MOREIRA, Juliane Almeida. Impacto dos haplótipos do gene ΒS sobre os marcadores de hemólise em pacientes com anemia falciforme em estado basal. 2013. 70 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-08-28T13:49:10Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_jamoreira.pdf: 958559 bytes, checksum: b94266eed179e412bd3693b4e235960b (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-08-28T13:54:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_jamoreira.pdf: 958559 bytes, checksum: b94266eed179e412bd3693b4e235960b (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-28T13:54:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_jamoreira.pdf: 958559 bytes, checksum: b94266eed179e412bd3693b4e235960b (MD5) Previous issue date: 2013 / A anemia falciforme (AF) é uma doença hereditária resultante de uma mutação pontual (GAG  GTG) no códon do gene da βS - globina, levando a uma substituição de ácido glutâmico por valina na sexta posição da cadeia polipeptídica, gerando uma hemoglobina (Hb) anormal denominada de HbS, em homozigose. A AF se caracteriza por anemia hemolítica crônica associada a múltiplos eventos tais como processo inflamatório crônico, aumento do estresse oxidativo, dano endotelial, diminuição da biodisponibilidade do óxido nítrico (NO), ativação da coagulação, dentre outros. Os biomarcadores de hemólise tais como: contagem de reticulócitos, lactato desidrogenase (LDH), ácido úrico e arginase I são fundamentais na avaliação do grau da hemólise, principalmente, de natureza intravascular contribuindo com o monitoramento da anemia nesses pacientes. O presente estudo teve como objetivo avaliar o impacto dos haplótipos do gene βS sobre os marcadores de hemólise em adultos com AF em estado basal, acompanhados no ambulatório do serviço de hematologia no Hospital Universitário Walter Cantídio (HUWC). Um total de 50 pacientes adultos com AF foi selecionado, com diagnóstico confirmado por estudo molecular. Os pacientes se encontravam em uso de hidroxiuréia (HU), dose variando de 500 mg a 1,5 g/kg/dia por no mínimo seis meses. Um grupo controle foi elaborado, sendo constituído por 20 indivíduos supostamente saudáveis. Foram coletados 10 mL de sangue venoso em tubo de coleta a vácuo, contendo o anticoagulante EDTA (etileno-diamino-tetracético), para a realização da contagem de reticulócitos e 6 mL de sangue venoso em tubo de coleta a vácuo contendo gel separador, sem anticoagulante, para as dosagens séricas de LDH , ácido úrico e arginase I. As variáveis idade, sexo, dosagem e tempo de uso do medicamento, concentração da Hb e da hemoglobina fetal (HbF) foram obtidas nos prontuários médicos no momento da realização do estudo. As análises estatísticas foram realizadas no programa GraphPad Prism (versão 5.0) e o nível de significância estabelecido foi p < 0,05. Foi verificado aumento significante nos níveis de reticulócitos, LDH, ácido úrico e arginase I nos pacientes com AF em relação ao grupo controle (p < 0,05). Foi observada diferença significativa na Hb nos grupos Bantu/Benin em relação aos demais haplótipos do cluster da βs-globina. Os níveis de HbF apresentaram uma tendência a aumento no haplótipo Benin/Benin em relação aos demais. Foi verificada uma tendência no aumento de LDH no genótipo Bantu/Bantu em comparação com os demais haplótipos. Foi observada diferença significativa da arginase I entre os grupos Bantu/Bantu vs Bantu/Benin e Bantu/Bantu vs Benin/Benin. Os resultados do presente estudo reforçam a hipótese de que a arginase I possa ser utilizada como possível indicador de gravidade uma vez que a mesma foi associada ao haplótipo Bantu.

CRUZ, F. D. A. M. Caracterização físico-química de proteínas presentes na membrana de hemácias de pacientes com anemia falciforme. 2013. 80f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2013. / Submitted by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-06-29T12:33:04Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_fdamcruz.pdf: 2045057 bytes, checksum: a0cb1ea43ac3bc0105250682d5ce4ec5 (MD5) / Approved for entry into archive by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-06-29T12:47:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_fdamcruz.pdf: 2045057 bytes, checksum: a0cb1ea43ac3bc0105250682d5ce4ec5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-29T12:47:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_fdamcruz.pdf: 2045057 bytes, checksum: a0cb1ea43ac3bc0105250682d5ce4ec5 (MD5) Previous issue date: 2013 / Sickle cell anemia (SCA) is the most common hereditary disease in Brazil and is present in about 0.1 to 0.3% of the population of African origin. This disease is caused by homozygous mutation of a single nucleotide (Glu6Val gene Hb S) that modify the function of the red cell in the body, which implies changes in membrane components and, consequently, the event sickling of red blood cells, causing vaso-occlusion. In this work we aim to identify, quantify and correlate changes in erythrocyte membrane glycoproteins associated with the framework and clinical evolution of the disease, using ion exchange chromatography (IEC) and SDS-PAGE. Were performed ion exchange chromatography on membrane proteins extracted from peripheral blood erythrocytes of 31 patients with AF. The chromatograms showed significant differences in the concentration of protein present in the membranes of red blood cells when we relate absorbance / elution range between seizure freedom and volunteers without a diagnosis of AF, depending on the clinical manifestations, patients may show differences in protein concentration. 1D SDS-PAGE revealed the presence of distinct proteins, suggesting that there are differences in the type and concentration of membrane proteins in sickle erythrocytes (both in patients without crisis as a crisis), when related to those extracted from red cells not anemic. In SDS-PAGE 2D 254 spots were identified, of which 8 spots were not identified by the program TagIdent. Most spots were distributed in the pH range 7-10, with a predominance of proteins with molecular weight less than or equal to 20 kDa. Our results suggest that analysis of sickle cells by IEC, followed by SDS-PAGE (1D and 2D), allowed differentiation and partially characterize membrane proteins of erythrocytes of patients (symptomatic and asymptomatic) with AF when related to volunteers without a diagnosis of AF . Our data reinforce the variety of biomodulation related AF, suggesting that their identification is of paramount importance for the study of adhesion between these cells sickle and the endothelium, which triggers vaso-occlusion, resulting in various symptoms / A anemia falciforme (AF) é a doença hereditária mais comum no Brasil e está presente em cerca de 0,1 a 0,3% da população afrodescente. A doença é uma homozigotia causada pela mutação de um único nucleotídeo (Glu6Val no gene Hb S) que altera a função da célula vermelha no organismo, o que implica em alterações nos componentes da membrana e, em conseqüência, o evento de falcização das hemácias, desencadeando crises de vaso-oclusão. Nesse trabalho objetivamos identificar, quantificar e correlacionar alterações em glicoproteínas da membrana eritrocitária associados com o quadro e evolução clínica da enfermidade, utilizando cromatografia de troca iônica (IEC) e SDS-PAGE. Foram realizadas cromatografias de troca iônica em proteínas de membrana extraídas de hemácias de sangue periférico de 31 portadores de AF. Os cromatogramas revelaram diferenças significativas quanto à concentração de proteínas presentes nas membranas das hemácias quando relacionamos absorbância/faixa de eluição entre pacientes sem crises e voluntários sem diagnóstico de AF; dependendo das manifestações clínicas, pacientes podem apresentar diferenças nas concentrações protéicas. SDS-PAGE 1D revelou a presença de proteínas distintas, sugerindo que há diferenças no tipo e na concentração das proteínas de membrana de hemácias falcêmicas (tanto em pacientes sem crise, quanto em crise) quando relacionadas àquelas extraídas da membrana de hemácias não falcêmicas. Na SDS–PAGE 2D foram identificados 254 spots, dos quais 8 spots não foram identificados pelo programa TagIdent. A maioria dos spots estavam distribuídos na faixa de pH 7-10, com predomínio de proteínas com massa molecular menor ou igual a 20 KDa. Nossos resultados sugerem que análise das células falcêmicas por IEC, acompanhadas de SDS-PAGE (1D e 2D), permitiu diferenciar e caracterizar parcialmente proteínas de membrana de hemácias de pacientes (sintomáticos e assintomáticos) com AF quando relacionadas ao controle, sem diagnóstico de AF. Nossos dados reforçam a variedade de biomoduladores relacionados AF, sugerindo que sua identificação é de suma importância para o estudo da adesão entre células falcêmicas e destas ao endotélio, o que pode desencadear a vasoclusão, resultando em diversos sintomas.

BANDEIRA, I. C. J. Estudo dos marcadores de inflamação: associação com os haplótipos do cluster da β-globina na anemia falciforme. 2013. 87 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, 2013. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-07-19T13:13:59Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_icjbandeira.pdf: 2138054 bytes, checksum: 16abdc3bcd1ea1d1c334877620c01618 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-07-19T13:14:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_icjbandeira.pdf: 2138054 bytes, checksum: 16abdc3bcd1ea1d1c334877620c01618 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-19T13:14:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_icjbandeira.pdf: 2138054 bytes, checksum: 16abdc3bcd1ea1d1c334877620c01618 (MD5) Previous issue date: 2013-02-20 / The Sickle Cell Anemia (SCA) is an inherited disease characterized by homozygous severe hemolytic anemia and clinical variables, considered a chronic inflammatory disease. SCA results from a mutation in a nitrogenous base in the sixth codon of the beta globin gene, leading to substitution of adenine for thymine nucleotide (GAG → GTG), which results in the production of the amino acid valine in place of glutamic acid. The inflammatory pathophysiology of SCA is centered on the ability of HbS polymerization that leads to chronic hemolysis and vaso-occlusion. SCA patients are a chronic inflammatory state of multifactorial origin that involves endothelial cells, erythrocytes, leukocytes and platelets by increasing the interactions between cell-cell and cell-endothelium starting an endothelial injury. The study was a cross-sectional prospective in order to investigate the association of haplotypes with the inflammatory profile of patients with AF. Was performed to confirm the HbSS and then study the haplotypes BS mutation in the gene for beta globin chain. We measured markers IL-6, IL-8, TNF-α, IL-17, CRP, IL-10 and TGF-β on 67 patients with SCA and 26 healthy subjects. We observed the prevalence of Bantu haplotype (67.1%) in the patient population studied, followed by the Benin haplotype (28.3%). The study confirms that SCA patients are in a chronic inflammatory state, as had elevated markers of proinflammatory and anti-inflammatory when compared to healthy subjects. The Bantu achieved higher levels of proinflammatory cytokines and CRP compared to the values for Haplotype Benin. For the anti-inflammatory profile, Bantu haplotype also showed high levels of the markers when compared to patients Benin haplotype. Then, the inflammatory profile of patients with SCA is associated with genetic polymorphisms. / A Anemia Falciforme (AF) é uma doença hereditária homozigótica caracterizada por anemia hemolítica grave e manifestações clínicas variáveis, considerada uma doença inflamatória crônica. A AF resulta de uma mutação pontual em uma base nitrogenada no sexto códon do gene da beta globina, levando a substituição do nucleotídeo adenina por timina (GAG → GTG), o que resulta na produção do aminoácido valina no lugar do ácido glutâmico. A fisiopatologia inflamatória da AF está centralizada na capacidade de polimerização da HbS que leva à hemólise crônica e à vaso-oclusão. Os pacientes com AF encontram-se em um estado inflamatório crônico de origem multifatorial, que envolve células endoteliais, eritrócitos, leucócitos e plaquetas através do aumento nas interações entre célula-célula e célula-endotélio iniciando uma lesão endotelial. O estudo foi do tipo transversal prospectivo com a finalidade de investigar a associação dos haplótipos com o perfil inflamatório de pacientes com AF. Foi realizada a confirmação da HbSS e em seguida o estudo dos haplótipos da mutação BS no gene da cadeia beta globínica. Foram dosados os marcadores IL-6, IL-8, TNF-α, IL-17, PCR-us, IL-10 e TGF-β em 67 pacientes com AF e em 26 indivíduos saudáveis. Observou-se a prevalência do haplótipo Bantu (67,1%) na população de pacientes estudada, seguido do haplótipo Benin (28,3%). O estudo confirma que os pacientes com AF encontram-se em um estado inflamatório crônico, pois apresentaram valores elevados de marcadores pró-inflamatórios e antiinflamatório, quando comparadas à indivíduos saudáveis. O haplótipo Bantu obteve mais elevados índices das citocinas pró-inflamatórias e da PCR-us quando comparados aos valores para o Haplótipo Benin. Para o perfil antiinflamatório, o haplótipo Bantu também apresentou valores elevados dos marcadores, quando comparados aos pacientes de haplótipo Benin. Então, o perfil inflamatório dos pacientes com AF está associado à polimorfismos genéticos.

A deficiência de ferro, quando severa denominada de anemia, é a deficiência nutricional mais comum globalmente, em especial nos países em desenvolvimento. A deficiência de ferro há muito tempo tem sido relacionada à diminuição da atividade do sistema imunológico e da capacidade de trabalho. Mais recentemente, o excesso de ferro tem sido associado ao aumento do risco de doenças crônico-degenerativas e de câncer. Existem evidências inconclusivas de que a carência de ferro poderia elevar o nível de danos no DNA. Mais ainda, com base nesse conceito pode-se pensar na hipótese de que a carência de ferro eleve a suscetibilidade ao câncer, especialmente nos tecidos que sofrem efeitos mais severos da carência de ferro. Portanto, os primeiros objetivos deste trabalho foram: (a) avaliar experimentalmente quais as repercussões da deficiência de ferro na estabilidade genômica em crianças e adolescentes; e (b) revisar a literatura acerca da associação entre a deficiência de ferro e o risco de câncer no trato gastrintestinal. Outro aspecto que não pode ser negligenciado é o fato de que o ferro é extremamente pró-oxidante nos sistemas biológicos, como no caso da anemia falciforme, e que a toxicidade de sua sobrecarga endógena precisa ser avaliada. Com efeito, o segundo objetivo deste trabalho foi avaliar tais efeitos em humanos com anemia falciforme (sobrecarga endógena) e em camundongos suplementados com ferro (sobrecarga exógena). A resposta ao problema global de carência de ferro está centrada no tratamento com doses profiláticas de ferro e a um incremento contínuo da oferta de ferro na dieta (p.ex. programas de suplementação nas farinhas e suplementos nutricionais), o que tem impacto ainda desconhecido sobre a estabilidade genômica. Daí emerge o terceiro objetivo desse estudo: avaliar se a vitamina C, o suco de laranja ou uma dieta rica em antioxidantes poderia diminuir a toxicidade ao DNA gerada pela suplementação com ferro em camundongos. Soma-se a esse objetivo, avaliar se o composto quelante de ferro desferoxamida ou a vitamina C (vitamina chave na biodisponibilização do ferro não heme) administrados na fase adulta podem melhorar os efeitos de perda de memória e dano no DNA induzidos por um tratamento com ferro no período perinatal em ratos, uma vez que o mal de Parkinson e Alzheimer têm progressão lenta e emergência tardia e estão associados ao acúmulo de ferro no cérebro. O quarto objetivo do trabalho foi definir a concentração ideal de ferro para células em cultura, em paralelo a avaliação de marcadores nucleares e mitocondriais de estabilidade genômica e da análise da expressão de genes ferro-dependentes envolvidos no reparo de DNA. Em resumo, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito para a instabilidade genômica da deficiência e do excesso de ferro em modelos murinos e grupos populacionais humanos (crianças com alta vulnerabilidade: deficiência; pacientes de anemia falciforme: excesso), testar estratégias para reduzir a toxicidade do ferro para a memória e para o DNA (pela administração de alimentos, vitaminas e medicamentos), e, finalmente, determinar qual a dose ideal de ferro para manter a estabilidade genômica de células em cultura. Para tal, as metodologias principais empregadas foram: ensaios cometa neutro e alcalino, para avaliação de danos primários ao DNA; teste de micronúcleos em medula óssea de camundongos e em células em cultura citocinese-bloqueadas para determinação de clastogenênese/aneugênese; Particle Induced X-ray Emission (PIXE) para avaliação do nível de ferro nos tecidos; polimerase chain-reaction quantitativo em tempo real (QRTPCR) para avaliação do comprimento de telômeros e do número de cópias do genoma mitocondrial e nível de expressão de genes de reparo de DNA. Adicionalmente, testes de memória foram utilizados em ratos e avaliações do consumo de nutrientes foram empregados nas crianças e adolescentes com carência de ferro. Os resultados da pesquisa apontam um aumento de danos no DNA, tanto em situações de excesso como de deficiência de ferro. Para o caso da deficiência de ferro, observou-se em crianças e adolescentes avaliados um padrão geral de má-alimentação, marcado pela carência de várias vitaminas, especialmente ácido fólico e niacina e incidência de verminoses. A revisão bibliográfica apontou evidências preliminares do aumento do risco de câncer no trato intestinal em função de baixa ingestão de ferro, bem como uma quantidade de ferro ideal para minimizar este risco (20 mg/dia Fe, valor maior do que as recomendações nutricionais atuais para humanos). Os mecanismos associados a esse aumento de risco incluem desequilíbrio nas respostas imunes contra células malignas, no metabolismo de compostos tóxicos, bem como na regulação redox e na biossíntese e reparo do DNA. Quanto às estratégias para reduzir a toxicidade do ferro, os resultados indicam que a vitamina C, comumente associada à suplementação com ferro, pode aumentar a toxicidade de ferro e é inefetiva para reduzir o déficit de memória induzido desse metal. O suco de laranja, uma alternativa saudável à vitamina C no aumento da biodisponibilidade do ferro não heme, parece ser mais adequada para reduzir a toxicidade do composto, da mesma forma que a dieta rica em antioxidantes testada. O quelante de ferro mais empregado globalmente (desferoxamida) foi efetivo em reverter o déficit de memória e os danos induzidos pelo ferro. Quanto à definição da dose ótima de ferro para o cultivo celular, evidenciou-se que a suplementação com ferro a longo-prazo, tanto na forma de sulfato ou como ferro ligado à transferrina pode contribuir no aumento da estabilidade genômica. Esses dados provêm de por metodologias de vanguarda, como comprimento de telômeros e estabilidade mitocondrial acessados por QTRTPCR, e indicam que a concentração ideal de ferro se situa numa faixa bastante estreita (6-20 μM Fe no meio de cultura). A análise da expressão de genes de reparo, executada em paralelo aos experimentos de suplementação com ferro nas células, revelou um novo mecanismo de controle pós-trascricional de genes dos genes WRN e MUTYH, que codificam, respectivamente, para uma DNA helicase e uma DNA glicosilase, ambas contendo ferro. Os resultados ora apresentados visam fornecer subsídios para manter a estabilidade genômica, reduzir o risco de câncer e maximizar a saúde dos indivíduos estudados, sendo aplicáveis globalmente pela da universalidade do cenário de desequilíbrio nutricional de ferro. Os avanços da pesquisa contribuem à incorporação do conceito de estabilidade genômica às recomendações nutricionais, que tradicionalmente sugerem níveis mínimos de nutrientes para diminuir a incidência de doenças associadas à deficiência e não visam deficiências nutricionais sutis e crônicas. Os resultados também contribuem a nutrigenômica: área incipiente de interface entre a genética e a nutrição, que aborda a interação entre os genes e os alimentos e, de uma forma particular, em estudar como os nutrientes afetam o genoma humano. Considerando a possibilidade de efeitos adversos do tratamento de ferro em indivíduos debilitados do ponto de vista bioquímico (p.ex. falta de antioxidantes) e as sugestões de associação entre o aumento da ingestão de ferro e acréscimo na incidência de câncer nos países de primeiro mundo, faz-se necessária uma definição parcimoniosa da melhor estratégia de suplementação/tratamento com ferro, no intuito de evitar instabilidade genômica em indivíduos com alimentação depauperada em nutrientes fundamentais à estabilidade genômica. Os resultados dos estudos in vitro desenvolvidos neste trabalho auxiliam no desenvolvimento de meios de cultura fisiológicos, lançam luzes sobre o problema da definição dos níveis ótimos de ferro para maximização da estabilidade genômica (p.ex. para células-tronco e protocolos de transplante) e evidenciam um novo mecanismo de controle do ferro sobre a expressão de genes de reparo de DNA. / Iron deficiency, named anemia when severe, is the far most common micronutrient deficiency worldwide, particularly among citizens of developing countries. Iron deficiency has been linked for a long time to immune system impairment and reduction in work capacity. Iron excess has been also associated, lately, with increased risk of chronic degenerative diseases and cancer. There are inconclusive evidences iron deficiency could increase the DNA damage level. Based in this concept, one could hypothesize iron deficiency increases cancer susceptibility, especially in tissues that suffer higher effect of iron deprivation. Therefore, the first aims of this research were: (a) to evaluate experimentally the repercussions of iron deficiency over genome stability and cancer risk in gastrointestinal tract; and (b) to review the literature towards the potential association between iron deficiency and gastrointestinal cancer risk increase. Another aspect that deserves attention is the fact of iron been extremely pro-oxidant in biological systems, as in sickle cell disease. Indeed, the second aim of this research was to evaluate such effects in humans with sickle cell disease (endogenous overload) and in mice supplemented with iron (exogenous overload). The answer to the global issue of iron deficiency is centered in treatment with prophylactic or curative iron doses and there is a general increase in dietary iron levels (e.g. flour supplementation programs and nutritional supplements) which has and not fully elucidated impact over genomic stability. Form this issue, emerges the third aim of this research: to evaluate if vitamin C, orange juice or a diet rich in antioxidants could reduce iron genotoxicity associated to iron supplementation. Summed to this objective, is the evaluation if the iron chelator desferoxamide and vitamin C (vitamin has a key role in iron bioavailability) administered in adulthood could ameliorate the memory impairment and DNA damage increase induced by iron treatment during neonatal period; particularly given the fact Parkinson and Alzheimer diseases have slow progression and are associated to selective accumulation of iron in brain. The fourth objective of the research was to define the ideal concentration of iron to cell cultures, in parallel to the evaluation of nuclear and mitochondrial markers of genomic stability as well as of the analyses of expression of iron-dependent genes involved in DNA synthesis and repair. All objectives can be summarized, as to evaluate the effect over genomic stability of iron deficiency and overload in murine models and human populations (children and adolescents with low socioeconomic background: deficiency and sickle cell disease: overload), to test strategies to reduced iron toxicity to memory and DNA (through the administration of foods, vitamins and medicines, and, finally, to determine the ideal dose for genome maintenance in cell cultures. The main methods used were: neutral and alkaline comet assay, to evaluate primary DNA damages; micronucleus test in mice bone marrow and cytokinesis-block cell cultures, to determine clastogenenicity/aneugenicity; Particle Induces X-ray Emission (PIXE), to determine iron level in tissues; and quantitative polymerase chain-reaction (QRTPCR) to evaluate telomere length, mtDNA copy numbers and mRNA level of DNA repair genes. Additionally, memory tests and nutrient consumption evaluations were used. Results suggested an increase in DNA damage either for iron deficiency or overload. Regarding iron deficiency, children and adolescents with low socioeconomic status evaluated had a poor nutritional profile, marked by nutritional deficiency, particularly of folic acid and a high prevalence of parasitosis. In the review article regarding the association between iron deficiency and cancer risk increase, the review of a few experimental studies in murine animals and some epidemiological studies in humans indicated preliminary evidences towards an association between iron deficiency and increased cancer risk. Moreover, the mechanism by which iron deficiency could induce early onset and progression of tumors in gastrointestinal tract was discussed, including: impairment of iron-dependent metabolic functions (e.g. depressed immune defenses against malignant cells, reduced metabolization of toxic compounds, and unbalance in antioxidant defenses and DNA biosynthesis and repair). Regarding the strategies to reduce iron supplementation-associated toxicity, results suggest vitamin C was ineffective to reduce iron genotoxicity, could increase iron toxicity and was not able to repair ironinduced memory impairment. On the other hand, orange juice, a healthy alternative to vitamin C, could reduce iron toxicity, similarly to the also tested diet rich in antioxidants. Desferoxamide, the most used iron chelator worldwide, was effective to reverse iron induced memory deficit and DNA damages induced by iron; however, its clinical usage is difficult. Regarding the definition of the optimal dose for genomic stability for cells in culture, we observed an increase in cell proliferation and genomic stability (comet assay, telomere length and micronucleus) either for iron sulfate or holotransferrin, however in a very narrow range. The analyses of expression of iron-related genes showed a new posttranscriptional regulation mechanism for iron-containing DNA helicase WRN and DNA glycosylase MUTYH. The results herein presented aim to provide subsides to maintain genomic stability, reduce cancer risk and to maximize the health, being widely applicable in face to the universality of iron deficiency. The research advances can contribute to the incorporation of the concept of genomic stability to nutritional recommendations; which traditionally are based in minimal levels of nutrients to diminish the incidence of diseases (e.g. anemia for iron) and are not focused in subtle nutrient deficiencies that can have chronic effects. Results also contribute to nutrigenomics: incipient area of interface between nutrition and genetics, which aims to evaluate how nutrients influence human genome. Considering the potential noxious outcomes of iron treatment in nutrient deprived individuals (i.e. with low antioxidant defenses or shortage of B vitamins), and the increase of dietary iron content, there is an urgency for the definition of the best supplementation strategy to prevent genomic stability. In vitro studies to define the adequate iron concentration can be useful for the definition of the optimal levels of iron to maximize genomic stability that could also be applied in improving cell culture protocols, for example to ex vivo culture of bone marrow previous to grafting after radiotherapy. In vivo studies also shed light upon a new mechanism for iron-dependent DNA repair regulation.

A anemia falciforme é uma hemoglobinopatia de grande heterogeneidade clínica, que vem sendo abordada como uma condição inflamatória crônica nas últimas décadas. A maioria dos pacientes com anemia falciforme faz uso da hidroxiuréia (HU), uma droga citotóxica que induz a produção de hemoglobina fetal (HbF). Apesar de amplamente utilizada, os detalhes do mecanismo de ação da HU não estão completamente estabelecidos. Este trabalho propôs-se a estudar a expressão gênica de células eritróides de pacientes com anemia falciforme diferenciadas in vitro e tratadas com HU, através da técnica de DD-PCR, bem como dar continuidade aos estudos imunogenéticos em andamento neste laboratório, através da análise de citocinas séricas pró- e anti-inflamatórias e do estudo de polimorfismos nos genes que codificam as moléculas de adesão ICAM-1 e PECAM-1, nestes pacientes. As análises de DD-PCR revelaram genes envolvidos em tradução, transcrição e outros processos, dos quais 3 foram escolhidos para discussão detalhada, com base em sua função (NACA, LXN e THRA). Os polimorfismos estudados (ICAM-1 rs5498, PECAM-1 53 G/A e PECAM-1 rs668) não apresentaram relação com o quadro clínico da doença, e as freqüências alélicas e genotípicas foram semelhantes em pacientes e controles. Os níveis das citocinas pró- e anti-inflamatórias (interleucinas 2, 4, 5 e 10, interferon-gama e TNF-alfa), investigadas através de citometria de fluxo, não foram diferentes na comparação entre controles e pacientes. / Sickle cell disease (SCD) is a hemoglobinopathy that presents extremely variable clinical manifestations. It has been approached as an inflammatory disorder within the past decades and several works have tried to determine which factors are involved in such characteristic. Most of the SCD patients are under treatment with hydroxyurea (HU), a cytotoxic drug which induces the production of fetal hemoglobin. Despite its widespread use, the mechanisms by which HU acts to improve the clinical picture of SCD patients are not fully understood. The present study aimed to investigate the gene expression of erythroid cells from SCD patients differentiated in vitro and cultivated with HU, as well as to continue the ongoing immunogenetic studies on SCD patients in our lab, by analyzing plasma cytokines and investigating polymorphisms on the adhesion molecules iICAM-1 and PECAM-1 n a group of SCD patients. Our DD-PCR analysis revealed several genes involved in transcription and translation, among other processes, and we chose 3 of those genes to discuss in more detail (NACA, LXN and THRA). The polymorphisms studied here (ICAM-1 rs5498, PECAM-1 53 G/A and PECAM-1 rs668) were not correlated with the clinical aspects of SCD, and the genotypic and allelic frequencies were similar among patients and controls. The levels of pro- and anti-inflammatory cytokines (interleukins 2, 4, 5 and 10, interferon-gamma and TNF-alpha) were similar in patients and controls.

FIALHO, Andréa Bessa Campelo Braga. Helicobacter pylori, níveis séricos de ferritina, vitamina B12, ácido fólico e a dinâmica da infecção em indivíduos de uma comunidade de baixa renda. 2012. 72 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-02-17T16:05:03Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_abcbfialho.pdf: 1116761 bytes, checksum: f9cdf2ec6b8e79a92db1fa9cb7ca1f02 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-02-17T16:05:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_abcbfialho.pdf: 1116761 bytes, checksum: f9cdf2ec6b8e79a92db1fa9cb7ca1f02 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-17T16:05:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_abcbfialho.pdf: 1116761 bytes, checksum: f9cdf2ec6b8e79a92db1fa9cb7ca1f02 (MD5) Previous issue date: 2012 / Helicobacter pylori infection is one the most prevalent infections in the world. There is a strong evidence that it is acquired in childhood. Therefore epidemiological studies in children are essential to understand the dynamics of this infection and also to evaluate the possible consequences of H. pylori infection in children. Previously it was evaluated the prevalence of H. pylori in children up to fourteen years of age at a low-income community called Parque Universitário. The present study is a cohort of a group of children eight years after the first study, with the aim of evaluating the dynamics of H. pylori infection and also to check if infected children are more likely to have anemia and ferrritin, folate and vitamin B12 deficiency when compared to non-infected children. The infection was evaluated in 133 individuals through the 13C urea breath test, previously validated for the brazilian population. Blood was sampled from 108 individuals to dose levels of ferritin, vitamin B12 and folate by chemiluminescence using Immulite ® 2000 and hemoglobin. The prevalence of H. pylori infection in the individuals was 53.4% (71/133) in 2000, while the prevalence of H. pylori in the same group in 2008 was 64.7% (86/133). It was found that after eight years, the majority (88.7%) of H. pylori positive individuals remained positive for infection. The rate of acquisition of infection by H. pylori after 8 years of the initial analysis was 17.3% (23/133) and the rate of loss of infection was 6% (8/133). The acquisition rates were higher in children younger than 10 years, reaching 30.2% in children younger than 5 years. The prevalence of infection in children under 5 years increased from 39.6% in 2000 to 62.2% in 2008 (p = 0.020). There was no statistically significant difference between anemia, serum ferritin, vitamin B12 and folate in H. pylori-positive individuals compared to H. pylori-negative. In conclusion, H. pylori infection is acquired early in childhood, with high rates of acquisition in children under 10 years. There was no association between H. pylori infection and anemia, serum vitamin B12 and folate levels among the individuals studied. / A infecção pelo Helicobacter pylori é uma das infecções mais prevalentes do mundo. Existem fortes evidências de que a transmissão dessa bactéria ocorre na infância, e estudos epidemiológicos em crianças são essenciais para que se entenda os aspectos relacionados com a dinâmica da infecção e suas conseqüências. Previamente pesquisadores vinculados ao Laboratório de Gastroenterologia da Universidade Federal do Ceará avaliaram a prevalência de H.pylori em crianças até quatorze anos de idade em uma comunidade fixa de baixa renda, denominada Parque Universitário. No presente estudo, foi realizado outro corte transversal aproximadamente oito anos após a análise inicial nesse mesmo grupo de crianças, com o objetivo de avaliar a dinâmica da infecção e se as crianças infectadas são mais susceptíveis a terem anemia, deficiência de ferrritina, folato e vitamina B12 do que as não infectadas. A infecção por H. pylori foi avaliada em 133 crianças por meio do teste respiratório, previamente validado para a população brasileira. Foram coletadas amostras de sangue em 108 crianças para a realização de hemograma e a dosagem de concentrações séricas de ferritina, vitamina B12 e folato por meio da técnica de quimioluminescencia utilizando Immulite ® 2000. A prevalência da infecção por H. pylori nas crianças foi de 53,4% (71/133) em 2000, enquanto a prevalência de H. pylori nas mesmas crianças em 2008 foi de 64,7% (86/133). Após 8 anos, a maioria (88,7%) das crianças H. pylori positivas permaneceram infectadas. A taxa de aquisição da infecção por H. pylori após 8 anos da análise inicial foi de 17,3% (23/133) e a taxa de cura espontânea da infecção foi de 6% (8/133). As taxas de aquisição foram maiores em crianças com idade de 10 anos ou menos, atingindo 30,2% em crianças menores de 5 anos. A prevalência da infecção em crianças com menos de 5 anos aumentou de 39.6% em 2000 para 62,2% em 2008 (p=0,020). Não houve diferença estatisticamente significante entre anemia, concentrações séricas de ferritina, vitamina B12 e folato em indivíduos H. pylori positivos comparados aos H. pylori negativos. Em conclusão, a infecção por H. pylori é adquirida precocemente na infância, com altas taxas de aquisição em crianças com 10 anos ou menos. Não foi encontrado associação entre a infecção por H. pylori e anemia, níveis séricos de vitamina B12, ferritina e folato

Made available in DSpace on 2012-05-07T14:40:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000003.pdf: 1461143 bytes, checksum: bf5c26f12e6dd903592863c2a4cc1881 (MD5) Previous issue date: 2006 / Objetivou-se determinar a prevalência de síndromes falciformes em familiares selecionados a partir de casos índice, com particular interesse em determinar o número de afetados adicionais detectados pelo modelo de triagem familiar ampliado. Utilizou-se um estudo de corte transversal de base populacional, realizado em familiares dos casos-índice identificados pela triagem neonatal no Recife, região metropolitana do Recife e em algumas cidades do interior do estado de Pernambuco. Foram estudados os membros familiares dos casos-índice recrutados a partir da listagem fornecida pelo Programa de Triagem Neonatal de Pernambuco alocados em núcleos definidos como: 1) núcleo reduzido (NR): constituído de pai, mãe e irmãos; 2) núcleo de primeiro grau (N1): constituído de avós, tios e primos de primeiro grau; 3) núcleo de segundo grau (N2): filhos dos primos de primeiro grau; 4) núcleo ampliado (NA): NR+N1+N2 e 5) núcleo ampliado de primeiro grau (NA1): NR+N1. Foram coletadas de agosto de 2004 a junho de 2005, informações e amostras de sangue periférico de 463 membros familiares pertencentes a 21 casos-índice. A mediana de idade foi de 22 anos onde 81,5 por cento desconheciam o que era anemia falciforme. Destes, 90,5 por cento eram do Recife e região metropolitana. O gene HBB*S esteve presente em 114 indivíduos. A freqüência deste gene foi maior no NR (69 por cento), mas também elevada no N1 (22,8 por cento). De fato, o NA1 resultou na detecção de 69 portadores adicionais (cerca de 172 por cento de casos adicionais). Também ocorreu um incremento de 73 por cento na média comparando o NR com o N1. Esses resultados indicam que um número relevante de indivíduos portadores do gene HBB*S seria detectado com a ampliação do NR através da inclusão do N1. Observou-se que 53,3 por cento da população estudada, estava na faixa considerada reprodutiva e 80 por cento das pessoas que carregavam o gene HBB*S já tinham gerado filhos. Os resultados permitem as seguintes recomendações: 1) A triagem para hemoglobinopatias deve permanecer de maneira universal no estado de Pernambuco. 2) A triagem familiar ampliada, para identificação de portadores de síndrome falciforme deve ser estendida para os familiares até o primeiro grau. 3) É recomendável que ações educativas sobre as síndromes falciformes ocorram de forma sistemática em Pernambuco. 4) É necessário o envolvimento dos atores do sistema de atenção básica à saúde no tocante a multiplicação do conhecimento sobre estas síndromes.

PRAZERES, Jean Lima. Avaliação das alterações hematológicas periféricas em pacientes com leishamaniose visceral. 2008. 68 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-21T13:18:00Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_jlprazeres.pdf: 2241775 bytes, checksum: cc77e64fa21d02951ded03514f6eed88 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T14:06:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_jlprazeres.pdf: 2241775 bytes, checksum: cc77e64fa21d02951ded03514f6eed88 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T14:06:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_jlprazeres.pdf: 2241775 bytes, checksum: cc77e64fa21d02951ded03514f6eed88 (MD5) Previous issue date: 2008 / According to World Health Organization (WHO) data there are some 12 million people worldwide with leishmaniasis. In Brazil the etiological agent of visceral leishmaniasis (VL) is Leishmania chagasi, and is the main means of transmission from the parasite to human beings and other hosts mammals is through the biting of the female mosquito of the order diptera insects belonging to the Psychodidae family, whose main vector is the Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (Lutz & Neiva). The visceral leishmaniasis or kala azar is a tropical disease that is characterized by the presence of fever, anemia, hepatosplenomegaly, hemorrhagic manifestations, and linfoadenomegaly, weight loss, tachycardia, dry cough, diarrhea, fever, pancytopenia and hypergammaglobulinemia. The hematological involvement is common in patients with VL, with anemia the most frequent abnormality due to its multifactor nature and prevalence varies depending on the population being studied. It is meant to evaluate the pattern of peripheral alterations of patients with hematological Visceral Leishmaniasis. Blood samples were collected after the diagnosis of researches seeking ways of amastigotes Leishmania sp in bone marrow aspirate in patients (n = 30), Hospital of Infectious Diseases São José, in Fortaleza, in the state of Ceará, in the period from January 2007 to July 2008 and a control group (n = 30) consists of blood donors from HEMOCE. Laboratory tests were performed at the Clinical Analysis Laboratory of the General Hospital of Fortaleza and the Louis Pasteur Medical Diagnosis Laboratory. The counting of blood elements were measured with an ABX blood Pentre 60 gauge, followed by cytomorphology assessment. The biochemical measurements were made in a HITACHI biochemical analyzer Module P800 and Roche ® Modular I. The comparison between the groups, for the average of quantitative variables was performed by Student t-test, for the normal distribution and Mann – Whitney hypothesis data, in case of non-normality of the data. We have statistically considered meaningful values of 0.05. The analysis (n = 30) patients, the study showed that 63% (19) of the patients are from within the State of Ceará and 37% (11)of the patients are from the capital of the state of Ceará, Fortaleza. That 80% (24) of patients are male and 20 (8%) were females. Most of the patients, 57% were aged between 31 to 45 years old. In what concerns the period of time of the disease until the date of laboratory diagnosis, 47% (14) of the patients already had signs of clinical disease with 30 to 90 days. We have to count the male of red blood cells, an average of 3.69 ± 0.6644 (x106/mm3), hemoglobin of 9383 ± 1.3002 (g/dL), Hematocrit of 28.6708 ± 4.0687 (%) for the female count of red blood cells, an average of 3525 ± 0.6233 (x106/mm3), hemoglobin from 8.5666 ± 1.6561 (g/dL), Hematocrit of 26.9666 ± 3.9026 (%) . With regard to RBC indices observed for both sex, cell volume Medium (MCV) of 78.1 ± 7.0 (fL), mean corpuscular hemoglobin (MCH) of 25.42 ± 2.51 (pg), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) of 32 ± 2.15 (%), distribution of amplitude of red blood cells (RDW) of 15,337 ± 2435 (%), reticulocyte count of 20.636.63 ± 20.300.39 (/ mm3). Of the morphological analysis showed up a laboratory profile characteristic of the type of anemia and microcytic normocytic and hypochromic followed by normochromic and 65% of the samples found the presence of "rouleax". For the determinations of serum iron had a average of 32.53 ± 17.31 (µg/dL), Transferrin of 146.83 ± 42.19 (mg/dL), Ferritin of 1.339.47 ± 599.05 (ng /ml), Vitamin B12 from 573.5 ± 253.94 (pg/mL), Folic Acid, 10 ± 3.47 (ng/mL). For the average counts of leukocytes observed was 2802.33 ± 2322.16 (n°/mm3), of neutrophils 1426.33 ± 1348.88 (n°/mm3), lymphocytes from 982.60 ± 576.47 (n°/ mm3); monocytes of 350.13 ± 283.47 (n°/mm3), platelet count 120.233.33 ± 90640.89 (n °/mm3). For the determinations of the VHS diagnosis, the patients had an average of 81.77 mm in the first hours of observation. The determination of TAP showed us that the diagnosis of the patients showed an average of 67.87% of activity prothrombin. The analysis it was observed that there is an impairment in VL hematopoese in translating in peripheral blood by a pancytopenia mainly in favor of the erythroid lineage, and the anemia in patients with chronic nature probably / De acordo com dado da Organização Mundial de Saúde (OMS) existem cerca de 12 milhões de pessoas no mundo com leishmaniose. No Brasil o agente etiológico da Leishmaniose visceral (LV) é a Leishmania chagasi, e a principal forma de transmissão do parasita ao homem e outros hospedeiros mamíferos é por meio da picada do mosquito fêmea de insetos dípteros da família Psychodidae, cujo vetor principal é o Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (Lutz & Neiva). O calazar ou leishmaniose visceral é uma doença tropical que se caracteriza pela presença de febre, anemia, hepatoesplenomegalia, manifestações hemorrágicas, além de linfoadenomegalia, perda de peso, taquicardia, tosse seca, diarréia, febre, pancitopenia e hipergamaglobulinemia. O envolvimento hematológico é comum nos pacientes com LV, sendo a anemia a anormalidade mais freqüente decorrente de natureza multifatorial e com prevalência variável conforme a população analisada. Consiste em avaliar o padrão das alterações hematológicas periféricas dos pacientes com Leishmaniose Visceral. As amostras de sangue foram colhidas após o diagnóstico laboratorial de pesquisa de formas amastigotas de Leishmania sp em aspirado medular nos pacientes (n=30) do Hospital São José de Doenças Infecciosas, em Fortaleza, Ceará, no período de Janeiro de 2007 a Julho de 2008 e de um grupo controle (n=30) constituído de doadores de sangue do HEMOCE. As análises laboratoriais foram realizadas no Laboratório de Análises Clínicas do Hospital Geral de Fortaleza e no Laboratório Louis Pasteur Medicina Diagnóstica. As contagens dos elementos sanguüíneos foram realizadas em contador hematológico Pentra 120 ABX, seguido de avaliação citomorfológica. As dosagens bioquímicas foram realizadas em Analisador bioquímico HITACHI Modular P800 e Modulo E/Roche®. A comparação entre os grupos, em relação à média das variáveis quantitativas foi realizada através do Teste t de Student, para os dados com hipótese de distribuição normal e Mann-Whitney, no caso de não normalidade dos dados. Foram considerados estatisticamente significantes valores de p < 0,05. Das análises (n=30) pacientes, observou-se que 63%(19) dos pacientes são do interior do Estado do Ceará e 37%(11) pacientes são da capital, Fortaleza. Que 80%(24) dos pacientes são do sexo masculino e 20(8%) do sexo feminino. A maioria dos pacientes, 57% apresentavam-se na faixa etária entre 31 a 45 anos de idade. Com relação ao tempo da doença até a data do diagnóstico laboratorial, 47%(14) dos pacientes já apresentavam sinais clínicos da doença com 30 a 90 dias. Obtivemos para o sexo masculino contagem das Hemácias, uma média de 3,69± 0,6644 (x106/mm3), Hemoglobina de 9,383±1,3002 (g/dL), Hematócrito de 28,6708±4,0687(%),para o sexo feminino contagem das Hemácias, uma média de 3,525± 0,6233(x106/mm3), Hemoglobina de 8,5666±1,6561(g/dL), Hematócrito de 26,9666±3,9026(%). Com relação aos índices hematiméticros observamos para ambos os sexo, um Volume Corpuscular Médio(VCM) de 78,1±7,0 (fL), Hemoglobina Corpuscular Média(HCM) de 25,42±2,51 (pg), Concentração de Hemoglobina Corpuscular Média(CHCM) de 32± 2,15 (%), Distribuição de amplitude das hemácias(RDW) de 15,337±2,435 (%), Contagem de reticulócitos de 20.636,63±20.300,39 (/mm3). Das análises citomorfológica, Das análises morfológicas evidenciou-se um perfil laboratorial característico de anemia do tipo microcítica e hipocrômica seguido de normocítica e normocrômica e em 65% das amostras observamos a presença de “rouleaux”. Para as determinações do Ferro sérico obtivemos uma média de 32,53±17,31 (µg/dL), Transferrina de 146,83±42,19 (mg/dL), Ferritina de 1339,47±599,05 (ng/mL), Vitamina B12 de 573,5±253,94 (pg/mL). Ácido Fólico de 10±3,47 (ng/mL). Para as contagens dos leucócitos a média observada foi de 2802,33 ±2322,16 (n°/mm3), neutrófilos de 1.426,33±1.348,88(n°/mm3), linfócitos de 982,60±576,47x(n°/mm3), monócitos de 350,13±283,47(n°/mm3), plaquetas de 120,233,33±90.640,89 (n°/mm3). Para as determinações do VHS ao diagnóstico, os pacientes apresentaram uma média de 81,77 mm na primeira hora de observação. As determinações do TAP nos mostrou que ao diagnóstico os pacientes apresentaram uma média de 67,87% de atividade de protrombina. Das análises observou-se que na LV existe um comprometimento na hematopoese traduzindo no sangue periférico por uma pancitopenia a favor principalmente da linhagem eritróide, sendo a anemia nestes pacientes de natureza provavelmente crônica

SILVA, Lilianne Brito da. Caracterização clínica, hematológica e molecular dos pacientes com anemia falciforme em Fortaleza, Ceará. 2009. 75 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-21T15:55:40Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_lbsilva.pdf: 1279336 bytes, checksum: 99b7beb606dc53352dd46882758c40db (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T16:15:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_lbsilva.pdf: 1279336 bytes, checksum: 99b7beb606dc53352dd46882758c40db (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T16:15:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_lbsilva.pdf: 1279336 bytes, checksum: 99b7beb606dc53352dd46882758c40db (MD5) Previous issue date: 2009 / Introduction: The sickle cell anemia is the result of a point mutation in the β-globin gene, leading to a substitution of glutamic acid by valine at the sixth position of the polypeptide chain. The sickle cell anemia presents heterogeneous clinical manifestations, which may be related to the type of haplotype associated with the gene for HbS and HbF levels. Objective: Clinical characterization, molecular and haematological patients with sickle cell anemia in Fortaleza, Ceará. Methods: We analyzed 47 patients with sickle cell anemia, adults of both sexes. The determination of hematological values was performed on blood cells automated meter; the determination of the presence of HbSS was performed by alkaline hemoglobin electrophoresis on cellulose acetate tapes and by differentiation electrophoresis on agar-phosphate pH 6.2; the levels of HbF were determined by alkali denaturation technique; and the analysis of the haplotypes of the ßS mutation was done by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). Statistical analysis was developed in the program GraphPad Prism (version 5.0) and the level of significance was set p <0.05. Results: The distribution of the haplotypes of βS-globin gene - 63% of the Bantu type, 25% of the Benin type and 12% atypical – was in conformity with that observed for the entire Brazilian population, in which the Bantu haplotype is most prevalent, followed by the Benin and Senegal. There was no significant difference between the results found in this study and those found for the cities of Rio de Janeiro, Porto Alegre, Campinas and Ribeirão Preto; but there was a significant difference with the results obtained for the cities of Salvador and Belém and the state of Amazonas, and by other researchers in Ceará. The distribution of haplotype frequencies of the βS-globin gene in the different studies is in line with the history of the formation of the Brazilian population, except for the results of a previous study carried out in Ceará, in which the Benin haplotype was found to be most prevalent. According to the historical information on the origins of the slave population brought to Ceará, the Bantu haplotype should be the most prevalent. In the comparison between the haplotypes and the haematological characteristics studied, only the values of HbF and Ht showed statistically significant difference. The levels of HbF were higher in the Benin haplotype, followed by the Bantu haplotype, which is in accordance with the literature. Was demonstrated greater presence of painful episodes and episodes of pneumonia in Benin haplotype/Atypical haplotype than in Bantu/Atypical and increased presence of urinary infection crises in Benin haplotype/Atypical haplotype than in Benin/Benin. There was no statistically significant difference between the haplotypes Bantu/Bantu and Benin/Benin for clinical complications, however it was observed that the haplotype Bantu/Bantu has a higher frequency in all studied clinical events when compared to Benin/Benin. Among the results was shown a trend of fewer patients with painful episodes and of leg ulcers with increased levels of HbF. There was no statistically significant difference in the comparison between the levels of HbF and the values of red blood cells, hemoglobin, hematocrit, leukocytes and platelets. Conclusions: The determination of haplotypes of sickle cell anemia is of great importance not only for monitoring and prognosis of patients, but also as a tool for anthropological studies which help in clarifying the origin of Africans who have contributed so much in training ethnological, economic, cultural and social Brazil. / Introdução: A anemia falciforme é o resultado de uma mutação pontual (GAGGTG) no códon do gene da globina β, conduzindo a uma substituição de ácido glutâmico por valina na sexta posição da cadeia polipeptídica. A anemia falciforme apresenta manifestações clínicas heterogêneas, que podem ser relacionadas ao tipo de haplótipo associado ao gene da HbS e aos níveis de HbF. Objetivo: Caracterização clínica, hematológica e molecular dos pacientes com anemia falciforme em Fortaleza, Ceará. Metodologia: Foram analisados 47 pacientes com anemia falciforme, adultos e de ambos os sexos. A determinação dos valores hematológicos foi realizada em contador automático de células sangüíneas; a determinação da presença de HbSS foi realizada por eletroforese em pH alcalino em fitas de acetato de celulose e por eletroforese de diferenciação em Ágar-fostato pH 6.2; os níveis de HbF foram determinados pela técnica da desnaturação alcalina; e a análise dos haplótipos da mutação ßS foi realizada por meio da técnica da reação em cadeia mediada pela polimerase para polimorfismo dos comprimentos dos fragmentos de restrição (PCR-RFLP). As análises estatísticas foram desenvolvidas no programa GraphPad Prism (versão 5.0) e o nível de significância estabelecido foi p < 0,05. Resultados: A distribuição dos haplótipos do gene da βS-globina, 63% do tipo Bantu, 25% do tipo Benin e 12% do tipo Atípico, está em conformidade com a observada para a população brasileira, em que o haplótipo Bantu é o mais prevalente, seguido pelo Benin e Senegal. Não houve diferença significativa entre o presente estudo e os resultados encontrados no Rio de Janeiro, Porto Alegre, Campinas e Ribeirão Preto; porém uma diferença significativa foi observada quando o estudo foi comparado aos resultados obtidos em Salvador, Belém, Amazonas e por outros pesquisadores no Ceará. A distribuição das freqüências dos haplótipos do gene da βS-globina nos diferentes estudos está condizente com a história da formação da população brasileira, exceto nos resultados do estudo anterior realizado no Ceará, que obteve o haplótipo Benin com maior prevalência. Conforme os dados históricos sobre as origens da população negra trazida ao estado do Ceará, o haplótipo Bantu seria o mais prevalente. Na comparação entre os haplótipos e as características hematológicas estudadas, apenas os valores de HbF e Ht apresentaram diferença estatisticamente significativa. Os níveis de HbF foram maiores no haplótipo Benin, seguido do haplótipo Bantu, o que está em conformidade com os dados da literatura. Foi demonstrada maior presença de crises vaso-oclusivas e episódios de pneumonia no haplótipo Benin/Atípico do que no haplótipo Bantu/Atípico; e maior presença de crises de infecção urinária no haplótipo Benin/Atípico do que no haplótipo Benin/Benin. Não houve diferença estatisticamente significativa entre os haplótipos Bantu/Bantu e Benin/Benin em relação às complicações clínicas, entretanto foi observado que o haplótipo Bantu/Bantu tem uma maior freqüência em todos os eventos clínicos estudados quando comparado ao Benin/Benin. Dentre os resultados foi demonstrada uma tendência de menor número de pacientes com crises vasos-oclusivas e úlceras de perna com o aumento dos níveis de HbF. Não houve diferença estatisticamente significativa na comparação entre os níveis de HbF e os valores de Hemácias, Hemoglobina, Hematócrito, Leucócitos e Plaquetas. Conclusões: A determinação dos haplótipos da anemia falciforme é de grande importância não só para o acompanhamento e prognóstico dos pacientes, como também como ferramenta para estudos antropológicos que contribuam no esclarecimento da origem dos africanos que tanto contribuíram na formação etnológica, econômica, cultural e social do Brasil.

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