Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:19Z : No. of bitstreams: 1 000836715.pdf: 843106 bytes, checksum: c33d2323cc7487e8cca4a2c9348832d9 (MD5) / O procedimento de aspiração folicular videolaparoscópica é amplamente utilizado dentro das biotecnologias reprodutivas, porém, existem alterações fisiológicas que o posicionamento em Trendelemburg pode ocasionar ao sistema cardiorrespiratório dos animais. Por este motivo e objetivando-se reduzir estas intercorrências, desenvolveu-se uma nova abordagem cirúrgica em decúbito lateral direito para aspiração folicular em ovelhas Santa Inês. Foram utilizadas 24 fêmeas ovinas Santa Inês divididas aleatoriamente em dois grupos com 12 animais cada sendo: GL - posicionadas em decúbito lateral direito com inclinação de 10º em cefalodeclive; GD - posicionadas em decúbito dorsal com inclinação 35º em cefalodeclive. Os animais foram submetidos ao procedimento de aspiração folicular por videolaparoscopia utilizando três portais e pneumoperitôneo induzido com CO2. Os tempos cirúrgicos, folículos visualizados e aspirados, oócitos recuperados, frequência cardíaca e respiratória, pressão arterial média, pressão ao final da expiração de CO2, analgesia pós operatória e concentração sérica de fibrinogênico foram avaliados nos períodos pré, trans e pós cirúrgicos. O tempo cirúrgico total, a frequência cardíaca, pressão arterial média, e EtCO2 apresentaram maiores valores no GL. Enquanto que os folículos visualizados e aspirados, oócitos recuperados, fibrinogênio, frequência respiratória e analgesia pós operatória foram similares entre os grupos. A técnica de aspiração folicular por acesso lateral apresenta-se como um procedimento viável e efetivo para a recuperação oocitária em ovelhas Santa Inês. Entretanto é importante comentar que este acesso acarreta alterações consideráveis no sistema cardiorrespiratório quando comparada ao procedimento convencional, fazendo com que sua aplicabilidade prática seja limitada / The laparoscopic ovum pick-up is widely used in reproductive biotechnology, although there are physiological changes in the cardiorespiratory system due to Trendelenburg position. For this reason and in order to decrease these events we developed a new surgical approach in the lateral position for follicular aspiration. 24 Santa Ines sheep randomly divided into two groups with 12 animals: GL - positioned in right lateral position and head down position of 10 degree; GD - supine positioned and an head down inclination of 35 degree. The animals were submitted to laparoscopic ovum pick-up procedure, using three portals and CO2 pneumoperitoneum. The surgery times, visualized and aspirated follicles, oocytes recovery, heart and respiratory rate, mean arterial pressure, pressure at the end of the exhaled CO2, post surgery analgesia and serum fibrinogenic were evaluated before, during and after surgery. The total surgery time, heart rate, mean arterial pressure, and EtCO2 were higher in the GL. While visualized and aspirated follicles, recovery oocytes, fibrinogen, respiratory rate and post surgery analgesia were similar between groups. The follicular aspiration technique for lateral approach presents as viable and effective procedure for oocytes recovery in Santa Ines sheep. However, it is important to mention that this approach requires considerable changes in cardiorespiratory system compared to the conventional approach, making their practical applicability limited

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-22Bitstream added on 2014-08-13T18:00:44Z : No. of bitstreams: 1 000755458.pdf: 7844344 bytes, checksum: c792c9d9113d97997c1a4e943fa85608 (MD5) / O diabete materno constitui um ambiente desfavorável para o desenvolvimento embrionário e feto-placentário. É uma repercussão de importância na obstetrícia moderna, visto que está associado a um risco aumentado de morbidade materna e neonatal e continua a ser um desafio médico significativo. O aumento mundial na incidência do diabete, o aumento do diabete tipo 2 em mulheres em idade reprodutiva e a geração cruzada da programação intra-uterina do diabete tipo 2 são as bases para o interesse crescente na utilização de modelos experimentais diabéticos, a fim de obter conhecimento sobre os mecanismos que induzem as alterações de desenvolvimento no diabete gestacional. Vários estudos têm demonstrado os benefícios da prevenção do diabete com intervenções no estilo de vida, melhora metabólica e controle de fator de risco cardiovascular para evitar substancialmente as complicações devastadores da doença. Apesar desses achados e a revolução recente no conhecimento científico e infinidade de novas terapias do diabete, continua a haver uma grande lacuna entre o que foi aprendido através da pesquisa e o que é feito na prática da saúde pública, clínica e comunitária. O iminente impacto econômico negativo desta complacência nos indivíduos, nas famílias e nas economias nacionais é alarmante. Espera-se que a pesquisa translacional no binômio diabete-gravidez seja implementada em centros de excelência tanto de pesquisa básica como aplicada e complementada por estudos clínicos multicêntricos, conduzidos de forma pragmática para aumentar o nível de evidência científica com recursos diagnósticos e propedêuticos mais confiáveis / The maternal diabetes constitutes an unfavorable environment for the fetal-placental and embryonic development. It is an important repercussion in modern obstetrics, since it´s associated to an increased risk of neonatal and maternal morbidity and it still is a significant medical challenge. The worldwide diabetes increased level, the increase of diabetes type 2 in reproductive age women and the crossed generation of the intrauterine programation from diabetes type 2 are the bases for the growing interest in the utilization of diabetics experimental samples, with the aim to adquire knowledge about the mechanisms that induce the development alterations at the gestational diabetes. Several studies have showed the benefits of the diabetes prevention, with interventions in the life style, metabolic improvement and control of the cardiovascular risk factor to substantially avoid this disease devastating complications. Despite these findings, the recent revolution in the scientific knowledge and the infinites new therapies for diabetes, there is still a large gap between what was learned through the researches and what is really done in the public, clinical and communitary health. The negative economic impact of this complacency in the people, families and national economies is alarming. It is expected that translational research in diabetes and pregnancy binomial are implemented in centers of excellence, in both basic and applied research, and complemented by multicenter clinical studies, conducted in a pragmatic way to increase the level of scientific evidence with more reliable diagnostic and propaedeutic resources

Orientador: Hamilto Akihissa Yamamoto / Coorientador: José Carlos Sozua Trindade Filho / Coorientador: Eunice Deffune / Banca: Juliany Gomes Quitzan / Banca: Paulo Roberto Kawano / Banca: Wagner José Fávaro / Banca: Renata Aparecida de Camargo Bittencourt / Resumo: A engenharia de tecidos tem se mostrado promissora para o tratamento de lesões e doenças da uretra. No presente estudo, foi demonstrada a caracterização das células de músculo liso de bexiga de coelhos e seu implante em matrizes acelulares de aorta de suínos para reparo de lesão na uretra de coelhos. Aortas de dez suínos foram obtidas, descelularizadas e colocadas em cultura com células de músculo liso provenientes de bexiga de dez coelhos, para servirem como modelo no reparo de tecido uretral. As aortas foram descelularizadas com sodium dodecyl sulfate (SDS) a 0,1% e tiveram seu coeficiente de rigidez testado, cujos resultados demonstraram a mesma resistência antes e depois do processo. As células de músculo liso cultivadas foram caracterizadas por citometria de fluxo com o anticorpo anti-CD90 e por imunocitoquímica usando o anticorpo Anti-Alpha Smooth Muscle Actin (- SMA). Com os resultados da citometria de fluxo excluiu-se a possibilidade da presença de células-tronco mesenquimais ou fibroblastos junto à cultura de células de músculo liso, enquanto que com a imunocitoquímica comprovou-se o perfil das células de músculo liso. A viabilidade das células foi mantida em 99,31% quando em contato com a matriz, demonstrando que o modelo proposto é um excelente biomaterial para uso como scaffold de células. Seu uso na reconstrução de uretra com lesões complexas pode ser considerado com otimismo, podendo resolver problemas relacionados à quantidade insuficiente de tecido na região / Abstract: Tissue engineering has shown promise for treatment in urethras injuries and diseases. In the present study, we demonstrated the rabbits smooth muscle cells of the bladder characterization and their implantation in an acellular porcine aorta for repairing injuries in rabbits urethras. Ten porcine abdominal aortas were obtained and placed in culture with rabbit bladders smooth muscle cells from ten animals to serve as a template for the repair of urethral tissue. The aortas were deccelularized with 0.1% sodium dodecyl sulfate (SDS) and had a coefficient of stiffness test, whose results showed the same resistance before and after the process. The smooth muscle cultured cells were characterized by flow cytometry with anti-CD90 antibody and by immunocytochemistry using Anti-Alpha Smooth Muscle Actin (-SMA) antibody. The results of flow cytometry excluded the possibility of the presence of mesenchymal stem cells or fibroblasts by the smooth muscle cells culture, whereas immunocytochemistry confirmed the profile of smooth muscle cells. When in contact with the matrix, cell viability was maintained at 99.31%, demonstrating that the proposed model is an excellent biomaterial for use as cell scaffold. Its use in urethral complex lesions reconstruction can be seen with optimism and solve problems related to insufficient quantities of urinary tissue / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-22Bitstream added on 2014-06-13T18:46:29Z : No. of bitstreams: 1 murador_p_dr_botfm.pdf: 1737625 bytes, checksum: 382b432b89ced80d3363c6e9187d9d58 (MD5) / A engenharia de tecidos tem se mostrado promissora para o tratamento de lesões e doenças da uretra. No presente estudo, foi demonstrada a caracterização das células de músculo liso de bexiga de coelhos e seu implante em matrizes acelulares de aorta de suínos para reparo de lesão na uretra de coelhos. Aortas de dez suínos foram obtidas, descelularizadas e colocadas em cultura com células de músculo liso provenientes de bexiga de dez coelhos, para servirem como modelo no reparo de tecido uretral. As aortas foram descelularizadas com sodium dodecyl sulfate (SDS) a 0,1% e tiveram seu coeficiente de rigidez testado, cujos resultados demonstraram a mesma resistência antes e depois do processo. As células de músculo liso cultivadas foram caracterizadas por citometria de fluxo com o anticorpo anti-CD90 e por imunocitoquímica usando o anticorpo Anti-Alpha Smooth Muscle Actin (- SMA). Com os resultados da citometria de fluxo excluiu-se a possibilidade da presença de células-tronco mesenquimais ou fibroblastos junto à cultura de células de músculo liso, enquanto que com a imunocitoquímica comprovou-se o perfil das células de músculo liso. A viabilidade das células foi mantida em 99,31% quando em contato com a matriz, demonstrando que o modelo proposto é um excelente biomaterial para uso como scaffold de células. Seu uso na reconstrução de uretra com lesões complexas pode ser considerado com otimismo, podendo resolver problemas relacionados à quantidade insuficiente de tecido na região / Tissue engineering has shown promise for treatment in urethras injuries and diseases. In the present study, we demonstrated the rabbits smooth muscle cells of the bladder characterization and their implantation in an acellular porcine aorta for repairing injuries in rabbits urethras. Ten porcine abdominal aortas were obtained and placed in culture with rabbit bladders smooth muscle cells from ten animals to serve as a template for the repair of urethral tissue. The aortas were deccelularized with 0.1% sodium dodecyl sulfate (SDS) and had a coefficient of stiffness test, whose results showed the same resistance before and after the process. The smooth muscle cultured cells were characterized by flow cytometry with anti-CD90 antibody and by immunocytochemistry using Anti-Alpha Smooth Muscle Actin (-SMA) antibody. The results of flow cytometry excluded the possibility of the presence of mesenchymal stem cells or fibroblasts by the smooth muscle cells culture, whereas immunocytochemistry confirmed the profile of smooth muscle cells. When in contact with the matrix, cell viability was maintained at 99.31%, demonstrating that the proposed model is an excellent biomaterial for use as cell scaffold. Its use in urethral complex lesions reconstruction can be seen with optimism and solve problems related to insufficient quantities of urinary tissue