Orientador: Patrícia Simone Leite Vilamaior / Banca: Marilia de Freitas Calmon Saiki / Banca: Silvia Borges Pimentel de Oliveira / Resumo: A morfogênese prostática do gerbilo inicia-se no 20º dia de vida pré-natal, sendo a ramificação no 1º dia do nascimento e a maturação glandular no final na puberdade. Isto contrasta com a glândula prostática de humanos, a qual tem todo o seu desenvolvimento no período pré-natal. A crisina, um flavonoide encontrado em várias espécies vegetais, como Passiflora coerula, Passiflora naringenina e em altas concentrações no mel (cerca de 5,3 mg/kg) e na própolis (28 g/L), apresenta ação inibitória sobre a enzima aromatase, a qual é responsável por catalisar a conversão de andrógenos em estrógenos. Poucos estudos relatam os efeitos da crisina, principalmente sobre a próstata. Portanto, este trabalho analisou, através de métodos morfológicos, morfométricos, sorológicos e imunoistoquímicos os efeitos da exposição à crisina, durante o período de lactação, sobre a próstata ventral de gerbilos machos adultos. Para isso, três grupos experimentais foram formados: Grupo crisina (CR), as mães receberam por gavagem 50 mg/kg/dia de crisina diluída em óleo de milho durante 14 dias do período de lactação; Grupo controle veículo (CV), as mães receberam óleo de milho no mesmo período de CR; Grupo controle (CO), as mães não receberam tratamento. Os filhotes machos foram eutanasiados com 120 dias de vida. A exposição à crisina no período neonatal não promoveu o desenvolvimento de desordens prostáticas nos gerbilos adultos, entretanto, observaram-se alterações no padrão morfológico da glândula. Assim, podemos afirmar que a crisina atuou como um desregulador endócrino sobre a próstata / Abstract: The morphogenesis prostatic of gerbil initiates from 20th day of prenatal period, the branching begins at the 1st day of birth and its final glandular maturation happen at end puberty. This is contrasts with prostate gland humans, which has all its development occurs in prenatal period. The chrysin a flavonoid foun in many vegetables species, like Passiflora coerula, Passiflora naringenin and in high concentrations in honey (about 5.3 mg / kg) and propolis (28 g / L), shows inhibitory action of the aromatase enzyme activity, which catalyzes the conversion of androgens to estrogens. Few studies have reported the effects of chrysin, especially on prostate. Thus, this study analyzed through morphological, morphometric, serologic and immunohistochemical methods the effects of the chrysin during the lactation period in the ventral prostate of adult male gerbils. For this, three experimental groups were formed. Chrysin group (CR): the mothers received by gavage 50 mg/kg/day of chrysin diluted in corn oil during 14 days of lactation period. Control vehicle group (CV): the mothers received corn oil in the same period CR. Control group (CO), the mothers received no treatment. The male offspring were euthanized at 120 days old. Exposure to chrysin in the neonatal period did not promote the development of prostatic disorders in adult gerbils, however, there were changes in the morphology of the gland. So we can say that chrysin presented endocrine disrupter actions on the prostate / Mestre

Foram estudadas 20 pacientes na menacme portadoras de leiomioma uterino, sintomáticas, que utilizaram anastrozol na dose 1 mg/dia por três meses consecutivos. Durante o tratamento acompanhou-se o volume do conjunto úteroleiomiomas com ultra-sonografia, no momento inicial e após um mês e três meses do início do uso da medicação. Além disso, foi observada a evolução da sintomatologia relacionada ao leiomioma (hipermenorréia, dismenorréia e metrorragia), presença de sintomas ligados ao hipoestrogenismo e dosagens séricas de FSH, estradiol, colesterol total e frações, triglicérides e glicose. Obtivemos redução média do volume do conjunto útero-leiomiomas de 9,32% até 31%. Houve diminuição significante dos sintomas relacionados ao leiomioma do útero. Não ocorreram sintomas ligados ao hipoestrogenismo. Não se comprovou modificação significante dos demais parâmetros estudados. Concluiu-se que o inibidor da aromatase, o anastrozol, na dosagem utilizada, foi efetivo na redução volumétrica do conjunto útero-leiomiomas, além de proporcionar significativa melhora dos sintomas relacionados a essa doença, sem alterar, no entanto, os valores de FSH, estradiol, colesterol total e frações, triglicérides e glicose. / We studied 20 patients in menacme with leiomyoma in the uterus, referring symptoms, using anastrozol 1 mg per day for three months. During this treatment we monitored the uterus-leiomyoma volume using ultrasound, at the beginning, one month after and three months after the beginning of the use of the medication. We also observed the leiomyoma symptoms evolution, presence of usual symptoms of hipoestrogenism and seric values of FSH, estradiol, cholesterol and its fractions triglycerides and glicemia. We obtained reduction in uterus-leiomyoma volume of 9.32% in average, in maximum 31%. There was significative reduction in symptoms related with leiomyoma. There were not symptoms of hipoestrogenism. We not observed significative modifications in the other studied parameters. This study concluded that the aromatase inhibitor, anastrozol, in this dosage, is effective in uterus-leiomyomas reduction, cause significative reduction of the symptoms related with this illness, without change the seric dosage of FSH, estradiol, total cholesterol and fractions, triglycerides and glicemia.

Introdução: Miomas são tumores benignos extremamente comuns em mulheres em idade reprodutiva. Constituem um importante problema de saúde pública, uma vez que atualmente o tratamento cirúrgico é o mais eficaz. Os estrógenos parecem ter importante participação no desenvolvimento e crescimento dos miomas. Dentre as hipóteses estudadas para explicar esta influência, destacamse o aumento da concentração de receptores de estrogênio no tecido miomatoso e a habilidade deste de converter androgênios em estrogênio in situ, via aumento da expressão da aromatase. Métodos: Foi realizado um estudo caso-controle. Foram obtidas amostras de miomas e miométrios normais de 14 pacientes em idade reprodutiva que se submeteram a histerectomia por miomatose. Resultados: Foram avaliadas amostras de leiomioma e miométrio normal de 12 pacientes. Não foi encontrada diferença estatisticamente significativa entre a expressão protéica dos receptores REα, REβ e da aromatase (P= 0,239, P = 0,695 e P = 0,203, respectivamente). Conclusão: Não foi encontrada diferença estatisticamente significativa na expressão protéica dos receptores de estrógeno alfa e beta e na expressão protéica da aromatase. Os estudos realizados até o momento em relação a este assunto são controversos e o assunto está longe de ser esclarecido. / Introduction: Leiomyomas are common benign tumors of the female reproductive tract. They are a major public health problem since nowadays surgical treatment is the most effective. Evidence suggests that estrogens regulate cell proliferation and myoma growth. This estrogen-mediated effect might be due to different amounts of estrogen receptors (ERα and ERß) in normal and myoma tissues and overexpression of aromatase P450 in myomas, which is responsible for conversion of androgens to estrogens in situ. Methods: Case-control study. Samples were collected from 14 premenopausal women admitted for abdominal hysterectomy due to fibroids. Results: We analyzed samples from myoma and normal myometrium from 12 patients. The protein expression of ERα, ERβ and aromatase had no statistical difference between leiomyoma and normal myometrium (P = 0.239, P = 0.695 and P = 0.203, respectively). Conclusions: The protein expression of ERα, ERβ and aromatase was similar in leiomyoma and normal myometrium. Studies accomplished so far reveal conflicting data and this subject still needs to be elucidated.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Atualmente, existe uma grande possibilidade de associaÃÃo entre as Ãreas de genÃtica quantitativa e de genÃtica molecular. Isto pode causar importante impacto na seleÃÃo de ovinos, com o estabelecimento de eficientes critÃrios de seleÃÃo para produÃÃo de carne. Com isso, os objetivos deste trabalho foram: verificar polimorfismos nos genes GDF9, Calpastatina e Aromatase (CYP19); verificar a freqÃÃncia de variantes alÃlicas do tipo SNP nestes genes; verificar os efeitos destas variantes sobre caracterÃsticas produtivas e reprodutivas de ovinos de uma populaÃÃo multirracial; estimar os parÃmetros genÃticos e os valores genÃticos destas caracterÃsticas, nesta populaÃÃo; verificar o efeito da inclusÃo do genÃtipo para estes genes nos modelos para estimativas de parÃmetros genÃticos e verificar o efeito do genÃtipo para estes genes sobre os valores genÃticos estimados. O gene GDF9 à um gene candidato relacionado com o fenÃtipo de alta prolificidade. O gene da Calpastatina possui importÃncia na produÃÃo de animais de corte, por està relacionado ao crescimento e a qualidade da carne. O gene da aromatase à um candidato afetando o desempenho produtivo e reprodutivo, pelo seu importante papel no metabolismo dos hormÃnios esterÃides. O polimorfismo do tipo (SNP) do gene CYP19 foi investigado pela tÃcnica PCR-RFLP em uma amostra de 133 animais de diversos grupos genÃticos de ovinos de corte. Foram estimadas as freqÃÃncias alÃlicas e genotÃpicas de polimorfismos deste gene e investigado o efeito destas variantes sobre caracterÃsticas de crescimento, reprodutivas e de habilidade materna, utilizando o procedimento GLM do software SAS. As caracterÃsticas estudadas foram peso ao nascer (PN), peso ao desmame (PD), peso ao abate (PA), peso a um ano de idade (P1), ganho de peso mÃdio diÃrio do nascimento ao desmame (Gn_d), ganho de peso mÃdio diÃrio do desmame ao abate (Gdes_abat), ganho de peso mÃdio diÃrio do desmame a um ano de idade (Gdes_ano), idade ao primeiro parto (IPP), intervalo de partos (IP), perÃodo de gestaÃÃo (PG), dias para o parto (DP), peso total de crias nascidas por matriz por parto (PTCN) e peso total de crias desmamadas por matriz por parto (PTCD). ParÃmetros genÃticos e valores genÃticos foram estimados utilizando o mÃtodo da MÃxima VerossimilhanÃa Restrita Livre de Derivadas (DFREML). Foi avaliado o efeito da inclusÃo do genÃtipo para o gene da aromatase nos modelos para estimativas de parÃmetros genÃticos. Foi verificado o efeito do genÃtipo sobre os valores genÃticos estimados. NÃo foi possÃvel genotipar os animais para os genes GDF9 e Calpastatina, devido a dificuldades de padronizar as reaÃÃes. Assim, os animais foram genotipados apenas para o gene da aromatase. Na amostra estudada para o gene da aromatase, nÃo foram observados indivÃduos com genÃtipo AA. As freqÃÃncias para os genÃtipos AB e BB foram 0,65 e 0,35, respectivamente. A freqÃÃncia alÃlica diferiu entre os grupos genÃticos estudados. O gene da aromatase apresentou influÃncia sobre a maioria das caracterÃsticas estudadas, havendo diferenÃas no padrÃo desta influÃncia, de acordo com o grupo genÃtico considerado. As herdabilidades diretas estimadas foram 0,21, 0,25, 0,52, 0,39, 0,24, 0,20, 0,21, respectivamente, para PN, PD, PA, P1, Gn_d, Gdes_abat e Gdes_ano, e 0,01, 0,06, 0,14, 0,06, 0,20 e 0,11, respectivamente, para IPP, IP, PG, DP, PTCN e PTCD. CorrelaÃÃes genÃticas positivas foram estimadas entre os pesos corporais. A correlaÃÃo genÃtica entre Gn_d e Gdes_abat foi de 0,37 e entre Gn_d e Gdes_ano foi de 0,55. CorrelaÃÃes genÃticas negativas foram estimadas entre IPP com IP e PG. PTCN apresentou correlaÃÃo genÃtica de 0,52 com PTCD. O uso da informaÃÃo do genÃtipo dos animais para o gene da aromatase melhorou o ajuste dos modelos de anÃlises genÃtica sob metodologia BLUP. Os indivÃduos com genÃtipo AB apresentaram superioridade genÃtica em relaÃÃo Ãqueles de genÃtipo BB para a maioria das caracterÃsticas estudadas. Pode se concluir que o uso da seleÃÃo assistida por marcadores permitirà o aumento da eficiÃncia da seleÃÃo atualmente em prÃtica com o uso das metodologias tradicionais de genÃtica quantitativa / Nowadays, there is great possibility of association between quantitative and molecular genetics. An important impact would be expected in the sheep selection, with the establishment of efficient criteria for meat production selection. The aims of this work were to verify polymorphisms in GDF9, Calpastatine and Aromatase (CYP19) genes; to verify the frequencies of SNP allelic variants in these genes; to verify the effects of these variants on productive and reproductive traits in a multiracial sheep population; to estimate genetic parameters and breeding values of these traits in this population; to verify the effect of genotype of these genes on models to estimate the genetic parameters and to verify the effect of genotype for these genes on estimated breeding values. GDF9 gene is a candidate related to phenotype of high prolificacy. The calpastatine gene has importance on production of meat animals, as it is related to growth and meat quality. Aromatase gene is a candidate affecting the productive and reproductive performance, by its important role in the steroid hormone metabolism. SNP polymorphism of CYP19 gene was investigated by PCR-RFLP technique in a sample of 133 animals from several breed groups of meat sheep. Allelic and genotypic frequencies were estimated for this polymorphism and the effect of these variants on growth,reproductive and maternal traits were investigated, using GLM procedure of SAS software. The studied traits were birth weight (PN), weaning weight (PD), slaughter weight (PA), yearling weight (P1), weight gain from birth to weaning (Gn_d), weight gain from weaning to slaughter (Gdes_abat), weight gain from weaning to yearling (Gdes_ano), age at first lambing (IPP), lambing interval (IP), gestation length (PG), lambing date (DP), total weight of lambs born for female for lambing (PTCN) and total weight of weaned lambs for female for lambing (PTCD). Genetic parameters and breeding values were estimated by Derivative Free Restricted Maximum Likelihood (DFREML) method. The effect of genotype inclusion in analysis models for estimation of genetic parameters was evaluated. The effect of genotype on estimated breeding value was verified. It was not possible to verify the genotype of the animals for GDF9 and Calpastatine genes due the difficulties on the reactions standardizations. So the animals were genotyped only for aromatase gene. In studied sample, it is not observed animals with AA genotype. The frequencies for AB and BB were 0.65 and 0.35,respectively. The allelic frequency did differ among studied breed groups. The aromatase gene presented influence on most studied traits, with difference in this influence according to breed group. The direct heritabilities were 0.21, 0.25, 0.52, 0.39, 0.24, 0.20, 0.21, respectively, for PN, PD, PA, P1, Gn_d, Gdes_abat and Gdes_ano, and 0.01, 0.06, 0.14, 0.06, 0.20 and 0.11, respectively, for IPP, IP, PG, DP, PTCN and PTCD. Positive genetic correlations were estimated among corporal weights. Genetic correlation between Gn_d and Gdes_abat was 0.37 and between Gn_d and Gdes_ano was 0.55. Negative genetic correlations were estimated between IPP with IP and PG. PTCN presented genetic correlation of 0.52 with PTCD. The use of information of genotype of aromatase gene increased the efficiency of models for genetic analyses by BLUP methodology. The animals with AB genotype presented genetic superiority for most studied traits in relation to those with BB genotype. It is possible conclude that the use of marked assisted selection will permit increase the efficiency of selection today in practice with the use of traditional quantitative genetic methodologies

Aromatase is the only enzyme that converts androgens into estrogens, which is found in the brain, testes and ovaries. In teleosts, brain aromatase is exclusively expressed in radial glial cells, which are the abundant stem-like non-neuronal progenitors involved in neuroendocrine functions and neurogenesis in the central nervous system. With little information about radial glial cell regulation by neurotransmitters and neurohormones available, the overall goal of this thesis is to investigate the interactions between dopamine neurons and radial glial cells in the adult goldfish (Carassius auratus) forebrain. Immunocytochemistry and confocal imaging revealed a close anatomical relationship between dopamine neurons and radial glial cells along the ventricular surface in the telencephalon. Transcriptional regulation of brain aromatase by dopamine indicated a brain region-specific pattern and suggested the involvement of other regulators in the goldfish forebrain. A novel goldfish primary radial glial cell culture model was established and characterized for brain aromatase regulation studies. Pharmacological studies demonstrated that specific activation of dopamine D1 receptors up-regulates brain aromatase through a cAMP-dependent molecular mechanism, which can be enhanced or attenuated by the product of aromatase action, 17β-estradiol. Proteome profiling and the response following treatment with the specific dopamine D1 receptor agonist SKF 38393 revealed that proteins involved in cell proliferation and growth are regulated through small molecules- and transcription factors-mediated signaling pathways. Analysis of genes related to radial glial cell and dopamine neuron functions demonstrated that glial activation and dopamine neuron recovery are estrogen-dependent in a neurotoxin MPTP-induced goldfish model of Parkinson’s disease. This thesis illustrates novel molecular mechanisms underlying brain aromatase regulation as well as radial glial cell function regulation and provides a framework for future investigation of existing endocrine disruptors modulating neurosteroid levels in the teleost brain.

No / Peripheral intracrine sex steroid synthesis from adrenal precursors dehydroepiandrosterone (DHEA) and DHEA-sulfate has evolved in humans. We sought to establish if there are differences in intracrine, paracrine, and endocrine regulation of sex steroids by primary cultures of human skin epidermal keratinocytes and dermal fibroblasts. Microarray analysis identified multifunctional genes modulated by steroids, quantitative RT-PCR (qRT-PCR) mRNA expression, enzymatic assay aromatase activity, scratch assay cell migration, immunocytochemistry α-smooth muscle actin (α-SMA), and collagen gel fibroblast contraction. All steroidogenic components were present, although only keratinocytes expressed the organic anion organic anion transporter protein (OATP) 2B1 transporter. Both expressed the G-protein-coupled estrogen receptor (GPER1). Steroids modulated multifunctional genes, up-regulating genes important in repair and aging [angiopoietin-like 4 (ANGPTL4), chemokine (C-X-C motif) ligand 1 (CXCL1), lamin B1 (LMNB1), and thioredoxin interacting protein (TXNIP)]. DHEA-sulfate (DHEA-S), DHEA, and 17β-estradiol stimulated keratinocyte and fibroblast migration at early (4 h) and late (24–48 h) time points, suggesting involvement of genomic and nongenomic signaling. Migration was blocked by aromatase and steroid sulfatase (STS) inhibitors confirming intracrine synthesis to estrogen. Testosterone had little effect, implying it is not an intermediate. Steroids stimulated fibroblast contraction but not α-SMA expression. Mechanical wounding reduced fibroblast aromatase activity but increased keratinocyte activity, amplifying the bioavailability of intracellular estrogen. Cultured fibroblasts and keratinocytes provide a biologically relevant model system to investigate the complex pathways of sex steroid intracrinology in human skin.—Pomari, E., Valle, L. D., Pertile, P., Colombo, L., and Thornton, M. J. Intracrine sex steroid synthesis and signaling in human epidermal keratinocytes and dermal fibroblasts.

Os fatores de crescimento vascular endotelial (VEGF) e o fibroblástico básico (bFGF) são reguladores importantes do desenvolvimento e função placentária. Os efeitos destes na expressão da enzima esteroidogênica aromatase P450 (P450arom) na placenta bovina em diferentes estágios gestacionais (90 a 270 dias) foram avaliados através de imunocitoquímica. Além disso, comparou-se a influência destes entre células placentárias de bovinos clonados e não clonados aos 270 dias. A aromatase P450 foi localizada exclusivamente no citoplasma das células trofoblásticas gigantes e sua expressão foi menor aos 150 dias de gestação, em relação às demais idades (p<0,05). O VEGF (50 ng/ml) influenciou significativamente a expressão da P450arom aos 150 e 270 dias, enquanto o bFGF (10 ng/ml) foi efetivo em estimular essa expressão particularmente no final da gestação (270 dias). Os dois fatores combinados (bFGF+VEGF) inibiram a expressão da P450arom no terço inicial (90 dias), mas, por outro lado, estimularam-na aos 150 e 270 dias (p<0,05). Nos clones, a expressão da P450arom, nos grupos controle e VEGF, foi semelhante a dos animais não clonados aos 270 dias de gestação, porém, o bFGF e os dois fatores combinados inibiram-na significativamente (p<0,05). Em todos os grupos analisados, a expressão da P450arom apresentou característica ascendente em função dos dias de cultivo, atingindo concentração máxima após 96 horas de incubação. Assim, o presente estudo demonstrou efeitos distintos e estágio-específicos dos fatores de crescimento bFGF e VEGF na secreção de estrógenos na placenta bovina via modulação da expressão da aromatase P450 in vitro. Conclui-se que estes fatores de crescimento agem como potentes moduladores de enzimas esteroidogênicas e que, sob as condições de cultivo estabelecidas, as células placentárias de bovinos clonados apresentam padrão de resposta distinto quando comparadas com células de bovinos não clonados de mesma idade gestacional. / Vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) are important regulators of placental development and function. Their effects on the steroidogenic enzyme aromatase P450 (P450arom) expression from bovine placenta at different gestational stages (90 - 270 days) were evaluated by immunocytochemistry. Moreover, we compared the effects of these growth factors on P450arom expression between cloned and non cloned bovine placental cells. P450arom was localized exclusively in trophoblast giant cells cytoplasm, and its expression reached lowest levels at day 150 of gestation in comparison to the remaining evaluated gestational stages. VEGF (50 ng/mL) influenced significantly P450arom expression at days 150 and 270, whereas bFGF (10 ng/mL) was effective in stimulating P450arom expression particularly during late gestation (day 270). The two factors combined (bFGF+VEGF) inhibited P450arom expression during early gestation (day 90), but, in contrast, stimulated it at days 150 and 270 of pregnancy (P<0.05). In cloned bovine placental cells, P450arom expression was similar to non-cloned cells in the control and VEGF groups, however, bFGF and both factors together inhibited it significantly (P<0.05). In all groups analyzed, P450arom expression presented rising pattern over the duration of the culture, reaching maximal values at 96 hours of incubation. Thus, the present study demonstrated distinct and stage-specific effects of these growth factors on bovine placenta P450arom expression in vitro. We concluded that these growth factors act as potent steroidogenic enzymes regulators, and, under the established culture conditions, placental cells from cloned bovines presented distinct answer pattern compared to non cloned placental cells at the same gestational stage.

O letrozol é usado como terapêutico em desordens reprodutivas provocadas pelos altos níveis de estrógenos. A enzima citocromo P450 aromatase biossintetiza estrógenos a partir dos andrógenos em tecidos com capacidade esteroidogênica, como o cérebro, testículo e ovário. O objetivo do nosso estudo foi avaliar se o letrozol afeta o desenvolvimento das principais vias de controle reprodutivo de preás machos e fêmeas. Para tanto, consideramos o ganho de peso corporal, do testículo, do ovário e do cérebro, a progressão morfológica da espermatogênese e da foliculogênese, bem como a atividade enzimática da citocromo P450 aromatase nesses tecidos, comparado-os entre os grupos experimentais de machos e fêmeas. Os preás receberam 0,01 g/kg-1 de letrozol diluído, via oral, semanalmente, até as idades de 30, 45, 90 e 120 dias. O letrozol aumentou o ganho de peso corporal, das gônadas e do cérebro. Também, prejudicou a formação do epitélio germinativo testicular e estratificou o epitélio de revestimento do ovário. Ainda, o inibidor pode alterar os campos neurais relacionados às zonas de aromatização. E alterou os sítios de atuação da aromatase nas gônadas. Concluímos que o uso prolongado do letrozol pode ocasionar efeito anabólico, infertilidade de machos, induzir a displasia ovariana em fêmeas e alterar os sítios de atuação da aromatase. / Letrozole is used as a therapeutic in reproductive disorders caused by high estrogen levels. The enzyme cytochrome P450 aromatase biosynthesizes estrogens from androgens on tissues with steroidogenic capacity such as brain, testis and ovary. The objective of our study was to evaluate whether letrozole affects the development of the main reproductive control pathway of male and female spixs yellow-toothed cavy. For this, we considered body weight, testis, ovary and brain gain, spermatogenesis and folliculogenesis, as well as the enzymatic activity of cytochrome P450 aromatase in these tissues compared to experimental groups of males and females. The cavies received dilute letrozole orally (0,01 g/kg-1), once a week, until 30, 45, 90 and 120 days. Letrozole increased body weight, gonad and brain gain. Also, it impaired the formation of the testicular germinal epithelium and epithelium of ovary. Furthermore, the inhibitor may alter the neural fields related to the aromatization zones and changed the sites of aromatase in the gonads. We concluded that prolonged use of letrozole may result in an anabolic effect, male infertility, induce ovarian dysplasia in females, and alter the sites of aromatase activity.

Analisou-se por métodos quantitativos e qualitativos o testículo de roedores histricomorfos nas fases, pré-púbere, púbere e adulto da Paca (Cuniculus paca), Cutia (Dasyprocta leporina) e Porquinho-da-índia (Cavia porcellus). Mediante as técnicas de microscopia de luz, microscopia eletrônica de varredura, microscopia eletrônica de transmissão e método estereológico. Verificou-se a influência do Letrozol um inibidor da enzima aromatase nas dosagens de 0,15mg\\kg e 1,0 mg\\kg, sobre a morfologia testicular de pacas macho. Este modelo animal apresenta importância, comercial e científica sendo excelente alternativa para a pesquisa, colaborando com o desenvolvimento de investigações vitais ao homem e aos próprios animais. Os resultados desta investigação demonstraram, que os aspectos qualitativos da morfologia testicular do Porquinho-da-índia, Cutia e de Paca foram semelhante nas fases pré-púbere, púbere e adulta. As avaliações quantitativas do Porquinho-da-índia e Cutia realizados mediante o método estereológico permitiram quantificar parâmetros, sem hipóteses de forma, tamanho, orientação ou distribuição das partículas contadas, demonstrando ser um método imparcial e confiável para ser aplicado em estudos de reprodução. Considerando o estrógeno ser essencial para a função da espermatogênese, o efeito do Letrozol no testículo da paca (Cuniculus paca), sugeriu que a inibição da enzima aromatase mediante a utilização de Letrozol na dosagem de 0,15mg \\kg, sugeriu em um aumento no número das células de Sertoli, refletindo sobre as demais células testiculares, comparando com o testículo basal (controle). O testículo tratado (Letrozol) demonstrou epitélio germinativo íntegro, sendo este dado importante para a reprodução. No animal púbere houve um aumento no número de células de- Sertoli, semelhante ao descrito anteriormente. O epitélio seminífero mostrou com alterações morfológicas, tais como proliferação celular, presença de células germinativas com características apoptóticas, e vacúolos e núcleos em picnose. Estes dados poderão ser úteis para o estudo da Síndrome da Disgenesia testicular / Analysis by quantitative and qualitative methods testicular histricomorfs rodents in phases, pre-pubertal, pubertal and adult paca (Cuniculus paca), agouti (Dasyprocta leporina) and guinea-pig (Cavia porcellus). By means of light microscopy techniques, scanning electron microscopy, transmission electron microscopy, stereological method and the influence of an aromatase inhibitor, the Letrozole in dosages of 0.15 mg\\kg and 1.0 mg\\kg on testicular male morphology paca. This animal model has importance, excellent commercial and scientific alternative to research, contributing to the development of vital research to humans and from animals themselves. The results of this research have shown that the qualitative aspects of testicular morphology guinea-pig, Agouti and paca were similar in pre-pubertal, pubertal and adult stages. Quantitative assessments of the guinea-pig and agouti performed by the stereological method allowed quantify parameters, no change of shape, size, orientation or distribution of particles counted, it is proving to be a partial and reliable method to be applied to reproduction studies. Considering the estrogen is essential for the function of spermatogenesis, the effect of Letrozole in the testis of paca (Cuniculus paca), suggested that inhibition of aromatase enzyme through the use of Letrozole in a dosage of 0.15 mg\\kg suggested in an increase in number of Sertoli cells, reflecting on the other testicular cells, comparing the baseline testis (control). The treaty testis (Letrozole) showed intact germinal epithelium, which is important data for reproduction. In pubertal animals there was an increase in the number of de Sertoli cells, similar to that described above. The seminiferous epithelium showed to morphological changes such as cell proliferation, the presence of germ cells with apoptotic features and vacuoles and nuclei picnosis. These data may be useful for the study of testicular dysgenesis syndrome

Afin de mettre en évidence les principaux éléments de la voie androgénique et œstrogénique dans l’épididyme du rat des sables adulte, capturé dans la région de Beni Abbès, en Algérie, l’aromatase, l’œstradiol, les récepteurs des androgènes (RA) et des œstrogènes (REα, REβ, GPR30) ont été recherchés chez des animaux en saison d’activité, en saison de repos sexuel, chez des animaux castrés, castrés puis traités par la testostérone et chez des animaux ayant subi la ligature des canaux efférents. En saison d’activité, les RA sont ubiquitaires, l’aromatase est cytoplasmique par contre l’œstradiol est nucléaire et cytoplasmique. Les REα et le GPR30 sont principalement dans le cytoplasme apical par contre les REβ sont nucléaires. En saison de repos sexuel, les RA, l’aromatase, l’œstradiol, les REα et le GPR30 persistent, cependant, les REβ subissent une translocation cytoplasmique. Chez les animaux castrés, les RA, l’aromatase et l’œstradiol sont réduits par contre les REα persistent avec une faible intensité. Le GPR30 est cytoplasmique et nucléaire. Chez les animaux castrés puis traités, les RA, l’aromatase, l’œstradiol, les REα, les REβ et le GPR30 sont restaurés. Chez les animaux ligaturés, le RA est faiblement conservé uniquement dans l’épididyme proximal. L’aromatase et l’œstradiol sont conservés. Le signal des REα, des REβ et du GPR30 est fortement exprimé dans le noyau et le cytoplasme dans l’épididyme proximal par contre il est fortement exprimé uniquement pour les REα dans l’épididyme distal. Par western blot, les RA, REα, REβ et GPR30 sont de 122, 64, 55 et 55 kDa respectivement. / In order to highlight the main elements of androgen and estrogen pathway in the epididymis of sand rat, captured in Beni Abbès area, in Algeria, androgen receptor (AR), aromatase, estradiol, estrogen receptors (ERα, ERβ and GPR30) were explored in breeding season, in resting season and in animals underwent castration, castration then testosterone treatment and ligation of efferent ducts. In breeding season, AR has a ubiquitous distribution, aromatase is exclusively cytoplasmic and estradiol is nuclear and cytoplasmic. The ERα and GPR30 were distributed with a high intensity in the apical cytoplasm contrarily to ERβ which were nuclear. In resting season, AR, aromatase, estradiol, ERα persist with lower staining. However, ERβ undergo cytoplasmic translocation and GPR30 persist in cytoplasm. In castrated animals, AR, aromatase and estradiol are reduced. ERα persist with low intensity in the apical cytoplasm. GPR30 is distributed in the cytoplasm and the nucleus. In castrated then treated animals, AR is restored; aromatase and estradiol reappear with a cytoplasmic localization for aromatase, nuclear and apical for ERα. ERβ and GPR30 are restored and have a cytoplasmic localization. In ligatured, RA is preserved in the caput, aromatase and estradiol persist caput and cauda. The signal of ERα, ERβ and GPR30 is highly expressed in the nucleus and cytoplasm of caput epididymis and highly expressed of ERα exclusively in cauda. By Western blot, RA, ERα, ERβ and GPR30 are found with molecular weights of 122, 64, 55 and 55 kDa respectively.