Submitted by Barroso Patrícia (barroso.p2010@gmail.com) on 2013-03-21T21:06:08Z No. of bitstreams: 1 Tese final isabela.pdf: 19026738 bytes, checksum: 2fd44c6a0db527266480ebdc1ac7ea15 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-21T21:06:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese final isabela.pdf: 19026738 bytes, checksum: 2fd44c6a0db527266480ebdc1ac7ea15 (MD5) Previous issue date: 2011 / A medicina regenerativa busca o reparo de tecidos lesionados, por meio do controle e ampliação da capacidade natural de regeneração dos tecidos. A bioengenharia tecidual óssea insere-se neste contexto e visa à utilização de biomateriais que atuem como arcabouços capazes de regenerar defeitos ósseos de dimensões críticas com a finalidade de restabelecer a função e/ou estética do indivíduo acometido. Com o intuito de se alcançar um incremento do reparo ósseo, produzido localmente pelos biomateriais, quando implantados em defeitos críticos, pode-se instituir uma estratégia de atuação no metabolismo ósseo com o medicamento ranelato de estrôncio, com a associação do efeito local e sistêmico. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de análise histomorfométrica, o potencial osteogênico do ranelato de estrôncio associado a microesferas de hidroxiapatita, juntamente com selante de fibrina, para regeneração em defeito ósseo crítico. Foram utilizados 64 rattus norvegicus da linhagem wistar, albinos, machos, adultos, que receberam via oral diariamente 900 mg/ Kg de ranelato de estrôncio, nos quais se realizou defeito ósseo crítico transfixado de 8,5 mm de diâmetro na região da calvária. Estes animais foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos - grupo controle com administração do ranelato de estrôncio (GCRS) - defeito ósseo sem implantação de biomaterial, apenas com a presença do coágulo sanguíneo; grupo hidroxiapatita com administração de ranelato de estrôncio (GHARS) - defeito ósseo com implantação de microesferas de HA; grupo fibrina com administração de ranelato de estrôncio (GFRS) - defeito ósseo com implantação de fibrina; e grupo hidroxiapatita associado à fibrina (GHAFRS) - defeito ósseo com implantação de microesferas de HA e fibrina; os grupos citados foram comparados com grupos controle-negativo (GC, GHA, GF, GHAF), cujo modelo animal foi similar, porém os animais não receberam o medicamento ranelato de estrôncio. Os animais foram sacrificados aos 15, 45 e 120 dias de pós-operatório e analisados por meio de microscopia óptica e, ainda, os grupos GC e GCRS foram avaliados, no ponto biológico de 120 dias, por microscopia eletrônica de varredura, microscopia eletrônica de transmissão e por espectrometria de energia dispersiva de raios-X. A administração do ranelato de estrôncio promoveu a regeneração parcial do defeito ósseo, sem o restabelecimento do volume ósseo original, com maior percentual de neoformação óssea quando utilizado sem associação com biomateriais; o elemento estrôncio foi incorporado à estrutura do tecido ósseo quando houve a administração do ranelato de estrôncio; as microesferas de HA foram biocompatíveis, atuaram, fundamentalmente, como biomaterial para preenchimento do defeito ósseo, e o seu potencial osteogênico restringiu-se à osteocondutividade; o selante de fibrina mostrou-se eficaz como agente aglutinante e acelerou a maturação óssea quando associado exclusivamente com o ranelato de estrôncio. / Universidade Federal da Bahia, Instituto de Ciências da Saúde

Este trabalho tem por objetivo a obtenção de nanofibras de blendas de policaprolactona (PCL), gelatina (GE), com a adição de hidroxiapatita (HA), através do processo de eletrofiação, a fim de mimetizar a matriz celular nativa (ECM). As nanofibras foram produzidas com o intuito de apresentar boas propriedades térmicas, mecânicas e de superfície, adequadas à utilização na área de engenharia de tecidos ósseos (ETO). Para obtenção de nanofibras com morfologia diferenciada, utilizou-se um coletor estacionário e um tambor rotatório, obtendo materiais com fibras alinhadas ou distribuídas aleatoriamente. Devido as características hidrofílicas das nanofibras de gelatina, foi efetuada a reticulação química nas nanofibras com este polímero após eletrofiação, utilizando o agente de reticulação hidrocloreto de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC). A reticulação mostrou-se efetiva, impedindo a dissolução das nanofibras em ambiente aquoso, comprovado pelo teste de intumescimento e solubilidade. As matrizes, de maneira geral, apresentaram dimensões em escala nanométrica, com presença de gotas em sua morfologia, dependendo da composição polimérica. O alinhamento das nanofibras ocasionou uma melhora nas propriedades mecânicas em relação as fibras com orientação aleatória, tornando o material mais rígido e resistente a tração. A eletrofiação de blendas permitiu a obtenção de fibras mais hidrofílicas. As propriedades térmicas demonstraram que as nanofibras produzidas são estáveis para utilização na temperatura de utilização médica. Os testes biológicos demonstram que as nanofibras com estruturas alinhadas e aleatórias obtidas permitiram a proliferação celular e a diferenciação osteogênica, apresentando potencial de serem utilizadas na engenharia de tecidos ósseos. / This work aims to obtain nanofibers by electrospinning technique with blends of polycaprolactone (PCL), gelatin (GE), and with the addition of hydroxyapatite (HA), in order to mimic a native cell matrix (ECM). Nanofibers were fabricated with the purpose of presenting good thermal, mechanical and surface properties, to be used in the area of bone tissue engineering (ETO). To obtain nanofibers with differentiated morphology, we used a stationary collector and a rotatory drum collector, obtaining materials with aligned or randomly fibers distributed. Due to the hydrophilic characteristics of the gelatin nanofibers, chemical crosslinking was performed in electrospun fibers containing this polymer with 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC). The crosslinking was effective, preventing the dissolution of the nanofibers in an aqueous environment, been proved by the swelling test and solubility. The scaffolds, in general, presented dimensions in nanometric, with presence of beads in their morphology, depending on the polymer composition. The alignment of the nanofibers caused an improvement in the mechanical properties compared with fibers in random orientation, making the material more rigid and resistant to traction. Electrospun blends allowed the production of more hydrophilic fibers. Thermal properties have demonstrated that the nanofibers produced are stable for use at the temperature of medical use. Biological assays demonstrate that both random and aligned nanofibers structures, allowed the cell proliferation and osteogenic differentiation, presenting potential to be used in tissue engineering.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-24T22:50:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 282119.pdf: 42799348 bytes, checksum: 15c822b837dc6765ee9d22798df44aba (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar histologicamente a influência de: dois enxertos ósseos bovinos, Orthogen (Baumer) e Bio-Oss®; dois polímeros compositos, PLGA (Boehringer Ingelheim) e PLGA+HA, (HA Genius-Baumer), osso autógeno e controle negativo de coágulo, relacionando-os a presença de tecido inflamatório, materiais de enxerto, osso neoformatado, tecidos conjuntivos e adiposos. Materiais e métodos: 21 coelhos da raça Nova Zelândia foram utilizados neste trabalho. Cada animal recebeu 6 enxertos sendo dois grupos de controle colocados no fêmur direito e esquerdo. Os coelhos sofreram eutanásia em 3 etapas nos 15, 30 e 60 dias pós-opreratórios. As amostras retiradas dos animais foram processadas para microscopia óptica e coradas pela técnica da hematoxilina e eosina (HE). A análise quantitativa foi feita em cortes nas lâminas seguindo o procedimento para análises estererológicas segundo os parâmetros estipulados por Mandarin-de-Lacerda (2003). Os resultados obtidos pela metodologia empregada indicaram que a regeneração óssea dos enxertos empregados foram superiores quando comparados ao coágulo. Conclusão: Todos os substitutos ósseos tiveram melhor resultado em relação ao controle negativo.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T06:42:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 280715.pdf: 95173377 bytes, checksum: abb1f8730c74816c3f032e641555b88c (MD5) / Cirurgias para reconstrução de tecido mole que utilizam material autógeno aumentam a morbidade e o riscos de complicações com a segunda área cirúrgica. Como alternativa para eliminar esses inconvenientes, a engenharia tecidual busca encontrar um arcabouço ideal para carrear células e fatores de crescimento responsáveis pela criação de tecidos em ambiente in vitro. Dessa forma o objetivo deste estudo é analisar quatro membranas absorvíveis como potencial arcabouço para a engenharia de tecidos. Foram utilizados fibroblastos humanos gengivais provenientes de cultura primária. Quatro membranas foram utilizadas: Osseoguard®, Genderm®, ácido poli(ácido lactico-co-glicólico) (PLGA) e ácido poli(ácido lactico-co-glicólico) associado com hidroxiapatita (PLGA+HA). Testes de proliferação, análise da degradação através da microscopia eletrônica de varredura (MEV), teste de viabilidade celular (MTT) e análise do pH do meio de cultura foram os métodos utilizados para avaliar as membranas. Os índices de proliferação não foram estatisticamente significativos entre grupos, contudo todas as membranas possibilitaram a proliferação celular. A análise do MEV mostrou que as membranas com base polimérica (PLGA e PLGA + HA) apresentam características mais apropriadas a arcabouços para engenharia tecidual. Os níveis de viabilidade celular diminuíram e os níveis de pH foram similares para todos os grupos exceto o PLGA que se apresentou ácido. A membrana de PLGA + HA é a que apresenta melhores características biológicas e estruturais para funcionar como arcabouço para a engenharia de tecidos. / Soft tissue reconstruction using autogenous material increases morbidity and risk of complications with the second surgical area, the donor site. As an alternative to eliminate these drawbacks, tissue engineering seeks to find an ideal scaffolds to wash cells and growth factors that are responsible for a tissue environment fabrication in vitro. Thus the aim of this study is to analyze four absorbable membranes as a potential scaffold for tissue engineering. Human gingival fibroblasts (HGF) from primary cell culture were used. Four types of bioabsorbable membranes were used as cell carrier: OsseoGuard®, Genderm®, poly (lactic-co-glycolic) acid (PLGA) and poly (lactic-co-glycolic) acid associated with hydroxyapatite (PLGA+HA). Proliferation assays, degradation analysis by scanning electron microscopy (SEM) cell viability assay (MTT) and pH analysis of the culture mediums were used to evaluate the membranes. The proliferation index was not statistically significant between groups, yet all the membranes allowed cell proliferation. The SEM analysis showed that the membranes based on polymers (PLGA and PLGA HA) have more appropriate scaffolds characteristics for tissue engineering. The level of cell viability decreased and the pH levels were similar for all groups except that PLGA. The PLGA+HA membrane has the best biological and structural functions as a scaffold for tissue engineering.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-12-12T03:24:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 351818.pdf: 2993488 bytes, checksum: 9d8c4cbb7914919274949d0f0ad99bbb (MD5) Previous issue date: 2017 / O objetivo deste estudo foi avaliar as propriedades físico-mecânicas dos arcabouços porosos de PLGA e cerâmica bifásica. Os arcabouços foram fabricados a partir do método de evaporação do solvente e lixiviação de partículas de sacarose, resultando em 70% de porosidade. As proporções produzidas foram 50/50, 60/40 e 40/60 (PLGA/HA+ß-TCP) com colágeno (G1, G2, G3) e sem impregnação de colágeno (G4, G5, G6). As amostras foram analisadas no MEV para caracterizar a superfície, estrutura e interconectividade dos poros. Para avaliar a hidrofilia dos grupos foi utilizado um teste de molhabilidade. Por fim, o ensaio de compressão para avaliar as propriedades mecânicas. Como grupo controle foi utilizado um enxerto xenógeno inorgânico (BioOss Block®, Geistlich, Suíça). As imagens do MEV revelaram que a estrutura tridimensional apresenta porosidade interconectada, cujos poros possuem tamanho e morfologia semelhantes à sacarose, que foi utilizada como material porogênico. Nos grupos sem colágeno, houve a presença de partículas cerâmicas separadas da matriz polimérica. A presença do colágeno na superfície provocou um aumento nas propriedades mecânicas e na molhabilidade deixando-a muito semelhante ao controle. A proporção polímero/cerâmica não influenciou nos valores obtidos de resistência à compressão e módulo de elasticidade. A impregnação de colágeno tipo 1 na estrutura dos arcabouços fez com que estes se tornassem mais hidrofílicos e provocou um desempenho mecânico melhor quando comparado com os que não receberam o tratamento.<br> / Abstract : The objective of this study was to evaluate the physical-mechanical properties of the porous scaffolds of PLGA and biphasic ceramic. The scaffolds were fabricated by solvent casting and particulate leaching technique using sucrose particles as porogen, resulting in 70% porosity. The proportions produced were 50/50, 60/40 and 40/60 (PLGA / HA + ß-TCP) with collagen (G1, G2, G3) and without collagen (G4, G5, G6) impregnation. The samples were analyzed in SEM to characterize the surface, structure and interconnectivity of the pores. A wettability test was used to evaluate the hydrophilicity of the groups. Finally, the compression test to evaluate the mechanical properties was performed. An inorganic xenogen graft (BioOss Block®, Geistlich, Switzerland) was used as the control group. SEM images revealed that the three-dimensional structure presented interconnected porosity whose pores had a size and morphology similar to sucrose, which was used as a porogenic material. In the groups without collagen, ceramic particles were detached from the polymeric matrix. The presence of collagen on the structure caused an increase in wettability and mechanical properties leaving it very similar to the control group. The polymer/ceramic ratio did not influence the values of compressive strength and modulus of elasticity. The impregnation of type 1 collagen to the structure of the scaffolds made them more hydrophilic and resulted in a better mechanical performance when compared to those who did not receive the treatment.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-10-20T03:11:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334973.pdf: 2040826 bytes, checksum: 65382a521fa32fa2b68528aeb8e508c3 (MD5) Previous issue date: 2015 / Terapias regenerativas têm despertado o interesse no campo da Odontologia, acarretando uma mudança de paradigma ao empregar abordagens regenerativas para o tratamento das doenças ou agravos que afetam o dente.A polpa dental é caracterizada por apresentar uma população variada de células como odontoblastos, fibroblastos, células de defesa, microvasos e terminações nervosas sensoriais e simpáticas pós-ganglionares. As fibras nervosas são responsáveis pela homeostase do tecido, estando relacionadas com a manutenção do tônus vascular e condução de estímulos nociceptivos, dentre outros. A prerrogativa da engenharia tecidual é formar um tecido idêntico ou ao menos que apresente características morfológicas e funcionais muito semelhantes àquelas do original,assim, a engenharia de tecido pulpar deve formar um tecido inervado capaz de regular as estrutrasneoformadas. Deste modo, o objetivo geral deste estudo foi estudar a possibilidade de desenvolver polpas dentais inervadas utilizando o Modelo de Fatia Dental/Arcabouço para Engenharia de Tecido Pulpar. Para tanto, 3º molares hígidos tiveram a sua polpa removida e a cavidade pulpar preenchida com um arcabouço polimérico altamente poroso, onde foram semeado células-tronco de polpa dental (SHED).Os conjuntos fatia dental/arcabouços/SHED foram implantados bilateralmente no tecido subcutâneo do dorso de camundongos, decorridos 21 a 65 dias de implantação no tecido subcutâneo do dorso de camundongos, a imunolocalizaçãodos elementos nervososfoi realizada por imuno-histoquímica para ß tubulina III, NCAMe P75. Foi observada a formação de um tecido semelhante à polpa dental, com presença de terminações nervosas livres e organizadas em feixes nervosos. A organização fascicular foi proporcional com o aumento de tempo avaliado. Foi possível desenvolver polpa inervada utilizando o Modelo Fatia Dental/ Arcabouço para engenharia de tecido pulpar, sendo que o processo de neurogênese ocorreu de maneira espontânea.<br> / Abstract : Regenerative therapies have increased interest in the field of dentistry, causing a paradigm shift when using regenerative approaches for the treatment of diseases or injuries that affect the tooth. The dental pulp is characterized by presenting a diverse population of cells as odontoblasts, fibroblasts, immune cells, microvessels and sensory nerve endings and postganglionic sympathetic. The nerve fibers are responsible for the homeostasis of the tissue, being related to the maintenance of vascular tone and driving nociceptive stimuli, among others. The prerogative of tissue engineering is to form a fabric or at least equal to present morphological and functional characteristics very similar to those of the original, thus, the pulp tissue engineering must form a tissue innervated able to regulate the newly formed estrutras. Thus, the aim of this study was to evaluated the possibility of developing innervated dental pulps through the ?The tooth slice/scaffold model for Dental Pulp Tissue Engineering?. Third molars had their pulp tissue removed and the pulp chamber filled with a highs porous polymer scaffold and seeding with Stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED). The tooth slice/scaffolds/SHED were implanted bilaterallyin the subcutaneous tissue of the dorsum. The detection of neural elements was performed by immunohistochemical technique using the anti ß-tubulin III, anti-P75 and anti-NCAM. It was observed the formation of a similar material to the dental pulp in the presence of free nerve bundles and arranged in nerve endings. The proportional fascicular organization was evaluated with increasing time. We conclude that occurs a spontaneous neurogenesis process in dental / scaffolds seeded with (SHED).

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-07-11T04:18:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 343728.pdf: 3217478 bytes, checksum: 53d18fac48e15e2acaabf0600e16f348 (MD5) Previous issue date: 2016 / Os disrafismos espinhais são graves malformações da medula espinhal que desorganizam o tecido nervoso medular e o mantém em comunicação com meio externo, incorrendo em inúmeras limitações aos pacientes acometidos, incluindo paralisias e hidrocefalia. O tratamento deve ser cirúrgico e precoce após o nascimento, porém a cirurgia pré-natal traz melhores resultados. Quando realizadas por técnica endoscópica, as correções demandam a utilização de biomateriais para o fechamento dos defeitos dorsais. A nanocelulose bacteriana (BNC) apresenta grande potencial em diversas aplicações biomédicas, sendo atualmente também empregada para a correção cirúrgica intrauterina dos disrafismos. No entanto, quando a sutura da pele não é possível, há necessidade da associação da celulose com materiais que sejam impermeáveis à água. Neste ensejo, foi concebido um novo biocompósito, nanopolimérico, combinando a BNC com o poli(L-ácido lático-co-trimetileno carbonato) (PLLA/TMC). Os compósitos foram produzidos através da técnica de imersão e evaporação do solvente, e caracterizados quanto a permeabilidade à água, degradação, morfologia, composição química, comportamento térmico, propriedades mecânicas, topografia, grau de molhabilidade, hidratação, ensaio de citotoxicidade com fibroblastos L929 e adesão e proliferação de queratinócitos humanos (HaCaT). Os compósitos de BNC-PLLA/TMC resultaram em finas e homogêneas membranas, cujas matrizes poliméricas, à microscopia eletrônica de varredura (MEV), se demonstraram bastante integradas entre si. Ademais, os compósitos caracterizados foram impermeáveis à água, resistentes, flexíveis e estáveis termicamente. A modificação de uma das suas superfícies acrescentou maior rugosidade e hidrofilicidade. Os ensaios in vitro não demonstraram citotoxicidade para quaisquer das combinações das matrizes poliméricas, enquanto que os estudos de adesão e proliferação de queratinócitos humanos (HaCaT), evidenciaram compatibilidade celular com todos os biomateriais. A adesão celular seguiu um padrão dual: pequenos grupamentos celulares difusamente localizados sobre as membranas de BNC e junto às porções modificadas dos compósitos; e adesão segmentar, de áreas celulares mais amplas e hipercelulares, recorrente nas blendas de PLLA/TMC, nos compósitos originais e nos compósitos modificados de BNC-PLLA/TMC nas suas porções periféricas. Dadas as suas características, e compatibilidade celular, os compósitos desenvolvidos apresentampotencial para a regeneração tecidual da pele, mais especificamente para a correção de disrafismos espinhais no período intrauterino.<br> / Abstract : Spinal dysraphisms are serious malformations of the spinal cord that disrupt the spinal cord tissue and keep it exposed to the external environment, incurring numerous limitations to the patients, including paralysis and hydrocephalus. Treatment should always be surgical, but recently it was found that surgery performed during the prenatal period reported better results than post partum. When done endoscopically, patches and sheets are always necessary for the complete closure of the defects. Bacterial nanocellulose (BNC) has great potential in various biomedical applications, including intrauterine surgical correction of dysraphisms, however, due to the likelihood of cerebrospinal and amniotic fluid leakage, a second patch is usually required to achieve correction. To address this, BNC was combined with poly (L-lactide-co-trimethylene carbonate) (PLLA/TMC), to form a new composite. The composite was produced through dip coating technique, and was studied regarding its permeability to water, polymer degradation, morphology, spectroscopy studies, thermal behavior, mechanical performance, surface roughness, wetting properties, water uptake, cytotoxicity studies with L929 rat fibroblasts as well as adhesion and proliferation studies with human keratinocytes (HaCaT). The BNC-PLLA/TMC composites became thin and homogeneous membranes, whose polymer matrices have proven quite integrated under Scanning Electronic Microscopy. Furthermore, the new composites were characterized as being waterproof, resistant to traction, flexible and thermally stable. The modification of one of its surfaces added greater roughness, hydrophilicity and water up taking capacity to the final membranes. In vitro assays with mouse L929 fibroblasts showed no cytotoxicity for any combinations of the polymer matrices. In vitro adhesion and proliferation studies of human keratinocytes (HaCaT) demonstrated compatibility with all materials. Nonetheless, regarding cellular adhesion, 2 patterns were identified: first, exhibiting small clusters of keratinocytes distributed within most of the BNC membranes and central parts of the modified composites; second, expressing wider and hypercellular areas of cell adherence to the surface of PLLA / TMC blends, to the original composite and to the peripheral portions of the modified BNC-PLLA/TMC composites. These results indicate that the composite developed has great potential for tissue regeneration of the skin, specifically in cases of correction of dysraphisms in the intrauterine period.

Este trabalho tem por objetivo a obtenção de nanofibras de blendas de policaprolactona (PCL), gelatina (GE), com a adição de hidroxiapatita (HA), através do processo de eletrofiação, a fim de mimetizar a matriz celular nativa (ECM). As nanofibras foram produzidas com o intuito de apresentar boas propriedades térmicas, mecânicas e de superfície, adequadas à utilização na área de engenharia de tecidos ósseos (ETO). Para obtenção de nanofibras com morfologia diferenciada, utilizou-se um coletor estacionário e um tambor rotatório, obtendo materiais com fibras alinhadas ou distribuídas aleatoriamente. Devido as características hidrofílicas das nanofibras de gelatina, foi efetuada a reticulação química nas nanofibras com este polímero após eletrofiação, utilizando o agente de reticulação hidrocloreto de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC). A reticulação mostrou-se efetiva, impedindo a dissolução das nanofibras em ambiente aquoso, comprovado pelo teste de intumescimento e solubilidade. As matrizes, de maneira geral, apresentaram dimensões em escala nanométrica, com presença de gotas em sua morfologia, dependendo da composição polimérica. O alinhamento das nanofibras ocasionou uma melhora nas propriedades mecânicas em relação as fibras com orientação aleatória, tornando o material mais rígido e resistente a tração. A eletrofiação de blendas permitiu a obtenção de fibras mais hidrofílicas. As propriedades térmicas demonstraram que as nanofibras produzidas são estáveis para utilização na temperatura de utilização médica. Os testes biológicos demonstram que as nanofibras com estruturas alinhadas e aleatórias obtidas permitiram a proliferação celular e a diferenciação osteogênica, apresentando potencial de serem utilizadas na engenharia de tecidos ósseos. / This work aims to obtain nanofibers by electrospinning technique with blends of polycaprolactone (PCL), gelatin (GE), and with the addition of hydroxyapatite (HA), in order to mimic a native cell matrix (ECM). Nanofibers were fabricated with the purpose of presenting good thermal, mechanical and surface properties, to be used in the area of bone tissue engineering (ETO). To obtain nanofibers with differentiated morphology, we used a stationary collector and a rotatory drum collector, obtaining materials with aligned or randomly fibers distributed. Due to the hydrophilic characteristics of the gelatin nanofibers, chemical crosslinking was performed in electrospun fibers containing this polymer with 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC). The crosslinking was effective, preventing the dissolution of the nanofibers in an aqueous environment, been proved by the swelling test and solubility. The scaffolds, in general, presented dimensions in nanometric, with presence of beads in their morphology, depending on the polymer composition. The alignment of the nanofibers caused an improvement in the mechanical properties compared with fibers in random orientation, making the material more rigid and resistant to traction. Electrospun blends allowed the production of more hydrophilic fibers. Thermal properties have demonstrated that the nanofibers produced are stable for use at the temperature of medical use. Biological assays demonstrate that both random and aligned nanofibers structures, allowed the cell proliferation and osteogenic differentiation, presenting potential to be used in tissue engineering.

Orientador: Elenice Deffune / Coorientador: José Carlos Souza Trindade Filho / Banca: Fernando Gonçalves de Almeida / Banca: Margarida Juri Saeki / Resumo: Levando-se em consideração avanços tecnológicos na área médica, a engenharia de tecidos (ET) surgiu como um capítulo do livro da Medicina Regenerativa a qual se caracteriza pelo desenvolvimento e manipulação de moléculas, células, tecidos, ou órgãos, desenvolvidos em laboratório, para apoiar ou substituir a função de partes do corpo defeituosas ou danificadas. Dentre os principais desafios está a abordagem dos chamados biomateriais ou scaffolds, que atuam como substratos adesivos para as células implantadas, propiciando suporte físico tridimensional e auxílio no crescimento de um tecido organizado, como é o caso do polímero constituído de quitosana. A quitosana é um polissacarídeo derivado da quitina, o qual apresenta propriedades inerentes dos biomateriais, sendo aqui apresentado sob a forma de membrana. Assim, foram aliadas técnicas derivadas da biotecnologia para a viabilização do uso desse biomaterial, in vivo, à demanda existente por alternativas visando restabelecer as funções vesicais para então,posteriormente, se constituir a materialização da Ampliação vesical. Propor o interfaceamento das áreas de urologia e de Engenharia de Tecidos visando à aplicabilidade do scaffold de quitosana em bexiga. Padronizar critérios necessários para o devido emprego da membrana in vivo. Foram produzidos dois grupos de membranas divididos em três subgrupos cada, elencados em função da concentração de ácido usado para diluição do polímero, quantidade de quitosana em gramas e acréscimo ou não de fatores de crescimento de plaquetas, sendo os subgrupos diferenciados pela denominação "Membranas não Dopadas" e "Dopadas". Amostras de células de tecido muscular liso de bexiga foram retiradas de coelhos e submetidas a testes de caracterização por imunocitoquímica (ICQ) e citometria de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Due to medicine technological advances, tissue engineering (TE) has emerged as a Regenerative Medicine chapter, characterized by the development and manipulation of molecules, cells, tissues, and organs, cultivated in laboratory to support or replace body's defective or damaged functions or parts. One of the main challenges is the approach of the biomaterials or scaffolds, responsible to guide and explore living tissue interactions between synthetic materials to optimize processes such as fixation, recognition, and colonization. As adhesive substrates for cells implanted; they provide tridimensional physical support assisting an organized tissue growth. Chitosan polymer is a polysaccharide derived from chitin that demonstrates inherent properties of biomaterials, presented here in a membrane form. Therefore, biotechnological techniques to validate the use of this biomaterial in vivo were allied to the demand for alternatives in order to restore bladder function, instigating bladder augmentation materialization. Propose to interface Urology and TE in order to apply the Chitosan scaffold in bladder. Standardize necessary criteria for the proper membrane use in vivo. Each one of the two groups of membranes produced was divided into three subgroups, listed according to the addition or not of Platelet Growth Factors. They were called "doped membranes" and "no doped membranes", respectively. Rabbit's bladder smooth muscle cells samples were removed and characterized by immunocytochemistry (ICC) and flow cytometry (FC) techniques for subsequent implant in the scaffolds. In relation to the membranes, it was proposed a standardized production of the different subgroups; sterilization by the Sterrad® method; adhesion test; evaluation of cellular cytotoxicity using Caspase-3- and Annexin... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2016-12-09T13:52:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-06. Added 1 bitstream(s) on 2016-12-09T13:55:23Z : No. of bitstreams: 1 000870881_20170306.pdf: 367778 bytes, checksum: db82c4998c7d49050765cd4b14882f61 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-03-10T13:07:30Z: 000870881_20170306.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-10T13:08:15Z : No. of bitstreams: 1 000870881.pdf: 6408119 bytes, checksum: a00dbe5b7026255d78fde75fe5e150aa (MD5) / Estruturas tridimensionais (scaffolds) construídas por técnicas de impressão tridimensional vêm ganhando espaço em reconstrução e regeneração de tecidos, pois permitem a fabricação de scaffolds com formas complexas. O objetivo deste trabalho foi caracterizar físico-química e biologicamente matrizes de poli (3-hidroxibutirato) (PHB), confeccionadas por impressão tridimensional via sinterização seletiva a laser (selective laser sinterization - SLS), funcionalizadas com fibroína da seda (FB), apatitas (HA) e/ou peptídeo de crescimento osteogênico (osteogenic growth peptide - OGP), com finalidade de regeneração óssea. Os resultados de caracterização demonstraram que a impressão via SLS produziu scaffolds de PHB com percentual de porosidade de 55,8±0,7% e com poros regulares de 500-700 µm. A adição de FB e HA mantiveram resultados de porosidade semelhantes e aumentaram a taxa de absorção de água do PHB no período inicial de 2 h. A incorporação de FB melhorou a resistência à compressão e o módulo de elasticidade, sendo este também melhorado por FB-HA. Nos ensaios in vitro observou-se uma boa adesão, espraiamento e proliferação celular em todos os grupos. Na avaliação indireta da precipitação de cálcio sobre as amostras, observou-se um melhor resultado no grupo FB-HA, principalmente em 3 dias. In vivo, os grupos experimentais falharam em estimular a osteogênese de contato, entretanto mantiveram a espessura da área de implantação, o que não ocorreu no grupo controle coágulo. Conclui-se que os scaffolds avaliados possuem algumas propriedades favoráveis a aplicação em regeneração óssea, entretanto alguns mecanismos de funcionamento dos mesmos in vivo, principalmente em longo prazo, ainda precisam ser entendidos e melhorados. / Three-dimensional structures (scaffolds) fabricated by three-dimensional printing techniques (3DP), have been widely used in tissues reconstruction and regeneration. The main advantage of that technique is the possibility of manufacturing scaffolds with complex shapes. The aim of this study was to perform physicochemical and biological characterization of three-dimensional matrices of poly (3-hydroxybutyrate) (PHB), made by 3DP via selective laser sintering (SLS), functionalized with silk fibroin (FB), apatites (HA) and / or osteogenic growth peptide (OGP), to favor bone regeneration. The results demonstrated that SLS 3DP produced PHB scaffolds with porosity percentage of 55.8 ± 0.7% with regular pores of 500-700 µm. The addition of HA and FB results in similar porosity and enhanced PHB water absorption rate, at the 2h timepoint. The incorporation of FB improved compressive strength and elastic modulus, which was also improved by FB-HA. In vitro tests showed good cell adhesion, spreading and proliferation in all. In the indirect evaluation of calcium precipitation a better result was observed in FB-HA group mainly in 3 days. In vivo experimental groups failed to stimulate contact osteogenesis. However, the scaffolds preserved the thickness of implantation area, which did not occur in the control clot group. It was concluded that the scaffolds evaluated in this study have some favorable properties for bone regeneration. However some of their action mechanisms in vivo, especially in long-term periods, still have to be better understood.