãos sadios e não sadios. Entretanto, outros estudos em nosso laboratório, ainda não publicados, não mostraram correlação significativa entre estes parâmetros. Portanto o uso dos índices de classificação para estimativa do nível de contaminação com aflatoxinas deve ser melhor estudado / not available

Estudos têm mostrado que a contaminação com aflatoxinas esta distribuída de forma extremamente heterogênea numa massa de grãos contaminada e que algumas frações especificas apresentam maior concentração. No Brasil, apesar da importância econômica e da possibilidade já demonstrada da contaminação com aflatoxinas no milho, não existem estudos da distribuição desta toxina em frações granulométricas, obtidas nos processos de pré-limpeza utilizados no Brasil e também, nas frações visualmente separáveis e consideradas no processo de classificação do milho. Assim, este trabalho teve como objetivo estudar a distribuição da contaminação, com aflatoxinas, em frações de milho, obtidas após peneiragem e separação visual de 30 amostras contaminadas. O procedimento de preparo das amostras para análise de aflatoxinas consistiu-se em passar cada amostra na peneira de crivos circulares de 4,5 mm de diâmetro obtendo-se uma fração &#8805; 4,5 mm e outra < 4,5 mm. A fração < 4,5 mm foi moída e analisada. A fração &#8805; 4,5 mm foi subdividida em duas: uma subamostra foi analisada e a outra passada por peneira de crivos circulares de 5,0 mm de diâmetro, sendo em seguida separada em grãos sadios (correspondendo a grãos regulares) e grãos não sadios (correspondendo a grãos ardidos, avariados, brotados, carunchados, chochos e quebrados), conforme a classificação oficial brasileira. Os resultados mostraram que embora a concentração com aflatoxinas nas frações granulométricas tenha sido estaticamente maior em media para a fração < 4,5mm, a fração &#8805; 4,5mm apresentou para amostras especificas níveis de concentração mais elevados. Entretanto, se for considerado o peso e a concentração com aflatoxinas de cada fração, a contribuição da fração &#8805; 4,5mm para a concentração estimada nas amostras seria sempre maior em comparação a fração < 4,5 mm. Foram encontrados índices de correlação entre as percentagens dos grupos de defeitos definidos pela Classificação Oficial: a) grãos ardidos, queimados e brotados e b) grãos avariados, significativos com relação aos níveis de contaminação estimados para as frações granulométricas. Entretanto, outros estudos em nosso laboratório, ainda não publicados, não mostraram correlação significativa entre estes parâmetros. Portanto o uso dos índices de classificação para estimativa do nível de contaminação com aflatoxinas deve ser melhor estudado. A distribuição da contaminação observada nas frações separadas visualmente mostrou que a contaminação dos grãos não sadios foi estatisticamente maior que dos grãos sadios e em nenhuma amostra os grãos sadios apresentaram maior contaminação que os grãos não sadios. Os níveis de contaminação dos grãos sadios foram menores de 20 &#956 g/kg, máximo nível permitido pela Legislação no Brasil (Brasil, 1996) em 87% das amostras. Todas as frações de grãos sadios apresentaram contaminação maior que este nível. Considerando o peso e a concentração com aflatoxinas de cada fração, a contribuição dos grãos sadios para a concentração estimada seria sempre maior e a retirada dos grãos não sadios contribuiria para reduzir os níveis de contaminação das amostras. Foram encontrados índices de correlação entre a s percentagens dos grupos de defeitos pela Classificação Oficial; a) grãos ardidos, queimados e brotados e b) grãos avariados, significativos com relação aos níveis de contaminação estimados para as frações de grãos sadios e não sadios. Entretanto, outros estudos em nosso laboratório, ainda não publicados, não mostraram correlação significativa entre estes parâmetros. Portanto o uso dos índices de classificação para estimativa do nível de contaminação com aflatoxinas deve ser melhor estudado / not available

[EN] Argentina is the main world exporter of peanuts with over 400,000 tons per year, which are mainly destined for European Union (EU) by more than 70% of exports. The main health-risk factor is the presence of mycotoxins in peanuts, mainly aflatoxins AFG2, AFG1, AFB2 and AFB1, which are produced by filamentous mold of the genus Aspergillus, more specifically by A. flavus and A. parasiticus. AFB1 was classified by the World Health Organization as a carcinogen in humans. Therefore, the international community has set limits for these aflatoxins. At least 99 countries have regulations for mycotoxins in food or feed; the tightest was set by the EU regulation 165/2010 with a maximum value of 2 ¿g/kg for AFB1 and 4 ¿g/kg for total aflatoxins. It is important to determine the occurrence of aflatoxin in peanut Argentina crops, in the main variety of the region, and to establish certain criteria to minimize contamination. Furthermore, it is essential to develop a method of analysis and a system of control risk through the blanching process. The aim of this thesis was to sample and analyze three agricultural cycles of more than 150,000 tons of peanuts from the central-southern of Cordoba province to determine the occurrence of aflatoxin in growing as a result of weather conditions. It was developed and validated a simple, accurate and economical analytical method based on high performance liquid chromatography performance for the detection and quantification of aflatoxins, AFG2, AFG1, AFB2 and AFB1. Returned values of detection limits were AFG2 = 0.22 ¿g/kg, AFG1 = 0.37 ¿g/kg, AFB2 = 0.12 ¿g/kg and AFB2 = 0.18 ¿g/kg with an average recovery rate of 83.4% for total aflatoxins. By this way as possible to meet the requirements of the EU and the USA. Analytical results indicate that, in the south-central region of Córdoba, aflatoxin contamination does not have a high incidence on the peanuts. Maximum impact on the occurrence of aflatoxins was 2.5% for 2012/2013 production cycle and an average value of 1.3% for the three annual periods studied. It was verified that the total water requirements for peanut cycle are important for the implementation and development of the crop as well as to achieve high yields. However, to prevent fungal growth and subsequent generation of aflatoxins, it is determining to mitigate water stress and apply pest control measures, from formation to grain filling -in R2 to R4 growth stages- taking place from February to end March. It was also found that in this region the crop is virtually mono-varietal where a runner-type peanut Granoleico prevails over other varieties. The average values of oleic acid in the samples were 78.97 ± 2.29%. During crop reception from the fields, samples moisture and damaged kernels were determined. Also the storage conditions were controlled. Finally, criteria that would allow implement of hazard analysis and critical points control system during critical stages of the crop, were established. Due to the dry blanching process of batches with aflatoxin (with a mass flow of 2,000 kg / h in two consecutive steps of electronic color sorting) and the treatment of rejected kernels (due to the high incidence of damage and defects, with hydrogen peroxide at 0.5% v/v concentration) was possible to reduce AFB1 83.31 ± 15.98% and total aflatoxin up to 17.33 ± 75.99% with weight loss less than 6% w/w. It can be considered as a step that could reduce the food safety hazard of aflatoxin to an acceptable level. Finally, using a logarithmic equation knowing the initial concentration of aflatoxin, peanut industry could predict the behavior of blanching process and determine the aflatoxin final concentration in lots for export without losing resources. / [ES] Argentina es el principal exportador a nivel mundial de maní con más de 400.000 toneladas anuales que tienen como destino principal la Unión Europea (UE) en más de un 70% de las exportaciones. El principal factor de riesgo para la salud es la presencia de micotoxinas en maní, principalmente aflatoxinas AFB1, AFB2, AFG1 y AFG2, que son producidas por hongos filamentosos del género Aspergillus, más específicamente por A. flavus y A. parasiticus. La AFB1 fue clasificada por la Organización Mundial de la Salud como cancerígena en humanos. Por esto, la comunidad internacional ha establecido límites para estas aflatoxinas. Al menos 99 países tienen reglamentos para las micotoxinas en los alimentos o en piensos, siendo los más estrictos los establecidos por el reglamento UE 165/2010, con un valor máximo de 2 ¿g/kg para AFB1 y 4 ¿g/kg para el total de aflatoxinas. Es por ello importante determinar la ocurrencia de aflatoxinas en el cultivo de maní en Argentina, en la principal variedad de la región, y establecer ciertos puntos de control para minimizar la contaminación y desarrollar un método de análisis y sistema de control de riesgos a través del proceso de blanqueado. En la presente tesis doctoral se cumple con varios objetivos, entre los cuales se destacan como principales el muestreo y análisis durante tres ciclos agrícolas de más de 150.000 toneladas de maní provenientes de la región centro-sur de la provincia de Córdoba para determinar la ocurrencia de aflatoxinas. Para el análisis se desarrolló y validó un método analítico simple, preciso y económico, basado en la cromatografía líquida de alta performance, para la detección y cuantificación de las aflatoxinas, AFB1, AFB2, AFG1 y AFG2, el cual arrojó valores de límites de detección para AFG2=0,22 µg/kg, AFG1=0,37 µg/kg, AFB2=0,12 µg/kg y AFB2=0,18 µg/kg con un porcentaje de recuperación promedio de 83,4% para las aflatoxinas totales cumpliendo los requerimientos de la UE y los EEUU. De acuerdo con los resultados analíticos se puede aseverar que en la región centro-sur de Córdoba, el maní no tiene una alta tasa de contaminación por aflatoxinas, siendo la incidencia máxima en la ocurrencia de aflatoxinas del 2,5% para el ciclo productivo 2012/2013 y un valor promedio del 1,3% para los tres períodos estudiados. Se verificó que los requerimientos hídricos totales durante el ciclo del maní son importantes para la implantación y desarrollo del cultivo como así también para lograr elevados rendimientos, sin embargo, para evitar la proliferación de hongos y posterior generación de aflatoxinas, es importante mitigar el estrés hídrico y aplicar medidas de control de plagas, en las etapas fenológicas R2 a R4, desde la formación hasta el llenado de los granos, que acontecen desde el mes de febrero hasta fin el mes de marzo. También se encontró que en esta región el cultivo es prácticamente mono-varietal, donde el maní tipo runner granoleico prevalece sobre otras variedades. Los valores de ácido oleico promedio hallados en las muestras fueron de 78,97%±2,29. El proceso de blanqueado en seco de lotes con aflatoxinas, con un flujo másico de 2.000 kg/h, en dos etapas consecutivas de selección electrónica por color, sumado al tratamiento de los granos rechazados con alto nivel de daños y defectos, con peróxido de hidrógeno al 0,5% v/v disminuyó la concentración de AFB1 en un 83,31% ± 15,98 y de las aflatoxinas totales hasta en un 75,99% ± 17,33 con una pérdida de peso del lote inferior al 6%, pudiendo considerarse al mismo como capaz de reducir el peligro de las aflatoxinas a un nivel aceptable. Finalmente, es posible para la industria manisera predecir el comportamiento del proceso de blanqueado y determinar la concentración final de aflatoxinas en lotes de exportación sin malgastar recursos mediante el empleo de una ecuación logarítmica conociendo la concentración inicial de aflatoxinas. / [CA] Argentina és el principal exportador a nivell mundial de cacauet amb més de 400.000 tones anuals que tenen com a destí principal la Unió Europea (UE) en més d'un 70% de les exportacions. El principal factor de risc per a la salut és la presència de micotoxinas en cacauet, principalment aflatoxinas AFG2, AFG1, AFB2 i AFB1, que són produïdes per fongs filamentosos del gènere Aspergillus, més específicament per A. flavus i A. parasiticus. L'AFB1 va ser classificada per l'Organització Mundial de la Salut com cancerígena en humans. Per açò, la comunitat internacional ha establi límits per a estes aflatoxinas. Almenys 99 països tenen reglaments per a les micotoxinas en els aliments o en pinsos, sent els més estrictes els establis pel reglament UE 165/2010, amb un valor màxim de 2 ¿g/kg per a AFB1 i 4 ¿g/kg per al total d'aflatoxinas. És per això important determinar la idea d'aflatoxinas en el cultiu de cacauet a Argentina, i establir certs punts de control per a minimitzar la contaminació i desenrotllar un mètode d'anàlisi i sistema de control de riscos a través del procés de blanquejat. La present tesi doctoral compleix diversos objectius, entre els quals es destaquen com a principals el mostratge i anàlisi durant tres cicles agrícoles de més de 150.000 tones de cacauet provinents de la regió centre-sud de la província de Còrdova. Per a l'anàlisi es va desenrotllar i va validar un mètode analític simple, precís i econòmic, basat en HPLC, per a la detecció i quantificació de les aflatoxinas, AFG2, AFG1, AFB2 i AFB1, el qual va presentar valors de límits de detecció per a AFG2=0,22 µg/kg, AFG1=0,37 µg/kg, AFB2=0,12 µg/kg i AFB2=0,18 µg/kg amb un percentatge de recuperació mitjana de 83,4% per a les aflatoxinas totals complint els requeriments de la UE i els EUA. D'acord amb els resultats analítics es pot asseverar que en la regió centre-sud de Còrdova, el cacauet no té una alta taxa de contaminació per aflatoxinas, sent la incidència màxima en la idea d'aflatoxinas del 2,5% per al cicle productiu 2012/2013 i un valor mitjana del 1,3% per als tres períodes estudiats. Es va trobar que els requeriments hídrics totals durant el cicle del cacauet són importants per a la implantació i desenrotllament del cultiu com així també per a aconseguir elevats rendiments, no obstant això, per a evitar la proliferació de fongs i posterior generació d'aflatoxinas, és important mitigar l'estrés hídric i aplicar mesures de control de plagues, en les etapes fenològiques R2 a R4, des de la formació fins a l'ompliment dels grans, que succeïen des del mes de febrer fins a fi el mes de març. També es va trobar que en esta regió el cultiu és pràcticament mona- varietal, on el cacauet tipus runner granoleico preval sobre altres varietats. Els valors d'àcida oleica mitjana trobats en les mostres van ser de 78,97%±2,29. Es va determinar el percentatge d'humitat i grans danyats en les mostres durant la recepció dels grans provinents dels camps, i es monitoraran les condicions d'emmagatzemament, per a finalment, establir criteris que permeteren la implementació d'un sistema d'anàlisi de riscos i punts crítics de control durant les etapes crítiques del cultiu. El procés de blanquejat en sec de lots amb aflatoxinas, amb un flux màssic de 2.000 kg/h, en dos etapes consecutives de selecció electrònica per color, sumat al tractament dels grans rebutjats amb alt nivell de danys i defectes, amb peròxid d'hidrogen al 0,5% v/v va disminuir la concentració d'AFB1 en un 83,31% ± 15,98 i de les aflatoxinas totals fins en un 75,99% ± 17,33 amb una pèrdua de pes del lot inferior al 6%, podent considerar-se al mateix com capaç de reduir el perill de les aflatoxinas a un nivell acceptable. Finalment, és possible per a la indústria manisera predir el comportament del procés de blanquejat i determinar la concentració final d'aflatoxinas en lots d'exportació sense malgastar recursos pe / Garavello, FJ. (2016). Desarrollo de un sistema integrado de calidad para reducir la concentración de aflatoxinas en maní blanqueado [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/63673

Muestra el estudio y caracterización de tres arcillas tipo esmectita, usadas como adsorbentes de micotoxinas tipo Aflatoxinas (B1, B2, G1 y G2), en su forma natural y bajo el proceso de modificación química. Se ha realizado el seguimiento a los cambios estructurales en las acillas provocados por la modificación química, evaluando así en cada una de las etapas su capacidad de adsorción de Aflatoxinas. Finalmente, se definen los parámetros del proceso y características de las arcillas modificadas mediante las cuales se optimiza la adsorción de las Aflatoxinas. La evaluación de las arcillas y seguimiento de los cambios estructurales fueron realizadas por las técnicas de difracción de rayos X, espectroscopía Mössbauer, espectroscopía Infrarroja y absorción atómica. Para la evaluación de adsorción de aflatoxinas se empleó la técnica de Ensayo Inmuno-sorbente Ligado a Enzimas. Las arcillas evaluadas en su forma natural están compuestas mayoritariamente por la arcilla montmorillonita y en menor proporción por cuarzo y cristobalita. Dentro de los cambios más relevantes bajo la modificación química, observados por las diferentes técnicas, podemos mencionar: – Para las tres arcillas, las intensidades de las vibraciones en los enlaces (OH-Mg, Al) y (OH-Al) de los sitios octaédricos disminuyen a medida que se incrementa la concentración ácida en la modificación química. - Por espectroscopía Mössbauer se verificó que, durante la modificación ácida, los sitios de Fe2+ en la estructura de las arcillas están siendo oxidados a Fe3+ . - Por difracción de rayos X se distinguió la expansión de la estructura de la arcilla, verificado por el aumento de la distancia interplanar del plano de reflexión (0 0 1), y su parcial disolución a medida que la concentración en el proceso de la modificación ácida se incrementa. - La prueba de adsorción de aflatoxinas nos indica que en algunos casos el tratamiento ácido en la arcilla puede mejorar la capacidad de adsorción y en otros casos no. Este comportamiento estaría condicionado a la composición química y estructural de la arcilla. - Los cambios más drásticos en la estructura de las arcillas, así como el mayor porcentaje en la adsorción de Aflatoxinas fueron obtenidos con el tratamiento acido a una concentración 2N. / Tesis

O trabalho objetivou construir um dendograma filogenético das cepas de Aspergillus flavus isoladas de amendoim recém-colhido de quatro regiões de São Paulo (Cafelândia, Jaboticabal, Rosália e Tupã), avaliar o potencial toxigênico e agrupar as cepas quanto à produção de esclerócios. A técnica de AFLP foi utilizada para caracterização genotípica. O potencial aflatoxigênico foi avaliado pelo cultivo das cepas em meio de ágar coco, extração das aflatoxinas por clorofórmio, separação por CCD e quantificação por espectrodenditômetro CS-9000. A indução da produção de esclerócios foi feita pela incubação dos isolados em meio ágar Czapeck-DOX. AFLP gerou 78 fragmentos de 27 pb a 365 pb, sendo 13% não polimórficos. O perfil genotípico revelou 31 haplótipos e de 12 grupos no dendograma. A similaridade entre os isolados variou de 37 a 90 %. O potencial aflatoxigênico revelou 91,7 % de cepas produtoras, com níveis entre 39,27 mg/Kg e 28689,61 mg/Kg para AFB1 e 1,50 mg/Kg a 9781,09 mg/Kg para AFB2. Quanto aos esclerócios, 83,9% das cepas foram produtoras, sendo todas tipo S. / This study aimed to draw a phylogenetic dendogram of Aspergillus flavus strains isolated from fresh harvested peanut from four regions of São Paulo state (Cafelândia, Jaboticabal, Rosália and Tupã), to determine the toxigenic potential and to group them regarding the sclerotia production pattern. The AFLP thecnique was used for genotypic characterization. Aflatoxin production was evaluated by inoculation of fungi in coconut agar, extraction with chloroform, TLC segregation and quantification by spectrophotometer CS-9000. Agar Czapeck-DOX was used to evaluate sclerotia production. AFLP generated 78 fragments varying from 27 pb to 365 pb, 13 % of them were not polymorphic. The genotypic profile showed 31 haplotypes and 12 groups in the dendogram. The similarity among the isolates varied from 37 to 90 %. The aflatoxigenic potential showed 91,7 % of producer strains, with levels between 39,27 mg/Kg and 28689,61 mg/Kg for AFB1 and between 1,50 mg/Kg and 9781,09 mg/Kg for AFB2. Concerning the sclerotia production, 83,9 % of the strains were producers, all were S type.

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito protetivo da adição de biomassa de Saccharomyces cerevisiae (SC) residual, obtida da fermentação alcoólica de cana e cerveja contra a passagem de aflatoxina M1 para o leite. Para tanto, foi realizado ensaio preliminar in vitro de remoção de AFB1 em solução tampão fosfato pelas diferentes fontes de biomassa de SC (levedura de cana-de-açúcar seca e inativada, LCSI; levedura autolizada, LA; parede celular, PC; e co-produto de cervejaria parcialmente desidratado, CCPD), em temperatura ambiente pelos tempos de contato de 05, 10, 20 e 30 min. O ensaio in vivo foi realizado por meio de 20 vacas multíparas da raça holandesa que foram selecionadas em estágio médio de lactação. O delineamento experimental consistiu em dez tratamentos, um controle negativo, um controle positivo e dois tratamentos (com e sem inclusão de AFB1) para cada uma das quatro diferentes fontes de SC, durante um período de 10 dias para avaliar a produção e a composição do leite, escore de condição corporal e bioquímica sérica. A análise de amostras de leite para quantificação de AFM1 foi realizada empregando-se coluna de imunoafinidade para purificação associada a CLAE acoplada a espectrômetro de massa triplo quadrupolo. O valor do limite de quantificação de AFM1 foi 0,5 &micro;g kg-1. Amostras de ração foram analisadas para quantificação de AFB1 por meio de coluna de imunoafinidade para purificação associada a CLAE. O valor do limite de quantificação de AFB1 foi de 0,5 &micro;g.kg-1. Através do estudo in vitro foi possível observar que a viabilidade celular não é pré requisito para adsorção e que o tempo de incubação não interfere na capacidade de adsorção de AFB1. No estudo in vivo, não foi observado efeito da AFB1 e nem das diferentes fontes de biomassa de SC sobre o escore de condição corporal, produção e composição do leite. A bioquímica sérica (AST, ALT e PT) avaliada foi similar entre os grupos não intoxicados e intoxicado com AFB1. Os tratamentos LA e PC apresentaram maior capacidade de adsorção de AFB1 em vacas leiteiras previamente intoxicadas. / The aim of this study was to evaluate the protective effect of adding residual biomass of Saccharomyces cerevisiae (SC), obtained from the fermentation of sugarcane and beer against aflatoxin M1 passage into milk. Therefore, preliminary in vitro test of AFB1 removal in phosphate buffer solution by SC different biomass sources (inactive dry yeast sugarcane, IDYS, autolyzed yeast, AY; cell wall, CW and co- brewery partially dehydrated product, CBPDP) at room temperature for contact times of 05, 10, 20 and 30 min was performed. The in vivo assays were performed using 20 multiparous Holstein cows that were selected in mid lactation stage. The experimental design consisted of ten treatments, a negative control, a positive control and two treatments (with and without inclusion of AFB1) for each of four different sources of SC, over a period of 10 days to evaluate the milk yield and composition, body condition score and serum biochemistry. Milk sample analysis for quantification of AFM1 were carried out using an immunoaffinity column for purification associated with HPLC coupled to triple quadrupole mass spectrometer. The limit of quantification for AFM1 was 0.5 &micro;g. kg-1. Feed samples were analyzed for AFB1 quantification by immunoaffinity purification column associated with HPLC. The limit of quantification for AFB1 was 0.5 &micro;g.kg-1. For in vitro study it was observed that the cell viability is not prerequisite for adsorption and the incubation time does not interfere with AFB1 adsorption capacity. For in vivo study, there was no effect of AFB1 nor the different SC biomass sources on body condition score, milk yield and composition. There was no significant difference between the originated AFB1 levels from food samples in different days of the experimental period. Serum biochemical (AST, ALT, TP) evaluated was similar between the control group and intoxicated with AFB1. The AY and CW treatments had higher adsorption capacity in dairy cows previously intoxicated.

Espécie típica da floresta amazônica, a castanha-do-brasil (Bertholletia excelsa, H.B.K.) é uma commodity selvagem, que se destaca na economia regional por ser um produto de alto valor econômico nos mercados nacional e internacional. Apresenta também reconhecido valor nutricional, decorrente de sua composição em lipídeos, proteínas e vitaminas, além de constituir uma excelente fonte de selênio. Entretanto, as condições climáticas em que esta cultura se insere, o baixo nível tecnológico característico de sua cadeia produtiva e as condições inadequadas de manejo e manuseio favorecem a contaminação por aflatoxinas, como também, a deterioração por oxidação por ser um alimento constituído de 60 a 70% de lipídeos. Estas deficiências no processo de extrativismo geram problemas para indústria processadora, que deve fornecer ao consumidor um produto de qualidade nutricional e sanitária. Este estudo objetivou caracterizar a castanha-do-brasil em diferentes etapas do processamento, como também avaliar a sua qualidade ao longo do beneficiamento. Foram analisadas amostras coletadas em 3 etapas, ao longo do processamento industrial, representando o ínicio do processamento (castanha in natura), fase intermediária (castanha dry) e fase final (amêndoas desidratadas). Em cada etapa foram realizadas 8 repetições de amostragens. A composição nutricional foi mantida ao longo do processamento, com predominância do ácido graxo linolênico (ômega-6) nas amostras. O índice de acidez da fração lipídica apresentou resultados satisfatórios, que se encaixam dentro dos limites da legislação vigente para óleos brutos extraídos a frio, com 2,20±0,84, 2,48±0,97 e 0,18±0,07 mg KOH/g de óleo para a castanha in natura, dry e amêndoa desidratada respectivamente. O índice de peróxido da fração lipídica nas amostras in natura apresentaram média de 0,018±0,010 mmol/kg, dry 0,032±0,011mmol/kg e na amêndoa desidratada 0,044±0,011 mmol/kg. Mesmo com o aumento do teor de hidroperóxidos em função do processamento, todas as amostras estão dentro dos padrões estabelecidos na legislação brasileira. Os resultados para absorbância em luz ultravioleta a 232 nm corroboram os resultados da formação de peróxidos, com diferença significativa entre as amostras. Os valores apresentados pelas castanhas in natura, dry e amêndoa desidratada foram de 2,14±0,28, 1,60±0,47 e 3,08±0,37 E1% 1cm, respectivamente. Apesar das diferenças entre indicadores do estado oxidativo das amostras, não houve diferença significativa na estabilidade oxidativa da fração lipídica, quantificada pelo período de indução em Rancimat, cuja média foi de 4,29 horas. A composição em ácidos graxos das amostras também foi similar, sem diferenças significativas entre grupo de ácidos graxos saturados, monoinsaturados e polinsaturados. Em todas as amostras os resultados para coliformes em termos de E. coli foram menores que 1 NMP/g, e ausência de Salmonella em 25 g de castanha. Entretanto, elevados índices de contaminação por aflatoxinas foram encontrados. Apenas 5 das 24 amostras estavam dentro dos limites estabelecidos nas legislações brasileiras e da União Europeia. Contudo, a presença de contaminação por aflatoxinas nas amostras de amêndoas desidratadas, foi reduzida significativamente, após as etapas de seleção e classificação das castanhas. Por meio destes resultados concluímos que as etapas do processamento interferem positivamente na qualidade da castanha-do-brasil. / Typical specie of the Amazon rainforest, the Brazil nut (Bertholletia excelsa, H.B.K.) is a wild commodity that stands out in the regional economy as a product of high economic value both in Brazilian and international markets. It presents also a recognized nutritional value, due to its composition in lipids, proteins and vitamins, in addition to being an excellent source of selenium. However, the climatic conditions of production regions, the low technological level of its supply chain and the unsuitable conditions of harvesting and handling favor the aflatoxins contamination with consequent risk to consumer health and economic losses, as well as, the deterioration by oxidation because it is a food consisting of 60 to 70% lipids. The deficiencies in processes create problems for the processing industry, that should provide the consumer one product with nutritional and health quality. This study aimed to characterize the Brazil nut at different stages of processing, but also assess their quality along the processing. Samples were analyzed in 3 stages, colected at each step of industrial processing, representing the beginning of processing (in nature), intermediate stage (dry nut) and final product (dehydrated kernel). The nutritional composition was maintained throughout the process, with predominant linolenic acid (omega-6) in cold pressed oil samples. Lipidic fraction samples presented low acid values, showing satisfactory results that fit within the limits of current legislation for crude oils: 2.20±0.84, 2.48±0.97 and 0.18±0.07 mg KOH/g in in nature, dry and dehydrated kernel samples, respectively. The peroxide value of the lipid fraction in fresh samples was 0.018±0.010 mmol/kg, in dry sample 0.032±0.011 mmol/kg, and in the dehydrated kernel, 0.044±0.011 mmol/kg. Even with the significant increase in oxidative index, the samples are within the standards established by Brazilian law. The results for absorbance in ultraviolet light (232 nm) corroborate the results of hydroperoxides formation, with significant difference among samples. Absorptivity at 232 nm in in nature nuts, dry and dehydrated kernel were 2.14±0.28, 1.60±0.47 and 3.08±0.37 E1% 1cm, respectively. There was no significant difference in oxidative stability measures by induction period in Rancimat. Samples presented a mean of 4,29 hours and the same fatty acid composition (total saturated, monounsaturated and polunsaturated fatty acids). In all samples the results for coliforms in terms of E. coli were <1 NMP/g, and there were absence of Salmonella in 25 g of nuts. However high levels of contamination by aflatoxins were found. Only 5 of the 24 samples were within the limits established in the Brazilian legislation and the European Union. But, the presence of aflatoxins in dehydrated kernel, was significantly reduced, following the steps of selection and classification of nuts. Through of these results we can conclude that the processing steps positively affect the quality of the Brazil nut.