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Validação e aplicação de método para determinação de oxitetraciclina por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) em camarão

OLIVEIRA, Beatriz Regina Brito de 28 August 2008 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-08T13:20:12Z No. of bitstreams: 1 Beatriz Regina Brito de OLiveira.pdf: 480535 bytes, checksum: e11bc6a9de00800c4c22f9a20e2b021b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-08T13:20:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beatriz Regina Brito de OLiveira.pdf: 480535 bytes, checksum: e11bc6a9de00800c4c22f9a20e2b021b (MD5) Previous issue date: 2008-08-28 / The white shrimp Litopenaeus vannamei is the species that stands out most in brazilian shrimp culture. One of the threats to the growth of this activity is the occurrence of diseases that affect the cultured animals, and hence, one of the actions taken to prevent or treat sick animals, the use of antibiotics, such as oxytetracycline (OTC). High Performance Liquid Chromatography (HPLC) with Detection Array of Diodes (DAD) was used to evaluate the OTC’s levels in shrimps cultured in tanks and treated with the drug. After the end of the treatment of shrimps with medicated feed containing OTC at 0,2; 0,4 and 0,5 mg/kg for 14 days, the elimination of antibiotic in muscle and the carapace of the animals until 22 days after medication was evaluated. It was verified through the results that the validated method intended to use and the OTC depletion was greater in carapace of animals (from 10 to 13 days) when compared to the muscle (five days). There was no statistical difference (P 0,05) between treatments used for levels of OTC in muscle and carapace. It is essential to point out the importance of quality control of drugs used in aquaculture as well as the deficient review of national and international standards about the use in the analyses of the shrimp whole, and not just the muscle, to evaluate the accordance of OTC residue in sample of crustaceans. / O camarão marinho Litopenaeus vannamei é a espécie que mais se destaca na carcinicultura brasileira. Uma das ameaças ao crescimento desta atividade em todo o mundo é a incidência de enfermidades que afetam os animais cultivados, sendo por isso, uma das possíveis ações adotadas para prevenir ou tratar animais enfermos é o uso de antibióticos, como a oxitetraciclina (OTC). Sendo assim, a partir de uma metodologia validada baseada na técnica de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por arranjo de diodos (DAD), avaliaram-se os níveis de oxitetraciclina em camarões cultivados em tanques e alimentados com ração adicionada do antibiótico objetivando-se avaliar a metodologia. Após o término do tratamento dos camarões com OTC nas concentrações de 0,2; 0,4 e 0,5 mg/Kg de ração durante 14 dias foi avaliada a concentração deste antibiótico no músculo e na carapaça dos animais até 22 dias após suspensão da medicação. Verificou-se que o método validado atende ao uso pretendido e foi observado maior tempo de residência da droga na carapaça dos animais cultivados em experimento (de 10 a 13 dias) quando comparado ao do músculo (cinco dias). Não houve diferença estatística (P 0,05) entre os tratamentos utilizados em relação aos níveis de OTC no músculo e na carapaça. É importante ressaltar a importância de um maior controle da qualidade dos fármacos utilizados na aquicultura, assim como, a falta de revisão de normas nacionais e internacionais quanto à utilização nas análises do camarão inteiro, e não somente do músculo, para avaliação da conformidade de crustáceos quanto ao resíduo de OTC.
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Detecção molecular e resistência a antimicrobianos no grupo V. fluvialis - V. furnissii / Molecular detection and antimicrobial resistance in group V. fluvialis - V. furnissii

Cintia Carolina da Silva Mayer 19 October 2010 (has links)
Introdução - Vibrio fluvialis é um microorganismo que provoca a gastroenterite muito semelhante à cólera, mas também há relatos de casos extra-intestinais como sepse, ferida, peritonite e celulite hemorrágica e encefalite. Acredita-se que a infecção por esse microorganismo esteja vinculada ao consumo de peixes crus ou mal cozidos contaminados e / ou frutos do mar. A identificação dessa bactéria por métodos fenotípicos continua a ser um problema devido à sua grande semelhança com Aeromonas hydrophila e V.furnissii; por isso, a utilização de uma ferramenta de diferenciação entre essas espécies é importante. Nas últimas décadas, o aumento da resistência aos antimicrobianos tem sido um fator preocupante, porque ela interfere na escolha dos medicamentos para o tratamento eficaz e há uma necessidade de rápida produção de novos antibióticos. Ambientes costeiros e estuários estão em perigo de serem contaminados por esgoto, que pode conter drogas que agem de forma seletiva, permitindo o desenvolvimento de resistência aos antimicrobianos. Vários estudos demonstraram que estirpes clínicas de V. fluvialis são resistentes a múltiplas drogas. Objetivos - Desenvolver um marcador molecular baseado no 16S rDNA capaz de detectar o grupo V. fluvialis-V. furnissii, e avaliar a susceptibilidade a antibióticos destas espécies, principalmente a partir de amostras ambientais. Métodos - Após a elaboração dos iniciadores a partir do alinhamento das espécies do gênero Vibrio, foram utilizadas cepas identificadas fenotipicamente como V. fluvialis e de V. furnissii para a sua detecção molecular. O perfil de susceptibilidade a antibióticos pelo método da disco-difusão foi realizada, assim como a investigação molecular da presença do elemento SXT e de seus genes de resistência a antimicrobianos. Resultados: Com a utilização dos iniciadores desenvolvidos foi possível confirmar corretamente as espécies. Observou-se alta porcentagem de resistência a ampicilina e cefalotina, sendo que 65,9por centode V. fluviais e 43,24por centode V. furnissi apresentaram resistência a pelo menos dois dos antibióticos utilizados. Somente em uma cepa de V. fluvialis detectou-se a presença de SXT e houve uma banda desconhecida de alto peso molecular quando da pesquisa do gene sulII. Conclusões: O método molecular mostrou ser um importante instrumento para se detectar espécies altamente relacionadas. Foram detectadas cepas resistentes a múltiplos antibióticos, indicando que o meio ambiente é um provável reservatório de genes de resistência; porém necessita-se de futuras investigações moleculares para se determinar o papel destes e sua possível associação com elementos genéticos. A detecção do elemento SXT sem a presença dos seus genes de resistência conhecidos atualmente reforça a idéia da extensão de seu papel adaptativo, além de ser o primeiro relato de sua existência na América do Sul / Introduction - Vibrio fluvialis is a microorganism that causes gastroenteritis very similar to cholera, however there are also reports of extraintestinal cases as sepse, skin wounds, peritonitis and hemorrhagic cellulitis and cerebritis. It is believed that infection by this organism is linked to the consumption of raw or undercooked contaminated fish and / or seafood. Identification of this bacteria by phenotypic methods remains a problem due to its great similarity with Aeromonas hydrophila and V.furnissii, therefore the use of a tool to differentiate these species is important. In recent decades, increasing antimicrobial resistance has been a concerning factor because it interferes in the choice of drugs for effective treatment and there is a need for rapid production of new antibiotics. Coastal and estuarine environments are in danger of being contaminated by sewage, which may contain drugs that will act selectively, allowing the development of antimicrobial resistance. Several studies have demonstrated that clinical strains of V. fluvialis are resistant to multiple drugs. Objectives - To develop a 16S rDNA - molecular marker able to detect the group V. fluvialis-V.furnissii, and to evaluate the antibiotic susceptibility of this species mainly from environmental samples. Methods - After the development of primers from alignment of the genus Vibrio strains phenotypically identified as V. fluvialis and V. furnissii were used for their molecular identification. The profile of antibiotic susceptibility was performed by the disk diffusion method, and the molecular investigation of the presence of the SXT element and their antimicrobial resistance genes. Results - The primers developed were able to confirm correctly the species. A high percentage of resistance to ampicillin and cephalothin was observed, V. fluvialis and V. furnissii showed resistance to at least two of the antibiotics used, 65.9 per cent and 43.24 per cent respectively. Only in one strain of V. fluvialis we detected presence of SXT and there was an unknown band of high molecular weight when we investigated gene sulII. Conclusions - Molecular identification has proved to be an important tool for differentiating highly related species. Strains resistant to multiple antibiotics were detected, indicating that the environment is likely a reservoir for resistance genes, but it is needed further molecular investigations to determine their role and their possible association with genetic elements. Detection of the SXT element without the presence of its known resistance genes reinforces the idea of the extent of its adaptive role, and this is the first report of its existence in South America
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Uso combinado de ionóforo e virginiamicina sobre o metabolismo, a digestibilidade e o comportamento ingestivo de novilhos Nelore confinados com dietas de alto concentrado / Combined use of ionophore and virginiamycin on metabolism, digestibility, and feeding behavior of Nellore steers confined with high concentrate diets

Nuñez, Amoracyr José Costa 22 February 2013 (has links)
Dois experimentos foram conduzidos com o objetivo de avaliar os efeitos do uso combinado de salinomicina e virginiamicina sobre o metabolismo ruminal, a digestibilidade, o comportamento ingestivo e as características sanguíneas de novilhos Nelore alimentados com dietas de alto concentrado. No experimento I, oito novilhos Nelore com 322 ± 26 kg de peso vivo (PV) inicial foram alocados no delineamento em quadrado latino 4 x 4 replicado, com quatro tratamentos em quatro períodos de 16 dias. Os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial 2 x 2, com dois níveis de salinomicina (0 e 13 ppm) e dois níveis de virginiamicina (0 e 15 ppm) na matéria seca (MS) das dietas, que continham 80% de concentrado na MS. No experimento II, oito novilhos Nelore com 434 ± 35 kg de PV inicial foram alocados no mesmo delineamento, mas com períodos de 21 dias. Os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial 2 x 2, com dois níveis de concentrado (70 e 90%) e dois níveis de virginiamicina (0 e 15 ppm) na MS das dietas. A salinomicina foi incluída em todas as dietas (13 ppm). Em ambos os experimentos, foram avaliados o consumo individual, a degradabilidade ruminal in situ, a digestibilidade aparente, a fermentação ruminal, o comportamento ingestivo, a população de protozoários ciliados ruminais e as características sanguíneas. As análises estatísticas foram realizadas pelo procedimento MIXED do SAS. No experimento I, houve efeito de nível de salinomicina e virginiamicina sobre as degradabilidades efetiva (DE) e potencial (DP) da fibra insolúvel em detergente neutro (FDN), sendo que os menores valores (P ≤ 0,05) foram observados para os animais tratados com os aditivos. A digestibilidade da proteína bruta (PB) foi maior (P = 0,01) para os novilhos que receberam salinomicina. Animais tratados com virginiamicina apresentaram maior (P = 0,01) concentração ruminal de propionato e menores (P ≤ 0,05) concentrações de acetato, butirato e lactato. Esses animais também apresentaram maior (P ≤ 0,03) tempo total de ruminação (TTR) e mastigação (TTM) e maior (P = 0,05) concentração de lactato no sangue. No experimento II, o aumento no teor de concentrado das dietas promoveu aumento (P = 0,01) no consumo de MS e nas digestibilidades aparentes da MS e PB, bem como redução (P < 0,01) na DE da FDN e PB. Animais tratados com ambos os aditivos apresentaram menor (P = 0,03) DE da FDN. As concentrações ruminais de acetato foram reduzidas (P < 0,01) com a inclusão de virginimicina, mas novilhos tratados com ambos os aditivos e alimentados com dieta contendo 90% de concentrado apresentaram aumento (P < 0,01) nas concentrações de propionato. O aumento no teor de concentrado promoveu redução (P < 0,01) no TTR e TTM dos animais, bem como na população de protozoários ciliados do rúmen e no pH sanguíneo. O uso combinado de salinomicina e virginiamicina apresentou efeitos positivos sobre a fermentação ruminal, especialmente quando a dieta com maior proporção de concentrado foi utilizada. / Two experiments were conducted to evaluate the effects of the combined use of salinomycin and virginiamycin on ruminal metabolism, digestibility, feeding behavior, and blood characteristics of Nellore steers fed high concentrate diets. In experiment I, eight Nellore steers with 322 ± 26 kg of initial body weight (BW) were allotted to a replicated 4 x 4 Latin square, with four treatments and four 16-day periods. Treatments were arranged in a 2 x 2 factorial design, with two salinomycin levels (0 and 13 ppm) and two virginiamycin levels (0 and 15 ppm) in the diet dry matter (DM), which contained 80% concentrate on a DM basis. In experiment II, eight Nellore steers with 434 ± 35 kg of initial BW were allotted to the same experimental design, but with 21-day periods, in a 2 x 2 factorial arrangement of treatments, with two concentrate levels (70 and 90%) and two virginiamycin levels (0 and 15 ppm) in the diet DM. Salinomycin was included in all diets (13 ppm). In both experiments, individual intake, in situ ruminal degradability, apparent digestibility, ruminal fermentation, feeding behavior, ciliated protozoa counts, and blood characteristics were evaluated. Statistical analyses were conducted using the MIXED procedure of SAS. In experiment I, there were effects of salinomycin and virginiamycin on effective and potential degradabilities (ED and PD, respectively) of the neutral detergent fiber (NDF), with lower values (P ≤ 0.05) observed for animals receiving the additives. Crude protein (CP) digestibility was higher (P = 0.01) for salinomycin-treated steers. Animals receiving virginiamycin showed higher (P = 0.01) ruminal concentrations of propionate and lower (P ≤ 0.05) ruminal concentrations of acetate, butyrate, and lactate. These animals also showed higher (P ≤ 0.03) total time spent ruminating (TTSR) and total time spent chewing (TTSC), as well as higher (P = 0.05) blood lactate concentrations. In experiment II, increasing concentrate levels increased (P = 0.01) DM intake and DM and CP digestibilities, but also decreased (P < 0.01) ED of the NDF and CP. Ruminal concentrations of acetate were reduced (P < 0.01) due to the inclusion of virginiamycin, but steers receiving both feed additives within the 90% concentrate group showed increased (P < 0.01) ruminal concentrations of propionate. Increasing concentrate levels decreased (P < 0.01) TTSR and TTSC, as well as ciliated protozoa counts and blood pH. The combined use of salinomycin and virginiamycin showed positive effects on ruminal fermentation, especially when animals were fed the higher concentrate diet.
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Protocolos para o uso combinado de monensina sódica e virginiamicina em dietas de bovinos Nelore confinados / Protocols for combined use of sodium monensin and virginiamycin in feedlot Nellore cattle diets

Rigueiro, André Luiz Nagatani [UNESP] 14 January 2016 (has links)
Submitted by ANDRÉ LUIZ NAGATANI RIGUEIRO null (andrenagatani@yahoo.com.br) on 2016-03-21T15:13:20Z No. of bitstreams: 1 Defesa-André04JAN2016_FINAL.pdf: 1050041 bytes, checksum: ad145a930ac44964a3ccf42de7b60ee7 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-03-23T12:00:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 rigueiro_aln_me_dra.pdf: 1050041 bytes, checksum: ad145a930ac44964a3ccf42de7b60ee7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-23T12:00:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rigueiro_aln_me_dra.pdf: 1050041 bytes, checksum: ad145a930ac44964a3ccf42de7b60ee7 (MD5) Previous issue date: 2016-01-14 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do uso combinado de monensina sódica (MON) e virginiamicina (VM) sobre o desempenho produtivo, comportamento ingestivo, características de carcaça, e saúde ruminal de bovinos Nelore terminados em confinamento. Foram utilizados 72 animais machos inteiros da raça Nelore, com peso vivo médio inicial de 388±31,07 kg, provindos de sistema de recria em pasto. Os animais foram divididos em quatro tratamentos de acordo com associação ou não dos aditivos nas fases de adaptação e terminação: MON (30 mg/kg) na adaptação + terminação; MON (30 mg/kg) + VM (25 mg/kg) na adaptação e VM (25 mg/kg) na terminação; MON (30 mg/kg) + VM (25 mg/kg) na adaptação e VM (25 mg/kg) + MON (30 mg/kg) na terminação e VM (25 mg/kg) na adaptação e MON (30 mg/kg) + VM (25 mg/kg) na terminação, caracterizando assim delineamento em blocos casualizados, em que cada tratamento contou com 6 repetições (3 animais por baia, sendo as baias as unidades experimentais). A duração do experimento foi de 90 dias, sendo 19 dias de adaptação, divididos em três períodos (7, 5 e 7 dias) com dietas de 69%, 74% e 79% de ingredientes concentrados, respectivamente; e 71 dias de terminação, com dieta contendo 84% de concentrado. Durante a fase de adaptação, a suplementação somente com VM aumentou a ingestão de matéria seca em quilos (IMSKG), ingestão de matéria seca em % do peso vivo (IMSPV), diminuiu a flutuação da ingestão de matéria seca (IMS) em quilos e em porcentagem e diminui os dias para os animais atingirem 2% de IMSPV (P<0,05). No período total de confinamento, a suplementação com MON e VM na fase de adaptação e somente VM na terminação aumentou o PV final, IMSKG, IMSPV, GPD, peso de carcaça quente, área de olho de lombo (AOL) final e ganho de AOL por dia. Não houve diferenças significativas entre os tratamentos para os parâmetros relacionados a saúde ruminal e seletividade da ração (P>0,05). Desta forma, a suplementação com somente VM melhorou o desempenho dos animais na fase de adaptação, no entanto, a suplementação com MON e VM na fase de adaptação e somente VM na terminação melhorou o desempenho e características de carcaça dos animais sem diferenças nos parâmetros relacionados a saúde ruminal e seletividade da dieta. / The experiment was designed to evaluate the effect of combined use of monensin (MON) and virginiamycin (VM) in the adaptation period and finishing period on feedlot performance, feeding behavior, ruminal health and carcass characteristics of Nellore cattle. Seventy two 26-mo-old yearling Nellore bulls (388±31.07 kg), backgrounded on pasture were randomly allocated and kept in 24 pens (10 m² and e 1.67 m bunk space per animal) according to the treatments: MON (30 mg/kg) in the adaptation and finishing period, MON (30 mg/kg ) + VM (25 mg/kg) in adaptation and only VM (25 mg/kg) in finish, MON (30 mg/kg) + VM (25 mg / kg) in adaptation and VM (25 mg/kg) + MON (30 mg/kg) in finish and VM (25 mg/kg) in adaptation MON (30 mg/kg) + VM (25 mg/kg) in finish, thus characterizing a completely randomized block design. Each treatment was composed by 6 replications (pens) in this study. The adaptation program consisted of ad libitum feeding of three adaptation diets over period of 19 days with concentrate level increasing from 69% to 84% of diet dry matter. During the adaptation period, animals feed with only VM showed greater dry matter intake in kilos, dry matter intake expressed as % of body weight, reduced in dry matter intake variation in kilos and percentage, and the number of days to achieve 2% of DMI, expressed as % of body weight (P<0.05). Throughout the study, steers that were fed MON and VM during the adaptation period and only VM during the finishing period increase final BW, DMI in kilograms and as percentage of BW, average daily gain, hot carcass weight, ribeye area and daily gain of ribeye area when compared to animals receiving others combinations. There were no differences between the treatments for parameters related of rumen health and selective consumption of ration (P>0.05). Thus, supplementation with only VM in the adaptation period improved the feedlot performance of the animals during the adaptation period; however, the supplementation with MON e VM during the adaptation period and only VM in the finishing period improved animals performance and carcass traits of Nellore cattle. / FAPESP: 2013/21672-7
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Avaliação clínica da eficácia da amoxilina ministrada em múltiplas doses no pós-operatório de exodontias de terceiros molares inferiores / Clinical evaluation of the efficacy of amoxicillin administered in multiple doses in postoperative of extractions lower third molar

Basilio de Almeida Milani 19 January 2012 (has links)
O uso de antibióticos para reduzir a infecção pós-operatória em cirurgia de terceiro molar permanece controverso. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da terapêutica com Amoxicilina em múltiplas doses para a prevenção de infecção em pacientes submetidos à extração de terceiro molar inferior com posição 2B (classificação de Pell & Gregory). O estudo foi prospectivo, cego, randomizado, duplo, controlado por placebo, com 32 pacientes. Cada paciente atuou como seu próprio controle usando a técnica de boca dividida. Um terceiro molar inferior foi retirado sob a cobertura de antibióticos no pós-operatório (500 mg de amoxicilina a cada 8 horas durante 7 dias) e o outro foi removido sem cobertura antibiótica pós-operatória (cápsulas de placebo a cada 8 horas durante 7 dias), mas em ambas cirurgias foi administrada dose única no pré-operatório de 1 g de amoxicilina. Os seguintes parâmetros foram avaliados no pré-operatório, no quarto e sétimo dias pós-operatórios: trismo, edema facial, temperatura corporal, linfadenopatia, infecção, disfagia e dor. Não houve diferença estatisticamente significativa nos parâmetros avaliados entre os pacientes operados (p> 0,05). Resultado do estudo mostrou que a administração de amoxicilina em dose única pré-operatória e em doses múltiplas pós-operatórias não se mostrou mais eficaz do que a administração somente em dose única pré-operatória com relação aos parâmetros clínicos avaliados nas exodontias de terceiros molares inferiores. / The use of antibiotics to reduce postoperative infection in third molar surgery remains controversial. The goal of this study was to evaluate the efficacy of multi-dose Amoxicilina therapy for the prevention of infection in patients undergoing lower third molar extraction with position 2B (Pell & Gregory classification). The study was a prospective, randomized, double blind, placebo-controlled trial with 32 patients. Each patient acted as their own control using the split-mouth technique. One lower third molar were removed under antibiotic cover postoperative (500 mg amoxicillin 8 hourly for 7 days) and the other were removed without antibiotic cover postoperative (placebo capsules 8 hourly for 7 days), but both surgery was administered preoperatively single dose of 1g of amoxicillin. The following parameters were evaluated on the preoperative and fourth, seventh days postoperative: trismus, facial swelling, body temperature, Lymphadenopathy, infection, dysphagia and pain. There was no statistically significant difference in the parameters evaluated between patients operated (p > 0.05). Results of the study showed that administration of amoxicillin single dose preoperative and postoperative multiple doses was not more effective than single dose administration only pre-operative with respect to clinical parameters evaluated in the lower third molar extractions.
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Desempenho zootécnico e eficiência reprodutiva em marrãs de linhagem comercial submetidas a dietas com antibióticos e probióticos / Performance and reproductive efficiency in commercial line gilts submitted to diets with antibiotics and probiotics

Chaya, Alberto Yukio 17 February 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1287662 bytes, checksum: 20770a49481eae9761bc4bfe89cd9319 (MD5) Previous issue date: 2012-02-17 / The aim of this study was to evaluate whether gilts that developed clinical cases of diarrhea in breast-feeding, present failures in reproductive performance and to evaluate whether they show the same body development of gilts that had no diarrhea as well to evaluate if the supply of food additives, antibiotics or probiotics, can eliminate or minimize the deficit in weight gain of gilts that suffered diarrhea in breast-feeding. Fiftyfour crossbred gilts, at approximately 80 d of age and 29 Kg, were fed ad libitum experimental diet formulated to attend nutritional requirements, and water was available at all times. Adding on basal diet, supplementation of antibiotic and probiotic, but not together on the same feed. The experimental design was completely randomized with two classes of animals (diarrheal and no diarrheal) subjected to three dietary treatments (1: antibiotic; 2: no feed additives; 3: probiotic), 2x3 factorial, four to five replicates of two animals per experimental unit. These animals started the experiment at approximately 80 days of age and their performance until, an average, 120 d of age. Gilts weighing around 75 Kg, at 120-130 days of age began to be exposed to adult boars. Estrous activity was monitored by exposure to boar in each pitch at least 15 min, twice per day. The reproductive and biological indices were analyzed descriptively using the statistical software R version 2.12.2 (R DEVELOPMENT TEAM, 2011). For all tests were performed to test the assumption (test of normality and homogeneity of variance test). The data were subjected to analysis of variance (ANOVA) and means were compared by F test at 5% and the Tukey test at 5%. Through the ANOVA, it was found that the interaction between the factors tested, class (diarrheal and no diarrheal) and treatment (1: antibiotic; 2: no feed additives; 3: probiotic), was not significant (p> 0.05). These factors are independent (F test, 5%). Thus, it was possible to compare the class separately from treatment. Among the main results (p <0.05) between classes include: females non diarrheal had bigger average daily weight gain and bigger feed intake of feed during the period 80-104 days of age. The better results (p <0.05) among treatments are: gilts subjected to treatment 2 had better feed intake from 80 to 104 days of age, better feed:gain ratio at 105-142 days of age, had earlier puberty and greater number of corpora lutea (ovulation). Therefore, it is concluded that there is a difference on performance between piglets that had diarrhea in farrowing and those who had not. And the supply of growth promoters during the experimental period were not effective as performance and reproductive efficiency of gilts. / O objetivo deste estudo foi avaliar se leitoas que desenvolvem ou não o quadro clínico de diarreia na fase de aleitamento, apresentam o mesmo desenvolvimento corporal e reprodutivo ao receber ou não aditivos alimentares, antibiótico ou probiótico, nas suas dietas. Utilizou-se cinqüenta e quatro fêmeas, com idade média de 80 dias e peso médio de 29 Kg. Os animais receberam água a vontade e foram alimentados ad libitum com ração basal experimental formuladas para atender as exigências nutricionais, acrescentando-se somente a suplementação ou não de antibiótico e/ou probiótico. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com duas classes (Diarreica e Não Diarreica) de animais submetidos a três tratamentos alimentares (1: antibiótico; 2: sem aditivo alimentar; 3: probiótico), fatorial 2x3, de quatro a cinco repetições, com dois animais por unidade experimental. Estes animais iniciaram o experimento em média aos 80 dias de idade e foram acompanhados zootecnicamente até, em média, os 120 dias de idade. A partir de 120-130 dias de idade (75 Kg de peso corporal), as fêmeas foram expostas diariamente e coletivamente em suas baias, a machos adultos (15 minutos de exposição, duas vezes ao dia) para rufiação e identificação do estro. A alimentação de todas as marrãs foi ad libitum em todo período experimental. Os índices zootécnicos e reprodutivos foram analisados descritivamente utilizando o software estatístico R versão 2.12.2. Para todas as análises foram realizadas o teste de pressuposição (teste de normalidade e teste de homogeneidade de variância). Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e as médias foram comparadas pelo teste F a 5% e pelo teste de Tukey a 5%. Por meio da ANOVA verificou-se que não houve interação entre os fatores testados, classe (Diarreica e Não Diarreica) e tratamento (1: antibiótico; 2: sem aditivo alimentar; 3: probiótico) (p>0,05). Dentre os principais resultados (p<0,05) entre classes destacam-se: fêmeas diarreicas apresentaram maior ganho de peso médio diário e maior consumo diário de alimento no período de 80 a 104 dias de idade. Dentre os principais resultados entre tratamentos, destacam-se (p<0,05): leitoas submetidas ao tratamento 2 obtiveram melhor consumo diário aos 80-104 dias de idade, melhor conversão alimentar aos 105-142 dias de idade, apresentaram puberdade precoce e maior número de corpos lúteos (ovulações). Portanto, conclui-se que há diferença zootécnica entre as classes de marrãs estudadas, e que o fornecimento de promotores de crescimento durante o período experimental não foram eficientes quanto ao desempenho zootécnico e a eficiência reprodutiva das marrãs.
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Ocorrência de clostridium difficile em leitões submetidos a antibioticoterapia nas regiões de Santa Catarina / Ocurrence of Clostridium difficile in pigs under antibiotic therapy in Santa catarina State

Barbosa, Carolina Grasel 10 October 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA08MA061.pdf: 265338 bytes, checksum: c19e162cccc2db9c3e85bc6f8c74e017 (MD5) Previous issue date: 2008-10-10 / The Clostridium difficile is a Gram-positive opportunist rod, anaerobic, spore-forming, found in the soil, water and enteric microbiota of many animal species. It has been described as the cause for enteritis in human beings and animals. In pigs it has grown in importance due to the large number of cases of neonatal enteritis that affects the colon of one to seven day old piglets. This bacterium produces two kinds of toxins: A (enterotoxin) and B (cytotoxin) that have an important role in the disease s pathogenesis. With the objective of researching the presence of the bacterium in up to seven days piglets submitted to antibiotic therapy as well as the production of the toxins A and B in isolated samples, 8 collections were made in different regions of the state of Santa Catarina, totalizing 490 samples of stool and retal swabs of piglets, gathered in the period of January to March 2008. The retal swabs were processed in the same day they were collected in the Microbiology Lab of CAV/UDESC and the stools were frozen at -4oC in steril Ependorf so that they could be submitted to the ELISA test later. Twenty-tree colonies of C. difficile were isolated, but no one produced the A and B toxins according to the ELISA test. Of the 69 stools analyzed, 32 (46,37%) were positive samples, 3 (4,34%) were intermediate samples, and 34 (49,27%) were negative samples, according to the ELISA test / O Clostridium difficile é um bastonete oportunista Gram-positivo, anaeróbio obrigatório, formador de esporos, encontrado no solo, água e microbiota entérica de várias espécies animais. Tem sido descrito como causa de enterite em seres humanos e animais. Em suínos tem adquirido grande importância devido ao grande número de casos de enterites neonatais que afetam o cólon de leitões entre um a sete dias de idade. Essa bactéria produz dois tipos de toxinas: A (enterotóxica) e B (citotóxica) que possuem papel importante na patogênese da doença. Com o objetivo de pesquisar a presença da bactéria em leitões com até 7 dias de idade submetidos à antibioticoterapia, bem como a produção das toxinas A e B nas amostras isoladas realizaram-se 8 coletas em diferentes regiões do Estado de Santa Catarina, totalizando 490 amostras de fezes e suabes retais de leitões, coletados no período de Janeiro a Março de 2008. Os suabes retais foram processados no mesmo dia da coleta no Laboratório de Microbiologia CAV/UDESC e as amostras de fezes foram congeladas a -40C em ependorf estéril para posterior realização do teste de ELISA. Foram isoladas 23 colônias do C. difficile, sendo que nenhuma delas produziu as toxinas A e B, pela análise do teste do ELISA. Já das 69 amostras de fezes analisadas, 32 (46,37%) amostras foram positivas, 3 (4,34%) amostras intermediárias e 34 (49,27%) amostras negativas, conforme demonstrou o teste de ELISA
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Degradação de tetraciclina utilizando o processo foto-fenton

Bautitz, Ivonete Rossi [UNESP] 20 June 2006 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-06-20Bitstream added on 2014-06-13T19:58:48Z : No. of bitstreams: 1 bautitz_ir_me_araiq.pdf: 446568 bytes, checksum: 8e69c35495f032ac3f24107bb7cbfdb9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fármacos residuais estão sendo encontrados com freqüência em ambientes aquáticos o que pode acarretar problemas ambientais. Dessa forma, neste trabalho foi avaliada uma alternativa para a degradação do antibiótico tetraciclina (TC): a utilização do processo foto-Fenton. O monitoramento da concentração de TC foi feito por análises de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e a remoção da carga orgânica foi avaliada por determinações de Carbono Orgânico Total (COT). Dois sistemas de fotodegradação foram empregados, um utilizando radiação artificial e outro solar. Foi avaliada a influência de alguns fatores na fotodegradação de TC (24,0 mg L-1) como a utilização de ferrioxalato de potássio (FeOx) e Fe(NO3)3 que foram testados como fonte de ferro e apresentaram resultados diferentes. Sob radiação artificial, Fe(NO3)3 apresentou os melhores resultados pois a total oxidação do composto alvo foi atingida em apenas um minuto de tratamento, enquanto que na presença de FeOx a total oxidação ocorreu em 10 minutos. Quando a concentração de Fe(NO3)3 foi variada de 0,200 mol L-1 para 0,100 mol L-1 foi verificado um decréscimo na remoção de COT de 74% para 47%. Já sob radiação solar, os melhores resultados foram obtidos com FeOx, pois em 30 segundos de tratamento a TC foi totalmente oxidada. Outro parâmetro avaliado foi a influência da concentração de H2O2 e a maior concentração estudada (20 mmol L-1) prejudicou a fotodegradação, enquanto que a menor concentração testada (3,00 mmol L-1) manteve boa remoção de COT (76%) e de oxidação de TC (100%). A degradação de TC foi também avaliada em matrizes como água superficial e efluente de estação de tratamento de esgoto. Nessas matrizes, FeOx sob radiação solar manteve bons resultados para a oxidação de TC, com o qual foram alcançados percentuais de 85 e 74% de remoção de COT na água superficial e efluente de ETE, respectivamente. / Pharmaceutical residues are being found frequently in aquatic environments what may cause environmental problems. Therefore, in this work an alternative for the degradation of the tetracycline (TC) antibiotic was evaluated: the use of the photo-Fenton process. The monitoring of the TC concentration was made by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) analysis and the removal of the organic load was evaluated by Total Organic Carbon determination (TOC). Two systems of photodegradation were employed, one using artificial radiation and other using solar radiation. The influence of some factors in the photodegradation of TC (24,0 mg L-1) was evaluated such as the use of potassium ferrioxalate (FeOx) and Fe(NO3)3 that were tested as iron source and presented different results. Under artificial radiation, Fe(NO3)3 presented the best results since total oxidation of the target compound was achieved in only one minute of treatment, while in presence of FeOx the total oxidation occurred in 10 minutes. When the concentration of Fe(NO3)3 was varied from 0,200 mol L-1 to 0,100 mol L-1 a decrease in the TOC removal from 74% to 47% was verified. Regarding solar radiation, best results were obtained with FeOx, since in 30 seconds of treatment, the TC was totally oxidized. Other parameter evaluated was the influence of the H2O2 concentration. The highest concentration studied (20 mmol L-1) hindered the photodegradation, while the lowest concentration (3,00 mmol L-1) tested provided good TOC removal (76%) and TC oxidation (100%). The degradation of TC was also evaluated in matrices such as surface water and effluent of sewage treatment plant. FeOx under solar radiation maintained good results for the TC oxidation with which percentages of 85% and 74% of TOC removal were achieved, respectively.
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Suscetibilidade antimicrobiana e protocolo de purificação de RNA para análise de expressão gênica de isolados clínicos de Fusobacterium nucleatum / Antimicrobial susceptibility and RNA purification protocol for gene expression analysis of clinical isolates of Fusobacterium nucleatum

Raquel Zanin Midena 02 September 2015 (has links)
Fusobacterium nucleatum é uma espécie bacteriana Gram-negativa, anaeróbia estrita e uma das espécies frequentemente encontradas nas infecções primárias do sistema de canais radiculares. Esta espécie tem grande importância na formação de biofilmes por ser uma ponte de união entre espécies que não são capazes de interagir. Os micro-organismos constituintes de biofilmes trocam material genético, aumentando a tolerancia dos mesmos e é quase impossível um isolado clínico ter os genes totalmente iguais à cepa padrão de coleções de cultura como da ATCC (American Type Culture Colection). O presente estudo investigou a espécie bacteriana anaeróbia Fusobacterium nucleatum isolada de canais radiculares, comparando-a com sua cepa de referência. Foi feito a comparação da suscetibilidade microbiana in vitro por meio de cultura microbiológica pelo método do E-test, com as cepas em crescimento planctônico e em biofilme. Também foi definido um protocolo de Purificação de RNA para esta espécie em ambas as condições de crescimento. As cepas clínicas de F. nucelatum foram isoladas por meio da cultura microbiológica de 23 pacientes que apresentavam dentes com infecção primária e periodontite apical visível em radiografia. Foi feito isolamento e identificação da espécie por série bioquímica com testes comerciais (Sistema Api, Bio-Meriéux, França) e PCR convencional, sendo no total 4 isolados clínicos investigados. Foi verificada a suscetibilidade antimicrobiana dos seguintes antibióticos: Amoxicilina, Amoxicilina + ácido clavulânico, Ampicilina, Azitromicina, Clindamicina, Eritromicina e Metronidazol. O protocolo para purificação de RNA foi feito com microesferas de zircônia, dispositivo bead beater, kit comercial RNeasy (Qiagen) e transcrição para DNA complementar (cDNA). A qualidade da purificação foi testada quanto a sua capacidade de amplificação pela reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR) utilizando primer para o gene 16s RNA específico para F. nucelatum. Todas as cepas testadas foram 100% suscetíveis a Amoxicilina + ácido clavulânico, Ampicilina, Azitromicina, Clindamicina e Metronidazol. Ambos os tipos de crescimento bacteriano demonstraram resistência somente à eritromicina. O protocolo proposto para a purificação do RNA de F. nucelatum dos isolados em crescimento planctônico e em biofilme foi eficaz. A média do rendimento do RNA das amostras para as bactérias em crescimento planctônico foi de 514,2 ng/&#x3BC;L (DP ± 397,7) e para as amostras em biofilme foi de 377,1 ng/&#x3BC;L (DP± 144,1). Os valores encontrados sugerem uma boa qualidade de RNA, livre de contaminação por proteínas. Todas as cepas de Fusobacterium nucleatum isoladas de canais radiculares, assim como a cepa ATCC foram suscetíveis aos antibióticos testados, com exceção do antibiótico eritromicina em ambos os tipos de crescimento bacteriano. As bactérias em biofilme apresentaram aumento na tolerância frente aos agentes antimicrobianos, com diferença estatística. O protocolo estabelecido para a purificação do RNA de cepas de Fusobacterium nucleatum cultivadas em fase planctônica e em biofilmes teve êxito com amplificação por qPCR. / Fusobacterium nucleatum is a Gram-negative bacterial species, strict anaerobic and one of the species often found in primary infection of the root canal system. This species has great importance in biofilm formation to be a union bridge between species which are not able to act alone. The constituent microorganisms of the biofilm exchange each tother genetic material, increasing the strength of them. It is almost impossible for a clinical isolate have genes totally equal to a standard strain, such as strains of culture collections like ATCC (American Type Culture Collection). The present study investigated anaerobic bacterial species Fusobacterium nucleatum isolated from root canals, comparing them to the ATCC strain. The microbial in vitro susceptibility of biofilm and planktonic growth of the strains was compared by means of microbiological culture and the E-test method, with the antibiotics Amoxicillin, Amoxicillin + clavulanic acid, Ampicillin, Azithromycin, Clindamycin, Eritromycin and Metronidazole.. Also, a RNA Purification protocol for the strains under the same growth conditions was defined. Clinical isolates were obtained by microbiological samples of patients with teeth with pulp necrosis and apical periodontitis visible on radiographs. The species isolation and identification were performed using commercial biochemical tests (Sistema Api, Bio-Meriéux, France) and conventional PCR, obtaining four clinical isolates. The protocol for RNA purification was done with zirconia beads, bead beater device and commercial kit RNeasy (Qiagen) and transcribed into complementary DNA (cDNA). The quality of purification was tested for its ability of amplification by real time polymerase chain reaction (qPCR) using primer for the gene 16s RNA specific for F. nucleatum. All tested trains were 100% susceptible to amoxicillin + clavulanic acid, ampicillin, azithromycin, clindamycin and metronidazole. Both types of bacterial growth showed resistance to Erythromycin. Bacteria in biofilm showed a decrease in susceptibility to all antibiotics, but without statistical difference. The protocol proposed for the purification of RNA of F. nucleatum was effective, in the planktonic and the biofilm growth. The average yield of RNA samples for bacteria in planktonic growth was 514.2 ng /&#x3BC;L (SD ± 397.7) and the samples in biofilm was 377.1 ng / &#x3BC;L (SD ± 144.1). These found values suggest a good quality of RNA, free of protein contamination. The established protocol for the purification of the RNA of the Fusobacterium nucleatum strains, grown in biofilm and planktonic phase, had successfully amplified by qPCR.
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Probiótico na ração de frangos de corte submetidos a antibioticoterapia: desempenho e microbiota intestinal / Dietary probiotic in broiler chickens submitted to antibiotic therapy: performance and intestinal microbiota

Rafaela Pereira 03 December 2014 (has links)
Este estudo teve o objetivo de avaliar a eficiência do probiótico em manter o equilíbrio da microbiota intestinal de aves submetidas à antibioticoterapia e as associações com o desempenho. Os tratamentos dietéticos consistiram de uma dieta basal única, à base de milho e farelo de soja, à qual foi acrescido ou não o probiótico Bacillus subtillis (100 g/ton de ração), na concentração de 10? UFC/g. Por 3 dias consecutivos a partir de 21 dias de idade, as aves foram submetidas à antibioticoterapia via água de bebida consistindo de 200 ppm de bacitracina metileno dissacilato (efeito em bactérias Gram-positivas ) e 1000 ppm de sulfato de neomicina (efeito em bactérias Gram-negativas). O experimento foi conduzido com frangos de corte no período de 1 a 42 dias, sendo que de 1 a 21 dias as aves receberam somente o tratamento dietético, e, a partir de 21 dias, as aves receberam os tratamentos dietético e terapêutico. Aos 2, 4 e 6 dias após a antibioticoterapia, 3 aves de cada unidade experimental foram sacrificadas para coleta do conteúdo do intestino delgado e do ceco e obtidos \"pools\" dos conteúdos intestinais em cada unidade experimental para constituir uma repetição. O experimento foi realizado com 4 tratamentos, obedecendo a esquema fatorial 2×2 para as variáveis de desempenho (com e sem probiótico × com e sem antibioticoterapia) com 9 repetições e 2×2×3 para as análises da microbiota intestinal (com e sem probiótico na dieta × com e sem antibioticoterapia × 2, 4 e 6 dias após a antibioticoterapia) com 3 repetições. O DNA total foi extraído dos conteúdos do intestino delgado e ceco para o isolamento da região 16S rRNA e análise das comunidades bacterianas. As técnicas moleculares utilizadas foram a de fingerprinting Terminal Restriction Length Polymorphism (T-RFLP), PCR em tempo real (qPCR) e o sequenciamento, sendo que, para todas as técnicas, a região alvo foi o gene 16S rRNA. Os fatores dietético e terapêutico modularam a microbiota intestinal de forma independente. Houve efeito dos fatores probiótico e antibioticoterapia nos grupos predominantes do conteúdo do intestino, desde a classificação taxonômica filo até a classificação gênero. Alguns grupos filogenéticos foram igualmente afetados pelos 2 fatores em estudo, enquanto que outros grupos foram alterados de forma específica em função do probiótico ou antibioticoterapia. A antibioticoterapia, assim como o probiótico dietético, reduziu o número de unidades taxonômicas operacionais (OTUs) no conteúdo do ceco. O melhor desempenho observado nas aves alimentadas com dietas com probiótico provavelmente está relacionado às alterações observadas na estrutura das comunidades intestinais e grupos filogenéticos, como o acréscimo de Lactobacillus e redução de Clostridiales. A antibioticoterapia modificou a estrutura da comunidade bacteriana, entretanto não provocou queda no desempenho das aves. A comunidade bacteriana do intestino das aves medicadas e suplementadas com probiótico apresentou alta similaridade com a comunidade das aves que receberam apenas probiótico dietético, indicando a possível recuperação da microbiota intestinal aos 6 dias após a antibioticoterapia. / The purpose of this study was to verify the ability of a probiotic in the feed to maintain the stability of gut microbiota in chickens after antibiotic therapy and associations with the performance. The dietary treatments consisted of a cornsoybean meal basal diet that was supplemented or not with a probiotic (Bacillus subtilis) in the concentration of 3×109 cfu/kg of feed. Starting on day 21, the birds were submitted to the antibiotic therapy consisting of 200 ppm of bacitracin methylene disalicylate (for Gram-positive bacteria) and 1,000 ppm of neomycin sulfate (for Gram-negative bacteria) in the drinking water, during 3 days. The trial was conducted with broiler chickens from 1 to 42 days of age, however, from 1 to 21 days, the chickens received only the dietary treatment, and after of the 21 days, the birds received the dietary and therapeutic treatments. At 2, 4 and 6 days after the antibiotic therapy, three chickens from each experimental unit were euthanized and the contents of the small intestine and ceca were collected and pooled by pen. The trial was conducted in a completely randomized design with 4 treatments and 9 replicates in a 2×2 factorial arrangement for performance characteristics (with and without probiotic × with and without antibiotic therapy), and in a 2×2×3 factorial arrangement for gut microbiota (with and without probiotic × with and without antibiotic therapy × 2, 4 and 6 days after of the antibiotic therapy) with 3 replicates per treatment. The DNA was extracted from the contents of the small intestine and ceca to isolate the 16S r RNA and study of the bacterial communities. The molecular techniques used were the terminal restriction fragment length polymorphism (TRFLP), quantitative PCR (qPCR) and sequencing, considering the 16S rRNA -genetargeted. The dietary and therapeutic factors modulated the gut microbiota independently. The probiotic and antibiotic therapy affected the main groups within of the gut content from the phylogenetic classification at the phylum level until the phylogenetic classification at the genera level. Some phylogenetic groups were equally affected by the two factors while other groups were changed in a distinct form depending on of the probiotic or antibiotic therapy. The antibiotic therapy and dietary probiotic decreased the number of taxonomic operational unit (OTUs) in cecal content. The improved performance observed in birds supplemented with probiotic was probably related to changes in the structure of intestinal bacterial communities and phylogenetic groups such as higher Lactobacillus and decreased Clostridiales. Antibiotic therapy modified the bacterial community structure; however it did not cause loss of broiler performance. The gut bacterial community in birds medicated and supplemented with probiotic had high similarity with the gut community of birds that received dietary probiotic only, indicating the possible recovery of the gut bacterial community 6 days after the antibiotic therapy.

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