Na região de Suzano, uma grande quantidade de resíduos industriais e domésticos é despejada no Rio Tietê. Essa região merece atenção especial devido a sua proximidade com a nascente do rio. O tratamento biológico de efluentes é realizado pela ETE Suzano (Estação de Tratamento de Esgotos de Suzano) da SABESP (Companhia de Saneamento Básico do Estado de São Paulo). O objetivo do trabalho foi avaliar o potencial impacto de efluentes lançados no Rio Tietê por meio da análise de toxicidade aguda e da mutagenicidade em caramujos de água doce Biomphalaria glabrata. Ensaios de toxicidade aguda foram realizados em espécimes adultos e embriões nos estádios de blástula, gástrula, trocófora e véliger. Os resultados obtidos no ensaio de toxicidade aguda foram utilizados para determinar a faixa de concentração para o teste do letal dominante, que foi empregado para a detecção de mutações em células germinativas. Caramujos selvagens adultos, após o final da exposição nas soluções, foram cruzados com albinos não expostos em diferentes intervalos para avaliar os efeitos nas células germinativas em diferentes estágios da espermatogênese – 10, 17, 24, 31, 38, 45, 52 e 59 dias, para isso foram analisadas as progênies heterozigotas dos albinos quanto à freqüência de malformações. As amostras foram coletadas e transportadas pela SABESP. Os seguintes pontos foram escolhidos: P0 - Barragem Ponte Nova, P1 – 200 metros a montante da estação, P2 – o afluente da estação, P3 – o efluente tratado da estação antes do lançamento no rio e P4 – 200 metros após o lançamento do efluente no rio. Foram realizadas quatro amostragens: duas campanhas no inverno (C1 – agosto de 2006 e C3 – agosto de 2007) e duas no verão (C2 – fevereiro de 2007 e C4 – março de 2008). Nas amostras de agosto de 2006 e agosto de 2007, o afluente foi tóxico para os embriões e adultos. Os resultados foram semelhantes, com valores de CL50 de 43,04%, 41,56%, 57,16% e 60,06% para os embriões nos estádios de blástula, gástrula, trocófora e véliger, respectivamente, e 100% para caramujos adultos na primeira amostra e 48,24%, 43,71%, 55,43% e 62,64% para os embriões nos estádios de 8 blástula, gástrula, trocófora e véliger, respectivamente, e 84,16% para caramujos adultos, em agosto de 2007. A amostra de fevereiro de 2007 foi tóxica apenas para caramujos adultos, com valor de CL50 de 41,25% e a amostra de março de 2008 não foi tóxica para os caramujos adultos e embriões. Em todas as amostragens, após a descarga no rio, os efluentes tratados não foram tóxicos para adultos e embriões de B. glabrata. Não houve mutagenicidade em todas as amostras. Neste trabalho, o potencial impacto de descargas de efluentes ao biota do Rio Tietê foi observado. Foram realizadas comparações entre os ensaios normatizados de toxicidade aguda com Daphnia similis e os ensaios de toxicidade aguda com B. glabrata. Os resultados mostraram que houve resposta similar entre B. glabrata e D. similis. As novas metodologias propostas para o monitoramento da qualidade das águas: o ensaio de toxicidade aguda em adultos e embriões e o teste do letal dominante em Biomphalaria glabrata para a avaliação da mutagenicidade in vivo – mostraram ser eficientes na avaliação de amostras de água e podem ser integrados na bateria de testes já validados e empregados para o controle de poluição ambiental. / In the region of Suzano, a wide range of industrial and domestic wastes are discharged in the River Tietê. This region deserves special attention because of its proximity to the origin of the river. Biological treatment of effluents is carried out by WWTP (Wastewater Treatment Plant of Suzano) of SABESP (Companhia de Saneamento Básico do Estado de São Paulo). The aim of the study was evaluate the potential impact of secondary effluent discharge on Tietê River by analyzing acute toxicity and mutagenicity in the freshwater snail Biomphalaria glabrata. Acute toxicity assays were conducted in adult specimens and embryo at blastulae, gastrulae, trocophore and veliger stages. Dominant lethal test was performed for detection of germ cell mutations. Results obtainded in acute toxicity test were used to determine the range of concentration for the dominant lethal test. After the end of the exposure, adults wild-type snails were crossed with non-exposed albino snails at different intervals to evaluate the effects in the germ cells at the different stages of spermatogenesis – 10, 17, 24, 31, 38, 45, 52 and 59 days. The frequency of malformations on the wild embryos of the albino offspring was used as indicator of germ cell mutations. Samples were collected and transported by SABESP. The following points were chosen: P0 – Ponte Nova Dam, P1 – 200 meters upstream to the plant, P2 – the affluent of plant, P3 – the effluent treated by plant before discharge in the river and P4 – 200 meters downstream to the discharge in the river. Four sampling were performed: two samples in winter (C1 – August of 2006 and C3 – August of 2007) and two in summer (C2 – February of 2007 and C4 – March of 2008). At August 2006 and August 2007, the station affluent was toxic for embryos and adults. The results were similar, with LC50 values; 43.04%, 41.56%, 57.16% and 60.06% for embryos at blastulae, gastrulae, trocophore and veliger stages respectively and 100% for adult snails in first sample and 48.24%, 43.71%, 55.43% and 62.64% for embryos at blastulae, gastrulae, trocophore and veliger stages respectively and 84.16% for adult snails in august 10 2007. Sampling at February 2007 was toxic only for adult snails, with a LC50 value of 41.25% and was not toxic for adults and embryos at March 2008. In all samplings, after discharge into the river, treated effluents were not toxic for B. glabrata adults and embryos. There was no mutagenicity in any samples. In this study, the potential impact of effluent discharge to the biota of Tietê River was showed. These results show the importance of the WWTP biological treatment of effluents in reducing acute toxicity. Comparisons were made between standardized acute toxicity tests with Daphnia similis and acute toxicity tests with B. glabrata. The results showed similar response between B. glabrata and D. similis. The new methodologies proposed for the monitoring of water quality: the acute toxicity test in adults and embryos and the dominant lethal test in Biomphalaria glabrata for assessing the in vivo mutagenicity - proved to be efficient in the evaluation of the water samples and can be integrated in battery of tests, validated and employed by control of environmental pollution.

Na região de Suzano, uma grande quantidade de resíduos industriais e domésticos é despejada no Rio Tietê. Essa região merece atenção especial devido a sua proximidade com a nascente do rio. O tratamento biológico de efluentes é realizado pela ETE Suzano (Estação de Tratamento de Esgotos de Suzano) da SABESP (Companhia de Saneamento Básico do Estado de São Paulo). O objetivo do trabalho foi avaliar o potencial impacto de efluentes lançados no Rio Tietê por meio da análise de toxicidade aguda e da mutagenicidade em caramujos de água doce Biomphalaria glabrata. Ensaios de toxicidade aguda foram realizados em espécimes adultos e embriões nos estádios de blástula, gástrula, trocófora e véliger. Os resultados obtidos no ensaio de toxicidade aguda foram utilizados para determinar a faixa de concentração para o teste do letal dominante, que foi empregado para a detecção de mutações em células germinativas. Caramujos selvagens adultos, após o final da exposição nas soluções, foram cruzados com albinos não expostos em diferentes intervalos para avaliar os efeitos nas células germinativas em diferentes estágios da espermatogênese – 10, 17, 24, 31, 38, 45, 52 e 59 dias, para isso foram analisadas as progênies heterozigotas dos albinos quanto à freqüência de malformações. As amostras foram coletadas e transportadas pela SABESP. Os seguintes pontos foram escolhidos: P0 - Barragem Ponte Nova, P1 – 200 metros a montante da estação, P2 – o afluente da estação, P3 – o efluente tratado da estação antes do lançamento no rio e P4 – 200 metros após o lançamento do efluente no rio. Foram realizadas quatro amostragens: duas campanhas no inverno (C1 – agosto de 2006 e C3 – agosto de 2007) e duas no verão (C2 – fevereiro de 2007 e C4 – março de 2008). Nas amostras de agosto de 2006 e agosto de 2007, o afluente foi tóxico para os embriões e adultos. Os resultados foram semelhantes, com valores de CL50 de 43,04%, 41,56%, 57,16% e 60,06% para os embriões nos estádios de blástula, gástrula, trocófora e véliger, respectivamente, e 100% para caramujos adultos na primeira amostra e 48,24%, 43,71%, 55,43% e 62,64% para os embriões nos estádios de 8 blástula, gástrula, trocófora e véliger, respectivamente, e 84,16% para caramujos adultos, em agosto de 2007. A amostra de fevereiro de 2007 foi tóxica apenas para caramujos adultos, com valor de CL50 de 41,25% e a amostra de março de 2008 não foi tóxica para os caramujos adultos e embriões. Em todas as amostragens, após a descarga no rio, os efluentes tratados não foram tóxicos para adultos e embriões de B. glabrata. Não houve mutagenicidade em todas as amostras. Neste trabalho, o potencial impacto de descargas de efluentes ao biota do Rio Tietê foi observado. Foram realizadas comparações entre os ensaios normatizados de toxicidade aguda com Daphnia similis e os ensaios de toxicidade aguda com B. glabrata. Os resultados mostraram que houve resposta similar entre B. glabrata e D. similis. As novas metodologias propostas para o monitoramento da qualidade das águas: o ensaio de toxicidade aguda em adultos e embriões e o teste do letal dominante em Biomphalaria glabrata para a avaliação da mutagenicidade in vivo – mostraram ser eficientes na avaliação de amostras de água e podem ser integrados na bateria de testes já validados e empregados para o controle de poluição ambiental. / In the region of Suzano, a wide range of industrial and domestic wastes are discharged in the River Tietê. This region deserves special attention because of its proximity to the origin of the river. Biological treatment of effluents is carried out by WWTP (Wastewater Treatment Plant of Suzano) of SABESP (Companhia de Saneamento Básico do Estado de São Paulo). The aim of the study was evaluate the potential impact of secondary effluent discharge on Tietê River by analyzing acute toxicity and mutagenicity in the freshwater snail Biomphalaria glabrata. Acute toxicity assays were conducted in adult specimens and embryo at blastulae, gastrulae, trocophore and veliger stages. Dominant lethal test was performed for detection of germ cell mutations. Results obtainded in acute toxicity test were used to determine the range of concentration for the dominant lethal test. After the end of the exposure, adults wild-type snails were crossed with non-exposed albino snails at different intervals to evaluate the effects in the germ cells at the different stages of spermatogenesis – 10, 17, 24, 31, 38, 45, 52 and 59 days. The frequency of malformations on the wild embryos of the albino offspring was used as indicator of germ cell mutations. Samples were collected and transported by SABESP. The following points were chosen: P0 – Ponte Nova Dam, P1 – 200 meters upstream to the plant, P2 – the affluent of plant, P3 – the effluent treated by plant before discharge in the river and P4 – 200 meters downstream to the discharge in the river. Four sampling were performed: two samples in winter (C1 – August of 2006 and C3 – August of 2007) and two in summer (C2 – February of 2007 and C4 – March of 2008). At August 2006 and August 2007, the station affluent was toxic for embryos and adults. The results were similar, with LC50 values; 43.04%, 41.56%, 57.16% and 60.06% for embryos at blastulae, gastrulae, trocophore and veliger stages respectively and 100% for adult snails in first sample and 48.24%, 43.71%, 55.43% and 62.64% for embryos at blastulae, gastrulae, trocophore and veliger stages respectively and 84.16% for adult snails in august 10 2007. Sampling at February 2007 was toxic only for adult snails, with a LC50 value of 41.25% and was not toxic for adults and embryos at March 2008. In all samplings, after discharge into the river, treated effluents were not toxic for B. glabrata adults and embryos. There was no mutagenicity in any samples. In this study, the potential impact of effluent discharge to the biota of Tietê River was showed. These results show the importance of the WWTP biological treatment of effluents in reducing acute toxicity. Comparisons were made between standardized acute toxicity tests with Daphnia similis and acute toxicity tests with B. glabrata. The results showed similar response between B. glabrata and D. similis. The new methodologies proposed for the monitoring of water quality: the acute toxicity test in adults and embryos and the dominant lethal test in Biomphalaria glabrata for assessing the in vivo mutagenicity - proved to be efficient in the evaluation of the water samples and can be integrated in battery of tests, validated and employed by control of environmental pollution.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:30:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarinesCorrea.pdf: 1007322 bytes, checksum: eee0383af9853387a2b539673fb195df (MD5) Previous issue date: 2006-03-31 / The molluscicide and cercaricide action of the Pterodon emarginatus plants Magonia pubescens and Croton urucurana found in the Brazilian scrubland center-west region and in other Brazilian regions where the schistosomose is endemic was evaluated separately in laboratories The brute etanolic extracto obtained after the dilution in water were tested over the Biomphalaria glabrata snails intermediary host of Schistosoma mansoni The evaluation of the bioactivity was done from the initial concentration of 100ppm over adult snails and those ones which died in the adult phase had their concentrations reduced at 50 25 and 12.5ppm successively The molluscicide effect was evaluated over the snails development phasis over the laying of eggs and over the ovigery masses hatching The extracts that did not show bioactivity on 100ppm did not have their concentrations decreased The P emarginatus extract did not demonstrate bioactivity over the snails the laying of eggs the ovigery masses hatching and the liberation of cercaries Showing the cercaricide effect five hours after the start of the experiment whereas the controlling group survived for 36 hours over the same conditions The M pubescens extract demonstrated 100% of bioactivity on the four concentrations utilized and in all the snails development phasis with the exception of the ovigery masses hatching The cercaricide effect was 100% on the 100 and 50ppm concentrations within fifteen minutes 100% on 25ppm within 30 minutes and 100% on 12.5ppm within two hours whereas the controlling group survived for 36 hours at the same conditions With the C urucurana extract the bioactivity was of 26.6% on the 100ppm concentration within 24 hours of an exposition over adult snails On the 50 25 and 12.5ppm concentrations it was not showed bioactivity over the adult and young snails the laying of eggs and the ovigery masses hatching It was presented bioactivity with newly-developed snails on the three concentrations tested after 24 hours of exposition With the cercaries the deaths were observed from the fifteen minutes on the 100 and 50ppm concentrations two hours on 25ppm and five hours on 12.5ppm, and in the controlling group they survived 36 hours at the same conditions The snails which survived to the P emarginatus e C urucurana extracts showed an increasing on the laying of eggs number when compared to the controlling group / Foram avaliadas, separadamente, em laboratório, as ações moluscicida e cercaricida das plantas Pterodon emarginatus, Magonia pubescens e Croton urucurana encontradas no Cerrado brasileiro, região Centro-Oeste e em outras regiões brasileiras, onde a esquistossomose é endêmica. Os extratos brutos etanólicos obtidos, com diluição em água, foram testados sobre caramujos da espécie Biomphalaria glabrata, hospedeiro intermediário de Schistosoma mansoni. A avaliação da bioatividade foi feita a partir de uma concentração inicial de 100ppm sobre caramujos adultos, sendo que aqueles que apresentaram mortalidade na fase adulta tiveram suas concentrações diminuídas para 50, 25 e 12,5ppm sucessivamente. Foi testado o efeito moluscicida sobre as fases do desenvolvimento do caramujo, sobre as oviposições e sobre a eclosão das massas ovígeras. Os extratos que não apresentaram bioatividade em 100ppm não tiveram suas concentrações reduzidas. O extrato de Pterodon emarginatus não apresentou bioatividade sobre caramujos, oviposições, eclosão de massas ovígeras e liberação de cercárias. Apresentou efeito cercaricida cinco horas após o início do experimento, enquanto o grupo controle sobreviveu por até 36 horas nas mesmas condições. O extrato de Magonia pubescens apresentou 100% de bioatividade nas quatro concentrações utilizadas e em todas as fases do desenvolvimento dos caramujos exceto na eclosão das massas ovígeras O efeito cercaricida foi de 100% nas concentrações de 100 e 50ppm em quinze minutos 100% para 25ppm em 30 minutos e 100% para 12,5ppm em duas horas enquanto o grupo controle sobreviveu por até 36 horas nas mesmas condições Com o extrato de Croton urucurana a bioatividade foi de 26,6% na concentração de 100ppm em 24 horas de exposição sobre caramujos adultos Nas concentrações de 50, 25 e 12,5ppm não se verificou bioatividade sobre caramujos adultos jovens massas ovígeras e eclosão das massas ovígeras Verificou-se bioatividade com caramujos recém-eclodidos nas três concentrações testadas após 24 horas de exposição Com cercárias as mortes foram observadas a partir de quinze minutos nas concentrações de 100 e 50ppm duas horas para 25ppm e cinco horas para 12,5ppm e no grupo controle sobreviveram até 36 horas nas mesmas condições Os caramujos que sobreviveram aos extratos de P emarginatus e C urucurana apresentaram pequeno aumento no número de desovas quando comparados ao grupo controle

Made available in DSpace on 2016-08-19T17:47:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_IRAMAR BORBA DE CARVALHO.pdf: 3080156 bytes, checksum: 254d7f4e8bff85de8ad661652e7c3b1a (MD5) Previous issue date: 2014-10-23 / Schistosomiasis is a parasitic disease, considered one of the greatest public health problems in Brazil. This is due to the complexity of the transmission of the disease, which depends on several factors involved as definitive and intermediate hosts, socioeconomic conditions, poor sanitation and low educational level of the population susceptible to infection. Starting in 1999 with the decentralization of the Schistosomiasis Control Program (PCE) responsibility of shares shall be the responsibility of municipalities shall be implemented by the Family Health Strategy. The city of St. Louis presents conducive to the development and spread of the disease in peripheral neighborhoods conditions. They are: unfavorable socioeconomic characteristics and the presence of B. glabrata snail in water collections. These data support the population's vulnerability to the spread of endemic disease, so it is important to conduct studies to evaluate the work of epidemiological surveillance. Considering this perspective, the present study is to evaluate the overall implementation of the surveillance and control of schistosomiasis in São Luís activities. Methodology used for the study is kind of evaluative and normative components in their structure and process. Data collection was conducted in the months from March to July 2014, using semi-structured questionnaires as a tool for health professionals who work surveillance and control of schistosomiasis. There was collected secondary data from the Information System of the Schistosomiasis Control Program (SISPCE) concerning epidemiological indicators. All data were consolidated and arrays of judgment that allowed measuring the degree of implementation of the Program. The results show that the degree of implementation is partially satisfying, as well as external organizational and political context, they present problems of operationalization. The centralization of services program, disarticulation of primary care, in addition to socioeconomic and environmental conditions of the municipality may increase the risk of spreading the disease. To achieve improvements in the functioning of the program is important to the managers and technicians understand that planning and continuous monitoring activities are fundamental for the achievement of satisfactory results. / A esquistossomose é uma doença parasitária, considerada um dos maiores problemas de saúde pública no Brasil. Isso se deve à complexidade da transmissão da enfermidade, que depende de vários fatores envolvidos como: hospedeiros definitivo e intermediário, condições socioeconômicas, falta de saneamento básico e baixo nível de escolaridade da população suscetível à infecção. A partir de 1999 com a descentralização do Programa de Controle de Esquistossomose (PCE) a responsabilidade das ações passa a ser da competência dos municípios devendo ser executadas pela Estratégia de Saúde da Família. O município de São Luís apresenta condições propícias ao desenvolvimento e expansão da doença nos bairros de periferia. São elas: características socioeconômicas desfavoráveis e a presença de caramujo B. glabrata nas coleções hídricas. Esses dados fundamentam a vulnerabilidade da população à propagação da endemia, por isso é importante a realização de estudos para avaliar o trabalho de vigilância epidemiológica. Levando em consideração esta perspectiva, o presente trabalho tem como objetivo geral avaliar as atividades de vigilância e controle da esquistossomose em São Luís. A metodologia utilizada para o estudo é do tipo avaliativa e normativa em seus componentes de estrutura e processo. Foi realizada coleta de dados nos meses de março a julho de 2014, utilizando como instrumento questionários semiestruturados aplicados aos profissionais de saúde que atuam na vigilância epidemiológica e no controle da esquistossomose. Houve coleta de dados secundários do Sistema de Informação do Programa de Controle de Esquistossomose (SISPCE) referentes aos indicadores epidemiológicos. Todos os dados foram consolidados e matrizes de julgamento permitiram aferir o grau de implantação do Programa. Os resultados mostram que o grau de implantação é parcialmente satisfatório, assim como o contexto organizacional, político e externo, por apresentarem problemas de operacionalização. A centralização dos serviços do Programa,a desarticulação da atenção básica, além das condições socioeconômicas e ambientais do município favorecem o risco de propagação da doença. Para alcance de melhorias no funcionamento do Programa é importante os gestores e técnicos entenderem que o planejamento e monitoramento contínuo são atividades fundamentais para o alcance de resultados satisfatórios.

L'immunité des invertébrés a longtemps été définie comme reposant sur une immunité innée simple basée sur une reconnaissance peu spécifique. Cependant depuis 20 ans les preuves que l'immunité des invertébrés présente de la spécificité se multiplient. De la même façon un phénomène de mémoire immunitaire nommé priming immunitaire a également été décrit chez ces derniers. Dans le cadre de ce travail de thèse j'ai pu étudier sous différents aspect le priming immunitaire chez Biomphalaria glabrata, un mollusque d'eau douce, face à son parasite naturel Schistosoma mansoni. Dans un premier temps nous avons pu démontrer que le priming immunitaire était spécifique du génotype du premier parasite entrant dans le mollusque. De plus, il apparaît que la succession des différents stades de développement du parasite stimule l'immunité séquentiellement afin d'engendrer une protection totale. Enfin nous nous sommes intéressés aux mécanismes sous jacents à ce priming immunitaire en focalisant notre attention sur les facteurs humoraux impliqués dans cette réponse de priming immunitaire. Nous avons observé différentes molécules pouvant être associées à la réponse de priming tant dans la spécificité de reconnaissance que dans la phase effectrice de la réponse immunitaire.

Schistosoma mansoni est un parasite helminthe responsable de la schistosomiase intestinale, qui affecte 200 millions de personnes dans les zones tropicales et subtropicales, et l'on estime que 600 millions de personnes sont exposées au risque de cette infection. Le cycle de vie du parasite est complexe et il requière, un hôte définitif, l'homme et un hôte intermédiaire, un mollusque d'eau douce appelé Biomphalaria glabrata. C'est chez le mollusque où le parasite se multiplie de forme massive de là l'importance du mollusque dans la transmission du parasite à l'homme. Lors de l'infection le mollusque met en place une réponse cellulaire et humorale très marquées pouvant dans certains cas tuer le parasite. Malgré l'importance du mollusque, les mécanismes moléculaires qui gouvernent ces réponses sont largement inconnus et donc l'étude de l'immunité du mollusque est une priorité en recherche médicale. Nous avons identifié deux orthologues de la cytokine de mammifère MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor ) BgMIF1 et BgMIF2. En utilisant des approches biochimiques et moléculaires en combinaison avec la technique de RNAi in vitro et in vivo nous avons démontré le rôle de BgMIF 1 et BgMIF2 comme régulateurs centrales de l'immunité innée du mollusque. En particulaire BgMIF1 régule l'activation des hémocytes et la réponse d'encapsulation lors de l'infection. D'un autre côté BgMIF2 régule dans la réponse antibactérienne. Nos résultats montrent que chez B. glabrata il y une régulation fine de la réponse immune innée et une capacité pour répondre de façon différente lors d'un challenge immunitaire. De plus une régulation par une cytokine de type vertébré dans un invertébré n'avait jusqu'à présent jamais été décrite. Nos travaux établissent les bases pour mieux comprendre les relations hôte-parasite dans une maladie comme la schistosomiase, et aussi constituent une avancée importante du point de vue de l'évolution de l'immunité innée en général.l

Submitted by Chaylane Marques (chaylane.marques@ufpe.br) on 2015-03-13T18:05:39Z No. of bitstreams: 2 ANA CARINA CAVALCANTI DE FREITAS - DOUTORADO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS - 2012.pdf: 10008315 bytes, checksum: 38c6ac0aa331fea67fa107d6df28fdba (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T18:05:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 ANA CARINA CAVALCANTI DE FREITAS - DOUTORADO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS - 2012.pdf: 10008315 bytes, checksum: 38c6ac0aa331fea67fa107d6df28fdba (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-12-18 / FACEPE / As plantas constituem uma importante fonte de produtos naturais ativos. Dentre os metabólitos primários vegetais, estão as lectinas, proteínas ubíquas na natureza que se ligam de forma específica e reversível a carboidratos, o que lhes permite várias aplicações biotecnológicas. Libidibia (Caesalpinia) ferrea var. parvifolia, popularmente conhecida como “pau-ferro”, é uma árvore largamente distribuída no Brasil utilizada na medicina popular devido às suas numerosas propriedades terapêuticas. O objetivo deste trabalho foi avaliar as propriedades biológicas (atividades citotóxica, antitumoral, anti-inflamatória, analgésica, artemicida e moluscicida) de preparações obtidas de L. ferrea, visando empregá-las como fitofármacos ou agentes de controle biológico. Na avaliação da atividade anti-inflamatória, o extrato etanólico da vagem (EECf, 50 mg/kg) reduziu significativamente o edema de orelha (66,6%) em relação ao controle, inibiu a permeabilidade vascular induzida por ácido acético, e a migração de leucócitos polimorfonucleares para a cavidade peritoneal induzida pelo tioglicolato. No teste de contorções induzidas por ácido acético, EECf (12,5; 25 e 50 mg/kg) reduziu significativamente o número de contorções em 24,9%; 46,9% e 74,2%, respectivamente. No teste de formalina, EECf apresentou efeitos nociceptivos apenas na segunda fase, relacionada à dor inflamatória. O extrato bruto aquoso da vagem (CE) e uma fração proteica obtida por precipitação com sulfato de amônio (F80), ambos em 100 mg/kg, também apresentaram efeito anti-inflamatório significativo, evidenciado pela redução (40,9% e 38,2%, respectivamente) do número de leucócitos no exsudato inflamatório, na peritonite induzida por carragenina. Ambos os preparados provocaram um decréscimo significativo nas concentrações de óxido nítrico e reduziram em 56,60% e 72,72%, respectivamente, o número de contorções induzidas por ácido acético, demonstrando forte ação antinociceptiva destas preparações. Na atividade citotóxica, as preparações não inibiram o crescimento nas linhagens celulares testadas. A redução no peso do tumor Sarcoma-180 promovida por F80 também não foi significativa (8,68%, 100 mg/kg peso corporal). A LD50 para ambos os preparados ficou estabelecida em 2.500 mg/kg peso corporal. As lectinas CfePL, CfeBL e CfeLL, obtidas respectivamente das vagens, entrecasca e folhas, foram testadas em diferentes concentrações (12,5; 25; 50 e 100 ppm), quanto às suas atividades artemicida (frente à Artemia salina) e embriotóxica (contra embriões de Biomphalaria glabrata). Quanto à atividade artemicida, todas as lectinas testadas promoveram a morte de A. salina, com LC50 de 10,728; 25,78 e 54,18 ppm, para CfeLL, CfeBL e CfePL respectivamente. Apenas CfePL e CfeLL apresentaram atividade embriotóxica nas concentrações testadas. As LC50 de CfeLL e CfePL foram de 36,30 e 94,95 ppm, respectivamente. Em conclusão, CE e F80 não apresentam atividades citotóxica e antitumoral significativas contra as células e o tumor testados; porém, a baixa toxicidade permite seu uso com certa segurança em atividades biológicas ou na medicina popular. Contudo, possuem atividades anti-inflamatória e antinociceptiva promissoras, assim como EECf, corroborando a base farmacológica do uso etnomédico de L. ferrea. Os resultados obtidos da atividade artemicida apresentada por CfeLL e CfeBL, além da significativa atividade moluscicida de CfeLL demonstram potenciais aplicações biotecnológicas para estas lectinas.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:16:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8638_1.pdf: 1080694 bytes, checksum: 8a1a58990100081f07c1f696123045ef (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As radiações ionizantes são conhecidas como agentes mutagênicos e causadores de infertilidade, devido às alterações genéticas que ocasionam. Esta característica tem motivado o emprego dessas radiações no controle biológico de animais, particularmente em situações envolvendo saúde pública. Neste contexto, o molusco Biomphalaria glabrata pode ser considerado um excelente modelo experimental. Este trabalho buscou avaliar os efeitos biológicos da radiação de uma fonte de 60Co com alta taxa de dose sobre a sobrevivência e reprodução do Biomphalaria glabrata. Para tanto, foram selecionados grupos de caramujos adultos, expostos e não expostos a doses entre 20 e 60 Gy, com intervalos de 10 Gy. Para todos os níveis de dose estudados, verificou-se que a radiação estimulou a produção de embriões, apesar dos índices de viabilidade terem sido inferiores a 6%. Por outro lado, os grupos irradiados com doses de 50 e 60 Gy tiveram percentuais de animais mortos da ordem de 30 e 35%, respectivamente. Os resultados obtidos são sugestivos de que doses de 20 e 30 Gy são ideais para o controle populacional desta espécie de animais, visto que ocasionaram a diminuição na fertilidade dos mesmos, sem levá-los à morte. Embora estudos mais aprofundados sejam necessários, ficou evidente o grande potencial da aplicação da radiação gama de alta taxa de dose no controle reprodutivo do Biomphalaria glabrata

Schistosoma mansoni est un parasite helminthe responsable de la schistosomiase intestinale, qui affecte 200 millions de personnes dans les zones tropicales et subtropicales, et l’on estime que 600 millions de personnes sont exposées au risque de cette infection. Le cycle de vie du parasite est complexe et il requière, un hôte définitif, l’homme et un hôte intermédiaire, un mollusque d’eau douce appelé Biomphalaria glabrata. C’est chez le mollusque où le parasite se multiplie de forme massive de là l’importance du mollusque dans la transmission du parasite à l’homme. Lors de l’infection le mollusque met en place une réponse cellulaire et humorale très marquées pouvant dans certains cas tuer le parasite. Malgré l’importance du mollusque, les mécanismes moléculaires qui gouvernent ces réponses sont largement inconnus et donc l’étude de l’immunité du mollusque est une priorité en recherche médicale. Nous avons identifié deux orthologues de la cytokine de mammifère MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor ) BgMIF1 et BgMIF2. En utilisant des approches biochimiques et moléculaires en combinaison avec la technique de RNAi in vitro et in vivo nous avons démontré le rôle de BgMIF 1 et BgMIF2 comme régulateurs centrales de l’immunité innée du mollusque. En particulaire BgMIF1 régule l’activation des hémocytes et la réponse d’encapsulation lors de l’infection. D’un autre côté BgMIF2 régule dans la réponse antibactérienne. Nos résultats montrent que chez B. glabrata il y une régulation fine de la réponse immune innée et une capacité pour répondre de façon différente lors d’un challenge immunitaire. De plus une régulation par une cytokine de type vertébré dans un invertébré n’avait jusqu’à présent jamais été décrite. Nos travaux établissent les bases pour mieux comprendre les relations hôte-parasite dans une maladie comme la schistosomiase, et aussi constituent une avancée importante du point de vue de l’évolution de l’immunité innée en général.l / We have identified and characterized a Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) family member in the Lophotrochozoan invertebrate, Biomphalaria glabrata, the snail intermediate host of the human blood fluke Schistosoma mansoni. In mammals, MIF is a widely expressed pleiotropic cytokine with potent pro-inflammatory properties that controls cell functions such as gene expression, proliferation or apoptosis. Here we show that the MIF protein from B. glabrata (BgMIF) is expressed in circulating immune defense cells (hemocytes) of the snail as well as in the B. glabrata embryonic (Bge) cell line that has hemocyte-like features. Recombinant BgMIF (rBgMIF) induced cell proliferation and inhibited NO-dependent p53-mediated apoptosis in Bge cells. Moreover, knock-down of BgMIF expression in Bge cells interfered with the in vitro encapsulation of S. mansoni sporocysts. Finally, the in vivo knock-down of BgMIF prevented the changes in circulating hemocyte populations that occur in response to an infection by S. mansoni miracidia. These results provide the first functional evidence that a MIF ortholog is involved in an invertebrate immune response towards a parasitic infection and highlight the importance of cytokines in invertebrate-parasite interactions.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:30:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CIRLANE SILVA FERREIRA.pdf: 793070 bytes, checksum: b29f3e5051b2e84947431f66651a7662 (MD5) Previous issue date: 2006-03-31 / The state of Goiás represents a high risk to schistosomiasis stablishment area The presence of the intermediate host Biomphalaria sp added to high migration levels of people from endemic regions of the country are evidences that favour the installation of this disease life cycle In this state of Goiás there are reports of high parasitary intensity and even cases of paraplegia associated with schistosomiasis. The Stryphnodendron polyphyllum (Martius 1837) known locally as Barbatimão de folha pequena is reported as a molluscicide plant This paper assesses the activity of gross bark extracts from S polyphyllum on the metabolism and on the acid-alkaline balance of B glabrata The mollusks were exposed to the extract at 25 and 50 mg/L concentrations for 24 hours and compared to a control group The concentrations of glucose calcium urea proteins and the activity of the following enzymes dehydrogenases lactate and aminotransferases were estimated using the spectrophotometry method The organic acids citrate propionate α- cetoglutarate succinate acetate malate fumarate pyruvate and lactate were detected and quantified using the liquid chromatography method Of all the organic acids found in the hemolymph, only citrate and propionate presented a significant alteration The acid-alkaline balance was verified by measuring the concentrations found in the pH oxygen carbonic gas carbonate ions and oxygen saturation using Radiomiter equipment The S polyphyllum extract tested proved effective due to celular toxicity on B glabrata(Say 1818) Alterations verified in the biochemical dosages reflect the metabolic disturbances in the hemolymph of the mollusk The Cirlane Silva Ferreira x extract interference caused an increase in the levels of glucose urea calcium aspartate alanine aminotransferases and carbonic gas pressure simultaneously causing a decrease in the levels of lactate dehydrogenase pH oxygen pressure carbonate ions and oxygen saturation This study confirms the bioactivity of the S polyphyllum aqueous extract on B glabrata One of the main contributions of the methodology used is that it enabled observation after direct contact with the extract that proved bioactivity on the metabolism of the mollusk The analysis of the aqueous extract taken from the bark of the barbatimão may be the basis for new and less toxic as well as less costly alternative for the control of schistosomiasis in Brazil, where the savannah is vast and financial resources are often scarce in the health sector / O Estado de Goiás representa uma área de alto risco ao estabelecimento da esquistossomose A presença do hospedeiro intermediário Biomphalaria sp somada à elevada migração de pessoas oriundas de regiões endêmicas do país são fatores que favorecem a instalação do ciclo desta doença Há no Estado de Goiás relatos de casos com alta intensidade parasitária e até mesmo um caso com paraplegia associada a esquistossomose O Stryphnodendron polyphyllum (Martius 1837) conhecido como Barbatimão de Folha Pequena é relatado como planta moluscicida Neste trabalho avaliou-se a atividade de extratos brutos da casca do caule de S polyphyllum sobre o metabolismo e o equilíbrio ácido-base do B glabrata Os moluscos foram expostos ao extrato por 24 horas nas concentrações de 25 e 50 mg/L e comparados com um grupo controle Foram avaliadas as concentrações de glicose cálcio uréia proteínas e atividade das enzimas lactato desidrogenase e aminotransferases pelo método de espectrofotometria Os ácidos orgânicos citrato propionato α-cetoglutarato succinato acetato malato fumarato piruvato e lactato foram dosados pelo método da cromatografia líquida Dos ácidos orgânicos encontrados na hemolinfa apenas o citrato e o propionato tiveram uma alteração significativa O equilíbrio ácido-base foi verificado pela medida das concentrações de pH oxigênio gás carbônico íons carbonatos e saturação de oxigênio através de equipamento Radiomiter O extrato de S polyphyllum testado demonstrou ação efetiva observada pelo estabelecimento de toxicidade celular sobre B glabrata (Say, 1818) As alterações apresentadas nas dosagens bioquímicas refletem os distúrbios metabólicos ocorridos na hemolinfa deste molusco A interferência deste extrato fez com que os níveis de glicose uréia cálcio aspartato alanina aminotransferases e pressão de gás carbônico se elevassem enquanto que os níveis de lactato desidrogenase pH pressão de oxigênio íons carbonato e saturação de oxigênio diminuíram Este trabalho confirma a bioatividade do extrato aquoso de S polyphyllum sobre o B glabrata Uma das principais contribuições desse estudo desenvolvido é a observação pós-contato direto com o extrato que demonstrou uma bioatividade sobre o metabolismo do molusco A análise de extrato aquoso obtido do caule do barbatimão pode subsidiar nova alternativa de menor toxicidade e menor custo financeiro no controle da esquistossomose no Brasil onde o Cerrado é vasto e a carência de recursos é freqüente no setor da saúde