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Efeito do derivado antraquinônico 1-Metoxi-4-((2-Hidroxitetradecil)Amino)-Antraceno-9,10-Diona (MTA), análogo a mitoxantrona, na modulação da resposta imune em modelo de encefalomielite autoimune experimentalSilva, Luan Crístian da 25 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-25 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Esclerose Múltipla (EM) é uma doença inflamatória autoimune desmielinizante que afeta o sistema nervoso central (SNC). A Encefalomielite Autoimune Experimental (EAE) é um modelo animal para o estudo da EM. A Mitoxantrona (MIT) é um agente usado para o tratamento da EM, entretanto, a cardiotoxicidade é um dos efeitos adversos do tratamento acumulativo. O presente estudo investigou o efeito do novo derivado antraquinônico,1-Metoxi-4-((2-hidroxitetradecil)amino)-antraceno-9,10-diona, denominado MTA, em modelo de EAE. Camundongos C57BL/6 foram imunizados com o peptídio da Glicoproteína Mielínica de Oligodendrócitos (MOG35-55) em adjuvante completo de Freund, suplementado com Mycobacterium tuberculosis H37RA e tratados com 1mg/Kg de MIT ou MTA do dia 14 ao dia 20 pós-imunização. Os efeitos tóxicos provenientes dos tratamentos com a MIT e o MTA, após 7 dias de tratamento em camundongos C57BL/6 imunizados, foram analisados a partir de curvas de sobrevivência, massa corporal e dosagem sérica da proteína CK-MB. No 21º dia após a imunização, as medulas espinhais foram removidas e submetidas a análises como dosagem de citocinas pró-inflamatórias IFN-γ, IL-17, IL-6, regulatórias, IL-10 e TGF-β e quimiocinas CCL5 e CCL20 através de ELISA. Foi feita a fenotipagem celular através da expressão dos marcadores CD4, CD8, CD19, CD11b, CD11c e F4/80 por citometria de fluxo e avaliação da presença de infiltrados inflamatórios e desmielinização em amostras de tecido. O tratamento com MTA reduziu o escore clínico da doença em camundongos C57BL/6 imunizados com o MOG35-55, o que foi associado com a redução da desmielinização e de células pró-inflamatórias, secreção das citocinas IL-17, IFN-γ, IL-6 e aumento de IL-10 e TGF-β na medula espinhal, de forma similar à MIT. Porém, o tratamento com MIT reduziu a capacidade de sobrevivência, massa corporal dos animais e ainda elevou a secreção da proteína CK-MB no soro, sugerindo estresse muscular cardíaco durante o período de tratamento, o que não foi observado no grupo MTA. Os resultados sugerem um importante papel do MTA na modulação da resposta imune envolvida na EM. A atenuação da inflamação e consequentemente a redução do escore clínico envolvendo a redução de
citocinas pró- inflamatórias, indicam esse composto como um tratamento alternativo para doenças autoimunes no sistema nervoso central. / Multiple sclerosis (MS) is an autoimmune demyelinating inflammatory disease that affects the central nervous system (CNS). The experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is an animal model for the study of MS. Mitoxantrone (MIT) is an agent used for treatment of MS, however, the cardiotoxicity is a cumulative adverse effects of treatment. This study investigated the effect of the new derivative anthraquinone, 1-methoxy-4 - ((2-hydroxytetradecyl) amino) anthracene-9,10-dione, called MTA in EAE model. C57BL/6 mice were immunized with the peptide of myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG35-55) in complete Freund's adjuvant supplemented with Mycobacterium tuberculosis H37RA and treated with 1 mg/kg of MIT or MTA the day 14 to day 20 post-immunization. The toxic effects arising from treatment with MTA and MIT after 7 days of treatment in C57BL/6 mice immunized were analyzed using survival curves, body weight and serum protein CK-MB. At day 21 after immunization, the spinal cords were removed and subjected to analysis such as determination of pro-inflammatory cytokines IFN-γ, IL-17, IL-6 and regulatory cytokines IL-10 and TGF-β and CCL5, CCL20 chemokines using ELISA, cellular phenotype through expression of markers CD4, CD8, CD19, CD11b, CD11c, F4/80 by flow cytometry and the presence of inflammatory infiltrates and demyelination by histopathology. Treatment with MTA reduced the clinical score of the disease in C57BL /6 mice immunized with MOG35-55, which was associated with the reduction of demyelination, presence of pro-inflammatory cells, release of cytokines IL-17, IFN-γ, IL-6 and increased of IL-10 and TGF-β in the spinal cord, as well as the MIT. However, treatment with MIT reduced survivability, the body weight and further increased the production of CK-MB in serum protein, suggesting cardiac muscle stress during the treatment, which was not observed in the MTA group. The results suggest an important role of MTA in modulating the immune response involved in MS. The attenuation of inflammation and thereby reduce the clinical score involving the reduction of pro-inflammatory cytokines indicate this compound as an alternative treatment for autoimmune diseases in the central nervous system.
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Estudo bioacústico do formigueiro-assobiador (Myrmeciza loricata (Lichtenstein, 1823); Aves: Thamnophilidae) na Reserva Biológica Municipal Poço D’Anta, Juiz de Fora – MGAmorim, Thiago Orion Simões 19 March 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-03-19 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O repertório vocal das aves é composto pelo canto e por chamados, e esses dois
tipos de vocalizações se diferenciam em nível estrutural e funcional. O repertório vocal
é uma ferramenta que pode ser utilizada para embasar estudos em sistemática,
conservação, ecologia, além de ser uma informação bastante valiosa no comportamento
de uma espécie. O formigueiro-assobiador (Myrmeciza loricata) é uma ave endêmica da
Mata Atlântica brasileira pertencente à família Thamnophilidae, uma das mais
importantes em número e espécies em toda a região Neotropical. O objetivo deste
estudo foi descrever o repertório vocal do formigueiro-assobiador. O trabalho de campo
foi realizado durante um ano na Reserva Biológica Municipal Poço D’Anta, Juiz de
Fora – MG. As vocalizações foram gravadas por gravador digital portátil Zoom H4N e
microfone condensador unidirecional, e cada evento vocal foi registrado em planilha de
campo com a descrição do comportamento exibido. O programa RAVEN Pro. 1.3
forneceu os sonogramas das vocalizações para as mensurações dos parâmetros
acústicos. O repertório vocal do formigueiro-assobiador é composto pelo canto e três
tipos de chamados. A emissão do canto do macho desencadeou respostas de outros
indivíduos presentes no entorno, o que pode sugerir que esta vocalização está
relacionada com a defesa territorial. O chamado I - alarme foi emitido quando o
observador caminhava pela trilha e se aproximava de um local onde havia indivíduos.
Observou-se que o chamado II foi emitido por machos e fêmeas quando estavam
próximos ou distantes um dos outros, e durante o vôo. O casal pode usar esse chamado
para reconhecimento mútuo e para manterem contato. O chamado III foi observado
durante o forrageamento e quando o macho se aproximava da fêmea. Foi observado que
machos e fêmeas cantam em dueto e apresentam cantos distintos. Machos sempre
iniciaram os duetos e fêmeas não foram observadas cantando sozinhas, elas cantavam
em resposta ao canto emitido pelo macho. O dueto pode estar relacionado com a
manutenção do casal e como uma forma de sincronizarem sua fisiologia reprodutiva,
além de advertir a possíveis intrusos a condição de acasalado do indivíduo. / The vocal repertoire of a bird is composed by song and calls, which has
structural and functional differences. The vocal repertoire is a tool that can be used to
support studies in systematics, conservation, ecology, and moreover is absolutely
relevant on behavioral studies. The White-bibbed Antbird (Myrmeciza loricata) is an
endemic bird of the Atlantic Forest and belongs to the family Thamnophilidae, which is
one of the most important families in the Neotropics. The aim of this study was to
describe the White-bibbed Antbird vocal repertoire. Fieldwork was conducted through
one year in the Biological Reserve of Poço D’Anta, Juiz de Fora – MG, Brazil. The
vocalizations were recorded with Zoom H4n digital portable recorder and unidirectional
condenser microphone and each vocal event was registered in spreadsheet. The software
Raven Pro 1.3 was used to produce the sonograms of vocalizations which allowed
measuring the acoustic parameters. We found that the White-bibbed Antbird repertoire
is composed by three calls and the song. The male song emission promoted responses
from others animals in the neighborhood, which may suggest that this vocalization is
related to territorial defense. The call I - alarm was emitted when the observer walked in
the trail and when he was approaching a place where there were individuals. The call II
was emitted by the males and females when they were near or far away from each other,
and during the flight. The couple can use this call for mutual recognition and to keep in
touch. The call III was emitted when the animals were foraging and when the
individuals of the couple were very near from each other. Males and females sing in
duet and the male and female songs were individually distinct. We found that males
initiate all duets, that females does not sing in isolation from males, and that duets
therefore occur as a result of females replying to male songs. The duet is possibly
related with keeping the pair bond, synchronize breeding and to warn potential intruders
the mated condition of the pair.
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Avaliações fitoquímica e farmacológica das sementes de Pterodon emarginatus VogelDutra, Rafael Cypriano 15 February 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-02-15 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Pterodon emarginatus Vogel (Leguminosae), popularmente conhecida como sucupira-branca ou faveiro, é uma planta nativa, dispersa por quase toda a região central do Brasil. A infusão de suas cascas, folhas e sementes têm eficiente ação anti-reumática, analgésica e antiinflamatória. O presente trabalho realizou análise fitoquímica e farmacológica do óleo essencial (OE) e frações obtidas das sementes de P. emarginatus Vogel. O OE foi extraído por hidrodestilação e as respectivas frações hexânica (FH), acetato de etila (FA), butanólica (FB) e metanólica (FM) foram preparadas utilizando aparelho de Soxhlet. Testes de classe de substâncias revelaram a presença de flavonóides, leucoantocianidinas, taninos, heterosídeos cardiotônicos, cumarinas e saponinas nas sementes, assim como taninos, leucoantocianidinas e heterosídeos cardiotônicos em todas as frações testadas. O OE das sementes apresentou atividade bactericida contra Staphylococcus aureus ATCC 25923 e toxicidade aguda frente à Artemia salina. As FH e FB apresentaram atividade leishmanicida frente às formas promastigotas de Leishmania amazonensis. As FB e FM apresentaram atividade antioxidante frente ao radical DPPH. O OE e as frações obtidos das sementes de P. emarginatus apresentaram atividade antinociceptiva, nos modelos de contorções abdominais induzidas por ácido acético, teste da placa quente e tempo de lambida da pata. O creme contendo OE e FH apresentaram potencial cicatrizante em modelo de queimaduras. O OE apresentou atividade gastroprotetora, nos modelos utilizando etanol absoluto, indometacina e HCl/etanol, atividade antiinflamatória no modelo de pleurisia induzida por carragenina e atividade antitumoral para todas as linhagens celulares tumorais utilizadas. Estes resultados são promissores, pois as sementes de Pterodon emarginatus Vogel possuem componentes ativos podendo constituir uma nova opção terapêutica. / Pterodon emarginatus Vogel (Leguminosae), popularly Known as “sucupira-branca” or “faveiro”, is native plant, easily found all over central Brazil. The infusion of its bark leaves and seeds are effective action anti-rheumatic, analgesic and antiinflammatory. The present work available the phytochemistry and pharmacological potential of P. emarginatus Vogel seeds. The essential oil (EO) was extracted for hydrodistillation and the respective fractions hexanic (HF), ethyl acetate (AF), buthanolic (BF) and methanolic (MF) prepared using Soxhlet apparatus. Tests class of substances showed the presence of flavonoids, leucoantocianidines, tannins, cardiotonic heterosides, cumarins and saponis in the seeds and leucoantocianidines, tannins, cardiotonic heterosides in all fractions tested. The EO was active against Staphylococcus aureus ATCC 25923 and showed acute toxicity against Artemia salina. The HF and BF showed leishmanicidal activity against Leishmania amazonensis promastigote forms. The BF and MF showed antioxidant activity against DPPH radicals. The EO and the fractions obtained of P. emarginatus seeds showed antinociceptive activity, in acetic acid-induced abdominal writhing, formalin test and hot plate test. The cream containing EO and HF produced potential activity against burns. The EO showed antiulcer activity in ethanol absolute, indomethacin and HCl/ethanol models, anti-inflammatory activity in the pleurisy induced by carrageenan and antitumoral activities for all tumor cells lines used in this work. These results are promising and the Pterodon emarginatus Vogel seeds seem have actives components might be a new therapeutic option.
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Biologia, comportamento e inimigos naturais de Omaspides pallidipennis Boheman, 1854 (Chrysomelidae: Cassidinae)Gomes, Paula Akeho de Albuquerque 29 June 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-06-29 / Os crisomelídeos apresentam grande diversidade de inimigos naturais e grande variedade de estratégias defensivas contra estes. Dentre as diversas adaptações defensivas da subfamília, destaca-se a subsocialidade por ser um raro fenômeno em Chrysomelidae. Nesta pesquisa foi estudada a espécie subsocial Omaspides pallidipennis Boheman, 1854 (Chrysomelidae: Cassidinae), com o objetivo principal de observar a subsocialidade, e de descrever, também, o seu ciclo de vida e suas interações com os inimigos naturais e com a planta hospedeira. As observações e experimentações foram conduzidas em ambiente natural (Mata Atlântica). Foram anotados os horários de oviposição, eclosão e emergência, a fim de conhecer o tempo de desenvolvimento dos imaturos. A experimentação de remoção das fêmeas sobre desova foi realizada para testar a eficiência do cuidado maternal. Fêmeas foram, também, trocadas para a verificação do comportamento altruístico. Os inimigos naturais e os visitantes dos nectários extraflorais foram coletados a fim de verificar se havia uma relação entre os predadores e os visitantes. Experimentos de campo mostraram que O. pallidipennis é uma espécie monófaga, alimentando-se unicamente de Ipomoea alba L. (Convolvulaceae). A fêmea permanece junto aos imaturos durante todo o período de desenvolvimento destes, alimentando-se somente durante o estágio larval. As larvas, nos dois primeiros estágios, se alimentam entre as nervuras, raspando o limbo foliar. A partir do terceiro estágio alimentam-se, também, das nervuras e pecíolo. Exceto quando se alimentam, permanecem sempre em cicloalexia. A subsocialidade se mostrou essencial para a sobrevivência da prole. Todas as proles experimentalmente testadas foram predadas. As fêmeas que foram trocadas permaneceram sobre as proles que não as delas, contudo não permanecem sobre as proles de outra espécie. Hipotetiza-se que este altruísmo se deva a uma possível seleção de parentesco; contudo, análises filogenéticas devem ser feitas para comprovar tal hipótese. Os inimigos naturais são de diversos táxons: Lepidoptera, Nematoda, Diptera, Hymenoptera e Coleoptera. Espécies predadoras pertencentes às duas últimas ordens foram encontradas, também, nos nectários extraflorais da planta hospedeira. Os Eulophidae foram os maiores inimigos durante o estágio de ovo. Esta pesquisa demonstra a importância dos trabalhos conduzidos em campo para a compreensão e entendimento da biologia e da interação entre organismos. / The chrysomelids exhibit great diversity of natural enemies and wide variety of defensive strategies against these. Among the different defensive adaptations of the subfamily, it highlights the subsociality as it is a rare phenomenon in Chrysomelidae. In this research it was studied the subsocial specie Omaspides pallidipennis Boheman, 1854 (Chrysomelidae: Cassidinae), with the main objective to observe the subsociality, and describe, also, their life cycle and its interactions with natural enemies and with the host plant. The observations and experiments were conducted in a natural environment (Atlantic Forest). It were recorded the timetables of oviposition, outbreak and emergency in order to know the time of development of immature. Females were experimentally removed from their egg-clutches to test the efficiency of maternal care. They were also exchanged with other offspring for the verification of altruistc behavior. Natural enemies and the visitors of extrafloral nectaries were collected in order to check if there was a relationship between predators and visitors. Field experiments showed that O. pallidipennis is a monophagous specie, feeding only I. alba (Convolvulaceae). The female remains close to immature throughout the period of development of these, feeding only when the larvae do. The larvae, in the first two stages, feed between the veins, scraping the leaf surface. From the third stage they feed, also, the veins and petioles. Except when they feed, they remain always in cicloalexy. The subsociality proved to be essential for the survival of offspring. All the offspring experimentally tested were predated. The females that were exchanged remained on the offspring that were not theirs however they did not remain on the offspring of another species. It is speculated that this altruism is due to a possible selection of kin selection, however, phylogenetic analyzes should be performed to confirm this hypothesis. The natural enemies are of various taxa: Lepidoptera, Nematoda, Diptera, Hymenoptera, and Coleoptera. Predatory species belonging to the last two orders were found, also, in extrafloral nectaries of the host plant. The Eulophidae (Hymenoptera) were the greatest enemies during the stage of egg. This research shows the importance of the work conducted in the field for the comprehension and understanding of biology and the interaction between organisms.
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Composição, estrutura e similaridade florística do estrato arbóreo de três fragmentos de Floresta Atlântica, na Serra Negra, município de Rio Preto, Minas Gerais, BrasilValente, Arthur Sérgio Mouço 21 March 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-03-21 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A Floresta Atlântica é considerada o oitavo maior hotspot do mundo, devido à alta biodiversidade e ao grau de degradação. Regiões de Floresta Atlântica em Minas Gerais, ainda sem estudos de inventário, têm sido propostas como prioritárias para a investigação científica. A Serra Negra, no município de Rio Preto, é uma destas regiões onde inexistem dados sobre a composição e estrutura de sua floresta. A região compreende uma área alagável, circundada por vários trechos de florestas serranas da
Mantiqueira e campos altimontanos, entre as elevações do maciço do Itatiaia (RJ, SP e MG) e da Serra do Ibitipoca (MG). O objetivo deste estudo foi determinar a composição florística, estrutura, e similaridade entre três fragmentos de Floresta Atlântica na Serra Negra e a similaridade com outros estudos. Foram amostradas três áreas, cada uma composta por 25 parcelas contíguas de 10 x 10m, totalizando 0,75 ha. de área amostrada, com critério de inclusão maior ou igual a 10 cm de CAP (Circunferência à Altura do Peito). Os parâmetros fitossociológicos calculados foram: densidade, freqüência, dominância e valor de importância. Foi descrita a estrutura horizontal e vertical das áreas, a diversidade foi calculada pelo índice de Shannon e o teste de hipótese sobre diferenças entre os dois índices foi realizado pelo teste proposto por Hutcheson. A similaridade foi calculada através dos índices de similaridade de Sørensen e Jaccard. Foram realizadas análises de ordenação entre as áreas amostradas e análise de agrupamento para similaridade com outros trabalhos. Foram amostrados 2.573 indivíduos, identificados em 195 morfo-espécies, incluídos em 59 famílias, 115 gêneros
e 180 espécies. As famílias com maior riqueza foram Myrtaceae (30 morfo-espécies), Lauraceae (20), Melastomataceae (17) e Fabaceae (13). Os gêneros com maior número de espécies foram Ocotea e Miconia (12 morfo-espécies cada), Eugenia e Myrcia (oito morfo-espécies cada), Casearia e Solanum (quatro espécies cada). As espécies mais abundantes foram Myrciaria tenella (DC.) O.Berg, Alchornea triplinervia Müll. Arg., Aparisthmium cordatum (Juss) Baill., Guapira venosa (Choisy) Lundell. A partir dos dados de composição e estrutura os fragmentos puderam ser diferenciados em Floresta Ombrófila Aluvial (Mata de Cambuí), Floresta Ombrófila Baixo-Montana (Mata do Benedito) e Floresta Ombrófila Alto-Montana (Mata do Ninho da Égua). / The Atlantic Forest is considered the eighth greater hotspot of the world due high biodiversity and to the degree of degradation. Regions of Atlantic Forest in Minas Gerais state, still without inventory studies, have been proposed as priority for the scientific inquiry. The Serra Negra, in the city of Rio Preto, is one of these regions with no information on its composition and structure. The region understands a flooding
area, surrounded for some stretches of mountain forests of the Mantiqueira Range and high mountains fields, between the rises of the massif of Itatiaia (RJ, SP e MG) and the Serra do Ibitipoca (MG). The objective of this study was to determine the flora´s composition, structure, the similarity between three samples of Atlantic Forest in the Serra Negra range and the similarity with other studies. Three areas were selected, each one composed for 25 contiguous parcels of 10 x 10 m, totalizing 0,75 ha. of sampled area, with criterion of inclusion bigger or equal to 10 cm of CAP. The calculated phytossociology parameters were: density, frequency, basal area and value of importance. The horizontal and vertical structure of the areas were described, the diversity was calculated by the index of Shannon and the test of hypothesis on differences between the two indices was carried through by the test proposed by Hutcheson. The similarity was calculated through the index of Sørensen and Jaccard.
Detrended Correspondence Analysis between the sampled areas and Cluster Analysis with other works had been carried through. It was showed 2573 individuals, identified in 195 morphospecies, enclosed in 59 families, 115 genus and 180 species. The families with bigger wealth were Myrtaceae (30 morphospecies), Lauraceae (20), Melastomataceae (17) and Fabaceae (13). The sorts with bigger number of species were Ocotea and Miconia (12 morfo-species each), Eugenia and Myrcia (eight morfo-species each), Casearia and Solanum (four species each). The most abundant species were
Myrciaria tenella (DC.) O.Berg, Alchornea triplinervia Müll. Arg., Aparisthmium cordatum (Juss) Baill., Guapira venosa (Choisy) Lundell. From the details of composition and structure, the samples could have been differentiated in Aluvial Rain Forest (Mata do Cambuí), Lower Montane Rain Forest (Mata do Benedito) and Upper Montane Rain Forest (Mata do Ninho da Égua).
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Efeito do tratamento com Talidomida na resposta imune contra a bactéria Brucella abortusQueiroz, Marina Coelho de 08 February 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-02-08 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Brucelose é uma zoonose causada por bactérias do gênero Brucella que causa em seres humanos febre ondulante, endocardite, artrite e osteomielite e em animais causa aborto e infertilidade. Destaca-se na resposta imune contra a Brucella a produção de IFN-ꝩ e a atividade de linfócitos T CD8+, destruindo o patógeno ou deixando-o vulnerável aos mecanismos extracelulares da imunidade. A Talidomida (Td) é um fármaco capaz de induzir a formação de um perfil TH1, com elevada produção de IFN-ꝩ, além de co-estimular e induzir a proliferação e produção de citocinas por linfócitos T CD8+. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a influência do tratamento com Talidomida na resposta imune contra a B. abortus, focando no futuro desenvolvimento de novos fármacos ou componentes vacinais que auxiliem no combate a esta importante patologia. Foram avaliadas a forma de tratamento e a concentração de Talidomida capaz de influenciar a carga bacteriana presente no baço de animais C57BL/6 infectados; O número de bactérias no baço de animais tratados, após 1,3 e 6 semanas de infecção; A produção de IFN-ꝩ e óxido nítrico em esplenócitos derivados destes animais; A produção de citocinas (IL-12, IFN-ꝩ e TNF-α) no tecido hepático; O percentual de células T CD4+ ou CD8+ presentes no baço de animais tratados e infectados e o potencial citotóxico de esplenócitos derivados destes animais. Foi verificado que o tratamento prévio com Td reduziu a carga bacteriana em todas as semanas avaliadas, conforme evidenciado pela cinética. A produção de IFN-ꝩ e óxido nítrico foram maiores em esplenócitos derivados de animais tratados com Td. A produção de IL-12, IFN-ꝩ e TNF-α foi elevada no tecido hepático após o tratamento. E nos esplenócitos foi observado maior percentual de células T CD8+ e maior citotoxicidade. Assim, os resultados encontrados até o momento nos levam a sugerir que o tratamento com Talidomida potencializam a eliminação do patógeno. / Brucellosis is a zoonosis caused by bacteria from the genus Brucella which causes undulant fever, endocarditis, arthritis and osteomyelitis in humans and, in animals, it causes abortion and infertility. The production of IFN-ꝩ and the activity of T CD8+ lymphocytes have an important role in the immune response against Brucella destroying the pathogen or leaving it vulnerable to extracellular immunity mechanisms. Thalidomide (Td) is a drug which is able to induce the formation of a TH1 profile, with high production of IFN-ꝩ, and it also coestimulates and induces proliferation and production of cytokines by T CD8+ lynphocytes. The purpose of this study was to evaluate the influence of the treatment with Thalidomide on the immune response against B. abortus, focusing in the development of new drugs or vaccine components in the future which will help in the fight against this important pathology. The form of treatment and Thalidomide concentration capable of influencing the bacterial load in the spleen of C57BL/6 infected animals were evaluated; the number of bacteria in the spleen of treated animals after 1, 3 and 6 weeks of infection; the production of IFN-ꝩ and nitric oxide in splenocytes from these animals; the (IL-12, IFN-ꝩ e TNF-α) cytokine production in the liver tissue; the percentage of T CD4+ or CD8+ cells in the spleen of treated and infected animals and the cytotoxic potential of splenocytes from these animals. In this study it was verified that previous treatment with Td reduced the bacterial load in all the evaluated weeks, as it was evidenced by kinetics. The production of IFN-ꝩ and nitric oxide was higher in splenocytes from animals treated with Td. The production of IL-12, IFN-ꝩ and TNF-α was high in the liver tissue after treatment. And a higher percentage of T CD8+ cells and higher citotoxicity were observed in splenocytes. The results so far suggest that treatment with Thalidomide potentializes the elimination of the pathogen.
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Aspectos biológicos da interação bactéria-droga-hospedeiro em modelo de Infecção por Bacteroides fragilis e tratamento com metronidazol em concentração subinibitóriaFreitas, Michele Cristine Ribeiro de 10 April 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-04-10 / Bastonetes Gram negativos anaeróbicos da espécie Bacteroides fragilis são membros da microbiota residente intestinal, e frequentemente associados a infecções endógenas. Para o tratamento destas infecções, o metronidazol persiste como um dos principais fármacos disponíveis. Como outros microrganismos, B. fragils são susceptíveis a perturbações ecológicas, muitas vezes resultantes de concentrações subinibitórias de antimicrobianos, que podem que podem desencadear alterações na biologia bacteriana com reflexo no seu potencial agressor. Considerando-se que, geralmente, os estudos de interação droga-bactéria utilizam ensaios in vitro, permanecem, assim, questionamentos sobre a real extensão do fenômeno considerando-se uma situação real de infecção e exposição a antimicrobianos em concentração subinibitória. Neste sentido, foi proposto o estudo de um modelo experimental de interação droga-bactéria-hospedeiro. Ratos Wistar foram submetidos à laparotomia para inserção de um corpo de prova na cavidade peritoneal, e posterior desafio percutâneo com B. fragilis ATCC 43859. Os animais foram divididos em três grupos experimentais: grupo controle negativo (CN) (n=18) sem inoculação bacteriana, apenas com o veículo; grupo controle positivo (CP) (n=30) animais infectados com a linhagem bacteriana parental; grupo experimental (GE) (n=24) animais infectados com a linhagem bacteriana parental, tratados com concentração subinibitória de metronidazol (1µg/mL - via percutânea) por um período de oito dias em intervalos de 48 horas. Foram avaliados em dois momentos durante o processo infeccioso: Após 8 dias o tratamento com o MTZ e 8 dias após o término do tratamento (16 dias). Experimentos com cultura bacteriana in vitro foram realizados considerando-se o mesmo desenho experimental para comparação. A dinâmica da colonização microbiana nos corpos de prova foi avaliada por cultura microbiana, PCR simples, PCR quantitativo e coloração de Gram. No hospedeiro, foram avaliados parâmetros histológicos e imunológicos, pela avaliação transcricional da expressão de citocinas. Características morfo-fisiológicas, bioquímicas e moleculares de bactérias selecionadas in vivo e in vitro foram avaliadas, ainda, pela coloração de Gram, Kit API20, formação de biofilme experimental, tolerância ao estresse oxidativo (H2O2), e genotipagem por AP-PCR. Os resultados mostram que a infecção in vivo por Bacteroides fragilis se manteve como monoinfecção durante todo o período experimental avaliado, com viabilidade bacteriana mesmo após tratamento com concentração subinibitória de metronidazol. Análise histológica do tecido formado no corpo de prova mostrou um infiltrado inflamatório exacerbado após os 8 dias de tratamento em ambos os grupos infectados. No entanto, após 16 dias o infiltrado inflamatório diminuiu no GE. Os níveis de expressão de citocinas mostraram-se alterados quando os grupos infectados foram comparados, principalmente relacionados aos níveis de IL-10. Embora alterações no perfil bioquímico bacteriano não tenham sido observadas, morfologia aberrante, aumento na formação de biofilme e diminuição da sensibilidade ao estresse oxidativo foram observadas nas linhagens selecionadas in vitro. Polimorfismo genético não foi detectado por AP-PCR. Nossos resultados sugerem que metronidazol em baixas concentrações interfere na relação bactéria-hospedeiro, o que pode ter implicações no processo infeccioso, sem, no entanto, resultar em alterações evidentes nas células bacterianas, como observado in vitro. Percebe-se, assim, a complexidade das interações droga-bacteria-hospedeiro em situação real de infecção e suas implicações na biologia microbiana e na patogênese. / Bacteroides fragilis, a member of the resident intestinal microbiota is the most important pathogen associated to endogenous infections. Meanwhile, metronidazole persists as the main drug available for treating these diseases. As other resident microorganisms, these bacteria are exposed to ecological disturbances, often resulting from subinhibitory concentrations of antimicrobial agents that can trigger changes in microbial biology and which may affect potential aggressor. Considering that the studies of drug-bacteria interactions usually uses in vitro assays, questions about the true extension of the phenomenon in a real situation of microbial infection and exposure to antimicrobials in subinhibitory concentrations remains. Thus, for a better understanding of drug-bacteria-host relationship in real situation of infection, an in vivo model of interaction has been proposed. Wistar rats were subjected to laparotomy to insert a perforated table tenis ball into the peritoneal cavity, followed by percutaneous challenge with B. fragilis ATCC 43859. The animals were divided into three experimental groups: negative control (NC) (n = 18) animals without bacterial inoculation using the vehicle only; positive control (PC) (n = 30) animals infected with the parental bacterial strain; experimental group (EG) (n = 24) animals infected with the parental bacterial strain, treated with subinhibitory concentration of metronidazole (1µg/mL percutaneous) for a period of eight days in 48 hour intervals. To evaluate the impact of metronidazole in the bacteria-host relationship the experimental infections were evaluated two times during the infectious process; first, 8 days after the treatment with MTZ and 8 days after the end of the treatment (16 days). The dynamics of the microbial colonization into the tissue cage was evaluated by conventional PCR, real time PCR and Gram stain. In the host, histological and transcriptional analysis of cytokine expression was performed. Morpho-physiological, biochemical and molecular characteristics of bacteria selected in vivo and in vitro were evaluated by Gram stain, kit API20, experimental biofilm formation, tolerance to oxidative stress (H2O2), and genotyping by AP-PCR. The results show that in vivo infection by Bacteroides fragilis remained as monoinfection throughout the experimental period with bacterial viability even after the treatment with sub inhibitory concentration of metronidazole. Histological analysis of the tissue formed into the tissue cage showed exacerbated inflammatory infiltrate after 8 days of treatment in both infected groups. However, after 16 days the inflammatory infiltrate decreased in the EG group. Increased cytokine expression was observed when infected groups were compared, mainly related to interleukin 10. Although changes in the bacterial biochemical profile were not observed, aberrant morphology, increased biofilm formation and decreased sensitivity to oxidative stress were observed in the in vitro selected strains. Genetic polymorphism was not detected by AP-PCR. Our results suggest that low concentrations of metronidazole interfere in the bacteria-host relationship, which could have implications in the infection process even without showing obvious alterations in the bacterial cells as demonstrated in vitro. Therefore, the complexity of drug-bacteria-host interactions in real infection situations and its consequences in microbial biology and pathogenesis is clear.
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Desenvolvimento de um sistema de telemetria para o estudo de propriedades termofísicas em ratos WistarKitamura, Felipe Campos 26 March 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-03-26 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A aferição precisa da temperatura de ratos Wistar é um elemento essencial no estudo da termorregulação desse animal. Recentes desenvolvimentos em telemetria tem propiciado medir a temperatura de animais vivos movendo-se livremente, gerando pouca ou nenhuma redução no bem estar do animal e permitindo o registro de informações mais confiáveis. Há evidências de que o coeficiente de difusão térmica (α) de órgãos e tecidos vivos seja um marcador de patologias que alteram a composição tecidual. Além disso, a taxa de absorção específica (SAR) e a condutividade elétrica (α) dos tecidos têm importante aplicação no estudo da interação das radiações com organismos biológicos. É possível estimar a SAR, α e γ de tecidos vivos estudando a variação térmica destes tecidos. Para isso, é preciso um sistema capaz de medir a temperatura de mais de um órgão do animal vivo, com alta resolução e alta taxa de amostragem, por um curto período. Os dispositivos de telemetria atuais servem muito bem para estudos de termorregulação, mas não dispõem das características necessárias para calcular a SAR, α e γ . Além disso, os sistemas existentes têm alto custo, o que por vezes é proibitivo. O objetivo do trabalho é desenvolver um sistema de telemetria de baixo custo, alta resolução e alta taxa de amostragem, para ratos Wistar, capaz de: (1) medir simultaneamente 4 canais de temperatura e (2) coletar informações da variação da temperatura no tempo, necessárias para a medida da SAR, α e γ em tecidos biológicos, in vivo e in vitro. Para isto, foi desenvolvido um sistema de telemetria utilizando resistores sensíveis a temperatura, do tipo NTC, microcontroladores PIC® (Microchip®) e módulo Bluetooth®, montados em placa de circuito impresso. Em seguida o sistema foi calibrado em um aparato construído no Laboratório de Física Aplicada do Instituto de Ciências Exatas da Universidade Federal de Juiz de Fora. Este sistema de calibração utilizou como referência um sensor do tipo PT100, medido com o multímetro de precisão Agilent® 34401A. A regressão linear de cada NTC em relação ao PT100 foi aplicada, objetivando estimar a temperatura pelo valor de resistência do NTC. Feito isso, o dispositivo foi testado em ratos Wistar, visando demonstrar possíveis usos do aparelho. O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética de Uso de Animais da UFJF (nº 085/2012). O coeficiente de determinação de cada NTC com o PT100 foi r2 > 0,999. O dispositivo desenvolvido mede 50 mm x 21 mm x 8 mm, com volume de 8,65 mL, e massa igual a 11,25 g. Possui quatro sensores de 1 mm de diâmetro, presos a hastes de 100 mm, com resolução de 1,53 x 10-3 oC e taxa de amostragem de até 1 amostra a cada 5 segundos. O dispositivo mostrou-se capaz de determinar a temperatura com alta resolução, alta taxa de amostragem e baixo custo, quando comparado com os dispositivos encontrados no mercado nacional e internacional. As medidas obtidas permitem, juntamente com outras técnicas, determinar o cálculo da SAR, α e γ do tecido. Não há, até o momento, um dispositivo similar no mercado. / -
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Zooplâncton como indicador da restauração de ambiente aquático impactado pela atividade de mineração: é possível recuperar a diversidade de funçõesJosué, Iollanda Ivanov Pereira 21 February 2017 (has links)
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iollandaivanovpereirajosué.pdf: 1133999 bytes, checksum: f0d09ce30e4512271d9f245cff90caf4 (MD5) / Rejected by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br), reason: on 2017-08-24T11:29:43Z (GMT) / Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-08-24T13:26:06Z
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Previous issue date: 2017-02-21 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A ecologia funcional tem sido amplamente utilizada como ferramenta na avaliação e recuperação de ecossistemas degradados, pois fornece informações a respeito das ligações entre características das espécies e funções e serviços do ecossistema. Esta abordagem, entretanto, ainda é pouco compreendida para as comunidades planctônicas. Em sistemas aquáticos degradados, o estudo da
diversidade funcional planctônica pode fornecer informações importantes sobre suas funções ecossistêmicas como fluxo de energia e matéria e embasar estratégias de restabelecimento das características funcionais dessa comunidade. Este estudo comparou a eficiência, de processos induzidos a processos naturais de restauração ecológica, em restabelecer a composição e diversidade funcional zooplanctônica. Amostras da comunidade zooplanctônica e variáveis limnológicas foram coletadas em março de 2015, no Lago Batata, (Oriximiná - PA), um lago amazônico impactado pela atividade de mineração. A diversidade taxonômica, bem como a diversidade funcional de espécies
zooplanctônicas foram avaliadas em seis pontos amostrais: 1) Área pelágica natural; 2) Área de igapó natural; 3) Área pelágica impactada; 4) Área de igapó plantio; 5) Área de bancos de arroz; 6) Área de igapó regeneração natural. Foram estimadas a diversidade taxonômica e funcional zooplanctônica para os pontos das diferentes áreas amostradas. Assim, a composição, taxonômica e funcional, zooplanctônica de cada área, foi avaliada e comparada Ainda, os padrões de diversidade zooplanctônica foram relacionados às variáveis limnológicas, por uma análise de correspondência canônica (CCA). Foi avaliada a relação entre o impacto do rejeito de bauxita e a composição de
atributos funcionais de cada área. O estudo observou que o processo induzido de restauração do Lago Batata teve um importante papel no reestabelecimento da composição e diversidade de funções zooplanctônicas. Além disso, a colonização natural dos bancos de arroz desempenhou um papel importante, auxiliando a restauração das condições físicas do lago e a reestabelecimento da
composição e diversidade de funções da comunidade zooplanctônica. Estes resultados complementam estudos anteriores na região, que até o presente momento abordaram apenas as características estruturais, contribuindo com conhecimento acerca da restauração do papel da comunidade zooplanctônica no funcionamento do ecossistema. / Functional ecology appears as a tool to assessing the recovery of ecological functions in degraded ecosystems, because it provides links related the species characteristics, ecosystem functions and services. However, this approach is poorly understood for zooplankton communities. In degraded aquatic systems, the study of zooplankton functional diversity provides important information
about restoring the community functional characteristics which has great importance in ecosystem processes, such as energy and matter flow. Here we compared the efficiency of natural and induced restoration processes in restoring the zooplankton functional composition and diversity. We sampled
zooplankton and limnological variables in March 2015 in Batata Lake (Oriximiná - PA), an Amazonian lake that was impacted by mining activity. We evaluated zooplankton taxonomic diveristy, as well the functional diversity in six sample points from the six areas: 1) Natural pelagic area; 2) Natural igapó
area; 3) Impacted pelagic area; 4) Igapó planting area; 5) Rice banks area; 6) Igapó natural restoration area. We estimate zooplankton taxonomic and functional diversity for each area. The zooplankton taxonomic and functional diversity were evaluated and compared. Zooplankton diversity patterns were
related to limnological variables, by a canonical correspondence analysis (CCA). The relationship between bauxite tailings impact and functional attributes composition of each area was evaluated. We found that induced restoration process in Batata Lake had an important role in reestablishing the
functional composition and diversity of zooplankton. In addition, the natural colonization of rice banks area played an active role supporting the restoration of the lake physical conditions and to restore the functional composition and diversity of zooplankton. These results complement previous studies in this
particular lake, which until the present moment were based only on structural characteristics, contributing with the knowledge about the restoration of zooplankton role in the ecosystem functioning.
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“Avaliação dos mecanismos imunológicos associados ao aumento da resistência de animais tratados com Talidomida frente à infecção com Brucella abortus”Goyatá, Társila Ferreira Guimarães 25 July 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-07-25 / A Brucelose é uma zoonose causada por bactérias do gênero Brucella que infectam o homem e uma grande variedade de animais, principalmente o gado. Em humanos causa febre ondulante, endocardite, artrite e osteomielite enquanto em animais causa aborto e infertilidade. Essa enfermidade é considerada a zoonose mais prevalente no mundo, com mais de 500.000 novos casos relatados por ano. Somente no Brasil, a Brucelose causa um impacto econômico estimado de 32 milhões de dólares ao ano. A resposta imune contra a Brucella envolve vários mecanismos da imunidade inata e adquirida entre os quais a citocina IFN-y, típica do perfil TH1, e as células T CD8+ executam um papel de destaque. IFN-y ativa macrófagos induzindo a produção de radicais derivados de oxigênio e nitrogênio essenciais no combate ao patógeno, além de ativar células NK. Já os linfócitos T CD8+ lisam as células infectadas destruindo o patógeno ou deixando-o vulnerável aos mecanismos extracelulares da imunidade. Assim, estes mecanismos são essenciais para o controle efetivo da infecção. Diversos trabalhos têm mostrado que a Talidomida, um derivado do ácido glutâmico, é capaz de induzir a formação de um perfil TH1, com elevada produção de IFN-y, além de co-estimular e induzir a proliferação e produção de citocinas por linfócitos T CD8+. De fato, trabalhos prévios de nosso grupo demonstraram que o tratamento prévio com Talidomida é capaz de aumentar a resistência de camundongos C57BL/6 contra Brucella, aliada ao aumento na produção de citocinas (IL-12 e IFN-y), óxido nítrico e células T CD8+. Assim, uma vez que a Talidomida apresenta um amplo espectro de ações, o objetivo deste estudo foi avaliar outros mecanismos imunológicos afetados pela Talidomida e que estejam associados ao aumento da resistência ao patógeno. Nosso foco não é o tratamento com a Talidomida em si, mas embasar o desenvolvimento de novos compostos ou componentes vacinais que auxiliem no combate a esta importante patologia. Como metodologia, primeiramente foi confirmada a carga bacteriana esplência uma semana após infecção, em animais previamente tratados com Talidomida. Em seguida a proliferação celular e o perfil de células regulatórias foram determinados em esplenócitos derivados de animais tratados e infectados. Em relação a imunidade inata, a ação da Talidomida foi avaliada através da produção de citocinas (IL-6 e TNF-α) e de óxido Nítrico. Por fim, avaliamos a influência da talidomida na sobrevivência de animais “Knockout” para IFN-y após a infecção por Brucella e se o tratamento com a droga é capaz de alterar a proteção induzida pela vacinação com a cepa RB51. Como resultados, foi percebida uma significativa redução na carga bacteriana de animais tratados com Talidomida em relação aos animais não tratados. Essa redução foi acompanhada de um aumento na proliferação linfocitária e da diminuição no percentual de células T regulatórias. Em relação aos macrófagos, foi percebido um aumento na produção de óxido nítrico em células tratadas com a droga após estímulo com a bacteria. Por fim, o tratamento com Talidomida não foi capaz de conferir maior nível de proteção a animais vacinados com a cepa RB51 e nem modificou o tempo de vida de animais “Knockout” para IFN-y infectados com B. abortus. Assim, o presente estudo conclui que a talidomida é capaz de potencializar a eliminação da Brucella abortus in vivo, e que esta potencialização é dependente da produção de IFN-y e óxido nítrico, bem como da redução do perfil regulatório. / Brucellosis is a zoonotic disease caused by bacteria of the genus Brucella that infects humans and a wide variety of animals, especially cattle. In humans it causes undulant fever, endocarditis, arthritis and osteomyelitis while in animals causes abortion and infertility. This disease is considered the most prevalent zoonosis in the world, with more than 500,000 new cases reported annually. Only in Brazil, Brucellosis causes an estimated economic impact of $ 32 million annually. The immune response against Brucella involves different mechanisms of innate and acquired immunity among which IFN-y cytokine, typical of TH1 profile, and CD8+ T cells have an important role. IFN-y activates macrophages by inducing the production of radicals derived from oxygen and nitrogen essential to combat the pathogen and activate NK cells. Already, CD8+ lymphocytes lyse infected cells by destroying the pathogen or leaving it vulnerable to extracellular mechanisms of immunity. So, these mechanisms are essential for an effective infection control. Several studies have shown that thalidomide, a derivative of glutamic acid, is able to induce the formation of a TH1 profile with high production of IFN-y, and to co-stimulate and induce proliferation and cytokine production by CD8 + T lymphocytes. In fact, previous studies from our group demonstrated that previous treatment with thalidomide is able to increase the resistance of C57BL/6 mice against Brucella, coupled with the increase in cytokine production (IL-12 and IFN-y), nitric oxide and CD8+ T cells. Therefore, since the Thalidomide has a broad spectrum of actions, the objective of this study was to evaluate other immune mechanisms affected by Thalidomide and which are associated with increased resistance to the pathogen. Our focus is not the treatment with thalidomide itself, but undergird the development of new compounds or vaccine components that help in combating this important disease.
As methodology, firstly was confirmed the bacterial load one week after infection in animals previously treated with Thalidomide. Then the profile of regulatory cells and cell proliferation were determined in splenocytes derived from treated and infected mice. Regarding innate immunity, the action of thalidomide was evaluated by the production of cytokines (IL-6 and TNF-α) and nitric oxide. Finally, we evaluated the influence of thalidomide on survival of animals "IFN-y Knockout” after Brucella infection and if the treatment with the drug is able to change the protection induced by vaccination with strain RB51 protection. As results, it was noticed a significant decrease in bacterial load of animals treated with thalidomide compared to untreated animals. This reduction was accompanied by an increase in lymphocyte proliferation and decrease in the percentage of regulatory T cells. With regard to macrophages, an increase in nitric oxide production in cells treated with the drug was seen after stimulation with bacteria. Finally, treatment with thalidomide was not able to confer higher level of protection to animals vaccinated with RB51 strain and did not change the life of animals "Knockout" for IFN-y infected with B. abortus. So, this study concludes that thalidomide is able to enhance the elimination of Brucella abortus in vivo, and that this enhancement depends on the IFN-y and nitric oxide as well as the reduction in the regulatory profile.
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