Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-04-09T14:13:14Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ernandes da Silva Filho - 2018.pdf: 2121110 bytes, checksum: 70fe1857112c1027e6cf53a16c1af017 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-04-09T14:43:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ernandes da Silva Filho - 2018.pdf: 2121110 bytes, checksum: 70fe1857112c1027e6cf53a16c1af017 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-09T14:43:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ernandes da Silva Filho - 2018.pdf: 2121110 bytes, checksum: 70fe1857112c1027e6cf53a16c1af017 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Listeriosis is a bacterial infection caused by Listeria monocytogenes, a bacterium transmitted mainly by the ingestion of contaminated food. It is the main responsible for food infections with low morbidity rate, but when contamination occurs in immunosuppressed the mortality rates are high, representing an important public health problem. Methods available for identification of the presence of Listeria monocytogenes include isolation of the bacterium through conventional culture, laborious, time-consuming and low sensitivity method, and usually complex and costly molecular and / or immunological methods requiring trained personnel and equipment. Therefore, the search for rapid, sensitive and specific methods for detecting the presence of Listeria monocytogenes in foods is useful and necessary for infection prevention and great value to reduce the mortality rate in the immunocompromised as well as to enable the epidemiological surveillance of this disease. The objectives of the study were: To develop lateral flow immunochromatographic test for the identification of L. monocytogenes in foods; To evaluate the performance of the lateral flow immunochromatographic test using food samples naturally and artificially contaminated with L. monocytogenes. As the detection agent, were impregnated glass fiber with anti-internalin-A MAb-2D12 conjugated to colloidal gold. As a capture agent, were sensitized, on nitrocellulose paper, the test line with polyclonal anti-internalin-B antibody, and in the control line with protein A, to validate the activity of the detection agent. Inoculations of standard strains of Listeria monocytogenes were used for evaluation of the Listeria detection in the proposed test. As a negative control, we used strains of Listeria innocua, Enterobacter sp. and Bacillus cereus. Positivity was obtained in prototypes of rapid tests sensitized with Polyclonal Anti-InlB. Positivity was observed in samples containing culture medium and newly cultured bacteria, validating the methodology used in the development of the test. The detection capacity of the test at D concentration is 2x10 4 CFU / mL. / A listeriose é uma infecção bacteriana, provocada por Listeria monocytogenes, uma bactéria transmitida principalmente pela ingestão de alimentos contaminados. É o principal agente responsável pelas infecções alimentares com baixa taxa de morbidade, porém quando a infecção ocorre em imunodeprimidos os índices de mortalidade são elevados, representando um importante problema de saúde pública. Os métodos disponíveis para a identificação da presença de Listeria monocytogenes incluem o isolamento da bactéria através de cultivo convencional, que consiste em um método laborioso, demorado e de baixa sensibilidade e métodos moleculares e/ou imunológicos, normalmente complexos, de custo elevado, requerendo equipamentos e pessoal treinado. Portanto, a busca por métodos alternativos, rápidos, sensíveis e específicos para a detecção da presença de Listeria monocytogenes em alimentos, é útil e necessária para prevenção da infecção e de grande valia para reduzir a taxa de mortalidade nos imunodeprimidos, bem como, viabilizar a vigilância epidemiológica desta enfermidade. Os objetivos do trabalho foram: Desenvolver teste imunocromatográfico de fluxo lateral para identificação de L. monocytogenes em alimentos; Avaliar o desempenho do teste imunocromatográfico de fluxo lateral utilizando amostras de alimentos naturalmente e artificialmente contaminados com L. monocytogenes. Como agente de detecção, foi impregnado à fibra de vidro o monoclonal MAb-2D12 anti-internalina-A conjugado ao ouro coloidal. Como agente de captura, foi sensibilizado, em papel de nitrocelulose, a linha teste com anticorpo policlonal anti-internalina-B, e na linha controle com proteína A, para validar a atividade do agente de detecção. Inóculos de cepas padrões de Listeria monocytogenes foram utilizados para avaliação da detecção Listeria no teste proposto. Como controle negativo, utilizamos cepas de Listeria innocua, Enterobacter sp. e Bacillus cereus. Foi obtido positividade em protótipos de testes rápidos sensibilizados com policlonal anti-InlB. Observou-se positividade em amostras contendo meio de cultura e a bactéria recém cultivada, validando a metodologia empregada no desenvolvimento do teste. A capacidade de detecção do teste foi de 2x10 4 UFC/mL.

Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-02-09T12:44:38Z No. of bitstreams: 2 Tese - Rodrigo Scaliante de Moura - 2014.pdf: 1156729 bytes, checksum: e7cbaa588f1b727f7e6e68f23536f799 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-02-20T11:00:49Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Rodrigo Scaliante de Moura - 2014.pdf: 1156729 bytes, checksum: e7cbaa588f1b727f7e6e68f23536f799 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-20T11:00:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Rodrigo Scaliante de Moura - 2014.pdf: 1156729 bytes, checksum: e7cbaa588f1b727f7e6e68f23536f799 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Serology to detect IgM antibodies against the PGL-I, a species-specific antigen from Mycobacterium leprae, can be used to aid in the identification of individuals with high bacillary load. Samples and the database from the U-MDT clinical trial were used to compare and report the perfomance of diverse classification methods. This study also evaluated the possibility of enhancement of serological tests by substituting the antigen carrier protein, the bovine serum albumin (BSA) by a human protein (HSA), aiming to eliminate unespecific bindings. The tests specificity was evaluated using sampes from household contacts, healthy population, TB patients and Visceral Leishmaniasis from endemic and non-endemic areas. In this study the most sensitive and the least specific approach was represented by counting the number of skin lesions, which identifiel 99% of MB leprosy patients. ML Flow HSA tests correcty allocated 70.9% and 68.6% of patients in the PB group, and 87% and 81% of patients in the MB group, respectively. The study suggests that the carrier protein of the antigen did not influence significantly in the seropositivity of studied groups. PGL-I serology did not presented cross-reactions with Visceral Leishmaniasis serum samples and confirmed a low positivity among control groups. / A sorologia para detecção de anticorpos da classe IgM contra o PGL-I, antígeno específico do M. leprae, pode ser utilizada para auxiliar na identificação de indivíduos com alta carga bacilar. Amostras e o banco de dados do ensaio clínico U-MDT foram utilizados para descrever o desempenho de diversos métodos de classificação. Este estudo também avaliou a possibilidade de melhoria dos testes sorológicos pela substituição da proteína carreadora do antígeno, a albumina bovina (BSA), por uma proteína humana (HSA), visando eliminar ligações não específicas. A especificidade dos testes foi avaliada utilizando amostras de contatos de pacientes, indivíduos saudáveis, pacientes de tuberculose e de leishmaniose visceral de áreas endêmica e não endêmica para hanseníase. Neste estudo, a abordagem mais sensível, porém menos específica foi a contagem de lesões, que foi capaz de detectar 99% dos pacientes multibacilares. Os testes ML Flow utilizando BSA ou HSA foram capazes de alocar corretamente 70,9% e 68,6% dos pacientes PB e, 87% e 81% dos pacientes MB, respectivamente. Portanto, este estudo sugere que a proteína carreadora do antígeno não influencia de maneira significativa na soropositividade dos grupos estudados. A sorologia PGL-I não apresentou reatividade cruzada com o soro de pacientes de Leishmaniose Visceral e se confirmou a baixa soropositividade entre os grupos controle.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / As reaÃÃes alÃrgicas a fÃrmacos representam um terÃo das reaÃÃes adversas a medicamentos, e embora sejam pouco freqÃentes, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade, revelando um importante problema de saÃde pÃblica. Os principais desafios relacionados com a hipersensibilidade a fÃrmacos decorrem do fato de sua imprevisibilidade, de que nÃo existe um modelo animal para pesquisa e devido à variabilidade individual no que diz respeito ao metabolismo do fÃrmaco. As reaÃÃes alÃrgicas a medicamentos sÃo difÃceis de serem diagnosticadas, uma vez que hà carÃncia de mÃtodos laboratoriais para sua investigaÃÃo. O presente estudo teve como objetivo estabelecer alguns mÃtodos imunolÃgicos in vitro para o diagnÃstico de alergia a medicamentos. Vinte pacientes atendidos no AmbulatÃrio de Dermatologia do Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio, Universidade Federal do CearÃ, com manifestaÃÃes muco-cutÃneas e sistÃmicas decorrentes de hipersensibilidade a fÃrmacos foram investigados atravÃs de histÃria clÃnica, exames laboratoriais in vivo e in vitro. Foram avaliados os marcadores de ativaÃÃo de linfÃcitos CD25 e CD69 atravÃs de citometria de fluxo, em cÃlulas mononucleares do sangue perifÃrico previamente incubadas com diferentes concentraÃÃes do fÃrmaco suspeito, e anÃlise das citocinas interferon γ e interleucina 5 no sobrenadante da cultura atravÃs de teste imunoenzimÃtico. Dezoito pacientes foram submetidos aos testes cutÃneos, sendo que nove mostraram resultados positivos a um ou mais fÃrmacos. Quinze pacientes apresentaram positividade para pelo menos um dos marcadores de ativaÃÃo em resposta ao fÃrmaco suspeito. Os marcadores CD69 e/ou CD25 foram expressos pelas cÃlulas T CD4+ e CD8+, tanto em reaÃÃes imediatas como nas nÃo imediatas. A comparaÃÃo dos Ãndices de estimulaÃÃo desses marcadores entre pacientes e indivÃduos saudÃveis nÃo alÃrgicos, resultou em diferenÃa significativa para CD4+CD69+ nas trÃs concentraÃÃes do fÃrmaco suspeito e para CD4+CD25+ apenas na menor concentraÃÃo do fÃrmaco suspeito. Nenhuma diferenÃa significativa para as citocinas IFN-γ e IL-5 foi observada entre os pacientes e os indivÃduos controles. A detecÃÃo de ambos os marcadores de ativaÃÃo CD69 e CD25 aumentou a sensibilidade diagnÃstica do teste. O uso combinado dos marcadores representa uma ferramenta promissora no diagnÃstico laboratorial das reaÃÃes alÃrgicas a medicamentos. NÃo obstante, essa hipÃtese deve ser confirmada com um nÃmero maior de pacientes e controles. / Drug allergy reactions represent one third of adverse drug reactions, and although they are infrequent, they present high rates of morbidity and mortality, revealing a major public health problem. The main challenges related to drug hypersensitivity result from its unpredictability, no animal model for research and individual variability with regard to drug metabolism. Drug allergy reactions are difficult to be diagnosed once there is a lack of laboratorial tests for their investigation. The present study aimed to establish some immunological in vitro methods for diagnosing drug allergy. Patients (n=20) attending a dermatology outpatient clinic, Hospital Universitario Walter CantÃdio, Universidade Federal Ceara, with mucocutaneous and systemic manifestations due to drug hypersensitivity were investigated by clinical history, laboratory findings, and in vivo and in vitro tests. The lymphocyte activation markers, CD25 and CD69, were evaluated by flow cytometry on the peripheral blood mononuclear cells previously incubated with different concentrations of the suspected drug, and analysis of interferon γ and interleukin 5 was done in the culture supernatant by enzyme immunoassay. Eighteen patients were tested by skin tests; nine patients showed positive results to one or more drugs. Fifteen patients showed positivity for at least one of activation markers in response to the suspected drug. The markers CD69 and/or CD25 were expressed by T cells CD4+ and CD8+, both in immediate and delayed reactions. Comparing stimulation index of the markers between patients and healthy no allergic individuals, it was observed a significant difference for CD4+CD69+ in the three suspected drug concentrations and CD4+CD25+ only in the lower drug concentration. No significant differences were found for the cytokines IFN-γ and IL-5 between patients and healthy individuals. The detection of both activation markers CD69 and CD25 increased the diagnostic sensitivity of the test. The use of both markers represents a promising tool in drug allergy diagnosis. Nonetheless, this hypothesis needs to be confirmed with a greater number of patients and controls.

TEIXEIRA, Fabrícia Martins. Marcadores de ativação de linfócitos T e de suas citocinas como ferramentas diagnósticas na hipersensibilidade alérgica a fármacos. 2012. 110 f. : Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Rede Nordeste de Biotecnologia- Renorbio, Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by demia Maia (demiamlm@gmail.com) on 2016-05-23T12:51:39Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_fmteixeira.pdf: 12054646 bytes, checksum: 9a383e69304dd6755cbdf120633dadc1 (MD5) / Approved for entry into archive by demia Maia (demiamlm@gmail.com) on 2016-05-23T12:52:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_fmteixeira.pdf: 12054646 bytes, checksum: 9a383e69304dd6755cbdf120633dadc1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-23T12:52:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_fmteixeira.pdf: 12054646 bytes, checksum: 9a383e69304dd6755cbdf120633dadc1 (MD5) Previous issue date: 2012 / Drug allergy reactions represent one third of adverse drug reactions, and although they are infrequent, they present high rates of morbidity and mortality, revealing a major public health problem. The main challenges related to drug hypersensitivity result from its unpredictability, no animal model for research and individual variability with regard to drug metabolism. Drug allergy reactions are difficult to be diagnosed once there is a lack of laboratorial tests for their investigation. The present study aimed to establish some immunological in vitro methods for diagnosing drug allergy. Patients (n=20) attending a dermatology outpatient clinic, Hospital Universitario Walter Cantídio, Universidade Federal Ceara, with mucocutaneous and systemic manifestations due to drug hypersensitivity were investigated by clinical history, laboratory findings, and in vivo and in vitro tests. The lymphocyte activation markers, CD25 and CD69, were evaluated by flow cytometry on the peripheral blood mononuclear cells previously incubated with different concentrations of the suspected drug, and analysis of interferon γ and interleukin 5 was done in the culture supernatant by enzyme immunoassay. Eighteen patients were tested by skin tests; nine patients showed positive results to one or more drugs. Fifteen patients showed positivity for at least one of activation markers in response to the suspected drug. The markers CD69 and/or CD25 were expressed by T cells CD4+ and CD8+, both in immediate and delayed reactions. Comparing stimulation index of the markers between patients and healthy no allergic individuals, it was observed a significant difference for CD4+CD69+ in the three suspected drug concentrations and CD4+CD25+ only in the lower drug concentration. No significant differences were found for the cytokines IFN-γ and IL-5 between patients and healthy individuals. The detection of both activation markers CD69 and CD25 increased the diagnostic sensitivity of the test. The use of both markers represents a promising tool in drug allergy diagnosis. Nonetheless, this hypothesis needs to be confirmed with a greater number of patients and controls. / As reações alérgicas a fármacos representam um terço das reações adversas a medicamentos, e embora sejam pouco freqüentes, apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade, revelando um importante problema de saúde pública. Os principais desafios relacionados com a hipersensibilidade a fármacos decorrem do fato de sua imprevisibilidade, de que não existe um modelo animal para pesquisa e devido à variabilidade individual no que diz respeito ao metabolismo do fármaco. As reações alérgicas a medicamentos são difíceis de serem diagnosticadas, uma vez que há carência de métodos laboratoriais para sua investigação. O presente estudo teve como objetivo estabelecer alguns métodos imunológicos in vitro para o diagnóstico de alergia a medicamentos. Vinte pacientes atendidos no Ambulatório de Dermatologia do Hospital Universitário Walter Cantídio, Universidade Federal do Ceará, com manifestações muco-cutâneas e sistêmicas decorrentes de hipersensibilidade a fármacos foram investigados através de história clínica, exames laboratoriais in vivo e in vitro. Foram avaliados os marcadores de ativação de linfócitos CD25 e CD69 através de citometria de fluxo, em células mononucleares do sangue periférico previamente incubadas com diferentes concentrações do fármaco suspeito, e análise das citocinas interferon γ e interleucina 5 no sobrenadante da cultura através de teste imunoenzimático. Dezoito pacientes foram submetidos aos testes cutâneos, sendo que nove mostraram resultados positivos a um ou mais fármacos. Quinze pacientes apresentaram positividade para pelo menos um dos marcadores de ativação em resposta ao fármaco suspeito. Os marcadores CD69 e/ou CD25 foram expressos pelas células T CD4+ e CD8+, tanto em reações imediatas como nas não imediatas. A comparação dos índices de estimulação desses marcadores entre pacientes e indivíduos saudáveis não alérgicos, resultou em diferença significativa para CD4+CD69+ nas três concentrações do fármaco suspeito e para CD4+CD25+ apenas na menor concentração do fármaco suspeito. Nenhuma diferença significativa para as citocinas IFN-γ e IL-5 foi observada entre os pacientes e os indivíduos controles. A detecção de ambos os marcadores de ativação CD69 e CD25 aumentou a sensibilidade diagnóstica do teste. O uso combinado dos marcadores representa uma ferramenta promissora no diagnóstico laboratorial das reações alérgicas a medicamentos. Não obstante, essa hipótese deve ser confirmada com um número maior de pacientes e controles.

Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 deniserigueira_dissertr.pdf: 813199 bytes, checksum: 6d0fe389f5316c7bbac1ab5ea9588a7a (MD5) Previous issue date: 2010-07-23 / Respiratory diseases are the second most frequent cause of hospitalization by the Brazilian Unified Health System (SUS). SUS is responsible for 1,541,113 admissions throughout the country. Asthma and Rhinitis are considered the most common chronic diseases among children and teenagers. Their prevalence has been significantly increased becoming a major public health problem. There is a wide range variation in prevalence of reported asthma, rhinitis, and their symptoms. The observed differences can be, at least in part, due to methodological problems in defining asthma symptoms. The International Study of Asthma and Allergies in Childhood (ISAAC) was developed in an attempt to standardize the methods used in epidemiological studies. It is used to evaluate and compare the prevalence and severity of asthma, rhinitis, and eczema among different cities and countries. In Brazil, the standardized ISAAC questionnaire was translated and validated. Several studies pinpoint that social and environmental factors such as the Western lifestyle, urbanization, and increased population density can be considered as important determinants in the prevalence of asthma and rhinitis. Air pollution has also been identified as an exacerbating factor of these allergic diseases. More recent studies have shown the association between air pollution due to cane trash burning and respiratory morbidity, thus increasing the amount of daily inhalation at the Emergency Service and hospitalizations due to respiratory problems. Objective: To estimate prevalence of asthma, rhinitis, related respiratory symptoms, and predisposing factors in students from Monte Aprazível, São Paulo State, and to evaluate the role of daily exposition to air pollution on respiratory function of these students. Monte Aprazível is a low-population density city, with low motor traffic; warm climate; and a predominantly sugarcane-based agriculture. Casuistry and Method: This is a descriptive transversal study in children ranging from 10-14 years of age, using a questionnaire composed of asthma and rhinitis components of ISAAC protocol, along with socio-demographic and predisposing factor questions, family and personal past medical history. Repeated measures of peak expiratory flow in children, and black carbon and PM2,5 concentration levels were carried out. Results: Prevalence of asthma and rhinitis was 11% and 33.2%, respectively. From the asthmatic children, 10.4% presented four or more wheezing attacks in the past 12 months. Past family history was associated to presence of current asthma and rhinitis. Regarding rhinitis, there was also an association with presence of mold and cracks on the house. Rhinitis was most frequent from June to October, which matches sugarcane harvest season. Daily prevalence of PEF beneath 80% of the median was higher in days with greater concentration of PM2,5. Conclusion: Prevalence of asthma is below national average and that of rhinitis is above. Evidence suggests that pollution levels in cane trash burn season, although within acceptable levels, can be contributing to exacerbation of asthma and rhinitis episodes. / As doenças respiratórias constituem a segunda causa de hospitalização pelo SUS (13,59%), responsabilizando-se por 1.541.113 internações em todo o país. A asma e a rinite são consideradas as doenças crônicas mais comuns entre crianças e adolescentes e com prevalências que têm aumentado significativamente, tornando-se um importante problema de saúde pública. Existe grande variação nas prevalências relatadas de asma, rinite e seus sintomas. As diferenças observadas podem ser, pelo menos em parte, devidas a problemas metodológicos na definição dos sintomas de asma. Na tentativa de padronizar os métodos utilizados em estudos epidemiológicos para estimar e comparar prevalência e gravidade de asma, rinite e eczema entre diferentes cidades e países foi desenvolvido o International Study of Asthma and Allergies in Childhood (ISAAC). No Brasil, seu questionário padronizado foi traduzido e validado para o português. Vários estudos ressaltam que fatores sócio-ambientais como o estilo de vida ocidental, urbanização e elevada densidade populacional podem ser considerados determinantes importantes nas prevalências de asma e rinite. A poluição atmosférica também tem sido identificada como fator exacerbador dessas doenças alérgicas. Estudos mais recentes associam exposição à poluição do ar a aumento na incidência de asma. Diversos estudos têm mostrado associação entre poluição ambiental decorrente de queima de palha da cana de açúcar e morbidade respiratória, com aumento do número diário de inalações no Serviço de Emergência e aumento de internações hospitalares por problemas respiratórios. Objetivo: Estimar a prevalência de asma, rinite, sintomas respiratórios relacionados e fatores predisponentes em escolares de Monte Aprazível-SP, cidade com baixo tráfego, baixa densidade populacional, clima quente e que tem como base agrícola predominante a cana de açúcar, e avaliar o papel da exposição diária de poluição do ar na função respiratória desses escolares. Casuística e Método: Estudo descritivo transversal em crianças de 10 a 14 anos, com aplicação de questionário composto pelos componentes de asma e de rinite do protocolo ISAAC, acrescido de questões sócio-demográficas, fatores predisponentes e antecedentes pessoais e familiares. Foram realizadas medidas repetidas do pico de fluxo expiratório nas crianças e dos níveis de concentração de PM2,5 e de black carbon. Resultados: A prevalência de asma foi de 11% e de rinite, de 33,2%. 10,4% apresentaram mais de 4 crises de sibilos nos últimos 12 meses. Antecedentes familiares se associaram à presença de asma e de rinite atuais. Para rinite, houve também associação com presença de mofo ou rachadura na casa. Rinite apresentou maior frequência nos meses de junho a outubro, período de safra da cana de açúcar. Prevalência diária de PFE abaixo de 80% da mediana foi maior em dias com maior concentração de PM2,5. Conclusão: A prevalência de asma está abaixo e a de rinite está acima da média nacional. As evidências sugerem que os níveis de poluição nos períodos de queima da palha da cana de açúcar, embora dentro dos níveis aceitáveis, podem estar contribuindo para a exacerbação de episódios de asma e de rinite.