Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-06-06T13:25:21Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_angelita_celente_martins.pdf: 733168 bytes, checksum: c74065f4c9562bd019898f47b44438ad (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-06-06T14:30:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_angelita_celente_martins.pdf: 733168 bytes, checksum: c74065f4c9562bd019898f47b44438ad (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-06T14:30:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_angelita_celente_martins.pdf: 733168 bytes, checksum: c74065f4c9562bd019898f47b44438ad (MD5) Previous issue date: 2014-08-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Os campos naturais sul-americanos apresentam várias espécies nativas com grande potencial forrageiro, que podem servir para o desenvolvimento de novos materiais cultivados mais produtivos e adaptados às mudanças climáticas. Dentre essas, destacam-se algumas leguminosas, como Macroptilium lathyroides L., Vigna luteola Jacq. e Desmodium incanum DC. O objetivo do trabalho foi caracterizar alguns mecanismos fisiológicos e bioquímicos de adaptação ao estresse, causado pela restrição hídrica no solo, em leguminosas nativas dos campos sul-brasileiros. As plantas foram obtidas a partir de sementes coletadas a campo e semeadas em bandejas multicelular de polipropileno expendido contendo substrato comercial (turfa fértil) e cultivadas em casa de vegetação. Após 49 dias da semeadura, as plantas foram transferidas para vasos plásticos, perfurados, com capacidade de 3L, mantendo-se três plantas por vaso. O substrato utilizado foi constituído de turfa fértil e solo, na proporção de 1:1. O tratamento com restrição hídrica foi iniciado 30 dias após o transplante por meio da suspensão da irrigação. O monitoramento do teor de umidade foi realizado por gravimetria. As plantas do tratamento controle foram mantidas na capacidade de campo. As avaliações foram realizadas aos quatro, 11 e 18 dias após a submissão ao déficit hídrico e aos dois, cinco e nove dias após a reidratação. O delineamento experimental utilizado foi em blocos ao acaso com quatro repetições. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e analisados por comparação de médias pelo Teste de Tukey a 5% de significância. A unidade experimental consistiu em um vaso contendo três plantas. Foram avaliados os parâmetros de crescimento, (massa seca da parte aérea e do sistema radicular e área foliar), concentração de pigmentos fotossintéticos (clorofilas a, b, total e de carotenoides totais) e o teor relativo de água em folhas, extravasamento de eletrólitos, teores de açúcares solúveis totais, prolina, peróxido de hidrogênio e malondialdeído em folhas e raízes. Os resultados obtidos permitem inferir que, em plantas de Macroptilium lathyroides e Desmodium incanum há uma relação direta entre o crescimento, caracterizado pelo acúmulo de massa seca na parte aérea e raiz respectivamente, o potencial de água nas folhas, a área foliar e o teor de clorofila total. Relação esta que não foi observada em Vigna luteola. O acúmulo de solutos compatíveis como açúcares solúveis e prolina constitui uma estratégia metabólica evidente para adaptação à restrição hídrica nas três espécies de leguminosas. / Many native species from southern brazilian rangelands have elevated potencial to be cultivated as forage and could be used to develop more productive and adapted materials to stress caused by climate changes such as some legume species: Macroptilium lathyroides L., Vigna luteola Jacq. and Desmodium incanum DC. The aim of this work was to characterize some biochemical and physiological adaptation mechanisms to stress caused by soil water deficit in native legume species from southern brazilian rangelands. Seeds were collected from native rangelands plants and planted in foam box cells containing commercial substrate (turf with nutrients) and grown under green house conditions. Plants were transferred to 3 L perforate plastic pots containing turf and soil in a 1:1 proportion, 49 days after sowing. Water deficit treatments were applied by stopping the irrigation of plants and initiated 30 days after plants were tranferred to pots. Soil moisture levels were monitored by gravimetry and control plants were kept closed to the field capacity. Growth and biochemical analysis were done at four, 11 and 18 days after plants were submitted to water deficit and at two, five and nine days after rehydratation of substrate in a group plants upon 18 days of water deficit treatment. Experiments were carried out in a fully randomized block design and the data were analysed by one-way analysis of variance (ANOVA). When F was significant the treatments means were compared by Tukey’s test (p0.05). Each treatment consisted of four replicates and each replicate consisted of one pot containing three plants. Growth parameters (root and shoot dry mass and leaf area), photosynthetic pigments concentration (chlorophyll a, b and total, total carotenoids) and relative water content in leaves, electrolyte likage, total soluble sugars contents, proline levels, hydrogen peroxide and malondialdeyd contents in leaves and roots were quantified. Macroptilium lathyroides and Desmodium incanum growth, characterized by dry mass accumulation in shoot and root system, was affected by water deficit in a similar way as water leaf potential, leaf area and total chlorophyll content. In Vigna luteola plants the relatioship between these parameters was not observed. Compatible solute accumulation such as soluble sugars and proline constitutes an evident metabolic strategy for adaptation to water restriction in the three legume species.

Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-06-23T11:46:07Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_alessandra_vollmann.pdf: 719074 bytes, checksum: fc4a031e8a673f1bbfe20e1289928b22 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-06-23T22:08:26Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_alessandra_vollmann.pdf: 719074 bytes, checksum: fc4a031e8a673f1bbfe20e1289928b22 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-23T22:08:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_alessandra_vollmann.pdf: 719074 bytes, checksum: fc4a031e8a673f1bbfe20e1289928b22 (MD5) Previous issue date: 2016-02-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O armazenamento de sementes é uma atividade essencial, que tem por função a manutenção da qualidade da semente para a próxima semeadura. As sementes de arroz (Oryza sativa L.) podem ser armazenadas tanto em sacaria quanto a granel, buscando a preservação da sua qualidade fisiológica, por meio de condições onde os danos sejam mínimos. Assim sendo, este trabalho teve por finalidade avaliar a influência da temperatura durante o armazenamento na qualidade fisiológica de sementes de arroz cv BR-IRGA 417, bem como verificar possíveis alterações na composição química e na atividade de enzimas hidrolíticas. Para isto, sementes de arroz foram submetidas a quatro condições de armazenamento, sendo, condições sem controle de umidade e temperatura (laboratório), temperatura constante de 15 ºC, temperatura de 15ºC, com elevação da temperatura para 25 ºC, durante 24h, a cada sete dias de armazenamento e sementes armazenadas em temperatura de 15ºC, com elevação da temperatura para 25 ºC, durante 24h, a cada 14 dias de armazenamento, mantidas armazenadas por 168 dias e avaliadas em períodos regulares de 56 dias. Os seguintes testes foram realizados: germinação, primeira contagem da germinação, índice de velocidade de germinação, comprimento de parte aérea e raiz, massa seca de parte aérea e raiz, condutividade elétrica, em todos os períodos avaliados, Já os seguintes testes: composição química e determinação da atividade das enzimas α-amilase e fosfatase ácida, bem como parâmetros obtidos no teste de emergência de plântulas, foram realizados antes de iniciar o armazenamento e após 168 dias. Os resultados mostraram que a alternância de temperatura durante o armazenamento ocasiona redução na qualidade fisiológica da semente. Portanto, pode-se concluir que, apesar de manter o potencial germinativo alto, ocorre redução no vigor das sementes de arroz, cv BR-IRGA 417, quando armazenadas em condições inadequadas de temperatura. / Seed storage has become is an essential activity, whose function is to maintain the quality of seed for the next sowing. Rice seeds (Oryza sativa L.) can be stored either in sacks as bulk, seeking to preserve your physiological quality, through conditions where damage seeds are minimal. Therefore, this experiment aimed at evaluate the influence of temperature during storage on the physiological quality of rice sseds, cv BR- IRGA 417, and verify changes in chemical compositions and activity of hydrolytic enzymes. For that, rice seeds were submitted to four storage conditions, without humidity and temperature control (laboratory), contant temperature of 15 ºC, temperature of 15 ºC with rise temperature to 25 ºC during 24 hours, every seven day storage, and temperature of 15 ºC with rise temperature to 25 ºC during 24 hours, every 14 day storage, remain stored for 168 days and evaluated at regular intervals of 56 days. The following testes were performed: germination test, first count of germination, germination speed rate, shoot and root length, dry mass of shoot and root, electrical conductivity, in all periods, already the following tests: chemical composition, and determining the activity of α-amylase and phosphatase acid, as well as parameters obtained in the emergency seedlings test, were carried out before starting storage and after 168 days. The results showed that during storage temperature alternation causes reduction in the seed physiological quality. Therefore, it can be concluded that though maintaining high germination potential occurs reduction in the effect of rice seeds cv BR-IRGA 417, when stored under unsuitable temperature conditions.

Submitted by Alberto Vieira (martins_vieira@ibest.com.br) on 2018-01-12T18:05:12Z No. of bitstreams: 1 576657.pdf: 7103966 bytes, checksum: 0286b14eba278887a46f7b0883b3b102 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-12T18:05:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 576657.pdf: 7103966 bytes, checksum: 0286b14eba278887a46f7b0883b3b102 (MD5) Previous issue date: 2002 / CAPES / FUJB / Apresenta as variações espaciais e temporais do nano- e microfitoplâncton da baía de Guanabara, Rio de Janeiro, Brasil sob aspectos estruturais (composição e abundância) e pré-funcionais (proporção de auto e heterótrofos e biomassa). A estratégia amostral incluiu coletas intensivas (semanais) durante dois anos e meio (07/1998 a 12/2000), a 0,5 m, em dois pontos com qualidades de águas distintas: Urca (na entrada) e Ramos (no interior). O fitoplâncton apresentou abundância uma ordem de grandeza maior em Ramos, com densidades de autótrofos na ordem de 10^7 - 10^9 cel.L^-1 para o nano e 10^5 - 10^7 cel.L^-1 para o microfito, e biomassas na ordem de 10^2 - 10^3 μgC.L^-1 para o nano e 10 - 10^3 μgC.L^-1 para o microfito. Na Urca, foram encontradas menores abundâncias absolutas e relativas também de heterótrofos. Foram listados para o microfitoplâncton 168 táxons na Urca e 69 em Ramos, sendo as diatomáceas o grupo de maior destaque, seguido pelos dinoflagelados. A metodologia de análise do nanoplâncton (somente epifluorescência) permitiu a identificação apenas de alguns grupos (diatomáceas, dinoflagelados, criptoficeas e cianobactérias). A mediana da diversidade microfitoplanctônica foi 2,43 bits.cer^-1 na Urca e 1.68 bits.cer^-1 em Ramos. O estado trófico (meso-eutrófico na Urca e hipereutrófico em Ramos) e a salinidade (menor em Ramos) foram identificados como os principais fatores determinantes da diferença espacial encontrada para o fitoplâncton. As variações sazonais foram condicionadas por um verão chuvoso (predomínio de diatomáceas e cianoficeas) e um inverno seco ( aumento na contribuição de flagelados). A sazonalidade mais marcada do fitoplâncton de Ramos foi atribuída a maior influência do aumento do fluxo dos rios nesta área. Variações interanuais coincidiram com os anos de ocorrência do fenômeno 'La Niña' ( 1998 e 1999), quando foram encontradas tendências sazonais diferentes do padrão observado para a baía de Guanabara. Variações semanais foram detectadas principalmente para o grupo dos dinoflagelados e euglenoficeas no interior da baía, área de maior estresse ambiental. A estimativa da biomassa total, a partir do biovolume, mostrou que a fração do microfitoplâncton apresentou importância similar ou maior que o nanoplâncton, ao contrário do que mostrou a densidade celular. Além disso, os heterótrofos nanoplanctônicos foram relativamente menos abundantes quanto à biomassa, enquanto o contrário ocorreu para os microfitoplanctônicos. A biomassa em termos de carbono, mesmo sendo uma medida estática, foi de extrema importância na determinação da real contribuição das frações (nano/microfito) e seus componentes (auto/hetero; grupos autotróficos), e na análise da distribuição dos organismos. Além disso, foi um parâmetro chave na interpretação dos estados tróficos determinados para a baía de Guanabara. / Presents the space-time variations for the nano- and microphytoplankton of Guanabara Bay, Rio de Janeiro, Brazil, focussing on the structure (composition and abundance) and pre-functional (auto and heterotrophic components, biomass) aspects of the community. Sampling strategy included intensive sampling (weekly) for two and a half years (July/1998 - December/2000), at 0.5 m, at two sites with different water qualities: Urca (close to the entrance) e Ramos (inner-reaches). The abundance of the phytoplankton was one order of magnitude higher at Ramos, where cell density of autotrophs varied around 10^7 - 10^9 cells. L^-1 for the nanoplankton and 10^5 - 10^7 cells. L^-1 for the microplankton, while biomass values varied around 10^2 - 10^3 μgC. L^-1 and 10 - 10^3 μgC. L^-1, respectively. At Urca, lower relative and absolute abundances of heterotrophs were also found. The species list for the microphytoplankton included 168 taxa for Urca and 69 for Ramos; diatoms were the best-represented species, followed by dinoflagellates. For the nanophytoplankton, it was identified just some groups (diatoms, dinoflagellates, cryptophytes and cyanobacteria) due to methodology of analysis (just epifluorescence). Median diversity of microphytoplankton was 2.43 bits.ceff^-1 at Urca and 1.68 bits.celr^-1 at Ramos. Trophic state (meso-eutrophic for Urca and hypertrophic for Ramos) and salinity (lower at Ramos) were identified as the main forcings determining the space variation found for the phytoplankton. Seasonal variations were associated to a rainny summer (dominance of diatoms and cyanobacteria) and a dryer winter (increase on the contribution of flagellates). The stronger seasonal variation found for Ramos was attributed to the greater influence of direct river flow to this area. Interannual variations coincided with the occurrence of "La Niña" years (1998 and 1999) when seasonal variations were different from those considered as the pattern for Guanabara Bay. Weekly variations were detected, especially for dinoflagellates and euglenophytes from the innerreaches of the bay, the area under stronger environmental stress. Estimates of total biomass from cell biovolume showed that the contribution of the microphytoplankton was equivalent and, at time, even greater than that of the nanoplankton, in contrast to what was indicated by the cell density data. Moreover, the heterotrophic componentes of nanoplankton were less abundant in terms of biomass, while the opposite occurred for microplankton ones. Biomass in terms of carbon, while still providing a sinoptic scenario of the community, was very important to determine the true contribution of each fraction (nano:microphytoplankton) and of each component (auto:heterotrophs), which were key to support the trophic states determined for Guanabara Bay.

Made available in DSpace on 2016-12-23T13:48:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Disertacao Lislane Rocha Schaeffer.pdf: 4914861 bytes, checksum: f00b3579c743c0a084ee90c0f399d063 (MD5) Previous issue date: 2007-12-10 / O presente trabalho foi realizado na região costeira próxima da área estuarina de Anchieta, ES, em uma área de malacocultura. As amostragens foram realizadas mensalmente no período de janeiro a dezembro de 2004 em 10 (dez) pontos: Rio, 1A, 1B, 1C, 2A, 2B, 2C, 3A, 3B, 3C. Foi realizada análise quali-quantitativa da comunidade fitoplanctônica e das variáveis ambientais, tais como temperatura da água, transparência, salinidade, pH e oxigênio dissolvido. Os resultados de temperatura da água e pH pouco variaram ao longo do ano. A pluviosidade interferiu na transparência da água e, portanto, foi a variável ambiental que mais influenciou na comunidade fitoplanctônica local. As diatomáceas foram as mais representativas (em análise qualitativa e quantitativa) das Classes. Os dados de densidade foram baixos se comparados a outras regiões costeiras, mas teve uma alta diversidade e equitabilidade demonstrando que a área de estudo ainda é uma região bem preservada, com poucos impactos ambientais. Os baixos valores de densidade e biovolume indicam que os mexilhões dependem muito pouco da comunidade fitoplanctônica como alimento. Em relação às espécies potencialmente tóxicas, a Classe Bacillariophyceae novamente teve a maior representatividade no número de ocorrências dos táxons ao longo do ano. As espécies fitoplanctônicas potencialmente tóxicas ainda não promovem florações, mas deve se considerar um alerta, uma vez que a população de Anchieta lançar seus efluentes domésticos no rio Benevente ou diretamente no mar. Esta pesquisa é um sub-projeto de maricultura sustentada do Projeto RECOS Milênio, financiado pelo CNPq a partir de 2004. / The actual paper was made in the coastol region near Anchieta estuarian area in Espírito Santo State in na malacoculture area. The samples were taken monthly from January to December 2004 in 10 (ten) points: Rio, 1A, 1B, 1C, 2A, 2B, 2C, 3A, 3B, 3C. The analysis made were both a phytoplankton comunity quali-quantitative and environmental variables as water temperature, transparency, pH, salinity, and oxigen dissolved analysis . The water temperature and pH results had little variation throughout the year. The amount of rain changed the water transparency, therefore, pluviosity was the most influencing factor in the local phytoplankton comunity. Diatom were the most significant kind ( concearning a qualitative and quantitative analysis). Density data was low compared to other beach regions, though it showed a high diversity and equitability levels, which assures the well preserved with low environment impact area. The low density and biovolume levels indicate that mussels almost do not depend on phitoplancton comunity to eat. The Bacillariophyceae kind had the most representation concearning toxic species, due to it highest numbers through the year. Phytoplankton species that are potentialy toxic still do not appear, however they should be considered dangerous, since the Anchieta city population sewing system go straight either to Beneventes River or to the sea. This research is an under project of sustain musssel culture from RECOS Milenium Project, sponsored by CNPq since 2004

Made available in DSpace on 2016-12-23T13:48:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Magda dos Santos Rossi.pdf: 1025934 bytes, checksum: 0049a719a5ed442439e219ad8cc3f5f4 (MD5) Previous issue date: 2011-02-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Espírito Santo state has edaphoclimatic conditions propitious to the cultivation of passion fruit tree, however, the average rainfall does not pose constant, resulting in extended periods of drought and periods of torrential rain. Therefore, assessing the physiological responses of plants of passion fruit tree (Passiflora edulis Sims) FB 200 and FB 300 cultivars submitted to water stress by flooding is the main way to identify and characterize the effects of duration of stress and select genetic material with a high degree of tolerance. Passion fruit tree plants were grown in a greenhouse and kept in well-drained soil until the start of treatment. Ultimately we used FB 200 and FB 300 cultivars employing three experimental treatments: 1. Unflooded plants, 2. Plants flooded for 3 days, 3. Plants flooded for seven days. In all treatments the plants had a recovery period (with soil drainage) of seven days. The flooding caused a decrease in water potential, stomatal conductance, and CO2 liquid assimilation rate on both cultivars during the flooding. Yet the reason between the internal and environmental concentration of CO2 (Ci/Ca) increased from the fifth day of flooding in both cultivars due to increased internal carbon. The phases O-J and J-I of the OJIP curve, presented greater changes during the flooding indicating the reduction of the PSII acceptor side (QA and QB) and the progressive reduction of the plastoquinone pool, respectively. The stress by flooding also resulted in the decrease of connectivity of units of PSII (with L-band positive) and inactivation of oxygen evolution complex (K-Band). The catalase and peroxidase activity increased significantly in cultivar FB 200 during the stress. After seven days of recovery the cultivars recovered the photosynthetic activity when submitted to short periods of flooding (three days). However, when the period of flooding was prolonged (seven days) the stress became more severe to a point of not having recovery of the photosynthetic activity / O Estado do Espírito Santo possui condições edafoclimáticas propícias para a cultura do maracujazeiro, porém, as médias pluviométricas não se apresentam constantes, ocasionando grandes períodos de estiagem e períodos de chuvas torrenciais. Portanto, avaliar as respostas fisiológicas de plantas do maracujazeiro (Passiflora edulis Sims), cultivares FB 200 e FB 300 submetidas ao estresse hídrico por alagamento do solo é o principal caminho a ser seguido para identificar e caracterizar os efeitos da duração do estresse e selecionar materiais genéticos com alto grau de tolerância. Plantas do maracujazeiro foram cultivadas em casa de vegetação e mantidas em solo bem drenado até o início dos tratamentos. Foram empregados três tratamentos experimentais: 1. Plantas não alagadas; 2. Plantas alagadas por três dias e 3. Plantas alagadas por sete dias. Em todos os tratamentos as plantas tiveram um período de recuperação (com drenagem no solo) de sete dias. O alagamento ocasionou decréscimo do potencial hídrico, da condutância estomática e da taxa de assimilação líquida de CO2 nas duas cultivares, no decorrer do alagamento. Já a razão entre a concentração interna e ambiente de CO2 aumentou a partir do quinto dia de alagamento nas duas cultivares devido ao aumento do carbono interno. As fases O-J, e J-I da curva OJIP, apresentaram maiores alterações no decorrer do alagamento indicando a redução do lado aceptor do FSII (QA e QB) e a progressiva redução do pool de plastoquinona, respectivamente. O estresse por alagamento resultou também em uma diminuição da conectividade das unidades do FSII (com bandas L positivas) e inativação do complexo de evolução do oxigênio (Banda K). A atividade da catalase e da peroxidase aumentaram significativamente na cultivar FB200 no decorrer do estresse. Após sete dias de recuperação as cultivares recuperam a atividade fotossintética quando submetidas a curtos períodos de alagamento (três dias). Entretanto, quando o período de alagamento foi prolongado (sete dias) o estresse torna-se mais severo a ponto de não ocorrer recuperação da atividade fotossintética

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:36:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1875030 bytes, checksum: 2c2c1497d43bb10ad7e10f009f941c57 (MD5) Previous issue date: 2006-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Geminiviruses constitute a large group of plant virus whose genome is packed as single-stranded DNA circles in a small, twinned isometric particle and is converted to double- stranded forms in nuclei of differentiated plant cells. Members of the genus Begomovirus, such as Cabbage leaf curl virus (CaLCuV), possess two genomic components, DNA-A and DNA-B. The DNA-A has the potential to code for five gene products (AV1, AC1, AC2, AC3, AC4) and is involved in replication, transcriptional activation of viral genes and encapsidation of the viral genome. The DNA-B encodes two movement proteins, the movement protein MP (BC1) and the nuclear shuttle protein NSP (BV1), both required for systemic infection. NSP shuttles the viral DNA between the nucleus and the cytoplasm and then acts cooperatively with MP to move the viral DNA cell-to-cell across the wall. The localization of NSP and its proposed role in cell-to-cell movement of the viral DNA predict that interactions with host factors may occur in both the cytoplasm and the nucleus. In fact, NSP has been demonstrated to interact with a plasma membrane receptor protein, designated NIK, and a nuclear acetyltransferase. A proline-rich extensin-like receptor protein kinase (PERK) was found to interact specifically with NSP of CaLCuV and of tomato-infecting geminiviruses, through yeast two-hybrid screening. The PERK-like protein, which we designated NsAK (NSP-associated kinase), is structurally organized into a proline-rich N-terminal domain followed by a transmembrane segment and a C-terminal serine/threonine kinase domain. The viral protein interacted stably with defective versions of the NsAK kinase domain but not with the potentially active enzyme in an in vitro binding assay. In vitro translated NsAK enhanced the phosphorylation level of NSP, indicating that NSP functions as substrate for NsAK. These results demonstrated that NsAK is an authentic serine/threonine kinase and suggested a functional link for the NSP-NsAK complex formation. This interpretation was corroborated by in vivo infectivity assays showing that loss of NsAK function delays the onset of CaLCuV infection and attenuates symptom development. Our data implicate NsAK as a positive contributor to geminivirus infection and suggest it may regulate NSP function. / Geminivírus constitui um grande grupo de vírus de planta, cujo genoma é empacotado na forma de DNA circular fita simples em partículas icosaédricas geminadas e é convertido em uma forma fita dupla no núcleo de células diferenciadas de plantas. A maioria dos membros do gênero Begomovirus, como o Cabbage leaf curl vírus (CaLCuV), possuem dois componentes genômicos, DNA-A e DNA-B. O DNA-A apresenta o potencial para codificar cinco produtos gênicos (AV1, AC1, AC2, AC3, AC4) e está envolvido na replicação, ativação transcricional de genes virais e encapsidação do genoma viral. O DNA-B codifica duas proteínas de movimento, Movement Protein MP (BC1) e Nuclear Shuttle Protein NSP (BV1), ambas requeridas para o estabelecimento de uma infecção sistêmica. NSP transporta o DNA viral entre o núcleo e o citoplasma e então atua cooperativamente com MP para transportar o DNA viral de célula-a-célula através da parede celular. A localização de NSP e seu papel proposto no movimento célula- a-célula do DNA viral predizem que podem ocorrer interações com fatores do hospedeiro tanto no citoplasma quanto no núcleo. De fato, foi demonstrado que NSP interage com uma proteína receptora da membrana plasmática, designada NIK, e uma acetiltransferase nuclear. Através de ensaio de duplo híbrido, foi identificada, uma PERK quinase ( proline-rich extensin-like receptor protein kinase ) de Arabidopsis thaliana que interage especificamente com NSP de CaLCuV e, também de geminivírus que infectam tomate, a qual foi designada NsAK ( NSP-associated kinase ) e é estruturalmente organizada em um domínio N-terminal rico em prolina seguido de um segmento transmembrana e de um domínio C-terminal de serina/treonina quinase. A proteína viral interagiu estavelmente com versões defectivas do domínio de quinase de NsAK, mas não com a enzima potencialmente ativa em um ensaio de ligação in vitro. NsAK traduzida in vitro aumentou o nível de fosforilação de NSP, indicando que NSP atua como substrato de NsAK. Estes resultados demonstram que NsAK é uma autêntica serina/treonina quinase e sugerem elo funcional para a formação do complexo NSP-NsAK. Esta interpretação foi corroborada por ensaios de infectividade in vivo, demonstrando que a perda de função de NsAK reduz a eficiência da infecção por CaLCuV e atenua o desenvolvimento dos sintomas. Estes dados implicam NsAK como um contribuidor positivo para a infecção por geminivírus e sugerem que NsAK pode regular a função de NSP.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:36:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 726631 bytes, checksum: 4b99d1bb7278ac3af995722dcd6a4931 (MD5) Previous issue date: 2007-12-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Canavalia ensiformis and Stizolobium aterrimum species grown in nutrient solution, pH 5.5, were treated with arsenic (As) at 0.0; 1.5; 2.5 and 3.5 mg L-1 concentrations during five days. After plant treatment As content and dry mass yield were determined. Arsenic effect on physiological and antioxidative parameters were also studied in the two species exposed to 0 and 1.5 mg L-1 As concentrations. Arsenic contents in plant roots and shoots increased with the increase in As in the nutrient solution, always at higher rates in C. ensiformis. Wilting of leaves was observed in C. ensiformis at 2.5 and 3.5 mg L-1 As concentrations, but not in S. aterrimum. Both species showed As toxicity symptoms in the roots. S. aterrimum showed darkening and diameter increase of lateral roots. C. ensiformis showed root yellowing only when exposed to 1.5 mg L-1 As concentration, followed by an increase in toxicity symptoms intensity and root system disintegration as As concentration was increased. Reduction of root hair number occurred in both species, with higher intensity in C. ensiformis. The species showed dry mass reduction in both plant parts, especially in the shoots. Chlorophyll a, b and total and carotenoids contents increased in C. ensiformis, but did not change in S. aterrimum with As treatment. Arsenic reduced CO2 assimilation rate, transpiration rate (E), stomatal conductance (gs), internal to external CO2 concentration ratio (Ci/Ca) and internal CO2 concentration (Ci) in both species, especially in C. ensiformis. Initial fluorescence (F0) and variable fluorescence to maximum fluorescence ratio (Fv/Fm) did not change in both species exposed to As. Plants exposure to As resulted in superoxide dismutases (SODs) activity increase in roots and leaves in both species. Peroxidases (POXs) activity decreased in both plant parts of S. aterrimum, but increased in C. ensiformis with As treatment. Glutathione reductases (GRs) activity increased in the roots of both species, especially in S. aterrimum. In the leaves, however, GRs activity increased only in C. ensiformis, while in S. aterrimum enzyme activity reduced. Lipid peroxidation in roots and leaves increased in both species after As treatment, especially in S. aterrimum. Under the experimental condition used in this research S. aterrimum was considered more tolerant to the toxic effects of As than C. ensiformis. / As espécies Canavalia ensiformis e Stizolobium aterrimum, cultivadas em solução nutritiva, pH 5,5, foram tratadas com arsênio (As) nas concentrações de 0,0; 1,5; 2,5 e 3,5 mg L- 1, durante cinco dias. Após este período, determinou-se o teor de As e seus efeitos sobre a produção de massa seca. Além disso, determinou-se o efeito do As sobre processos fisiológicos e parâmetros antioxidativos nas espécies submetidas às doses 0 e 1,5 mg L-1de As. A concentração de As nas raízes e parte aérea das plantas aumentou com o aumento da concentração de As na solução nutritiva, sempre em maior intensidade em C. ensiformis. Observou-se murcha foliar apenas em C. ensiformis nas doses 2,5 e 3,5 mg L-1 de As, mas o mesmo não foi observado em S. aterrimum. Nas raízes, ambas as espécies apresentaram sintomas de toxidez. S. aterrimum apresentou escurecimento e aumento do diâmetro das raízes laterais. C. ensiformis apresentou amarelecimento das raízes somente quando submetida à dose 1,5 mg L-1, com evolução dos sintomas de toxidez e desintegração das raízes com o aumento na concentração de As. A redução de pêlos radiculares ocorreu nas duas espécies, sendo mais intensa em C. ensiformis. As espécies apresentaram reduções da massa seca nas duas partes das plantas, especialmente na parte aérea. O tratamento com As resultou em aumento nos teores de clorofilas a, clorofila b, clorofila total e carotenóides para C. ensiformis, enquanto S. aterrimum não apresentou alteração nas variáveis. Nas duas espécies o As reduziu a taxa de assimilação de CO2, a transpiração (E), a condutância estomática (gs), a relação concentração de CO2 interna e externa (Ci/Ca) e a concentração interna de CO2 (Ci), especialmente em C. ensiformis. A fluorescência inicial (F0) e a relação fluorescência variável e fluorescência máxima (Fv/Fm), não sofreram alterações nas duas espécies. A exposição das plantas ao As resultou em aumento na atividade das dismutases do superóxido (SODs), tanto nas raízes quanto nas folhas nas duas espécies. A atividade das peroxidades (POXs) reduziu em S. aterrimum, mas aumentou em C. ensiformis com o tratamento com As. A atividade das redutases da glutationa (GRs) aumentou nas raízes das duas espécies, especialmente em S. aterrimum. Nas folhas, entretanto, a atividade das GRs aumentou em C. ensiformis, mas decresceu em S. aterrimum. A peroxidação de lipídios nas raízes e nas folhas sofreram acréscimos, quando submetidas ao tratamento com As, especialmente em S. aterrimum. Sob as condições experimentais da presente pesquisa, S. aterrimum foi considerada mais tolerante aos efeitos tóxicos do As do que C. ensiformis.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:36:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3012323 bytes, checksum: 96e79a49116ebbc5c759193ecd754c2b (MD5) Previous issue date: 2006-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The plants propagated in vitro are usually affected by stress conditions, which can lead to the hyperhydricity development. In this sense, this study was carried out to investigate the influence of the gelling agents, cytokinin-6-benzylaminopurine (BAP) and type of the flask sealing upon the induction of hyperhydricity in grapevine and strawberry plants. So, strawberry plants Dover and Burkley and the rootstock of the grapevine 'VR043 - 43', kept in vitro in growth room at 25 ± 2 ºC, under a 16-hour photoperiod and irradiance 36 µmol m-2 s-1. Strawberry explants were cultivated in medium containing salts and vitamins of MS, 30 g L-1 sucrose, 100 mg L-1 myo-inositol added with Agar (6.5 g L-1) or Phytagel® (2.5 g L-1) and BAP at different concentrations (0.5; 1.0; 2.0 and 3.0 mg L-1). Some grapevine internodes were transferred to MS/2 or to Q & L medium, with the same amounts of sucrose and myo-inositol added with Agar (6.5 g L-1) or Phytagel® (2,5 g L-1) and BAP (1.0 or 2.0 mg L-1). The ethylene levels were measured inside the flasks at 5, 10, 20, and 30 days under culture for strawberry plant, as well as at 3, 7, 14, 20, 30 and 40 days for grapevine. After 35 days, the following analyses were accomplished: biochemistry (SOD, CAT, POD, isozymes, lipid peroxidation, chlorophyll content), structural (light microscopy and scanning electron microscopy), besides the morphologic characteristics of the hyperhydricity. To study the influence of the sealing upon the development of hyperhydricity, the grapevine and strawberry plants were transferred to flasks containing both inductor and noninductor medium of hyperhydricity. The flasks were sealed with either rigid polypropylene lid with and without membrane permeable to gaseous exchanges or two layers of plastic PVC film. The ethylene levels were measured at 7, 20 and 40 days under culture. After 35 days, the following were analyzed: fresh and dry matter of the buds, lipid peroxidation, enzymatic systems MDH, ADH and POD, electrolyte leakage, and ultra-structural characteristics (scanning). The BAP addition to the culture medium induced the oxidative stress, which caused changes in the physiologic state of both strawberry and grapevine plants, that were characterized by increase in either the activity of antioxidant enzymes and the peroxidation of lipids, alterations at cellular level, malformations in stomata and epidermal cells, besides increased production ethylene inside the culture flasks. The sealing type affected the internal ambient of the flasks, therefore the hyperhydricity development. In the flasks sealed with permeable membrane, even in hyperhydricity inducing medium, no morphologic characteristics of such a phenomenon were observed, although an increase in both peroxidase activity and electrolyte leakage were observed in the grapevine plants submitted to this treatment. The sealing of the flasks with rigid polypropylene lid or with PVC film, in presence of BAP, promoted higher hyperhydricity index, therefore confirming that the sealing type of the flasks associated to the components of the medium and culture conditions are related to the appearance of this physiological disorder in plants grown in vitro. / Plantas propagadas in vitro são freqüentemente afetadas por condições de estresse que podem levar ao desenvolvimento de hiperidricidade. Nesse sentido, o presente trabalho teve como objetivos investigar a influência de agentes gelificantes, da citocinina 6-benzilaminopurina (BAP) e do tipo de vedação dos frascos sobre a indução de hiperidricidade em videira e morangueiro. Para tal, foram utilizadas plantas de morangueiros Dover e Burkley e do porta-enxerto de videira VR043 43 , mantidas in vitro em sala de crescimento a 25 ± 2 ºC, sob fotoperíodo de 16 h e irradiância 36 mmol m-2 s-1. Explantes de morangueiro foram cultivados em meio contendo sais e vitaminas de MS, 30 g L-1 de sacarose, 100 mg L-1 de inositol, acrescido de Ágar (6,5 g L-1) ou Phytagel® (2,5 g L-1) e BAP em diferentes concentrações (0,5; 1,0; 2,0 e 3,0 mg L-1). Segmentos de entrenós de videira foram transferidos para meio MS meia força ou para meio Q & L, com as mesmas quantidades de sacarose e mioinositol, acrescidos de Ágar (6,5 g L-1) ou Phytagel® (2,5 g L-1) e BAP (1,0 ou 2,0 mg L-1). Foram mensurados os níveis de etileno no interior dos frascos aos 5, 10, 20, e 30 dias de cultivo, para morangueiro, e aos 3, 7, 14, 20, 30 e 40 dias, para videira. Após 35 dias, foram realizadas analisadas bioquímicas (SOD, CAT, POD, isoenzimas, peroxidação de lipídios, teor de clorofila), estruturais (microscopia fotônica e eletrônica de varredura), além da análise das caracteristicas morfológicas da hiperidricidade. Para estudar a influência do tipo de vedação no desenvolvimento de hiperidricidade, plantas de videira e morangueiro foram transferidas para frascos contendo meio indutor e não indutor de hiperidricidade. Os frascos foram vedados com tampa rígida de polipropileno, com e sem membrana permeável a trocas gasosas ou duas camadas de filme pástico de PVC. Foram mensurados os níveis de etileno aos 7, 20 e 40 dias de cultivo e, após 35 dias, foram analisados massas fresca e seca dos brotos, peroxidação de lipídios, sistemas enzimáticos (MDH, ADH e POD), extravasamento de solutos e características ultraestruturais. A adição de BAP no meio de cultivo induziu ao estresse oxidativo que, por sua vez, causou mudanças no estado fisiológico de plantas de morangueiro e videira, caracterizadas por aumento da atividade de enzimas antioxidantes e da peroxidação de lipídios, alterações em nível celular, malformações de estômatos e de células epidérmicas, além de aumento na produção de etileno no interior dos frascos de cultivo. O tipo de vedação utilizado influenciou o ambiente interno dos frascos e, conseqüentemente, o desenvolvimento de hiperidricidade. Nos frascos vedados com membrana permeável, mesmo em meio indutor de hiperidricidade, não foram observadas características morfológicas desse fenômeno, embora tenha sido observado aumento da atividade de peroxidases e de extravasamento de eletrólitos em plantas de videira, submetidas a este tratamento. A vedação de frascos com tampa rígida de polipropileno ou com filme de PVC, em presença de BAP, promoveram maior índice de hiperidricidade, confirmando que o tipo de vedação dos frascos, em combinação com componentes do meio e com condições de cultivo, estão relacionados ao surgimento dessa desordem fisiológica em plantas cultivadas in vitro.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:36:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 931851 bytes, checksum: 02913dabd536f90d618f0d85274181de (MD5) Previous issue date: 2006-02-07 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Clusia hilariana, a CAM plant with crucial ecological role, has a broad distribution in brazilian restingas. With the aim to evaluate the physiological and biochemical effects of iron ore particulate matter (MSPFe), deposited in different fashions, on this species, three distinct experiments were carried out. Young plants were hydroponic cultivated in Hoagland solution at pH 5,5 and 4,0, using two source of iron, iron citrate III (0 and 2,0 mM) and FeEDTA complex (0, 1 and 2,0 mM). On the second experiment the plants were exposed to 6 and 18 mg.cm-2.day-1 of MSPFe, applied directly on the soil surface. On the final experiment, 2,14 mg.cm-2.day-1 of MSPFe was applied on the leaf surface by keeping the plant inside a MSPFe deposition chamber, in order to simulate the phenomenon that takes place in the field. The source of available iron in the hydroponic solution was critical for the stress onset. The gas exchange parameters were only affected on plants treated with FeEDTA. The iron content in plant tissues was greater in plants exposed to MSPFe deposition treatments than the control plants. The deposition of MSPFe on leaf surface caused significant decrease of a number of parameters such as plant height, leaf number, net photosynthesis, stomatal conductance, chlorophyll a fluorescence, pigments content and organic acid accumulation, yonder increment on the relative membrane permeability, reduction of activity of catalase enzyme, without similar effect on lipid peroxidation. These effects were less dramatic on the treatment with MSPFe deposited on the soil surface. The enzymatic activity of superoxide dismutase was enhanced in those plants treated with MSPFe applied on the soil surface, revealing an effective control of the reactive oxygen species. Thus, the set of physiological response of C. hilariana, as a consequence of MSPFe applications depends upon the target of the deposition, as supported by the significant results obtained when the MSPFe was applied directly on the leaves surface. The damages caused by the applications of MSPFe on the leaves of C. hilariana, were probably due to a physical effect rather than a toxic effect of the iron. The tolerance of C. hilariana to the high iron content in the soil, followed by iron accumulation in the plant, reveals the possibility of its use in iron phytoextraction of contaminated environments. / Clusia hilariana é uma espécie que apresenta o metabolismo ácido das crassuláceas (CAM), de grande distribuição nas restingas brasileiras, onde desempenha importante papel ecológico. Com o objetivo de avaliar os efeitos das diferentes formas de deposição do material sólido particulado de ferro (MSPFe), em aspectos bioquímicos e fisiológicos, nesta planta, foram implantados três experimentos. No experimento inicial, plantas jovens foram cultivadas em solução nutritiva de Hoagland em pH 5,5 e 4,0, com duas fontes de ferro, o citrato de ferro III (0 e 2,0 mM) e o complexo FeEDTA (0; 1,0 e 2,0 mM). No segundo experimento, as plantas foram expostas a 6 e 18 mg.cm-2.dia-1 de MSPFe aplicados sobre o solo. O último experimento, com aplicação de 2,14 mg. cm-2.dia-1 de MSPFe sobre a superfície foliar, foi realizado após a construção de uma câmara de deposição de MSPFe, que simula o que ocorre naturalmente nas áreas sujeitas à poluição por ferro. A fonte de ferro disponível na solução nutritiva foi determinante para a ocorrência do estresse, os parâmetros de trocas gasosas, nesse experimento, foram prejudicados apenas com a exposição das plantas ao FeEDTA. Foi verificado maior teor de ferro nos tecidos vegetais expostos às diferentes formas de deposição do MSPFe, em relação aos respectivos controles. A aplicação do MSPFe sobre as folhas de C. hilariana causou reduções significativas em vários parâmetros avaliados, como altura da planta, número de folhas, fotossíntese, condutância estomática, fluorescência da clorofila a, teor de pigmentos e acumulação de ácidos orgânicos, além de aumento na permeabilidade relativa de membrana e redução na atividade da enzima catalase. Entretanto, a peroxidação de lipídios de membrana não sofreu alterações. Com a deposição do MSPFe sobre o solo, os mesmos parâmetros permaneceram invariáveis. Houve incremento significativo na atividade da enzima superóxido dismutase em decorrência da deposição do MSPFe no solo, indicando controle efetivo das espécies reativas de oxigênio. A resposta fisiológica em C. hilariana, como conseqüência da aplicação do MSPFe, depende da forma de deposição, como evidenciado pelos diversos danos causados quando o MSPFe foi aplicado sobre a superfície foliar, em relação à aplicação do mesmo material ao solo. Provavelmente, os danos causados pela aplicação do MSPFe sobre as folhas de C. hilariana, não se deve, primeiramente, à toxidez do ferro, mas sim devido aos efeitos físicos da deposição. A tolerância de C. hilariana, encontrada nesse experimento, à elevada concentração de ferro no solo e conseqüente acúmulo deste metal, fornece indícios para sua utilização em estudos com objetivos de fitoextração do ferro em ambientes contaminados.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:36:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1243805 bytes, checksum: 3c8248afdd915bfc2ff4163ea2ee6cdc (MD5) Previous issue date: 2006-02-21 / Universidade Federal de Minas Gerais / The present study was conducted to evaluate possible interactions between ethylene and polyamines levels upon in vitro morphogenesis of two passion fruit species (Passiflora cincinnata Masters and P. edulis Sims f. flavicarpa Degener, population FB-100). Hypocotyl-derived segments (average 10 mm length) were cultivated in MS-based medium, with B5 vitamin complex, 30 g.L-1 sucrose, 100 mg.L-1 myo-inositol, 10% (v/v) coconut water, 0,5 mg.L-1 6-benzyladenine (BA) ), and solidified with 2.5 g L-1 Phytagel®. Ethylene and polyamines were assayed at different times in culture (3, 6, 9, 12, and 30 d). Aiming to characterize the shoot-buds differentiation histological analyses were performed with previous fixation of the samples in FAA 50%. The effects of ethylene inhibitor, promoter and scavenger (aminoethoxyvinilglycine AVG, silver tiosulfate STS, 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid ACC, and mercury perchlorate- MP, respectively), polyamines (spermine, spermidine and putrescine) and its inhibitor (methylglyoxal-bis-guanylhydrazone - MGBG) were also analysed. A delayed organogenic response occurred in explants of P. edulis f. flavicarpa as compared to P. cincinnata, though coincident with a delayed detection of ethylene and polyamine in cultures of the former. Similar morphogenic responses were observed in explants cultured onto AVG- or MPsupplemented medium, whereas ACC-treated cultures impaired organogenic responses. Polyamine-supplemented cultures displayed morphogenic responses similar to those from control treatment. However, MGBG similarly to ACC lessened the morphogenic responses. Interestingly, explants at redifferentiation stages displayed high expansion and elongation rates, linked to elevated ethylene and polyamine, suggesting that competition between their biosynthetic pathways is highly regulated and plastic, and that these interactions may play a key role in differentiation process. / O presente trabalho teve por objetivo investigar as possíveis interrelações entre etileno e poliaminas sobre a capacidade morfogênica de explantes de hipocótilo de duas espécies de maracujazeiro (Passiflora cincinnata Masters e Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Degener população FB-100). Explantes de hipocótilo retirados de plântulas germinadas in vitro foram cultivados em meio contendo sais MS, complexo vitamínico B5, 30 g.L-1 de sacarose, 100 mg.L-1 de inositol, 10% (v/v) de água de coco, 0,5 mg.L-1 6-benzilaminopurina (BAP) e solidificado com 2,5 g.L-1 de Phytagel. Os níveis de etileno e poliaminas foram mensurados ao longo do período de indução da organogênese. Concomitantemente, foi realizada a histologia com a fixação do material vegetal em F.A.A. 50% e acompanhamento da ontogênese das gemas adventícias, de forma a se caracterizar os diferentes eventos envolvidos na rediferenciação celular e a regulação dos níveis de poliaminas e etileno. Também foram realizados tratamentos com inibidores (aminoetoxivinilglicina AVG, tiossulfato de prata - STS), seqüestrador (perclorato de mercúrio PM) e promotor da produção de etileno (ácido 1-carboxílico 1-aminociclopropano - ACC), além da adição de poliaminas (putrescina, espermidina e espermina) e de seu inibidor (metilglioxal-bis-guanil hidrazona MGBG) ao meio de cultivo. Foi observado atraso nas respostas morfogênicas em P. edulis f. flavicarpa em comparação com P. cincinnata, sendo coincidente com o atraso observado nas concentrações de poliaminas e etileno mensurados naquela espécie. As respostas morfogênicas dos explantes foram semelhantes nos tratamentos com inibidores e seqüestrador, sendo observado comprometimento da organogênese apenas no meio de cultivo com adição isolada de ACC. Nos tratamentos com poliaminas não foi observada diferença em relação ao tratamento controle. Todavia, o tratamento com MGBG apresentou respostas semelhantes àquele com ACC levando à redução da resposta morfogênica. Observou-se que culturas em estádios de rediferenciação, caracterizadas por apresentarem altas taxas de expansão e alongamento, apresentaram níveis elevados de etileno associados a altos níveis de poliaminas, sugerindo que a competição entre as duas rotas biossintéticas é altamente regulada e plástica, e que a interação seria a peça chave para a definição da diferenciação.