A atrofia muscular espinal (AME) é uma das doenças de herança autossômica recessiva mais frequentes, com uma incidência estimada de 1 em cada 10.000 nascidos vivos. A AME se caracteriza por degeneração de neurônios motores na medula espinal, causando fraqueza progressiva de membros e tronco, seguida de atrofia muscular. Os pacientes são classificados em AME tipo I, AME tipo II e AME tipo III, baseado na idade de início dos sintomas e na evolução clínica. As três formas clínicas são causadas por alterações no gene de sobrevivência do neurônio motor (SMN1), que apresenta uma cópia homóloga (SMN2). Em torno de 95% dos pacientes com AME são homozigotos para ausência do exon 7 do gene SMN1, devido a uma deleção desse gene ou à uma conversão para SMN2. A ausência de SMN2 não tem consequências clínicas e é encontrada em aproximadamente 5% dos indivíduos normais, mas o número de cópias de SMN2 modula o fenótipo de pacientes com AME. Devido a este espectro uniforme de mutação, a análise molecular realizada mais frequentemente é a detecção de deleções e conversões dos éxons 7 e/ou 8 dos genes SMN1 e SMN2 nos pacientes com suspeita clínica de AME. Neste trabalho, um protocolo baseado no sistema TaqMan® foi desenvolvido e comparado com a metodologia de PCR-RFLP (restriction fragment length polymorfism) utilizada no laboratório, avaliando o potencial de aplicação no diagnóstico molecular de pacientes com AME. Amostras de DNA de 100 indivíduos com suspeita clínica de AME foram analisadas pelos dois métodos. Amostras suspeitas de apresentar conversão foram analisadas por sequenciamento direto de DNA. Homozigotos para a ausência do exon 7 do gene SMN1 foram identificados em 58 casos (58%), sendo a maioria devido à deleção desse gene. Destes pacientes, 56 foram classificados, de acordo com os critérios diagnósticos revisados para AME, e distribuídos da seguinte forma: 26 (46,4%) do tipo I, 16 (28,6%) tipo II e 14 (25,0%) tipo III. Oito casos de conversão do gene SMN1 para SMN2 foram encontradas entre os pacientes e a distribuição desses casos entre as três formas clínicas foi a seguinte: 4 pacientes do tipo III, 3 do tipo II e 1 do tipo I. Cinco casos de homozigotos para ausência do gene SMN2 foram identificados entre os demais indivíduos. A comparação do método PCR-RFLP com o método baseado no sistema TaqMan® descrito neste estudo mostrou que ambos foram específicos e precisos para essas análises. No entanto, o ensaio TaqMan® foi mais sensível e mais rápido e parece ser um método adequado para o diagnóstico de AME. / Spinal muscular atrophy (SMA) is one of the most frequent autosomal recessive disorder with an estimated incidence of 1 case in each 10,000 live-births. SMA is characterized by degeneration of motor neurons in the spinal cord, causing progressive weakness of the limbs and trunk, followed by muscle atrophy. Patients have been classified in type I–III SMA based on age at onset and clinical course. All three types of SMA are caused by alterations in the survival motor neuron gene (SMN1) that also have a homologous copy named SMN2. About 95% of SMA patients show homozygous absence of SMN1 exon 7 due a deletion of this gene or a conversion into SMN2. The absence of SMN2 is found in about 5% of individuals with no clinical phenotype, but number of SMN2 copies modulates the phenotype of SMA patients. Considering this uniform mutation spectrum, direct molecular genetic testing consists basically of detecting deletions and conversions of exons 7 and 8 of these genes in SMA patients. In this work, we develop a real time PCR TaqMan® method and compared with the most commonly used PCR restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) assay, evaluating the potential application of molecular diagnosis of SMA patients. DNA samples from 100 individuals with clinical features of SMA were analyzed by both methods. Besides, patients DNA samples carrying a conversion event were analysed by direct DNA sequencing. Homozygous for SMN1 exon 7 absence were identified in 58 cases (58%) being the majority due to gene deletion and eight cases of gene conversion. From those, 56 were classified, according to the revised diagnostic criteria, and distributed as follows: 26 (46.4%) SMA type I, 16 (28.6%) SMA type II and 14 (25.0%) SMA type III. In addition, gene conversion was observed in 4 SMA type I patients, 3 SMA type II and 1 SMA type III patient. Among the remaining individuals five samples were found to be homozygous for absence of SMN2 gene. Comparing PCR-RFLP method and the method based on the TaqMan® system describe in this study, we verify that both were precise and specific for these analyses. However, the TaqMan® assay was faster and more sensitive than PCR-RFLP and was shown to be a suitable method for the diagnosis of SMA.

Orientador: Maeli Dal Pai / Resumo: A musculatura esquelética em peixes corresponde mais de 70% do peso corporal total desses animais e o desenvolvimento, crescimento e manutenção do fenótipo muscular envolvem o balanço dinâmico entre as vias de anabolismo e catabolismo muscular, sendo influenciado por diversos fatores, como a disponibilidade alimentar. Períodos com baixa ou nenhuma disponibilidade de alimento é frequentemente observado na natureza e talvez, por isso, garantem aos peixes uma alta capacidade adaptativa para enfrentar períodos de jejum prolongado. Com a realimentação e os níveis metabólicos restabelecidos, o animal pode apresentar um processo de crescimento acelerado, chamado crescimento compensatório. Existe um grande interesse da aquicultura nos processos de crescimento compensatório após jejum, uma vez que bem estabelecido pode gerar diminuição do custo com a alimentação e aumento dos níveis de produção. Uma ferramenta para o estudo do músculo de peixes durante períodos de jejum e realimentação é a proteômica. A proteômica permite identificar o conjunto de proteínas expressas por uma célula ou tecido em determinadas situações e modificações ambientais e possui a vantagem de caracterizar eventos pós-traducionais, algo impossibilitado pela genômica e transcriptoma. Dessa forma, nós testamos a hipótese de que juvenis de pacu (Piaractus mesopotamicus) submetidos a 30 dias de jejum e 30 e 60 dias de realimentação apresentam crescimento compensatório e alterações no perfil de expressão proteico da m... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The skeletal muscle in fish corresponds more than 70% of the total body weight and the development, growth and maintenance of the muscle phenotype involves the dynamic balance between muscle anabolism and catabolism pathways, being influenced by several factors, such as food availability. Periods with low or no food availability are often observed in nature and may therefore, ensure a high adaptive capacity in fish to deal with prolonged fasting periods. With refeeding and metabolic levels restored, the animal may exhibit accelerated growth, called compensatory growth. There is a great interest of aquaculture in the processes of fasting/refeeding, once well-established can generates decrease of the feeding costs and increase of the production levels. An important tool to analyze muscle fish during fasting/refeeding is Proteomics. The proteomics allows to identify a set of proteins expressed by a cell or tissue in some situations and environmental changes and has the advantage of characterizing post-translational events, something impossible to detect by genomic and transcriptome analysis. This way, we tested the hypothesis that juveniles pacu (Piaractus mesopotamicus) submitted to 30 days of fasting and 30 and 60 days of refeeding present compensatory growth and alterations in the protein expression profile of the skeletal muscle. For this, we used two animals groups: Control group (C) fed continuously for 90 days and experimental group (E), submitted to 30 days of fasting fo... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-27 / Introdução: A privação de sono paradoxal (PSP) em ratos é capaz de induzir reduções da massa corporal e de gordura corporal, fato este atribuído ao aumento da secreção de hormônios do eixo hipófise-adrenal. Considerando que a PSP também está associada com diminuição de hormônios anabólicos, a musculatura esquelética também pode ser fortemente influenciada, respondendo com atrofia e podendo prejudicar sua recuperação após determinado dano. Objetivos: Avaliar a massa corporal, perfil de secreção hormonal e a histomorfometria do músculo tibialis anterior (TA) submetido ou não a criolesão. Material e método: Para alcançar os objetivos propostos, foram realizados dois experimentos. No primeiro, 9-10 ratos Wistar machos, com aproximadamente 3 meses de idade foram submetidos a PSP por 96 horas (Grupo PSP) ou ao período de sono por 96 horas (Grupo CTRL). No segundo experimento, 8-9 ratos Wistar machos, com aproximadamente 3 meses de idade foram submetidos ao protocolo de criolesão, para indução da lesão no músculo TA e, subsequentemente, submetidos a: 1) PSP por 96 horas (Grupo D-PSP) ou período de sono por 96 horas (Grupo D-CTRL); ou 2) PSP por 96 horas seguida de 96 horas de sono ad libitum (período de rebote de sono – Grupo D-RB) ou ao período de sono por 192 horas (Grupo D-CTRL-RB). Foram realizadas dosagens de corticosterona e testosterona sanguíneas e análise histomorfométrica do músculo TA sadio e danificado. Resultados: No experimento 1 foi possível observar redução da massa corporal, da massa muscular e da AST do TA no grupo PSP, além de aumento da concentração de corticosterona e diminuição da concentração de testosterona. Já no experimento 2, a histomorfometria do músculo TA sadio e os parâmetros hormonais foram similares ao experimento 1 no grupo D-PSP, enquanto que o TA danificado apresentou redução da sua massa somente no grupo D-PSP. Embora a AST da região danificada tenha sido menor em relação ao TA sadio no grupo D-PSP, a mesma não foi diferente do TA danificado do grupo D-CTRL. Por outro lado, o grupo D-RB apresentou massa e AST do TA maior que o grupo D-PSP, mas menor que os grupos D-CTRL e D-CTRL-RB. Conclusão: A PSP está associada com atrofia do músculo TA e prejuízo da sua capacidade de recuperação após dano induzido por criolesão, possivelmente pelas respostas hormonais associadas a PSP. / Introduction: Paradoxical sleep deprivation (PSD) in rats is able to induce reductions in body mass and body fat, due to increased secretion of pituitary-adrenal axis hormones. Considering that PSD is also associated with a decrease in anabolic hormones, skeletal muscle can also be strongly influenced, causing atrophy damaging its recovery after a lesion. Objectives: To evaluate body mass, hormone profile and tibialis anterior (TA) muscle histomorphometry after cryolesion or no damage. Method: To achieve the proposed objectives, two experiments were conducted. In the first, 3-month-old male Wistar rats (9 to 10 per group) were subjected to 96 hours of PSD (PSD group) or 96 hours of sleep (CTRL group). In the second experiment, 3-month-old male Wistar rats (8 to 9 per group) were first subjected to cryolesion and then divided in the following groups: PSD for 96 hours (Group D-PSD) or sleep for 96 hours (D-CTRL group); or 2) PSD for 96 hours followed by 96 hours of sleep ad libitum (sleep rebound – D-RB group) or sleep for 192 hours (D-CTRL-RB group). Blood corticosterone and testosterone levels and TA muscle histomorphometry were determined, both in damaged and healthy muscles. Results: In experiment 1, we observed reductions in body mass, muscle mass and cross-sectional area of TA in the PSD group, and increased levels of corticosterone and decreased levels of testosterone. In the second experiment, the histomorphometry of the TA not damaged and the hormonal parameters of D-PSD group were similar to experiment 1, while the TA damaged showed decreases in its mass in comparison to DCTRL and D-CTRL-RB groups. Although the cross-sectional area of the damaged area was lower compared to healthy TA on the D-PSD group, it was not different from the damaged TA of CTRL-D group. However, the D-RB group presented the TA mass and AST significantly higher than the PSD-group, but lower than the D-CTRL-RB and D-RB groups. Conclusion: PSD is associated with TA atrophy and impaired ability to recover from damage induced by cryolesion, possibly because of hormonal responses associated with PSD. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2016-05-11T13:01:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tatiane_cozendey_ioc_dout_2015.pdf: 3019290 bytes, checksum: 371f043085e9244f3d5cfd0d103d2470 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / As doenças neurodegenerativas são caracterizadas por morte neuronal, insidiosa, progressiva e irreversível. Formam um grupo heterogêneo de patologias determinadas por diferentes mecanismos. Um grande número de doenças neurodegenerativas apresenta etiologia genética, enquanto que outras ocorrem de forma esporádica independente de herança genética. A Esclerose Lateral Amiotrófica (ELA) pode ser classificada em familiar ou esporádica, e acomete indivíduos de meia idade, normalmente acima dos 50 anos. Suas manifestações clínicas incluem fraqueza progressiva, atrofia, fasciculação, hiperreflexia, disartria, disfagia, e eventual paralisia da função respiratória. No momento não há cura ou tratamento efetivo para que se detenha ou se reverta o processo degenerativo da ELA. Para melhorar a qualidade de vida dos pacientes são realizados tratamentos paliativos. Com os avanços recentes da genética molecular, genes responsáveis por diversas formas clínicas desta doença estão sendo caracterizados. No momento já existem mais de 20 genes associados a ELA. Este estudo visa o diagnóstico comprobatório e diferencial da etiologia genética da ELA, contribuindo dessa forma, para efetuar o aconselhamento genético mais preciso dos pacientes, para que a ELA deixe de ser uma doença subnotificada, e também fornecendo mais informações para auxiliar no entendimento da patogênese da ELA. Para a realização deste estudo, sangue de pacientes encaminhados ao Instituto de Neurologia Deolindo Couto (INDC/UFRJ), foram coletados e encaminhado ao Laboratório de Genética Humana do IOC/FIOCRUZ e para o Neuro Genetics Lab, McGill University, Montreal, Canada (doutorado sanduíche) para a realização do rastreamento de 5 genes (SOD1, TARDBP, FUS, VAPB e ANG) e genotipagem de 2 genes (C9ORF72 e ATXN2) envolvidos na ELA Nossos achados revelaram 15 SNPs nos diferentes genes estudados (ANG, FUS, SOD1, TDP-43 e VAPB). Pela primeira vez, foi descrito um paciente brasileiro de ELA-FTD (Demência Frontotemporal) com a repetição expandida C9ORF72. Após o rastreamento do gene VABP foram encontradas 6 famílias com a mutação P56S, onde 5 possuem AME (Atrofia muscular espinhal) de início tardio e apenas uma possui ELA. Nossos achados e de estudos anteriores nos levaram a concluir que a mutação P56S no gene VAPB parece ser mais frequente em pacientes de AME de início tardio do que em pacientes de ELA. Encontramos uma nova mutação no gene TARDBP, em um paciente de ELA-E (ELA esporádica), e após realizarmos a caracterização da mesma, vimos que ela leva a perda de função do gene através de efeito hipomórfico. Pela primeira vez, foi visto a associação da repetição expandida CAG no gene ATXN2 e o risco de causar ELA em pacientes brasileiros, bem como ocorrência, concomitante, de ATXN2 e da mutação P56S no gene VAPB em pacientes de ELA e de AME de início tardio. Isso sugere que o gene ATXN2 poderia ser fator de risco não apenas para a ELA, como para a AME de início tardio. Nosso estudo veio somar-se ao conhecimento da ELA na população brasileira e de certa forma também para AME de início tardio. E enfatiza a importância da associação da clínica com a genética para um diagnóstico mais preciso / Neurodegenerative diseases are characterized by neuronal death, insidious, progressive and irreversible. The diseases that belong to this heterogeneous group are determined by different mechanisms. A large amount of neurodegenerative diseases has genetic etiology, whereas others are sporadic regardless genetic inheritance. Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) can be classified in familial or sporadic, and most often begins in people of fifty years of age or older. ALS clinical manifestations include progressive weakness, atrophy, fasciculation, hyperreflexia, dysarthria, dysphagia, and eventual respiratory failure. To date, there is no cure or effective treatment to stop or reverse ALS degenerative process. To improve patient\2019s life quality, palliative treatments are put in place. With the recent progress in molecular genetics, genes responsible for many clinical forms of this disease are being found. So far, there are twenty genes associated to ALS. The goal of this study is the differential and proving diagnosis of ALS genetic etiology, contributing thus to provide a more accurate patient genetic counseling allowing ALS not to be an underreported disease, and also providing more information to help to understand ALS pathogenesis. In this study, patients admitted to Instituto de Neurologia Deolindo Couto (INDC/UFRJ) underwent blood analysis at Laboratório de Genética Humana do IOC/FIOCRUZ and Neuro Genetics Lab, McGill University, Montreal, Canada (Sandwich Doctorate) to perform the screening of five genes (SOD1, TARDBP, FUS, VAPB e ANG) and genotype two ALS-associated genes (C9ORF72 e ATXN2) Our findings show fifteen SNPs in different genes of this study (ANG, FUS, SOD1, TDP-43 e VAPB). For the first time, an ALS/FTD (Frontotemporal degeneration) Brazilian patient was described with repeat expansion in C9ORF72. After the screening of VAPB gene, there were found six families with P56S mutation: five of this group had late-onset SMA (Spinal muscular atrophy); and only one had ALS. Our finding and previous studies lead us to conclude that P56S mutation in VAPB seems to be more frequent in late-onset SMA patients than in ALS patients. We found a novel mutation in TARDBP gene in an SALS patient (sporadic ALS). After characterizing the mutation, we observed that it leads to loss of gene function via hypomorphic effect. For the first time an association of repeat expansion CAG in ATXN2 and risk of ALS in Brazilian patients was described, as well as the concomitant occurrence of ATXN2 and P56S mutation in VAPB gene in ALS and late-onset SMA patients, suggesting that ATXN2 gene could be risk factor not only for ALS, but also to late-onset SMA. Our study brought new information regarding ALS in Brazilian population, and, at some extent, also to late-onset SMA, and emphasizes the importance of association between clinics and genetics to a more accurate diagnosis / 2100-11-18

A atrofia muscular espinal (AME) é uma das doenças de herança autossômica recessiva mais frequentes, com uma incidência estimada de 1 em cada 10.000 nascidos vivos. A AME se caracteriza por degeneração de neurônios motores na medula espinal, causando fraqueza progressiva de membros e tronco, seguida de atrofia muscular. Os pacientes são classificados em AME tipo I, AME tipo II e AME tipo III, baseado na idade de início dos sintomas e na evolução clínica. As três formas clínicas são causadas por alterações no gene de sobrevivência do neurônio motor (SMN1), que apresenta uma cópia homóloga (SMN2). Em torno de 95% dos pacientes com AME são homozigotos para ausência do exon 7 do gene SMN1, devido a uma deleção desse gene ou à uma conversão para SMN2. A ausência de SMN2 não tem consequências clínicas e é encontrada em aproximadamente 5% dos indivíduos normais, mas o número de cópias de SMN2 modula o fenótipo de pacientes com AME. Devido a este espectro uniforme de mutação, a análise molecular realizada mais frequentemente é a detecção de deleções e conversões dos éxons 7 e/ou 8 dos genes SMN1 e SMN2 nos pacientes com suspeita clínica de AME. Neste trabalho, um protocolo baseado no sistema TaqMan® foi desenvolvido e comparado com a metodologia de PCR-RFLP (restriction fragment length polymorfism) utilizada no laboratório, avaliando o potencial de aplicação no diagnóstico molecular de pacientes com AME. Amostras de DNA de 100 indivíduos com suspeita clínica de AME foram analisadas pelos dois métodos. Amostras suspeitas de apresentar conversão foram analisadas por sequenciamento direto de DNA. Homozigotos para a ausência do exon 7 do gene SMN1 foram identificados em 58 casos (58%), sendo a maioria devido à deleção desse gene. Destes pacientes, 56 foram classificados, de acordo com os critérios diagnósticos revisados para AME, e distribuídos da seguinte forma: 26 (46,4%) do tipo I, 16 (28,6%) tipo II e 14 (25,0%) tipo III. Oito casos de conversão do gene SMN1 para SMN2 foram encontradas entre os pacientes e a distribuição desses casos entre as três formas clínicas foi a seguinte: 4 pacientes do tipo III, 3 do tipo II e 1 do tipo I. Cinco casos de homozigotos para ausência do gene SMN2 foram identificados entre os demais indivíduos. A comparação do método PCR-RFLP com o método baseado no sistema TaqMan® descrito neste estudo mostrou que ambos foram específicos e precisos para essas análises. No entanto, o ensaio TaqMan® foi mais sensível e mais rápido e parece ser um método adequado para o diagnóstico de AME. / Spinal muscular atrophy (SMA) is one of the most frequent autosomal recessive disorder with an estimated incidence of 1 case in each 10,000 live-births. SMA is characterized by degeneration of motor neurons in the spinal cord, causing progressive weakness of the limbs and trunk, followed by muscle atrophy. Patients have been classified in type I–III SMA based on age at onset and clinical course. All three types of SMA are caused by alterations in the survival motor neuron gene (SMN1) that also have a homologous copy named SMN2. About 95% of SMA patients show homozygous absence of SMN1 exon 7 due a deletion of this gene or a conversion into SMN2. The absence of SMN2 is found in about 5% of individuals with no clinical phenotype, but number of SMN2 copies modulates the phenotype of SMA patients. Considering this uniform mutation spectrum, direct molecular genetic testing consists basically of detecting deletions and conversions of exons 7 and 8 of these genes in SMA patients. In this work, we develop a real time PCR TaqMan® method and compared with the most commonly used PCR restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) assay, evaluating the potential application of molecular diagnosis of SMA patients. DNA samples from 100 individuals with clinical features of SMA were analyzed by both methods. Besides, patients DNA samples carrying a conversion event were analysed by direct DNA sequencing. Homozygous for SMN1 exon 7 absence were identified in 58 cases (58%) being the majority due to gene deletion and eight cases of gene conversion. From those, 56 were classified, according to the revised diagnostic criteria, and distributed as follows: 26 (46.4%) SMA type I, 16 (28.6%) SMA type II and 14 (25.0%) SMA type III. In addition, gene conversion was observed in 4 SMA type I patients, 3 SMA type II and 1 SMA type III patient. Among the remaining individuals five samples were found to be homozygous for absence of SMN2 gene. Comparing PCR-RFLP method and the method based on the TaqMan® system describe in this study, we verify that both were precise and specific for these analyses. However, the TaqMan® assay was faster and more sensitive than PCR-RFLP and was shown to be a suitable method for the diagnosis of SMA.

Made available in DSpace on 2016-02-05T18:29:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-29. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:33:29Z : No. of bitstreams: 1 000855128_20171211.pdf: 122236 bytes, checksum: 59eb5832dfc868f4fc2e44e8e38e7d65 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-12-15T12:43:35Z: 000855128_20171211.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-12-15T12:44:26Z : No. of bitstreams: 1 000855128.pdf: 1517503 bytes, checksum: bd4c125bcc78758a9841522de65a5401 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O pacu, Piaractus mesopotamicus, é uma espécie de grande importância econômica no Brasil e muitos estudos sobre sua fase inicial já foram conduzidos visando viabilizar o cultivo intensivo dessa espécie. Peixes passam por períodos em jejum, tanto em condições naturais quanto nas de cultivo, ocorrendo a ativação de sistemas proteolíticos ocasionando a degradação do tecido muscular, o que implica na redução da musculatura estriada esquelética, parte mais importante do animal em termos produtivos. Assim, fazem-se necessárias pesquisas visando compreender a formação e degradação do tecido muscular, uma vez que essa é a principal parte comercializada. Nesse estudo, juvenis de pacu com 20,4 ± 0,7 mm de comprimento total e 90,3 ± 4,1 mg de peso médio foram estocados em 20 tanques de 50 L a uma densidade de 10 peixes/L. Três períodos de jejum foram avaliados: J4, J8 e J11, correspondentes a 4, 8 e 11 dias de jejum. Após este período, os peixes foram realimentados por 20 dias com náuplios de artêmia. O controle positivo (ART) foram peixes alimentados com náuplios de artêmia durante todo o período experimental. Amostras para análises biométricas, histológica do fígado e musculo esquelético e de expressão de genes que controlam o crescimento e atrofia muscular foram coletadas no final de cada período de jejum e ao final do experimento. As fibras musculares foram distribuídas nas seguintes classes de diâmetro (d = μm): Classe 10 = d ≤ 10, Classe 20 = 10 <d ≤ 20, Classe 30 = 20 <d ≤ 30, Classe 40 = 30 <d ≤ 40, e classe 50 = d> 40. No final do período de jejum observou-se que o crescimento dos juvenis celularidade das fibras musculares foram afetados pelo jejum. Os animais do tratamento J11 apresentaram alta incidência de atrofia das fibras musculares, como revelado pelo aumento das frequências das fibras nas classes de fibras 10 e 20. Comportamento semelhante foi observado nos animais mantidos 8 dias... / The pacu, Piaractus mesopotamicus, is a species with great economic importance in Brazil and many studies on its initial phase have been conducted to enable the intensive culture of this species. Fish undergo fasting periods, both in natural conditions as in the intensive rearing, causing activation of proteolytic systems due to the breakdown of muscle tissue, which implies the reduction of the skeletal striated muscles of the animal, the edible part of fish. In this way, more research is necessary to understand the formation and breakdown of muscle tissue. In this study, juvenile pacu with 20.4 ± 0.7 mm in total length and 90.3 ± 4.1mg of average weight were stocked in 20 tanks of 50 L at a density of 10 fish/L. The fasting periods evaluated were: J4; J8 and J11, corresponding to 4, 8 and 11 days of fasting. After this period, the fish were refed for 20 days with artemia nauplii. The positive control (ART) was fish fed newly hatched artemia nauplii throughout the experimental period. Samples for growth, histological analysis of liver and muscle fibers and gene expression were collected at the end of each period of fasting and at the end of the experiment. Muscle fibers were distributed into the following diameter classes (d = μm): Class 10 = d ≤ 10, Class 20 = 10 <d ≤ 20, Class 30 = 20 <d ≤ 30, Class 40 = 30 <d ≤ 40, and class d 50 => 40. At the end of the fasting period, growth, survival and the frequency of muscle fibers were affected by fasting. The fish in the treatment J11 showed high incidence of muscle fiber atrophy, as revealed by increased frequencies in classes 10 and 20 fibers. Similar pattern was observed in animals kept eight days fasting (J8). The fish of the treatment J4 showed a lower incidence of muscle fiber atrophy and the frequency of fiber classes 10, 20, 30 and 50 was similar to the positive control. The glycogen storage in the liver of fasted animals was decreased as higher was the fasting ...

Orientador : Prof. Dr. André Luiz Félix Rodacki / Coorientador : Prof. Dr. Eddy Krueger / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Educação Física. Defesa: Curitiba, 29/07/2016 / Inclui referências : f. 63-81 / Área de concentração: Exercício e esporte / Resumo: A atrofia muscular é uma das consequências mais evidentes da lesão medular, como resultado da imobilidade crônica. Os efeitos deletérios da lesão medular em grandes grupos musculares podem levar a efeitos secundários, tais como intolerância à glicose, aumento do risco da síndrome metabólica e diabetes do tipo II. O treinamento com RFS (RFS) tem sido proposto como uma forma efetiva para induzir hipertrofia utilizando-se de cargas baixas, com pouco ou nenhum dano muscular. O presente estudo teve como objetivo investigar os efeitos agudos e crônicos da eletro-estimulação funcional de baixa intensidade combinada com restrição parcial do fluxo sanguíneo (EEF+RFS) em músculos afetados pela lesão medular. Os efeitos agudos de uma sessão de EEF com (grupo EEF+RFS) e sem RFS (grupo EEF) nos níveis de lactato sanguíneo, na espessura muscular (EM) e na formação de edema foram comparados. Os efeitos crônicos na EM e na formação de edema após oito semanas de EEF com e sem RFS, realizados duas vezes por semana, foram também comparados. O grupo EEF+RFS mostrou aumentos agudos maiores nos níveis de lactato, na EM e edema, comparado ao grupo EEF (p<0,05). O grupo EEF+RFS mostrou um aumento crônico na EM após 4 semanas de treinamento (p<0,05), sem aumentos adicionais da 4a. para a 8a. semana (p>0,05). Após 3 semanas de destreinamento, a EM diminuiu aos valores basais. Não houve mudanças na EM crônica no grupo EEF ao longo das 8 semanas de treinamento (p>0,05). O presente estudo mostrou que 8 semanas de eletro-estimulação funcional combinada com RFS induz a aumentos na EM dos músculos afetados pela lesão medular. Os efeitos agudos indicam que a eletro-estimulação induz a um maior acúmulo de metabólitos e edema, quando combinada com RFS. Os efeitos crônicos sugerem que os aumentos iniciais na EM podem ser atribuídos a edema, ao passo que depois da 4a. semana os aumentos podem ser interpretados predominantemente como hipertrofia muscular. Palavras-chave: lesão medular, RFS, eletro-estimulação funcional, hipertrofia muscular, edema. / Abstract: Muscle athrophy is one of the most evident consequences of SCI, as a result of chronic immobility. The detrimental effects of SCI on large skeletal muscle groups may lead to secondary effects such as glucose intolerance, increased risk of metabolic syndrome and type 2 diabetes mellitus. Blood flow restriction (BFR) training has been proposed as an effective method to induce hypertrophy using low training loads, with little or no muscle damage. This study aimed to investigate the acute and chronic effects of low-intensity functional electrical stimulation (FES) combined with blood flow restriction (BFR) on muscles affected by spinal cord injury. The acute effects of one bout of FES with (FES+BFR group) and without BFR (FES group) on blood lactate, muscle thickness (MT) and edema formation were compared. The chronic effects on MT and edema following 8-weeks of twice weekly training with and without BFR were also compared. The FES+BFR group showed greater acute blood lactate, MT and edema increases compared to the FES only group (p<0,05). The FES+BFR group showed a chronic MT increase after 4 week of training (p<0.05), with no further MT increases from the 4th to the 8th week (p>0,05). Following 3 week of detraining, MT decreased to baseline values. No MT changes were observed in the FES group throughout the 8 weeks (p>0.05). This current study showed that 8 weeks of low-intensity FES training combined with BFR induces MT increases on the paralyzed skeletal muscles of spinal cord-injured men. The acute effects suggest that functional electrical stimulation induces a greater metabolites accumulation and edema, when combined with BFR. The chronic effects suggest that early increases in MT can be attributed to edema, whereas after the 4th week the increased MT can be interpreted predominantly as muscle hypertrophy. Keywords: spinal cord injury, blood flow restriction, functional electrical stimulation, muscle hypertrophy, edema.

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-20. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:48:39Z : No. of bitstreams: 1 000833784_20200131.pdf: 133380 bytes, checksum: 09661239adaad4e130cc45acff7af498 (MD5) / O objetivo do trabalho foi investigar as características morfológicas e fisiológicas, e a expressão de genes envolvidos na atrofia muscular (MuRF-1 77 e atrogina-1) e genes que controlam o crescimento muscular (MyoD, Miogenina, IGF-1 e receptor de IGF-1) e a Miostatina, em juvenis de tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus), submetidos ao jejum, seguidos de realimentação. Foram utilizados juvenis de tilápia-do-nilo, com peso médio de 30.2 ± 0.9 g, e o experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado (DIC), com quatro tratamentos e oito repetições: (AL) controle alimentado, alimentado até a saciedade aparente durante o período experimental; (J1) uma semana de jejum e 10 semanas de realimentação; (J2) duas semanas de jejum e 10 semanas de realimentação; (J3) três semanas de jejum e 10 semanas de realimentação. As biometrias foram realizadas após uma, duas e três semanas de jejum e após uma, duas, seis e semanas de realimentação para cada tratamento. As coletas de amostras (n = 16/tratamento) foram realizadas nos finais dos períodos de jejum e após semanas de realimentação. Foram observadas significativas reduções nos índices de desempenho nos peixes durante o jejum. Entretanto, após dez semanas de realimentação, os peixes que passaram por jejum apresentaram apenas crescimento compensatório parcial. O consumo alimentar e a taxa de crescimento específico aumentaram durante a realimentação, igualando-se ao consumo alimentar do tratamento AL, porém não foram suficientes para induzir o crescimento compensatório total. A taxa de sobrevivência não diferiu entre os tratamentos. Os níveis de triglicérides e o cortisol nos peixes do tratmento J1 foram significativamente menores em relação ao AL. Os índice hepatosomático (IHS), índices de gordura visceral (IGV), lipídio na carcaça e os níveis de glicogênio ... / The aim of this study was to investigate the morphological and physiological characteristics and the gene expression involved in muscle atrophy (MuRF-1 and atrogin-1) and genes that control muscle growth (MyoD, Myogenin, IGF-1 and IGF-1 receptor) and the Myostatin, in Nile tilapia (Oreochomis niloticus) juveniles submitted to fasting, followed by refeeding. It was used Nile tilapia juveniles with average body mass 30.2 ± 0.9 g and the experiment was completely randomized with four treatments and eight repetitions: (FC) fed control, fish were fed continuously during the 13 weeks; (F1) one week of fasting and 10 weeks of refeeding; (F2) two weeks of fasting and 10 weeks of refeeding; (F3) three weeks of fasting and 10 weeks of refeeding. Biometric performance was made after one, two and three weeks of fasting and after one, two, six and 10 weeks of refeeding. Samples were collected (n = 16 fish/treatment) after the end of each period of fasting and after 10 weeks of refeeding. It was observed significant decrease of performance index of fish during fasting. However, after 10 weeks of refeeding, fish that were fasted showed only partial compensatory growth. The feed intake and specific growth rate increased during refeeding, equaling to the FC, but it was not enough to induce total growth compensation. The survival rate did not differ among all treatments. The triglycerides and cortisol levels in fish from F1 were significantly lower than FC. The hepatosomatic index (HSI), visceral fat index (VFI), carcass lipid and liver glycogen levels decreased in fish that was fasting. However, after 10 weeks of refeeding, the lipids amount on VFI, on body composition and liver glycogen in fish from F1, F2 and F3 treatments were similar to FC. At the first week of the experiment, in the F1 and FC treatments, the morphological muscle fibers analyses showed a high quantity of small muscle fibers with central nucleus, showing the mosaic hyperplasia ...

Orientador: Maeli Dal Pai / Coorientador: Robson Francisco Carvalho / Banca: Renato Ferretti / Banca: Renne Laufer Amorim / Resumo: Não disponível / Abstract: The skeletal muscle atrophy is a common phenomenon in many chronic systemic diseases such a sepsis, chronic heart failure, chronic obstructive pulmonary disease, chronic kidney disease, diabetes, AIDS and cancer. These diseases may be accompanied by a complex metabolic syndrome characterized by muscle wasting, denominated cachexia. The molecular pathways responsible for cachexia are not completely understood, however, evidence suggest that pro-inflammatory cytokines like Tumor Necrosis Factor (TNF)-α and Interferon (INF)-γ have a key role in molecular pathways related to loss of function and muscle mass. The complexity of mechanisms controlling gene expression in this process suggests the involvement of additional regulatory molecules, such as microRNAs; these RNA molecules encoded by the genome regulate the function of skeletal muscle during development and various muscle diseases. MicroRNAs orchestrate common pathways or biological function, this unique feature gives rise as an effective tool for determining the pathways involved in specific diseases or biological processes. The hypothesis of this work is that the muscle atrophy induced by TNF-α and INF-γ has a microRNAs expression profile that allow the identification of regulatory networks and molecular pathways / Mestre

Orientador: Maria Célia Portella / Coorientador: Maeli Dal Pai / Banca: Natália de Jesus Leitão / Banca: Rosângela Kiyoko Jomori Bonichelli / Banca: Luiz Roberto Furlan / Banca: Laura Satiko Okada Nakaghi / Resumo: O pacu, Piaractus mesopotamicus, é uma espécie de grande importância econômica no Brasil e muitos estudos sobre sua fase inicial já foram conduzidos visando viabilizar o cultivo intensivo dessa espécie. Peixes passam por períodos em jejum, tanto em condições naturais quanto nas de cultivo, ocorrendo a ativação de sistemas proteolíticos ocasionando a degradação do tecido muscular, o que implica na redução da musculatura estriada esquelética, parte mais importante do animal em termos produtivos. Assim, fazem-se necessárias pesquisas visando compreender a formação e degradação do tecido muscular, uma vez que essa é a principal parte comercializada. Nesse estudo, juvenis de pacu com 20,4 ± 0,7 mm de comprimento total e 90,3 ± 4,1 mg de peso médio foram estocados em 20 tanques de 50 L a uma densidade de 10 peixes/L. Três períodos de jejum foram avaliados: J4, J8 e J11, correspondentes a 4, 8 e 11 dias de jejum. Após este período, os peixes foram realimentados por 20 dias com náuplios de artêmia. O controle positivo (ART) foram peixes alimentados com náuplios de artêmia durante todo o período experimental. Amostras para análises biométricas, histológica do fígado e musculo esquelético e de expressão de genes que controlam o crescimento e atrofia muscular foram coletadas no final de cada período de jejum e ao final do experimento. As fibras musculares foram distribuídas nas seguintes classes de diâmetro (d = μm): Classe 10 = d ≤ 10, Classe 20 = 10 <d ≤ 20, Classe 30 = 20 <d ≤ 30, Classe 40 = 30 <d ≤ 40, e classe 50 = d> 40. No final do período de jejum observou-se que o crescimento dos juvenis celularidade das fibras musculares foram afetados pelo jejum. Os animais do tratamento J11 apresentaram alta incidência de atrofia das fibras musculares, como revelado pelo aumento das frequências das fibras nas classes de fibras 10 e 20. Comportamento semelhante foi observado nos animais mantidos 8 dias... / Abstract: The pacu, Piaractus mesopotamicus, is a species with great economic importance in Brazil and many studies on its initial phase have been conducted to enable the intensive culture of this species. Fish undergo fasting periods, both in natural conditions as in the intensive rearing, causing activation of proteolytic systems due to the breakdown of muscle tissue, which implies the reduction of the skeletal striated muscles of the animal, the edible part of fish. In this way, more research is necessary to understand the formation and breakdown of muscle tissue. In this study, juvenile pacu with 20.4 ± 0.7 mm in total length and 90.3 ± 4.1mg of average weight were stocked in 20 tanks of 50 L at a density of 10 fish/L. The fasting periods evaluated were: J4; J8 and J11, corresponding to 4, 8 and 11 days of fasting. After this period, the fish were refed for 20 days with artemia nauplii. The positive control (ART) was fish fed newly hatched artemia nauplii throughout the experimental period. Samples for growth, histological analysis of liver and muscle fibers and gene expression were collected at the end of each period of fasting and at the end of the experiment. Muscle fibers were distributed into the following diameter classes (d = μm): Class 10 = d ≤ 10, Class 20 = 10 <d ≤ 20, Class 30 = 20 <d ≤ 30, Class 40 = 30 <d ≤ 40, and class d 50 => 40. At the end of the fasting period, growth, survival and the frequency of muscle fibers were affected by fasting. The fish in the treatment J11 showed high incidence of muscle fiber atrophy, as revealed by increased frequencies in classes 10 and 20 fibers. Similar pattern was observed in animals kept eight days fasting (J8). The fish of the treatment J4 showed a lower incidence of muscle fiber atrophy and the frequency of fiber classes 10, 20, 30 and 50 was similar to the positive control. The glycogen storage in the liver of fasted animals was decreased as higher was the fasting ... / Doutor