Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TherezaMMP_DISSERT.pdf: 3247575 bytes, checksum: b56626eecb3cf571b5b30d6c0ab92d04 (MD5) Previous issue date: 2013-03-22 / Bioidentical hormones are defined as compounds that have exactly the same chemical and molecular structure as hormones that are produced in the human body. It is believed that the use of hormones may be safer and more effective than the non-bioidentical hormones, because binding to receptors in the organism would be similar to the endogenous hormone. Bioidentical estrogens have been used in menopausal women, as an alternative to traditional hormone replacement therapy. Thermal data of these hormones are scarce in literature. Thermal analysis comprises a group of techniques that allows evaluating the physical-chemistry properties of a drug, while the drug is subjected to a controlled temperature programming. The thermal techniques are used in pharmaceutical studies for characterization of drugs, purity determination, polymorphism identification, compatibility and evaluation of stability. This study aims to characterize the bioidentical hormones estradiol and estriol through thermal techniques TG/DTG, DTA, DSC, DSC-photovisual. By the TG curves analysis was possible to calculated kinetic parameters for the samples. The kinetic data showed that there is good correlation in the different models used. For both estradiol and estriol, was found zero order reaction, which enabled the construction of the vapor pressure curves. Data from DTA and DSC curves of melting point and purity are the same of literature, showed relation with DSC-photovisual results. The analysis DTA curves showed the fusion event had the best linearity for both hormones. In the evaluation of possible degradation products, the analysis of the infrared shows no degradation products in the solid state / Horm?nios bioid?nticos s?o compostos que t?m exatamente a mesma estrutura qu?mica e molecular dos horm?nios end?genos humanos. Acredita-se que a utiliza??o desses horm?nios pode ser mais segura e eficaz que os horm?nios n?o-bioid?nticos, pois a liga??o aos receptores no organismo se daria de forma semelhante aos horm?nios end?genos. Estrog?nios bioid?nticos v?m sendo utilizado, em mulheres na menopausa, como uma alternativa ? terapia de reposi??o hormonal tradicional. Dados t?rmicos desses horm?nios s?o escassos na literatura. A an?lise t?rmica ? um conjunto de t?cnicas que possibilita medir as propriedades f?sico-qu?micas de uma subst?ncia em fun??o da temperatura. As t?cnicas t?rmicas v?m sendo utilizadas na ?rea farmac?utica em diversas aplica??es, como na caracteriza??o de f?rmacos, determina??o do grau de pureza, identifica??o de polimorfismo, estudos de estabilidade e compatibilidade. Este trabalho tem como objetivo a caracteriza??o dos horm?nios bioid?nticos estradiol e estriol atrav?s das t?cnicas t?rmicas TG/DTG, DTA, DSC, DSC-fotovisual. A partir da an?lise das curvas TG, foi poss?vel calcular os par?metros cin?ticos para as amostras. Os dados cin?ticos mostraram boa correla??o entre os diferentes modelos empregados. Tanto para o estradiol como para o estriol, foi encontrada ordem zero de rea??o, o que possibilitou a constru??o das curvas de press?o de vapor. Dados das curvas DSC e DTA sobre ponto de fus?o e pureza s?o condizentes com a literatura, sendo poss?vel correlacionar estes resultados com o DSC-fotovisual. As an?lises das curvas DTA mostraram o evento de fus?o como o de melhor linearidade para os dois horm?nios. Na avalia??o dos poss?veis produtos de degrada??o, a an?lise do infravermelho mostra que n?o houve produtos de degrada??o no estado s?lido

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ReginaCE_DISSERT.pdf: 2319971 bytes, checksum: 40c841a1d50cf6f734095c894d9d920d (MD5) Previous issue date: 2013-04-25 / Homeopathic medicines have been used for over two hundred years without the examination of their effects on in vivo and in vitro assays, due to the peculiarity of homeopathic preparations, the high dilution, which creates a challenge for the use of usual analytical techniques of quality control of medicine.Although there is scarcity of literature and variety of experiments, recently there have been some studies with few in vitro assays which have shown positive responses when evaluating the mechanism of action of homeopathic medicines which are able to act on a specific system.The present study aims to evaluate the efficacy of homeopathic products containing Momordica charantia through bioassays.Homeopathic products were tested by the MTT to assess cytotoxicity in RAW 264.7 (macrophage-like cells) and in tumor cells HeLa (human cervical adenocarcinoma cells), CHO K1 (Chinese hamster ovary cells), PANC-1 (human pancreas cancer cells) and PC-3 (human prostate cancer cells), dosage of inflammatory mediators NO, TNF-? and IL-6 released by RAW 264.7 cells, analysis of the death process and cell cycle changes of PC-3 by flow cytometry. The data demonstrate that homeopathic products of Momordica charantia did not show cytotoxicity to RAW 264.7, increased the production of inflammatory mediators by RAW 264.7 synergistically with LPS, showed cytotoxicity to PC-3 with change in its cell cycle inhibiting its proliferation, being the 30CH the most potent sample. Correlation studies were conducted in order to evaluate the possible in vitro applicable models to the quality control of homeopathic products with Momordica charantia. The data showed that the best applicable models in assessing the quality are the MTT to assess cytotoxicity in RAW 264.7 and PC-3 in 24 hours for Momordica charantia fruit products and dosage of NO production by RAW 264.7 with and without LPS / Os medicamentos homeop?ticos t?m sido utilizados por mais de duzentos anos, sem a verifica??o dos seus efeitos em ensaios in vivo e in vitro. Devido ? peculiaridade das prepara??es homeop?ticas, sua alta dilui??o, que cria um desafio para a utiliza??o das t?cnicas anal?ticas usuais do controle de qualidade de medicamentos. Embora exista escassez de literatura e heterogeneidade de experimentos, recentemente existem alguns estudos com poucos ensaios in vitro que t?m apresentado respostas positivas quando se avalia o mecanismo de a??o dos medicamentos homeop?ticos que s?o capazes de atuar em um sistema espec?fico. O presente estudo visa ? avalia??o da efic?cia dos produtos homeop?ticos contendo Momordica charantia atrav?s de bioensaios. Os produtos homeop?ticos foram avaliados pelo teste do MTT para verifica??o da citotoxicidade em RAW 264.7(macr?fago murino) e em c?lulas tumorais HeLa (Adenocarcinoma cervical uterino humano), CHO K1 (C?lulas de ov?rio de Hamster chin?s), PANC-1 (Carcinoma de p?ncreas humano) e PC-3 (Adenocarcinoma de pr?stata humano); pela dosagem de mediadores da inflama??o NO, TNF-? e IL-6 liberados por c?lulas RAW 264.7 e pela an?lise do processo de morte e da altera??o do ciclo celular de PC-3 por citometria de fluxo. Os dados demonstraram que os produtos homeop?ticos de Momordica charantia n?o apresentaram citotoxicidade para RAW 264.7, aumentaram a produ??o dos mediadores da inflama??o por RAW 264.7 sinergicamente com LPS, mostraram citotoxicidade para PC-3 com altera??o no seu ciclo celular inibindo sua prolifera??o, sendo 30CH a amostra mais potente. Foram realizados estudos de correla??o visando avaliar os poss?veis modelos in vitro aplic?veis ao controle de qualidade de produtos homeop?ticos contendo Momordica charantia. Os dados demonstraram que os melhores modelos aplic?veis na avalia??o da qualidade s?o o teste do MTT para avaliar citotoxicidade em RAW 264.7 e PC-3 em 24 horas para os produtos de Momordica charantia (fr) e dosagem da produ??o de NO por RAW 264.7 com e sem LPS

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoaoFB_DISSERT.pdf: 2759392 bytes, checksum: db32fc8b33f7b2673ea9c102af48910f (MD5) Previous issue date: 2010-02-23 / Funda??o de Amparo a Pesquisa do Estado de S?o Paulo / The congenital facial clefts are characterized by incomplete formation of the structures that separate the oral and nasal cavity. It is known that several environmental and genetic factors are involved in its development, among these, polymorphisms associated with folic acid metabolism have been investigated. In this sense, the objective was to observe the frequency of polymorphisms C677T and A1298C methylenetetrahydrofolate reductase gene (MTHFR), methionine synthase A2756G of (MTR), A66G of methionine synthase reductase (MTRR) A80G and the reduced folate carrier (RFC1) in patients with non-syndromic oral clefts, trying to match them with their development. Methods: We studied 140 patients with non-syndromic oral clefts and their mothers and 175 control subjects with their mothers, who underwent a questionnaire to obtain family information. Were collecting blood for DNA extraction from patients and their mothers to identify the genotypes of both by PCRRFLP, in addition to carrying out the determination of glucose, AST, ALT and serum creatinine, folic acid and vitamin B12 Serum and plasma homocysteine, and the hemogram. Results: Most patients have cleft lip and palate (55.8%), followed by isolated cleft palate (24.2%) and cleft lip (20%). Regarding gender, 62% of patients were male and 48% female and, after subdivision of the type of screwdriver according to sex was found a prevalence of males in the cracks of the type lip and palate (69 %) and lip (69.2%) and in the case of cleft palate was a female predominance (59%). The average concentration of serum folate in the group of mothers of cleft patients was significantly lower (13.8 ? 2.4 ng / mL) compared with the group of mothers of control subjects (18.8 ? 3.4 ng / mL) This was also observed for the group of cleft children as compared to controls, the dosage of folic acid had a significant difference with values of 15.6 ? 0.6 (ng / mL) and 17.9 ? 0.6 (ng / mL), respectively. For the biochemical measurements of glucose, AST, ALT and creatinine were not statistically different, nor was observed for haematological parameters performed. In assessing the frequency of polymorphisms C677T and A1298C MTHFR, A2756G MTR, MTRR A66G and A80G of the RFC1 there was no statistically significant difference in genotype distribution between cases and controls both for mothers and in the cleft. Conclusion: Although not observed association of polymorphisms with the development of cracks, the decrease in serum folate in the group of cleft patients and their mothers may reflect a disturbance in the metabolism of this metabolite, necessitating further studies such as studies methylation and expression to further elucidate the involvement of folate in the development of oral clefts / As fendas orais s?o malforma??es caracterizadas pela forma??o incompleta das estruturas que separam a cavidade nasal e oral. Sabe-se que v?rios fatores ambientais e gen?ticos est?o envolvidos no seu desenvolvimento, dentre esses, polimorfismos associados ao metabolismo do ?cido f?lico t?m sido alvo de estudos. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi observar a freq??ncia dos polimorfismos C677T e o A1298C do gene da Metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR), A2756G da Metionina Sintase (MTR), A66G da Metionina Sintase Redutase (MTRR) e A80G do Transportador de folato reduzido (RFC1) em pacientes portadores de fendas orais n?o-sindr?micas, buscando associ?-los ao desenvolvimento das mesmas. Casu?stica e M?todos: Foram avaliados 140 portadores de fendas orais n?o-sindr?micas e suas m?es e 175 indiv?duos controles com suas m?es, que foram submetidos a um question?rio familiar para obten??o de informa??es. Foi realizada a coleta de sangue para extra??o do DNA dos pacientes e de suas m?es para identifica??o dos gen?tipos de ambos atrav?s de PCR-RFLP, al?m da realiza??o das dosagens de glicose, AST, ALT e creatinina s?ricos, dosagens de ?cido f?lico e vitamina B12 s?ricos e homociste?na plasm?tica, al?m da realiza??o de hemograma. Resultados: A maioria dos pacientes s?o portadores de fenda l?bio-palatina (55,8%), seguida da fenda palatina isolada (24,2%) e da fenda labial (20%). Em rela??o ao sexo, 62% dos pacientes e s?o do sexo masculino e 48% do sexo feminino e, ap?s subdivis?o do tipo de fenda de acordo com o sexo constatou-se uma preval?ncia do sexo masculino nas fendas do tipo l?bio-palatina (69%) e labial (69,2%) e no caso das fendas palatinas isoladas houve uma predomin?ncia do sexo feminino (59%). A concentra??o m?dia de ?cido f?lico s?rico no grupo das m?es de pacientes fissurados foi significativamente inferior (13,8?2,4ng/mL) quando comparada com o grupo das m?es dos indiv?duos controles (18,8?3,4ng/mL), o que tamb?m foi observado para o grupo dos pacientes fissurados quando comparado aos filhos controles, a dosagem de ?cido f?lico apresentou diferen?a significante com valores de 15,6?0,6(ng/mL) e 17,9?0,6(ng/mL), respectivamente. Para as dosagens bioqu?micas de glicose, AST, ALT e creatinina n?o foram observadas diferen?as estat?sticas, assim como n?o foi observado para os par?metros hematol?gicos realizados. Na avalia??o da freq??ncia dos polimorfismos C677T e A1298C da MTHFR, A2756G da MTR, A66G da MTRR e A80G do RFC1 n?o foi observada diferen?a estatisticamente significante na distribui??o dos gen?tipos entre caso e controle tanto em rela??o as m?es quanto nos pacientes fissurados. Conclus?o: Apesar de n?o ter sido observada associa??o dos polimorfismos estudados com o desenvolvimento das fendas, a diminui??o na concentra??o s?rica de ?cido f?lico no grupo dos pacientes fissurados e de suas m?es pode refletir algum dist?rbio no metabolismo desse metab?lito, sendo necess?rio mais estudos como estudos de metila??o e express?o para melhor elucidar o envolvimento do ?cido f?lico no desenvolvimento das fendas orais

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndreLS_DISSERT.pdf: 5066827 bytes, checksum: 73399e5a8ccc704bf54eb5cf1faba287 (MD5) Previous issue date: 2013-03-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Gene therapy is based on the transfer of exogenous genetic material into cells or tissues in order to correct, supplement or silencing a particular gene. To achieve this goal, efficient vehicles, viral or non-viral, should be developed. The aim of this work was to produce and evaluate a nanoemulsion system as a possible carrier for no-viral gene therapy able to load a plasmid model (pIRES2-EGFP). The nanoemulsion was produced by the sonication method, after been choose in a pseudo-ternary phase diagram build with 5 % of Captex 355?, 1.2 % of Tween 80?, 0.8 % of Span 80?, 0.16% of stearylamine and water (to 100 %). Measurements of droplet size, polydispersity index (PI), zeta potential, pH and conductivity, were performed to characterize the system. Results showed droplets smaller than 200 nm (PI < 0.2) and zeta potential > 30 mV. The formulation pH was near to 7.0 and conductivity was that expected to oil in water systems (70 to 90 &#956;S/s) A scale up study, the stability of the system and the best sterilization method were also evaluated. We found that the system may be scaled up considering the time of sonication according to the volume produced, filtration was the best sterilization process and nanoemulsions were stable by 180 days at 4 ?C. Once developed, the complexation efficiency of the plasmid (pDNA) by the system was tested by agarose gel electrophoresis retardation assay.. The complexation efficiency increases when stearylamine was incorporated into aqueous phase (from 46 to 115 ng/&#956;L); regarding a contact period (nanoemulsion / pDNA) of at least 2 hours in an ice bath, for complete lipoplex formation. The nanoemulsion showed low toxicity in MRC-5 cells at the usual transfection concentration, 81.49 % of survival was found. So, it can be concluded that a nanoemulsion in which a plasmid model was loaded was achieved. However, further studies concerning transfectation efficiency should be performed to confirm the system as non-viral gene carrier / A terapia g?nica consiste na transfer?ncia de material gen?tico ex?geno para c?lulas ou tecidos no intuito de corrigir, suplementar ou silenciar um determinado gene. Para que este objetivo seja alcan?ado, eficientes ve?culos carreadores devem ser desenvolvidos: virais ou n?o-virais. O objetivo deste trabalho foi produzir e avaliar um sistema nanoemulsionado como poss?vel ve?culo n?o-viral para terapia g?nica, capaz de veicular um modelo plasmidial (pIRES2-EGFP). A nanoemuls?o foi produzida pelo m?todo de sonica??o, ap?s ser escolhida em um digrama de fases pseudo-tern?rio. A formula??o ? constitu?da de 5 % de Captex 355?, 1,2 % de Tween 80?, 0,8 % de Span 80?, 0,16 % de estearilamina e ?gua (qsp 100 %). O sistema foi caracterizado quanto ao tamanho de got?cula, ?ndice de polidispers?o (PI), potencial zeta, pH e condutividade. Os resultados mostraram got?culas menores que 200 nm (PI < 0,2) e potencial zeta > 30 mV em uma formula??o de pH pr?ximo a 7,0 e condutividade compat?vel a formula??es de ?leo em ?gua (70 90 &#956;S/s). A possibilidade de escalonamento, a estabilidade do sistema e a melhor forma de esteriliza??o tamb?m foram avaliadas onde observou-se que o sistema pode ser escalonado adequando o volume produzido ao tempo de sonica??o e a forma mais eficiente de esteriliza??o foi a filtra??o em membrana. O sistema apresentou estabilidade maior que 180 dias quando armazenado a 4 ?C. Uma vez desenvolvido, o sistema foi testado quanto ? capacidade de compactar o modelo plasmidial (pDNA). Eletroforese em gel de agarose foi a metodologia empregada para este fim, onde verificou-se que o poder de compacta??o aumenta (de 46 para 115 ng/&#956;L) quando a estearilamina ? incorporada na fase aquosa, respeitando um per?odo de contato (nanoemuls?o/pDNA) de pelo menos 2 horas, em banho de gelo. A nanoemuls?o mostrou-se pouco t?xica nas concentra??es usuais para ensaios de transfec??o em c?lulas do tipo MRC-5, apresentando 81,49 % de viabilidade celular. Portanto, o processo de produ??o de um sistema que complexa eficientemente o modelo plasmidial foi obtido. Contudo, estudos de efici?ncia de transfec??o devem ser conduzidos para confirmar o sistema como um carreador n?o-viral de material gen?tico

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MelinaBL_DISSERT.pdf: 4468439 bytes, checksum: 05a71c9a22430196d211e6d7c8feea61 (MD5) Previous issue date: 2008-09-22 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Diabetes Mellitus (DM) and osteoposes are chronic diseases with great socioeconomic consequences, mainly due to the late complications and consequent disabilities. The potential effects of DM on bone metabolism remain a very conroversial issue, and disagreement exists with regard to the clinical implications of diabetic osteopenia and the mechanism of its ocurrence. The issue is further complicated by the contribuicion of the especific factors, such as duration of disease an dthe degree of metabolic control. The objective of this study is to identify the osteopathy in children and adolescents with DM 1 assisted in the hospital of pediatrics, UFRN, through biochemical markers of bone and mineral metabolism and the extent of bone mineral density. The study was composed by 74 diabetics type 1 patients (DM1) of both gender and aged 6 to 20 yars. Normoglic?mic group was composed by 97 healthy subjects of both genders, which showed the same age range of DM1, in addition to same socioeconomic class. These individuals qere students from the networks of public education in the city of Natal-RN, randomly invited to paticipate in our study. Both groups DM1 and NG were divided intofour subgroups, according to the classification of tanner , T1, T2, T3, T4 for achieving a benchmark. Diabetic individuals showed up with a poor glycemic control. the group DN1 T4 showed an incresead value for total protein, albumin, urea and microalbumiuria are predictors of grumelura injury in DM1 patients . The total alkaline phosphatase activitywas kept on high levels for both groups because they are in a stature development age. For osteocalcin there were decreased levels for groups Dm1 T1, T2, and T3 when compared to their NG (s), suggesting that this decrease could be associated with reduction in the number and/or differentiation os osteoblasts thereby contributing to reducing bone formation. There were no changes in the activity of TRAP. The serum concentrations of total and ionized calcium, phosphorus and magnesium were included within the RV. It was observed that the BMD (Z- SCORE ) has always been within the RV for both groups, despite to DM1 T4. Taking all together, our results support the hypothesis that children and adolescents with type 1 DM present the risk in the long run to suffer a reduction in the bone mass, associated to poor glicemic control and disease duration. It could limit the bone growth and increase the probality of development of osteopenia, as well as other complications surch as retinopathy and renal failure / Diabetes mellitus (DM) a osteoporose s?o doen?as cr?nicas com grandes consequ?ncias socioecon?micas, sobretudo devido ? complica??es tardias e consequente desabilidades. Os efeitos potenciais do DM no metabolismo ?sseo continua a ser uma quest?o controversa, e ainda n?o existe um consenso no que diz respeito ?s implica??es cl?nicas da osteopenia diab?tica e os mecanismos da sua ocorr?ncia. Entretanto, a contribui??o de fatores espec?ficos, tais como a dura??o da doen?a e o grau de controle metab?lico tem sido muito discutidos. O objetivo do presente estudo foi identificar precocemente a osteopatia diab?tica em crian?as e adolescentes com DM 1 atendidos no Hospital de Pediatria da UFRN atrav?s de marcadores bioqu?micos do metabolismo mineral e ?sseo, marcadores da fun??o renal e da medida da densidade mineral ?ssea (DXA; Z-score L1-L4) . O estudo foi constitu?do por uma amostra de 74 pacientes diab?ticos tipo 1 (DM1) de ambos os sexos, com faixa et?ria entre 6 a 20 anos. O grupo normoglic?mico (NG) foi constitu?do por 97 indiv?duos saud?veis, de ambos os sexos, os quais apresentaram a mesma faixa et?ria do DM1, al?m de compreenderem a mesma classe socioecon?mica. Estes indiv?duos eram alunos de escolas da rede p?blica de ensino da cidade de Natal-RN, convidados aleatoriamente a participar do nosso estudo. Tanto o grupo DM1 quanto o NG foram divididos em quatro subgrupos, de acordo com a Classifica??o de Tanner, T1, T2, T3, T4, para viabilizar uma avalia??o comparativa. Os indiv?duos diab?ticos apresentaram um controle glic?mico insatisfat?rio, com valores de glicemia e HbA1C significativamente superiores aos obtidos para os NG. O grupo DM1 T4 apresentou valores aumentados de prote?nas totais, albumina, ur?ia e microalbumin?ria, sugerindo assim um in?cio de comprometimento renal, visto que os valores elevados de microalbumin?ria s?o preditores de les?o glomerular em pacientes DM1. A atividade da fosfatase alcalina total mostrou-se acima dos VR nos grupos DM1 e NG por estes estarem numa faixa et?ria de desenvolvimento estatural. Observa-se uma diminui??o da concentra??o de osteocalcina para os grupos DM1 T1, T2 e T3 quando comparados aos respectivos NG (s), sugerindo que esta diminui??o estaria associada a diminui??o do n?mero e/ou da diferencia??o dos osteoblastos no seu est?gio final de matura??o, contribuindo consequentemente para a redu??o da forma??o ?ssea. N?o foram observadas altera??es na atividade da TRAP. As concentra??es s?ricas de c?lcio total e ionizado, f?sforo e magn?sio estavam compreendidos dentro dos VR, mas os grupos diab?ticos apresentaram hipozincemia e hiperzinc?ria. A DMO (Z-score L1-L4; DXA) esteve sempre dentro dos VR para os grupos estudados, entretanto os grupos DM1 apresentaram sempre valores abaixo do seu respectivo NG, alca?ando uma diferen?a significativa para DM1 T4. O conjunto de resultados obtidos indicam que o baixo controle glic?mico e o tempo de doen?a representaram fatores de risco importantes para o desenvolvimento precoce da osteopenia diab?tica, bem como para o comprometimento renal e sinais de retinopatia.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PolyanneNM_DISSERT_Parcial.pdf: 770580 bytes, checksum: 39b0d43a294576d304dce8d402da84aa (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The benznidazole (BNZ) is the only alternative for Chagas disease treatment in Brazil. This drug has low solubility, which restricts its dissolution rate. Thus, the present work aimed to study the BNZ interactions in binary systems with beta cyclodextrin (?-CD) and hydroxypropyl-beta cyclodextrin (HP-?-CD), in order to increase the apparent aqueous solubility of drug. The influence of seven hydrophilic polymers, triethanolamine (TEA) and 1-methyl-2- pyrrolidone (NMP) in benznidazole apparent aqueous solubility, as well as the formation of inclusion complexes was also investigated. The interactions in solution were predicted and investigated using phase solubility diagram methodology, nuclear magnetic resonance of protons (RMN) and molecular modeling. Complexes were obtained in solid phase by spray drying and physicochemical characterization included the UV-Vis spectrophotometric spectroscopy in the infrared region, scanning electron microscopy, X-ray diffraction and dissolution drug test from the different systems. The increment on apparent aqueous solubility of drug was achieved with a linear type (AL) in presence of both cyclodextrins at different pH values. The hydrophilic polymers and 1-methyl-2-pyrrolidone contributes to the formation of inclusion complexes, while the triethanolamine decreased the complex stability constant (Kc). The log-linear model applied for solubility diagrams revealed that both triethanolamine and 1-methyl-2-pyrrolidone showed an action cosolvent (both solvents) and complexing (1-methyl-2-pyrrolidone). The best results were obtained with complexes involving 1-methyl-2-pyrrolidone and hydroxypropylbeta- cyclodextrin, with an increased of benznidazole solubility in 27.9 and 9.4 times, respectively. The complexes effectiveness was proven by dissolution tests, in which the ternary complexes and physical mixtures involving 1-methyl- 2-pyrrolidone and both cyclodextrins investigated showed better results, showing the potential use as novel pharmaceutical ingredient, that leads to increased benznidazole bioavailability / A doen?a de Chagas tem como ?nica alternativa para tratamento, no Brasil, o benznidazol (BNZ). Este f?rmaco possui baixa solubilidade, o que restringe sua velocidade de dissolu??o. Diante disto, o presente trabalho teve como objetivo o estudo das intera??es do BNZ em sistemas bin?rios com a beta-ciclodextrina (?-CD) e a hidroxipropil-beta-ciclodextrina (HP-?-CD), com o intuito de aumentar a solubilidade aquosa do f?rmaco. A influ?ncia de sete pol?meros hidrof?licos, da trietanolamina (TEA) e da metil-1-pirrolidona-2 (NMP) na solubilidade aquosa aparente do benznidazol, assim como na forma??o dos complexos de inclus?o, tamb?m foi investigada. As intera??es em solu??o foram previstas e investigadas usando os diagramas de solubilidade de fases, espectroscopia de ressonancia magn?tica nuclear de pr?tons (RMN) e modelagem molecular. Diferentes complexos foram obtidos em fase s?lida por secagem por atomiza??o em aparelho de spray dryer e a caracteriza??o f?sico-qu?mica destes incluiu a espectrofotometria UV-Vis, a espectroscopia na regi?o do infravermelho, a microscopia eletr?nica de varredura, a difra??o de raios-X e os ensaios de dissolu??o do f?rmaco a partir das diferentes amostras. O aumento da solubilidade aquosa aparente do f?rmaco foi alcan?ada de forma linear (perfil AL) na presen?a de ambas as ciclodextrinas em diferentes valores de pH. A presen?a dos pol?meros hidrof?licos e da metil-1-pirrolidona-2 contribui para a estabiliza??o dos complexos formados, enquanto a trietanolamina diminuiu a constante de estabilidade (Kc) dos complexos formados. O modelo do log linear aplicado aos diagramas de solubilidade revelou que a trietanolamina e a metil-1-pirrolidona-2 mostraram uma a??o cossolvente (ambos solventes) e complexante (metil-1-pirrolidona-2). Os melhores resultados foram obtidos com os complexos envolvendo a metil-1-pirrolidona-2 e a hidroxipropil-beta-ciclodextrina, com um aumento de solubilidade do f?rmaco em 27,9 e 9,4 vezes, respectivamente. A efic?cia dos complexos foi comprovada pelos ensaios de dissolu??o, nos quais os complexos tern?rios e misturas f?sicas envolvendo a metil-1-pirrolidona-2 e as ciclodextrinas investigadas apresentaram os melhores resultados, demonstrando a possibilidade de uso como um novo insumo farmac?utico, que leve ao aumento da biodisponibilidade do benznidazol / 2020-01-01

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LayanyCSM_DISSERT.pdf: 3056601 bytes, checksum: f51238ab187dba8302a9c19547ab98ac (MD5) Previous issue date: 2012-02-06 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Ciclodextrinas s?o polissacar?deos c?clicos com uma cavidade interna hidrof?bica e superf?cie externa hidrof?lica. Em solu??es aquosas, s?o capazes de formar complexos de inclus?o com v?rios f?rmacos hidrof?bicos, tomando a parte lipof?lica das mol?culas para dentro da sua cavidade. O presente trabalho tem por objetivo desenvolver e caracterizar complexos de inclus?o entre &#946; ciclodextrina (&#946; CD) e praziquantel (PZQ), um anti-helm?ntico de baixa solubilidade aquosa empregado no tratamento da esquistossomose, na aus?ncia ou presen?a de hidroxipropilmetilcelulose. Foi feito o desenvolvimento e a valida??o da metodologia espectrofotom?trica UV vis para doseamento do f?rmaco nos sistemas obtidos. A t?cnica de solubilidade de fases foi empregada para investigar as intera??es entre o PZQ e os excipientes em solu??o aquosa. Prepara??es s?lidas do tipo PZQ:&#946; CD e PZQ:&#946; CD:HPMC foram obtidas por malaxagem e liofiliza??o e caracterizadas por calorimetria explorat?ria diferencial (DSC), an?lise termogravim?trica (TG) combinada ? an?lise t?rmica diferencial (DTA), espectroscopia na regi?o do infravermelho com transformada de Fourier (FT- IR), difra??o de raios X (DRX) e microscopia eletr?nica de varredura (MEV). O perfil de dissolu??o dos sistemas tamb?m foi determinado. O m?todo desenvolvido e validado para quantifica??o do praziquantel nos sistemas obtidos demonstrou ser simples, r?pido, linear, seletivo, preciso, exato, robusto e reprodut?vel. Os diagramas de solubilidade evidenciaram um aumento de solubilidade de 4 vezes para os complexos PZQ:&#946; CD, 5 vezes para os sistemas PZQ:&#946; CD:HPMC e cerca de 9 vezes para os complexos PZQ:&#946; CD:HPMC com aquecimento. A caracteriza??o f?sico qu?mica das prepara??es refor?ou a possibilidade de forma??o de complexos de inclus?o entre as esp?cies envolvidas. A malaxagem e a liofiliza??o forneceram grau significativo de amorfiza??o dos sistemas e sugerem a forma??o de complexos de inclus?o bin?rios (PZQ:&#946;-CD) e tern?rios (PZQ:&#946;-CD:HPMC). As prepara??es bin?rias e tern?rias obtidas por malaxagem e liofiliza??o apresentaram velocidade de dissolu??o superior quando comparadas ? dissolu??o do PZQ puro, melhorando assim a solubilidade aquosa do f?rmaco em quest?o

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2233780 bytes, checksum: 36fd18af67f2bd8e2c76af844131f20c (MD5) Previous issue date: 2012-08-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Heterocyclic compounds are the biggest sources of synthetic drugs and have grown exponentially with important applications in the pharmaceutical industry. Amongst the heterocyclic compounds, it has been highlighted the thiophenes category and its derivatives, which call attention for presenting important pharmacological actions, especially analgesic and the anti-inflammatory ones. The present study aims to investigate the Antinociceptive, anti-inflammatory activity and acute pre-clinical from tiophenic derivative 6CN10. The behavioral pharmacological screening of treated animals (250, 500 and 1000 mg/kg) showed changes, such as analgesia and ambulation reduction. There was no death of animals or the presence of toxic signs. From the pharmacological screening was determined the use of three doses (25, 50 and 100 mg/kg) for other studies. In the Rota rod and open field tests, there were no changes in the motor coordination of animals, discarding the possibility of a myorelaxant effect. Through models of nociception inducers, such as the abdominal constriction induced by acetic acid, formalin and hot plate, it was noticed a dose-dependent Antinociceptive activity of 6CN10. Such effect did not show itself to be associated to the opioid via of central analgesia, once this derivative did not produce any significant effect in the hot plate test, and because it has not been blocked by naloxone, an pattern antagonist opioid. The 6CN10 inhibited significantly the time of paw licking in both phases of the formalin test, especially at the inflammatory phase, being needed an analysis of the anti-inflammatory activity of the derivative. For this purpose, it was used the model of induced peritonitis by carrageenan, where there was inhibition of neutrophil migration to the intra-peritoneal cavity of treated animals, demonstrating the anti-inflammatory activity of 6CN10. In the acute toxicological study after treatment with the dosage of 1000 mg/kg 6CN10, it was observed a reduction in the food intake and in the body weight in females. The examined hematological parameters remained unaffected. The treatment was able to raise levels of ALT and AST, in both sexes, corroborating with histopathological findings that showed evidence of Hepatotoxicity. The kidneys, heart and lungs showed no histological particularities. Therefore, the results presented in this study showed a promising effect of 6CN10 as an analgesic and anti-inflammatory substance, however its security should be better investigated. / Os compostos heterocíclicos são as maiores fontes de fármacos sintéticos e têm crescido exponencialmente apresentando importantes aplicações na indústria farmacêutica. Entre os compostos heterocíclicos destacamos a classes dos tiofenos e seus derivados, que despertam grande interesse por apresentarem ações farmacológicas importantes, sobretudo, analgésica e antiinflamatória. O presente estudo se propôs a investigar a atividade antinociceptiva, antiinflamatória e a toxicidade pré-clínica aguda do derivado tiofênico 6CN10. A triagem farmacológica comportamental dos animais tratados (250, 500 e 1000 mg/kg) demonstrou alterações, tais como, analgesia e redução da ambulação. Não houve morte dos animais, nem presença de sinais tóxicos. A partir da triagem farmacológica determinou-se a utilização de três doses (25, 50 e 100 mg/kg) para os demais estudos. Nos testes de rota rod e campo aberto, não foram observadas alterações na coordenação motora dos animais, descartando a possibilidade de um efeito miorelaxante. Por meio de modelos indutores de nocicepção, como os testes das contorções abdominais induzidas por ácido acético, da formalina e da placa quente, foi observado uma atividade antinociceptiva dose-dependente de 6CN10. Tal efeito não demonstrou associar-se à via opióide de analgesia central, uma vez que este derivado não produziu efeito significativo no teste da placa quente, e por não ter sido bloqueado pela naloxona, um antagonista opióide padrão. 6CN10 inibiu significativamente o tempo de lambedura da pata em ambas as fases do teste formalina, sobretudo na fase inflamatória, se fazendo necessário uma análise da atividade antiinflamatória do derivado. Para este fim, utilizou-se o modelo de peritonite induzida pela carragenina, onde houve inibição da migração de neutrófilos para a cavidade intraperitoneal dos animais tratados, demonstrando a atividade antiinflamatória do 6CN10. No estudo toxicológico agudo após tratamento com a dose de 1000 mg/kg de 6CN10, foi observado redução da ingestão de alimentos e peso corpóreo nas fêmeas tratadas. Os parâmetros hematológicos analisados permaneceram inalterados. O tratamento foi capaz de elevar os níveis de ALT e AST, em ambos os sexos, corroborando com os achados histopatológicos que mostraram indícios de hepatotoxicidade. Os rins, coração e pulmões não apresentaram particularidades histológicas. Portanto, os resultados apresentados neste estudo evidenciaram um efeito promissor de 6CN10 como substância analgésica e antiinflamatória, contudo a sua segurança deve ser melhor investigada.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1157916 bytes, checksum: c99ab78dc2b8ee9f7877c46cab75b07f (MD5) Previous issue date: 2014-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Cryptococcus neoformans is the opportunistic pathogenic yeast with broad geographic capable of infecting all kinds of animal distribution. In humans, cryptococcosis mainly affects the lungs and central nervous system, less frequently the skin, presenting in general with severe and fatal outcomes. People with compromised immune systems are more likely to develop cryptococcosis, especially those affected by human immunodeficiency virus. Conventional treatment of cryptococcosis potentially toxic antifungal use for long periods and that has been the target of resistance of these microorganisms, in addition to the high costs of treatment. Against this background, the searches for natural products with antifungal properties have been a promising alternative, with great attention of scholars as to the analysis of essential oils and their constituents. Thus, the present study aimed to evaluate the in vitro antifungal activity of essential oil of Laurus nobilis L. (Laurel) on strains of Cryptococcus neoformans. The chemical composition of the oil was analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC / MS) and its antifungal activity, assessed by determining the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicide concentration (MFC) by microdilution. Its kinetic microbial death and the effects on the morphology were also analyzed. The results of GC / MS revealed the presence of seven phytochemicals, isoeugenol (57%), myrcene (15,9%), chavicol (9,3%), methyleugenol (2,43%), linalool (2,14%), caryophyllenne (2,10%) and limonene (2,02%). The oil showed fungal growth inhibition of 70% of the 10 strains tested, with MIC set at 256 &#956;g/mL and 1024 &#956;g/mL MFC. The curve of microbial death had a fungistatic effect (reduction <3 log10UFC/mL from the initial inoculum) at concentrations of MIC / 2, MIC, MIC x 2 and fungicidal effect (reduction of &#8805; 3 log10UFC/mL from the initial inoculum) in MIC x 4 starting from 2 hours. Not being observed change in micromorphology of LM 2601 strain, selected for the study of kinetics and micromorphology, when subjected to contact with the essential oil in different concentrations. The essential oil of L. nobilis L. showed antifungal activity against all strains of C. neoformans tested and thus may represent a novel antifungal product with potential in the treatment of cryptococcosis. / Cryptococcus neoformans é uma levedura patogênica oportunista, com ampla distribuição geográfica, capaz de infectar os mais variados tipos de animais. No homem, a criptococose acomete principalmente o sistema nervoso central e pulmões, com menor frequência a pele, apresentando-se de uma forma geral com evolução grave e fatal. Indivíduos com o sistema imunológico comprometido são mais susceptíveis de desenvolver a criptococose, principalmente os acometidos pelo vírus da imunodeficiência humana. O tratamento convencional da criptococose utiliza antifúngicos potencialmente tóxicos por longos períodos e que vêm sendo alvo de resistência desses microrganismos, além dos elevados custos com o tratamento. Diante desse panorama, a busca por produtos naturais com propriedades antifúngicas têm sido uma alternativa promissora, com grande atenção dos estudiosos quanto à análise dos óleos essenciais e seus constituintes. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antifúngica in vitro do óleo essencial de Laurus nobilis L. (louro) sobre cepas de Cryptococcus neoformans. A composição química do óleo foi analisada por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas (CG/EM) e sua atividade antifúngica, avaliada pela determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM), pela técnica de microdiluição. A cinética de morte microbiana e os efeitos sobre a micromorfologia também foram analisados. Os resultados da CG/EM revelaram a presença de sete fitoconstituintes majoritários, isoeugenol (57%), mirceno (15,9%), chavicol (9,3%), metileugenol (2,43%), linalol (2,14%), cariofileno (2,10%) e limoneno (2,02%). O óleo apresentou inibição do crescimento fúngico sobre 70% das 10 cepas ensaiadas, tendo a CIM estabelecida em 256 &#956;g/mL e a CFM em 1024 &#956;g/mL. A curva de morte microbiana apresentou efeito fungistático (redução < 3 log10UFC/mL a partir do inóculo inicial) nas concentrações de CIM/2, CIM, CIM x 2 e efeito fungicida (redução &#8805;3 log10UFC/mL a partir do inóculo inicial) na CIM x 4 a apartir das 2 horas. Não foi constatado alteração na micromorfologia da cepa LM 2601, selecionada para o estudo da cinética e da micromorfologia, quando submetida ao contato com o óleo essencial em diferentes concentrações. O óleo essencial de L. nobilis L. apresentou atividade antifúngica contra as cepas de C. neoformans testadas e dessa forma, pode representar um novo produto com potencial antifúngico no tratamento da criptococose.

Made available in DSpace on 2015-05-14T13:00:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1948005 bytes, checksum: 96df7a3d564809417a83d020664df9fc (MD5) Previous issue date: 2014-11-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Herpes simplex labialis, one of the most prevalent viral infections worldwide, is a chronic, relapsing incurable disease, persist throughout the lifetime of the host, usually in a latent form. Facing the difficulty of finding an effective therapy to traditional medicine, we seek new possibilities in complementary medicine treatment for this condition. The study aimed to perform non-clinical and clinical phase I and II toxicological tests with topical antiviral celodenina, neoflavonide synthesized from the ethanol extract of the stem bark of Coutarea hexandra (Jacq) K. Shum, topically. Preclinical studies have evaluated the dermal primary skin irritation - acute effect (single dose) and acute eye irritation (single dose) and in both experiments albino rabbits Zealanders, healthy adults were used in number 12, being 6 males and 6 females (control and treated) at a dose of 0.5 g of the cream. The assessment of primary skin irritation demonstrated that the cream does not irritate the skin of rabbits tested in Drug Testing Laboratory of the Federal University of Paraíba, since none showed any degree of erythema and edema throughout the experiment. Regarding eye irritation simple, cream showed low irritant effect, as only 33.3% rabbits showed redness in conjunctiva during the first 24 hours after application of the test substance. Did not identify any changes in the iris and cornea, in any animal throughout the experiment. To investigate the clinical phase I toxicity in humans, the celodenina, 30 volunteers were selected, of both sexes, clinically healthy, aged between 18 and 65 years. Study participants were treated daily, the night shift, by dermal route, with the cream for a period of four weeks and evaluated before the start of the study and after its termination hematology (CBC), biochemical (glucose, urea, creatinine, total cholesterol, AST, ALT, alkaline phosphatase), in order to detect possible changes resulting from use of cream in them, as well as to compare the results before and after the study. No abnormal values for both hematological variables as for biochemical between times and groups were highlighted. During treatment with the cream, some adverse reactions were observed in participants: local dryness (7%), burning (13%), tingling (7%) and erythema (7%), but the number of affected subjects was small, and symptoms and signs reported occurred in the first week of the study, not requiring specific treatment, disappearing spontaneously. Clinical phase II trials were randomized, double-blind, comparing celodenina 4% with placebo in 33 patients with recurrent herpes labialis between 18 and 65 years, who used these substances three times daily for 15 days. Patients were also assessed before and after the study of hematological and biochemical tests, which showed no significant values between times. Few adverse effects were reported, burning (21%) and local dryness (5.3%), both mildly during the first 30 minutes after application in the first five days. Herpes recurrences were evaluated for 30, 60 and 90 days and the participants treated with celodenina 4% had lower percentage of same relative to placebo at all time. These results suggest a low toxicity of the product, satisfactorily efficient control of relapses and indicate that this formulation can be used in Phase III clinical trials, dose and route of administration tested in the treatment of recurrent herpes labialis. / O herpes simples labial, uma das infecções virais mais prevalentes no mundo, é doença crônica, recidivante e incurável, persistindo durante toda a vida do hospedeiro, geralmente sob a forma latente. Frente à dificuldade de se encontrar uma terapia eficaz com a medicina tradicional, busca-se na medicina complementar novas possibilidades de tratamento para esta patologia. O estudo objetivou realizar ensaios toxicológicos, não clínico e clínicos fase I e II, com o antiviral celodenina, neoflavonoide sintetizado, a partir do extrato etanólico das cascas do caule de Coutarea hexandra (Jacq) K. Shum, via tópica. Os estudos dermais não clínicos avaliaram a irritação primária da pele efeito agudo (dose simples) e a irritação ocular aguda (dose simples) e em ambos os experimentos foram utilizados coelhos albinos neozelandeses, sadios, adultos, em número de 12, sendo 6 machos e 6 fêmeas (controle e tratado) para uma dose de 0,5 g do referido creme. A avaliação da irritação primária da pele demonstrou que o creme não é irritante para a pele dos coelhos testados no Laboratório de Ensaios Toxicológicos da Universidade Federal da Paraíba, já que nenhum deles apresentou nenhum grau de eritema e edema durante todo o experimento. Em relação à irritação ocular simples, o creme demonstrou efeito de baixa irritabilidade, porque apenas 33,3% coelhos apresentaram rubor em conjuntiva nas primeiras 24 horas após a aplicação da substância em estudo. Não foi identificada nenhuma alteração na íris e na córnea, em qualquer dos animais em todo o experimento. Para investigar a toxicidade clínica fase I, em seres humanos, da celodenina, foram selecionados 30 voluntários, de ambos os sexos, clinicamente saudáveis, com faixa etária compreendida entre 18 e 65 anos. Os participantes do estudo foram tratados diariamente, no turno da noite, por via dermal, com o creme por um período de 4 semanas e avaliados antes do início do estudo e após o seu término com exames hematológicos (hemograma completo), bioquímicos (glicemia, uréia, creatinina, colesterol total, AST, ALT, fosfatase alcalina), com o objetivo de detectar possíveis alterações decorrentes da utilização do creme nos mesmos, bem como, comparar os resultados antes e após o término do estudo. Não foram evidenciados valores alterados, tanto para as variáveis hematológicas como para as bioquímicas entre os tempos e os grupos. Ao longo do tratamento com o creme, foram observadas algumas reações adversas nos participantes: ressecamento local (7%), ardor (13%), formigamento (7%) e eritema (7%), mas o número de voluntários acometidos foi pequeno, e os sintomas e sinais relatados ocorreram na primeira semana do estudo, não necessitando de tratamento específico, desaparecendo espontaneamente. Os estudos clínicos fase II foi randomizado, duplo-cego, comparando a celodenina 4% com placebo em 33 pacientes portadores de herpes labial recorrente entre 18 e 65 anos, que utilizaram as referidas substâncias 3 vezes ao dia durante 15 dias. Os pacientes também foram avaliados antes e após o término do estudo com exames hematológicos e bioquímicos, os quais não demonstraram valores significativos entre os tempos. Poucos efeitos adversos foram relatados, o ardor (21%) e o ressecamento local (5,3%), ambos, de forma branda, durante os primeiros 30 minutos após a aplicação nos primeiros 5 dias. As recidivas herpéticas foram avaliadas durante 30, 60 e 90 dias e os participantes tratados com celodenina 4% apresentaram menor percentual das mesmas em relação ao placebo em todos os tempos. Estes resultados sugerem a baixa toxicidade do produto, eficiência satisfatória no controle das recidivas e indicam que esta formulação pode ser utilizada para testes clínicos fase III, na dose e via de administração testada no tratamento do herpes labial recorrente.