Thesis (Ph. D.)--University of Texas at Austin, 2002. / Vita. Includes bibliographical references. Available also from UMI Company.

Thesis (M. Phil.)--University of Hong Kong, 1992.

Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 1998. / Typescript. Vita. Includes bibliographical references (leaves 327-343). Also available on the Internet.

Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 1998. / Typescript. Vita. Includes bibliographical references (leaves 327-343). Also available on the Internet.

Thesis (PhD.(Chemical Engineering)--University of Pretoria, 2005. / Includes bibliographical references.

Thesis (Ph. D.)--University of Wisconsin--Madison, 1967. / Typescript. Vita. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Th.--Pharm.--Paris 5, 1984. N°: 104.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, 2015. / Made available in DSpace on 2016-03-01T04:01:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337297.pdf: 5463795 bytes, checksum: 5dbbd7aee7017ba6922aedc855149909 (MD5) Previous issue date: 2015 / Uma série de (E)-4-[(4-Nitrobenzilideno)amino]fenóis (1a-3a) e seus análogos sililados (5-7) foi sintetizada e completamente caracterizada. O composto (E)-4-[(4-Nitrobenzilideno)amino]fenol (1a) em acetonitrila (CH3CN) age como um quimiossensor cromogênico devido ao fato de que ânions básicos levam ao seu desprotonamento, resultando numa solução colorida. A detecção seletiva de CN- sobre F- foi obtida adicionando-se 1,4% (v/v) de água ao sistema: a água solvata preferencialmente o F-, enquanto o CN- fica relativamente livre para desprotonar 1a. Outra estratégia envolveu um ensaio de competição do fenolato e do analito pelo calix[4]pirrol (CP) em CH3CN. O fenolato e o CP formam um complexo por ligação de hidrogênio, com mudança na cor do meio. Dentre diversos ânions, somente o F- foi capaz de restaurar a cor original correspondendo ao fenolato, pelo fato do ânion deslocá-lo do sítio de complexação. Em uma segunda parte do trabalho, os compostos (E)-N-(4-nitrobenzilideno)-4-[(triisopropilsilil)oxi]anilina (5) e (E)-3,5-Dimetil-N-(4-nitrobenzilideno)-4-[(triisopropilsilil)oxi]anilina (6) apresentaram-se como quimiodosímetros cromogênicos baseados na quebra da ligação silil éter seletivos em CH3CN para o ânion F- em relação a vários ânions testados. O (E)-3,5-Dibromo-N-(4-nitrobenzilideno)-4-[(triisopropilsilil)oxi]anilina (7) foi aplicado para a detecção seletiva de CN- ou F- em CH3CN com 2,0% (v/v) de água, utilizou-se o CP para interagir com F- e o iodeto cuproso para interagir com CN-, deixando CN- ou F- livres para reagir com o composto 7. Confirmou-se através das técnicas de RMN de 1H e HRMS que os compostos gerados na quebra da ligação silil éter são os fenolatos correspondentes coloridos em solução. Nos estudos cinéticos em CH3CN, verificou-se o maior valor de k2 e menor t1/2 das reações dos quimiodosímetros com F- foram obtidos para o quimiodosímetro 7. Entretanto, em CH3CN na presença de 4,0% (v/v) de água, 7 apresentou o maior valor de k2 e menor t1/2 com o ânion CN-. Na parte final do trabalho, foi desenvolvida uma estratégia simples e eficiente utilizando o quimiodosímetro 7 para a detecção altamente seletiva de CN- em sistema aquoso micelar de brometo de cetiltrimetilamônio e plasma sanguíneo humano, baseado na clivagem da ligação silil éter.<br> / Abstract : (E)-4-(4-Nitrobenzylideneamine)phenols (compounds 1a-3a) and their silylated (compounds 5-7) analogues were synthesized and fully characterized. (E)-4-[(4-Nitrobenzylidene)amine]phenol (1a) in acetonitrile (CH3CN) acts as a chromogenic chemosensor based on the idea that more basic anions cause its deprotonation, generating a colored solution. The discrimination of CN- over F- was obtained by addition 1.4% (v/v) of water to CH3CN: water preferentially solvates F-, leaving the CN- free to deprotonate 1a. Another strategy involved an assay in CH3CN comprised of the competition between phenolate dye and the analyte for calix[4]pyrrole (CP). The phenolate and CP form a hydrogen-bonded complex, which changes the color of the medium. On the addition of various anions, only F- was able to restore the original color corresponding to phenolate in solution due to the fact that the anion dislodges phenolate from the complexation site. In a second part of this thesis, (E)-N-(4-nitrobenzylidene)-4-[(triisopropylsilyl)oxy]aniline (5) and (E)-3,5-dimethyl-N-(4-nitrobenzylidene-4-[(triisopropylsilyl)oxy]aniline (6) were studied as chromogenic anionic chemodosimeters based on Si-O cleavage selective for F- over other anionic species in CH3CN. (E)-3,5-Dibromo-N-(4-nitrobenzylidene)-4-[(triisopropylsilyl)oxy]aniline (7) was applied to selective detection of CN- or F- in CH3CN with 2.0% (v/v) of water, using CP to interact with F- and cuprous iodide to interact with CN-, which makes CN- or F- free to react with 7. Experimental evidences were collected for the Si-O cleavage, which leads to the release of the corresponding phenolates colored in solution. Kinetic studies showed in CH3CN that the highest value of k2 and lowest t1/2 value of chemodosimeters reactions with F- were obtained for 7.Thus, in CH3CN with 4.0% (v/v) of water, 7 showed the highest valued of k2 and lowest t1/2 value to CN-. In the last part of the thesis, a simple and efficient strategy was developed based on the chemodosimeter approach, for the highly selective detection of CN- in an aqueous cetyltrimethylammonium bromide micellar system and human blood plasma, based on the Si-O bond cleavage.

Orientador : Profª. Drª. Andréa Emilia Marques Stinghen / Coorientador : Profª. Drª. Wesley Maurício de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciencias Biológicas (Microbiologia, Parasitologia e Patologia Básica). Defesa: Curitiba, 16/02/2016 / Inclui referências : f. 54-61 / Resumo: p-Cresil Sulfato (PCS) e Indoxil Sulfato (IS) são toxinas urêmicas ligadas à proteínas, responsáveis por muitas das consequências clínicas da uremia, tais como a disfunção endotelial na doença renal crônica (DRC). Os transportadores de ânions orgânicos (OATs), representam uma família de transportadores que medeiam a absorção de uma vasta gama de moléculas e também de toxinas urêmicas por células tubulares proximais. No presente estudo investigamos a captação de PCS e IS por OAT1 e OAT3 em células endoteliais vasculares humanas. O PCS foi sintetizado a partir de seu precursor p-cresol através de sulfatação utilizando ácido clorossulfônico/KOH a fim de obter um sal de potássio. A caracterização do PCS foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), espectrometria de massa (EM) e Ressonância Magnética Nuclear de H1 e C13. As células endoteliais humanas foram tratadas com as concentrações normal, urêmica e urêmica máxima de PCS (0,08, 1,75 e 2,6 mg/L) e IS (0,6, 53 e 236 mg/L) respectivamente, com e sem Probenicid (Pb), comumente utilizado como agente uricosúrico, e descrito como um inibidor de OATs. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio de Brometo de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio (MTT). A captação de PCS e IS foi avaliado em extratos de células endoteliais à 4 e 37ºC por CLAE. OAT1 e OAT3 foram avaliados por western blot e imunocitoquímica. A expressão da quimiocina monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) foi avaliada por ELISA em sobrenadante de células endoteliais tratadas com PCS e IS com e sem Pb após cinética de 0, 3 e 6 h. A viabilidade celular diminuiu significativamente após 24 h de tratamento com PCS (P<0,05) e IS (P<0,001) de uma forma dose dependente para IS, e foi restabelecida após o tratamento com Pb. A captação de PCS e IS analisados por CLAE mostrou que a 37ºC ocorre a internalização celular de PCS e IS, e quando o Pb foi adicionado, houve a inibição da captação para ambas as toxinas, o que sugere que os OATs estão envolvidos na captação e transporte celular de PCS e IS. Além disso, à 4ºC foi observada uma internalização diminuída. A análise por western blot e imunocitoquímica mostraram que tanto OAT1 quanto OAT3 estão envolvidos na captação de PCS e IS em células endoteliais, com maior expressão de OAT1. A expressão de MCP-1 foi aumentada após 3 e 6 h de tratamento com PCS e IS, mas diminuiu após o tratamento com Pb. Em conclusão, PCS e IS servem como substratos para OATs em células endoteliais humanas e sua captação é mediada por estes transportadores. O bloqueio seletivo dos OATs pode servir como uma estratégia terapêutica para inibir a expressão de biomarcadores inflamatórios vasculares, tais como a quimiocina MCP-1, uma das principais moléculas no processo de aterosclerose urêmica. Nossos resultados podem ser úteis para melhor compreender os mecanismos celulares e moleculares da toxicidade urêmica em pacientes com DRC e reverter em novas estratégias terapêuticas nestes pacientes. Palavras-chave: toxicidade urêmica, p-cresil sulfato, indoxil sulfato, OATs, captação. / Abstract: Protein bound uremic toxins such as p-cresyl sulfate (PCS) and indoxyl sulfate (IS) are responsible for many of the uremia clinical consequences, such as endothelial dysfunction in chronic kidney disease (CKD) patients. Organic anion transporters (OATs), are a family of transporters that mediate the uptake of a wide range of molecules, and have being enrolled in the uptake of uremic toxins on e.g. proximal tubular cells. In this study we investigated whether OAT 1 and OAT 3 are enrolled in the uptake of PCS and IS in human vascular endothelial cells. PCS was synthesized by p-cresol sulfatation using chlorosulfonic acid/KOH in order to obtain a potassium salt, and characterized by high performance liquid chromatography (HPLC), mass spectrometry (MS) and 13C and 1H Nuclear Magnetic Resonance Spectra. Indoxyl sulfate was purchased commercially. Human endothelial cells (E.A.hy 926 - ATCC CRL 2922) were treated with normal, uremic and maximum uremic concentrations of PCS (0.08 mg/L, 1.75 mg/L and 2.6 mg/L) and IS (0.6 mg/L, 53 mg/L and 236 mg/L) respectively, with and without Probenicid (Pb), commonly used as a uricosuric agent and described as an OAT inhibitor. Cell viability was assessed by MTT. The PCS and IS up take was analyzed in endothelial cells extracts at 4°C and 37°C by High-performance liquid chromatography (HPLC). OAT 1 and OAT 3 were assessment by western blot and immunocytochemistry. Cell viability decreases after 24h of PCS (P<0,05) and IS (P<0,001) treatment in a dose dependent manner. The uptake of PCS and IS in cells extracts analyzed by HPLC, showed that at 37 ºC the cell internalization occurs for PCS and IS and when Pb was added, there was no evidence of both toxins, suggesting that OATs are involved in the active cellular transport of PCS and IS. In addition no uptake activity was noted at 4°C. Western blot and immunocytochemistry analysis showed that both OAT1 and OAT3 are involved in the uptake of PCS and IS in endothelial cells, with larger contribution by OAT1. MCP-1 expression increased after 3 and 6h of PCS and IS treatment, but decreased after Pb treatment. In conclusion, PCS and IS serve as OATs substrates in human endothelial cells and their uptake is mediated by OATs. The selective blockage of OATs could serve as a therapeutic strategy to inhibit he expression of vascular inflammatory biomarkers, such as Protein MCP-1, one of the main molecules in the uremic atherosclerosis process. Our findings could be useful to better understand the cellular and molecular mechanisms of uremic toxicity in CKD patients. Key-words: uremic toxicity, p-cresyl sulfate, indoxyl sulfate, OATs, uptake.

Resumo