Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-06-01T18:57:05Z No. of bitstreams: 1 TES_RODRIGO_ALBERTO_CENCI_PARCIAL.pdf: 331932 bytes, checksum: fcfb0ce6332ff35cfabdbf49377d5d26 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-01T18:57:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_RODRIGO_ALBERTO_CENCI_PARCIAL.pdf: 331932 bytes, checksum: fcfb0ce6332ff35cfabdbf49377d5d26 (MD5) Previous issue date: 2016-03-22 / This study is part of a project that aimed to evaluate by means of micro-computed tomography (?CT) image analysis bone density in rabbit calvarial defects treated with low-level laser therapy (LLLT) after filling with blood clot, autogenous bone, and BIO-OSS?. Twenty-nine clinically healthy male New Zealand rabbits weighing 3 to 4 kg each were used in the study. Three bone defects were produced in each rabbit, for a total of 87 defects that were randomly divided into six groups: three experimental groups that received LLLT (EI, EII, and EIII) and three control groups that did not receive LLLT (CI, CII, and CIII). Defect size was 8 mm2 in diameter. The CI and EI defects were filled with blood clot. The CII and EII defects were filled with autogenous bone. The CIII and EIII defects were filled with BIO-OSS?. The experimental groups received LLLT at spot doses of 10 J per session, while the control groups received sham irradiation. Laser irradiation was performed with an aluminum-gallium-arsenide (AlGaAs) laser diode (Thera Lase?) at a wavelength of 830 nm (infrared LLLT was performed every 48 hours after surgery for a total of eight sessions. The animals were euthanized 30 days after surgery, 15 days after the last LLLT session. ?CT analyses were conducted using the Skycan 1176 ?CT scanner (Skyscan Kontich, Belgium). Samples were analyzed by ?CT to identify the percentage bone density compatible with a radiographic image of low, moderate, or high bone density and to evaluate the influence of LLLT on the process of new bone formation. In order to analyze bone density and thus evaluate new bone formation in the surgical site, the region of interest was delimited by drawing a cube (2 mm3) in the central area of the defect and entirely within the region filled with blood clot, autogenous bone, or BIO-OSS?. The results showed that bone density was higher in defects treated with BIO-OSS? in combination with LLLT (group EIII), followed by the nonirradiated BIO-OSS?-grafted group (CIII). In groups where the defects were filled with autogenous bone, bone density was similar for both experimental and control groups. In groups with defects filled with blood clot, bone density was low for both experimental and control groups. We conclude that the combination of BIO-OSS? with LLLT promoted the formation of bone of high radiographic density and that ?CT is a reliable technique to measure bone density. / Este estudo ? parte de um projeto que teve por objetivo avaliar por meio de imagens obtidas em microtom?grafos computadorizados, as diferentes tonalidades de cinza em calotas cranianas de coelhos, submetidas a a??o da terapia com laser de baixa pot?ncia, ap?s o preenchimento de defeitos ?sseos com co?gulo sangu?neo, osso aut?geno e BIO-OSS?. Para tanto foram utilizados 29 coelhos da ra?a Nova Zel?ndia, machos, pesando entre 3 e 4 Kg, clinicamente sadios. Em cada coelho foi realizado tr?s defeitos ?sseos, gerando um total de 87 defeitos que foram distribu?dos aleatoriamente em seis grupos: Tr?s grupos experimentais (com Laserterapia) EI, EII e EIII e tr?s grupos controle (sem Laserterapia), CI, CII e CIII. Cada defeito ?sseo possu?a 8 mm2 de di?metro. Os defeitos dos grupos CI e EI foram preenchidos com co?gulo sangu?neo. Os defeitos dos grupos CII e EII foram preenchidos com osso aut?geno. Os defeitos dos grupos CIII e EIII foram preenchidos com BIO-OSS?. Os grupos experimentais, foram submetidos a LLLT, recebendo doses pontuais de 10J por sess?o enquanto no grupo controle foi simulado uma irradia??o com Laser. O aparelho utilizado foi o Thera Lase?, laser de diodo infravermelho com meio ativo GaAlAs (Arseneto de G?lio e Alum?nio), com comprimento de onda de 830nm. Os animais foram eutanasiados 30 dias ap?s a cirurgia, sendo 15 dias ap?s a ?ltima das 8 sess?es de LLLT. A Laserterapia era realizada em intervalos de 48 horas. As amostras foram analisadas no aparelho de microtomografia computadorizada Skycan 1176 (Skyscan Kontich, B?lgica) do LAMIR. As amostras foram submetidas ? ?TC a fim de identificar a porcentagem do osso neoformado compat?vel com imagem radiogr?fica com baixos valores de cinza, valores m?dios de cinza e valores altos de cinza e tamb?m, verificar a influ?ncia da irradia??o com Laser no processo de neoforma??o ?ssea. Para an?lise da densidade ?ssea atrav?s dos valores de cinza, foi desenhado um cubo com 2mm3 na regi?o central do defeito ?sseo, totalmente inscrito na regi?o do material enxertado. Os resultados obtidos demonstraram que os valores de cinza observados nas imagens foram maiores na associa??o entre BIO-OSS? e Laser (EIII), seguido da inser??o do BIO-OSS? sem aplica??o do Laser. Nos grupos onde o defeito foi preenchido com osso aut?geno, os valores de cinza encontrados nas imagens foram similares entre os grupos experimentais e controle. Nos grupos onde observou-se a neoforma??o ?ssea pelo co?gulo sangu?neo, os valores de cinza observados foram baixos para os dois grupos. Concluiu-se neste estudo que a associa??o entre BIO-OSS? e Laser, proporcionou a forma??o de um tecido ?sseo com alta densidade radiogr?fica e tamb?m que o microtom?grafo ? um equipamento confi?vel para avaliar a densidade ?ssea atrav?s do dimensionamento dos n?veis de cinza.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-08-01T16:49:33Z No. of bitstreams: 1 TES_VINICIUS_SALIM_SILVEIRA_PARCIAL.pdf: 778228 bytes, checksum: 0bb5d051d3234e68fb2b04dd63add0fc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-01T16:49:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_VINICIUS_SALIM_SILVEIRA_PARCIAL.pdf: 778228 bytes, checksum: 0bb5d051d3234e68fb2b04dd63add0fc (MD5) Previous issue date: 2016-03-23 / This study is the result of a project that aimed to assess the systemic effects of low-level laser therapy (LLLT) on the morphology of the thyroid and sublingual glands when used as adjuvant therapy for peri-implant bone healing in the rabbit mandible. For the present study, 32 clinically healthy male New Zealand rabbits (Oryctolagus cuniculus) weighing 3 to 4 kg each were divided into four groups of eight animals each, one control group (CI, nonirradiated animals) and three experimental groups that received LLLT (group EI = 5 J/cm2 per spot; group EII = 2.5 J/cm2 per spot; and group EIII = 10 J/cm2 per spot). Animals in all experimental groups underwent seven treatment sessions with irradiation applied in two spots per session, resulting in total energy densities of 70 J/cm2, 35 J/cm2, and 140 J/cm2, respectively, in groups EI, EII, and EIII. The mandibular left incisor was surgically extracted in all animals, and an osseointegrated implant was placed immediately afterward. Control animals underwent sham irradiation following the same protocol used for irradiated animals, but with the laser device left unpowered. The experimental groups were irradiated with an aluminum-gallium-arsenide (AlGaAs) laser diode (Thera Lase?) at a wavelength of 830 nm (infrared) for spot irradiation, 50mW output power, in continuous wave mode every 48 hours over a 13-day period. LLLT began in the immediate postoperative period. All animals were euthanized 45 days after the experiment. There was no histomorphometric change in any of the groups, demonstrating that LLLT has no systemic effects that can lead to morphological changes in the thyroid and sublingual glands when used to stimulate peri-implant bone healing in the rabbit mandible. / Este estudo ? o resultado de um projeto que teve por objetivo avaliar o efeito sist?mico da LLLT na morfologia das gl?ndulas tire?ide e sublingual quando esta terapia ? utilizada na cicatriza??o peri-implantar em regi?o da mand?bula de coelhos. Para o presente estudo foram utilizados 32 coelhos da ordem Lagomorpha, ra?a Nova Zel?ndia, machos, pesando entre 3 e 4kg, clinicamente sadios, distribu?dos em 4 grupos de 8 animais cada, sendo um grupo controle CI(sem irradia??o) e tr?s grupos experimentais sendo: EI(densidade de energia de 5J/cm2 por ponto de aplica??o), EII(densidade de energia de 2,5J/cm2 por ponto de aplica??o) e EIII(densidade de energia de 10J/cm2 por ponto de aplica??o), todos os coelhos dos grupos experimentais foram submetidos a 7 sess?es de irradia??o tendo tido dois pontos de aplica??o por sess?o, resultando em densidades de energia totais de 70J/cm2, 35J/cm2 e 140J/cm2, respectivamente nos grupos EI, EII e EIII. Todos os animais foram submetidos ? cirurgia de exodontia do incisivo inferior esquerdo e instala??o imediata de implante dent?rio no alv?olo correspondente e ap?s, o grupo controle foi submetido ?s mesmas rotinas de aplica??o de LLLT que os grupos experimentais, por?m sem irradia??o, afim de padronizar os experimentos. Os animais dos grupos experimentais foram irradiados com um laser de diodo infravermelho (Thera Lase?1)) com o meio ativo de GaAlAs (Arseneto de G?lio e Alum?nio), com um comprimento de onda de 830nm, de forma pontual, pot?ncia de 50mW, emiss?o cont?nua, aplicada a cada 48 horas em um total de 13 dias. Os protocolos de irradia??o se iniciaram no p?s operat?rio imediato. Todos os animais foram sacrificados ap?s decorridos 45 dias do experimento. N?o verificou-se nenhuma altera??o histomorfom?trica em nenhum dos grupos estudados, o que nos mostrou que a LLLT n?o apresentou um efeito sist?mico capaz de causar altera??es morfol?gicas nas gl?ndulas tire?ide e sublingual quando utilizada para estimular a cicatriza??o peri-implantar na regi?o da mand?bula.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-08-11T14:06:57Z No. of bitstreams: 1 DIS_RENATA_STIFELMAN_CAMILOTTI_PARCIAL.pdf: 1706843 bytes, checksum: 86f835b84ad4c9c1d525adc199226ade (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-11T14:06:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_RENATA_STIFELMAN_CAMILOTTI_PARCIAL.pdf: 1706843 bytes, checksum: 86f835b84ad4c9c1d525adc199226ade (MD5) Previous issue date: 2016-03-18 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The objectives of this study were: (a) elucidate whether Low Level Laser Therapy has positive effects in the treatment of bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw, by a systematic review of the literature. A systematic search of the PubMed, EMBASE, and Cochrane Library electronic databases was conducted, with no restrictions on language or year of publication. Search strategies were formulated using keywords and Boolean operators. The electronic search strategy retrieved 55 records. From 55 articles of wich 10 were ultimately included for data analysis in this review. Our findings show that treatment modalities including laser was associated with superior outcomes in terms of cure or improvement of bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw lesions as compared with conventional surgical and/or conservative drug therapy. It can be concluded that combined treatment with antibiotics, minimally invasive surgery (including Er:YAG laser surgery), and Low Level Laser Therapy in the early stages of the disease should be the gold standard for bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw management. (b) evaluate the influence of Low Level Laser Therapy in the 685nm and and 830nm wavelength (emission of red and infrared light repectivamente) in the healing process of the bone and soft tissues in rats under bisphosphonate therapy, zoledronic acid, and dexamethasone concomitantly underwent a surgery for extraction of upper molars. For this study were used twenty-eight Rattus norvegicus Wistar race, randomly divided into 4 groups of 7 animals each, one vehicle control group, a medication control group (administered Zoledronic Acid and dexamethasone) and other 2 groups wich were administered Zoledronic Acid and dexamethasone, one group was treatede with a laser with red light emission and the another onde with the and infrared light emission. There were statistically significant differences in the clinical evaluation of the wound and the weight of the animals. Regarding the histological evaluation, there were no statistically significant differences, although there are differences in the descriptions of the groups because it was possible to observe the difference maturation of the healing stage between groups. The effect of drug therapy with Zoledronic Acid and dexamethasone in the bone tissue repair process, induce osteonecrosis of the jaw in rats and slows down the healing process and we had positive influence on the bone and soft tissue repair process in the laser groups with red and infrared light emission at the stipulated dosimetry. / Os objetivos deste estudo foram: (a) tentar elucidar, atrav?s de revis?o sistem?tica da literatura, se a laserterapia atua positivamente no tratamento da osteonecrose dos maxilares induzida por bisfosfonatos. Foi realizada uma busca sistem?tica das bases de dados eletr?nicas PubMed, Embase e Cochrane Library, sem restri??es de linguagem ou ano de publica??o. As estrat?gias de busca foram formuladas utilizando palavras-chave e operadores booleanos. A estrat?gia de busca eletr?nica encontrou 55 registros dos quais 10 foram finalmente inclu?dos para an?lise de dados nesta revis?o. Nossos resultados mostram que as modalidades de tratamento, incluindo o laser foi associado com resultados superiores em termos de cicatriza??o ou melhora de osteonecrose dos maxilares induzida por bisfosfonatos, em compara??o com a terapia com cir?rgica convencional e/ou conservadora com uso de medica??o. Pode-se concluir que o tratamento combinado com antibi?ticos, cirurgia minimamente invasiva (incluindo cirurgia a laser de Er: YAG), e a laserterapia de baixa pot?ncia nas fases iniciais da doen?a deve ser o padr?o ouro para osteonecrose dos maxilares induzida por bisfosfonatos; (b) avaliar a influ?ncia da laserterapia de baixa pot?ncia nos comprimendos de onda de 685nm e 830 nm (emiss?o de luz vermelha e infravermelha repectivamente) no processo de reparo dos tecidos ?sseo e mole em ratos sob terapia com bisfosfonato, no caso o ?cido Zoledr?nico, e Dexametasona concomitantemente submetidos a procedimento cir?rgico de exodontia dos molares superiores. Para essa pesquisa foram utilizados vinte e oito Rattus norvegicus da ra?a Wistar, aleatoriamente divididos em 4 grupos de 7 animais cada, sendo um grupo controle ve?culo, um grupo controle da medica??o (administrado ?cido Zoledr?nico e Dexametasona) e outros 2 grupos onde foram administrado ?cido Zoledr?nico e Dexametasona, sendo um grupo tratado com laser, com emiss?o de luz vermelha e outro, infravermelho. Houve diferen?as estatisticamente significativas na avalia??o cl?nica da ferida e no peso dos animais. Em rela??o ? avalia??o histol?gica, n?o houve diferen?as estatisticamente significativas, apesar de haver diferen?as nas descri??es entre os grupos, pois foi poss?vel observar a diferen?a de matura??o do est?gio de cicatriza??o entre os grupos. O efeito da terapia medicamentosa com o ?cido Zoledr?nico e Dexametasona concomitantes no processo de reparo dos tecidos ?sseo, induz a osteonecrose da maxila em ratos e retarda o processo de cicatriza??o e os efeitos da laserterapia com emiss?o de luz vermelha e infravermelha com a dosimetria estipulada teve influ?ncia positiva no processo de reparo de tecidos ?sseo e mole.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 400249.pdf: 5270689 bytes, checksum: fa29405c9c8a0de59b769d9f25ba78e3 (MD5) Previous issue date: 2008-01-10 / A Sinteriza??o seletiva a laser (SLS) e a impress?o tridimensional (3DPTM) s?o t?cnicas de prototipagem r?pida cujo uso vem sendo ampliado em Cirurgia e Traumatologia Bucomaxilofacial. A literatura tem apontado resultados satisfat?rios, apresentando boa reprodutibilidade a partir de cr?nios secos. Contudo, levar o prot?tipo em campo cir?rgico ? uma necessidade fundamental. Sendo assim, realizou-se o presente estudo com a finalidade de analisar a estabilidade dimensional dos biomodelos em SLS e 3DPTM, ap?s esteriliza??o em autoclave, m?todo consagrado na literatura como o mais eficaz. Os procedimentos metodol?gicos envolveram a mensura??o de cinco medidas lineares externas horizontais, quatro medidas lineares internas horizontais e uma medida linear vertical, que foram realizadas antes e ap?s a esteriliza??o em autoclave e utilizado, como instrumento de aferi??o, um paqu?metro digital calibrado. Os resultados revelaram altera??es dimensionais estatisticamente n?o-significativas para o biomodelo em SLS e destrui??o total do biomodelo em 3DPTM, ap?s sua esteriliza??o. A partir da metodologia empregada e dos resultados obtidos, concluiu-se que o biomodelo de SLS apresenta acur?cia dimensional ap?s ser esterilizado em autoclave.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 400927.pdf: 2370909 bytes, checksum: b53e1a26d8a1672ca08aea46ce6f3465 (MD5) Previous issue date: 2007-12-14 / O objetivo desta pesquisa foi avaliar as altera??es dent?rias e esquel?ticas ocorridas ap?s a expans?o r?pida maxilar assistida cirurgicamente (ERM-AC) quando comparadas duas t?cnicas de osteotomia Le Fort I: Bell (1976); Bennett e Wolford (1982). A amostra foi composta por 27 pacientes leucodermas, com idade variando entre 17 e 40 anos, sendo 12 do g?nero feminino e 15 do masculino. Todos os pacientes eram adultos com defici?ncia de crescimento maxilar transversal, n?o submetidos a tratamento ortod?ntico pr?vio e com indica??o de ERM-AC como parte de seu tratamento ortod?ntico. Medidas lineares e angulares foram obtidas a partir de tra?ados cefalom?tricos laterais e p?stero-anteriores e analisadas estatisticamente nas fases inicial, logo ap?s a estabiliza??o do aparelho tipo Hirax e com tr?s meses de conten??o. A ERM-AC promoveu aumento na dist?ncia da base ?ssea apical maxilar (p<0,01) e da cavidade nasal (p<0,01), que permaneceram constantes ap?s tr?s meses de conten??o em ambos os grupos e constatou-se aumento nas dist?ncias intermolares superiores (p<0,01) logo ap?s a estabiliza??o do aparelho. Ap?s tr?s meses de conten??o, verificou-se que os incisivos centrais superiores inclinaram para palatino (p<0,01) durante o per?odo de conten??o em ambos os grupos. Na avalia??o transversal, tanto a dist?ncia entre os ?pices como a dist?ncia entre as coroas desses dentes aumentaram (p<0,01) logo ap?s a estabiliza??o do aparelho. Ap?s tr?s meses de conten??o e constatou-se um aumento significativo do ?ngulo interincisal em ambos os grupos, avaliado na telerradiografia PA.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 404993.pdf: 9515227 bytes, checksum: daedc3a2902210c12e30178c37ca8d64 (MD5) Previous issue date: 2008-08-12 / A apicectomia ? um procedimento cir?rgico em que o ?pice radicular pode ser removido por meio da utiliza??o de brocas em alta ou baixa rota??o. Os LASERs de alta pot?ncia v?m sendo utilizados como recurso tecnol?gico na execu??o deste procedimento. O objetivo deste trabalho foi avaliar, in vitro, a presen?a de falhas na interface dente/material obturador (adapta??o marginal) nos canais radiculares, as superf?cies apicectomizadas e os elementos qu?micos presentes nas superf?cies cortadas de 24 ?pices dent?rios de caninos humanos permanentes, submetidos a tratamento endod?ntico, com posterior abla??o com o uso de broca, LASERs CO2 e Er:YAG, divididos em tr?s grupos: Br apicectomia por broca em 90?, sob refrigera??o constante com cloreto de s?dio a 0,9%, CO2 apicectomia por LASER CO2 (5 W, CW/SP), sem irriga??o e Er apicectomia por LASER Er:YAG (400 mJ, 10 Hz), sob refrigera??o constante com spray ar/?gua. Obtiveram-se imagens de microscopia eletr?nica de varredura para avaliar as superf?cies apicectomizadas e espectros de EDS para identifica??o dos elementos qu?micos presentes em cada superf?cie apicectomizada. O teste de Shapiro-Wilk foi aplicado aos percentuais dos elementos qu?micos carbono, oxig?nio, magn?sio, f?sforo e c?lcio presentes nos ?pices dent?rios dos tr?s grupos para verificar a distribui??o normal das vari?veis. Utilizou-se o teste de ANOVA, seguido pelo teste de Tukey ou de Games-Howell, para as vari?veis que se apresentaram distribu?das normalmente e o teste n?o-param?trico de Kruskal-Wallis, seguido pelo de Dunn, para as vari?veis que n?o seguiram uma distribui??o normal de probabilidade. Os resultados foram considerados significativos estatisticamente no n?vel de 5%. Os resultados demonstraram que as amostras apicectomizadas por broca apresentaram menor irregularidade da superf?cie dentin?ria quando comparadas aos grupos LASER. As superf?cies dentin?rias apicectomizadas por LASER CO2 mostraram intensa carboniza??o, o que resultou em um maior percentual do elemento carbono para este grupo em rela??o aos demais. O grupo LASER CO2 apresentou a maior falha na adapta??o marginal, exibindo as maiores fendas entre dente/material obturador quando comparado aos outros grupos. Extrapolando para a pr?tica cl?nica, o grupo broca apresentou os melhores resultados nesta pesquisa devido ? menor irregularidade das superf?cies apicectomizadas por este m?todo e ? melhor adapta??o marginal do material obturador.

Made available in DSpace on 2013-10-29T16:25:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000451617-Texto+Completo-0.pdf: 638194 bytes, checksum: f2470bb81322e6a32a3d10b371e1182b (MD5) Previous issue date: 2013 / Objective: To evaluate the histological changes of bone surface after insertion of mini-plates and screws in the bone surface. Material and methods: Eighteen rats of Wistar strain were used, a plate and two screws were inserted in the external cortex of the femur of each animal. The animals were divided into three groups of six animals each, after thirty days of completion of the procedure the implanted material was removed cirurgiacamente after euthanasia of animals, and the bone surface ready to be removed and analyzed histologically. Results: Histological evaluation after marking immunohistochemistry, Group 3, with different materials, showed an increased inflammatory infiltrate in uperfície area analyzed, which indicated a possible area of osteolysis. Groups 1 and 2 showed no statistically significant differences showing an increase of the standard normal reparative inflammation. Conclusions: The results of study indicated that the use of different materials increase the chance of encountering large areas of osteolysis in the bone surface in contact with these materials. / Objetivo: Avaliar as alterações histológicas da superfície óssea após a inserção de miniplacas e parafusos na superfície óssea. Materiais e métodos: Dezoito ratos, da linhagem Wistar, foram utilizados; Uma placa e dois parafusos de fixação foram inseridos na cortical externa do fêmur de cada animal. Os animais foram divididos em três grupos de seis animais cada, após trinta dias da realização do procedimento o material implantado foi removido cirurgicamente após a eutanásia dos animais, e a superfície óssea removida e preparada para ser analisadas histologicamente. Resultados: Na avaliação histológica, após a marcação imunohistoquímica, O grupo 3, com diferentes materiais, apresentou um aumento do infiltrado inflamatório na superfície de área analisada, que indicou uma possível osteólise da região. Os grupos 1 e 2 não apresentaram diferenças estatísticas significantes que demonstrassem um aumento do padrão normal de inflamação reparativa. Conclusões: Os resultados do trabalho indicam que o uso de diferentes materiais aumentam a possibilidade de ocorrer áreas de osteólise na superfície óssea em contato com esses materiais.

Made available in DSpace on 2015-01-20T01:01:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000464699-Texto+Completo-0.pdf: 3304843 bytes, checksum: 1c2d736171549331a5af746072affda0 (MD5) Previous issue date: 2014 / Mesenchymal stem cells hold great promise for tissues repair and regeneration, including bone defects. The association of these cells to a scaffold which resembles bone tissue structure and physiology is a major challenge in bone tissue engineering. The lyophilized bovine bone has a structure, chemical composition and mechanical properties similar to human bone marrow and acts as an excellent osteoconductive material. This in vitro study aimed to evaluate the growth of bone marrow mononuclear cells (BMMC) on a lyophilized bovine bone scaffold (Orthogen® - Baumer S. A., BR) covered with fibronectin; to verify if different cell densities interfere with the adhesion and proliferation of these cells and to evaluate whether the combination of platelet-rich plasma (PRP) interferes with adhesion and proliferation of BMMC grown on the lyophilized bovine bone scaffold. For this purpose, bone marrow cells obtained from a Kyoto rat were grown on blocks of lyophilized bovine bone coated with fibronectin in DMEM culture medium supplemented with 10% inactivated fetal bovine serum. The Orthogen® samples were distributed into four experimental groups, in triplicate, in three 24 wells culture plates and evaluated in three periods: 72 h, 96 h and 192 h. Group 1: lyophilized bovine bone + BMMC (5 x 104 cells / well); Group 2: lyophilized bovine bone + BMMC + PRP; Group 3: lyophilized bovine bone + fibroblasts (3T3); Group 4: lyophilized bovine bone + BMMC (15 x 104 cells / well). Cultures were incubated with the intercalating agent 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) for nuclear staining in order to evaluate the cell population density, by detection with confocal microscopy, of the number of cells adhered to the lyophilized bovine bone scaffolds, after 72 h, 96 h and 192 h. The analysis of the lyophilized bovine bone surface and the morphological aspects of the cells adhered to it was performed on one sample from each group, by scanning electron microscopy (SEM). Analysis of variance (ANOVA) with two factors showed a significant interaction between the main effects evaluated: group and time, with p < 0. 001.Through the results of Bonferroni statistical test, significant difference was found in the average number of nuclei in the period of culture of 96 h in group 3, and the period of culture of 192 h in group 4, which was higher than the other groups. Through SEM analysis, mononuclear cells adhered to the lyophilized bovine bone scaffold were observed only in the groups 3 and 4, in the last, progressively, being already possible to observe cell morphology differentiation and to identify spherical and fusiform cells with cytoplasmic extensions. We concluded that BMMC cultured on a lyophilized bovine bone scaffold coated with fibronectin adhered and proliferated on the bone surface. BMMC cultured at a density of 15 x 104 cells / well, adhered and proliferated on the bone surface more evidently, when compared to the BMMC cultured at a density 5 x 104 cells / well, in the three culture periods evaluated. The association of PRP to BMMC culture on a lyophilized bovine bone scaffold increased, but not with statistical significance, the adhesion and proliferation on the bone surface. / As células-tronco mesenquimais detêm grande promessa para a reparação e regeneração de tecidos, inclusive de defeitos ósseos. A associação destas células a um arcabouço que se assemelhe à estrutura e à fisiologia do tecido ósseo é um dos grandes desafios da engenharia tecidual óssea. O osso bovino liofilizado, com estrutura e composição química similares ao osso humano medular, além de possuir propriedades mecânicas comparáveis às do osso humano, atua como excelente material osteocondutor. O presente estudo in vitro teve como objetivos avaliar o cultivo de células mononucleares de medula óssea (CMMO) sobre um arcabouço de osso bovino liofilizado (OrthoGen® - Baumer S. A., BR) recoberto com fibronectina; verificar se diferentes densidades celulares interferem na proliferação e na adesão destas células e avaliar se a associação de plasma rico em plaquetas (PRP) interfere na adesão e na proliferação das CMMO cultivadas sobre o arcabouço de osso bovino liofilizado. Para isso, células da medula óssea obtidas de um rato Kyoto foram cultivadas sobre blocos de osso bovino liofilizado, recobertos com fibronectina, em meio de cultura DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino inativado. As amostras do OrthoGen® foram distribuídas em quatro grupos experimentais, em triplicata, em três placas de cultura com 24 poços e avaliadas em três períodos: 72 h, 96 h e 192 h. Grupo 1: osso bovino liofilizado + CMMO (5 x 104 células/poço); Grupo 2: osso bovino liofilizado + CMMO + PRP; Grupo 3: osso bovino liofilizado + fibroblastos (3T3); Grupo 4: osso bovino liofilizado + CMMO (15 x 104 células/poço). As culturas foram incubadas com o agente intercalante 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) para coloração nuclear visando à avaliação de densidade populacional, por meio da detecção por microscopia confocal, do número de células aderidas aos arcabouços de osso bovino liofilizado, após 72 h, 96 h e 192 h. A análise da superfície do osso bovino liofilizado e das características morfológicas das células aderidas sobre ele o foram realizadas em uma amostra de cada grupo, com o auxílio do microscópio eletrônico de varredura. A análise de variância (ANOVA) com dois fatores mostrou interação significativa entre os efeitos principais avaliados: grupo e tempo, com valor de p < 0,001.Através dos resultados do teste estatístico de Bonferroni, verificou-se diferença significativa da média de núcleos no período de cultura de 96 h no grupo 3, e no período de cultura de 192 h no grupo 4, a qual foi maior do que as dos demais grupos. Através da análise por microscopia eletrônica de varredura foram observadas CMMO aderidas ao arcabouço de osso bovino liofilizado somente no grupo 3 e no grupo 4, neste aumentando de forma progressiva, já sendo possível evidenciar diferenciação na morfologia celular e identificar células esféricas e fusiformes com prolongamentos citoplasmáticos. Conclui-se que as CMMO cultivadas sobre um arcabouço de osso bovino liofilizado recoberto com fibronectina aderiram e proliferaram sobre a superfície óssea. As CMMO cultivadas numa densidade de 15 x 104 células / poço, aderiram e proliferaram sobre a superfície óssea de forma mais evidente, quando comparadas às CMMO cultivadas numa densidade 5 x 104 células / poço, nos três períodos de cultura avaliados. A associação de PRP à cultura de CMMO sobre um arcabouço de osso bovino liofilizado aumentou, mas não de forma estatisticamente significativa, a adesão e a proliferação celular sobre a superfície óssea.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000423502-0.pdf: 5239440 bytes, checksum: 32e82b4251252353febf2ca10f052662 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / The purpose of this research was to evaluate bone repair in defects created by fracture with or without distraction osteogenesis in rabbit lower jaws stimulated with low level laser therapy (LLLT – 830nm) by histology, computerized tomography and mechanical properties. 10 rabbits underwent surgery in order to have histologic analysis (four control and six experimental) and five rabbits to tomographic and mechanical analysis (one not broken, not distracted and not irradiated; one broken, not distracted and not irradiated; one broken, not distracted and nor irradiated; one broken, distracted and not irradiated; one broken, distracted and irradiated). In order to achieve the distracted bone, the following protocol was used latency period – three days, activation period-seven days 0.7mm/d, consolidation period- 10 days. The animals were irradiated with infrared laser (GaAl) As (λ=830nm, 40mW) with 10J/cm2 dose per spot applied directly to the distraction osteogenesis site during the consolidation stage at 48hy intervals. Histologically, the area of the new bone was higher on irradiated group (57.89%) than the control (46.75%), p=0.006. The tomographic analysis shows higher bone density, measured by Hounsfield Units (HU) on the broken bone irradiated with laser and better uniform repair. The mechanical properties were the same in the broken bone. On the distracted bone, the hardness was similar in broken groups, but the laser modified the elastic modulus in the these rabbits. / Esta pesquisa teve como objetivo avaliar, por métodos histológicos, tomográficos e físicos, o efeito do laser de baixa potência (LLLT – 830 nm) no osso neoformado em mandíbulas de coelhos submetidas à fratura, sem ou com distração osteogênica (DO). Foram utilizados 10 coelhos para as análises histológicas (quatro para o grupo controle e seis para o experimental) além de cinco coelhos para as análises tomográficas e físicas (um nãofraturado, não-distraído e sem irradiação laser; um fraturado, não-distraído e sem irradiação laser; um fraturado, não-distraído e com irradiação laser; um fraturado, distraído e sem irradiação laser; um fraturado, distraído e com irradiação laser). Para os coelhos que sofreram alongamento ósseo por DO foi adotado o seguinte protocolo: latência – três dias, ativação – sete dias 0,7mm/d, e consolidação – 10 dias. Para os animais irradiados, utilizou-se o laser infravermelho (GaAl)As (J=830 nm, 40 mW) com o seguinte protocolo: dose pontual de 10 J/cm2, diretamente sobre o sítio ósseo submetido à fratura e/ou DO, no período de consolidação óssea, respeitando-se intervalos de 48 horas. O percentual do osso neoformado foi maior no grupo com laser (57,89%) do que no controle (46,75%), p=0,006, conforme observado na análise histológica. A análise tomográfica revelou aumento da densidade, medida em Unidades Hounsfield (HU), dos ossos fraturados que foram irradiados com laser. Com relação às propriedades físicas, pareceu não haver grandes diferenças entre os grupos que sofreram fratura. Nos ossos submetidos à DO, o laser não promoveu alteração da nanodureza, mas modificou os valores do módulo de elasticidade, na amostra estudada.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000424484-0.pdf: 12584409 bytes, checksum: ce100d293e186ae476b96a04abe84099 (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / Introduction: Distraction osteogenesis is a treatment approach designed to induce new bone formation in vascularized bone surfaces through the use of functional devices and the application of slow and progressive traction forces. Objectives: To validate the use of nanoindentation tests in research protocols involving animals and to assess the quality of newly formed bone in sheep mandibles submitted to distraction osteogenesis and low-level laser therapy (LLLT) based on hardness and modulus of elasticity values. We also aim to determine the best moment for the application of laser therapy, i. e., during the latency/activation or consolidation periods, and to assess the dimensions of newly formed bone with the use of computed tomography. Background data: Nanobiotechnology is an emerging concept in the field of science and technology that has a potential to radically change the criteria currently used to assess the quality of bone formed after distraction osteogenesis. Methods: Extraoral distraction devices were placed in five sheep so as to achieve 1. 5 cm of lengthened bone in 60 days. Distraction devices were removed 50, 40, and 33 days after surgery. Four animals were also treated with eight applications of infra-red laser (830ŋm), each 48 hours, in three equidistant spots, with 5Jcm2 and 50mW of potence, at different times. One was used as control (no laser therapy). The newly formed bone was submitted to nanoindentation tests for the assessment of hardness and modulus of elasticity and a computed tomography to bone contraction evaluation. Results: When applied in the bone consolidation period, LLLT caused an increase in hardness and modulus of elasticity values. On the other hand, animals irradiated with LLLT during the activation period presented lower values. Computed tomography revealed that the animals using the devices for 33 days presented contraction of the newly formed bone. Conclusions: Nanoindentation tests were able to detect slight abnormalities in bone metabolism and proved to be important tools for the assessment of bone quality after distraction osteogenesis. LLLT provides increased benefits when applied during the bone consolidation period, once it promotes an increase in hardness and modulus of elasticity values. The bone consolidation period should be of at least 3 weeks, so as to prevent bone contraction. / Introdução: A distração osteogênica é um processo terapêutico para induzir neoformação tecidual entre superfícies ósseas vascularizadas, por meio de uma força lenta e progressiva de tração, através de aparelhos funcionais. Objetivos: Validar a utilização dos testes de nanoindentação em pesquisas com modelo experimental não humano, a fim de conhecer a qualidade do osso mandibular neoformado em ovelhas submetidas à distração osteogênica e à terapia a laser de baixa potência (LLLT), baseado nos valores de dureza e módulo de elasticidade. Complementarmente, objetiva-se conhecer o momento mais benéfico para irradiação do laser, se na fase de latência/ativação ou maturação. Ademais, foram realizadas tomografias computadorizadas para avaliar a dimensão de osso neoformado e verificar possíveis contrações desse alongamento. Contexto de Pesquisa: A nanobiotecnologia é um campo emergente da ciência e da tecnologia que tem o potencial para transformar radicalmente, por meio de novos conhecimentos, os critérios atualmente utilizados para conhecer a qualidade do osso formado por distração osteogênica. Materiais e Métodos: Cinco ovelhas foram utilizadas e nelas instalados distratores extra-bucais, com intuito de neoformar 1,5 cm de osso em 60 dias de observação, sendo que os distratores eram removidos aos 50, 40 e 33 dias de pósoperatório. Quatro animais foram irradiados com LLLT infravermelho (830 ŋm), tendo recebido oito aplicações, a cada 48 horas, com três pontos de 5J/cm2 e potência de 50mW, em diferentes períodos terapêuticos; o quinto foi o controle, sem tratamento LLLT. As peças ósseas foram submetidas a testes de nanoindentação para aferir módulo de elasticidade e dureza das amostras e a tomografias computadorizadas para avaliar a contração óssea. Resultados: A LLLT quando utilizada na fase de maturação do osso, promoveu aumento da dureza e do módulo de elasticidade. Por outro lado, os animais irradiados com LLLT durante o período de latência/ativação apresentaram menores valores de dureza e módulo de elasticidade. A análise tomográfica complementar demonstrou que, nos animais com manutenção do distrator por 33 dias, ocorreu contração do osso neoformado. Conclusões: A nanoindentação é um teste capaz de captar as mínimas alterações do metabolismo ósseo e, portanto, uma importante ferramenta na aferição da qualidade do osso em procedimentos de distração osteogênica. A LLLT é mais benéfica quando aplicada no período de maturação do osso, pois promove aumento da dureza e do módulo de elasticidade. O período de consolidação óssea com permanência do distrator deve ser de, no mínimo, três semanas, a fim de prevenir contração do tecido ósseo alongado.