Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Mestre em Genética e Bioquímica / O Anacardium humile St. Hill., conhecido como cajuzinho-do-cerrado ou cajuí, é uma espécie pertencente à família Anacardiaceae que ocorre naturalmente em Campo Sujo e no Cerrado do Brasil. Tem importância alimentar, industrial, medicinal e econômica e a castanha tem as mesmas características e usos do cajú comum, com ampla utilização para o consumo. Pelo fato das espécies do Cerrado mostrarem interesses antagônicos, biológico e socieconômico, torna-se necessário gerar informações biológicas, na tentativa de uma adequada exploração econômica, para evitar a utilização predatória ou, até mesmo, a extinção da espécie. O objetivo desse trabalho foi o de otimizar um protocolo para cultivo em escala comercial, por micropropagação de Anacardium humile, além de analisar os patógenos existentes no cultivo in vitro, para quantificar a melhor concentração de fungicida sistêmico a ser utilizado na cultura de cajuí. Foi analisada, ainda, a divergência genética existente entre populações do cerrado mineiro (Clube Caça e Pesca Itororó Uberlândia MG) e goiano (Parque Estadual da Serra de Caldas Caldas Novas - GO) por meio da técnica de AFLP (Amplified Fragment Lenght Polimorphism). Ocorreu baixo sucesso de micropropagação de cajuí apesar de se obter brotos, que não puderam ser aclimatados. A análise de microrganismos mostrou prevalência de Aspergillus niger no cultivo in vitro sendo que as concentrações utilizadas de benomyl no meio foram muito elevadas, podendo causar fitotoxicidade às plântulas. Quanto à análise da divergência genética verificou-se maior distância genética entre populações de regiões diferentes (58%) do que dentro da mesma região (35% Clube Caça e Pesca Itororó; 47% Parque Estadual da Serra de Caldas) apesar de as plantas apresentarem características fenotípicas distintas.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O controle da cicatrizaÃÃo Ãssea tem grande importÃncia na traumatologia, visto que os princÃpios que norteiam esta Ãrea sÃo a limpeza da ferida, reduÃÃes precoces com fixaÃÃo do foco da fratura, assegurando viabilidade circulatÃria local, prevenindo a infecÃÃo, principalmente nas fraturas expostas. A aroeira-do-sertÃo (Myracroduon urundeuva Fr. All), Ãrvore da famÃlia AnacardiÃcea, à conhecida pelo seu uso popular com atividades antiinflamatÃrias e cicatrizantes, surgindo como alternativa terapÃutica. Diante dessas qualidades, foram analisadas suas atividades, utilizando um modelo experimental em fraturas expostas induzidas em mandÃbula de coelhos. Foram utilizados trinta coelhos, brancos, da raÃa Nova ZelÃndia, machos, com peso variando entre 1700 a 2100g, distribuÃdos em dois grupos de quinze animais. Os coelhos foram submetidos a tratamento cirÃrgico, sob anestesia geral, para realizaÃÃo de fratura do corpo mandibular direito, ficando exposta para cavidade bucal por um perÃodo de quatro horas. Em todos os animais foi realizada a coleta do material do foco de fratura para anÃlise microbiolÃgica. Os animais foram distribuÃdos ao acaso, conforme o tratamento proposto: no grupo I, foram utilizados 300ml da soluÃÃo de extrato aquoso de aroeira a 20% para irrigaÃÃo do foco de fratura, durante 5 minutos. No grupo II, foi utilizado soro fisiolÃgico a 0,9%, no mesmo volume e no mesmo tempo do grupo I, para irrigaÃÃo do foco de fratura. Em todos os animais foi realizada a reduÃÃo da fratura com fixaÃÃo interna rÃgida, utilizando miniplacas de titÃnio do sistema 1,5mm. Foram realizados controles radiogrÃficos do pÃs-operatÃrio dos 7, 14 e 30 dias para anÃlise da consolidaÃÃo da fratura. Os grupos foram redistribuÃdos em subgrupos conforme o dia de eutanÃsia em SG7, SG14 e SG30 onde foi realizada a remoÃÃo do bloco Ãsseo da regiÃo operada para anÃlise histolÃgica pelo mÃtodo de coloraÃÃo do TricrÃmico de Masson. Os animais foram analisados do ponto de vista clÃnico, radiolÃgico e histolÃgico. Na anÃlise clÃnica, foi verificado o aspecto da ferida cirÃrgica. O grupo I (aroeira) mostrou resultado pouco significante na cicatrizaÃÃo da ferida, quando comparado com o grupo II. No aspecto radiolÃgico, o grupo tratado com aroeira nÃo apresentou efeitos significativos quanto à consolidaÃÃo. Do ponto de vista histolÃgico, houve uma reduÃÃo da concentraÃÃo de bactÃrias no foco da fratura no grupo tratado com aroeira. O extrato aquoso de aroeira a 20% nÃo tem efeito significativo na consolidaÃÃo Ãssea de fraturas expostas induzidas em mandÃbula de coelhos, no entanto, houve benefÃcio na cicatrizaÃÃo da ferida e uma diminuiÃÃo significativa das colÃnias bacterianas no foco das fraturas / Controlling bone healing is of great importance to traumatology, since some of the guiding principles of this area are the cleaning of the wound, the early fixation of the fracture, to assure the viability of the bone supply, and prevent the infection, especially in exposed fractures. The Aroeira-do-SertÃo (Myracrodruon urundeuva Fr.All), tree of Anacardiceae family, is known for its popular uses as anti-inflammatory due to its healing activities, being a good therapeutic alternative. To investigate these properties we analyzed an experimental model using induced exposed fractures in rabbit jaws. Thirty white New Zealand male rabbits weighing between 1700 and 2100g, divided in two groups of fifteen animals each were used. The rabbits underwent surgical procedure under general anesthesia to fracture their right mandibular body, which was exposed to oral cavity for 4 hours. Material from the fracture site was collected for microbiological analysis. The animals were randomly distributed according to the proposed treatment. In Group I, 300ml of aqueous extract of Myracrodruon urundeuva at 20% was used for the irrigation of the focus of the fracture for 5 minutes. In Group II, sterile saline solution 0.9% at the same volume was used at the same way as Group I. All animals underwent fracture reduction with internal rigid fixation using 1,5mm titanium mini-plates. Before euthanasia, postoperatory radiographs were done by subgroups at 7, 14, and 30 days for analysis of the consolidation of the fractures, after which the bone fragment of the operated region was removed for histological analysis using the Masson Tricromic method. The animals were analyzed from the clinical, radiological and histological perspectives. The clinical analysis consisted in the visual verification of the aspect of the surgical wound. Group I (Myracrodruon urundeuva) showed a little improvement in healing when compared to Group II. Radiographically Groups II did not presented significant effects in the consolidation of the bone. Histologically reduction of the bacterial concentration was showed in the fracture in the Group I. The conclusion was that a Myracrodruon urundeuva aqueous extract at 20% has no significant effect in the consolidation of induced exposed fractures of rabbit jaws, but shows benefits in the healing of wounds, reducing the colonies of bacteria in the fractures sites significantly

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Também descreve o desenvolvimento e validação de um método analítico utilizando CLAE-DAD para quantificação de substâncias bioativas na casca do caule e nas folhas de Cenostigma macrophyllum Tul. (Leguminosae) e avaliação da atividade antioxidante, anticolinesterásica, antionociceptiva e anti-inflamatória dos extratos padronizados. As fases orgânicas obtidas por partição do extrato metanólico bruto dos galhos, casca e cerne da raiz de S. brasiliensis apresentaram boa atividade antioxidante, pelo método do sequestro do radical livre DPPH e do sistema - caroteno/ácido linolênico. As fases CHCl3, AcOEt e BuOH do cerne e da casca da raiz de S. brasiliensis apresentaram atividade superior a 50% de inibição da acetilcolinesterase, ao passo que o extrato metanólico bruto da raiz apresentou atividade antinociceptiva e anti-inflamatória in vivo, avaliadas através dos ensaios de contorção abdominal induzida por ácido acético e determinação da migração de neutrófilos para a cavidade peritoneal. As fases hexânica, CHCl3 e BuOH da casca e do cerne da raiz de S. brasiliensis apresentaram elevada toxicidade no teste da A. salina. Através da analise por CG-EM das fases hexânica e clorofórmica da raiz de S. brasiliensis foram identificados a presença principalmente de compostos fenólicos, ácidos graxos e seus ésteres metílicos, esteroides e carboidratos. Através de métodos cromatográficos usuais (CC, CCDP em sílica gel e permeação em gel de Sephadex LH-20) foi possível isolar das diferentes fases dos galhos e raízes de S. brasiliensis as substâncias β-sitosterol e seu derivado glicosilado, α e -amirina, galato de metila, ácido gálico, ácido elágico, quercetina-3-O-β-D-xilopiranosídeo e os novos dímeros de chalcona 2’,4,4’,5-tetrahidroxichalcona-(27’’,88’’)-4’’- hidroxietenilbenzeno (schinopsona A) e (7’’*R,8’’*S)-2’,4,4’,5-tetrahidroxichalcona- (27’’,88’’)-2’’’,4’’,4’’’-trihidroxi-7’’,8’’-dihidrochalcona (schinopsona B). As estruturas das substâncias isoladas foram elucidadas através da análise dos dados obtidos pelos espectros de massas de alta resolução, RMN de 1H e 13C (BB e DEPT), NOEdiff além de técnicas bidimensionais (HMBC, HMQC ou HSQC, NOESY). O método analítico de perfil cromatográfico desenvolvido e validado, utilizando CLAE-DAD, foi aplicado na quantificação de ácido gálico, galato de metila, ácido elágico, agathisflavona e amentoflavona no extrato metanólico das folhas e casca do caule de C. macrophyllum. Os extratos padronizados apresentaram boa atividade antioxidante, tanto pelo método do sequestro do radical livre DPPH quanto pelo sistema -caroteno/ácido linolênico. No teste de atividade anticolinesterásica os extratos das folhas e da casca do caule apresentaram 68,77 ± 1,20% e 86,91 ± 1,76%, respectivamente de inibição da acetilcolinesterase. A avaliação da atividade antinociceptiva e anti-inflamatória in vivo demonstraram que os dois extratos avaliados apresentaram boa atividade. / This work describes the phytochemical study and evaluation of antioxidant, anticholinesterase, antinociceptive, anti-inflammatory activities and toxicities of Schinopsis brasiliensis Engl. (Anacardiaceae), a plant which is used in folk medicine to treat impotence, sore throat, cough and diarrhea. It also describes the development and validation of an analytical method by HPLC/DAD for quantification of bioactives compounds present in the bark of stem and leaves of Cenostigma macrophyllum Tul. (Leguminosae) besides the evaluation of antioxidant, anticholinesterase, antinociceptive and anti-inflammatory activities of its standardized extracts. The organic phases obtained from the partition of the crude methanol extract of stems, bark and heartwood of the root of S. brasiliensis showed good antioxidant activity by the methods of the quenching of DPPH and -carotene /linolenic acid system. The CHCl3, EtOAc and BuOH phases of the heartwood and the bark of the roots of S. brasiliensis showed activity superior to 50% of inhibition of acetylcholinesterase, while crude methanolic extract from the root showed in vivo antinociceptive and anti-inflammatory activities, obtained by writhing in the acetic acid induced test and determination of neutrophil migration to the peritoneal cavities. The hexane, CHCl3 and BuOH phases of the barks and heartwood of the roots of S. brasiliensis showed high toxicity in the brine shrimp test. By GC-MS of the hexane and chloroform extracts from root of S. brasiliensis could be identified mainly the presence of phenolic, fatty acids and their methyl esters, steroids and carbohydrates. Ordinary chromatographic techniques such as CC, CCDP on silica gel and gel permeation in Sephadex LH-20 permitted to isolate from the different organic phases of the branches and the roots β-sitosterol and its glycosyl derivative, α-amyrin, - amyrin, methyl gallate, gallic acid, ellagic acid, quercetin-3-O-β-D-xylopyranoside and new chalcone dimmers, the 2',4,4', 5-tetrahydroxychalcone-(27', 88')-4'- hydroxyetenylbenzene (schinopsone A) and the (7’’*R,8’’*S)-2’,4,4’,5-tetra- hydroxychalcone-(27’’,88’’)-2’’’,4’’,4’’’-trihydroxy-7’’,8’’-dihydrochalcone (schinopsone B). The structures of the isolates were elucidated by the data obtained through, high-resolution mass spectra, 1H and 13C NMR (BB and DEPT), NOEdiff and two-dimensional NMR techniques (HMBC, HMQC or HSQC, NOESY). The chromatographic analytical method developed and validated using HPLC-DAD was applied to the quantification of gallic acid, methyl gallate, ellagic acid, agathisflavone and amentoflavone from the methanol extract of leaves and stems bark of C. macrophyllum. Standardized extracts showed good antioxidant activity, in both tests assayed (quenching of radical DPPH and -carotene/linolenic acid system). Anticholinesterase activity of extracts from the leaves and bark of stem showed 68.77 ± 1.20% and 86.91 ± 1.76%, respectively of acetylcholinesterase inhibition. The evaluation of the in vivo antinociceptive and anti-inflammatory activity demonstrated that both extracts evaluated show good activity.