Orientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Evandro Watanabe / Banca: Milton Carlos Kuga / Resumo: Este estudo objetivou avaliar o pH, o teor de cloro disponível e a atividade antibacteriana de soluções irrigadoras endodônticas isoladas e associadas frente ao Enterococcus faecalis pelo teste de contato direto (in vitro) e em canais radiculares contaminados (ex vivo). A análise de pH foi realizada por meio de pHmetro digital e o teor de cloro pelo método da iodometria. Na metodologia de contato direto, uma suspensão de E. faecalis foi exposta aos seguintes irrigantes: GI- Solução de hipoclorito de sódio (NaOCl) a 2,5%; GII- NaOCl a 2,5% + ácido cítrico a 10% 7:3 (em volume); GIII- NaOCl a 2,5% + vinagre de maça 5:5 (em volume); GIV- Ácido cítrico a 10%; GV- Vinagre de maça. Os períodos de contato foram 30 segundos, 1, 3 e 10 minutos. O número de unidades formadoras de colônia por mililitro de solução (UFC/mL) foi determinado após diluições decimais seriadas e semeadura em placas de Tryptic Soy Agar (TSa). Como controle negativo foi utilizado solução fisiológica esterilizada. Em outro experimento, 110 dentes humanos unirradiculados tiveram seus canais radiculares contaminados com E. faecalis e incubados a 37°C por 21 dias. As substâncias analisadas foram: GI- NaOCl a 2,5%; GII- NaOCl a 2,5% + ácido cítrico a 10% 7:3 (em volume); GIII- NaOCl a 2,5% + vinagre de maça 5:5 (em volume); GIV- Vinagre de maçã; GV- Solução de clorexidina a 2%; GVIÁcido peracético a 1%; GVII- Solução salina fisiológica. Coletas microbiológicas foram realizadas imediatamente após preparo biomecânico e decorrido o período de sete dias. Após diluições decimais seriadas, alíquotas foram semeadas em placas de TSa e a contagem de UFC/mL determinada. Os resultados foram submetidos aos testes ANOVA, Tukey e Bonferroni, com nível de significância de 0,05. A associação do NaOCl a 2,5% com ácido cítrico ou vinagre de maça promoveu redução de pH e teor de... (Resumo completo, clicar acesso / Abstract: This study aimed to evaluate the pH, the available chlorine content and the antibacterial activity of endodontic irrigants and associations against Enterococcus faecalis by direct exposure test (in vitro) and within infected root canals (ex vivo). The pH was recorded using a digital pH meter and the chlorine content was measured by a standard iodine/thiosulfate titration method. In the direct exposure test, a bacterial suspension was mixed with the following irrigants: GI- 2,5% sodium hypochlorite solution (NaOCl); GII- 2,5% NaOCl + 10% citric acid 7:3 (at volume); GIII- 2,5% NaOCl + apple vinegar 5:5 (at volume); GIV- 10% citric acid; GV- apple vinegar. The contact times were 30 seconds, 1, 3 and 10 minutes. The number of colony-forming units per millilitre (UFC/mL) was calculated after serial 10-fold dilutions and culture in Tryptic Soy Agar (TSa) plates. Sterilized physiologic solution was used as negative control. In another experiment, the root canals of 110 human single-rooted teeth were infected with E. faecalis and incubated at 37°C for 21 days. The analysed substances were: GI- 2,5% NaOCl; GII- 2,5% NaOCl + 10% citric acid 7:3 (at volume); GIII- 2,5% NaOCl + apple vinegar 5:5 (at volume); GIV- apple vinegar; GV- 2% chlorhexidine solution; GVI- 1% peracetic acid; GVIIphysiologic saline solution. Microbiological samples were collected immediately after the biomechanical preparation and after 7 days. After serial 10-fold dilutions and culture in TSa plates, UFC/mL counts were determined. The results were submitted to ANOVA, Tukey and Bonferroni test, with a level of significance established at 0.05. The pH and the chlorine content reduced at associations of 2,5% NaOCl with citric acid or apple vinegar. In the direct exposure test, pure and associated NaOCl were capable of killing E. faecalis after 30 seconds. Citric acid did the same... (Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

Resumo: O tratamento endodôntico é uma etapa importante do protocolo de atendimento do reimplante dentário e tem uma relação direta com o aparecimento das reabsorções radiculares, maior causa de perda dos dentes reimplantados. O objetivo do trabalho foi analisar o processo de reparo no reimplante tardio de dente de macaco, utilizando o hidróxido de cálcio (Ca(OH)2) e o MTA como materiais obturadores de canal. Cinco macacos Cebus apella adultos tiveram seus incisivos laterais superiores e inferiores, direito e esquerdo, extraídos e deixados em meio ambiente por 60 minutos. Decorrido esse período, foi realizado o preparo biomecânico dos canais e os dentes foram divididos em dois grupos experimentais: grupo I - canal preenchido com pasta de Ca(OH)2 e grupo II - canal preenchido com MTA (Angelus®). Após o selamento da abertura coronária com ionômero de vidro, o ligamento periodontal foi removido e os dentes imersos em solução de fluoreto de sódio 2%, pH 5,5, por 10 minutos. Em seguida, os alvéolos foram irrigados com soro fisiológico e os dentes reimplantados e contidos por 30 dias com fio de aço e resina composta. A eutanásia dos animais foi realizada 60 dias após o reimplante. Os espécimes de ambos os grupos apresentaram reabsorção por substituição e pontos de anquilose ao longo dos três terços radiculares e ausência de reabsorção inflamatória. Não houve diferença significante entre os dois grupos com relação à reabsorção por substituição, porém a quantidade de anquilose foi significativamente maior no grupo do Ca(OH)2. Baseado nesses resultados conclui-se que o MTA pode ser uma opção clínica viável para a obturação de dentes tardiamente reimplantados que necessitam de um longo período de curativo com hidróxido de cálcio. / Abstract: The endodontic treatment is an important stage of the clinical protocol in cases of tooth replantation and has a direct relationship with the development of root resorption, which is the main cause of loss of replanted teeth. The purpose of this study was to evaluate the repair process in delayed replantation of monkey's teeth using calcium hydroxide (Ca(OH)2) and MTA as root canal filling materials. Five adult Cebus apella monkeys had their maxillary and mandibular right and left lateral incisors extracted and bench-dried for 60 minutes. Thereafter, the teeth were submitted to root canal biomechanical preparation and were randomly assigned to two experimental groups: Grupo I - root canal filling with a Ca(OH)2 paste; and Group II - root canal filling with MTA (Angelus®). After sealing of the coronal opening with glass ionomer cement, the periodontal ligament was removed and the teeth were immersed in 2% sodium fluoride solution, pH 5.5, for 10 minutes. Next, the sockets were irrigated with saline, the teeth were replanted and a retention made from stainless steel wire and composite resin was placed for 30 days. The animals were sacrificed 60 days after replantation. The specimens of both groups exhibited replacement resorption and areas of ankylosis throughout the three root thirds and absence of inflammatory resorption. There was no statistically significant difference between the groups with respect to replacement resorption. However, the incidence of ankylosis was statistically significant higher in the Ca(OH)2 group. Based on these results, it may be concluded that MTA may be a viable clinical option for obturation of teeth submitted to delayed replantation.

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Sandra Marcia Habitante / Banca: Mariella Vieira Pereira Leão / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Claudio Antonio Talge Carvalho / Resumo: Primeiramente foi avaliada no estudo a ação antimicrobiana da água ozonizada frente suspensão composta por Candida albicans e Enterococcus faecalis, verificando o tempo necessário de ozonização da água para eliminação destes microrganismos. Nas próximas etapas, foi avaliada a eficiência da água ozonizada como agente irrigante, durante o preparo biomecânico, tanto na eliminação de Candida albicans e Enterococcus faecalis, assim como na neutralização de LPS de Escherichia coli inoculados no interior de canais radiculares. Foram utilizados 48 dentes humanos unirradiculados, sendo que nos canais radiculares de 24 espécimes, foram inoculados 20 mL de uma suspensão contendo C. albicans e E. faecalis, e nos outros 24 espécimes, foram inoculados 10 mL LPS de E. coli, verificando-se a ação da água ozonizada como agente irrigante durante o preparo biomecânico. Foram realizadas coletas das amostras (imediata e após sete dias da instrumentação), e os dados foram submetidos à análise estatística. Como resultados, pode-se observar que a ação antimicrobiana da água ozonizada por dez minutos foi efetiva frente à suspensão microbiana. Como agente irrigante durante o preparo biomecânico, a água ozonizada apresentou efetividade frente à suspensão de C. albicans e E. faecalis inoculada no interior dos canais radiculares na coleta imediata, porém, na segunda coleta apresentou pouco efeito residual. Na verificação da neutralização de endotoxina, a ação da água ozonizada como agente irrigante não apresentou efetividade na neutralização de LPS de E. coli inoculada nos canais radiculares, sendo que quantidades restantes de LPS apresentaram efeitos biológicos. Como conclusão, a água ozonizada foi eficiente na redução de C. albicans e E. faecalis inoculada no interior dos canais radiculares, mas não apresentou efeito sobre LPS de E. coli. / Abstract: At first, the study was to evaluated the antimicrobial action of the ozonized water before the suspension composed of Candida albicans and Enterococcus faecalis, checking the necessary time of ozonization of the water in order to eliminate these microorganisms. In the next stages, the efficiency of ozonized water as an irrigant agent was evaluated, during the biomechanical preparation, as in the elimination of C. albicans and E. faecalis, as well as in the neutralization of Escherichia coli LPS inoculated into the root canals. Were used 48 single-rooted human teeth, seeing that in the root canals of 24 specimens, it were inoculated 20 mL of a suspension containing C. albicans and E. faecalis, and on the other 24 specimens, it were inoculated 10 mL of Escherichia coli LPS, having been checked the action of the ozonized water as an irrigant agent during the biomechanical preparation. Collections of samples (immediately and after seven days of the instrumentation) were carried out, and the data was submitted to statistical analysis. As a result, one could observe that the antimicrobial action of the ozonized water for ten minutes was effective before the microbial solution. As an irrigant agent during the biomechanical preparation, the ozonized water presented effectiveness before the suspension of C. albicans and E. faecalis inoculated into the root canals in the immediate collection, however, in the second collection it presented little residual effect. When verifying the endotoxin neutralization, the action of the ozonized water as an irrigant agent did not present effectiveness in the neutralization of E. coli LPS inoculated in the root canals, seeing that the remaining quantities of LPS presented biological effects. It was concluded that, the ozonized water was efficient in the reduction of C. albicans and E. faecalis inoculated inside the root canals, but it did not present any effect over E. coli LPS. / Doutor

Orientador: Idomeo Bonetti Filho / Coorientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Renato de Toledo Leonardo / Banca: Milton Carlos Kuga / Banca: Evandro Watanabe / Banca: Manoel Eduardo de Lima Machado / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade antibacteriana de soluções irrigadoras e do sistema Endox Plus no preparo de canais radiculares. Capítulo 1 - Para comparar a efetividade antibacteriana da solução de hipoclorito de sódio (NaOCl), MTAD BioPure e do Sistema Endox Plus durante o preparo biomecânico, foram utilizadas 70 raízes de dentes humanos unirradiculados contaminadas com cepa de E. faecalis (ATCC 29212) e incubadas por 21 dias. Os espécimes foram divididos em cinco grupos: GI- Sistema Endox Plus, GII- NaOCl 2.5 % /MTAD, GIII- NaOCl 2,5% /EDTA, GIV- solução salina (controle positivo), GV- Controle negativo (sem instrumentação/irrigação). Foi realizada a análise microbiológica das amostras por meio de diluições seriadas e a contagem das UFCs. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente por ANOVA e Tukey post-hoc (p < 0,05). Todos os espécimes mostraram crescimento bacteriano após o período de contaminação com similar contagem de UFC/mL log, sem diferença estatística entre os grupos. Após os procedimentos houve uma redução da quantidade de bactérias em todos os grupos, exceto no controle negativo. Não houve diferenças estatísticas significantes entre os GI e GIV. Os grupos II e III não mostraram crescimento bacteriano, mostrando diferença estatística com os outros grupos. Na coleta final, houve um aumento na contagem bacteriana nos grupos I, II, III e IV, sem diferença significativa entre eles. Porém, houve diferença na proliferação bacteriana quando comparados com a coleta pós-preparo. O sistema Endox Plus demonstrou a menor efetividade antibacteriana quando comparado às soluções de NaOCl 2,5% /MTAD e NaOCl 2,5% /EDTA e, todos os procedimentos avaliados permitiram a proliferação bacteriana após 7 dias, mostrando a permanência... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study is to evaluate the antimicrobial effectiveness of irrigating solutions and the Endox Plus system in the treatment of the root canals. Chapter I- In order to compare the antimicrobial effectiveness of sodium hypochlorite solution (NaOCl), MTAD Biopure and Endox Plus system during chemomechanical preparation, were used 70 single-rooted human teeth, which were contaminated with the strain of E. faecalis (ATCC 29212) and incubated for 21 days. The specimens were divided into five groups: GI- Endox Plus system, GII- NaOCl 2.5% /MTAD, GIII- NaOCl 2.5% /EDTA, GIV- saline solution (positive control), GV- negative control (without instrumentation/irrigation). Microbiological analysis of the samples consisted in evaluation of the CFUs. The data obtained were statistically analyzed by ANOVA tests and Tukey post-hoc (p<0.05). The specimens showed bacterial growth after the initial incubation period with similar counting of CFU/mL log, with no statistical difference among the groups. After the procedures there was a decrease of the amount of bacteria in all groups, except in the negative control. There were no statistically differences between the GI and GIV. The GII and GIII didn't show bacterial growth, showing statistical differences with the other groups. In the final sample, bacterial counts increased in groups I, II, III, IV, with no statistically significant differences among the groups, but there was a difference when compared to the post-instrumentation sample. The Endox Plus system presented the lowest antibacterial effectiveness when compared to the solutions of NaOCl 2.5% /MTAD y NaOCl 2.5% /EDTA and all the evaluated procedures allowed the recovery of bacteria 7 days after treatment, demonstrating persistence of infection in the root canal system. Chapter II- The antibacterial... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O propósito desse trabalho foi verificar a retenção de pinos fibro resinosos cimentados em canais radiculares alargados simulando raízes extensamente comprometidas, fabricados por duas técnicas usadas para diminuir sua desadaptação; comparando-as ao pino fixado somente com cimento. Foram utilizados vinte e quatro raízes de dentes humanos unirradiculares, padronizadas com 15.0 mm de comprimento e 5.0 0.3 mm de diâmetro. As raízes foram incluídas em resina acrílica e divididas em grupos de acordo com a técnica usada: grupo I - pino DC White Post no2 cimentado com sistema adesivo quimicamente ativado e com cimento resinoso dual; grupo II mesmo pino reanatomizado com resina composta para copiar a anatomia do canal radicular, cimentado da mesma forma; e grupo III mesmo pino associado a três pinos acessórios, cimentados do mesmo modo. O canal radicular teve seu diâmetro padronizado pela broca no2 para o pino DC em uma profundidade de 12.0 mm e alargado com uma broca tronco cônica em uma profundidade de 10.0 mm. As oito raízes de cada grupo foram seccionadas transversalmente em três discos de 3.0 mm, a partir da cervical para a execução de um ensaio de extrusão, descartando-se os últimos 2.0 mm, que serviram somente para centralizar o pino. Os valores de retenção foram registrados e tratados estatisticamente por ANOVA e pelo teste SNK (p<0.05). Diferenças significativas foram observadas entre três porções radiculares investigadas em todos os grupos, com os valores de retenção diminuindo da cervical para apical. A retenção na porção apical do grupo com pinos customizado com resina foi estatisticamente maior que na mesma região dos demais grupos. Nenhuma diferença foi encontrada entre o grupo com pinos acessórios e o grupo somente com pino e cimento nessa parte da raiz. Nenhuma diferença foi observada comparando as porções cervical e média dos diferentes grupos. Os tipos de falha após o teste de extrusão foram observados em microscópio eletrônico de varredura com aumento de 200, 600 e 1000 vezes. Elas ocorreram exclusivamente entre o pino e o cimento ou a resina composta. A camada de adesão (camada híbrida) foi mais facilmente observada nas porções cervical e média de todos os grupos. Isso sugere que a retenção nas porções apicais da raiz é predominantemente friccional. Uma vez que pinos acessórios somente alcançam até a porção média do canal radicular, a retenção do pino não é aumentada com essa técnica. / The aim of this study was to evaluate the retention of fiber posts cemented in enlarged root canals simulating compromised roots, fabricated with to two techniques used to minimize your desadptation; comparing it to posts fixed only with ciment. Twenty four single root human teeth standardized in 15.0mm length and 5.0 0.3mm diameter were used. The roots were imbibed in acrylic resin and divided in groups according to the technique used: group I - DC White Post no2 cemented with quimically cured adhesive system and a dual cured resin cement; group II the same post customized with composite resin to copy the root canal anatomy, cemented the same way; and group III the same post associated with three accessory posts, cemented the same way. The root canals had their diameter standardized using a no2 DC post burs 12.0 mm deep and enlarged with a chamfer bur 10.0 mm deep. The eight roots of each group were transversely sectioned in three 3.0 mm diameter discs, starting from cervical to make the push out test, discarding the last 2.0mm used only to centralize the post. The retention values were registered and statistically treated with ANOVA and SNK tests (p<0.05). Significant differences were observed when comparing the three root portions of all groups investigated, with retention values decreasing from cervical to apical. The retention in apical portion of customized posts was statistically greater than the same parts of other groups. No differences were found between the group with accessory posts and only cemented posts in this root portion. No differences was observed comparing cervical e middle portions of different groups. The failure types after the push out test were observed in MEV with 200, 600 e 1000x magnification. They occurred exclusively between the post and the resin cement or the composite resin. A hybrid layer was more easily observed in the cervical and middle portions of the roots in all groups. This suggests that the retention in the apical portions of roots is mostly frictional. Since accessory posts only eventually can reach the middle portion of root canal the post retention is not increased with this technique.

Introdução: A evolução dos instrumentos de NiTi pode ser dividida em gerações de acordo com algumas modificações tais como: tratamento térmico da liga, secção transversal e movimento utilizado para o preparo do canal, que pode ser movimento rotatório contínuo ou movimento oscilatório assimétrico. Essas mudanças tem como objetivo prover maior flexibilidade aos instrumentos, permitindo uma melhor modelagem do canal, com menor desvio e menor risco de perfurações. Outro aspecto relevante é a maior resistência à fadiga cíclica, das ligas com tratamento térmico, colaborando para uma maior resistência à fratura do instrumento. Objetivos: Este estudo comparou a fadiga cíclica, o transporte do canal , a capacidade de centralização e o volume do canal pós preparo, produzidos pelos sistemas TF Adaptive e Navigator EVO, quando utilizados em rotação contínua ou no movimento Adaptive. Métodos: Quarenta raízes mésio-vestibulares de molares superiores foram analisadas através de micro-CT antes e depois do preparo do canal radicular com os dois sistemas e dois movimentos (Adaptive e Rotação Contínua). As amostras foram divididas em quatro grupos: TFA – instrumentos TF Adaptive utilizados no movimento Adaptive; TFC –instrumentos TF Adaptive utilizados em rotação contínua; NA – instrumentos Navigator EVO utilizados no movimento Adaptive; e NC – instrumentos Navigator EVO utilizados em rotação contínua. Adaptive; e NC – instrumentos Navigator EVO utilizados em rotação contínua. Os canais radiculares foram preparados até instrumentos 35.04. O transporte apical, a capacidade de centralização e o volume de preparo foram analisados utilizando-se micro-CT em três níveis: 3, 6 e 9mm do ápice.O teste de fadiga cíclica foi realizado utilizando um equipamento apropriado, onde, dez instrumentos de cada marca foram utilizados em um contraângulo redutor 6:1 e um motor elétrico com controle de torque, com programas prédefinidos ‘‘custom mode'' e ‘‘TF Adaptive'' para ativar os instrumentos 25.06 e 35.04.Os resultados foram analisados com os testes Kruskal-Wallis eDunn para se verificar o transporte do canal, a capacidade de centralização e o volume do canal. O teste Student-T foi usado para avaliar a fadiga cíclica (P = 0,05). Conclusões: Ambos sistemas podem ser usados no movimento Adaptive ou em rotação contínua. Porém, a resistência à fratura dos instrumentos foi maior quando utilizados em rotação contínua. Pouco transporte de canal ocorreu, quando os canais mésio-vestibulares de molares superiores foram preparados até instrumentos 35.04. / Introduction: The evolution of NiTi instruments can be divided in generations, according to changes like in the NiTi alloy, heat treatment, cross-section format, and in the movement used for root preparation that goes form continuous rotation to asymmetric oscillation. These changes aim to provide greater flexibility to the instruments, allowing a better shaping, with less transportation and risk of perforation. Other aspect is the increased fracture resistance of the alloys with heat treatment, which is a big concern about NiTi instruments. Aim: This study compared the cyclic fatigue and the canal transportation promotedby TF Adaptive and Navigator EVO systems when used with two different motions. Methods: Forty mesiobuccal roots of maxillary molars were scanned using micro-CT imaging before and after root canal preparation with the two instrument systems two motions (adaptive and continuous rotation). Samples were divided into four groups: TFA – TF Adaptive instruments under adaptive motion; TFC - TF Adaptive instruments under continuous motion; NA - Navigator instruments under adaptive motion; and NC – Navigator instruments under continuous motion. Root canals were prepared until 35.04 instruments. Apical transportation, centering ability and volume were analyzed using micro- CT at three levels: 3, 6 and 9 mm from the apex. The cyclic fatigue tests were performed using a custom-made device. Ten instruments of each brand were activated by using a 6:1 reduction handpiece powered by a torque-controlled motor using the preset programs ‘‘custom mode'' and ‘‘TF Adaptive'' to activate25.06 and 35.04 instruments. Data were analyzed with Kruskal-Wallis and Dunn tests were used to assess canal transportation, centering ability and canal volume. Student-T test was used to evaluate cyclic fatigue (P = .05). Conclusions: Both systems can be used under adaptive or continuous rotation. However; the lifespan of the instruments was higher when used under continuous rotation. Little canal transportation occurred when mesiobuccal root canals from maxillary molars were prepared until 35.04instruments.

Orientador: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Resumo: Cimentos endodônticos devem apresentar propriedades físico-químicas e biológicas adequadas. Publicação 1- Avaliação da citotoxicidade, bioatividade celular, potencial bioativo e atividade antimicrobiana dos cimentos GuttaFlow bioseal (GFB) e TotalFill BC (TF), comparados ao AH Plus (AHP). A citotoxicidade e bioatividade celular (Saos-2) foram avaliadas por meio dos ensaios de metil tetrazólio (MTT), vermelho neutro (VN), atividade da fosfatase alcalina (ALP) e vermelho de alizarina (ARS). O potencial bioativo foi avaliado em microscopia eletrônica de varredura (MEV). Para avaliação da eficácia antimicrobiana sobre Enterococcus faecalis e/ou Candida albicans foram realizados os testes de contato direto sobre células planctônicas ou biofilme. Dados da viabilidade celular e atividade de ALP foram submetidos aos testes two-way ANOVA e Bonferroni post-test. ANOVA e Tukey foram usados para análise do ARS e da atividade antimicrobiana (α=0,05). GFB e TF não mostraram efeitos citotóxicos. GFB mostrou maior atividade de ALP aos 7 dias e foi efetivo sobre biofilme de C. albicans e dual-espécies. TF induziu maior deposição de nódulos mineralizados no ensaio ARS, mostrou maior potencial bioativo em MEV e maior atividade antimicrobiana sobre células planctônicas e biofilme de E. faecalis. Publicação 2- Avaliação dos cimentos NeoMTA Plus (NMTAP) e MTA Fillapex (MTAF) em comparação ao AHP. Foram avaliadas as propriedades de alteração volumétrica (AV), citotoxicidade, bioatividade celular, p... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Endodontic sealers have to show adequate physico-chemical and biological properties. Publication 1- aims to evaluate the cytotoxicity, cell bioactivity, bioactive potential and antimicrobial activity of GuttaFlow bioseal (GFB) and TotalFill BC (TF), compared to AH Plus sealer (AHP). Cytotoxicity and cell bioactivity (Saos-2) were evaluated by methyl tetrazolium (MTT), neutral red (VN), alkaline phosphatase (ALP) and alizarin red (ARS) assays. The bioactive potential was evaluated by scanning electron microscopy (SEM). To evaluate the antimicrobial and/or antibiofilm efficacy against Enterococcus faecalis and Candida albicans were realized direct contact test on planktonic cells or biofilm. Cell viability data and ALP activity were submitted to two-way ANOVA and Bonferroni post-test. ANOVA and Tukey were used for ARS analysis (α=0.05). GFB and TF showed no cytotoxic effects. GFB showed higher ALP activity at 7 days and was effective against biofilms of C. albicans and dual-species. TF induced higher deposition of mineralized nodules with ARS assay and higher bioactive potential in SEM and higher antimicrobial activity on planktonic cells and biofilm of E. faecalis. Publication 2- aims to evaluate the MTA Fillapex (MTAF) and NeoMTA Plus (NMTAP) sealers in comparison to the AHP. The physicochemical properties, volumetric alteration (VA), cytotoxicity, cell bioactivity, bioactive potential and antimicrobial activity were evaluated. Setting time (ST) and flow were evaluated accord... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Avaliou-se a citotoxicidade do hipoclorito de sódio a 1%, do digluconato de clorexidina a 2% e do Endoquil e seus efeitos na liberação de citocinas e de óxido nítrico em culturas de macrófagos peritoniais murinos. As substâncias sofreram diluições de 1.000 e 10.000 vezes: Grupo Controle, meio de cultura meio McCoy`s 5A® modificado e apirogênico; Grupo Hipoclorito de sódio a 1% (diluições A 0,001 e B 0,0001); Grupo Digluconato de Clorexidina a 2% (diluições A 0,002 e B 0,0002); Grupo Endoquil a 10% (diluições A 0,01 e B 0,001). Foram utilizados 70 camundongos da linhagem C57Bl/6j fêmeas. Após anestesia e sacrifício realizou-se a coleta do exudato celular por meio da injeção e aspiração de meio McCoy`s 5A® modificado na cavidade abdominal dos animais. O ensaio da atividade citotóxica foi realizado pelo Método do MTT nos períodos: curto prazo (4 e 12 horas); médio prazo (24, 48 e 72 horas) e longo prazo (5 e 7 dias). A absorbância dos poços foi lida em Leitora de Elisa a 550 nm. Os valores obtidos foram comparados com os valores do padrão, calculando-se assim a viabilidade e o número de células presentes de cada grupo avaliado em função do tempo. A quantificação in vitro das citocinas IL-1, IL-1, IL-6 e TNF- foi realizada por meio de imunoensaio do tipo Elisa, utilizando-se kit Quantikine® M murine. A análise da síntese de óxido nítrico foi conduzida segundo a metodologia de Griess, na qual o óxido nítrico é convertido a nitrito, sendo este último detectado colorimetricamente. Cada grupo experimental foi analisado em dois tempos de observação (24 e 48h), com estímulo de LPS ou não, em duplicatas. Os dados foram submetidos ao teste estatístico de análise de variância e, quando necessário, complementados pelo teste de Tukey. Após 12 horas, o grupo tratado com clorexidina na diluição A apresentou diminuição significativa da viabilidade celular em relação aos grupos tratados com hipoclorito de sódio e Endoquil; este declínio estendeu-se para 24, 48 e 72 horas quando provocou morte celular. Em 5 e 7 dias, ocorreu redução da viabilidade em todos os grupos, com diferença significante para o grupo da clorexidina. Em relação às citocinas e óxido nítrico: o hipoclorito de sódio e a clorexidina induziram a produção e exacerbaram o efeito do LPS sobre as IL-1 e IL-1 , respectivamente, enquanto que o Endoquil diminuiu estes efeitos; a clorexidina inibiu o efeito estimulatório do LPS, diminuindo a síntese de IL- 6; juntamente com o Endoquil, a clorexidina diminuiu a síntese de TNF- , enquanto que o hipoclorito aumentou esta produção em 24 horas; mesmo estimulados com LPS, o hipoclorito e a clorexidina comprometeram a síntese de óxido nítrico, em 24horas e, após 48 horas, apenas a clorexidina manteve a inibição. / The cytotoxicity of 1% sodium hypochlorite, of 2% chlorhexidine digluconate and of Endoquil and its effects on cytokine release and nitric oxide were evaluated in culture of murine peritoneal macrophages. Substances were diluted 1,000 and 10,000 times: Control Group with culture medium using McCoy 5A`s® modified and apirogenic, Group Sodium Hypochlorite 1% (dilutions A - 0.001 and B - 0.0001); Group Chlorhexidine Digluconate 2% (dilutions A - 0.002 and B - 0.0002); Group Endoquil 10% (dilutions A - 0.01 and B - 0.001).70 female mice of strain C57BL/6J were used. After anesthesia and sacrifice, middle McCoy`s® 5A modified was injected in the abdominal cavity of animals and then the cellular exudate was aspirated. The cytotoxicity assay was performed by MTT method in the periods: short term (4 and 12 hours), medium term (24, 48 and 72 hours) and long term (5 to 7 days). The absorbance of the wells was read on ELISA reader at 550 nm. The values were compared with standard values, observing the viability and cell number in each group as a function of time. The in vitro quantification of cytokines IL-1, IL-1, IL-6 and TNF- was performed using an ELISA-type immunoassay, using the kit Quantikine® M Murine. Analysis of nitric oxide synthesis was conducted according to the Griess assay, in which nitric oxide is converted to nitrite, the latter being detected colorimetrically. Each experimental group was analyzed at two time points (24 and 48h) with stimulation of LPS or not, in duplicates. The data were submitted to statistical analysis of variance and, where necessary, complemented by Tukey test. After 12 hours, the group treated with chlorhexidine with dilution A significantly decreased cell viability when compared to the groups treated with sodium hypochlorite and Endoquil. This decline has extended to 24, 48 and 72 hours, when cell death occurred. After 5 and 7 days occured the reduction of viability in all groups, with significant differences for the chlorhexidine group. In relation to cytokines and nitric oxide: sodium hypochlorite and chlorhexidine induced the production and exacerbated the effect of LPS on IL-1 and IL-1 , respectively, while Endoquil decreased these effects;chlorhexidine inhibited the stimulatory effect of LPS, reducing the synthesis of IL- 6; just as Endoquil chlorhexidine decreased the synthesis of TNF-, but hypochlorite increased production in 24 hours; even stimulated with LPS, sodium hypochlorite and chlorhexidine undertook the synthesis of nitric oxide in 24 hours and, after 48 hours only chlorhexidine kept inhibition.

A proposta deste estudo foi avaliar a infiltração bacteriana em dentes obturados pela técnica de condensação lateral, cone único modificada e termoplastificada por onda contínua de condensação. Quarenta e nove raízes disto-vestibulares de molares superiores padronizados no limite de trabalho de 9 mm foram instrumentados com sistema ProTaper até lima F2, e assim divididos em 3 grupos (n=15) de acordo com a técnica de obturação: G1 cone único modificada, G2 condensação lateral, e G3 - termoplastificada por onda contínua de condensação e injeção de guta percha. O grupo controle positivo foram 2 espécimes sem obturação, e o grupo controle negativo foram 2 espécimes obturados pela técnica de condensação lateral e abertura coronária selada com cianoacrilato. As raízes foram impermeabilizadas deixando 2 mm apicais livre e montadas no aparato de duplo compartimento. Após esterilização com óxido de etileno, 3 ml de TSB estéril foi inoculado no compartimento inferior, e 400 l de caldo contendo Enterococcus faecalis no compartimento superior. A nutrição bacteriana foi realizada a cada 48 h através da retirada de 200 l de caldo bacteriano e adição de 200 l de TSB. O TSB contido no compartimento inferior foi checado a cada 48 h para verificar presença de turvamento num período experimental de 30 dias. O grupo controle positivo infiltrou em 24 h, e nenhum controle negativo apresentou infiltração em 30 dias. No tempo experimental, o grupo do cone único modificado apresentou 73,3% das amostras infiltradas, a condensação lateral apresentou 66,6%, e a termoplastificada 53,3%, não havendo diferença significante entre os grupos aplicando-se os testes do Quiquadrado e Kruskal-Wallis (p>0.05). Pode-se concluir que a técnica de cone único modificada apresenta capacidade de selamento semelhante à técnica de condensação lateral e termoplastificada por onda contínua. / The aim of this study was to evaluate bacterial leakage in root canals obturated with lateral condensation, modified single-cone and continuous wave of condensation techniques. Forty-nine distobuccal root canals of upper molars were standardized with 9 mm of working length. Then the canals were shaped by ProTaper Rotary system up to F2, and divided in three groups (n=15) according to obturation technique: G1 modified single-cone, G2 lateral condensation and G3 continuous wave of condensation. The positive control was two no obturated root canals, and positive control two root canals obturated with lateral condensation technique and coronal opening sealed with cyanoacrylate. The roots external surfaces were sealed, except for the apical 2 mm around the apical foramen, and the bacterial leakage model of two chambers was used. After sterilization by ethylene oxide gas, 3 ml of TSB was poured into the lower chamber, and 400 l of soy broth containing Enterococcus faecalis was inoculated into the upper chamber. Bacterial nutrition was performed each through changing of 200 l of bacterial soy broth to 200 l of TSB. The TSB placed in the lower chamber was checked each 48 h to verify turbidity on the experimental period of 30 days. The positive control leaked within 24 h, and the negative control no leaked on 30 days. In the experimental period, modified single-cone technique showed leakage of 73,3% samples, lateral condensation showed 66,6%, and wave continuous of condensation 53,3%. There were no significant difference between the groups according to Chi-square and Kruskal-Wallis tests (p>0.05). It can be concluded that modified single-cone technique shows sealing ability semelhante to lateral condensation and continuous wave of condensation techniques.

O intuito do presente trabalho foi avaliar in vitro a desinfecção de canais radiculares de pré-molares inferiores humanos, variando a técnica de preparo e os regimes de irrigação utilizados. Para isso, 85 espécimes foram padronizados em comprimento e diâmetro apical e, após o devido preparo, receberam contaminação com Enterococcus faecalis e Candida albicans por 28 dias. Os canais foram divididos em 8 grupos: G1 - instrumentação manual associada à irrigação com solução fisiológica; G2 - instrumentação manual associada à irrigação com NaOCl à 1,0%; G3 - instrumentação manual associada à irrigação com NaOCl à 1,0% e AC à 15%; G4 - instrumentação manual associada à irrigação com NaOCl à 5,25%; G5 - instrumentação rotatória associada à irrigação com solução fisiológica; G6 - instrumentação rotatória associada à irrigação com NaOCl à 1,0%; G7 - instrumentação rotatória associada à irrigação com NaOCl à 1,0% e AC à 15%; G8 - instrumentação rotatória associada à irrigação com NaOCl à 5,25%. O grupo controle negativo foi composto por 5 dentes preenchidos com meio de cultura esterilizado. Todos os canais dos grupos experimentais foram preparados até instrumentos com diâmetro final de 0,50mm. Coletas microbianas foram realizada antes e após o PQC, com auxílio de pontas de papel esterilizadas. Raspas de dentina foram coletadas após o PQC com o intuito de verificar a ocorrência de MOs no interior dos túbulos dentinários. Não houve diferença estatística entre as técnicas de instrumentação, quanto à diminuição microbiana no interior dos canais. Quanto aos regimes de irrigação, o soro fisiológico produziu os piores resultados, seguido pelo NaOCl à 1,0%. Já quando acompanhado pelo AC, a desinfecção alcançada não demonstrou diferença estatística quanto aos grupos irrigados com NaOCl à 5,25%. / The purpose of this study was to evaluate the in vitro disinfection achieved in root canals of human mandibular premolars, varying the preparation technique and irrigation regimens. For this, 85 specimens were standardized in length and apical diameter, and after proper preparation were contaminated with Enterococcus faecalis and Candida albicans for 28 days. After this period, the canals were divided into eight experimental groups as follows: G1 - hand instrumentation with irrigation with sterile saline, G2 - hand instrumentation with irrigation with NaOCl to 1.0%, G3 - Manual instrumentation with irrigation with NaOCl to 1.0% and citric acid to 15%, G4 - instrumentation associated with irrigation with NaOCl at 5.25%; G5 - rotary instrumentation associated with irrigation with sterile saline and G6 - rotary instrumentation associated with irrigation with NaOCl to 1.0%; G7 - rotary instrumentation with irrigation with NaOCl to 1.0% and citric acid to 15%; G8 - rotary instrumentation with irrigation with NaOCl at 5.25%. Negative control group was composed of 5 teeth had their canals filled with sterile culture medium. All root canals of the specimens of experimental groups were prepared by instruments with a diameter equivalent to the tip end of 0.50 mm. Microbial samplings were performed before and after the PQC with the aid of sterilized paper points. Dentine chips were collected after the PQC in order to verify the occurrence of microorganisms inside the dentinal tubules. The results showed no statistical difference between the techniques of instrumentation, on the microbial reduction. As for systems of irrigation, saline produced the worst results followed by NaOCl 1.0%. When followed by citric acid, disinfection achieved no difference for the groups irrigated with NaOCl at 5.25%