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Preparação e avaliação farmacológica de derivados dos lipídios fenólicos do líquido da casca da castanha de caju

Gonzaga, Wellington Alves 02 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Kathryn Cardim Araujo (kathryn.cardim@gmail.com) on 2010-10-08T21:09:56Z No. of bitstreams: 1 2008-Wellington Alves Gonzaga.pdf: 2782974 bytes, checksum: 11f9e38188de54dc86543df7ffb27125 (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-10-08T22:49:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008-Wellington Alves Gonzaga.pdf: 2782974 bytes, checksum: 11f9e38188de54dc86543df7ffb27125 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-10-08T22:49:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008-Wellington Alves Gonzaga.pdf: 2782974 bytes, checksum: 11f9e38188de54dc86543df7ffb27125 (MD5) / O presente trabalho descreve a utilização do Líquido da Casca da Castanha de Caju (LCC), fonte abundante de lipídios fenólicos nãoisoprenóides encontrada no País, como matéria-prima para a obtenção de substâncias com aplicações sintéticas e biológicas em potencial. Os processos de extração, separação e caracterização dos lipídios fenólicos do LCC foram conseguidos por meio de procedimentos de domínio no nosso grupo de pesquisa. Foram realizadas modificações químicas moderadas (e.g. hidrogenação, acetilação, metilação) nos grupos funcionais dos ácidos anacárdicos e cardanóis. Adicionalmente, foram realizadas algumas modificações de maior complexidade visando à preparação de derivados 4- hidroxicumarínicos. As matérias-primas, os intermediários e derivados envolvidos neste estudo foram purificados por cromatografia em coluna ou recristalização e, caracterizados por métodos espectroscópicos de IV, RMN 1H e RMN 13C. Paralelamente, as substâncias foram submetidas a testes biológicos. No ensaio utilizando Artemia salina apenas o ácido tetrahidroanacárdico (DL50 0,252 ppm) apresentou atividade. As demais substâncias derivadas do LCC não foram avaliadas no teste de Artemia salina devido à insolubilidade nas condições do ensaio. O ensaio da redução do complexo de fosfomolibdênio foi realizado de acordo com uma modificação do método de Prieto. Para validação e construção da curva-padrão, ácido salicílico, butilidroxitolueno (BHT) e quercetina foram usados como padrões. Dentre as substâncias testadas, 1-(2- hidróxi-4-pentadecil acetofenona (46), 2-hidróxi-6-pentadecil-benzoato de metila (48), ácido 2-acetiloxi-6-pentadecil-benzóico (49) e o acetato de 3- pentadecilfenol (32) apresentaram um perfil antioxidante semelhante ao do BHT. No teste para verificar a atividade fotoprotetora a substância 48 apresentou melhor resultado na região do UVB. No ensaio de inibição de crescimento celular ex-vivo usando células OSCC, a substância 46, a 49 e a 32 apresentaram atividade. Já no ensaio com células MCF-7 o cardanol saturado, 2-metóxi-6-pentadecil benzoato de metila e LCC técnico apresentaram maior atividade. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The present work describes the utilization of Cashew Nut-Shell Liquid (CNSL), abundant source of phenolic non-isoprenoids lipids from our country, as raw material for preparation of compounds with synthetic applications as well as biological useful. The extraction, separation and characterization of CNSL phenolic nonisoprenoids lipids were done by procedures well-known in our research group. Moderates modifications (e.g. hydrogenation, acetylation, metylation) were accomplished on functional groups of anacardic acids and cardanols. Additionally, were done more complex modifications aiming the preparation of 4-hydroxycoumarin derivatives. The natural lipids, all intermediates and derivatives involved at this study were purified by chromatographic column or recrystalization, and characterization by spectrometric methods (IR, 1H and 13C NMR). Simultaneously, all substances were submitted to biological assays. By Artemia salina assay only saturated anacardic acid shown activity (DL50 0,252 ppm). The other CNSL derivatives were not evaluated Artemia salina test because they were not soluble on the assay conditions. The reduction phosphomolybdenum complex assay was done by a modification on Prieto’s method. For validation and construction of standard curve, salicylic acid, BHT and quercetin were used as standard. Among all assayed compounds, 1-(2- hydroxi-4-pentadecyl) acetophenone (46), methyl 2-hydroxi-6- pentadecylbenzoate (48), 2-(acetyloxy)-6-pentadecylbenzoic acid (49) and anacardyl acetate (32) exhibited antioxidant property similar to BHT. In relation to the fotoproctetion activity the methyl ester of anacardic acid exhibited best result on UVB region. By ex vivo cellular inhibition assay using OSCC, the compounds 46, 49 and 32 showed activity. On the other hand, the assay with MCF-7 cells the 3-pentadecylphenol, methyl 2-hydroxi-6-pentadecylbenzoate and CNSL exhibited better activity.
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Metabolismo de lipídios em cetáceos : identificação de estoques populacionais, itens alimentares e gliceroneogênese

Caon, Glauco da Silva January 2007 (has links)
Resumo não disponível.
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Nanoemulsões catiônicas como sistemas de liberação de oligonucleotídeos : formulação e caracterização físico-química

Martini, Érico January 2005 (has links)
Nanoemulsões catiônicas têm sido recentemente consideradas como potenciais sistemas de liberação de oligonucleotídeos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a influência da adição de quantidades crescentes dos lipídeos catiônicos estearilamina (EA), oleilamina (OA) ou DOTAP (DT) sobre propriedades físico-químicas de nanoemulsões como sistemas de liberação de um oligonucleotídeo modelo (pdT16). As formulações foram preparadas pelo procedimento de emulsificação espontânea. As nanoemulsões constituídas de triglicerídeos de cadeia média, lecitina de gema de ovo, glicerol, quantidades crescentes dos lipídeos catiônicos (até 20 mM) e água foram caracterizadas em termos de diâmetro médio, pH, potencial zeta e viscosidade. Baseado nos resultados obtidos, as formulações contendo EA, OA e DT na concentração de 2 mM foram selecionadas para a continuidade do trabalho, uma vez que apresentam diâmetro de gotícula e potencial zeta de cerca de 250 nm e 40-50 mV, respectivamente. A taxa de associação do pdT16 às nanoemulsões foi determinada, indiretamente, pelo doseamento deste, na fase aquosa externa após separação em membranas de ultrafiltração/centrifugação, por meio de espectrofotometria no UV. A maior taxa de associação do pdT16 foi detectada para a formulação contendo o lipídeo catiônico DT (até ~70 mg/g de fase interna). Evidências adicionais da associação do pdT16 com as nanoemulsões foram detectadas pelo aumento do diâmetro de gotícula, inversão do potencial zeta e morfologia das gotículas. Em uma última etapa, um estudo preliminar da liberação do pdT16 foi realizado especialmente para a formulação contendo o lipídeo catiônico DT. O fator de diluição e relação de cargas [+/-] foram identificados como os principais parâmetros que influenciam a liberação do pdT16 a partir das nanoemulsões. Em conclusão, o conjunto dos resultados obtidos demonstra a influência da concentração e da natureza do lipídeo catiônico empregado sobre as propriedades físico-químicas de nanoemulsões catiônicas como sistemas de liberação de oligonucleotídeos.
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Metabolismo de lipídios em cetáceos : identificação de estoques populacionais, itens alimentares e gliceroneogênese

Caon, Glauco da Silva January 2007 (has links)
Resumo não disponível.
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Perfil epidemiológico, clínico e metabólico de mães e recém-nascidos em maternidade pública de Salvador

Amorim, Lídia Pereira de January 2013 (has links)
Submitted by Edileide Reis (leyde-landy@hotmail.com) on 2015-04-14T01:28:13Z No. of bitstreams: 1 Lídia Pereira de Amorim.pdf: 268352 bytes, checksum: c8d0a2f0e04225a79d61fd18573857f0 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-14T01:28:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lídia Pereira de Amorim.pdf: 268352 bytes, checksum: c8d0a2f0e04225a79d61fd18573857f0 (MD5) Previous issue date: 2013 / O estudo do perfil epidemiológico, clínico e metabólico de mães e recém-nascidos pode melhorar a abordagem preventiva e reduzir risco de aterosclerose para o complexo materno-fetal. Objetivos: Descrever o perfil epidemiológico, clínico e metabólico de mães e recém-nascidos e correlacionar o perfil clínico e metabólico. Desenho do estudo: transversal, descritivo e analítico. Metodologia: 105 gestantes e neonatos estudados entre maio e agosto de 2008. Coletados dados maternos históricos, físicos e laboratoriais (pré-gestacionais, gestacionais e puerperais), além de dados neonatais físicos e laboratoriais. Resultados: idade de 25,7 ± 6,5 anos, 93,3% de não brancas, escolaridade de 4 a 7 anos (50,0%) e 54,2% com atividade remunerada. Eventos adversos: hipertensão arterial (16,2%), pré-eclâmpsia (1,9%), e diabetes gestacional (1,9%); variações: peso, Δ= +4,5Kg, IMC, Δ= +2Kg/m2; variações puerperais: PAS, Δ= -3,7mmHg e PAD, Δ= -2,3mmHg; parto cesária; neonatos com peso elevado (16,7%), prematuros (9,5%). Valores maternos elevados do colesterol total (43,8%), triglicérides (44,8%), LDL-C (15,2%), TG/HDL-C (25,7%) e glicemia casual (7,6%); no RN glicemia elevada em 67 (64%) e o perfil lipídico, em mediana e IIQ, mostrou colesterol total, 59mg/dL (48-77mg/dL); LDL-C, 29mg/dL (22-39mg/dL); HDL-C, 26mg/dL (21-32mg/dL); VLDL-C, 4,6mg/dL (3,4-7,1mg/dL); TG, 23mg/dL (18-36mg/dL); TG/HDL, 0,9 (0,6-1,4); LDL/HDL, 1,1 (0,6-1,4); glicemia, 73mg/dL (53-96mg/dL); Hemoglobina, 15g/dL (14-16g/dL) e Hematócrito, 46mg/dL (43-48mg/dL). Conclusões: A gestação pode representar um potencial fator de risco de aterosclerose para o complexo materno-fetal. Assim, é importante monitorar o perfil lipídico durante a gestação e controlá-lo com medidas não farmacológicas, como nutrição e atividade física adequada, além de reavaliar após a gestação.
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Bioprospecção de leveduras oleaginosas capazes de utilizar o glicerol bruto como fonte de carbono.

Siqueira, Filipe da Silva January 2015 (has links)
Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2015-03-24T20:39:47Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_BioprospecçãoLevedurasOleaginosas.pdf: 1524822 bytes, checksum: edff16b7f4e7acc91d279a9b13ad296a (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2015-03-25T15:49:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_BioprospecçãoLevedurasOleaginosas.pdf: 1524822 bytes, checksum: edff16b7f4e7acc91d279a9b13ad296a (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-25T15:49:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_BioprospecçãoLevedurasOleaginosas.pdf: 1524822 bytes, checksum: edff16b7f4e7acc91d279a9b13ad296a (MD5) Previous issue date: 2015 / Os biocombustíveis, bioetanol e biodiesel, estão entre as fontes de energia alternativas promissoras para reduzir a utilização dos combustíveis fósseis. O biodiesel é um éster metílico ou etílico obtido a partir da transesterificação de óleos vegetais na presença de um álcool. Esta reação gera como subproduto, o glicerol bruto (GB), que equivale a 10% de todo volume gerado. Uma alternativa para o consumo do GB é a sua utilização como fonte de carbono por micro-organismos oleaginosos. Os óleos estocados podem ser utilizados como uma fonte alternativa de óleos para produção do biodiesel. Os micro-organismos oleaginosos são capazes de acumular mais de 20% de sua biomassa em lipídeos e seus óleos apresentam estrutura química semelhante aos óleos vegetais. Portanto, o objetivo deste trabalho foi selecionar leveduras capazes de metabolizar o glicerol bruto e estocá-lo na forma de lipídeos. Sessenta e três isolados de leveduras oriundas da produção de cachaça foram avaliados quanto à capacidade de crescer na presença de GB, como única fonte de carbono, e armazená-lo na forma de lipídeos. As leveduras foram inoculadas em meio mínimo Synthetic Defined (SD) contendo 10% de GB e incubadas a 23°C, durante um período de 48 horas. No ensaio colorimétrico com Sudan Black (corante lipofílico) as culturas foram fixadas em lâminas e analisadas em microscópio óptico. Vinte e cinco cepas foram selecionadas como leveduras capazes de armazenar lipídeos. Posteriormente, estas cepas foram submetidas a ensaio quantitativo utilizando o corante fluorescente Nile Red. Para isso, foram inoculadas em meio SD com 10% de GB, incubadas a 28°C, sob agitação de 180 RPM, por 48 horas e colocadas em solução Nile Red 0,1 mg/mL por 10 minutos. Seis leveduras apresentaram o dobro da acumulação de lipídeo em comparação a Yarrowia lipolytica (controle positivo). Estas cepas foram posteriormente submetidas à caracterização dos ácidos graxos produzidos, na cromatografia gasosa-Flame Ionization Detector (CG-FID). A cepa LBCM3 apresentou o maior conteúdo lipídico dentre as selecionadas com 36,60% de lipídeos. Além disso, esta foi a única cepa capaz de produzir simultaneamente os ácidos linoléico e linolênico, lipídeos estes importantes para produção de biodiesel. A cepa LBCM17 apresentou o segundo maior conteúdo lipídico com 27,90% de lipídeos totais. As cepas LBCM95 e LBCM98 exibiram 21,90% e 2,17% de lipídeos totais, respectivamente. A LBCM1 apresentou o menor conteúdo lipidíco com 0,22% de lipídeos totais. Os resultados demonstram que as leveduras selecionadas são capazes de utilizar o GB como fonte de carbono e possuem potencial para aplicação na produção de biodiesel. As seis leveduras selecionadas na análise semi-quantitativa, segundo resultado do sequenciamento da região ITS5.8s, são Saccharomyces cerevisiae. _________________________________________________________________________ / ABSTRACT: The biofuels, bioethanol and biodiesel, are among the promising alternative energy sources to reduce the use of fossil fuels. Biodiesel is a methyl or ethyl ester obtained from the transesterification of vegetable oils in the presence of an alcohol. This reaction generates the crude glycerol (CG) as a by-product, which corresponds to 10% of all generated volume. An alternative to consumption of GB is its use as a carbon source for oleaginous microorganisms. These may be used as an alternative source of oils to produce biodiesel. The oleaginous microorganisms are able to accumulate more than 20% of their biomass into lipids and their oils present chemical structure similar to vegetable oils. Therefore, the objective of this work was to select yeast capable of metabolizing the crude glycerol and store it in the form of lipids. Sixty-three yeast strains derived from the cachaça production were evaluated for the ability to grow in the presence of GB, as the only source of carbon and store it in the form of lipids. The strains were inoculated in a minimal SD medium containing GB 10% and incubated at 23°C for a period of 48 hours. The cultures were fixed on slides and analyzed by light microscopy after colorimetric assay with Sudan Black (lipophilic dye). Twenty five strains were selected as yeasts that can store lipids. Subsequently, these strains were subjected to quantitative assay using Nile Red fluorescent dye. To this, were inoculated into Synthetic Defined (SD) medium with GB 10% were incubated at 28°C under agitation of 180 RPM for 48 hours and placed in Nile Red solution 0.1 mg/ml for 10 minutes. Six strains showed twice the accumulation of lipids in comparison to Yarrowia lipolytica (positive control).These strains subsequently underwent characterization of fatty acids produced in the gas chromatography- Flame Ionization Detector (GC-FID). The LBCM3 strain showed the highest lipid content with 36,60 % of lipids. Moreover, this was the only strain able to produce both linoleic and linolenic acids which are important lipids for biodiesel production. The LBCM17 strains exhibited the second highest lipid content with 27,90 % of total lipids. The LBCM95 strains and 98 exhibited 21,90 % and 2,17 % of total lipids respectively. The LBCM1 presented the lowest lipid content with 0,22% of total lipids. The results showed that the selected strains are able to utilize GB as a source of carbon and have potential for use in the production of biodiesel. Six yeasts selected in the semi -quantitative analysis, according to results of sequencing ITS5.8s region, are Saccharomyces cerevisiae.
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Metabolismo de lipídios em cetáceos : identificação de estoques populacionais, itens alimentares e gliceroneogênese

Caon, Glauco da Silva January 2007 (has links)
Resumo não disponível.
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Nanoemulsões catiônicas como sistemas de liberação de oligonucleotídeos : formulação e caracterização físico-química

Martini, Érico January 2005 (has links)
Nanoemulsões catiônicas têm sido recentemente consideradas como potenciais sistemas de liberação de oligonucleotídeos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a influência da adição de quantidades crescentes dos lipídeos catiônicos estearilamina (EA), oleilamina (OA) ou DOTAP (DT) sobre propriedades físico-químicas de nanoemulsões como sistemas de liberação de um oligonucleotídeo modelo (pdT16). As formulações foram preparadas pelo procedimento de emulsificação espontânea. As nanoemulsões constituídas de triglicerídeos de cadeia média, lecitina de gema de ovo, glicerol, quantidades crescentes dos lipídeos catiônicos (até 20 mM) e água foram caracterizadas em termos de diâmetro médio, pH, potencial zeta e viscosidade. Baseado nos resultados obtidos, as formulações contendo EA, OA e DT na concentração de 2 mM foram selecionadas para a continuidade do trabalho, uma vez que apresentam diâmetro de gotícula e potencial zeta de cerca de 250 nm e 40-50 mV, respectivamente. A taxa de associação do pdT16 às nanoemulsões foi determinada, indiretamente, pelo doseamento deste, na fase aquosa externa após separação em membranas de ultrafiltração/centrifugação, por meio de espectrofotometria no UV. A maior taxa de associação do pdT16 foi detectada para a formulação contendo o lipídeo catiônico DT (até ~70 mg/g de fase interna). Evidências adicionais da associação do pdT16 com as nanoemulsões foram detectadas pelo aumento do diâmetro de gotícula, inversão do potencial zeta e morfologia das gotículas. Em uma última etapa, um estudo preliminar da liberação do pdT16 foi realizado especialmente para a formulação contendo o lipídeo catiônico DT. O fator de diluição e relação de cargas [+/-] foram identificados como os principais parâmetros que influenciam a liberação do pdT16 a partir das nanoemulsões. Em conclusão, o conjunto dos resultados obtidos demonstra a influência da concentração e da natureza do lipídeo catiônico empregado sobre as propriedades físico-químicas de nanoemulsões catiônicas como sistemas de liberação de oligonucleotídeos.
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Desenvolvimento de sistema de tratamento e reciclagem de meio de cultivo de microalgas para produção de biodiesel

Lemos, Jacqueline de Souza 15 March 2013 (has links)
Resumo: O uso de lipídios provenientes de microalgas para produção de biodiesel apresenta vantagens consideráveis quando comparado com as tradicionais matérias-primas, porém o custo da produção de microalgas ainda é elevado. Assim o desenvolvimento de um sistema de tratamento e reciclagem de meio de cultivo de microalgas com eficiência similar ao do meio original, permite alcançar uso racional de água, economia com nutrientes e até mesmo melhorar a produtividade de microalgas. Esse constitui uma forma de reduzir os custos de produção de biodiesel de microalgas em plantas comerciais. A microalga Scenedesmus sp. foi cultivada durante 21 dias para avaliar seu crescimento, produtividade de biomassa e lipídios totais, a fim de definir um período ideal de cultivo, que possibilite obter mais lipídios em tempo menor. A maior produtividade foi alcançada no 9º dia de cultivo. Como forma de reduzir custos e perdas no sistema foi definido que o processo de recuperação da biomassa e o tratamento do meio de cultivo ocorreriam em uma única etapa. Foi avaliado o efeito dos agentes floculantes, hidróxido de sódio e cloreto férrico, para tratamento do meio de cultivo (recuperação da biomassa), em função da perda de lipídios. A floculação com cloreto férrico não apresentou variação significativa na taxa de lipídios quando comparados com a recuperação da biomassa por centrifugação, enquanto que a floculação com hidróxido de sódio apresentou perdas significativas. O meio de cultivo clarificado com FeCl3 foi reciclado para cultivar novamente a microalga, com adição de solução de metais (25 %) e sem solução de metais (0 %). No nono dia de cultivo o experimento sem solução de metais apresentou redução do teor lipídico, ao contrário do experimento com solução de metais que não apresentou variação significativa quando comparado com o cultivo em meio fresco. Conclui-se, portanto, que a reciclagem de meio de cultivo de microalgas com eficiência similar ao do meio original é viável, reduz o consumo de água e sais metálicos, o que representa uma economia de 38% quando o meio de cultivo é reciclado uma vez.
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Bioprospecção de lipases a partir de metagenoma do solo e sua aplicação para a produção de biodiesel

Tavares, Paula January 2013 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-06-14T14:02:36Z No. of bitstreams: 1 2013_PaulaTavares.pdf: 2071642 bytes, checksum: dc5f3b1ef02c162114ac1a5acfa84afd (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-06-17T11:16:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_PaulaTavares.pdf: 2071642 bytes, checksum: dc5f3b1ef02c162114ac1a5acfa84afd (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-17T11:16:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_PaulaTavares.pdf: 2071642 bytes, checksum: dc5f3b1ef02c162114ac1a5acfa84afd (MD5) / O solo do Cerrado brasileiro tem sido o foco de poucos estudos sobre sua diversidade microbiana. O solo é um habitat com uma grande diversidade de microrganismos e, assim, ele pode ser usado como uma fonte de enzimas industriais. A identificação de novos genes através da abordagem metagenômica, trouxe vantagens ao desenvolvimento de enzimas com novas atividades. Lipases são um importante grupo de enzimas com várias aplicações biotecnológicas nas industrias de detergente, alimentos, indústrias farmacêuticas e de biocombustível. Para isolar os genes putativos de lipase com tamanho pequeno de DNA (8 kb), foi realizado screening na biblioteca metagenômica de solo de cerrado com substrado de tributirina. A triagem funcional desta biblioteca resultou na identificação de três clones com actividade lipolitica, que foram devidamente sequenciados. Eles revelaram 4 ORFs com funções relacionadas à atividade lipolítica. Duas das enzimas lipolíticas isoladas da biblioteca de pequenos fragmentos de solo de Cerrado tiveram a sua expressão induzida em E. coli BL21 (DE3), sendo nomeadas LipWorfW e LipYorfY. As ORFs tem 1000 pb e codificam para 2 proteínas contendo 300 resíduos de aminoácidos com um peso molecular estimado de 30 kDa para a proteína LipWorfW e 33 kDa para a proteína LipYorfY e identidade com lipases verdadeiras. Resultado de gel de eletroforese SDS- PAGE demonstram a superexpressão destas enzimas. A determinação de sua atividade ideal e os parâmetros enzimáticos vao levar a uma análise bioquímica detalhada a fim de propor a utilização deste produto em aplicações de biodiesel, com foco na melhoria dos processos de produção. Considerando a aplicação potencial biotecnológico destas enzimas, este trabalho visa a seleção e caracterização de lipases três novos genes da biblioteca metagenômica de solo da savana vegetação adequadas para uso na produção de biodiesel. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The Brazilian Cerrado soil has been the focus of very few studies about its microbial diversity. Soil is a habitat with high diversity of microorganisms and thus it can be used as a source of industrial enzymes. The identification of new genes through the metagenomic approach led to the development novel enzyme activities. The advantage of directly screening for enzymatic activities from metagenome libraries is that researchers access previously unknown genes and their encoded enzymes. Lipases are an important group of relevant enzymes as they find immense biotechnologically applications in food, detergent, pharmaceutical and biofuel industries. Lipases are mainly produced by microbes, more frequently bacterial, and play a vital role in commercial ventures. To isolate putative lipase genes a small DNA size (8 Kb), Cerrado soil metagenomic libraries were screened with tributirin. The funcional screening of this library resulted in the identification of three lipase activity producing clones that were subsequently sequenced. They revealed 4 ORFs with functions related to lypolitic activity. Two lipolytic enzymes from the small DNA fragments library of Cerrado soil was isolated and their expression induced in E. coli strain BL21 (DE3), being named LipWorfW and LipYorfY. The open reading frame have 1000 pb and encodes a protein containing 300 amino acid residues with estimated molecular weight of 30 kDa for the LipWorfW protein and 33 kDa for the LipYorfY protein and strong identity with true lipases. SDS-PAGE gel electrophoresis demonstrates the overexpression of that lipase on inducing conditions. The determination of their optimal activity and enzymatic parameters will lead to more detailed biochemical analysis, in order to propose the use of this product in biodiesel applications, with focus on improvement of production processes. Considering the potential biotechnological application of these enzymes, this work aims at the selection and characterization of 3 novel lipases genes from metagenomic library from soil from savannah-like vegetation suitable for use in biodiesel production.

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