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Avaliação in vitro do processo de liberação de Tacrolimus em compósitos de PLGA e polipirrolMelo, Maiana Piovesan de January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015 / The repair of injured peripheral nerves is one of the most difficult tasks in neurosurgery. Among the techniques used is distinguished using the artificial tube for nerve guidance during the regeneration process. The preparation of composites based on biodegradable polymers and conducting polymers related to growth factors, have been proposed as a promising approach for improving regeneration of injured peripheral nerves. However, it should be considered that during the regeneration process is necessary to have a control over the dosage and the time of release of the drug in question not to jeopardize the recovery process. In this work were based membranes prepared PLGA (lactic-co-glycolic poly-acid), polypyrrole (PPy) and Tacrolimus as a growth factor. Was reported as a factor of the process of degradation and the relationship between the composition of membrane PLGA / PPy / Tacrolimus with the release of the drug in the first days of incubation. It was found that membranes with higher PLGA thicker, resulting in a lower weight loss and delayed release of Tacrolimus. In this work PLGA membranes containing search polypyrrole nanofibers (PPy) and Tacrolimus, as a growth factor, were prepared by the solvent evaporation method. The process of degradation and drug release were assessed 28 days of incubation. It was observed that membranes with a higher concentration of PLGA. / A reparação de nervos periféricos lesionados é uma das tarefas mais difíceis na neurocirurgia. Entre as técnicas utilizadas destaca-se a utilização de tubos artificiais para orientar o nervo durante o processo de regeneração. A preparação de compósitos baseados em polímeros biodegradáveis e polímeros condutores, associados a fatores de crescimento, têm sido proposta como uma abordagem promissora para melhorar a regeneração de nervos periféricos lesionados. Porém, deve ser considerado que durante o processo de regeneração é necessário ter um controle sobre a dosagem e o tempo de liberação do fármaco em questão para não prejudicar o processo de recuperação. Assim, neste trabalho foram preparadas membranas baseadas em PLGA (poli-ácido láctico-co-glicólico), polipirrol (PPy) e Tacrolimus como fator de crescimento. Foi avaliado o processo de degradação e a relação entre a composição de membranas de PLGA/PPy/Tacrolimus com a liberação do fármaco nos primeiros dias de incubação. Foi verificado que membrana com maior quantidade de PLGA, mais espessa, resultou numa menor perda massa e retardou a liberação do tacrolimus. Neste trabalho de pesquisa membranas de PLGA contendo nanofibras de polipirrol (PPy) e Tacrolimus, como fator de crescimento, foram preparadas por meio da metodologia da evaporação do solvente. O processo de degradação e a liberação do fármaco foram avaliados durante 28 dias de incubação. Foi observado que membranas com uma maior concentração do PLGA.
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Desenvolvimento e aplicação de copolímero absorvível como câmara de regeneração de nervo periférico em ratosSebben, Alessandra Deise January 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014 / Introduction: Peripheral nerve injury results in functional loss in the innervated organ, and recovery without surgical intervention is rare. Many surgical techniques can be used for nerve repair. Among these, the tubulization technique can be highlighted: this allows regenerative factors to be introduced into the chamber. Biomaterials and neurotrophic factors are indicated as a therapeutic alternative for reconstruction of peripheral nerves. Objective: To develop a nanotexturized absorbable tube of poly (lactic-co-glycolic acid), and to evaluate its effect with and without incorporation of tacrolimus on peripheral nerve regeneration in rats. Materials and Methods: Nanotexturized absorbable PLGA tubes and films with and without incorporation of tacrolimus are developped, which were characterized in vitro and in vivo for biocompatibility, biodegradability and effectiveness as technical tubing were fabricated. The in vivo experiment in which eighty-eight rats were used, occurred in two stages: the copolymers with and without incorporation of tacrolimus were implanted in 63 animals to evaluate the biocompatibility; a defect of 10mm sciatic nerve was created in the remaining 25 animals were divided into three groups according to treatment: autograft (5) tubulization with PLGA (10), tubulization with PLGA and tacrolimus (10). Walking Track and histomorphometric analyses were performed. Results: PLGA membranes nanotexturized, containing tacrolimus or not, differ from the negative control cell viability assays in vitro (p = 0. 000) cells, the membrane containing tacrolimus was significantly improved, regardless of the time when compared to the membrane without the drug (p = 0. 026). In in vivo biocompatibility evaluation, the surrounding tissue to PLGA implants showed acute inflammation, which was decreasing the long 90-day evaluation. It was evident less collagen deposition in both biomaterials, p ≤ 0. 020 seven days after the implants were inserted. The PLGA tube without tacrolimus had smaller average response to the thickness of the myelin sheath compared to autograft and the tube containing tacrolimus in proximal, medial and distal segments (p < 0. 05). In functional assessment of the recovery of the sciatic nerve in rats, the group of PLGA without tacrolimus significantly differed from the 90-day autograft group (p = 0. 0020).Conclusion: The present study suggests that the combination of tacrolimus and PLGA promoted the regeneration of rat sciatic nerves, and this can be a powerful alternative to clinical use in peripheral nerve injuries. / Introdução: Lesões em nervos periféricos resultam na perda de função do órgão inervado e raramente apresentam recuperação sem a intervenção cirúrgica. Uma das formas de reparo é a técnica de tubulização, através da qual é possível acrescentar fatores com capacidade regenerativa. Nesse contexto, biomateriais e fatores neurotróficos são indicados como uma alternativa terapêutica para reconstrução de nervos periféricos. Objetivo: Desenvolver tubo nanotexturizado absorvível composto por poli (ácido láctico-co-ácido glicólico), e avaliar seu efeito sem e com incorporação de tacrolimus sobre a regeneração de nervo periférico em ratos. Materiais e Métodos: Foram confeccionados tubos nanotexturizados absorvíveis de PLGA com e sem incorporação de tacrolimus, que foram caracterizados in vitro e in vivo quanto à biocompatibilidade, biodegradação e eficácia como técnica de tubulização. O experimento in vivo, no qual foram utilizados 88 ratos, ocorreu em 2 etapas: os copolímeros sem e com incorporação de tacrolimus foram implantados em 63 animais para avaliar a biocompatibilidade; um defeito de 10mm no nervo ciático foi criado nos 25 animais restantes, os quais foram divididos em três grupos conforme o tratamento: enxerto autólogo (5), tubulização com tubo PLGA (10) e tubulização com tubo PLGA e tacrolimus (10). Foram realizados Teste de Marcha e análise histomorfométrica. Resultados: As membranas de PLGA, contendo ou não tacrolimus, diferiram do controle negativo nos ensaios de viabilidade celular in vitro (p = 0,000); a membrana contendo tacrolimus foi significativamente melhor, independente do tempo, quando comparada à membrana sem o fármaco (p = 0,026). Na avaliação da biocompatibilidade in vivo, o tecido circunjacente aos implantes de PLGA apresentaram inflamação aguda, que foi decrescendo ao longo dos 90 dias de avaliação. Em 7 dias após os implantes serem inseridos, evidenciou-se menor deposição de colágeno nos dois biomateriais quando comparado aos demais períodos (p ≤ 0,020). O tubo de PLGA sem tacrolimus teve média menor em relação à espessura da bainha de mielina comparado ao enxerto autólogo e ao tubo contendo tacrolimus nos segmentos proximal, medial e distal (p < 0,05). Na avaliação funcional da recuperação do nervo ciático de ratos, o grupo de PLGA sem tacrolimus diferiu significativamente do grupo enxerto autólogo (em 90 dias - p= 0,0021), com menores índices de função ciática. Conclusão: o presente estudo sugere que a combinação de PLGA e tacrolimus favoreceu a regeneração de nervo ciático de rato, e esta poderá ser uma potente alternativa para aplicação clínica em lesões de nervos periféricos.
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Avaliação da citotoxicidade e da liberação iônica de mini-implantes ortodônticosBlaya, Micéli Beck Guimarães January 2010 (has links)
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license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The aim of this study was to investigate the biocompatibility of new and corroded miniscrews (MSs) through the evaluation of cell toxicity in vitro and of ion release in vivo. Saccharomyces Cerevisiae yeast was used as a eukaryotic microbiological model for the cytotoxicity assay. Qualitative and quantitative tests were carried out using the wild strain FF18733. In addition, direct exposure (in liquid YPD culture) and indirect exposure tests (using artificial saliva previously exposed to the MSs) were carried out using new MSs and MSs with sodium fluoride (NaF at 0. 0125%, 0. 025% and 0. 05%) and used in vivo. Photomicrographs with scanning electron microscopy (SEM) were obtained for the new and used MSs. As a result, the wild strain FF 18733 showed a reduction in cell viability in the direct exposure to one and two new MSs. However, this reduction was not significant. The results for indirect exposure showed that there were no significant differences between new and used MSs and the control groups. Moreover, exposure to NaF did not induce corrosion of MSs sufficient to lead to significant cell toxicity in the yeast. Despite the slight corrosion revealed by the photomicrographs, there was no significant loss of cell viability in the strains of S. cerevisiae tested. This demonstrates that the components of MSs (Ti-6Al-4V) did not significantly alter the yeast metabolism, indicating that the MSs tested present good biocompatibility for use in orthodontic clinics. The aim of the in situ study was to compare the levels of several metallic ions released in the saliva of patients undergoing orthodontic treatment with MSs. The experimental group was made up of 20 individuals who were within the 6th and 8th months of treatment. Saliva from each patient was collected at four different timepoints: before MS placement (T1), 10 minutes (T2), 7 days (T3) and 30 days (T4) after MS placement. Saliva samples were analyzed by spectrometry (ICP- MS - inductively coupled plasma mass spectrometry; and ICP-OES - inductively coupled plasma optical emission spectrometry).The release of nine different metal ions was observed: titanium (Ti), zinc (Zn), chromium (Cr), nickel (Ni), iron (Fe), copper (Cu), aluminum (Al), vanadium (V), and cobalt (Co). Data were analyzed by descriptive statistics and tests for normality (Shapiro-Wilk). The metal ion concentrations in the saliva at the four different timepoints were compared using the Wilcoxon test (α=95%). At T4, there was a quantitative increase in the salivary concentration of Cu, Ti, V and Zn and a quantitative decrease in Al, Co, Cr, Fe and Ni, when compared to T1. However, there were no statistically significant differences in the metal concentrations. Therefore, it can be concluded that the use of orthodontic appliances with MSs does not lead to an increase, significative statistically, in salivary metal concentrations. / Propôs-se neste trabalho avaliar a biocompatibilidade dos mini-implantes ortodônticos novos e utilizados em tratamento ortodôntico por meio da aplicação de testes avaliativos de toxicidade celular in vitro e de liberação iônica in vivo. O ensaio de citotoxicidade foi através da levedura Saccharomyces Cerevisiae que é um modelo microbiológico eucariótico. Foram realizados testes qualitativos e quantitativos, com a cepa selvagem FF18733 desta levedura. Foram executados testes de exposição direta (em meio de cultura YPD líquido) e testes de exposição indireta utilizando: MIs novos, MIs expostos ao fluoreto de sódio (NaF a 0,0125%, 0,025% e 0,05%), e MIs utilizados in vivo. Foram realizadas fotomicrografias com microscopia eletrônica de varredura (MEV) nos MIs utilizados in vivo e novos. Como resultado, a cepa selvagem FF 18733 mostrou uma diminuição de sua sobrevivência nos experimentos de exposição direta a um e a dois mini-implantes novos. No entanto, tal sensibilidade não se mostrou significativa. Os resultados de exposição à saliva artificial de novos, bem como todos os resultados referentes aos usados, não indicaram diferenças em relação aos controles. Da mesma forma, a exposição ao NaF não induziu, nos MIs, uma corrosão suficiente para causar toxicidade celular significativa nesta levedura. Apesar da corrosão leve apresentada nas fotomicrografias, não foram observadas induções de perda de viabilidade celular significativas na cepa testada de S. cerevisiae a partir dos componentes da liga (Ti-6Al-4V) dos MIs ortodônticos. Evidenciou-se, assim, que tais componentes não alteram de forma importante o metabolismo da levedura, indicando que os MIs testados tendem a apresentar uma boa biocompatibilidade para uso em clínica ortodôntica. No estudo in situ, o objetivo foi examinar e comparar os níveis de vários íons metálicos liberados na saliva de pacientes em tratamento ortodôntico e que iriam necessitar de tratamento envolvendo o uso de miniimplante. A amostra foi composta por 20 indivíduos que estavam entre o sexto e o oitavo mês de tratamento ortodôntico. A saliva de cada paciente foi coletada em 4 tempos diferentes: antes da inserção do MI (T1), 10 minutos (T2), 7 dias (T3) e 30 dias (T4) após a instalação do MI. As amostras salivares foram analisadas através de espectrometria (ICP- MS - inductively coupled plasma mass spectrometry; e ICP-OES - inductively coupled plasma optical emission spectrometry). A liberação de nove diferentes ions metálicos foram observados: titânio (Ti), zinco (Zn), cromo (Cr), níquel (Ni), ferro (Fe), cobre (Cu), alumínio (Al) e cobalto (Co). Os dados foram analisados através de estatística descritiva e testes de normalidade (Shapiro-Wilk). A concentração de ions metálicos na saliva nos quatro tempos diferentes de tratamento com MI foi comparado usando o teste de Wilcoxon (α=95%). No tempo T4, houve um aumento quantitativo na concentração salivar de Cu, Ti, V, Zn, bem como um decréscimo quantitativo na concentração salivar de Al, Co, Cr, Fe, Ni, quanto comparados ao grupo T1. No entanto, não houve diferenças estatisticamente significativas entre as concentrações de metais. Logo, pode ser concluído que a colocação de aparelho ortodôntico associado ao uso de mini-implante ortodôntico não leva a um aumento, estatisticamente significativo, na concentração de ions metálicos na saliva.
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Análise do reparo de defeitos ósseos preenchidos com β- trifosfato de cálcio associado a implantes de titânio puroMottin, Roberta Weirich January 2009 (has links)
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license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Concerning the necessity of form and function restoration from bone structures which had been lost through pathologies, traumas or iatrogenicity has been widely studied. The researches have been trying to develop new materials in order to recover or maintain the bone volume as well as quality into regions which have lost their proper anatomic conformations, being biomaterials the most suitable ones as a viable alternative as bone substitutes. β- tricalcium phosphate granule (β-TCP) is an inorganic composite which combines active biodegradability with osteoconductivity properties. The present study aims to develop a histological descriptive analysis on the repair of bone defects filled with β-TCP associated to pure titanium implants into cavities prepared in the calvarium bone of rats. Eighteen male adult rats were randomly selected and divided into three groups of six rats each, according to their period of death: 15, 30 and 60 days. Four bone defects were made into the calvarium bone of the rats and filled with: (a) β-TCP, (b) clot, (c) β-TCP + pure titanium screw and (d) pure titanium screw. The samples were cut and histologically evaluated. The analysis moved through the presence and volume of connective tissue and newly formed bone, as well as the presence or absence of remaining material (β-TCP) into the defect. It was verified an acceleration of the new bone formation process in the presence of β-TCP. The results suggest the biocompatibility and osteoconductivity of the biomaterial, even when associated to pure titanium implantes. / A necessidade de restabelecimento da forma e da função de estruturas ósseas perdidas por patologias, traumas ou iatrogenias tem sido amplamente estudada. As pesquisas têm procurado desenvolver novos materiais com o intuito de recuperar ou manter volume e qualidade óssea em regiões que perderam suas conformações anatômicas adequadas, sendo os biomateriais uma alternativa viável como substitutos ósseos. O grânulo β- trifosfato de cálcio (β-TCP) é um composto inorgânico que combina a propriedade de biodegradabilidade ativa com a osteocondutividade. O presente trabalho tem como objetivo fazer uma análise histológica descritiva do reparo de defeitos ósseos preenchidos com β-TCP associado a implantes de titânio puro, em cavidades confeccionadas em calotas cranianas de ratos. Foram selecionados randomicamente 18 ratos, machos adultos e a seguir divididos em três grupos de seis ratos cada, de acordo com o período de morte: 15, 30 e 60 dias. Na calota craniana de cada rato foram confeccionados quatro defeitos ósseos preenchidos com: (a) β-TCP, (b) coágulo, (c) β-TCP + parafuso de titânio puro e (d) parafuso de titânio puro. As amostras foram cortadas e avaliadas histologicamente. Foi analisada a presença e volume de tecido conjuntivo frouxo e de tecido ósseo imaturo, bem como a presença ou ausência de material remanescente (β-TCP) no defeito. Verificou-se a aceleração do processo de neoformação óssea na presença do β- TCP. Os resultados sugerem a biocompatibilidade e osteocondutividade do biomaterial, mesmo quando associado a implantes de titânio puro.
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Incorporação do hormônio do crescimento humano recombinante (rhGH) em matriz de polímero biodegradávelGarcia, Ricardo Fernandes January 2013 (has links)
Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2013-05-27T17:49:17Z
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448352.pdf: 2234936 bytes, checksum: 8f2dcd05e3619f61d684fbf373e529c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-27T17:49:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1
448352.pdf: 2234936 bytes, checksum: 8f2dcd05e3619f61d684fbf373e529c4 (MD5) / Objetivo: Incorporar o hormônio de crescimento recombinante humano em um polímero biodegradável o poli ácido láctico glicólico ( PLGA ) para utilização na área de cirurgia e traumatologia bucomaxilofacial. Materiais e Métodos: Foi utilizada mistura de dois solventes, metanol e o diclorometano numa proporção em massa de 1,5 : 5,0 para dissolver o PLGA. Foi feita outra solução com o rhGH (hormônio de crescimento humano recombinante), acetato de zinco e água deionizada. As duas misturas foram então misturadas sob agitação mecânica e vertidas em moldes de silicone circular de 01cm de diâmetro e aproximadamente 02mm de espessura. Essa mistura foi deixada na câmara de evaporação de solvente por 48 horas. As matrizes, então, foram degradadas in vitro em PBS (solução tampão fosfato salino) com pH 7.4, em banho termostatizado. As amostras foram retiradas do banho no intervalo de 01, 02, 03, 04, 07, 10, 14 dias. Foi aferida a perda de massa, variação do pH e concentração do hormônio liberado em função do tempo. Resultados: A concentração do hormônio liberado em função do tempo foi aumentando ate o terceiro dia. No quarto dia, houve uma queda e, no sétimo, ocorreu um aumento do hormônio liberado, estendendo-se até o décimo dia, no décimo quarto dia houve queda novamente. O pH teve uma queda brusca de 7.4 para 3.2 no primeiro dia e mantendo uma pequena queda até o décimo quarto dia. A perda de massa foi gradual, em relação ao tempo, como já era esperado. Conclusão: O PLGA é um bom biomaterial para esses fins. Revelou-se possível incorporar o rhGH nessa matriz, de modo a, então, desenvolver-se um possível material que sirva como enxerto em tecido ósseo. / Objective: To incorporate recombinant human growth hormone in a biodegradable polymer (PLGA) Material and Methods: It was used a blend of two solvents, methanol and dichloromethane in a ratio by weight of 1.5: 5.0 for dissolving the PLGA. Another solution was made with rhGH, zinc acetate and deionized water. The two mixtures were then mixed together under mechanical stirring and poured into silicone molds circular of 01cm in diameter and around 02mm of espessur. This mixture was left in the evaporation chamber of solvent for 48 hours. The matrices were then degraded in vitro in PBS pH 7.4, thermostatted bath. The samples were removed from the bath in the range of 01, 02, 03, 04, 07, 10, 14 days. Was measured weight loss, pH and concentration of hormone released versus time. Results: The concentration of hormone released versus time was increased until the third day. On the fourth day had a fall and on the seventh day there have been increased hormone released by the tenth day, the fourteenth day was falling again. The pH had a sharp drop from 7.4 to 3.2 on the first day and keeping a small drop until the fourteenth day. The mass loss was a gradual loss in relation to time as was to be expected. Conclusion: The PLGA is a good biomaterial for making this type of device. You can incorporate the rhGH this array to get a possible material that may serve as a bone graft.
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Avaliação do processo de cicatrização óssea com diferentes biomateriais em fêmur de ratosHörlle, Lucas January 2013 (has links)
Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2013-05-28T11:29:37Z
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448378.pdf: 1007476 bytes, checksum: 897bb580689b310a7b5b7e858e16467e (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-28T11:29:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1
448378.pdf: 1007476 bytes, checksum: 897bb580689b310a7b5b7e858e16467e (MD5) / Objetivo: O presente estudo objetivou verificar o processo de reparo ósseo frente à utilização dos biomateriais Bio-Oss®, Osteogen® e Bone Ceramic® em um modelo experimental com defeitos criados no fêmur de ratos, através de análise histológica, avaliando também a taxa de interleucina-1 (IL-1), interleucina-6 (IL-6) e TNF-α presente em cada processo inflamatório existente no reparo ósseo. Materiais e Métodos: 36 ratos da linhagem Wistar com 8 semanas e cerca de 300 gramas foram submetidos à cirurgia do fêmur criando um defeito ósseo de 5mm de comprimento por 3mm de largura até chegar em tecido medular. Os animais foram divididos aleatoriamente em quatro grupos: Grupo I - Bio-Oss® (Geistlich Sons Ltd. Wolhusen, Suíça); Grupo II - Bone Ceramic® (Straumann AG, Basel, Suíça); Grupo III - Osteogen® (Impladent Ltd., Hollywood, EUA); Grupo Controle – coágulo. Conforme cada grupo, o fêmur tinha sua medula preenchida pelo biomaterial correspondente, excetuando-se o Grupo Controle que teve preenchimento por coágulo. Trinta dias após a cirurgia, os animais sofreram eutanásia e cada fêmur operado removido, descalcificado, cortado em micrótomo e confeccionado lâmina microscópica para análise histológica. Resultados: Em trinta dias, não houve diferença significativa na neoformação óssea entre os grupos. No entanto, quanto à taxa de marcação das citocinas pró-inflamatórias, o Bio-oss mostrou-se com a menor taxa de TNF-α, sendo em apenas dois sítios uma taxa leve. O mesmo ocorreu com IL-1, mas mostrando em seis sítios taxa leve. Em relação à IL-6, a taxa foi de moderada à severa para a maioria dos sítios. O Bone Ceramic mostrou taxa mais alta de TNF-α em relação ao Bio-oss, manteve um equilíbrio em relação à IL-1 e resultados semelhantes à IL-6. E o Osteogen apresentou a taxa mais alta de TNF-α e IL-1 e mais baixa de IL-6 quando comparado ao Bio-oss e Bone Ceramic. Conclusão: As implicações clínicas a partir de um estudo em modelo animal são controversas, mas dentro do escopo do trabalho, um biomaterial com baixo índice de TNF-α e IL-1 e índice moderado de IL-6 mostra-se maduro em 30 dias, ou seja, com condições histológicas ideais de neoformação óssea. / Objective: This study aimed to verify the process of bone repair biomaterials forward the use of Bio-Oss ®, Osteogen ® and Bone Ceramic ® in an experimental model with defects created in rat femurs through histological analysis, evaluating also the rate of interleukin-1 (IL-1), interleukin-6 (IL-6) and TNF-α present in each inflammatory process existing in bone repair. Materials and Methods: 36 Wistar rats aged 8 weeks and about 300 grams underwent surgery femur bone defect creating a 5mm long and 3mm wide to get in medullary tissue. The animals were randomly divided into four groups: Group I - Bio-Oss ® (Geistlich Wolhusen Sons Ltd., Switzerland), Group II - Bone Ceramic ® (Straumann AG, Basel, Switzerland), Group III - Osteogen ® (Impladent Ltd., Hollywood, USA), Group Control - clot. As each group, the femur had their bone biomaterial filled by correspondent, except for the control group that had filled with blood clot. Thirty days after surgery, animals were euthanized and each operated femur removed, decalcified, cut with a microtome and blade made for microscopic histological analysis. Results: In thirty days, no significant difference in bone formation between the groups. However, as the rate of the marking of proinflammatory cytokines, Bio- Oss showed the lowest rate of TNF-α and in only two places a rate slightly. The same occurred with IL-1, but showing slight rate at six sites. Regarding IL-6, the rate was moderate to severe in most sites. The Bone Ceramic showed higher rate of TNF-α in relation to Bio-oss, maintained a balance in relation to IL-1 and similar to IL-6. And Osteogen showed the highest rate of TNF-α and IL-1 and lower IL-6 when compared to Bio-oss and Bone Ceramic. Conclusion: The clinical implications from a study in animal models are controversial, but within the scope of work, a biomaterial with low TNF-α and IL- 1 and moderate content of IL-6 appears to be mature in 30 days, i.e., with optimal histological conditions of bone formation.
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Polímeros com sais imidazólicos : materiais inovadores com propriedades antibiofilme frente a isolados de Candida / Polymers with imidazolium salts : innovative materials with antibiofilm properties against Candida isolatesSchrekker, Clarissa Martins Leal January 2016 (has links)
As Candida spp. têm grande habilidade para colonizar e formar biofilmes em dispositivos médicos e biomateriais, provocando infecções nos hospedeiros humanos. O Polietileno de Alta Densidade (PEAD), Polihidroxibutirato (PHB) e o Ácido Polilático (PLA) apresentam propriedades interessantes para aplicações em dispositivos médicos. Os sais imidazólicos (SI) apresentam propriedades avançadas, inclusive antifúngicas, podendo ser utilizados como aditivos nestes polímeros. Neste estudo, foram preparados filmes poliméricos com diferentes teores dos SI cloreto de 1-n-hexadecil-3-metilimidazólico (C16MImCl) e metanossulfonato de 1-n-hexadecil-3- metilimidazólico (C16MImMeS), através dos processos de mistura no estado fundido (PEAD e PHB) e de Solvent Casting (PLA). Para avaliar se esses biomateriais apresentavam atividade antibiofilme foram realizados ensaios Antibiofilme, testados frente a isolados de Candida spp. Para determinar a porcentagem de impedimento da formação do biofilme foram realizados ensaios de Menor Concentração Antibiofilme, frente a isolados de Candida tropicalis. Análises de Microscopia Eletrônica de Varredura foram realizadas para verificar se ocorre o impedimento da formação do biofilme nos biomateriais. Foram avaliadas a citotoxicidade dos SI, a adesão celular e a biocompatibilidade celular de células-tronco mesenquimais humanas (CTMh) nos filmes de PEAD, PHB e PLA. Foram realizados ensaios histopatológicos dos biomateriais em pele de orelha de suínos para verificar se ocorre lesões microscópicas. Os filmes de PEAD, PHB e PLA foram caracterizados para avaliar a morfologia, a presença dos SI na superfície e as propriedades físicoquímicas dos mesmos. Os filmes de PEAD, PHB e PLA com diferentes teores dos SI C16MImCl e C16MImMeS apresentaram atividade antibiofilme frente a isolados de Candida tropicalis, C. parapsilosis e C. albicans. Com o ensaio MCA foi possível verificar que com o aumento do teor dos SI (C16MImCl e C16MImMeS) no PLA e PHB ocorre em geral um aumento na porcentagem de impedimento da formação do biofilme, sendo que isso em geral não ocorre com o PEAD. As micrografias de MEV mostraram o efetivo impedimento da formação do biofilme. Em geral os SI não apresentaram citotoxicidade em baixas concentrações. Os biomateriais mostraram uma boa adesão celular e são biocompatíveis com CTMh. Na avaliação histopatológica de pele da orelha suína com os biomateriais não foram observadas lesões microscópicas agudas. Em combinação com as boas propriedades morfológicas, físico-químicas e mecânicas, estes biomateriais são promissores para serem utilizados na confecção de dispositivos médicos. / Candida spp. have great ability to colonize and form biofilms on medical devices and biomaterials, causing infections in human hosts. High-density polyethylene (HDPE), Polyhydroxybutyrate (PHB) and Polylactic acid (PLA) exhibit interesting properties for applications in medical devices. Imidazolium salts (IS) have advanced properties, including antifungal, which could be explored as additives in these polymers. In this study, polymer films with different IS (1-n-hexadecyl-3- methylimidazolium chloride (C16MImCl) and 1-n-hexadecyl-3-methylimidazolium methanesulfonate (C16MImMeS)) contents were prepared, using either the melt blending (HDPE and PHB) or the solvent casting process (PLA). The antibiofilm assay with Candida spp. isolates was performed to assess the antibiofilm activity of these biomaterials. Inhibition percentages of biofilm formation of Candida tropicalis isolates were determined by the minor antibiofilm concentration (MAC) assay. Scanning electron microscopy was applied to verify the inhibition of biofilm formation on these biomaterials. The cytotoxicity of IS and the cell adhesion and biocompatibility of human mesenchymal stem cells (hMSC) of the HDPE, PHB and PLA films was studied. Histopathologic assays were performed with these biomaterials on ear pigskin to verify the occurrence of microscopic lesions. The HDPE, PHB and PLA films were characterized to understand their surface morphology, the presence of IS on the surface and the physicochemical properties thereof. The polymer films with different concentrations of the IS C16MImCl and C16MImMeS presented antibiofilm activity against isolates of Candida tropicalis, C. parapsilosis and C. albicans. The MAC assay enabled to determine that an increasing IS (C16MImCl and C16MImMeS) content in the PLA and PHB biomaterials promoted, in general, an increase in the inhibition percentage of biofilm formation, which was not observed for the HDPE films. The SEM micrographs showed the effective prevention of biofilm formation on the IS containing biomaterials. Lower concentrations of the IS showed no cytotoxicity. The biomaterials presented good cell adhesion percentages and biocompatibility with hMSC. Furthermore, no acute microscopic lesions were identified in the histopathological evaluation after contact between the biomaterials and ear pigskin. In combination with the good morphological, physicochemical and mechanical properties, these biomaterials can be considered as promising for use in the manufacturing of medical devices.
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Materiais de suporte na orelha média: comparação entre a esponja de gelatina absorvível e a esponja do biopolímero da cana-de-açúcar em ratosMAYER, Débora Lopes Bunzen 21 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-21 / Existem diversos biomateriais que podem ser utilizados na cirurgia otológica para preencher a
cavidade da orelha média ou dar suporte a enxertos. A esponja de gelatina absorvível é a mais
utilizada, mas pode provocar fibrose e prejudicar a ventilação da orelha média. O biopolímero
da cana-de-açúcar é um biomaterial, em forma de esponja, produzido na Estação
Experimental da Cana-de-açúcar da Universidade Federal Rural de Pernambuco. Investigar os
efeitos da reação inflamatória provocada pela esponja do biopolímero da cana-de-açúcar (BP)
comparada a esponja de gelatina absorvível (EGA) na mucosa da orelha média de ratos.
Estudo experimental prospectivo. A esponja do BP foi implantada na orelha direita e a EGA
na orelha esquerda de 30 ratos Wistar fêmeas. Os animais foram sacrificados com 4 e 12
semanas após o procedimento. Avaliação histológica qualitativa foi realizada para verificar a
reação inflamatória na bula timpânica. A esponja do BP provocou exsudato inflamatório mais
intenso e persistente que a EGA. Foi encontrado exsudato polimorfonuclear e
linfomononuclear nas bulas em contato com o BP que persistiram na luz da bula até 12
semanas, o que caracterizou uma reação inflamatória crônica com sinais de agudização. No
grupo da EGA, o exsudato foi linfomononuclear, leve, mas com observação de traves de
fibrose. A EGA foi, em grande parte, absorvido ao final do experimento. O BP não foi
absorvido durante o tempo de observação. Houve espessamento da mucosa e neoangiogênese
no grupo da EGA, o que provavelmente está envolvido com o processo de fibrose. Não houve
diferença estatisticamente significativa quanto ao grau de fibrose entre os biomateriais. O BP
apresentou reação inflamatória mais intensa que a EGA, no entanto, provocou menos
neoangiogênese. O presente experimento evidenciou que a esponja do BP não apresentou as
características necessárias para o uso como material de suporte dentro da bula timpânica, em
contato direto com a mucosa. Contudo, é possível que essa esponja possa ser utilizada em
contato com a face epidérmica da membrana timpânica e com o conduto auditivo externo,
pois se comportou como um material de preenchimento não-absorvível a curto prazo.
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Avaliação da resposta inflamatória da bula timpânica do biopolímero da cana-de-açúcarLopes Bunzen Mayer, Débora 31 January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / Introdução: A membrana de biopolímero da cana-de-açúcar tem sido utilizada experimentalmente em diversas áreas. Na Otologia existe a possibilidade da mesma ser utilizada como enxerto, na substituição da fáscia do músculo temporal. Objetivos: Analisar os resultados da interação da membrana de biopolímero da cana-de-açúcar com a bula timpânica do rato, comparada com a fáscia autóloga. Materiais e Métodos: Foi realizado estudo experimental, prospectivo, pareado com 24 ratos Wistar. Na orelha direita foi inoculada a membrana do biopolímero da cana-de-açúcar, e na orelha esquerda, a fáscia autóloga. Os ratos foram sacrificados com 4, 8 e 12 semanas após a cirurgia. As bulas timpânicas foram submetidas à análise histológica descritiva e histomorfométrica. O índice de absorção dos materiais foi analisado. Resultados: A análise histomorfométrica obtida através das médias das mensurações da membrana timpânica e da espessura da mucosa foi semelhante em ambas as orelhas. A análise descritiva evidenciou que o biopolímero causou mais exsudato que a fáscia precocemente, porém após 12 semanas, não havia mais reação inflamatória. Houve absorção total do biopolímero em três casos ao final do experimento. Conclusão: O biopolímero tem a capacidade de produzir exsudato precocemente, comparado com a fáscia, mas isso não influenciou o resultado final. O biopolímero é biocompatível, sendo absorvido completamente na bula timpânica. A membrana do bipolímero da cana-de-açúcar apresentou características que a capacitam como enxerto futuro na cirurgia otológica
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Avaliação histomorfométrica comparativa do processo de reparo de defeitos ósseos perenes em calvária de ratos tratados com -fosfato tricálcio, hidroxiapatita sintética, hidroxiapatita sintética + -fosfato tricálcio e osso autógeno / Histomorphometric comparative evaluation of the repair of perennial bone defects in rats skulls treated with -tricalcium phosphate, synthetic hydroxyapatite, synthetic hydroxyapatite + -tricalcium phosphate and autogenous graftMartins, Angélica Cristina de Oliveira 26 April 2010 (has links)
Os objetivos do trabalho foram caracterizar as biocerâmicas a base de hidroxiapatita (HA), -fosfato tricálcio (TCP) e o compósito HA/TCP na proporção 60:40 pela análise microestrutural e por Espectrometria de Energia Dispersiva de Raios-X (EDS) ao microscópio eletrônico de varredura, e comparar histomorfometricamente o processo de reparo ósseo de defeitos cranianos perenes tratados com essas três diferentes cerâmicas e o enxerto autógeno nos períodos de 0, 30, 90 e 180 dias pós-operatório. Microestruturalmente, a HA apresentou superfície irregular com concavidades, fendas e grande quantidade de microporos; o TCP exibiu superfície irregular e baixa resistência mecânica; a HA/TCP apresentou superfície lisa com raras concavidades e ausência de porosidades. As cerâmicas estavam constituídas pelos elementos O, P e Ca, sendo que a relação Ca/P seguiu a ordem: HA/TCP > HA > TCP. Morfometricamente, o volume inicial enxertado foi aproximadamente de 60 mm3 para todos os tratamentos. Entre 30 e 180 dias, o volume total da região do enxerto (Vtre) e do material enxertado (VM) manteve-se constante nos defeitos tratados com osso autógeno (Vtre = 53,61 mm³, VM =20,11 mm³), HA (Vtre = 60,13mm³, VM = 32,72 mm³), HA/TCP (Vtre = 57,60mm³, VM = 31,61 mm³), TCP (Vtre = 38,27mm3, VM = 10,07 mm³). Aos 30 dias, o volume de tecido ósseo no grupo autógeno foi de 22,06 mm³, ocupando quase a totalidade dos espaços entre as partículas, enquanto que, nos grupos HA e HA/TCP foi de apenas 7,62 mm³, sendo parte dos espaços (19,10 mm3), constituído por tecido conjuntivo fibroso. Entre 30 e 180 dias, o volume de tecido ósseo não apresentou diferenças estatísticas significantes (p>0,05). O número absoluto de osteoblastos e osteócitos no grupo autógeno foi, respectivamente, de 118,57 x102 e 178,57 x102 células, aos 30 dias, diminuindo 40,16% e 29,09% aos 90 dias, decorrente do processo de remodelação óssea. Nos grupos HA e HA/TCP, o número absoluto de osteoblastos e osteócitos foram similares e permaneceram constantes dos 30 aos 180 dias, com uma média de 39,13 x102 e 132,20 x102 células, respectivamente. Com relação ao grupo TCP, o volume de tecido ósseo foi de 4,16mm3 aos 30 dias e aumentou 70,27% aos 90 dias, passando a ocupar 13,93 mm³ do Vtre. Concomitantemente, o número absoluto de osteoblastos e osteócitos passaram, respectivamente, de 5,64 x102 e 37,01 x102 células, aos 30 dias, para 67,46 x102 e 166,13 x102 células, aos 90 dias. Baseados nos resultados aqui obtidos, concluímos que, no modelo experimental de defeitos cranianos em ratos, o enxerto autógeno é ainda, o padrão ouro para reconstrução óssea, enquanto que, dentre as cerâmicas analisadas, o TCP é o melhor biomaterial ósseo-substituto. / The aim of the work was to characterize the ceramics: hydroxyapatite (HA), -tricalcium phosphate (TCP) and the composite HA/TCP (60:40) through scaning electron microscope - energy dispersive system (SEM-EDS) analysis and to compare histomorphometrically the repair of perennial skull defects treated with these three different ceramics and autogenous graft at 0, 30, 90 and 180 days post-operatively. Microstructurally, HA showed irregular surface with concavities, cracks and several pores. TCP also presented irregular surface and low mechanical strength. HA/TCP showed smooth surface with rare concavities and pores. The ceramics were constituted by the elements O, P and Ca, and the relation Ca/P follow the order: HA/TCP > HA > TCP. Morphometrically, the initial graft volume was approximately 60 mm3 for all treatments. Between 30 and 180 days, the total volume of the grafted area (Vtga) and of the implanted material (Vim) were constant in the following groups: autogenous (Vtga = 53,61 mm³; Vim = 20,11 mm3), HA (Vtga = 60,13mm³; Vim = 32,72 mm3), HA/TCP (Vtga = 57,60mm³; Vim = 31,61 mm3) and TCP (Vtga = 38,27mm³; Vim = 10,07 mm3). At 30 days, the bone tissue volume was of 22,06 mm3 in the autogenous group, occupying totally the space among the particles, while in the HA and HA/TCP groups was only 7,62 mm3. At 30 and 180 days, the bone tissue volume did not show statistical differences (p>0.05). The total number of osteoblasts and osteocytes in the autogenous group was respectively, 118, 57 x 102 and 178,57 x 102 cells, at 30 days, reducing 40,16% e 29,09%, at 90 days, due to bone remodeling. In the HA and HA/TCP groups, a similar and stable number of osteoblasts and osteocytes were observed during all periods, with mean of 39,13 x 102 and 132,20 x 102 cells, respectively. In the TCP group, the bony tissue volume was of 4,16 mm3, at 30 days, increasing 70,27% at 90 days. Concomitantly, the total number of osteoblasts and osteocytes was respectively, 5,64 x 102 and 37,01 x 102 cells, at 30 days, achieving 67,46 x 102 and 166,13 x 102 cells, at 90 days. Based in the results obtained here, we concluded that in the rat skull defect model the autogenous bone is yet the good standard graft material for bone reconstruction and that among the tested ceramics, the TCP is the best bone graft substitute.
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