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Hemócitos de caranguejeiras da família Theraphosidae: ultracaracterização e purificação de peptídeos antimicrobianos / Hemócitos de caranguejeiras da família Theraphosidae: ultracaracterização e purificação de peptídeosSOARES, Tatiana 29 April 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-04-29 / CAPES / Alguns aracnídeos possuem uma ampla distribuição geográfica e podem viver mais de duas décadas; eles estão presentes desde a Era Paleozóica há cerca de 300 milhões de anos. Esses aracnídeos são as tarântulas, especificamente as aranhas pertencentes ao gênero Lasiodora. Infelizmente o gênero ainda encontra-se sob uma revisão sistemática e necessita de informações e compilações científicas de qualquer natureza. Com o intuito de enriquecer as informações sobre esse gênero a presente Tese descreve, pela primeira vez, a caracterização dos hemócitos de Lasiodora sp. quanto a ultraestrutura e a purificação de peptídeos antimicrobianos a partir dessas mesmas células. Adicionalmente, apresenta um artigo de revisão que tem como foco os hemócitos da Lasiodora sp. sob aspectos de purificação de biomoléculas, caracterização celular e situação taxonômica do gênero. Seis tipos celulares de hemócitos foram identificados e classificados de acordo com a literatura existente, nomeados prohemócitos, granulócitos tipo I e II, esferulócitos, oenocitóide e plasmatócitos. Quanto à purificação de peptídeos antimicrobianos (AMPs) as tarântulas: Lasiodora sp., Acanthoscurria rondoniae e Vitalius sorocabae, migalomorfas da família Theraphosidae, foram escolhidas para testar a hipótese de que moléculas podem ser conservadas em organismos do mesmo táxon. Os componentes antimicrobianos de Lasiodora sp. (L), A. rondoniae (A) e V. sorocabae (V) foram pré-purificados por cromatografia com concentrações crescentes de acetonitrila (5%, 40% e 80%). O material eluído na concentração de 40% de acetonitrila foi submetido a um fracionamento por cromatografia em fase reversa (RP- HPLC), resultando em frações com atividade antimicrobiana. Todas as frações isoladas foram analisadas quanto ao efeito no crescimento da bactéria Gram-positiva Micrococcus luteus A270, Gram-negativa Escherichia coli SBS363 e levedura Candida albicans MDM8. As frações L1, A1 e V1 inibiram o crescimento de E. coli, M. luteus e C. albicans. As frações L2, A2 e V2 apresentaram atividade antimicrobiana somente contra E. coli enquanto as frações L3, A3, e V3 apresentaram atividade antimicrobiana contra E. coli e C. albicans. Todas as frações isoladas foram submetidas à espectrometria de massas (ESI-MS). As frações L1, A1 e V1 correspondem ao peptídeo gomesina, as frações L2, A2 e V2 ao peptídeo migalina, e as frações L3, A3 e V3 ao peptídeo acanthoscurrina. O estudo contribui para a caracterização inédita do gênero e para a elucidação de biomoléculas em hemócitos de aranhas. / Some arachnids have a wide geographical distribution and can live more than two decades; they are present from the Paleozoic Era about 300 million years. These arachnids are tarantulas, specifically spiders belonging to Lasiodora genre. Unfortunately the genre still is under a systematic review and needs information and scientific compilations of any kind. In order to provide more details about this genre this thesis describes for the first time, the characterization of hemocytes Lasiodora sp. as the ultrastructure and purification of antimicrobial peptides from these same cells. Additionally, features a review article focuses on the hemocytes of Lasiodora sp. under aspects of purification of biomolecules, cell characterization and taxonomic situation. Six cell types of hemocytes were identified and classified according to the literature, named prohemocytes, granulocyte type I and II, spherulocytes, oenocytes and plasmatocytes. For the purification of antimicrobial peptides (AMPs) of tarantulas: Lasiodora sp., Acanthoscurria rondoniae and Vitalius sorocabae, mygalomorphs from Theraphosidae family, were chosen to test the hypothesis that molecules can be conserved in the same taxon. The antimicrobial components of Lasiodora sp. (L) A. rondoniae (A) and V. sorocabae (V) was pre-purified by chromatography with increasing concentrations of acetonitrile (5%, 40% and 80%). The material eluted at a concentration of 40% acetonitrile was subjected to fractionation by reversed phase chromatography (RP-HPLC), resulting in fractions with inhibitory activity. All the isolated fractions were analyzed for their effect on the growth of Gram-positive bacterium Micrococcus luteus A270, gram negative Escherichia coli and yeast Candida albicans SBS363 MDM8. The fractions L1, A1 and V1 inhibited the growth of E. coli, C. albicans and M. luteus. The L2 fractions, A2 and V2 showed antimicrobial activity against E. coli while only fractions L3, A3, and V3 showed antimicrobial activity against E. coli and C. albicans. All isolated fractions were subjected to mass spectrometry (ESI-MS). The fractions L1, A1 and V1 correspond to gomesin peptide fractions; the L2, A2 and V2 mygalin and L3, A3 and V3 the acanthoscurrin. The study contributes to the unprecedented characterization of the genus and the elucidation of biomolecules in hemocytes of spiders.
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Influência da radiação não Ionizante sobre a marcação de células sanguíneas com 99MTC in vitro e cicatrização em camundongos in vivoRicardo de Queiroz Martiniano, Carlos January 2003 (has links)
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Previous issue date: 2003 / A densidade energética de baixa potência (Laser e campo
eletromagnético) vem sendo utilizada, nos últimos anos, com bastante freqüência
na área médica e odontológica. O principal uso do Laser é auxiliar o reparo
tecidual, para aliviar a dor, controlar a inflamação e o edema. Enquanto que, a
ação de campos eletromagnéticos de baixa freqüência sobre os seres vivos é alvo
de estudo ao longo dos últimos anos e tem se constatado a sua interferência
sobre a debilidade do sistema endócrino. Vale ressaltar que o estudo de
marcação das hemácias com tecnécio-99m é usado para diversas avaliações em
medicina nuclear incluindo o estudo do volume sangüíneo em tratamento
intensivo neurológico. Este trabalho visa avaliar a influencia da radiação não
ionizante sobre a marcação de hemácias "in vitro" e avaliar o efeito do laser na
cicratização em camundongos. Para isto foram utilizadas amostras de sangue de
ratos da linhagem Wistar com 60 dias de idade pesando cerca de 240g. O sangue
foi colhido por punção cardíaca e dividido em dois grupos. O primeiro para ser
submetido à indução com Laser de Baixa Potência (LBP) nas seguintes
densidades energéticas separadamente: 3, 6 , 9 e 18 J/cm2 .Nos experimentos,
com a indução do LBP foram utilizados o EDT A e a Heparina como
anticoagulante. O segundo grupo foi submetido a um campo eletromagnético
(CEM) de 60 Hz durante 2, 4, 17 e 21 horas separadamente. Após a indução do
laser e do campo eletromanético as amostras de sangue foram submetidas a
marcação com Tecnécio 99m (99mTc). Os resultados mostram que a presença de
EDT A e Heparina no sangue, como anticoagulante é capaz de modificar a
captação de tecnécio-99m pelas hemácias. A indução do laser promove uma
redução da capacidade de ligação do tecnécio-99m a partir de 3J/cm2 obtendo
uma redução em torno de 50% e permanecendo inalterada até 18J/cm2. Por outro
lado, pode-se verificar que o campo eletromagnético também altera a capacidade
de ligação em função do tempo de exposição, porém a inibição da captação pelas
hemácias é menos acentuada que o laser. No experimento "in vivo" com
camundongos machos, após incisões no abdome da ordem de 1 cm, com
posterior aplicação do laser na densidade energética de 3J/cm2, na incisão
esquerda, observa-se que 48 horas após as aplicações, o tecido epitelial e
conjuntivo, macroscopicamente, encontra-se totalmente livre de inflação e
infecção e com uma cicatrização superficial mais pronunciada que a incisão
direita. Pode-se concluir que o laser e o campo eletromagnético promovem
alterações na marcação dos elementos sangüíneos, e o laser é capaz de acelerar
o reparo celular
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Padronização da coleta e quantificação de células-tronco hematopoéticas no sangue do cordão umbilical de cães /Canesin, Ana Paula Massae Nakage. January 2005 (has links)
Orientador: Áureo Evangelista Santana / Banca: Belinda Pinto Simões / Banca: Márcia Mery Kogika / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Gilson Hélio Toniollo / Resumo: As células-tronco promovem a reconstituição hematopoética e de outros tecidos, estando presentes no embrião, sangue periférico, medula óssea e sangue do cordão umbilical (SCU). Os modelos experimentais de células-tronco do sangue periférico e da medula óssea, em cães, têm propiciado informações relevantes para transplantes de células-tronco em humanos. Entretanto, não existe estudo sobre o SCU canino. O objetivo deste ensaio foi padronizar um método de coleta de SCU de cães sadios e quantificar as células sangüíneas e células-tronco CD34+ do SCU. No presente protocolo, a coleta de SCU de 40 cães neonatos foi realizada para contagem das células sangüíneas, com o auxílio de um contador automático de células, bem como das células-tronco, CD34+, utilizando-se do citômetro de fluxo. O método de coleta do SCU na porção justaplacentária dos vasos umbilicais permitiu a quantificação das células sangüíneas e células-tronco. Os valores hematológicos do SCU, exceto o VCM e o número de plaquetas, apresentaram-se reduzidos com relação àqueles de cães recém-nascidos e adultos. Apesar do volume escasso de SCU (1325 mL), a quantidade de células-tronco do cordão umbilical canino (3,38l2,72 CD34+ x106/kg) é semelhante àquela reportada para medula óssea, bem como para o sangue periférico mobilizado de cães adultos, sendo coincidente com aquela preconizada para reconstituição hematopoética. / Abstract: Stem cells promote the reconstitution of the hematopoietic and others tissues, and are present in the embryo, peripheral blood, bone marrow and umbilical cord blood (UCB). The experimental models of bone marrow and peripheral blood stem cells in dogs provide important information for stem cells transplants in humans. However, there are no studies on the UCB cells of dogs. This experiment aimed at standardizing the collection method and at quantifying blood and stem cells in the umbilical cord of dogs aiming at hematological recuperation. In this assay, UCB of 40 neonates dogs was collected for blood cell count in automatic cell counter and stem cell CD34+ count in flow cytometer. The method of UCB collection at the juxta-placental portion of the umbilical vessels allowed UCB blood and stem cell CD34+ quantification. The hematological values of UCB, except for the Mean Corpuscular Volume and platelet count, were reduced as compared to the reference values of the peripheral blood of healthy neonate and adult dogs. Despite the small volume of UCB (1325 mL), the quantity of stem cells in the canine umbilical cord (3.38l2.72 CD34+ x106/kg) is similar to that reported in the bone marrow and mobilized peripheral blood of adult dogs, coinciding with the amunt recommend for hematopoietic reconstitution. / Doutor
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Participação da Fosfatidilserina exposta por Toxoplasma gondii na indução de Corpúsculos Lipídicos em MacrófagoRoberto Neto, João January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Toxoplasma gondii é o agente causador da toxoplasmose, doença distribuída em grande parte do globo infectando vertebrados endotérmicos. T. gondii é um parasita intracelular obrigatório e não sintetiza colesterol, recrutando-o da célula hospedeira. Esse parasito é dividido em grupos, de acordo com a virulência, sendo a cepa RH e a cepa ME-49 representantes de parasitos de maior e de moderada virulência, respectivamente. Semelhante a outros parasitos protozoários, T. gondii expõem fosfatidilserina (PS) na membrana externa, sendo um exemplo do mimetismo apoptótico, o que tem sido sugerido como mecanismo de evasão. Corpúsculos lipídicos (CL) são organelas lipídicas comumente encontradas em uma gama de diferentes células, de plantas, parasitos e animais. CL são modulados positivamente por diferentes fatores, incluindo células apoptóticas, parasitos como Trypanosoma cruzi, Leishmania spp. e Plasmodium falciparum e citocinas, como o fator de transformação do crescimento (TGF-\03B2). Nosso trabalho visou investigar se a PS exposta na membrana plasmática de T. gondii pode induzir CL em macrófagos. Independente da virulência da cepa utilizada, T gondii foi capaz de induzir CL em macrófagos infectados. A indução foi maior com aumento da relação parasito/macrófago. Subpopulações de T. gondii, PS positivos (PS+) e PS negativo (PS-) foram obtidas e a subpopulação de PS + induziu mais CL em relação a subpopulação de PS-. A neutralização da PS dos parasitos PS+ ou da população total com anexina-V foi capaz de reduzir o número de CL nas células hospedeiras. Lipossomos contendo PS induziram mais CL em macrófagos quando comparados aos lipossomos sem PS
Curiosamente, parasitos PS- também foram capazes de aumentar o número de CL em macrófagos, sugerindo a participação de outros fatores nesse processo indutor. Após a interação de macrófagos com T. gondii, observamos aumento no número de CL tanto em células que continham o parasita quanto em células vizinhas não parasitadas. Esse achado sugere uma sinalização 18 parácrina entre as células. O TGF-\03B2 é descrito como sendo secretado após infecção por T. gondii, e sua neutralização causou inibição da formação de CL induzido por T. gondii, revelando sua participação nesse processo. Concluímos que T. gondii é capaz de induzir CL em macrófagos, e essa indução tem a participação da PS exposta em sua membrana. A indução dessas organelas ocorreu independente da virulência da cepa. Esse processo é potencializado pela ação parácrina do TGF-\03B2 / Toxoplasma gondii
is the causative agent of toxoplasmosis, a disease
largely
spread
across the globe infecting
almost any
endothermic vertebrates.
T. gondii
is an
obligatory intracellular
par
asite that
can
not synthesize cholesterol
thus relying on
recruiting
it from
the host cell. This parasite is divided into groups according to the
virulence, and the RH
strain and the ME
-
49
strain
representing
highly
and moderate
virulen
t
parasites, respect
ively. Similar to other protozoan parasites,
T. gondii
exposes phosphatidylserine (PS) on the outer membrane
,
an example of the
apoptotic mimicry
,
which
has been suggested as
a
mechanism
of evasion
,. Lipid
bodies (LB) are lipid organelles commonly found in
a range of different cells of plants,
animals and parasites. LB are positively modulated by different factors, including
apoptotic cells, parasites such as
Trypanosoma cruzi
,
Leishmania
spp. and
Plasmodium falciparum
and cytokines such as transforming gro
wth factor (TGF
-
β) .
Our study aimed to investigate whether the PS exposed on the plasma membrane of
T. gondii
in macrophages can induce
LB
.
T gondii
was capable of inducing LB in
infected macrophages,
i
ndependently of the virulence of
the
strain used
.
T
he
LB
induction was greater with increase in parasite / macrophage ratio. Subpopulations of
T gondii
posi
tive PS (PS
+) and negative (PS
-
) were obtained and PS+ subpopulation
induced
significantly greater
LB
formation compared to
PS
-
subpopulation. The
neutra
lization of PS with annexin
-
V was able to reduce the number of LB
o
n
PS+
parasites
or on the
total
parasite
population
, but not on
PS
-
parasites. Liposomes
containing PS induced more LB than liposomes without PS. Interestingly, PS
-
parasites induced LB
f
ormation
in macrophages, suggesting the involvement of other
factors.
After interaction of
T. gondii
with
macrophages
,
we observed
increased
LB
formation both in cells containing internalized
parasite
s as well as in bystander cells
without internalized par
asites
,
suggestive of
a paracrine signaling. TGF
-
β is
described as being secreted after infection with
T. gondii
and its neutralization
caused
inhibition of
T. gondii
-
induced
LB
formation
,
pointing to
TGF
-
β participation
in this process. We conclude that
T. gondii
is able to
induce
LB formation
in
macrophages
.
The induction of these
organelles
was independent of strain
virulence.
T. gondii
-
induced
LB
formation
occurs through
signaling triggered by
PS exposed on the
parasite
membrane. This process is
also amplified
by TGF
-
β
a
cting
in a paracrine fashion
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Determinação de parametros de forma para analise de celulas sanguineasSouza Filho, Wanderley de 18 December 2000 (has links)
Orientadores : Neucimar Jeronimo Leite, Konradin Metze / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Computação / Made available in DSpace on 2018-07-31T15:06:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2000 / Resumo: Este traba1ho foi realizado juntamente com o Laboratório de Anatomia Patológica UNICAMP na análise de AgNORs (Regiões Organizadoras do Nuc1éolo) em células sangüíneas. Estudos anteriores demonstram que o padrão das AgNORs pode evidenciar alterações de proliferação e diferenciação celular. Assim, o estudo das AgNORs poderia dar informações adicionais sobre a cinética celular. Na grande maioria das pesquisas, a análise de AgNORs é restrita a parâmetros simples, como o número de precipitações ou a área ocupada pelas AgNORs. O objetivo deste trabalho é introduzir novos parâmetros de forma, ainda não considerados na literatura, que possam trazer informações objetivas adicionais para melhorar a classificação entre vários tipos de neoplasias e, eventualmente, trazer informações prognósticas complementares. Para tanto, foi desenvolvido um sistema ImAgNOR - com ferramentas que possibilitam tanto a segmentação semi-automática das estruturas como a extração dos parâmetros relacionados / Abstract: This work was accomplished together with the Laboratory of Pathological Anatomy UNICAMP in the analysis of AgNORs (Nucleolar Organizing Regions) in blood cells. Previous studies demonstrate that the pattem of AgNORs can evidence proliferation alterations and cellular differentiation. Thus, the study of AgNORs could give additional information on the cellular kinetics. In many researches, the analysis of AgNORs is restricted to simple parameters, as the number of precipitations or the area occupied by AgNORs. The goal ofthis work is to introduce new shape parameters, not yet considered in the literature that can bring additional objective information to improve the c1assification among several types of neoplasias and, eventually, to bring supplementary prognostic information. In this sense, a system was developed - ImAgNOR - with tools that facilitate the semiautomatic segmentation of the structures as well as the extraction of the related parameters / Mestrado / Mestre em Ciência da Computação
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Influência da extensão da doença periodontal no perfil sanguíneo de ratos Wistar /Guimarães, Gustav. January 2016 (has links)
Orientador: Luciano Tavares Angelo Cintra / BancaEloi Dezan Junior / Renata Oliveira Samuel / Christine Men Martins / Resumo: O obje tivo deste trabalho foi invest igar a influ ê ncia da extensão da doença periodontal no perfil sanguíneo de ratos Wistar. Foram utilizados 30 ratos divididos em 3 grupos de 10 animais: C - ratos controle ; DP1 - ratos com doença periodontal em 3 molares superiores ; DP2 - ratos com doença per iodontal em 3 molares superiores e 3 inferiores . A doença periodontal foi induzida por meio da confecção de ligadura em torno do colo dentário dos molares selecionados de acordo com cada grupo . Após 30 dias, os animais foram anestesiados e, por meio de uma punção cardíaca, foi coletado 5 ml de sangue para as análises dos parâmetros do hemograma, creatinina, triglicérides e colesterol. Em seguida, os animais foram sacrificados e as maxilas removidas e processadas para análise histopatológica em coloraçã o de H .E . para caracterizar o perfil da doença periodontal em cada animal . Os resultados obtidos a partir do tecido hematológico foram analisados estaticamente por meio dos testes de ANOVA e Tukey, com nível de significância de 5%. Pode - se observar nos grupos DP 1 e DP2 presença de infiltrado inflamatório crônico, perda de inserção conjuntiva, perda de estrutura óssea cortical e alveolar, presença de reabsorções dentárias, presença de b iofilme e sequestro ósseo. Quant o ao perfil sanguíneo, pode - se observar diferen ça estatisticamente significante entre o grupo controle e os grupos DP1 e DP2 em relação à quantidade de leucócitos e linfócitos (p<0,05). Ainda, o grupo DP2 apresentou maior quantidade de leucócito s e neutrófilos em relação ao grupo DP1 e controle (p<0,05 ). Pode - se concluir que a presença da doença periodontal eleva a quantidade de l eucócitos, neutrófilo e linfócitos no sangue de ratos Wistar, e que, a extensão da doença periodontal influencia na quanti dade de leucócitos e neutrófilos. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the influence of the periodontal disease extension o n the blood profile of Wistar rats. Thirty rats were divided into 3 groups of 10 animals each : C control rats; DP1 - rats with periodontal disease in 3 upper molars; DP2 - rats with periodontal disease in 3 upper and 3 lower molars. Periodontal disea se was induced by ligature around the tooth according to each group. After 30 days, the animals were killed and 5ml of blood was collected for analyzes of blood cou nt parameters, creatinine, triglycerides and cholesterol. Then the animals were sacrificed and the jaws removed and processed for histopathological analysis to characterize, in H.E. staining, the profile of periodontal disease in each animal. The results f rom the hematologic tissue were analyzed statistically by ANOVA and Tukey test, with 5% significance level. It can be observed in groups DP1 and DP2 presence of chronic inflammatory infiltrates, connective tissue attachment loss and alveolar bone cortical structure loss, presence of resorptions, presence of biofilm and bone sequestration. As for the blood profile, it is can observe a statistically significant difference between the control group and the groups DP1 and DP2 to the amount of leukocytes and lym phocytes (p <0.05). Further, DP2 group had a higher amount of leukocytes and neutrophils compared to DP1 and control group (p <0.05). It can be concluded that the presence of periodontal disease increases the amount of leukocytes, neutrophils, and lymphocy tes in the blood of Wistar rats, and the extent of periodontal disease affects the quantification of leukocytes and neutrophils. / Doutor
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Localização de imagens ao microscópio utilizando processamento digital de imagemBandeira, Marcos Vinícius January 2005 (has links)
O exame de sangue é um dos procedimentos de análises clínicos mais utilizados pelo largo espectro de anomalias que consegue detectar. A contagem de células de sangue, objeto deste trabalho, é um destes exames. A contagem manual é feita por um operador que examina ao microscópio, com ampliação adequada, uma amostra eventualmente tratada ou colorida. Ainda hoje há casos em que contagem manual é necessária mas é cada vez mais freqüente a utilização da contagem automática, feita através de citômetro de fluxo. Esta dissertação aborda um sistema de contagem de células do sangue por processamento digital de imagens e pode ser automático ou semi-automático. O projeto é fruto de uma parceria entre o LaPSIDELET e o HCPA. Deste projeto surgiu o SAIMO (Sistema de Aquisição de Imagens para uso em Microscopia Óptica). No estágio atual o SAIMO possui algumas limitações no controle de posicionamento e no campo de visão limitado. O controle de posicionamento atual fica a cargo do operador: não há informação sobre as imagens já adquiridas, podendo ocorrer sobreposição. Devido à limitação do campo de visão, várias aquisições devem ser feitas para se obter o número mínimo de células recomendado. Além disso, há um possível aumento de erro de contagem associado às imagens parciais de célula presentes nas bordas das imagens. Este trabalho tem como proposta solucionar o problema de controle de posicionamento das aquisições, com a localização da cena durante a captura da imagem. Além disso, é proposta uma técnica de composição de mosaico com as imagens adquiridas, reduzindo os problemas causados pelo campo de visão limitado. Também são propostos métodos de préprocessamento apropriados às imagens adquiridas, que proporcionam a redução do tempo das tarefas subseqüentes. O método de validação das localizações verifica se as coordenadas encontradas por este processo são consistentes. Os resultados obtidos mostraram que o método é rápido na localização e eficiente na composição do mosaico, podendo ser utilizado como parte de um sistema de contagem de células por processamento digital de imagens.
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Comparação dos resultados de hemogramas do contador eletrônico ABX Pentra 60 com a microscopiaMonteiro, Felipe Goulart January 2005 (has links)
Resumo não disponível
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Estudo das atividades das cabenegrinas A-I e A-II frente aos efeitos hematológicos e histológicos induzidos pelo veneno total e frações da serpente Bothrops neuwiedi em camundongos Swiss / Study of the activities of cabenegrinas A-I and A-II compared to the histological and hematological effects induced by the venom and fractions of the snake Bothrops neuwiedi in Swiss miceArruda, Alcínia Braga de Lima January 2011 (has links)
ARRUDA, Alcinia Braga de Lima. Estudo das atividades das cabenegrinas A-I e A-II frente aos efeitos hematológicos e histológicos induzidos pelo veneno total e frações da serpente Bothrops neuwiedi em camundongos Swiss. 2011. 167 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-24T12:03:50Z
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Previous issue date: 2011 / The venom of the Bothrops neuwiedi provokes an action mainly of the hemorrhagic, proteolytic and coagulant type. When inoculated, the venom cause primarily a local action, and secondarily a systemic action. The systemic effects of poisoning include changes in various systems such as hematological, cardiovascular, liver, urinary, respiratory, immune, digestive and nervous. The mechanisms that cause the changes are complex and the various toxic components of the venom may act directly or indirectly on the cells. This study aimed first to investigate possible histological and hematological caused by the whole venom and by the phospholipase A2 and lectin C fractions from Bothrops neuwiedi snake, at 2, 4, 8, 16 and 24 hours intervals in mice, and then evaluate the cabenegrins A-I and A-II in the neutralization of the biological activities of the snake whole venom, analyzing its anti-ophidian potential for possible complementation of serum therapy. We studied the actions of the whole venom and of the phospholipase A2 and lectin C fractions on the hematological system, evaluating the hemogram, the myelogram and the splenogram, at different times. The hemogram was performed by the Sysmex-Roche blood cell counter model KX-21N; the myelogram was performed through the differential and morphological count of bone marrow cells using slides obtained after cytospin (using Cytological Centrifuge model Incibrás); and the splenogram, by quantifying and morphology of the cells in "imprint" of the spleen. After the hematological study, the kidneys, spleen, liver and heart were subjected to histological analysis. All studied parameters were analyzed by the ANOVA test and by the nonparametric Kruskal-Wallis exact test, with p<0.05. The results showed that main quantitative changes in the hematological cells, using the whole venom and the phospholipase A2 and lectin C fractions were: slight increase in erythrocytes and hematocrit, leukocytosis and thrombocytopenia, with repercussion in the peripheral blood; increase of erythroid and myeloid cells in myelogram and increase in myeloid cells in the splenogram. These changes were more evident two and four hours after the poisoning. The histological changes in the kidneys, spleen, liver and heart were characterized mainly by congestion, interstitial edema, hemorrhage, hydropicdegeneration and inflammatory process. When animals were treated with cabenegrins it was detected that these could not revert the quantitative changes of the spleen cells caused by the whole venom. However, all dilutions of cabenegrins AI and A-II were able to inhibit the thrombocytopenia and the increase of myeloid cells in the myelogram, and reverse all the histological changes found in all the studied organs. The treatment with cabenegrins also showed that the cabenegrins A-I (in the 2.5:1 dilution) and the cabenegrins A-II (in the 2.5:1 and 5:1 dilutions) neutralized the changes in the differential count, i.e., these cabenegrins decreased the number of segmented neutrophils, reflecting in the total number of neutrophils. These results suggest that the cabenegrins AI and A-II may be used in the future as an adjunctive treatment of treatment of snake accidents caused by Bothrops neuwiedi. / A serpente Bothrops neuwiedi possui veneno que tem ação principalmente do tipo pró-coagulante, hemorrágica e proteolítica. O veneno da Bothrops neuwiedi quando inoculado, possui ação primariamente local e secundariamente sistêmica. Os efeitos sistêmicos do envenenamento compreendem alterações em diferentes sistemas como: hematológico, cardiovascular, hepático, urinário, respiratório, imunológico, digestório e nervoso. Os mecanismos que ocasionam tais alterações são complexos e os vários componentes tóxicos dos venenos podem agir direta ou indiretamente nas células. Este trabalho teve como objetivo investigar as possíveis alterações hematológicas e histológicas induzidas pelo veneno total e pelas frações fosfolipase A2 e lectina C da serpente Bothrops neuwiedi, nos tempos 2, 4, 8, 16 e 24 horas em camundongos Swiss e avaliar as cabenegrinas A-I e A-II na neutralização das atividades biológicas do veneno total da serpente Bothrops neuwiedi analisando seu potencial antiofídico para possível complementação da soroterapia. Foram estudadas as ações do veneno total, fosfolipase A2 e lectina C sobre o sistema hematológico, avaliando o hemograma, mielograma e esplenograma em diferentes tempos. O hemograma foi realizado pelo contador de células sanguíneas Sysmex-Roche, modelo KX-21N, o mielograma através da contagem diferencial e morfológica das células da medula óssea através de lâminas obtidas após citocentrifugação (centrífuga citológica modelo Incibrás) e o esplenograma através da quantificação e morfologia das células em “imprint” do baço. Após o estudo hematológico, rins, baço, fígado e coração foram submetidos à análise histológica. Todos os parâmetros estudados foram analisados pelo teste de ANOVA e pelo teste não-paramétrico exato de Kruskal-Wallis, com p< 0,05. Os resultados mostraram que as principais alterações quantitativas nas células hematológicas com o uso do veneno total e as frações lectina C e fosfolipase A2 da serpente Bothops neuwiedi foram: discreto aumento do número de hemácias e no hematócrito, leucocitose e plaquetopenia no sangue periférico; aumento das células eritróides e mielóides no mielograma e aumento das células mielóides no esplenograma. Estas alterações foram mais evidentes nos tempo de duas e quatro horas após o envenenamento. As alterações histológicas no baço, rins, coração e fígado, caracterizaram-se principalmente, por congestão, edema intersticial, hemorragia, degeneração hidrópica e processo inflamatório. Quando os animais foram tratados com as cabenegrinas, foi verificado que estas não conseguiram reverter às alterações quantitativas das células no baço provocadas pelo veneno total. Porém, as cabenegrinas A-I e A-II em todas as diluições utilizadas foram capazes de inibir a plaquetopenia, reduzir o aumento da concentração de células mielóides no mielograma e reverter todas as alterações histológicas encontradas em todos os órgãos estudados. Também foi visto que a cabenegrina A-I na diluição 2,5:1 e as cabenegrinas A-II nas diluições 2,5:1 e 5:1 neutralizaram as alterações na contagem diferencial, ou seja, as referidas cabenegrinas diminuíram o número de neutrófilos segmentados, refletindo também no número de neutrófilos totais. Estes resultados sugerem que as cabenegrinas A-I e A-II poderão no futuro ser utilizadas como coadjuvantes no tratamento do acidente provocado pela serpente Bothrops neuwiedi.
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Pacientes com esquizofrenia polimedicados usuários de clozapina : alterações no hemograma e principais interações medicamentosas envolvendo clozapinaVictorino, André Tavares January 2018 (has links)
Os pacientes com esquizofrenia geralmente são polimedicados e as alterações no hemograma e as interações medicamentosas são prevalentes neste grupo de pacientes. A clozapina demonstrou ser eficaz em pacientes resistentes ao tratamento. A agranulocitose e a neutropenia são os principais efeitos adversos da clozapina. Avaliamos as alterações no hemograma nos últimos cinco anos e as interações medicamentosas em pacientes estáveis com esquizofrenia, usuários de clozapina. Foram recrutados cento e vinte e um pacientes ambulatoriais com esquizofrenia. O diagnóstico foi feito por exame clínico utilizando a Lista de verificação de critérios operacionais para doença psicótica (OPCRIT). Os dados foram coletados através de revisão de registros médicos e entrevistas por três pesquisadores devidamente treinados. Todos os participantes assinaram um termo de consentimento antes da coleta de dados. Apenas 18 pacientes (14,90%) usaram clozapina isoladamente, todos os outros eram polimedicados (mediana, 3 medicamentos, amplitude entre 1-11). 58,7% dos pacientes apresentaram alterações no hemograma nos últimos 5 anos. Quatorze tipos de interações medicamentosas de gravidade moderada ou maior foram identificados nas amostras do estudo. O controle hematológico e o conhecimento das interações medicamentosas são fundamentais para o sucesso do tratamento. Este conhecimento também é importante para melhorar o aconselhamento aos pacientes sobre o uso correto de medicamentos. / Patients with schizophrenia are usually polymedicated and changes in blood counts and drug interactions are prevalent in this group of patients. Clozapine has been shown to be efficacious in treatment-resistant patients. Agranulocytosis and neutropenia are the main adverse effects of clozapine We evaluated changes in blood count I the last five years and drug interactions in stable schizophrenic patients using clozapine. One hundred and twenty one outpatients with schizophrenia were recruited. The diagnosis was made by clinical examination using the Operational Criteria Checklist for Psychotic Illness (OPCRIT). Data were collected through medical record review and interviews by three properly trained researchers. All participants signed a consent form before data collection. Only 18 patients (14.90%) used clozapine alone, all others were polymedicated (median, 3 drugs; range, 1-11 drugs). 58.7% of patients had changes in the blood count during the last 5 years. Fourteen types of drug interactions of moderate or major severity were identified in the study samples. Hematological control and knowledge of drug interactions are critical to the success of treatment. This knowledge is also important for improved advice to patients on the correct use of medications
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