Ph.D. / Bovine babesiosis, or redwater, is at present known to be caused by Babesia bigemina and Babesia bovis in the Republic of South Africa. Until recently, however, the only information on the natural transmission of these parasites in the country was based on observations made during the early part of this century and information on the developmental cycle of the parasites in their vectors was superficial or nonexistent ...

Thesis (MSc (Veterinary Science))--University of Pretoria, 2001. / Includes bibliographical references.

Thesis (MSc (Veterinary Science))--University of Pretoria, 2005. / Includes bibliographical references.

Submitted by TALITA BARBAN BILHASSI null (talitabarban@yahoo.com.br) on 2016-04-26T17:24:25Z No. of bitstreams: 1 TESE TALITA BARBAN BILHASSI.pdf: 3215997 bytes, checksum: 07aede5d76602ed82d16385cc21986cf (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-04-28T18:47:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 bilhassi_tb_dr_jabo.pdf: 3215997 bytes, checksum: 07aede5d76602ed82d16385cc21986cf (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-28T18:47:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 bilhassi_tb_dr_jabo.pdf: 3215997 bytes, checksum: 07aede5d76602ed82d16385cc21986cf (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Entre as principais causas de perdas produtivas em bovinos criados nos trópicos está a infestação pelo carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus e, consequentemente, dos hemoparasitas transmitidos por ele. A resistência dos zebuínos e de animais cruzados com raças taurinas à infestação por esse ácaro é amplamente conhecida. Entretanto, no que se refere à suscetibilidade às babesioses bovinas, existem evidências de que o grupo genético também pode interferir na resistência, seguindo o mesmo padrão observado para o carrapato vetor, com os taurinos apresentando maior sensibilidade. Assim, este estudo teve por objetivo avaliar a parasitemia por Babesia bovis e Babesia bigemina em 50 novilhas da raça Canchim ( Charolês + Zebu) naturalmente infestadas pelo R. (B.) microplus nas quatro estações do ano durante 24 meses, além de caracterizar o perfil de citocinas que podem estar associados ao fenótipo de resistência e suscetibilidade aos hemoparasitas do gênero Babesia spp. Foram realizadas contagens de fêmeas adultas de carrapatos com tamanho igual ou superior a 4,5 mm de diâmetro, presentes no lado esquerdo de cada bovino. As amostras de DNA extraídas foram submetidas à amplificação por meio da Reação em Cadeia da Polimerase Quantitativa em Tempo Real (qPCR), utilizando iniciadores que flanqueiam fragmentos dos genes mitocondriais do citocromo b (mt-cyt B), específicos para B. bovis e B. bigemina. O RNA extraído do sangue, foi usado para sintetizar o DNA complementar (cDNA) para análise de expressão dos genes do IFN- , TNF- , IL-10 e IL-12B por meio da quantificação relativa (RTqPCR). Foram observadas diferenças significativas (P<0,05) entre os meses das avaliações para a contagem de carrapatos. Entretanto, não houve efeito significativo (P>0,05) nas colheitas realizadas entre novembro de 2013 a janeiro de 2014 e entre os meses janeiro e fevereiro de 2015. A frequência da parasitemia no rebanho foi de 98%. Dentre as amostras de DNA que puderam ser quantificadas pela qPCR, 98% e 95,4% foram positivas para B. bovis e B. bigemina, respectivamente. Com relação ao número de cópias (NC) dos fragmentos dos genes mt-cyt B específicos para B. bovis e B. bigemina foram observados efeitos significativos (P<0,05) para ambas as espécies e interação das mesmas com as colheitas realizadas nas diferentes estações do ano. A análise do nível de expressão de mRNA do IFN- , TNF- e IL-12B revelou que houve um efeito siginificativo (P<0,05) da interação entre animais dos extremos de resistência/suscetibilidade e estações do ano, exceto para IL-10. Conclui-se que, a qPCR apresenta alta sensibilidade e especificidade para o diagnóstico das babesioses bovinas em amostras de sangue e que a oscilação na carga parasitária nas diferentes estações do ano pode estar associada com o perfil de expressão de citocinas apresentada. / Among the main causes of production losses in cattle is in the tropics infestation by Rhipicephalus (Boophilus) microplus, and consequently the hemoparasites transmitted by it. The resistance of zebu and crossbred with European breeds to infestation by this mite is widely known. However, as regards susceptibility to bovine babesiosis, there is evidence that genetic group can also interfere in resistance following the same pattern observed in the tick vector, with the taurine presenting greater sensitivity. This study aimed to evaluate parasitaemia by Babesia bovis and Babesia bigemina in 50 heifers Canchim (⅝ Charolais + ⅜ Zebu) naturally infested by R. (B.) microplus in four seasons for 24 months, and characterize the profile of cytokines that may be associated with phenotype resistance and susceptibility by gender hemoparasites Babesia spp. Adult female ticks counts with size equal to or greater than 4.5 mm in diameter, present in the left side of each calf were performed. The extracted DNA samples were subjected to amplification by Reaction Polymerase Chain Quantitative Real Time (qPCR), using primers flanking fragments of mitochondrial gene cytochrome B (mt-cyt B) specific for B. bovis and B. bigemina. The RNA extracted from the blood was used to synthesize complementary DNA (cDNA) for expression analysis of genes IFN-γ, TNF-α, IL-10 and IL-12B by relative quantification (RT-qPCR). Significant differences were observed (P <0.05) between the months of reviews for the tick count. However, there was no significant effect (P>0.05) in samples taken between november 2013 and january 2014 and between the months january and february 2015. The frequency of parasitaemia in the herd was 98%. Among the samples of DNA that could be quantified by qPCR, 98% and 95.4% were positive for B. bovis and B. bigemina, respectively. Regarding the number of copies (NC) of fragments of genes mt-cyt B, specific to B. bovis and B. bigemina significant effects were observed (P<0.05) for both species and interaction between those harvests in different seasons. Analysis of the mRNA expression level of IFN-γ, TNF-α and IL-12B showed that there was a significant effect (P<0.05) interaction between the animal extreme resistance/susceptibility and seasons, except for IL-10. It is concluded that the qPCR has high sensitivity and specificity for the diagnosis of bovine babesiosis in blood samples and that the fluctuation in the parasitic load in the different seasons of the year may be associated with the profile of cytokine expression presented by herd animals Canchim during the experimental period. / FAPESP: 2013/16246-9

Thesis (MSc (Veterinary Tropical Diseases, Veterinary Science))--University of Pretoria, 2008. / Includes bibliographical references. Also available in print format.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-24Bitstream added on 2014-06-13T19:20:18Z : No. of bitstreams: 1 reis_ro_dr_botfmvz.pdf: 1007324 bytes, checksum: 536ddb6ef3848f47cd6253ed5d8bd393 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Com o objetivo de verificar possíveis alterações hematológicas e bioquímicas que ocorrem no sangue bovino obtido de animal hígido e parasitado com Babesia bigemina, quando conservado em bolsas plásticas contendo Citrato-fostato-dextrose-adenina (CPDA-1) e os efeitos da Riboflavina e radiação ultravioleta na inativação de Babesia bigemina. Na primeira etapa o grupo I foi formado por bolsas plásticas contendo sangue proveniente de bovinos saudáveis e o grupo II foi formado por bolsas plásticas contendo sangue de bovinos parasitados com Babesia bigemina. Foi determinado Contagem total de hemácias e leucócitos, Concentração da Hemoglobina, Volume Globular, Proteína Plasmática Total, Fibrinogênio, Sódio, Potássio e Lactato a cada três dias durante 21 dias. Na segunda etapa foi realizado Esfregaço Sanguíneo Corado, Reação de Imunofluorescência Indireta e Reação em Cadeia da Polimerase quantitativa antes e após aplicação da Riboflavina e radiação ultravioleta, em seguida, o sangue foi inoculado em bezerros esplenectomizados. Esses exames foram repetidos nos dias sete, 14 e 21 pós-inoculação. O sangue conservado apresentou redução da contagem de hemácias e leucócitos, da Concentração da Hemoglobina, Volume Globular, Proteína Plasmática Total, Fibrinogênio e Sódio e ocorreu um aumento na concentração de Potássio e Lactato no decorrer de 21 dias. Observou-se que o sangue armazenado em bolsas plásticas sofre alterações hematológicas e bioquímicas após 21 dias de conservação. A Babesia bigemina não foi eliminada pela adição da Riboflavina e exposição à luz ultravioleta. Novos estudos devem ser realizados para verificar a eficácia desta técnica na inativação de patógenos que podem ser transmitidos por meio da transfusão sanguínea / The aim of this study was to verify the possible hematological and biochemical alterations that occur in bovine blood obtained from healthy animals and from the ones infected with Babesia bigemina when kept in plastic bags with CPDA-1, and to verify the effectiveness of the treatment with Riboflavin in the inactivation of the Babesia sp. In the first part of the experiment, group I was formed by plastic bags with blood obtained from healthy bovines and group II by plastic bags with blood obtained from bovines infected with Babesia bigemina. In both groups the Red Blood Cells Count, Hemoglobin Concentration, Packed Cell Volume, Total Plasma Protein, Fibrinogen, White Blood Cells, Sodium, Potassium and Lactate was determined every three days, during 21 days. In a second phase the stained blood smear, indirect immunofluorescence reaction and quantitative Polimerase Chain Reaction to diagnose before and after the treatment with Riboflavin and ultraviolet radiation. The blood was inoculated in esplenectomized bovine. These exams were repeated on the days 7, 14 and 21 after the inoculation. In both groups the preserved blood presented reduction in the number of Erythrocytes, Leukocytes, Hemoglobin Concentration, Packed Cell Volume, Total Plasma Protein, Fibrinogen and Sodium and an increase of the Potassium and Lactate concentration occurred in the period of 21 days. The results were considered statistically significant (p<0,01). This way it was observed that the blood preserved in plastic bags suffers hematological and biochemical alterations after 21 days of conservation. Babesia bigemina was not eliminated by the treatment with Riboflavin and ultraviolet radiation

Resumo: Com o objetivo de verificar possíveis alterações hematológicas e bioquímicas que ocorrem no sangue bovino obtido de animal hígido e parasitado com Babesia bigemina, quando conservado em bolsas plásticas contendo Citrato-fostato-dextrose-adenina (CPDA-1) e os efeitos da Riboflavina e radiação ultravioleta na inativação de Babesia bigemina. Na primeira etapa o grupo I foi formado por bolsas plásticas contendo sangue proveniente de bovinos saudáveis e o grupo II foi formado por bolsas plásticas contendo sangue de bovinos parasitados com Babesia bigemina. Foi determinado Contagem total de hemácias e leucócitos, Concentração da Hemoglobina, Volume Globular, Proteína Plasmática Total, Fibrinogênio, Sódio, Potássio e Lactato a cada três dias durante 21 dias. Na segunda etapa foi realizado Esfregaço Sanguíneo Corado, Reação de Imunofluorescência Indireta e Reação em Cadeia da Polimerase quantitativa antes e após aplicação da Riboflavina e radiação ultravioleta, em seguida, o sangue foi inoculado em bezerros esplenectomizados. Esses exames foram repetidos nos dias sete, 14 e 21 pós-inoculação. O sangue conservado apresentou redução da contagem de hemácias e leucócitos, da Concentração da Hemoglobina, Volume Globular, Proteína Plasmática Total, Fibrinogênio e Sódio e ocorreu um aumento na concentração de Potássio e Lactato no decorrer de 21 dias. Observou-se que o sangue armazenado em bolsas plásticas sofre alterações hematológicas e bioquímicas após 21 dias de conservação. A Babesia bigemina não foi eliminada pela adição da Riboflavina e exposição à luz ultravioleta. Novos estudos devem ser realizados para verificar a eficácia desta técnica na inativação de patógenos que podem ser transmitidos por meio da transfusão sanguínea / Abstract: The aim of this study was to verify the possible hematological and biochemical alterations that occur in bovine blood obtained from healthy animals and from the ones infected with Babesia bigemina when kept in plastic bags with CPDA-1, and to verify the effectiveness of the treatment with Riboflavin in the inactivation of the Babesia sp. In the first part of the experiment, group I was formed by plastic bags with blood obtained from healthy bovines and group II by plastic bags with blood obtained from bovines infected with Babesia bigemina. In both groups the Red Blood Cells Count, Hemoglobin Concentration, Packed Cell Volume, Total Plasma Protein, Fibrinogen, White Blood Cells, Sodium, Potassium and Lactate was determined every three days, during 21 days. In a second phase the stained blood smear, indirect immunofluorescence reaction and quantitative Polimerase Chain Reaction to diagnose before and after the treatment with Riboflavin and ultraviolet radiation. The blood was inoculated in esplenectomized bovine. These exams were repeated on the days 7, 14 and 21 after the inoculation. In both groups the preserved blood presented reduction in the number of Erythrocytes, Leukocytes, Hemoglobin Concentration, Packed Cell Volume, Total Plasma Protein, Fibrinogen and Sodium and an increase of the Potassium and Lactate concentration occurred in the period of 21 days. The results were considered statistically significant (p<0,01). This way it was observed that the blood preserved in plastic bags suffers hematological and biochemical alterations after 21 days of conservation. Babesia bigemina was not eliminated by the treatment with Riboflavin and ultraviolet radiation / Orientador: Raimundo Souza Lopes / Coorientador: Pedro Paulo Pires / Banca: Regina Kiomi Takahira / Banca: Elizabeth Moreira dos Santos Schmidt / Banca: Advaldo Henrique da Fonseca / Banca: Cecília Braga Laposy / Doutor

Calves infected with Babesia bovis or Babesia bigemina between 3 and 9 months of age can develop immunity without showing overt clinical signs. This transient immunity is not dependent on maternal immunity. After 9 months of age, they are fully susceptible to challenge. Dairy calves between 2 and 3 months of age were vaccinated with B. bigemina and B. bovis live frozen vaccines (Onderstepoort Biological Products®). Two months after vaccination, 90% of calves were serologically positive on IFA test to B. bigemina, and 70% were serologically positive to B. bovis. At this age, only 17% of the control group had seroconverted to B. bigemina and none of the calves had seroconverted to B. bovis. All experimental calves maintained positive serological status to both B. bovis</i. and B. bigemina for at least 5 months after vaccination. It is sound practice to vaccinate dairy calves against babesiosis at 2–3 months of age. Endemic stability is achieved before the period of natural resistance wanes. Copyright / Dissertation (MSc)--University of Pretoria, 2011. / Veterinary Tropical Diseases / unrestricted

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_regina_celis_pereira_reiniger.pdf: 329158 bytes, checksum: 6caf8cc77973c7a12a10801deeda4e26 (MD5) Previous issue date: 2008-05-15 / The presence of anti-Babesia bovis and anti-B. bigemina immunoglobulins (IgG class) were evaluated, by indirect fluorescent antibody test, in bovine sera from a naturally tick-infected beef cattle herd. Samples were collected from 31 heifers, from 13 to 24 months of age, from a farm located South of Rio Grande do Sul, Brazil. Blood samples were monthly collected followed by observing the presence of Boophilus microplus ticks in cattle. Climatic data were also observation. Mean temperature and relative humidity showed to be higher than their climate normal (1971-2000), allowing constant tick infestations throughout the year. Serologic tests showed that 100% of the animals remained positive for B. bigemina during the experimental period. For B. bovis, however, this condition was only reached from 17 months of age onwards, after the classical third tick generation infestation (autumn). These results showed that the enzootic stability was maintained in this farm, as observed earlier when these same animals were monitored in their first year of age. This epidemiological condition being unusual for this region. The experimental animals showed lower anti-B. bovis (P=0,0002) and anti-B. bigemina (P<0,0001) specific-immunoglobulins when compared to their first year averages. Anti-B. bigemina specific-immunoglobulins were significantly higher than anti-B. bovis specific-immunoglobulins (P=0,0001). These results reveal a situation of enzootic stability in geographical areas early described as of enzootic instability for cattle babesiosis, and provide information to better understand the high frequency of B. bovis outbreaks in this region. / Avaliou-se, através da reação de imunofluorescência indireta, a presença de imunoglobulinas (classe IgG) anti-Babesia bovis e anti-Babesia bigemina no soro de 31 bovinos de um rebanho de corte naturalmente infectado, dos 13 aos 24 meses de vida, em uma propriedade localizada ao sul do Rio Grande do Sul. As coletas mensais de sangue foram acompanhadas de observação da presença do Boophilus microplus, bem como de dados climatológicos durante o ano do experimento. A temperatura e a umidade relativa do ar mantiveram-se superiores às normais ao longo do ano, favorecendo a constância do carrapato no rebanho. A sorologia revelou que 100% dos bovinos mantiveram-se positivos para B. bigemina durante todo o período experimental, enquanto para B. bovis, esse índice só foi obtido a partir dos 17 meses de idade, após a infestação pela terceira geração de carrapatos (outono). Isso revela que foi mantida a situação de estabilidade enzoótica na propriedade, constatada durante o primeiro ano de vida destes animais, o que é atípico para região. Os bovinos mantiveram títulos de anticorpos significativamente inferiores aos observados durante o seu primeiro ano de vida, tanto para B. bovis (P=0,0002) como para B. bigemina (P<0,0001). A titulação de anticorpos para B. bigemina foi significativamente (P=0,0001) superior à verificada para B. bovis. Os resultados obtidos revelam a existência de situação de estabilidade enzoótica em uma área de instabilidade enzoótica para a babesiose bovina, e fornece subsídios para o entendimento da maior freqüência de casos clínicos causados por B. bovis na região.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_alvaro_carlos_menezes_arteche.pdf: 1268541 bytes, checksum: 48cb8939395a534c09b30fdb0ec17ef9 (MD5) Previous issue date: 2011-11-21 / This study analyzed, by reaction to indirect immunofluorescence and individual weighting, the levels of protection and weight-gain in beef calves from birth to the age of eight month, which received two doses of vaccine against tick fever and were maintained free from ticks, compared to naturally infested calves in extensive management conditions with continuous grazing in a rural property situated in the municipality of Santana do Livramento Espinilho / RS. Two groups were randomly gathered, n=30, from which Group I (test) was kept free from ticks from birth to weaning and received two doses of the attenuated, trivalent, refrigerated vaccine against tick fever. Groupe II (control) followed the property s traditional management, which reflects the one used in the region, allowing the tick infestation by the animals. Weight control was accomplished in the first day (d0) and in the last day of the experiment (d180). The serology revealed that 100% of the vaccinated animals presented titles equal to 1:5120 for the three parasites Anaplasma marginale, Babesia bovis e Babesia bigemina (p≤0,025), whereas in the control group the highest titles were 1:2560 in four animals for A. marginale, 1:1280 in four animals for B. bovis and 1:1280 in two animals for B. bigemina (p≤ 0,025). Group I got a mean weight-gain of 30,5 kg more than the control group at the end of the experiment (p≤0,025). The results obtained show that keeping animals free from tick, from birth to weaning, and maintaining them vaccinated against tick fever is safer, more efficient and economically and technically more advantageous than the traditional management system carrapateamento (natural tick infestation). / Avaliaram-se, pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e de pesagens individuais, os níveis de proteção e ganho de peso de terneiros de corte do nascimento ao desmame com oito meses de idade que receberam duas doses de vacina contra tristeza bovina e foram mantidos livres de carrapatos em comparação a terneiros naturalmente infestados em condições de manejo extensivo com pastoreio contínuo em propriedade rural localizada no município de Santana do Livramento-Espinilho/RS. Formaram-se dois grupos aleatóriamente, n=30, sendo o GRUPO I (teste) mantido livre de carrapatos desde o nascimento até o desmame e com duas doses da vacina atenuada, trivalente e refrigerada contra tristeza bovina. O GRUPO II, controle, seguiu o manejo tradicional da propriedade, que reflete o da região, permitindo que os animais fossem infestados por carrapatos. As pesagens foram realizadas no primeiro dia do experimento (d0) e no último dia do experimento (d180). A sorologia revelou que 100% dos animais vacinados apresentaram títulos maiores ou iguais a 1:5120 para os três parasitos Anaplasma marginale, Babesia bovis e Babesia bigemina (p≤0,025) enquanto que no grupo controle os títulos máximos foram 1:2560 em quatro animais para A. marginale, 1:1280 em quatro animais para B. bovis e 1:1280 em dois animais para B. bigemina. Houve diferença significativa entre os dois grupos (p≤0,025). O grupo I obteve 30,5 Kg a mais de ganho médio de peso que o grupo controle no final do experimento (p≤0,025). Com os resultados obtidos, conclui-se que é mais eficiente, seguro e vantajoso econômica e tecnicamente manter os animais livres de carrapatos, desde o nascimento até o desmame, e vacinados contra tristeza bovina, do que com o manejo tradicional carrapateamento .