Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Thèse doctorat : Médecine. Immunologie : Université de Nantes : 2003. / Bibliogr. f. 146-157 [138 réf.].

Reproduction de : Thèse de doctorat : Biologie : toxicologie de l'environnment : Metz : 2004. / Titre provenant de l'écran-titre. Notes bibliographiques.

Thèse (M.Sc.) -- Université Laval, 1997. / Les légendes des ill. se trouvent sur les f.. en regard et portent une pagination. Bibliogr.: f. [40]-54. Publié aussi en version électronique.

Les tumeurs humaines sont associées à la production d'antigènes oncofoetaux qu'on utilise comme moyen de diagnostic dans le dépistage du cancer. Un de ces antigènes, la préalbumine embryonnaire, découverte par Kalashnikov , Tatarinov et leurs collaborateurs est associée à différents sarcomes et tumeurs des tissus mous. Des anticorps polyclonaux et monoclonaux contre l'EPA ont permis de détecter la présence à de cet antigène à la surface de certaines lignées cellulaires humaines cancéreuses par des méthodes d'immunofluorescence et d'immunoperoxydase indirectes. Les mêmes anticorps prouvent l'absence de cet antigène sur des lignées cellulaires normales. Les anticorps ont permis aussi la caractérisation histologique d'un angiosarcome du foie par rapport au foie normal. Il est maintenant possible de faire un dosage radioimmunologique grâce à une courbe tracée à partir de solutions de référence dans un tampon PBS. Certaines tumeurs humaines sont associées à la production d'antigènes oncofoetaux qu'on utilise comme moyen diagnostique dans le dépistage du cancer. Parmi ces antigènes 1'a 1phafoetoprotéine (AFP) et l'antigène carcinoembryonnaire (CEA) sont principalement associés aux carcinomes. Kalashnikov, T atarinov et leurs collaborateurs ont décrit une nouvelle protéine oncofoetale, la préalbumine emryonnaire (EPA) associée à différents sarcomes et tumeurs des tissus mous. La purification de cette protéine a permis de produire des anticorps polyclonaux et monoclonaux. Les anti-EPA monoclonal et polyclonal ont permis de détecter la présence de cet antigène à la surface de certaines lignées cellulaires humaines cancéreuses par des méthodes d'immunofluorescence et d'immunoperoxydase indirectes. Les mêmes anticorps ne révèlent pas la présence de cet antigène sur des lignées cellulaires normales. Les anticorps monoclonaux et polyclonaux ont permis aussi la caractérisation histologique de l'angiosarcome du foie par rapport à un foie normal. Cette tumeur présente chez les travailleurs du chlorure de vinyle à Shawinigan est mortelle à presque 100%, puisque dépistée à un stade avancé. La dernière partie constitue une étape pré liminaire vers le dosage sérique de l'EPA par essai radioimmunologique dosage. Il est donc maintenant possible de faire un dosage très sensible grâce à une courbe tracée à partir de solutions de référence dans un tampon PBS. Il est certain que ces tests ne constitueront pas à eux seuls des tests cliniques universels pour la détection des maladies néoplasiques de type sarcomateux. Il est quand même très important de penser à une application clinique car avec d'autres tests complémentaires, ils permettront de faire un diagnostic plus certain avec un traitement plus adéquat. / Montréal Trigonix inc. 2018

L'objectif de ce projet a été la production des anticorps monoclonaux dirigés contre le cytomegalovirus (CMV) pour fin d'utilisation potentielle en diagnostic et/ou l'utilisation comme outil pour etudier les aspects fondamentaux du CMV. Des anticorps monoclonaux ont été obtenus par fusion de lymphocytes de souris (immunisées par quatre injections intrapéritonéales de 500 mg à intervale de deux semaines) et des cellules de mylome de souris (NSO) maintenues en culture exponentielle. Le dépistage des clones sécréteurs a été effectué par ELISA et immunofluorescence (IF). Les hybridomes intéressants ont été clonés par dilution limite puis congelés dans l'azote liquide et injectés par voie intrapéritonéale chez des souris (BALB/c), traitées avec une injection intrapéritonéale de 0.7 ml de pristane (2,4,10,14-Tetramethylpentadecane) dix jours auparavant, pour la production de liquide ascitique. Parmi les clones sélectionnés, un seul s'est révélé d'un grand intérêt. Le clone CLB-1 s'est révélé d'une grande reactivité et d'une grande spécificité contre le CMV. Le liquide ascitique produit par les cellules monoclonales CLB-1 a été testé et les aspects suivants des réactions entre le CLB-1 et le CMV ont été vérifiés: (a) Reactivité et spécificité de l'anticorps contre le CMV. Pour étudier ce phénomène, l'anticorps monoclonal (CLB-1) a été testé par IF (en dilution de 1:100) contre des cellules fibroblastiques infectées par le CMV (AD169) ou par l'Herpès simplex type-1 ou type-2. Les résultats ont montré une réaction positive avec les cellules infectées par le CMV (AD169) et négative avec les cellules non-infectées ou infectées par l'Herpès sipmlex type-1 ou type-2. (b) La capacité de cet anticorps (CLB-1) pour la detection des isolées cliniques de CMV a été vérifié. L'anticorps monoclonal a détecté toutes les isolées cliniques trouvés positives au CMV. (c) Pour étudier la cinétique de la synthèse de la protéine contre lequel l'anticorps monoclonal est dirigé, le CLB-1 a été testé en IF avec des cellules fibroblastiques infectées avec le CMV à des temps différents après l'infection. Les résultats ont montré une réaction positive entre 72 et 96 heures après 11 infection prouvant ainsi que la protéine contre laquelle CLB-1 est dirigé est une protéine tardive. (d) La capacité neutralisante de 11 anticorps a été vérifiée et il a été prouvé que ce derniér neutralise le virus à une dilution de 1:100 comparativement au sérum humain ayant une capacité neutralisante à une dilution de 1:5. (e) Finalement le test d'immunodiffusion double sur gel d1 agarose a montré que 1'anticorps monoclonal CLB-1 est de type IgGl. Plusieurs essais ont été effectués afin de déterminer le poids moléculaire de la (les) protéine(s) contre laquelle 11 anticorps CLB-1 est dirigé. Par immunoblotting, il nous a été impossible d1 identifier cette (ces) protéine (s). La raison probable est la destruction ou la modification de 11 épitope dans le processus de préparation de 11 antigene. Il a été mentionné que la majorité des anticorps monoclonaux ne précipitent pas les antigene contre lesquels ils sont dirigés (Carter and Ter Meulen, In advances in virus research. 1984, 29: 95-130). En conclusion nous avons produit un anticorps monoclonal contre le CMV, cet anticorps peut nous aider pour les diagnostic et probablement pour le traitement de 1'infection virale de CMV. / Fusions of spleen cells obtained from mice immunized with human cytomegalovirus (CMV) and a mouse myeloma cell line were performed. One monoclonal antibody, CLB-1 was obtained from the four fusions performed. The following aspects of the reaction of the monocolona1 antibody CLB-1, with CMV were investigated: (a) The reactivity and specificity of CLB-1 with CMV; (b) the ability of the CLB-1 monoclonal antibody to detect clinical isolates of CMV; (c ) the kinetics of synthesis of the protein against which the CLB-1 monoclonal antibody reacts ; (d) the ability of the CLB-1 to neutralize CMV; and (e) some characteristics of this monoclonal antibody. The data obtained showed that the CLB-1 monoclonal antibody detected cells infected with CMV A D16 9 , the strain which was used as the immunizing antigen. The CLB-1 antibody showed a high degree cf specificity for the CMV as it did not react with the herpes simplex type-1, herpes simplex type-2 infected cells nor with uninfected human fibroblasts. From the kinetic experiments, the data obtained showed that this monoclonal antibody was directed against a late protein(s) that appeared between 72h and 96h post-infection. The CLB-1 antibody neutralized the virus completely at a dilution of 1:100 of an acitis fluid preparation. Using the double immunodiffusion method, the CLB-1 antibody was found to belong to the IgGl sub-class of immunoglobulins / Montréal Trigonix inc. 2018

Reproduction de : Mémoire du DES : Biologie médicale : Nantes : 2008. Reproduction de : Thèse d'exercice : Pharmacie : Nantes : 2008. / Bibliogr.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2003. / Bibliogr.: f. [123]-148. Publié aussi en version électronique.

La fusion entre des cellules de rate de souris immunisées avec des suspensions de tumeurs primaires mammaires humaines et des cellules d'une lignée de myélome de souris a permis d’obtenir des anticorps monoclonaux reconnaissant les cellules épithéliales. De cette banque d'anticorps, trois réagissent contre des filaments cytoplasmiques. La caractérisation de ces anticorps monoclonaux a été faite à l'aide de techniques d'immunohistochimie, immunofluorescence et immunoperoxydase, en utilisant différentes lignées cellulaires humaines et différents tissus épithéliaux et non-épithéliaux humains, afin de connaître la spécificité des anticorps. Le poids moléculaire relatif des protéines reconnues par les anticorps a été déterminé par immunodétection de type western après transfert des protéines sur membrane de nitrocellulose. Les résultats présentés dans ce mémoire concernent uniquement la caractérisation d'un anticorps monoclonal, 1B6, qui reconnaît spécifiquement plusieurs cytokératines. Par sa spécificité, cet anticorps est un marqueur des cytokératines, donc des cellules d'origine épithéliale normales et tumorales. Il représente ainsi un outil utile et unique à notre connaissance pour le diagnostic, en pathologie, de métastases d'origine épithéliale. Au niveau de la recherche fondamentale, il constitue un outil intéressant pour l'étude, entre autres de la différenciation cellulaire épithéliale et du rôle des cytokératines. / Montréal Trigonix inc. 2018

Mémoire de D.E.S. : Pharmacie hospitalière et des collectivités : Université de Nantes : 2007. Thèse d'exercice : Pharmacie : Université de Nantes : 2007. / Bibliogr.