Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-05-16Bitstream added on 2014-06-13T21:01:48Z : No. of bitstreams: 1 silva_nml_dr_rcla.pdf: 1681735 bytes, checksum: 0eb84f1024cbb7b236e8ba041c6d5158 (MD5) / Os membros da ordem Trentepohliales são estritamente terrestres, crescendo em solo, rochas, troncos, folhas, frutos, folhas e vários tipos de construções artificiais. A ordem consiste de uma única família, Trentepohliaceae, e o número de gêneros é ainda conflitante entre os autores, alguns considerando a família com cinco gêneros (Trentepohlia, Printzina, Phycopeltis, Cephaleuros e Stomatochroon) e outros com seis (incluindo Physolinum, além dos gêneros citados). Esse grupo é um dos mais abundantes em ambientes terrestres e está entre os menos conhecidos e estudados, principalmente em regiões tropicais. Devido à sua morfologia relativamente simples, as Trentepohliales formam um grupo taxonomicamente difícil e sua grande plasticidade morfológica está relacionada a fatores ambientais, tornando confusa a distinção de espécies e gêneros. O presente estudo visou contribuir com o conhecimento taxonômico do grupo, por meio do levantamento florístico em cinco biomas brasileiros: Cerrado (Parque Nacional da Serra da Canastra e Parque Nacional da Chapada dos Veadeiros), Floresta Ombrófila Densa (Parque Estadual da Serra do Mar/Núcleo Picinguaba e Parque Nacional de Itatiaia), Floresta Ombrófila Mista (Região de Campos do Jordão) e Restinga (Parque Estadual da Serra do Mar/Núcleo Picinguaba), além de fragmentos de Floresta Estacional Semidecidual presentes na região noroeste do estado de São Paulo. Adicionalmente, objetivou-se a ampliação geográfica do registro de ocorrência das espécies já registradas em território nacional e descrição de aspectos ecológicos do habitat onde se desenvolvem. O material coletado foi utilizado para detalhamento da taxonomia do grupo, com a aplicação de estudos moleculares, além dos morfológicos clássicos. Os crescimentos de Trentepohliales... / Not available

Orientador: Orlando Necchi Júnior / Resumo: Nos últimos séculos a história do ser humano no planeta Terra tem sido marcada por intensos impactos ambientais antropogênicos negativos, dentre os quais destaca-se a maior exposição da radiação ultravioleta (UV) na superfície terrestre devido à destruição da Camada de Ozônio ocasionada pela liberação de substâncias tais como os CFCs (clorofluorcarbonetos). A radiação UV tem sido considerada com um dos principais fatores que afetam a distribuição dos organismos fotossintetizantes em ambientes aquáticos, tendo efeitos biológicos diversos como danos no DNA e em moléculas proteicas, alteração dos pigmentos fotossintéticos, modificações nos parâmetros fotossintéticos e crescimento desses organismos. Torna-se evidente, portanto, que as mudanças da incidência de radiação UV na superfície terrestre podem levar a alterações ecofisiológicas nas comunidades algais. Nesse contexto, este trabalho teve como objetivo central analisar as respostas fisiológicas (parâmetros fotossintéticos, concentração de pigmentos fotossintéticos e de substâncias fotoprotetoras) à radiação ultravioleta (UVA e UVAB) em macroalgas continentais (ambientes lóticos e aerofíticos). A idéia geral foi avaliar o nível de resposta (tendência de aumento ou diminuição em maior ou menor grau) na performance em função da exposição à radiação ultravioleta. Duas hipóteses gerais foram formuladas: 1) as respostas das macroalgas consistirão essencialmente de tendência de diminuição de sua performance fisiológica (parâmetros fotossintéticos e concentração de pigmentos) e aumento de substâncias fotoprotetoras sob exposição à radiação UV; 2) o nível de resposta será diferente entre os grupos de algas, sendo que para as algas verdes (tipicamente algas de sol) espera-se que sejam mais tolerantes à ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The history of human on planet Earth has been marked by intense negative anthropogenic environmental impacts, which enhanced the exposure to ultraviolet (UV) radiation the Earth's surface due to depletion of the ozone layer caused by the release of substances, such as, CFCs (chlorofluorocarbons). UV radiation has been considered as one of the main factors that affect the distribution of photosynthetic organisms in aquatic environments, with varied biological effects, such as, damage to DNA and protein molecules, alteration of photosynthetic pigments, changes in photosynthetic parameters and growth of these organisms. Changes in the incidence of UV radiation on the Earth's surface can lead to ecophysiological alterations in algal communities. In this context, the objective of this investigation was to analyze the physiological responses (photosynthetic parameters, concentration of photosynthetic pigments and photoprotective substances) to ultraviolet radiation (UVA and UVAB) in inland macroalgae (lotic and aerophytic habitats). The general idea was to evaluate the level of response (trend of increase or decrease to greater or lesser degree) in photosynthetic performance to ultraviolet exposure. Two general hypotheses were formulated: 1) the responses of macroalgae will essentially consist of a trend to decrease in their physiological performance (photosynthetic parameters and pigment concentration) and increase photoprotective substances under UV exposure; 2) the response level will be different among algal groups, with green algae (typically sun-adapted algae) expected to be more tolerant to UV radiation, whereas red algae (typically shaded-adapted algae) to be more sensitive and the cyanobacteria having intermediate responses. Specific hypotheses were formulated for each part of the work (chapters). Experiments were performed under three ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Fernando Masarin / Banca: Banca: Kelly Johana Dussan Medina / Banca: Samuel Conceição de Oliveira / Resumo: Kappaphycus alvarezii é uma macroalga vermelha utilizada principalmente para produção industrial de hidrocolóides (principalmente carragena). O cultivo de K. alvarezii foi estabelecido como uma atividade econômica importante em mais de 20 países. Os principais componentes da biomassa de K. alvarezii são carboidratos. O processamento de carragena a partir de K. alvarezii promove a formação de um resíduo rico em glucana. Objetivo: Avaliar o desenvolvimento de cultivos de K. alvarezii em diferentes condições climáticas e averiguar o efeito da hidrólise enzimática sobre os resíduos obtidos pós-processamento de carragena. Métodos: A parte experimental envolveu o cultivo de 4 cepas de K. alvarezii ao longo de um ano no oceano atlântico em Ubatuba-SP. A partir dos dados dos cultivos foram calculadas as velocidades de crescimento e produtividades. Cultivos selecionados com base nos dados de produtividade foram previamente misturados e homogeneizados e submetidos a um pré-tratamento com KOH 6%. As biomassas previamente pré-tratadas com KOH 6% foram extraídas com água para a obtenção das carragenas e dos resíduos. As frações obtidas no processamento foram caracterizadas quimicamente. Os resíduos foram hidrolisados enzimaticamente com celulases comerciais. Resultados: Foram diferenciados três níveis de produtividade (A, setembro-dezembro de 2013; B, janeiro-março de 2014; C, abril-junho 2014). Os valores de produtividade foram maiores no nível B e intermediários nos níveis A e C. Os val... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The fungus of genus Paracoccidioides is the etiological agent of paracoccidioidomycosis (PCM), an important mycosis in Brazil and Latin America. There are different available therapies, as antifungals belong to the class of polyenes, azoles and sulfonamides. The development of new antifungal agents with greater effectiveness is required to prevent relapse and reduce side effects, the period of treatment and sequelae. The gallic acid molecule with different modifications (alkyl gallates) showed antifungal activity against a representative panel of pathogenic fungi. The decyl gallate (G14) was the study object of this work, for which the Paracoccidioides-host interaction was connected with the mechanism of action. Therefore, the fungus Paracoccidioides lutzii (Pl01) was challenged with the G14 to analyze the changes in the development of budding and cell viability by MTT assay. Then, it was assessed the influence of the G14 in the interaction rate of Pl01 with murine alveolar macrophage lineage AMJ2-C11, with mammalian lung lineage A549 and MRC-5, and hemocytes of Galleria mellonella larvae using assays by flow cytometry. The compound G14 was evaluated for survival rate of infected G. mellonella larvae and to capacity of modulation of nitric oxide production in RAW macrophages. The mechanism of action was performed by chemical-genetic interaction assay followed by genetic interaction, which involves comparing a mutant collection, of Saccharomyces cerevisiae yeast, with hypersensitive profile to G14 to double mutant database to predict via affected. In P. lutzii (Pl01)... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

abstract: In oxygenic photosynthesis, Photosystem I (PSI) and Photosystem II (PSII) are two transmembrane protein complexes that catalyze the main step of energy conversion; the light induced charge separation that drives an electron transfer reaction across the thylakoid membrane. Current knowledge of the structure of PSI and PSII is based on three structures: PSI and PSII from the thermophilic cyanobacterium Thermosynechococcus elonagatus and the PSI/light harvesting complex I (PSI-LHCI) of the plant, Pisum sativum. To improve the knowledge of these important membrane protein complexes from a wider spectrum of photosynthetic organisms, photosynthetic apparatus of the thermo-acidophilic red alga, Galdieria sulphuraria and the green alga, Chlamydomonas reinhardtii were studied. Galdieria sulphuraria grows in extreme habitats such as hot sulfur springs with pH values from 0 to 4 and temperatures up to 56°C. In this study, both membrane protein complexes, PSI and PSII were isolated from this organism and characterized. Ultra-fast fluorescence spectroscopy and electron microscopy studies of PSI-LHCI supercomplexes illustrate how this organism has adapted to low light environmental conditions by tightly coupling PSI and LHC, which have not been observed in any organism so far. This result highlights the importance of structure-function relationships in different ecosystems. Galdieria sulphuraria PSII was used as a model protein to show the amenability of integral membrane proteins to top-down mass spectrometry. G.sulphuraria PSII has been characterized with unprecedented detail with identification of post translational modification of all the PSII subunits. This study is a technology advancement paving the way for the usage of top-down mass spectrometry for characterization of other large integral membrane proteins. The green alga, Chlamydomonas reinhardtii is widely used as a model for eukaryotic photosynthesis and results from this organism can be extrapolated to other eukaryotes, especially agricultural crops. Structural and functional studies on the PSI-LHCI complex of C.reinhardtii grown under high salt conditions were studied using ultra-fast fluorescence spectroscopy, circular dichroism and MALDI-TOF. Results revealed that pigment-pigment interactions in light harvesting complexes are disrupted and the acceptor side (ferredoxin docking side) is damaged under high salt conditions. / Dissertation/Thesis / Ph.D. Biochemistry 2010

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de São Carlos. Departamento de Ciencias Biologicas / Made available in DSpace on 2012-10-15T20:59:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0

NOBRE, Clareane Avelino Simplicio Nobre. Isolamento, purificação e caracterização parcial da estrutura primária de uma ficobiliproteína da alga marinha vermelha Hypnea musciformis (Wulfen) Lamouroux. 2015. 55 f. : Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Engenharia de Pesca, Fortaleza-CE, 2015 / Submitted by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-07-12T12:16:54Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_casnobre.pdf: 1293747 bytes, checksum: ef415f9b1a75c524f87b2a6e87d52332 (MD5) / Approved for entry into archive by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-07-12T12:17:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_casnobre.pdf: 1293747 bytes, checksum: ef415f9b1a75c524f87b2a6e87d52332 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-12T12:17:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_casnobre.pdf: 1293747 bytes, checksum: ef415f9b1a75c524f87b2a6e87d52332 (MD5) Previous issue date: 2015 / Seaweeds are a rich reserve of substances with biotechnological interest, among these substances it is possible to highlight the phycobiliproteins. These molecules are water-soluble proteins covalently linked to pigments with linear tetrapyrrole structure called bilin, also known as accessory pigment. Thus, the phycobiliproteins form a complex named phycobilisomes, which is a primary structure of light-gathering, showing photosynthetic function. These structures are found in red and Cyanophyceae seaweed. Phycobiliproteins isolated and purified, when structuraly analised, present subunits characterized as alpha, beta and gamma. These proteins can be used as colorants and stabilizers for food, markers of biomolecules, antioxidants and anti-inflammatory agents. In view of the importance of these molecules, this work aimed to isolate, purify and determine the partial primary structure of the beta chain phycobiliprotein present in the red marine algae Hypnea musciformis. The phycobiliprotein (HMp) was isolated by precipitation of proteins with ammonium sulphate and purified by ion-exchange chromatography. The polyacrylamide gel electrophoresis revealed that the HMp has two chains around 20 kDa and 22 kDa. The 22 kDa chain was excised from the gel and digested with proteolytic enzyme trypsin. The peptides from digestion underwent fragmentation in mass spectrometer. The generated fragments were used for sequencing peptides and have identified in databases. Primers were designed to amplify the beta chain gene bhmp from the genomic DNA of the algae. The amplified gene was sequenced and the tool Phred/Phrap/Consed processed the raw data. The final gene sequence has been translated to obtain the partial primary structure of bHMp. The translation resulted in a sequence with 87 amino acid residues and HMp presented identity with various phycoerythrins of red algae. / As algas marinhas constituem uma rica reserva de substância de interesse biotecnológico, dentre essas substâncias podemos destacar as ficobiliproteínas. Essas moléculas são proteínas solúveis em água ligadas covalentemente a pigmentos com estrutura tetrapirrólica linear denominado bilina, também conhecido como pigmento acessório. Dessa forma, as ficobiliproteínas formam um complexo denominado ficobilissomos, que constitui uma estrutura primordial de captação de luz, apresentando função fotossintética. Essas estruturas são encontradas nas algas marinhas vermelhas e cianofíceas. Ficobiliproteínas isoladas e purificadas, quando caracterizadas, apresentaram subunidades estruturais, como subunidades alfa, beta e gama. Quanto a suas aplicações, essas proteínas foram utilizadas como corantes e estabilizantes de alimentos, marcadores de biomoléculas, agentes antioxidantes e anti-inflamatórios. Tendo em vista a importância destas moléculas, este trabalho teve como objetivo isolar, purificar e determinar a estrutura primária parcial da cadeia beta de uma ficobiliproteína presente na alga marinha vermelha Hypnea musciformis. A ficobiliproteína (HMp) foi isolada através da precipitação do extrato proteico com sulfato de amônio e purificada por cromatografia de troca iônica. A eletroforese em gel de poliacrilamida revelou que a HMp possui duas bandas proteicas em torno de 20 kDa e 22 kDa. A banda de 22 kDa foi excisada do gel e digerida com a enzima proteolítica tripsina. Os peptídeos oriundos da digestão foram submetidos à fragmentação em espectrômetro de massas. Os fragmentos gerados foram utilizados para sequenciar os peptídeos e estes na identificação de proteínas a partir dos bancos de dados existentes. A partir dessas informações, iniciadores foram desenhados para amplificar o gene da cadeia beta da ficobiliproteína de Hypnea musciformis (bhmp) a partir do DNA genômico da alga. O gene amplificado foi sequenciado e os dados brutos foram processados pela ferramenta Phred/Phrap/Consed. A sequência processada foi traduzida para obtenção da estrutura primária parcial de bhmp. A tradução resultou em uma sequência de 87 resíduos de aminoácidos e HMp apresentou identidade com diversas ficoeritrinas de algas vermelhas.

QUINDERE, Ana Luiza Gomes. Caracterização estrutural e atividade anti-inflamatória em modelo de aterosclerose em camundongos de uma galactana sulfatada da alga vermelha Acanthophora muscoides. 2015. 152 f. Tese (Doutorado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Vitor Campos (vitband@gmail.com) on 2016-09-01T22:42:17Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_algquindere.pdf: 1798137 bytes, checksum: c21776a201b808de159ff9bc73b36644 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-09-02T21:05:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_algquindere.pdf: 1798137 bytes, checksum: c21776a201b808de159ff9bc73b36644 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-02T21:05:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_algquindere.pdf: 1798137 bytes, checksum: c21776a201b808de159ff9bc73b36644 (MD5) Previous issue date: 2015 / Sulfated galactans from red marine algae are polysaccharides with heterogeneous structures that have presented a variety of potentially therapeutic biological effects including anticoagulant, anti-thrombotic and anti-inflammatory, however, their potential activity as anti-inflammatory agent in the treatment of atherosclerosis, a chronic inflammatory disease that culminates with thromboembolic disorders, has not been previously studied. Furthermore, experimental data from animal models and clinical studies support connections between the hemostasis and inflammation in atherogenesis. These interfaces among inflammation and thrombogenesis have been suggested as targets for pharmacological intervention to reduce disease progression. Herein, we determined the chemical structure of a novel sulfated galactan obtained from the marine alga Acanthophora muscoides (fraction AmII) and analysed its effect on a mice model of atherosclerosis in 10-week aged apolipoprotein E deficient (ApoE−/−) mice under high-cholesterol diet for additional 4 or 11 weeks. Fraction AmII (10 mg/kg) or Vehicle were subcutaneously injected from week 2 until 4 of the diet or from week 6 until week 11 of the diet. In vitro assays of macrophage chemotaxis were also performed. The structure of the complex sulfated galactan was characterized by solution nuclear magnetic resonance and its molecular mass was determined by gel permeation chromatography and polyacrylamide gel electrophoresis. The sulfated galactan from A. muscoides presents a molecular mass of ~ 20kDa and an alternating 4-linked α-galactose and 3-linked β-galactose, substituted with sulfate esters and methyl ethers along with the occurrence of 3,6-anhydro-α-galactoses. In the 4 weeks diet model, treatment with fraction AmII did not alter the atherosclerotic plaque size, and other intraplaque features of vulnerability (such as lipid, neutrophil, macrophage, MMP-9 and collagen contents). In the 11 weeks diet model, treatment with fraction AmII reduced intraplaque macrophage and tissue factor (TF) content as compared to Vehicle-treated animals. Intraplaque TF co-localized and positively correlated with macrophage rich-areas. No changes on atherosclerotic plaque size, and other intraplaque features of vulnerability, such as lipid, neutrophil, MMP-9 and collagen contents, were observed. Moreover, mRNA expression of MMPs, chemokines and genetic markers of Th1/2/reg/17 lymphocyte polarization within mouse aortic arches and spleens was not affected by AmII treatment. In vitro, treatment with AmII dose-dependently reduced macrophage chemotaxis without affecting TF production. Overall, the chronic AmII treatment was well tolerated. In conclusion, our results indicate that AmII treatment reduced intraplaque macrophage content, by impacting on cell recruitment, and, concomitantly, intraplaque TF content of potential macrophage origin in atherosclerotic mice. / As galactanas sulfatadas obtidas de algas marinhas vermelhas são polissacarídeos de estruturas heterogêneas que têm apresentado uma variedade de efeitos biológicos, potencialmente terapêuticos, incluindo anticoagulante, antitrombótico e anti-inflamatório. No entanto, a sua atividade potencial como agente anti-inflamatório para o tratamento de aterosclerose, uma doença inflamatória crônica que culmina com distúrbios tromboembólicos, não foi previamente estudada. Além disso, dados experimentais de modelos animais e estudos clínicos suportam conexões entre a hemostasia e inflamação na aterogênese. Estas interfaces entre inflamação e trombogênese têm sido sugeridas como alvos para intervenção farmacológica visando reduzir a progressão da doença. No presente trabalho, determinou-se a estrutura química de uma nova galactana sulfatada obtida da alga marinha Acanthophora muscoides (fração AmII) e analisou-se seu efeito sobre um modelo de aterosclerose em camundongos deficientes em apolipoproteína E (ApoE−/−) de 10 semanas submetidos a dieta de alto teor de colesterol durante mais 4 ou 11 semanas. A fração AmII (10 mg/kg) ou veículo (salina) foram injetados por via subcutânea durante a segunda até a quarta semana de dieta ou a partir da sexta até a décima primeira semana de dieta. Ensaios in vitro de quimiotaxia de macrófagos também foram realizados. A estrutura da galactana sulfatada complexa foi caracterizada por ressonância magnética nuclear em solução e a sua massa molecular foi determinada por cromatografia de permeação em gel e eletroforese em gel de poliacrilamida. A fração AmII apresentou uma massa molecular de ~ 20 kDa e uma alternância de α-galactose 4 ligada e β-galactose 3-ligada, substituído com ésteres de sulfato e éteres de metil, juntamente com a ocorrência de unidades de 3,6-anidro-α-galactoses. No modelo de dieta de 4 semanas, o tratamento com a fração AmII não alteraou o tamanho da placa aterosclerótica e demais características de vulnerabilidade intraplaca, tais como lípido, neutrófilos, macrófagos, metaloprotease de matriz (MMP)-9 e conteúdo de colágeno. No modelo de dieta de 11 semanas, o tratamento com a fração AmII reduziu os conteúdos de macrófago intraplaca e de fator tecidual (FT), em comparação com animais tratados com veículo. O FT intraplaca co-localizou e positivamente correlacionou com áreas ricos em macrófagos. Não foram observadas alterações no tamanho da placa aterosclerótica e nas outras características de vulnerabilidade intraplaca, tais como conteúdos de lipídios, neutrófilos, MMP-9 e do colágeno. Além disso, a expressão de mRNA de MMPs, quimiocinas e marcadores genéticos de polarização de linfócitos Th1/2/reg/17 nos arcos aórticos e nos baços dos camundongos não foi alterada pelo tratamento AmII. In vitro, o tratamento com AmII reduziu de forma dose-dependente a quimiotaxia de macrófagos sem afetar a produção de FT. No geral, o tratamento crônico com AmII foi bem tolerado. Em conclusão, nossos resultados indicam que o tratamento com AmII em camundongos ateroscleróticos reduziu o conteúdo de macrófagos intraplaca, agindo sobre o recrutamento celular, e, concomitantemente, o conteúdo de FT intraplaca de originado potencialmente de macrófagos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de São Carlos. Departamento de Ciencias Biologicas / Made available in DSpace on 2016-01-08T13:32:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1979

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-25Bitstream added on 2014-06-13T19:49:37Z : No. of bitstreams: 1 bautista_ain_me_rcla.pdf: 374564 bytes, checksum: 1e7cf9c5da15f9f6f26f1fe790157e7c (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estudos sobre efeitos da manipulação de nutrientes inorgânicos (especialmente nitrogênio e fósforo) em macroalgas continentais são escassos, especialmente com espécies de regiões tropicais. Foram analisadas as respostas fisiológicas (crescimento, fotossíntese e conteúdo de pigmentos) ao empobrecimento de nitrogênio e fósforo inorgânicos (nas formas de nitrato e fosfato, respectivamente) em condições de cultura de duas populações de Compsopogon coeruleus (denominadas isolados 79 e 58) e em duas populações de Batrachospermum delicatulum (isolados 43 e 111), provenientes de ambientes com distintos níveis de saprobidade e trofia. O objetivo central foi avaliar as respostas das espécies (diminuição ou aumento na resposta fisiológica) conforme decréscimo nas concentrações de nitrogênio e fósforo inorgânicos. Três diluições na concentração original de nitrogênio e fósforo do Meio Básico de Bold foram empregadas: Bold (Controle), -10xN (0,21mM), -25xN(0,09mM), -50xN(0,04mM), - 10xP(0,11mM), -25xP(0,04mM) e -50xP(0,02mM). Nos tratamentos com nitrogênio, o isolado 79 de C. coeruleus respondeu com diminuição mais acentuada da performance geral em relação ao isolado 58, isto é, menores valores de rendimento quântico efetivo (RQE) e das concentrações das ficobilinas em todas as diluições de nitrogênio. A degradação de ficobilinas é uma resposta típica e amplamente descrita de Rhodophyta sob escassez de nitrogênio. O isolado 43 de B. delicatulum reduziu a síntese de clorofila com o decréscimo de nitrogênio no meio, enquanto que no isolado 111 o conteúdo de ficobilinas aumentou, sugerindo que estas populações possuem estratégias distintas de respostas da concentração de pigmentos em relação ao nitrogênio. / Studies on the effects of inorganic nutrients manipulation (specially nitrogen and phosphorus) in freshwater macroalgae are scarce. Physiological responses (growth, photosynthesis and pigment contents) to nitrogen and phosphorus impoverishment (nitrate and phosphate, respectively) were analyzed under culture conditions in two populations of Compsopogon coeruleus (designated isolates 79 and 58), and of Batrachospermum delicatulum (isolates 43 and 111), coming from environments with distinct levels of saprobity and trophy. The essential aim was to evaluate the species’ responses (decrease or increase in physiological performance) to decrease in inorganic nitrogen and phosphorus concentrations. Three dilutions in original concentration of nitrogen and phosphorus of Bold Basic Medium were tested: Bold (Control), -10xN (0,21mM), -25xN(0,09mM), -50xN(0,04mM), -10xP(0,11mM), -25xP(0,04mM) e - 50xP(0,02mM). For the nitrogen treatments, the isolate 79 of C. coeruleus responded with a more pronounced decrease in general performance in comparison to isolate 58, that is, lower values of effective quantum yield (EQY) and of phycobiliprotein concentrations in all nitrogen dilutions. Phycobiliprotein degradation is a typical and widely reported response of red algae under nitrogen scarcity. Isolate 43 of B. delicatulum reduced the chlorophyll synthesis according to nitrogen decrease in the medium, whereas in isolate 111 the phycobiliprotein content increased, suggesting that these populations have distinct strategies of pigment concentration responses to nitrogen impoverishment. For the phosphorus experiments, the isolate 58 responded with a more pronounced decrease in general performance in comparison to isolate 79: lower values of maximum photosynthetic rate (Pmáx) and photosynthetic efficiency (α), besides lower phycobiliprotein concentrations in all phosphorus dilutions.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Sulfated galactans from red marine algae are polysaccharides with heterogeneous structures that have presented a variety of potentially therapeutic biological effects including anticoagulant, anti-thrombotic and anti-inflammatory, however, their potential activity as anti-inflammatory agent in the treatment of atherosclerosis, a chronic inflammatory disease that culminates with thromboembolic disorders, has not been previously studied. Furthermore, experimental data from animal models and clinical studies support connections between the hemostasis and inflammation in atherogenesis. These interfaces among inflammation and thrombogenesis have been suggested as targets for pharmacological intervention to reduce disease progression. Herein, we determined the chemical structure of a novel sulfated galactan obtained from the marine alga Acanthophora muscoides (fraction AmII) and analysed its effect on a mice model of atherosclerosis in 10-week aged apolipoprotein E deficient (ApoE−/−) mice under high-cholesterol diet for additional 4 or 11 weeks. Fraction AmII (10 mg/kg) or Vehicle were subcutaneously injected from week 2 until 4 of the diet or from week 6 until week 11 of the diet. In vitro assays of macrophage chemotaxis were also performed. The structure of the complex sulfated galactan was characterized by solution nuclear magnetic resonance and its molecular mass was determined by gel permeation chromatography and polyacrylamide gel electrophoresis. The sulfated galactan from A. muscoides presents a molecular mass of ~ 20kDa and an alternating 4-linked α-galactose and 3-linked β-galactose, substituted with sulfate esters and methyl ethers along with the occurrence of 3,6-anhydro-α-galactoses. In the 4 weeks diet model, treatment with fraction AmII did not alter the atherosclerotic plaque size, and other intraplaque features of vulnerability (such as lipid, neutrophil, macrophage, MMP-9 and collagen contents). In the 11 weeks diet model, treatment with fraction AmII reduced intraplaque macrophage and tissue factor (TF) content as compared to Vehicle-treated animals. Intraplaque TF co-localized and positively correlated with macrophage rich-areas. No changes on atherosclerotic plaque size, and other intraplaque features of vulnerability, such as lipid, neutrophil, MMP-9 and collagen contents, were observed. Moreover, mRNA expression of MMPs, chemokines and genetic markers of Th1/2/reg/17 lymphocyte polarization within mouse aortic arches and spleens was not affected by AmII treatment. In vitro, treatment with AmII dose-dependently reduced macrophage chemotaxis without affecting TF production. Overall, the chronic AmII treatment was well tolerated. In conclusion, our results indicate that AmII treatment reduced intraplaque macrophage content, by impacting on cell recruitment, and, concomitantly, intraplaque TF content of potential macrophage origin in atherosclerotic mice. / As galactanas sulfatadas obtidas de algas marinhas vermelhas sÃo polissacarÃdeos de estruturas heterogÃneas que tÃm apresentado uma variedade de efeitos biolÃgicos, potencialmente terapÃuticos, incluindo anticoagulante, antitrombÃtico e anti-inflamatÃrio. No entanto, a sua atividade potencial como agente anti-inflamatÃrio para o tratamento de aterosclerose, uma doenÃa inflamatÃria crÃnica que culmina com distÃrbios tromboembÃlicos, nÃo foi previamente estudada. AlÃm disso, dados experimentais de modelos animais e estudos clÃnicos suportam conexÃes entre a hemostasia e inflamaÃÃo na aterogÃnese. Estas interfaces entre inflamaÃÃo e trombogÃnese tÃm sido sugeridas como alvos para intervenÃÃo farmacolÃgica visando reduzir a progressÃo da doenÃa. No presente trabalho, determinou-se a estrutura quÃmica de uma nova galactana sulfatada obtida da alga marinha Acanthophora muscoides (fraÃÃo AmII) e analisou-se seu efeito sobre um modelo de aterosclerose em camundongos deficientes em apolipoproteÃna E (ApoE−/−) de 10 semanas submetidos a dieta de alto teor de colesterol durante mais 4 ou 11 semanas. A fraÃÃo AmII (10 mg/kg) ou veÃculo (salina) foram injetados por via subcutÃnea durante a segunda atà a quarta semana de dieta ou a partir da sexta atà a dÃcima primeira semana de dieta. Ensaios in vitro de quimiotaxia de macrÃfagos tambÃm foram realizados. A estrutura da galactana sulfatada complexa foi caracterizada por ressonÃncia magnÃtica nuclear em soluÃÃo e a sua massa molecular foi determinada por cromatografia de permeaÃÃo em gel e eletroforese em gel de poliacrilamida. A fraÃÃo AmII apresentou uma massa molecular de ~ 20 kDa e uma alternÃncia de α-galactose 4 ligada e β-galactose 3-ligada, substituÃdo com Ãsteres de sulfato e Ãteres de metil, juntamente com a ocorrÃncia de unidades de 3,6-anidro-α-galactoses. No modelo de dieta de 4 semanas, o tratamento com a fraÃÃo AmII nÃo alteraou o tamanho da placa aterosclerÃtica e demais caracterÃsticas de vulnerabilidade intraplaca, tais como lÃpido, neutrÃfilos, macrÃfagos, metaloprotease de matriz (MMP)-9 e conteÃdo de colÃgeno. No modelo de dieta de 11 semanas, o tratamento com a fraÃÃo AmII reduziu os conteÃdos de macrÃfago intraplaca e de fator tecidual (FT), em comparaÃÃo com animais tratados com veÃculo. O FT intraplaca co-localizou e positivamente correlacionou com Ãreas ricos em macrÃfagos. NÃo foram observadas alteraÃÃes no tamanho da placa aterosclerÃtica e nas outras caracterÃsticas de vulnerabilidade intraplaca, tais como conteÃdos de lipÃdios, neutrÃfilos, MMP-9 e do colÃgeno. AlÃm disso, a expressÃo de mRNA de MMPs, quimiocinas e marcadores genÃticos de polarizaÃÃo de linfÃcitos Th1/2/reg/17 nos arcos aÃrticos e nos baÃos dos camundongos nÃo foi alterada pelo tratamento AmII. In vitro, o tratamento com AmII reduziu de forma dose-dependente a quimiotaxia de macrÃfagos sem afetar a produÃÃo de FT. No geral, o tratamento crÃnico com AmII foi bem tolerado. Em conclusÃo, nossos resultados indicam que o tratamento com AmII em camundongos aterosclerÃticos reduziu o conteÃdo de macrÃfagos intraplaca, agindo sobre o recrutamento celular, e, concomitantemente, o conteÃdo de FT intraplaca de originado potencialmente de macrÃfagos.