Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2013. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-06-03T14:46:13Z No. of bitstreams: 1 2013_RobertaRamosCoelho_Parcial.pdf: 1375046 bytes, checksum: c126bf586c468cd419bdfca6216af06b (MD5) / Rejected by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br), reason: Retirar o restante do capítulo 3. on 2015-06-03T18:28:49Z (GMT) / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-06-03T18:35:35Z No. of bitstreams: 1 2013_RobertaRamosCoelho_Parcial.pdf: 749097 bytes, checksum: f12f9942225d4a2704b22859efa25ac3 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-06-03T19:22:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_RobertaRamosCoelho_Parcial.pdf: 749097 bytes, checksum: f12f9942225d4a2704b22859efa25ac3 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-03T19:22:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_RobertaRamosCoelho_Parcial.pdf: 749097 bytes, checksum: f12f9942225d4a2704b22859efa25ac3 (MD5) / O Brasil é o quinto maior produtor de algodão do mundo, e também um dos maiores produtores mundiais de fibra, contribuindo positivamente para a balança comercial. O algodão é atacado por uma série de pragas, sendo o bicudo-doalgodoeiro, Anthonomus grandis, um dos insetos-pragas mais destrutivos. Além do bicudo-do-algodoeiro, o nematoide das galhas Meloidogyne incognita é uma praga importante desta e de outras culturas. O presente trabalho foi realizado visando o desenvolvimento de ferramentas biotecnológicas para o controle destas duas pragas agrícolas. No caso de A. grandis, a técnica do silenciamento gênico por RNAi foi utilizada para estudar a importância da Vitelogenina (proteína envolvida na reprodução dos insetos) para este inseto-praga. A técnica de RNAi é utilizada como ferramenta de validação funcional de genes e para o controle de pragas, e vem sendo utilizada na nova geração de plantas transgênicas. Isto em vista, no presente trabalho foram avaliados os efeitos do silenciamento gênico da vitelogenina de A. grandis (Agvtg) na biologia e no desenvolvimento do inseto adulto e da progênie. Inicialmente, foi realizado um estudo para identificar os melhores genes referência a serem utilizados em estudos gerais de qRT-PCR com este inseto. Após esta identificação, foi determinado o padrão de expressão do gene Agvtg e verificou-se a presença de transcritos em diferentes fases do desenvolvimento do inseto através de qRT-PCR. A proteína (AgVtg) foi localizada, por imunocitoquímica, em oócitos em desenvolvimento. Após microinjeção de dsRNA para Agvtg (dsVtg) em fêmeas de A. grandis, foi verificada uma significativa diminuição no acúmulo de transcritos deste gene. Além disto, verificou-se que as fêmeas tratadas com o dsVtg são capazes de produzir ovos na mesma quantidade dos tratamentos controle, porém, a maior parte dos ovos era inviável. Estudos realizados por meio de microscopia dos ovos oriundos de fêmeas tratadas com dsVtg revelaram, ainda, diferentes fenótipos, correspondentes a paralização do desenvolvimento do embrião em diferentes estágios de desenvolvimento, indicando, provavelmente, diferentes níveis desilenciamento gênico. Os estudos realizados com M. incognita, por sua vez, foram feitos utilizando uma estratégia distinta da anterior. Sabe-se que o nematoide das galhas estimula o ciclo celular das células hospedeiras das plantas, assim, foram utilizadas linhagens de plantas de Arabidopsis thaliana superexpressando proteínas inibidoras do ciclo celular de plantas (KRPs) e mutantes que não expressam estas proteínas para avaliar o efeito no ciclo de vida do patógeno. Esse trabalho nos permitiu demonstrar a possível função de KRP3, KRP5 e KRP7 em galhas induzidas por nematoides. Nossos resultados demonstram que todos os membros desta família afetam a progressão do ciclo celular durante a formação de galhas de forma diferente, afetando o ciclo de vida do nematoide. Assim, os dados gerados neste trabalho certamente contribuirão consideravelmente para o desenvolvimento de novas técnicas e ferramentas para o controle da principal praga do algodão no país, o bicudo-do-algodoeiro, e do nematoide de galhas, Meloidogyne incognita. ____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Brazil is ranked as the fifth world cotton producer, being also one of the largest fiber producers in the world, leading in high contribution to the commercial trade. Cotton is produced in monoculture system, and it is attacked by a large number of pests. The cotton boll weevil, Anthonomus grandis, is one of the most destructive pests of cotton. Also, the root-knot nematode Meloidogyne incognita is an important pest that infect many plants species including cotton. The present work was conducted to develop biotechnological tools for the control of these two agricultural pests. In the case of A. grandis, the technique of gene silencing by RNAi was used to study the importance of vitellogenin (protein involved in reproduction) for this insect pest. The RNAi technique is used as a tool for validation of gene function and pest control, and is used in the new generation of transgenic plants. The present study evaluated the effects of gene silencing of vitellogenin in A. grandis (Agvtg) in biology,development of the adult insect and its progeny. Initially, a study was conducted to identify the best reference genes to be used in general studies qRT-PCR with this insect. After, it was determined the expression pattern of Agvtg gene and the presence of transcripts at different stages of insect development was verified by qRT-PCR. The protein (AgVtg) was located by immunocytochemistry in developing oocytes. After microinjection of dsRNA for Agvtg (dsVtg) in A. grandis females, there was a significant decrease in transcripts accumulation of this gene. Furthermore, it was found that females treated with dsVtg are able to produce eggs in the same amount of control treatments, however, most of the eggs was not viable. Studies performed by microscopy of the eggs that came from females treated with dsVtg also revealed different phenotypes, corresponding to paralysis of embryo development in different stages of development, probably indicating different levels of gene silencing. Studies realized with M. incognita, were made using a different strategy from above. It is known that the root-knot nematode stimulates the cell cycle of the host cells in plants. So Arabidopsis thaliana lines overexpressing cell cycle inhibitory proteins from plants (KRPs) and also mutants which do not express these proteins were used to evaluate the effect the pathogen life cycle. This work allowed us to demonstrate the possible role of KRP3, KRP5 and KRP7 in galls induced by nematodes. Our results demonstrate that all members of this family affect cell cycle progression during gall formation differently, thus affecting the nematode life cycle. Thus, the data generated in this study will certainly contribute significantly to the development of new techniques and tools for the control of major cotton pest in the country, cotton boll weevil, and the root-knot nematode, Meloidogyne incognita.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-17Bitstream added on 2014-06-13T20:48:09Z : No. of bitstreams: 1 grigolli_jfj_me_jabo.pdf: 355083 bytes, checksum: 9d8e7b89c1a1a845a5387f948235891d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O conhecimento do comportamento de uma praga é fundamental para o entendimento da intensidade de seus danos. O objetivou deste trabalho foi estudar o comportamento de alimentação e produção de danos por Anthonomus grandis em cinco cultivares de algodoeiro, avaliando as épocas de maior e menor preferência alimentar e de oviposição de A. grandis, a distribuição vertical no dossel das plantas de botões florais com orifícios de alimentação e oviposição, a preferência alimentar por botões florais de diferentes idades e o respectivo tempo de abscisão. Utilizou-se o delineamento em blocos ao acaso em esquema de parcelas subdivididas com oito repetições. Semanalmente foram avaliadas 5 plantas/parcela. Para o estudo da preferência alimentar por botões florais de diferentes idades e o tempo para sua abscisão, utilizou-se 20 botões florais ao acaso por cultivar, avaliados acompanhados diariamente. NuOPAL, DeltaOPAL e FMX-910 foram utilizadas para alimentação em todo período de florescimento e frutificação das plantas e FMT-701 e FMX-993 apenas no início e no final deste período. DeltaOPAL, FMX-910 e FMX-993 foram utilizadas para oviposição em todo período de florescimento e frutificação das plantas e NuOPAL e FMT-701, apenas no início e no final deste período. Botões florais do terço superior foram mais preferidos para oviposição e botões florais dos terços médio e superior para alimentação. A preferência alimentar foi maior sobre botões florais com 2 dias em NuOPAL e FMX-910 e com 7 dias em DeltaOPAL, FMT-710 e FMX-993. Nas 5 cultivares o tempo para abscisão dos botões florais foi 1 a 2 dias após a primeira punctura de alimentação / The knowledge of a pest behavior is essential for the damage intensity understanding. The objective was to study the feeding behaviour and damage output by Anthonomus grandis in five cotton cultivars. It was evaluated the period of A. grandis major and minor feeding and oviposition preference, the within-plant distribution of flower buds with feeding and oviposition punctures on the plant canopy, the feeding preference for squares at different ages and also the square abscission time after the first feeding puncture. It was used a randomized block design in a split plot design with eight repetitions. Evaluations were performed weekly on five plants per plot. For feeding preference for squares at different ages and the time for its abscission after the first feeding puncture study, were observed in 20 plants/cultivar 20 randomly squares, which were monitored daily. NuOPAL, DeltaOPAL, and FMX-910 were used for feeding throughout the flowering and fruiting period, and FMT-701 and FMX-993 only at the beginning and end of this period. DeltaOPAL, FMX-910, and FMX-993 were used for oviposition throughout the flowering and fruiting period, and NuOPAL and FMT-701 only at the beginning and end of this period. It was observed a feeding preference for flower buds on the medium ans upper parts of the plants and oviposition preference for flower buds on the upper part of the plants for all five cultivars. The boll weevil feeding preference was on squares with two days on NuOPAL and FMX-910 and seven days on DeltaOPAL, FMT-701, and FMX-993. The square abscission time was 1 to 2 days after the first feeding puncture in all cultivars

Submitted by Katiane Souza (katyane.souza@gmail.com) on 2016-04-21T20:24:11Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1994663 bytes, checksum: b4a55d6751cd42500966c407695ecda4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-21T20:24:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1994663 bytes, checksum: b4a55d6751cd42500966c407695ecda4 (MD5) Previous issue date: 2005-03-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The conservation of germplasm of oleaginous species of the cotton (Gossypium hirsutum L.) and the castor bean (Ricinus communis L.) it is of great importance to guarantee the readiness of the resources genetic vegetables for the improvement. The cryoopreservation is seen as great alternative for conservation long term of the resources genetic vegetables. To present research it was developed in the National Center of Research of the Cotton (CNPA) of the Brazilian Company of Agricultural Research (EMBRAPA), Laboratory of Biotechnology, in Campina Grande, PB, with the objective of evaluating cryopreservation protocols for the cotton and the castor bean culture. Cotton seeds were used of the you cvs. BRS 200 and BRS 201 and of the castor bean seeds of the cvs. BRS 188 - Paraguaçu and BRS 149 - Nordestina for the obtaining of your embryonic axes and of the plantlets for the excision of the explants (shoot apices and nod cotiledonare). Among the cryopreservation techniques, they were appraised protocols of vitrification and encapsulation-dehydration for cotton explants and desiccation of embryonic axes of the cotton and of the castor bean culture. In the vitrification, the DMSO was used (0; 5; 10; and 15%) and/or sucrose (0; 0,1; 0,25 and 0,5 M) in the preculture of the explants for 48 hours. In the encapsulation-dehydration, explants were submitted or not to the preculture for 24 hours MS liquid medium supplemented with 0,3 M of sucrose and dived in the encapsulation solution, containing 3% of Na-alginate, forming a bead that involved the explant, which were maintened by 12 hours in MS liquid medium with 0,75 M of sucrose, on a rotary shaker at 130 rpm. The beads containing the explants was submitted to the desiccation by 0; 3; 6 and 9 hours in the flow camera to laminate, with subsequent determination of the content of water. In the procedure of desiccation of the embryonic axes, cotton and castor bean seeds they were submitted the imbibition in water for 24 hours for subsequent extraction of the embryonic axes in the flow camera to laminate, where axes stayed desiccation for 0; 30; 60 and 90 minutes after extraction, with subsequent determination of the content of water. In all experiments the explants they were them placed in cryotubes and directly plunged into liquid nitrogen (-196°C), during 0; 5; 30 and 60 days. At the end of each period, the thawing of the explants was accomplished fast (38±2°C for 1-2 min) and slowly (25±2°C for 60 min) and then cultured in vitro for four weeks, moment in that took place them analysis of viability of the cotton explants and embryonic axes of both species. The desiccation of the cotton embryonic axes for 60 minutes (16% of the content of water) and of the castor bean for 90 minutes (5% of the content of water), when obtained of imbibed seeds, it guaranteed regeneration after cryopreservation. The employment of the DMSO above 5% affected the viability of the explants. The encapsulation induced a reduction in the development of the explants and the desiccation it affected the regeneration. The vitrification and the encapsulation-dehydration didn't guarantee regeneration of the cotton explants cryopreserved. / A conservação de germoplasma de espécies oleaginosas como o algodoeiro (Gossypium hirsutum L.) e a mamoneira (Ricinus communis L.) é de grande importância para garantir a disponibilidade dos recursos genéticos vegetais para o melhoramento. A criopreservação é vista como ótima alternativa para conservação a longo prazo dos recursos genéticos vegetais. A presente pesquisa foi desenvolvida no Centro Nacional de Pesquisa do Algodão (CNPA) da Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA), Laboratório de Biotecnologia, em Campina Grande, PB, com o objetivo de avaliar protocolos de criopreservação para o algodoeiro e a mamoneira. Foram utilizadas sementes de algodoeiro das cvs. BRS 200 e BRS 201 e da mamoneira cvs. BRS 188 - Paraguaçu e BRS 149 - Nordestina para a obtenção de seus eixos embrionários e de plântulas matrizes para excisão dos explantes (ápices caulinares e nós cotiledonares). Dentre as técnicas de criopreservação, foram avaliados protocolos de vitrificação e encapsulamento-dessecação para explantes de algodoeiro e dessecação de eixos embrionários do algodoeiro e da mamoneira. Na vitrificação, empregou-se o dimetilsulfóxido (0; 5; 10; e 15%) e/ou sacarose (0; 0,1; 0,25 e 0,5 M) no meio MS de pré-cultivo dos explantes por 48 horas. No encapsulamento-dessecação, explantes de algodoeiro foram pré-cultivados em MS com 0,3 M de sacarose por 24 horas e mergulhados na solução de encapsulamento com alginato de sódio a 3%; explantes encapsulados foram transferidos para cultivo em MS com 0,75 M de sacarose durante 12 horas sob 130 rpm e então submetidos a dessecação por 0; 3; 6 e 9 horas na câmara de fluxo laminar, com posterior determinação do teor de água. No procedimento de dessecação dos eixos embrionários, sementes de algodoeiro e mamoneira foram submetidas a embebição por 24 horas para posterior extração dos eixos embrionários na câmara de fluxo laminar, onde eixos permaneceram dessecando por 0; 30; 60 e 90 minutos após extração, com posterior determinação do teor de água. Em todos experimentos foram empregadas quatro réplicas de 10 unidades experimentais, que foram postas em criotubos e imersos no nitrogênio líquido (-196°C), onde permaneceram por 0; 5; 30 e 60 dias. Ao final de cada período, o descongelamento das amostras foi realizado rapidamente (38±2°C por 1-2 min) e lentamente (25±2°C por 60 min) e então cultivadas in vitro durante quatro semanas, momento em que se realizou as análise de viabilidade dos explantes de algodoeiro e eixos embrionários de ambas espécies. A dessecação dos eixos embrionários de algodoeiro por 60 minutos (16% do teor de água) e da mamoneira por 90 minutos (5% do teor de água), quando obtidos de sementes embebidas, garantiu regeneração após criopreservação. O emprego do dimetilsufóxido acima de 5% afetou a viabilidade dos explantes. O encapsulamento induziu uma redução no desenvolvimento dos explantes e a dessecação afetou a regeneração. A vitrificação e o encapsulamento-dessecação não garantiram regeneração aos explantes de algodoeiro criopreservados.

Resumo: O controle biológico utilizando microrganismos vem sendo estudado como uma alternativa ao uso de agroquímicos. Estes pesticidas poluem o ambiente, além de serem tóxicos a diversas espécies vegetais e animais. Diante disso, a bactéria Bacillus thuringiensis é um importante entomopatógeno que vem sendo utilizado na agricultura pelo fato de secretar proteínas que são tóxicas a insetos pertencentes a diversas ordens. Dentre os diversos genes de B. thuringiensis que codificam proteínas tóxicas, as classes vip1, vip2 e cry3 destacam-se como alternativa para o controle de insetos-praga da ordem Coleoptera. O presente trabalho objetivou a identificação e caracterização molecular, por meio da técnica de PCR-RFLP, dos genes cry3, vip1, vip2 e vip1/vip2 em uma coleção de B. thuringiensis, quanto a possíveis polimorfismos existentes, procurando relacioná-los à toxicidade em larvas de Anthonomus grandis. Da análise de 1078 isolados de B. thuringiensis, foram encontrados 151 isolados positivos para os genes em estudo e 14 perfis polimórficos, indicando a presença de subclasses destes genes. Os resultados obtidos nos ensaios de toxicidade indicam que os polimorfismos gênicos podem apresentar interferência na toxicidade das proteínas, sendo que a toxina Cry3 apresentou uma maior efetividade na mortalidade em larvas de A. grandis. Os resultados também evidenciaram que a PCR-RFLP mostrou-se apropriada para a detecção da variabilidade genética em B. thuringiensis, permitindo a identificação de haplótipos / Abstract: Biological control using microorganisms is being studied as an alternative to the use of agrochemicals. These pesticides pollute the environment, being toxic to many species of plants and animals. For these reasons, the bacterium Bacillus thuringiensis is an important entomopathogen that has been used in agriculture, once it produces proteins that are toxic to many target insect orders. Among several genes from B. thuringiensis that encode toxic proteins there are vip1, vip2 and cry3 classes that stand as an alternative for controlling insect pests belonging the Coleoptera order. The objective of this work was to identify and characterize molecularly, through PCR-RFLP, the genes cry3, vip1, vip2 and vip1/vip2 in a collection of B. thuringiensis, for possible polymorphisms exist, trying to relate them to the toxicity in Anthonomus grandis larvae. Analysis of 1078 isolates of B. thuringiensis, were found 151 positive isolates for the genes under study and 10 polymorphic profiles, which indicate the presence of subclasses of the genes. These results obtained in tests toxicity indicate that polymorphisms gene may have interference with the toxicity of the protein, and the toxin Cry3 showed a greater effectiveness in mortality in A. grandis larvae. These results also showed that the PCR-RFLP proved to be suitable for the detection of genetic variability in B. thuringiensis, allowing the identification of haplotypes / Orientador: Janete Apparecida Desidério / Coorientador: Odair Aparecido Fernandes / Banca: Maria Inês Tiraboschi Ferro / Banca: José Roberto Postali Parra / Mestre

Orientador: Antonio Carlos Busoli / Banca: Marcos Gino Fernandes / Banca: Arlindo Leal Boiça Júnior / Resumo: O conhecimento do comportamento de uma praga é fundamental para o entendimento da intensidade de seus danos. O objetivou deste trabalho foi estudar o comportamento de alimentação e produção de danos por Anthonomus grandis em cinco cultivares de algodoeiro, avaliando as épocas de maior e menor preferência alimentar e de oviposição de A. grandis, a distribuição vertical no dossel das plantas de botões florais com orifícios de alimentação e oviposição, a preferência alimentar por botões florais de diferentes idades e o respectivo tempo de abscisão. Utilizou-se o delineamento em blocos ao acaso em esquema de parcelas subdivididas com oito repetições. Semanalmente foram avaliadas 5 plantas/parcela. Para o estudo da preferência alimentar por botões florais de diferentes idades e o tempo para sua abscisão, utilizou-se 20 botões florais ao acaso por cultivar, avaliados acompanhados diariamente. NuOPAL, DeltaOPAL e FMX-910 foram utilizadas para alimentação em todo período de florescimento e frutificação das plantas e FMT-701 e FMX-993 apenas no início e no final deste período. DeltaOPAL, FMX-910 e FMX-993 foram utilizadas para oviposição em todo período de florescimento e frutificação das plantas e NuOPAL e FMT-701, apenas no início e no final deste período. Botões florais do terço superior foram mais preferidos para oviposição e botões florais dos terços médio e superior para alimentação. A preferência alimentar foi maior sobre botões florais com 2 dias em NuOPAL e FMX-910 e com 7 dias em DeltaOPAL, FMT-710 e FMX-993. Nas 5 cultivares o tempo para abscisão dos botões florais foi 1 a 2 dias após a primeira punctura de alimentação / Abstract: The knowledge of a pest behavior is essential for the damage intensity understanding. The objective was to study the feeding behaviour and damage output by Anthonomus grandis in five cotton cultivars. It was evaluated the period of A. grandis major and minor feeding and oviposition preference, the within-plant distribution of flower buds with feeding and oviposition punctures on the plant canopy, the feeding preference for squares at different ages and also the square abscission time after the first feeding puncture. It was used a randomized block design in a split plot design with eight repetitions. Evaluations were performed weekly on five plants per plot. For feeding preference for squares at different ages and the time for its abscission after the first feeding puncture study, were observed in 20 plants/cultivar 20 randomly squares, which were monitored daily. NuOPAL, DeltaOPAL, and FMX-910 were used for feeding throughout the flowering and fruiting period, and FMT-701 and FMX-993 only at the beginning and end of this period. DeltaOPAL, FMX-910, and FMX-993 were used for oviposition throughout the flowering and fruiting period, and NuOPAL and FMT-701 only at the beginning and end of this period. It was observed a feeding preference for flower buds on the medium ans upper parts of the plants and oviposition preference for flower buds on the upper part of the plants for all five cultivars. The boll weevil feeding preference was on squares with two days on NuOPAL and FMX-910 and seven days on DeltaOPAL, FMT-701, and FMX-993. The square abscission time was 1 to 2 days after the first feeding puncture in all cultivars / Mestre

Os insetos da ordem Hemiptera apresentam membranas lipoproteicas que revestem as microvilosidades das células intestinais, como se fossem dedos de luva, e formam expansões para o lúmen do intestino que parecem terminar em fundo cego. A presença das duas membranas no ápice dos enterócitos gera questões intrigantes de como se dá a formação da membrana perimicrovilar, como ocorre a absorção de nutrientes e como se dá o encaminhamento de enzimas digestivas para o lúmen intestinal. A digestão de proteínas baseada em enzimas originalmente lisossômicas é uma característica marcante nos Hemiptera, em especial os Heteroptera que evolutivamente voltaram a uma alimentação de polímeros. O presente estudo indica que os genes das proteinases tipicamente lisossômicas sofrem uma série de duplicações, havendo a manutenção de um gene para função puramente lisossômica e a divergência funcional dos demais genes para a função de digestão extracelular. O gene que mantém a função lisossômica não é modulado pela alimentação, além de ser expresso nos mais diversos tecidos. Já os genes que se especializaram na digestão extracelular têm a expressão aumentada com a ingestão de alimento, indicando sua função. Parece não haver diferença nas características relacionadas ao encaminhamento celular das proteínas produzidas por esses genes, indicando que o direcionamento para a rota secretória é devido à superexpressão dos genes relacionados à digestão. Enzimas como alfa-glicosidases, alfa-manosidases e aminopeptidases que participam da digestão extracelular seguem a rota secretória que envolve a formação de vesículas de dupla membrana. Foi possível ampliar o modelo de digestão incluindo a participação das catepsinas D, de uma alfa-glicosidase solúvel e a possível participação de uma tiolredutase além do definir o local de atuação das lipases. Temos agora uma visão global da participação das enzimas digestivas que atuam na digestão em D. peruvianus. / The insects of the order Hemiptera have lipoprotein membranes lining the microvilli of midgut cells, like glove fingers, and form expansions into the lumen of the intestine. The presence of two membranes on the apex of enterocytes thus generates intriguing questions about the formation of perimicrovillar membrane, the absorption of nutrients, and the targeting of digestive enzymes into the intestinal lumen. The digestion of proteins based on originally lysosomal enzymes is an important feature in Hemiptera, especially in Heteroptera that evolutionary returned to feed on polymers. The genes of typical lysosomal proteinases undergo a series of duplications followed by the maintenance of a gene for purely lysosomal function and functional divergence of other genes for extracellular digestion function. The gene that maintains the lysosomal function is not modulated by feeding, in addition to being expressed in diverse tissues. By the other hand, genes specialized in extracellular digestion are up regulated by food intake, indicating its function. No difference was found in the targeting in the proteins produced by these genes, which indicates that targeting to the secretory route is due to overexpression of digestion-related genes. Enzymes involved in extracellular digestion as alpha-glucosidase, alpha-mannosidase and aminopeptidase follow the secretory route that includes the formation of double membrane vesicles. In this study we increased the digestion model adding the participation of cathepsin D, a soluble alpha-glucosidase, and the possible participation of a tiolredutase, and also to defining the place of lipases operation. We now have a global view of the participation of digestive enzymes involved in digestion D. peruvianus.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2017-03-06T16:42:27Z No. of bitstreams: 1 PDF - Damião Raniere Queiroz.pdf: 2080361 bytes, checksum: 44365e2b23cdbf1cba5e480bca445e50 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2017-03-07T16:44:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Damião Raniere Queiroz.pdf: 2080361 bytes, checksum: 44365e2b23cdbf1cba5e480bca445e50 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-07T16:44:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Damião Raniere Queiroz.pdf: 2080361 bytes, checksum: 44365e2b23cdbf1cba5e480bca445e50 (MD5) Previous issue date: 2017-02-16 / This work aimed to estimate the general combining ability (GCA) and the specific combining ability (SCA) for agronomic traits among six upland cotton genotypes and their fifteen hybrid combinations; and to determine the predominant genetic effects in the control of the evaluated traits. In 2015, six cotton genotypes: FM 993, CNPA 04-2080, PSC 355, TAM B 139-17, IAC 26 and TAMCOT – CAMD-E, and fifteen hybrid combinations were evaluated at the Experimental Station of Embrapa Algodão, located in Patos - PB. The experiment consisted of a randomized block design with three replications. The following characteristics were evaluated: plant height (PH, cm); appearance of the first flower (AFF, days); appearance of the first boll (AFB, days); weight of one boll (BW, g); cotton seed yield (CSY, kg/ha); lint percentage (LP, %); cotton fiber yield (LY, kg/ha); length (LEN, mm); uniformity (UNI, %); strength (STR, gf/tex), and fineness (FIN, IM). Diallel analysis was carried out according to the method 2, model 1 of Griffing (1956). Significant differences were detected between the treatments and between the combining abilities estimates (GCA and SCA). Additive effects were predominant for the following characteristics: PH, AFF, AFB, LP, LEN, UNI, STR, FIN and non-additive effects were predominant for: BW, CSY and LY. The genotypes CNPA 04- 2080, IAC 26 and FM 993 showed highest estimates of gi for yield, and the genotype TAM B 139-17 presented the highest estimates for fiber characteristics. In general, the best combinations were: FM 993 x PSC 355, FM 993 x TAMCOT-CAMD-E, CNPA 04-2080 x TAM B 139-17, CNPA 04-2080 x TAMCOT-CAMD-E, PSC 355 x IAC 26 and TAM B 139- 17 x IAC 26, since they have the largest SCA (sij) with at least one of the parents of high GCA (gi). Therefore, they are indicated for extraction of elite lines and for the obtainment of superior genotypes. / O objetivo deste trabalho foi estimar a capacidade geral (CGC) e específica (CEC) de combinação para características agronômicas e tecnológicas de fibra entre seis genótipos de algodoeiro herbáceo e suas quinze combinações híbridas, bem como determinar os efeitos genéticos predominantes no controle dos caracteres avaliados. Em 2015, seis genótipos de algodoeiro: FM 993, CNPA 04-2080, PSC 355, TAM B 139-17, IAC 26 e TAMCOT – CAMD-E e quinze combinações híbridas foram avaliadas na Estação Experimental da Embrapa Algodão, localizada em Patos - PB. O delineamento utilizado foi o de blocos ao acaso com três repetições. Foram avaliadas as seguintes características: Altura de plantas (ALT, cm); Aparecimento da primeira flor (APF, dias); Aparecimento do primeiro capulho (APC, dias); Peso de um capulho (P1C, g); Produtividade de algodão em caroço (PROD, kg/ha); Porcentagem de fibras (PF, %); Produtividade de algodão em fibra (PRODF, kg/ha); Comprimento da fibra (COMP, mm); Uniformidade (UNF, %); Resistência (RES, gf/tex) e Finura (FIN, IM). Procedeu-se a análise dialélica, utilizando-se o método 2, modelo 1 segundo a metodologia proposta por Griffing (1956). Diferenças significativas foram detectadas entre os tratamentos e entre as capacidades combinatórias (CGC e CEC). Verificou-se predominância dos efeitos aditivos para as características: ALT, APF, APC, PF, COMP, UNF, RES, FIN e predominância dos efeitos não aditivos para: P1C, PROD e PRODF. Os genótipos CNPA 04-2080, IAC 26 e FM 993 apresentaram as maiores estimativas de gi para a produtividade, enquanto TAM B 139-17 obteve as maiores estimativas para as características de fibra. De um modo geral, as melhores combinações foram: FM 993 x PSC 355, FM 993 x TAMCOT-CAMD-E, CNPA 04-2080 x TAM B 139- 17, CNPA 04-2080 x TAMCOT-CAMD-E, PSC 355 x IAC 26 e TAM B 139-17 x IAC 26, por apresentarem as maiores CEC (Sij) com pelo menos um dos pais de alta CGC (gi ). Sendo assim, estas combinações são indicadas para extração de linhagens e obtenção de genótipos superiores.

Orientador: Arlindo Leal Boiça Júnior / Resumo: A resistência de plantas a insetos pode trazer contribuições significativas para o manejo de Chloridea virescens (Fabricius) e Spodoptera cosmioides (Walker) em algodão. Porém, ainda há poucas informações de genótipos comerciais resistentes a essas pragas e para selecioná-los é preciso, primeiramente, estabelecer uma metodologia de pesquisa confiável, melhor diferenciar para materiais resistentes e suscetíveis. Assim, neste trabalho foram avaliados potenciais fatores capazes de interferir na expressão de resistência de algodoeiro a S. cosmioides e C. virescens e, posteriormente, foi avaliada a influência de diferentes genótipos de algodoeiro sobre o comportamento de alimentação e desenvolvimento biológico de ambas as espécies para selecionar genótipos resistentes. Foi avaliada a influência dos fatores densidade larval, estrutura vegetal e idade da planta, utilizando as cultivares DeltaOpal e FMT 701. Para S. cosmioides, o uso de duas lagartas de 3º ínstar por disco foliar oriundos da parte mediana de plantas de algodoeiro em estádio de florescimento e para C. virescens uma lagarta de 3º ínstar por disco foliar de folhas da parte superior de plantas em estádio de botão floral permitiram melhor discriminação entre as cultivares quanto seus níveis de resistência. Com base nesses resultados, foi avaliada a influência de genótipos comerciais de algodão sobre o comportamento de alimentação e desenvolvimento de ambas as espécies-praga. Em relação a S. cosmioides, foram avaliados as ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Host plant resistance can contribute significantly to the management of Chloridea virescens (Fabricius) and Spodoptera cosmioides (Walker) in cotton. However, there is still little information on commercial genotypes resistant to these pests and to select them we must first establish a reliable research methodology to better distinguish between resistant and susceptible materials. In this work, we evaluated potential factors capable of interfering in the expression of resistance of cotton to S. cosmioides and C. virescens and, subsequently, the influence of different cotton cultivars on the feeding behavior and biological development of both species was evaluated, aiming select resistant cultivars. The influence of larval density, plant structure and plant phenological stages was evaluated using the DeltaOpal and FMT 701 cultivars. The use of two 3rd instar of S. cosmioides larvae per leaf disc from the middle leaves of first open flower stage and one 3rd instar larva of C. virescens per leaf disc from the upper leaves of plants at first visible floral bub stage allowed better discrimination between genotypes as to their resistance levels. Based on these results, we evaluated the influence of commercial cotton cultivars on the feeding and developmental behavior of both pest species. For S. cosmioides were evaluated the genotypes BRS 286, BRS 293, BRS 335, BRS 336, BRS 368 RF, BRS 372, DeltaOpal, FMT 701, FMT 707, FMT 709, FM 910 and FM 993. BRS 293, BRS 335 and FMT 707 cultiv... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Johnny Rodrigues (johnnyrodrigues@ufcg.edu.br) on 2018-09-17T20:57:43Z No. of bitstreams: 1 JOELMA SALES DOS SANTOS - TESE PPGEA 2012..pdf: 13860742 bytes, checksum: fac37c1ab0eb02e62c3c72dbd0f37041 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-17T20:57:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JOELMA SALES DOS SANTOS - TESE PPGEA 2012..pdf: 13860742 bytes, checksum: fac37c1ab0eb02e62c3c72dbd0f37041 (MD5) Previous issue date: 2012-02 / CNPq / A reutilização de resíduos na agricultura tem-se tornado uma alternativa promissora e viável, de vez que pode substituir a adubação química, proporcionando um elevado aporte de nutrientes às plantas, o que possibilita a redução dos custos de produção. Neste sentido, o objetivo do trabalho foi avaliar o uso de composto orgânico oriundo de lixo doméstico e a irrigação com água residuária doméstica tratada no desenvolvimento, produção e qualidade da fibra do algodoeiro, bem como seu potencial em absorver os metais zinco e cobre. Para isto, as plantas foram cultivadas em ambiente protegido pertencente à Universidade Federal de Campina Grande, município de Campina Grande, PB. O delineamento experimental foi em blocos casualizados em esquema fatorial 6x2, com 3 repetições; as 6 doses de nitrogénio disponível em composto de resíduo sólido foram (0, 60, 100, 140, 180 e 220 kg de N ha'1) e 2 tipos de água (água potável e água residuária doméstica tratada). Verilicou-se que as doses de nitrogénio e os tipos de água utilizados não influenciaram significativamente, no que diz respeito ao desenvolvimento, à produção e qualidade da fibra do algodoeiro BRS 286, a fibra produzida por esta cultivar se encontra dentro dos parâmetros aceitáveis pela indústria têxtil. As plantas de algodão se mostraram mais eficientes na absorção e translocação do zinco quando irrigadas com água residuária doméstica tratada. A adubação orgânica oriunda da compostagem de lixo urbano e a irrigação residuária doméstica tratada, podem substituir a adubação química no cultivo de algodoeiro cultivar BRS 286. / The reuse of waste in agriculture has become a viable and promising alternative, since it can replace chemical fertilizer, providing a high input of nutrients to plants, which enables the reduction of costs production. In this sense, the objective was to evaluate the use of compost derived from household waste and irrigation with treated domestic wastewater in the development, production and quality of cotton fiber, as well as its potential to absorb the metais zinc and copper. For this, the plants were grown in a greenhouse belonging to the Federal University of Campina Grande, Campina Grande, Paraíba state. The experimental design was a randomized block in 6 x 2 factorial with three replicates, and six doses of nitrogen available in compost solid waste were (0, 60, 100, 140, 180 and 220 kg N ha"1) and two types of water (drinking water and treated domestic wastewater). It was found that the nitrogen and the type of water used had no significant effect, as regards the development, production and quality of cotton fiber BRS 286, the fiber is produced by cultivating parameters is within the acceptable industry textiles. The cotton plants were more efficient in uptake and translocation of zinc when irrigated with treated domestic wastewater. The organic fertilizer coming from the composting of urban waste and treated domestic wastewater irrigation can replace chemical fertilizers in the cultivation of cotton cultivar BRS 286.

As respostas comportamentais do bicudo-do-algodoeiro aos compostos orgânicos voláteis de plantas em fase vegetativa, plantas com botão floral, botão floral, flor e maçã e plantas em floração do algodoeiro, e a presença dos semioquímicos que responsáveis pela interação inseto-planta foram investigadas neste trabalho. Todos os experimentos foram realizados em condições de laboratório usando insetos criados em dieta artificial e planta cultivadas em casa de vegetação. Bioensaios usando olfatômetro em ípsilon demonstraram que macho são atraídos pelos voláteis das plantas em fase vegetativa e flores, e as fêmeas pelos voláteis das flores e plantas em floração. Ambos os sexos do bicudo-do-algodoeiro não foram traídos pelos voláteis de planta com botão floral, botão flora e maçã. Compostos voláteis destes tratamentos foram coletados por oito horas e analisados por GC-MS, revelando 13 compostos liberados pelas plantas em floração e 11 nas flores e plantas em fase vegetativa. As plantas em sus respectivas fases de desenvolvimento liberam maiores quantidades de compostos que as flores. As antenas de machos e fêmeas foram eletrofisiologicamente responsivas aos extratos voláteis destes tratamentos, confirmando o mesmo padrão de resposta observado nos bioensaios de olfatometria. Os compostos sintéticos β-caryophyllene e cis-3-hexenyl-acetate presentes em maiores quantidades em plantas em floração não foram atrativos para as fêmeas na concentração utilizada nos bioensaios de olfatometria. Os resultados encontrados neste trabalho demonstram que machos e fêmeas exploram os compostos orgânicos voláteis liberados pelas diferentes fases desenvolvimento da planta e pelas flores, aportando assim, com novas evidencias sobre a interação entre A. grandis e seu principal hospedeiro, G. hirsutum, abrindo a possibilidade de realizar novos estudos visando a aplicabilidade de estes semioquímicos no monitoramento e controle deste importante inseto-praga. / The behavioral responses of the cotton boll weevil to the volatile organic compounds of plants in the vegetative stage, plants with square, squares, flower, boll and flowering plants of cotton, and the presence of semiochemicals responsible for the insect-plant interaction were investigated in this work. All experiments were carried out in laboratory conditions using insects raised in artificial diet and plant grown under greenhouse conditions. Y-tube olfactometer bioassays showed that male were attracted by volatiles of plants in vegetative phase and flowers, and the females by flowers and flowering plants volatiles. Both sexes of the cotton boll weevil were not attracted by plant with squares, squares and boll volatiles. Volatile compounds of these treatments were collected for eight hours and analyzed by GC-MS, revealing 13 compounds released by flowering plants and 11 by flowers and plants in the vegetative stage. Plants in their respective stages of development release larger amounts of compounds than flowers. Male and female antennae were electrophysiologically responsive to the volatile extracts of these treatments, confirming the same response pattern observed in the olfactory bioassays. The synthetic compounds β-caryophyllene and cis-3-hexenyl-acetate present in larger quantities at flowering plants were not attractive for females at the concentration used in Y-tube olfactometer bioassays. The results obtained in this work demonstrate that males and females exploit the volatile organic compounds released by cotton plant at different development stages and by the flowers, thus contributing with new evidence about the interaction between A. grandis and their major host plant, G. hirsutum, which will serve as support for studies aiming at the applicability of these semiochemicals in the monitoring and control of the cotton boll weevil.