Orientador: Gilberto da Assunção Fernandes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T23:01:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pilenso_CintiaHeloisaCorrea_M.pdf: 4387089 bytes, checksum: 081a5628788a602f8e82cbfb2fbad97d (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O núcleo central da amígdala (CeA) participa dos mecanismos que controlam a resposta ao estresse. A finalidade deste estudo foi avaliar os efeitos da lesão bilateral do CeA sobre a resposta a dois diferentes tipos de estresse: o estresse psicológico de contenção e o estresse físico, através da injeção intraperitoneal de salina hipertônica a 2%. Foram utilizados ratos Wistar machos, com peso de 200 a 250g, distribuídos em três grupos: controle, simulado e lesado. Neste último, o CeA foi lesado bilateralmente por eletrocoagulação em um aparelho de estereotaxia. Após 14 dias de recuperação, os ratos foram novamente divididos em grupos: estresse psicológico, estresse fisico e sem estresse. Ao final desses procedimentos, as amostras de sangue foram coletadas para posterior determinação dos níveis séricos de corticosterona e os animais foram sacrificados por decapitação. Em seguida, as adrenais e adeno-hipófises foram retiradas e pesadas. Os cérebros dos animais lesados foram submetidos à análise histológica para identificar a presença da lesão bilateral do CeA. Observou-se que os pesos corporais dos animais, assim como os pesos das glândulas, não mostraram alterações significativas, provavelmente devido à utilização de modelo de estresse agudo e não crônico. Entretanto, as concentrações de corticosterona, hormônio de estresse, mostraram-se significativamente menores nos ratos lesados que nos controles, nos animais que foram submetidos ao estresse físico. Assim, foi verificado que o estresse físico foi bloqueado pela lesão. Dessa forma, os resultados encontrados sugerem que a lesão bilateral do CeA altera o eixo hipotálamo-hipófise-adrenal e que a injeção intraperitoneal de salina hipertônica está relacionada com os mecanismos desencadeadores de estresse na amígdala / Abstract: The aim for this study was to investigate the role of central amygdaloid nucleus (CeA) in the modulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis (HPA) in response to physical and psychological stress. Wistar albino rats were lesioned in the CeA and submitted to psychological (immobilization) and physical stress (2% intraperitoneal saline), afier 14 days of rest. Afterwards, the blood was collected for corticosterone analysis and the rats were decapitated. At the autopsy, pituitary and adrenals glands were removed, cleaned and weighed. The results showed no influence of the acute stress in gland weights. However, corticosterone levels diminished with bilateral lesions of the CeA in response to physical stress. The results suggest that CeA might be involved in the regulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis response to physical stress / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Magíster en Bioquímica, Área de especialización Clínica aplicada / El inicio de la respuesta inmune adaptativa depende de la interacción específica entre células T CD4+ naïve y células presentadoras de antígenos (APCs). De todas las APCs, las células dendríticas (DCs) juegan un rol fundamental en la iniciación y regulación de la respuesta inmune adaptativa. Su función principal es la de capturar, procesar los antígenos y presentarlos a los linfocitos B y T para que éstos inicien la repuesta inmunológica. En este contexto, previamente nuestro grupo de investigación demostró que las DCs expresan el receptor de mineralocorticoides (MR), cuya activación por aldosterona induce la secreción de IL-6 y TGF-β, aumenta su capacidad para activar células CD8+ y promueve la polarización de las células T CD4+ hacia un perfil TH17 (rol pro-inflamatorio). Diversos estudios han evidenciado que productos del sistema nervioso y endocrino pueden tener efectos importantes sobre la función de las DCs. De este modo, se ha demostrado que la activación de MR por aldosterona genera una respuesta pro-inflamatoria y las activación del receptor de glucocorticoides (GR) por cortisol (corticosterona en modelo murino) genera una respuesta anti-inflamatoria. Sin embargo, la interacción entre estos receptores es más compleja, ya que cortisol puede unirse a MR con igual afinidad que aldosterona; no obstante, en algunos tejidos como el riñón existe una enzima que le confiere a MR selectividad por aldosterona denominada 11βhidroxiesteroide deshidrogenasa tipo 2 (11βHSD2), aunque en diversas células del sistema inmune se ha descrito la ausencia de esta enzima. Tradicionalmente, los glucocorticoides (GCs) han sido ampliamente utilizados en el tratamiento de enfermedades inflamatorias generando, a través de la activación de GR, una potente inhibición de la respuesta inmune. Pero, a pesar de los beneficios antiinflamatorios postulados, en pacientes que presentan un exceso de GCs han sido observados efectos adversos como hipertensión y daño cardiovascular. En estos casos, se ha propuesto que un exceso de GCs podría promover la excesiva activación MR, aumentando la respuesta pro-inflamatoria. Recientemente, se ha descrito en células del músculo liso vascular (VSMCs) un nuevo receptor capaz de activarse por hormonas corticosteroidales: el Receptor Acoplado a Proteína G-30 (GPR30), que en células endoteliales puede ser activado por estrógenos, aldosterona o cortisol, y cuya expresión no ha sido descrita en DCs. Por lo tanto, el efecto neto de aldosterona y cortisol dependerá de la concentración de cada ligando, el contexto celular y los niveles de expresión relativa de cada receptor en cada célula inmune, entre otros múltiples factores. Otro antecedente que centró nuestra atención fue que espinolactona (SPIRO), un antagonista competitivo de MR, sería capaz de inducir la expresión de hemo oxigenasa-1 (HO-1), enzima cuya actividad tiene efectos antioxidantes, anti-inflamatorios y anti-apoptóticos. Diversos estudios demuestran que las DCs expresan HO-1 y que esta expresión disminuye drásticamente como resultado del proceso de maduración y que la sobreexpresión de HO-1 en DCs, inhibe la maduración y la función pro-inflamatoria inducida por LPS. En este contexto, las DCs juegan un rol clave en la regulación de la inmunidad adaptativa y la activación de las células T, por lo tanto, el efecto de la HO-1 sobre la regulación de la función de las DCs puede ser altamente relevante para modular la respuesta inmune adaptativa. Basándonos en estos antecedentes nuestra hipótesis central fue que "corticosterona, a través de la señalización de MR, aumenta la capacidad de las células dendríticas para activar células T”. En primer lugar, para caracterizar nuevos moduladores de la función de las DCs, determinamos la expresión relativa de MR, 11βHSD2, GPR30 y las dos isoformas de GR por qRT-PCR, observando que DCs derivadas de médula ósea (bm-DCs) presentan niveles detectables de ARNm para estas proteínas, los cuales aumentaron cuando se indujo la maduración con LPS, a excepción de la isoforma GRα, cuyos niveles no varían con el proceso de maduración. Posteriormente, nos propusimos detectar la expresión de ARNm de MR, 11βHSD2 y GPR30 en otro tipo celular que cumple funciones de APC: los linfocitos B. Purificamos linfocitos B a partir de esplenocitos y mediante qRT-PCR determinamos los niveles de cada ARNm. Los datos obtenidos sugieren que los linfocitos B presentan niveles detectables de ARNm para GPR30 y MR, pero no para 11βHSD2. Como un objetivo adicional, nos propusimos determinar si espinolactona es capaz de aumentar los niveles de ARNm de HO-1 en bm-DCs, sin embargo, los datos que obtuvimos no son concluyentes, ya que solo se observó un ligero aumento en la expresión de HO-1. Por otro lado, centrándonos en nuestro objetivo principal, generamos bm-DCs y las estimulamos con corticosterona más RU486 (antagonista de GR) para promover la unión a MR, y luego analizamos los cambios en su fenotipo. En este caso, los datos sugieren que los estímulos utilizados no afectan significativamente la viabilidad de las bm-DCs y que el tratamiento previo con RU486 y posteriormente con corticosterona, disminuye la expresión de PDL-1 y aumenta la expresión de CD40 en bm-DCs. Finalmente, los datos obtenidos en esta tesis no nos permiten concluir categóricamente que corticosterona es capaz de activar MR e inducir un fenotipo pro-inflamatorio en las DCs, pero la disminución en la expresión de PDL-1 y el aumento de CD40 sugieren que las DCs tienden a adquirir dicho fenotipo. De manera siginificativa, nuestros resultados sugieren que las DCs expresan 2 proteínas que no habían sido descritas en este tipo celular: GPR30 y 11βHSD2, las cuales abren una nueva posibilidad de regulación de la función de las DCs / The initiation of the adaptive immune response depends on the specific interaction between T cells naïve CD4+ and antigen presenting cells (APCs). Of all the APCs, dendritic cells (DCs) play a critical role in the initiation and regulation of adaptive immune response. Their main function is to capture and process antigens and present them to T and B lymphocytes to initiate these immune response. In this context, previously, our research group showed that the DCs express the mineralocorticoid receptor (MR), and that its activation by aldosterone induce the secretion of IL-6 and TGF-β, increases its ability to activate CD8+ T cells and promotes polarization of CD4+ T cells toward a Th17 profile (associated with the inflammatory role). Diverse studies have shown that products and processes of the nervous and endocrine systems can have significant effects on the function of DCs. Thus, it has been shown that activation of MR by aldosterone generates a pro-inflammatory response, and the activation of the glucocorticoid receptor (GR) by cortisol (corticosterone in murine model) generates an anti-inflammatory response. However, the interaction between these receptors is more complex because cortisol can bind to MR with equal affinity that aldosterone; nevertheless , in some tissues, such as kidney, exists an enzyme that confers selectivity to MR by aldosterone called 11-β-hidroxysteroid dehydrogenase type 2 (11βHSD2), although in various cells of the immune system has been described the absence of this enzyme. Traditionally, glucocorticoids (GCs) have been widely used in the treatment of inflammatory diseases by generating, through the activation of GR, a potent inhibition of the immune response. But despite the postulated anti-inflammatory benefits in patients, with an excess of GCs have been observed adverse effects such as hypertension and cardiovascular damage. In these cases, it is suggested that an excess of GCs may promote excessive activation MR, increasing the pro-inflammatory response. Recently, it has been described in vascular smooth muscle cells (VSMCs) a new receptor that can be activated by corticosteroids hormones: G -protein coupled receptor-30 (GPR30). In endothelial cells, this receptor can be activated by estrogen, aldosterone or cortisol, but its expression has not been described in DCs. Thus, the net effect of aldosterone and cortisol depend on the concentration of each ligand, the cellular context and the relative expression levels in each immune cell, among other factors. Other antecedent that focused our attention was that spinolactone (SPIRO), a competitive antagonist of MR, would be capable of inducing the expression of heme oxygenase-1 (HO-1), an inducible enzyme by ligand and has antioxidant, anti-inflammatory and anti-apoptotic activity in kidney cells. Several studies show that DCs express HO-1, and that this expression decreases drastically as a result of the maturation process and that the overexpression of HO-1 in DCs inhibits maturation and pro-inflammatory function induced by LPS. In this context, DCs play a key role in the regulation of adaptive immunity and T cell activation, so the effect of HO-1 on the regulation of the function of the DCs may be highly relevant to modulate the adaptive immune response. Based on this background, our central hypothesis was that "corticosterone through MR signalling enhances the ability of dendritic cells to activate T cells”. First, to characterize in DCs novel modulators of the function expression, we determined the RNA relative levels of MR, 11βHSD2, GPR30 and the two isoforms of GR by qRT- PCR, observing that bone marrow-derived DCs (bm-DCs) have detectable levels of mRNA for these proteins, which are increased when maturation was induced by LPS, with the exception of GRα isoform, whose levels of expression does not change by this maturation process. Later, we decided to detect mRNA expression of MR, 11βHSD2 and GPR30 in another cell type which act as APCs: Blymphocytes. Our data suggest that B-lymphocytes have detectable RNAm levels for GPR30 and MR, but not for 11βHSD2. As a further object, we wanted to determine if spironolactone is able to increase HO-1 mRNA levels in bm-DCs, however, we obtained inconclusive data, as only a slight increase was observed in the HO-1 mRNA levels. On the other hand, focusing on our main aim, we generated bm-DCs and stimulated them with corticosterone and RU486 (a GR antagonist) to promote binding to MR and then we analysed changes in phenotype. In this case, the data suggest that the stimuli does not significantly affect the viability of the bm-DCs and that pre-treatment with RU486 and subsequently with corticosterone, decreases the expression of PDL-1 and increases expression of CD40 in bm- DCs. Finally, the data obtained in this thesis does not allow us to conclude categorically that corticosterone is able to activate of MR and induce a pro-inflammatory phenotype in DCs, but the decrease in expression of PDL-1 and increase in the CD40 levels suggests that DCs tend to acquire the pro-inflammatory phenotype. Significantly, our results suggest that DCs express two new proteins that had not been described in this cell type: GPR30 and 11βHSD2, which open a new possibility for regulating the DCs function / Conicyt

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 324101.pdf: 1681284 bytes, checksum: 81ec13403f99d04fca6e93bcf6741e68 (MD5) Previous issue date: 2013 / A creatina é um composto sintetizado endogenamente e também obtido pela dieta, intimamente relacionado com o metabolismo energético muscular e cerebral que possui efeito anti-excitotóxico, antioxidante e neuroprotetor, além de apresentar atividade antidepressiva em estudos pré-clínicos e clínicos. O tratamento da depressão ainda é desafiador tendo em vista as limitações dos fármacos atualmente disponíveis no mercado. Uma nova estratégia para o tratamento da depressão refratária a tratamentos convencionais consiste na utilização de cetamina, um antagonista de receptores NMDA que age de forma rápida e eficiente. Este estudo investigou em camundongos Swiss, de forma comparativa, os efeitos antidepressivos da creatina e da cetamina e a participação da via PI3K/Akt/mTOR neste efeito. Para isso, utilizamos um modelo de indução de comportamento tipo-depressivo por meio da administração crônica de corticosterona nesses animais. A administração oral de corticosterona (20 mg/kg, p.o.) por 21 dias, mas não por 7 e 14 dias, promoveu um aumento no tempo de imobilidade dos animais no teste de suspensão pela cauda (TSC) e uma diminuição no tempo de comportamento de auto-limpeza no teste de borrifagem de sacarose (splash teste), caracterizando um comportamento tipo-depressivo. O aumento no tempo de imobilidade no TSC induzido pelo modelo de depressão foi revertido pelo tratamento com creatina (10 mg/kg, p.o.) e por cetamina (1 mg/kg, i.p.), mas não por fluoxetina (10 mg/kg, p.o.), quando administradas uma única vez, 24 horas após a última administração de corticosterona. Adicionalmente, os animais submetidos ao modelo de depressão apresentaram uma redução naconcentração sérica de corticosterona comparado ao grupo controle sendo que este parâmetro não foi alterado pelo tratamento com creatina (10 mg/kg, p.o.) ou cetamina (1 mg/kg, i.p.). Adicionalmente foi demonstrado que o tratamento dos camundongos com wortmanina (um inibidor irreversível de PI3K, 0,1 µg/sítio, i.c.v.), ou rapamicina (um inibidor de mTOR, 0,2 nmol/sítio, i.c.v.), reverteram o efeito anti-imobilidade da creatina (10 mg/kg, p.o.) e da cetamina (1 mg/kg, i.p.) no TSC, tanto em animais submetidos ao modelo de depressão, quanto nos animais tratados com veículo. Nenhuma alteração locomotora dos animais foi observada no teste do campo aberto, em nenhum dos grupos experimentais. Adicionalmente investigamos o efeito da creatina e da cetamina sobre os níveis de mTOR fosforilada e total no hipocampo. Tanto os animais tratados com creatina (10 mg/kg, p.o.) quanto os animais tratados com cetamina (1 mg/kg, i.p.) apresentaram um aumento no imunoconteúdo de p-mTOR (Ser2481), tanto nos grupos experimentais submetidos ao tratamento crônico com corticosterona, quanto nos grupos controle. O conjunto de resultados indica que a creatina compartilha com a cetamina um efeito tipo-antidepressivo agudo em um modelo animal de depressão classicamente responsivo apenas à administração crônica de antidepressivos. Esse efeito parece ser mediado pela ativação da via de sinalização mediada por PI3K/Akt/mTOR. Dessa maneira pode-se sugerir que a creatina pode constituir uma alternativa terapêutica de efeito antidepressivo rápido, com efeitos adversos menos pronunciados quando comparada com a cetamina, para o tratamento da depressão associada ao estresse. <br> / Abstract : Creatine is an endogenous compound synthetized either by our organism or obtained by the diet that plays a key role in muscle and brain energetic metabolism. Besides possessing antiexcitotoxic, antioxidant and neuroprotective properties, it has antidepressant effects in preclinical and clinical studies. The management of depression still represents a challenge, especially due to the limitations of the therapeutic options available in the market. Ketamine, an antagonist of NMDA receptors, has been succesfully used as a novel strategy for the treatment of refractory depression, producing rapid and efficient remission. This study investigated the antidepressant effects of creatine, compared with ketamine and the involvement of PI3K/Akt/mTOR pathway in their effects in a model of depression induced by the chronic administration of corticosterone in Swiss mice. The oral administration of corticosterone (20 mg/kg, p.o.) for 21 days, but not for 7 or 14 days caused an increased immobility time in the tail suspension test (TST) and a reduction in the time spent grooming in the splash test, indicative of a depressive-like behavior. The increased immobility time induced by the depression model was reversed by either creatine (10 mg/kg, p.o.) or ketamine (1 mg/kg, i.p.) treatment, but not by a single dose of fluoxetine (10 mg/kg, p.o.), administered once, 24 h after the last administration of corticosterone. Additionally, mice submitted to the depression model presented a reduction on the serum corticosterone levels as compared to the control group. This parameter was not altered neither by creatine nor ketamine treatment. Moreover, treatment of mice with either wortmannin (irreversible PI3K inhibitor, 0.1 µg/site, i.c.v.), orrapamycin (mTOR inhibitor, 0.2 nmol/site, i.c.v.), abolished the anti-immobility effect of creatine (10 mg/kg, p.o.) and ketamine (1 mg/kg, i.p.) in the TST both in mice submitted to chronic administration of corticosterone and in control mice. None of the treatments caused any alteration in the locomotor activity of mice in the open-field test. Additionally, the effects of creatine and ketamine on the levels and phosphorylation of mTOR were investigated. The immunocontent of p-mTOR (Ser2481) was increased both in mice treated with creatine (10 mg/kg, p.o.) and ketamine (1 mg/kg, i.p.) from corticosterone and vehicle groups. Altogether, the results indicate that creatine shares with ketamine the ability to acutely reverse the depressive-like behavior induced by a model of depression that does not respond to acute fluoxetine administration in mice. This effect seems to be mediated by the activation of PI3K/Akt/mTOR signaling. Therefore, it may be suggested that creatine might be a novel antidepressant compound with a robust and rapid onset of action, comparable to ketamine due devoid of its strong psychotropic effects.

Orientador: Elenice A. de Moraes Ferrari / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T23:44:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_CelenaMariaZanide_D.pdf: 7376420 bytes, checksum: 4b256f450ea921b07481bf9e78866ccb (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O objetivo foi analisar substratos hormonais da variação de atividade geral e de processos de habituação do comportamento exploratório a estimulação acústica ao longo de 24h, relacionando variações diurna-noturna no comportamento e nas concentrações de melatonina (MEL) e corticosterona (B) plasmáticos. A descrição do comportamento utilizou um catálogo de comportamento de pombos em cativeiro, cuja elaboração é descrita no Experimento I. No Experimento 11, esse catálogo foi usado para analisar as relações entre a variação da atividade geral nas 24h e as concentrações plasmáticas de MEL e B. Foram usados 40 pombos machos atribuídos ao grupo de ciclo claro-escuro de 12h:12h (CE), com luz acendendo às 6h (n= 20) ou de claro contínuo (CC) (n= 20). O registro comporta mental ocorreu em duas sessões de 5 min, às 3,6,9,12,15,18,21 e 24h, em dois dias sucessivos, com gravação em vídeo para a posterior categorização e quantificação da atividade geral. Amostras de sangue foram coletadas para subgrupos (n=5) de pombos nos mesmos horários de observação comporta mental. Análises radioimunológicas foram usadas para avaliar as concentrações hormonais plasmáticos de MEL (3, 6, 9,12,15,18,21 e 24h) e de B (6,12,18 e 24h). O Experimento 111 analisou a habituação do comportamento exploratório a estímulos acústicos. Foram usados dois grupos de pombos, CE (n=64) e CC (n=64), divididos em subgrupos (n=8) segundo a hora dos testes: 3, 6, 9, 12, 15, 18,21 ou 24h. Os pombos receberam sons (1000Hz, 83dB, 1s) a intervalos de 30s, em duas sessões, com intervalo de 24h. Os resultados indicaram variação de atividade geral com um pico às 6h e 18h e outro intermediário às 12h (p < 0,05). Houve um robusto ritmo de MEL plasmática em CE, com diferenças significativas dia-noite (p < 0,001). Na situação CC, a atividade geral é mantida em níveis mais elevados, exceto às 24h e 3h (p < 0,05). Em CC, a curva de concentrações medianas de B plasmática mostrou um padrão similar ao de CE, porém com valores superiores (p = 0,002). Os dados do Experimento 111 mostraram diferénças noite-dia na habituação em CE, com habituação ocorrendo apenas durante a fase clara. Na situação CC houve habituação em todos os horários excetuando-se a primeira sessão das 21 h e 24h. O aumento das concentrações plasmáticas de B em todos os horários da situação CC foi interpretado como indicativo de que a luz constante é estressante. As relações entre os aumentos nas concentrações de B e a diminuição das concentrações de MEL, com desaparecimento do seu ritmo característico, observadas na situação CC, refletiriam uma interação entre as variações cíclicas desses hormônios de modo a garantir a eficiência dos sistemas de ritmicidade endógena do organismo. As interações desse substrato hormonal e os sistemas neurais de ritmicidade biológica resultariam na modulação do comportamento e da aprendizagem de habituação ao longo das 24h / Abstract: This work analyzed the diurnal variation of different behaviors, habituation learning and plasmatic levels of melatonin and corticosterone in pigeons. Experiment I describes the procedures for the elaboration of a behavioral catalogue of pigeons maintained in home cages, in the animal's room under laboratory conditions. Two other experiments were done, each one with had two groups of animais: one submitted to a 12:12h light-dark cycle (LD), with lights on at 6:00 a.m and the other to constant light (LL) for a maximum of three days. In Experiment 11 both LD and LL groups, were observed in 5 min sessions at times 3, 6, 9, 12, 15,18, 21 and 24h during two successive days. Behavior was video taped in the home cages for posterior categorization and quantification. Radioimmune essays were used to evaluate plasmatic hormonal levels of melatonin and corticosterone. Blood samples were obtained at the same times of behavioral observation. In Experiment 111, animais were tested for habituation of the exploratory behavior to a 1000Hz, 83dB, repetitive sound (30s), in two sessions, with a 24h between-session interval. Both LD and LL birds were subdivided in 8 groups, each one tested at a different time (3, 6, 9, 12, 15, 18,21 or 24h). Results indicated diurnal variation of general activity with peaks at 6h and 18h and an intermediary one at 12h (p < 0,05) and a robust diurnal rhythm of plasmatic melatonin (p < 0,001) under LD. Both of these rhythms disappeared under LL conditions. The curve of median cummulative corticosterone plasmatic concentrations was displaced to higher values under LL but showed a similar pattern as in LD (p = 0.002). Habituation data for the LD condition indicated nightday differences with habituation learning only during the day times. Under LL conditions birds habituated to the sound at every time, except during the 21 :00 and 24:00h sessions. Constant light is a stressful stimulus for pigeons as indicated by the increase in the corticosterone levels. This change in corticosterone added to the blunting of the melatonin rhythm in LL conditions may interact in a modulatory way in order to guarantee an effective system of endogenous temporal organization. This modulatory hormonal substrate may interact with the neural system of biological timing and contribute to the changes observed in the diurnal variation of general activity and habituation learning / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / En los anfibios anuros, la comunicación acústica juega un rol fundamental en la reproducción, ya que durante la estación reproductiva, los machos generalmente forman coros donde decenas o cientos de individuos emiten cantos o “llamadas de advertencia” para atraer a las hembras, las que a su vez “eligen” entre las potenciales parejas a través de la información codificada en estos cantos. Se han descrito diversos factores que pueden afectar las vocalizaciones de los anuros y por ende, la reproducción, existiendo un cuerpo de evidencia cada vez mayor que señala a los niveles circulantes de hormonas esteroidales como uno de estos factores. En esta memoria se analizó la influencia de la hormona corticosterona (CORT) en la percepción de señales acústicas y en la conducta vocal de machos de Pleurodema thaul, estudiando particularmente el efecto de esta hormona en los umbrales de respuesta vocal evocada y agresiva. Esto se realizó mediante experimentos de canto evocado (“playback”), en los cuales machos de P. thaul fueron estimulados con intensidades crecientes de una imitación sintética de su llamada de advertencia especie-específica, seguido de la toma de muestras de sangre para la medición de sus niveles plasmáticos CORT. Se encontró una correlación negativa entre los niveles circulantes de CORT y los umbrales de respuesta vocal evocada de los machos, pero no se encontró correlación estadísticamente significativa entre esta hormona y el umbral de respuesta agresiva. A su vez, se encontró una correlación negativa entre la superficie corporal y los umbrales de respuesta vocal evocada de los sujetos experimentales. Estos datos sugieren un efecto positivo, aunque indirecto, de la CORT sobre la conducta reproductiva de este anuro, disminuyendo la intensidad de sonido con que son percibidas las llamadas de advertencia de sus vecinos más cercanos

Durante as duas primeiras semanas após o nascimento, os ratos mostram respostas neuroendócrinas diminuídas ao estresse, caracterizando uma fase conhecida como o “período hiporresponsivo ao estresse”. No entanto, é um período sensível do desenvolvimento do sistema nervoso, no qual o animal é suscetível a eventos ambientais, tais como estresse e qualidade do cuidado materno, os quais podem ter efeitos duradouros no indivíduo. No presente estudo, foram investigados os níveis plasmáticos de corticosterona e ocitocina e a atividade monoaminérgica central em ratos neonatos submetidos ao estresse por frio. Também foram investigadas as possíveis influências do gênero e do cuidado materno recebido. No final do 1º dia pós-parto (P0), 60 ratas Wistar tiveram suas ninhadas padronizados em 8 filhotes. Do P1 ao P10, as mães tiveram seus comportamentos maternos analisados de acordo com trabalhos anteriores, nos quais o comportamento de lambida foi tido como uma medida de qualidade de cuidado materno (freqüência média de lambida da população = 5,52 ± 0,19). As mães apresentando as menores e as maiores freqüências de lambida foram selecionadas como Pouco-Cuidadoras (média<4,18, n=12) e Muito- Cuidadoras (média>6,99, n=10), respectivamente. No P13, um par de filhotes foi removido da ninhada e imediatamente sacrificado por decapitação (grupo controle) e outros dois pares foram removidos da ninhada e colocados em um recipiente plástico dentro de uma câmara fria (0ºC, 6 min.), sendo sacrificados 15 e 30 min. após o término do estresse por frio. O sangue do tronco foi colhido para radioimunoensaio de corticosterona e ocitocina plasmáticas. Os encéfalos foram rapidamente removidos para dissecção dos hipotálamos e hipocampos que foram usados na análise das monoaminas e seus metabólitos na Cromatografia Líquida de Alta Performance. A ANOVA de três vias com Post Hoc de Duncan mostrou um efeito do estresse aumentando a corticosterona plasmática (p<0,001), comparada ao período pré-estresse (basal). As filhotes fêmeas de ambos os grupos e os filhotes machos e fêmeas Muito- Cuidados apresentaram níveis maiores de ocitocina plasmática (p<0,05 para ambos), comparados aos Pouco-Cuidados. O estresse também diminuiu a atividade da dopamina (p=0,05), comparado aos grupos controles. O efeito do cuidado materno foi também observado no hipocampo, cuja atividade serotonérgica foi maior em filhotes Muito- Cuidados (p=0,05), comparados a filhotes Pouco-Cuidados, independente do gênero. Conforme relatado anteriormente em outros trabalhos, o estresse aumenta a corticosterona plasmática em filhotes, mesmo no período hiporresponsivo. Os níveis plasmáticos aumentados de ocitocina na prole Muito-Cuidada estão de acordo com evidências a respeito do papel deste hormônio no apego mãe-filhote. A ocitocina aumentada em filhotes fêmeas mostra que diferenças hormonais quanto ao gênero já estão presentes no início da vida de roedores. Interessantemente, o estresse diminuiu a atividade dopaminérgica, o que está de acordo com resultados encontrados em certas áreas hipotalâmicas de animais adultos expostos ao frio. É sugerido que esse efeito seja devido à peculiaridade do estresse por frio, uma vez que as respostas monoaminérgicas podem variar dependendo do estressor usado. O hipocampo foi sensível ao cuidado materno, o qual já foi anteriormente indicado por ser uma importante estrutura encefálica cuja atividade é influenciada por diferentes qualidades de cuidado materno por meio da sinalização serotonérgica. / During the first two weeks after birth the rats show decreased neuroendocrine responses to stress, characterizing a stage known as “stress hyporesponsive period”. However, this is a neurodevelopmental sensitive period in which the animal is susceptible to environmental events, such as stress and the quality of maternal care, which may have long-term effects upon the individual. It was investigated plasma corticosterone and oxytocin, and central monoaminergic activity in neonatal rats submitted to cold stress. It was also investigated the possible influences of gender and maternal care received. In the end of 1° postpartum day (P0), the 60 Wistar dams had their litters culled to 8 pups. From P1 to P10, dams had their maternal behaviour analysed according to previous works, in which licking behaviour was taken as a measure of the quality of maternal care (population’s mean licking frequency= 5.52 ± 0.1863). Dams showing the lower and higher frequencies of licking were selected as Low Licking (mean<4.1814, n=12) and High Licking (mean>6.991, n=10), respectively. At P13, a pair of pups was removed from the litter and immediately sacrificed by decapitation (control group) and other two pairs were removed from the litter and placed in a plastic container inside a cold chamber (0ºC, 6 min), being sacrificed 15 and 30 min after the termination of the cold stress. Blood trunk was taken for plasma corticosterone and oxytocin radioimmunoassay. The brains were quickly removed for dissection of the hypothalami and hippocampi for monoamine and their metabolites High Performance Liquid Chromatography analysis. The three-way ANOVA with Duncan Post Hoc showed an effect of stress increasing plasma corticosterone (p<0.001) compared to the control group (basal situation). The female pups of both groups and High Licked male and female pups showed higher levels of plasma oxytocin (p<0.05 for both). The stress also decreased hypothalamic dopamine turnover (p=0.05) compared to the control groups. The maternal effect was also found in the hippocampus, whose serotonergic activitiy was increased in High Licked pups (p=0.05), independent of gender. As previously reported in other works, stress increases plasma corticosterone in the pups even in the stress hyporesponsive period. The increased plasma oxytocin levels in the High Licked offspring are according to evidences supporting the role of this hormone upon the mother-infant attachment. The increased oxytocin in female pups shows that hormonal gender differences are present in the early life of rodents. Interestingly, it was found that stress decreased the hypothalamic dopaminergic activity, which is according to results found in certain hypothalamic areas of adult animals exposed to cold. It is suggested that this is due to the peculiarity of cold stress, since the monoaminergic responses vary depending on the stressor used. The only central effect of maternal care was found in the hippocampus, which was previously found to be an important brain structure whose activity is influenced by different qualities of maternal care through serotonergic signaling.

Durante as duas primeiras semanas após o nascimento, os ratos mostram respostas neuroendócrinas diminuídas ao estresse, caracterizando uma fase conhecida como o “período hiporresponsivo ao estresse”. No entanto, é um período sensível do desenvolvimento do sistema nervoso, no qual o animal é suscetível a eventos ambientais, tais como estresse e qualidade do cuidado materno, os quais podem ter efeitos duradouros no indivíduo. No presente estudo, foram investigados os níveis plasmáticos de corticosterona e ocitocina e a atividade monoaminérgica central em ratos neonatos submetidos ao estresse por frio. Também foram investigadas as possíveis influências do gênero e do cuidado materno recebido. No final do 1º dia pós-parto (P0), 60 ratas Wistar tiveram suas ninhadas padronizados em 8 filhotes. Do P1 ao P10, as mães tiveram seus comportamentos maternos analisados de acordo com trabalhos anteriores, nos quais o comportamento de lambida foi tido como uma medida de qualidade de cuidado materno (freqüência média de lambida da população = 5,52 ± 0,19). As mães apresentando as menores e as maiores freqüências de lambida foram selecionadas como Pouco-Cuidadoras (média<4,18, n=12) e Muito- Cuidadoras (média>6,99, n=10), respectivamente. No P13, um par de filhotes foi removido da ninhada e imediatamente sacrificado por decapitação (grupo controle) e outros dois pares foram removidos da ninhada e colocados em um recipiente plástico dentro de uma câmara fria (0ºC, 6 min.), sendo sacrificados 15 e 30 min. após o término do estresse por frio. O sangue do tronco foi colhido para radioimunoensaio de corticosterona e ocitocina plasmáticas. Os encéfalos foram rapidamente removidos para dissecção dos hipotálamos e hipocampos que foram usados na análise das monoaminas e seus metabólitos na Cromatografia Líquida de Alta Performance. A ANOVA de três vias com Post Hoc de Duncan mostrou um efeito do estresse aumentando a corticosterona plasmática (p<0,001), comparada ao período pré-estresse (basal). As filhotes fêmeas de ambos os grupos e os filhotes machos e fêmeas Muito- Cuidados apresentaram níveis maiores de ocitocina plasmática (p<0,05 para ambos), comparados aos Pouco-Cuidados. O estresse também diminuiu a atividade da dopamina (p=0,05), comparado aos grupos controles. O efeito do cuidado materno foi também observado no hipocampo, cuja atividade serotonérgica foi maior em filhotes Muito- Cuidados (p=0,05), comparados a filhotes Pouco-Cuidados, independente do gênero. Conforme relatado anteriormente em outros trabalhos, o estresse aumenta a corticosterona plasmática em filhotes, mesmo no período hiporresponsivo. Os níveis plasmáticos aumentados de ocitocina na prole Muito-Cuidada estão de acordo com evidências a respeito do papel deste hormônio no apego mãe-filhote. A ocitocina aumentada em filhotes fêmeas mostra que diferenças hormonais quanto ao gênero já estão presentes no início da vida de roedores. Interessantemente, o estresse diminuiu a atividade dopaminérgica, o que está de acordo com resultados encontrados em certas áreas hipotalâmicas de animais adultos expostos ao frio. É sugerido que esse efeito seja devido à peculiaridade do estresse por frio, uma vez que as respostas monoaminérgicas podem variar dependendo do estressor usado. O hipocampo foi sensível ao cuidado materno, o qual já foi anteriormente indicado por ser uma importante estrutura encefálica cuja atividade é influenciada por diferentes qualidades de cuidado materno por meio da sinalização serotonérgica. / During the first two weeks after birth the rats show decreased neuroendocrine responses to stress, characterizing a stage known as “stress hyporesponsive period”. However, this is a neurodevelopmental sensitive period in which the animal is susceptible to environmental events, such as stress and the quality of maternal care, which may have long-term effects upon the individual. It was investigated plasma corticosterone and oxytocin, and central monoaminergic activity in neonatal rats submitted to cold stress. It was also investigated the possible influences of gender and maternal care received. In the end of 1° postpartum day (P0), the 60 Wistar dams had their litters culled to 8 pups. From P1 to P10, dams had their maternal behaviour analysed according to previous works, in which licking behaviour was taken as a measure of the quality of maternal care (population’s mean licking frequency= 5.52 ± 0.1863). Dams showing the lower and higher frequencies of licking were selected as Low Licking (mean<4.1814, n=12) and High Licking (mean>6.991, n=10), respectively. At P13, a pair of pups was removed from the litter and immediately sacrificed by decapitation (control group) and other two pairs were removed from the litter and placed in a plastic container inside a cold chamber (0ºC, 6 min), being sacrificed 15 and 30 min after the termination of the cold stress. Blood trunk was taken for plasma corticosterone and oxytocin radioimmunoassay. The brains were quickly removed for dissection of the hypothalami and hippocampi for monoamine and their metabolites High Performance Liquid Chromatography analysis. The three-way ANOVA with Duncan Post Hoc showed an effect of stress increasing plasma corticosterone (p<0.001) compared to the control group (basal situation). The female pups of both groups and High Licked male and female pups showed higher levels of plasma oxytocin (p<0.05 for both). The stress also decreased hypothalamic dopamine turnover (p=0.05) compared to the control groups. The maternal effect was also found in the hippocampus, whose serotonergic activitiy was increased in High Licked pups (p=0.05), independent of gender. As previously reported in other works, stress increases plasma corticosterone in the pups even in the stress hyporesponsive period. The increased plasma oxytocin levels in the High Licked offspring are according to evidences supporting the role of this hormone upon the mother-infant attachment. The increased oxytocin in female pups shows that hormonal gender differences are present in the early life of rodents. Interestingly, it was found that stress decreased the hypothalamic dopaminergic activity, which is according to results found in certain hypothalamic areas of adult animals exposed to cold. It is suggested that this is due to the peculiarity of cold stress, since the monoaminergic responses vary depending on the stressor used. The only central effect of maternal care was found in the hippocampus, which was previously found to be an important brain structure whose activity is influenced by different qualities of maternal care through serotonergic signaling.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:45:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012 / O estresse no inicio da vida aumenta a vulnerabilidade a disturbios psiquiatricos, como depressao e ansiedade, assim como ao abuso de drogas. Um paradigma utilizado para estudar esses efeitos em roedores e a separacao materna longa (SML). Em um estudo previo realizado por nosso grupo, a SML acelerou o desenvolvimento da sensibilizacao comportamental ao efeito estimulante do etanol (EtOH) em femeas e este efeito pode ter sido decorrente de diversas alteracoes, entre elas, hormonais, neuroquimicas e comportamentais. No presente estudo procuramos dissecar essas influencias dos efeitos da SML sobre a sensibilizacao comportamental ao EtOH. Para isso, foram utilizados camundongos machos e femeas, submetidos a SML, que consiste em separar os filhotes de suas maes por 3h/dia do 2º ao 14º dia de vida. O grupo controle foi formado por ninhadas nao manipuladas, exceto para a limpeza das gaiolas-moradia (cuidado padrao de bioterio - CPB). No primeiro experimento, avaliou-se o efeito da SML per se ou apos o tratamento cronico de EtOH na atividade locomotora, nas concentracoes plasmaticas de corticosterona (CORT) e de monoaminas no cortex frontal, estriado e hipocampo, dosadas pelo metodo de ohigh performance liquid chromatographyo (HPLC). Os principais resultados deste experimento mostraram que os machos submetidos a SML e tratados cronicamente com EtOH apresentaram maiores concentracoes de CORT plasmatica e monoaminas hipocampais. Esse ultimo resultado poderia sugerir alteracao do comportamento tipo ansioso, que foi avaliado no Experim ento 2. Assim, os animais CPB e SML foram testados no labirinto em cruz elevado apos a administracao aguda de salina ou de 1,0 ou de 1,25 g/kg de EtOH e os machos SML apresentaram maior comportamento tipoansioso apos a administracao de salina, enquanto que foram mais sensiveis ao efeito ansiolitico do EtOH do que os machos CPB. Outros sistemas envolvidos no processo da sensibilizacao comportamental sao os sistemas opioidergico e do hormonio liberador de corticotrofina (CRH), que foram testados, respectivamente, nos experimentos tres e quatro. Os antagonistas opioidergico (naltrexone) e do receptor 1 do CRH (CRH-R1; CP-154526) diminuiram ou bloquearam a sensibilizacao comportamental dependendo do sexo, sendo que a SML nao modificou este efeito. Concluindo, as concentracoes de CORT e monoaminas foram mais sensiveis aos efeitos da SML, sendo que os machos foram mais influenciados pela manipulacao. A sensibilizacao comportamental nao foi modificada pela SML e o bloqueio da expressao desse fenomeno pelos antagonistas opioidergico e de CRH-R1 ocorreu de maneira sexo-dependente, sendo que os machos foram mais sensiveis ao naltrexone e as femeas ao antagonista de CRH-R1 / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-11-25 / Tem-se proposto que o estresse pré-natal (EPN) estaria associado com o prejuízo no desenvolvimento social e comportamental da prole. Fatores nutricionais durante a prenhez e lactação também podem influenciar o desenvolvimento fetal e pós-natal. Este estudo avaliou o desenvolvimento pós-natal de filhotes expostos ao EPN e à suplementação com óleo de peixe e gordura de coco in utero e durante a lactação. Ratas Wistar foram distribuídas em três grupos: dieta regular, dieta suplementada com gordura de coco ou com óleo de peixe. Constatada a prenhez, foram subdivididas em dois grupos: controle (CLT) e EPN. O estresse de restrição foi aplicado entre o 14º e 20º dias de prenhez e a suplementação, mantida durante a prenhez e lactação. O desenvolvimento dos filhotes foi avaliado pelo peso corporal, reflexo postural, abertura dos olhos e a ambulação entre o 1º e 21º dias de vida. As concentrações de corticosterona materna foram determinadas durante o procedimento de estresse: 2 dias antes do EPN (basal) e imediatamente após o EPN nos dias 14 e 21 de prenhez. O comportamento tipo-depressivo no teste da natação forçada e as concentrações de corticosterona foram medidos em machos adultos expostos ao EPN. O ganho de peso das mães foi pejudicado pelo EPN, sendo que as concentrações de corticosterona estavam aumentadas no grupo EPN em relação ao grupo controle. Ao nascer, as proles do grupo EPN apresentaram menor peso, sendo que este efeito foi mantido até o desmame e prevenido pelas dietas de coco e peixe. A dieta de coco reduziu a latência para o reflexo postural de fêmeas no 1º dia de vida em relação aos outros grupos e em machos, a dieta de peixe prejudicou este comportamento comparado com a dieta regular. Em relação à ambulação, o EPN aumentou a ambulação em machos e fêmeas, sendo que este efeito foi prevenido pela dieta de peixe em fêmeas. Na idade adulta, o EPN causou redução no peso de machos adultos quando comparado ao de animais controle. Quando os animais foram avaliados no teste da natação forçada, encontrou-se redução significativa no tempo de imobilidade em machos adultos EPN quando comparados aos controles, sugerindo um efeito tipo anti-depressivo. A atividade motora foi avaliada no campo aberto sendo que os animais não apresentaram mudanças na ambulação. Em relação às concentrações plasmáticas de corticosterona, nossos resultados mostraram que imediatamente após o teste, os machos do grupo EPN-dieta regular apresentaram menor liberação de corticosterona quando comparados com os controles. As dietas de peixe e coco também reduziram a concentração de corticosterona em machos controles em relação ao grupo controledieta regular. Em conclusão, o desenvolvimento pós-natal, do nascimento até idade adulta, foi influenciado pelo EPN e pelas dietas oferecidas. Algumas das alterações resultantes do EPN foram prevenidas pelas dietas de coco e peixe. Estes resultados mostram que o EPN causa conseqüências que perduram até a idade adulta. Além disso, ambas as manipulações, EPN e as dietas, influenciaram a liberação de corticosterona na idade adulta. / Adequate development of the central nervous system depends on prenatal and postnatal factors. On one hand, prenatal stress (PNS) has been implicated in impaired development of the offspring. On the other hand, nutritional factors during pregnancy and lactation can influence fetal and postnatal growth. This study assessed the postnatal development of rat offspring exposed to PNS whose mothers were fed with different diets during pregnancy and lactation. Female Wistar rats were assigned to one of three groups: regular diet, diet supplemented with coconut fat or fish oil. When pregnancy was confirmed, they were distributed into control (CTL) or PNS (daily restraint stress during the last week of pregnancy) groups. . Body weight, righting reflex, eye opening and locomotion were assessed during different phases of development. Maternal corticosterone levels were determined throughout the experimental period: two days before PNS (baseline) and immediately after the stress sessions on days 14 and 21 of pregnancy. The depressive–like behavior in the forced swimming test and corticosterone levels were measured in the adult male offspring exposed to PNS. Maternal weight gain was impaired by PNS. Corticosterone levels were higher in PNS groups compared to the control group. At birth, PNS males and females weighted less than those on the group CTL. At 21 days of age, PNS males and females fed the regular diet had lower body weight than their respective CTL and coconut fat, but fish oil prevented this effect. PNS increased the latency of righting reflex at day 1 of age, and this impairment was prevented by coconut fat-supplemented diet. However, fish oil impaired the righting reflex in CTL males. PNS induced hyperactivity in 13 day-old male and female pups, and this effect was prevented by fish oil supplementation only in females. In the adulthood, PNS rats showed lower body weight than control. However, the immobility time was lower in PNS than in control rats. After the forced swimming test, plasma corticosterone levels were decreased in PNS fed regular diet compared to control in same diet. No differences were observed with either diet on body weight or immobility behavior. However, the corticosterone levels were modified by early fish oil or coconut fat supplement. The corticosterone response was also lower in control rats whose mothers were fed diets supplemented with fish oil or coconut fat than regular diet. In conclusion, postnatal development from birth to weaning was influenced by PNS and diet and some of the alterations induced by PNS were prevented by coconut fat and fish oil. These data support the idea that PNS causes long-term consequences in adulthood. Furthermore, both manipulations, PNS and supplemented diets, influenced the corticosterone response in adulthood. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Durante as duas primeiras semanas após o nascimento, os ratos mostram respostas neuroendócrinas diminuídas ao estresse, caracterizando uma fase conhecida como o “período hiporresponsivo ao estresse”. No entanto, é um período sensível do desenvolvimento do sistema nervoso, no qual o animal é suscetível a eventos ambientais, tais como estresse e qualidade do cuidado materno, os quais podem ter efeitos duradouros no indivíduo. No presente estudo, foram investigados os níveis plasmáticos de corticosterona e ocitocina e a atividade monoaminérgica central em ratos neonatos submetidos ao estresse por frio. Também foram investigadas as possíveis influências do gênero e do cuidado materno recebido. No final do 1º dia pós-parto (P0), 60 ratas Wistar tiveram suas ninhadas padronizados em 8 filhotes. Do P1 ao P10, as mães tiveram seus comportamentos maternos analisados de acordo com trabalhos anteriores, nos quais o comportamento de lambida foi tido como uma medida de qualidade de cuidado materno (freqüência média de lambida da população = 5,52 ± 0,19). As mães apresentando as menores e as maiores freqüências de lambida foram selecionadas como Pouco-Cuidadoras (média<4,18, n=12) e Muito- Cuidadoras (média>6,99, n=10), respectivamente. No P13, um par de filhotes foi removido da ninhada e imediatamente sacrificado por decapitação (grupo controle) e outros dois pares foram removidos da ninhada e colocados em um recipiente plástico dentro de uma câmara fria (0ºC, 6 min.), sendo sacrificados 15 e 30 min. após o término do estresse por frio. O sangue do tronco foi colhido para radioimunoensaio de corticosterona e ocitocina plasmáticas. Os encéfalos foram rapidamente removidos para dissecção dos hipotálamos e hipocampos que foram usados na análise das monoaminas e seus metabólitos na Cromatografia Líquida de Alta Performance. A ANOVA de três vias com Post Hoc de Duncan mostrou um efeito do estresse aumentando a corticosterona plasmática (p<0,001), comparada ao período pré-estresse (basal). As filhotes fêmeas de ambos os grupos e os filhotes machos e fêmeas Muito- Cuidados apresentaram níveis maiores de ocitocina plasmática (p<0,05 para ambos), comparados aos Pouco-Cuidados. O estresse também diminuiu a atividade da dopamina (p=0,05), comparado aos grupos controles. O efeito do cuidado materno foi também observado no hipocampo, cuja atividade serotonérgica foi maior em filhotes Muito- Cuidados (p=0,05), comparados a filhotes Pouco-Cuidados, independente do gênero. Conforme relatado anteriormente em outros trabalhos, o estresse aumenta a corticosterona plasmática em filhotes, mesmo no período hiporresponsivo. Os níveis plasmáticos aumentados de ocitocina na prole Muito-Cuidada estão de acordo com evidências a respeito do papel deste hormônio no apego mãe-filhote. A ocitocina aumentada em filhotes fêmeas mostra que diferenças hormonais quanto ao gênero já estão presentes no início da vida de roedores. Interessantemente, o estresse diminuiu a atividade dopaminérgica, o que está de acordo com resultados encontrados em certas áreas hipotalâmicas de animais adultos expostos ao frio. É sugerido que esse efeito seja devido à peculiaridade do estresse por frio, uma vez que as respostas monoaminérgicas podem variar dependendo do estressor usado. O hipocampo foi sensível ao cuidado materno, o qual já foi anteriormente indicado por ser uma importante estrutura encefálica cuja atividade é influenciada por diferentes qualidades de cuidado materno por meio da sinalização serotonérgica. / During the first two weeks after birth the rats show decreased neuroendocrine responses to stress, characterizing a stage known as “stress hyporesponsive period”. However, this is a neurodevelopmental sensitive period in which the animal is susceptible to environmental events, such as stress and the quality of maternal care, which may have long-term effects upon the individual. It was investigated plasma corticosterone and oxytocin, and central monoaminergic activity in neonatal rats submitted to cold stress. It was also investigated the possible influences of gender and maternal care received. In the end of 1° postpartum day (P0), the 60 Wistar dams had their litters culled to 8 pups. From P1 to P10, dams had their maternal behaviour analysed according to previous works, in which licking behaviour was taken as a measure of the quality of maternal care (population’s mean licking frequency= 5.52 ± 0.1863). Dams showing the lower and higher frequencies of licking were selected as Low Licking (mean<4.1814, n=12) and High Licking (mean>6.991, n=10), respectively. At P13, a pair of pups was removed from the litter and immediately sacrificed by decapitation (control group) and other two pairs were removed from the litter and placed in a plastic container inside a cold chamber (0ºC, 6 min), being sacrificed 15 and 30 min after the termination of the cold stress. Blood trunk was taken for plasma corticosterone and oxytocin radioimmunoassay. The brains were quickly removed for dissection of the hypothalami and hippocampi for monoamine and their metabolites High Performance Liquid Chromatography analysis. The three-way ANOVA with Duncan Post Hoc showed an effect of stress increasing plasma corticosterone (p<0.001) compared to the control group (basal situation). The female pups of both groups and High Licked male and female pups showed higher levels of plasma oxytocin (p<0.05 for both). The stress also decreased hypothalamic dopamine turnover (p=0.05) compared to the control groups. The maternal effect was also found in the hippocampus, whose serotonergic activitiy was increased in High Licked pups (p=0.05), independent of gender. As previously reported in other works, stress increases plasma corticosterone in the pups even in the stress hyporesponsive period. The increased plasma oxytocin levels in the High Licked offspring are according to evidences supporting the role of this hormone upon the mother-infant attachment. The increased oxytocin in female pups shows that hormonal gender differences are present in the early life of rodents. Interestingly, it was found that stress decreased the hypothalamic dopaminergic activity, which is according to results found in certain hypothalamic areas of adult animals exposed to cold. It is suggested that this is due to the peculiarity of cold stress, since the monoaminergic responses vary depending on the stressor used. The only central effect of maternal care was found in the hippocampus, which was previously found to be an important brain structure whose activity is influenced by different qualities of maternal care through serotonergic signaling.