INTRODUÇÃO: Quimiorradioterapia (QRT) concomitante adjuvante aumenta a sobrevida livre de doença (SLD) em pacientes portadores de carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço (CECCP) de alto risco operados com intenção curativa, porém está associada a toxicidade não desprezível e seu impacto na sobrevida global (SG) é incerto. ERCC1 (Excision Repair Cross Complementing Group 1) é uma proteína com função crítica no reparo de DNA por excisão de nucleotídeos (NER) e está envolvido na resistência à quimio- e radioterapia. Neste trabalho tivemos como objetivos determinar a expressão da proteína ERCC1, a expressão do RNA mensageiro (mRNA) de ERCC1 e a ocorrência do polimorfismo de nucleotídeo único T19007C de ERCC1 em pacientes portadores de CECCP de alto risco, operados e tratados com QRT adjuvante, bem como o valor prognóstico destes marcadores. MÉTODOS: Trata-se de um estudo retrospectivo em pacientes portadores de CEC de cavidade oral, orofaringe, hipofaringe ou laringe, operados com intenção curativa e portadores de doença de risco alto ou intermediário. Pacientes elegíveis haviam sido tratados com QRT adjuvante: 60-70 Gy e cisplatina concomitante (100 mg/m2, dias 1, 22 e 43), não apresentavam metástases a distância e nem sinais de recidiva após cirurgia. A expressão da proteína ERCC1 foi avaliada por imunohistoquímica, através de um escore H semiquantitativo, obtido pelo produto da intensidade da coloração nuclear (0-3) pelo escore proporcional atribuído à porcentagem estimada de núcleos corados (0;0,1;0,5;1). O método da transcrição reversa e reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real quantitativo foi utilizado para determinação da expressão do mRNA de ERCC1 em tecido de tumor primário, normalizada em relação à expressão da fração 18S do RNA ribossomal. Genotipagem de ERCC1 (códon 118) foi realizada por PCR - polimorfismo do tamanho do fragmento de restrição a partir de DNA genômico extraído de linfonodos normais destes pacientes, após digestão com BsrDI. RESULTADOS: 69 pacientes com idade mediana de 56a, sendo 81% homens, foram estudados. Em relação à neoplasia, os sítios primários observados foram: cavidade oral (41%), laringe (32%), hipofaringe (16%) e orofaringe (12%), com estadio III 14% e estadio IV 86%, sendo pT3-pT4 78% e pN2-pN3 58%. Quarenta e três pacientes apresentaram-se com pelo menos dois linfonodos positivos, 27 com extravazamento extracapsular da metástase linfonodal e 18 com margens positivas. Achados de alto risco foram detectados em 40 pacientes (58%). No seguimento mediano de 47 meses, observou-se 11 recidivas loco-regionais, sete recidivas a distância, 10 casos com segundo tumor primário (sendo quatro com primário em pulmão e quatro em esôfago) e 30 óbitos (22 pela doença). A taxa de SG em 5 anos foi 40% e a taxa de SLD em 5 anos foi 31%. Escore H superior a 1,5 foi encontrado em 32 pacientes (54%), os quais apresentaram melhor taxa de sobrevida global em 5 anos (50% versus 18%, HR 0,43, 95%CI 0,20-0,90, p=0,026). Quinze pacientes (33%), dos 45 analisados, apresentaram elevada expressão do mRNA de ERCC1 (> 3,1) e estes pacientes tiveram melhor taxa de sobrevida global em 5 anos em comparação com aqueles com baixa expressão (86% versus 31%, HR 0,26, 95%CI 0,14-1,01, p=0,052). A distribuição dos genótipos de ERCC1 no códon 118 em 49 pacientes foi 39% C/T, 37% C/C, e 24% T/T. Não foi encontrada associação significativa entre idade, sexo, estadiamento e achados anatomopatológicos de risco, e os polimorfismos genéticos no códon 118 de ERCC1 ou a expressão do mRNA de ERCC1. Não houve diferença entre os genótipos C/C, C/T e T/T seja em termos taxa de sobrevida global em 5 anos (45%, 46%, 46%; p=0,808), seja em termos de taxa de sobrevida livre de doença em 5 anos (31%, 34%, 20%, p=0,770, respectivamente). O escore H (> 1,5 versus 1,5; HR ajustado 0,20, 95%CI 0,07-0,57, p=0,003) e a expressão normalizada do mRNA de ERCC1 (> 3,1 versus 3,1; HR ajustado 0,12, 95%CI 0,03-0,59, p=0,009), permaneceram significantes do ponto de vista estatístico, como fatores prognósticos na análise multivariada. CONCLUSÕES: Alta expressão imunohistoquímica da proteína ERCC1 e alta expressão do mRNA de ERCC1 conferem melhor prognóstico em pacientes portadores de CECCP operados de alto risco tratados com QRT adjuvante baseada em cisplatina. O polimorfismo genético T19007C de ERCC1 não apresentou valor prognóstico nestes pacientes. / BACKGROUND: Adjuvant concurrent chemoradiation (CRT) improves diseasefree survival (DFS) in patients diagnosed with head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) presenting with high-risk features treated with surgery with curative intent, but treatment-related toxicity is not negligible and its impact on overall survival (OS) is uncertain. ERCC1 (Excision Repair Cross Complementing Group 1) is a protein with a critical role in the nucleotide excision repair (NER) pathway, associated with resistance to chemo- and radiation therapy. We aimed here to study ERCC1 protein expression, ERCC1 messenger RNA (mRNA) expression and the single nucleotide polymorphism T19007C of ERCC1 as prognostic markers in HNSCC patients presenting with high-risk features treated with surgery and adjuvant CRT. METHODS: It is a retrospective study in patients with oral cavity, oropharynx, hypopharynx or larynx SCC submitted to radical surgery with curative intent and presenting with pathologic features of high- or intermediate-risk. Eligible patients were treated with adjuvant CRT: 60-70 Gy and concurrent cisplatin (100 mg/m2, days 1, 22 and 43), with no distant metastasis and no relapsed disease after surgery. ERCC1 protein expression was evaluated by immunohistochemistry, using a semi-quantitative H-score, calculated by multiplying the nuclear staining intensity (0-3) by the proportion score attributed to the percentage of positive tumor nuclei (0;0,1;0,5;1). Quantitative real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction (PCR) assay was performed to determine ERCC1 mRNA expression in primary tumors tissue specimens. The ERCC1 mRNA expression was normalized using 18S fraction of ribosomal RNA expression as internal reference. ERCC1 (codon 118) genotypes were detected using PCR restriction fragment length polymorphism method carried out in genomic DNA extracted from normal lymph nodes. The PCR products were digested with BsrDI. RESULTS: 69 patients (median age 56 y, 81% male) were studied. Regarding tumor characteristics, primary sites were: oral cavity 41%, larynx 32%, hypopharynx 16%, oropharynx 12%, stage III 14%, stage IV 86%, pT3- pT4 78% and pN2-pN3 58%. Forty-three patients presented with two or more positive lymph nodes, 27 with extracapsular spread of nodal disease and 18 with positive margins. High-risk pathologic features were detected in 40 patients (58%). During the median follow-up of 47 months, we observed 11 locoregional relapses, seven distant relapses, 10 patients were diagnosed with secondary primary tumors (four in lungs and four in esophagus) and 30 deaths (22 disease-related). The 5-year overall survival rate was 40% and the 5-year disease-free survival rate was 31%. High H-score (> 1.5) was seen in 32 patients (54%), who presented better 5-year overall survival rate in comparison to those with lower H-scores (50% versus 18%, HR 0.43, 95%CI 0.20-0.90, p=0.026). Fifteen patients (out of 45, 33%) whose tumors presented normalized ERCC1 expression > 3.1 were classified as having high ERCC1 mRNA expression, and these patients presented better 5-year overall survival rate in comparison to those with lower ERCC1 mRNA expression (86% versus 30%, HR 0.26, 95%CI 0.14-1.01, p=0.052). Genotype distribution at ERCC1 codon 118 in 49 patients was 39% C/T, 37% C/C, and 24% T/T. No significant association was found between age, gender, stage, grading and pathological risk features and ERCC1 codon 118 genotypes or ERCC1 mRNA expression. No difference was detected among C/C, C/T and T/T genotypes, either in terms of 5-year overall survival rates (45%, 46%, 46%; p=0.808), or 5-year diseasefree survival rate (31%, 34%, 20%, p=0.770, respectively). H-score (> 1.5 versus 1.5; adjusted HR 0.20, 95%CI 0.07-0.57, p=0.003) and ERCC1 mRNA normalized expression (> 3.1 versus 3.1; adjusted HR 0.12, 95%CI 0.03-0.59, p=0.009), remained significant as favorable prognostic factors after adjusting for prognostic factors in a multivariate analysis. CONCLUSIONS: High immunohistochemical expression of ERCC1 protein and high ERCC1 mRNA expression, but not the T19007 single nucleotide polymorphism, were associated with better prognosis in HNSCC patients submitted to surgery and adjuvant cisplatin-based chemoradiation.

INTRODUÇÃO. A proteína Fator Inibitório da Migração de Macrófagos (MIF) é frequentemente observada com expressão elevada em tecidos tumorais quando comparados aos tecidos equivalentes normais e estudos têm sugerido seu papel como marcador prognóstico de neoplasias malignas, incluindo carcinomas hepatocelular, de ovário, de esôfago e também de cabeça e pescoço. Adicionalmente, alguns de seus mecanismos de ação já demonstrados, como a indução da proliferação e migração celular permitem implicar essa expressão diferencial no desenvolvimento tumoral e, consequentemente, no prognóstico das neoplasias malignas. OBJETIVO. Esse estudo objetivou avaliar o papel diagnóstico e prognóstico da proteína MIF em carcinoma epidermóide da cavidade bucal. METODOLOGIA. O estudo foi composto por 50 pacientes com carcinoma epidermoide da cavidade bucal coletados prospectivamente e 57 casos retrospectivos admitidos nos Serviços de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Hospital Heliópolis e da Faculdade de Medicina da Fundação ABC. As análises foram feitas por meio de imunoistoquímica dos tecidos tumorais e margens epiteliais normais e de ELISA das amostras de soro e saliva, coletadas pré e pós-tratamento cirúrgico, dos pacientes participantes. Os resultados foram correlacionados aos achados clínicos e histopatológicos. RESULTADOS. A expressão da proteína MIF e seu receptor CD74 mostrou-se elevada em tecido tumoral quando comparado ao tecido epitelial livre de neoplasia (p < 0,0001). Associação entre a alta expressão da MIF no tumor e infiltração vascular linfática foi observada (p=0,005) e alta expressão da MIF no epitélio livre de tumor apresentou correlação marginalmente significativa com ocorrência de segundo tumor primário (p=0,072). A expressão positiva do receptor CD74 não apresentou associação com variáveis clínicas ou histopatológicas. A concentração sorológica da proteína MIF apresentou associação inversa com metástase linfonodal (p=0,018) e estádios patológicos avançados (p=0,040) e foi significativamente reduzida após a ressecção do tumor (p=0,001). A concentração da MIF na saliva não apresentou redução significativa após o tratamento cirúrgico, mas foi associada aos estágios pT3 e pT4 (p=0,001) e a estádios patológicos avançados (p=0,032). CONCLUSÕES. A redução significante da concentração da MIF observada no soro dos pacientes após a ressecção cirúrgica do tumor permite sugerir papel potencial dessa proteína como biomarcador para a detecção precoce de recorrência do carcinoma epidermoide da cavidade bucal. A expressão tecidual da proteína MIF e seu receptor CD74 apresentou papel controverso, mas a concentração salivar da proteína MIF parece relacionar-se a um possível papel pró-tumoral em carcinoma epidermoide da cavidade bucal / INTRODUCTION. The Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) overexpression is frequently observed in tumor tissues compared to normal tissues and some previous studies have suggested its role as a prognostic marker of malignancies, including hepatocellular, ovarian, esophageal and also head and neck carcinoma. Additionally, some of its mechanisms of action, as migration and cell proliferation induction, have been demonstrated, which allow imply a differential expression in tumor progression and therefore in the prognosis of malignant neoplasms. OBJECTIVES. This study aimed to evaluate the role of MIF protein and its receptor CD74 in prognosis and diagnostic of oral squamous cell carcinoma. METHODS. The study consisted of 50 patients with oral squamous cell carcinoma prospectively collected and 57 patients retrospectively collected admitted at the Head and Neck Surgery Service from Heliópolis Hospital and ABC Medical School. The analysis were performed by Imunohistochemistry of tumor and normal tissues and by ELISA of serum and saliva samples collected pre and post-surgical treatment. Results were correlated to clinical and histopathological data. RESULTS. The expression of MIF protein and of its receptor CD74 was higher in OSCC than in normal epithelium (p < 0,0001). Association between overexpression of MIF in tumor tissue and lymphatic vessel invasion was observed (p=0,005) and higher concentration of MIF in normal epithelium showed correlation of marginal significance with second primary tumor occurrence (p=0,072). The positive expression of the receptor CD74 did not presented association with clinical or histopathological variables. Serum MIF concentration presented inverse association with lymph node metastasis (p=0,018) and advanced pathological stage (p=0,040) and it was significantly reduced after the surgery (p=0,001). The salivary MIF concentration was not significantly reduced after the surgery, but it was associated with pT3 and pT4 stages (p=0,001) and advanced pathological findings (p=0,032). CONCLUSIONS. The results showing significant reduction of MIF concentration in post-surgical serum of patients suggest its potential role as a biomarker to early detection of oral squamous cell carcinoma recurrence. The MIF and CD74 expression presented controversial role, but the salivary concentration of MIF seems to develop a possible pro-tumoral role

INTRODUÇÃO. A proteína Fator Inibitório da Migração de Macrófagos (MIF) é frequentemente observada com expressão elevada em tecidos tumorais quando comparados aos tecidos equivalentes normais e estudos têm sugerido seu papel como marcador prognóstico de neoplasias malignas, incluindo carcinomas hepatocelular, de ovário, de esôfago e também de cabeça e pescoço. Adicionalmente, alguns de seus mecanismos de ação já demonstrados, como a indução da proliferação e migração celular permitem implicar essa expressão diferencial no desenvolvimento tumoral e, consequentemente, no prognóstico das neoplasias malignas. OBJETIVO. Esse estudo objetivou avaliar o papel diagnóstico e prognóstico da proteína MIF em carcinoma epidermóide da cavidade bucal. METODOLOGIA. O estudo foi composto por 50 pacientes com carcinoma epidermoide da cavidade bucal coletados prospectivamente e 57 casos retrospectivos admitidos nos Serviços de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Hospital Heliópolis e da Faculdade de Medicina da Fundação ABC. As análises foram feitas por meio de imunoistoquímica dos tecidos tumorais e margens epiteliais normais e de ELISA das amostras de soro e saliva, coletadas pré e pós-tratamento cirúrgico, dos pacientes participantes. Os resultados foram correlacionados aos achados clínicos e histopatológicos. RESULTADOS. A expressão da proteína MIF e seu receptor CD74 mostrou-se elevada em tecido tumoral quando comparado ao tecido epitelial livre de neoplasia (p < 0,0001). Associação entre a alta expressão da MIF no tumor e infiltração vascular linfática foi observada (p=0,005) e alta expressão da MIF no epitélio livre de tumor apresentou correlação marginalmente significativa com ocorrência de segundo tumor primário (p=0,072). A expressão positiva do receptor CD74 não apresentou associação com variáveis clínicas ou histopatológicas. A concentração sorológica da proteína MIF apresentou associação inversa com metástase linfonodal (p=0,018) e estádios patológicos avançados (p=0,040) e foi significativamente reduzida após a ressecção do tumor (p=0,001). A concentração da MIF na saliva não apresentou redução significativa após o tratamento cirúrgico, mas foi associada aos estágios pT3 e pT4 (p=0,001) e a estádios patológicos avançados (p=0,032). CONCLUSÕES. A redução significante da concentração da MIF observada no soro dos pacientes após a ressecção cirúrgica do tumor permite sugerir papel potencial dessa proteína como biomarcador para a detecção precoce de recorrência do carcinoma epidermoide da cavidade bucal. A expressão tecidual da proteína MIF e seu receptor CD74 apresentou papel controverso, mas a concentração salivar da proteína MIF parece relacionar-se a um possível papel pró-tumoral em carcinoma epidermoide da cavidade bucal / INTRODUCTION. The Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) overexpression is frequently observed in tumor tissues compared to normal tissues and some previous studies have suggested its role as a prognostic marker of malignancies, including hepatocellular, ovarian, esophageal and also head and neck carcinoma. Additionally, some of its mechanisms of action, as migration and cell proliferation induction, have been demonstrated, which allow imply a differential expression in tumor progression and therefore in the prognosis of malignant neoplasms. OBJECTIVES. This study aimed to evaluate the role of MIF protein and its receptor CD74 in prognosis and diagnostic of oral squamous cell carcinoma. METHODS. The study consisted of 50 patients with oral squamous cell carcinoma prospectively collected and 57 patients retrospectively collected admitted at the Head and Neck Surgery Service from Heliópolis Hospital and ABC Medical School. The analysis were performed by Imunohistochemistry of tumor and normal tissues and by ELISA of serum and saliva samples collected pre and post-surgical treatment. Results were correlated to clinical and histopathological data. RESULTS. The expression of MIF protein and of its receptor CD74 was higher in OSCC than in normal epithelium (p < 0,0001). Association between overexpression of MIF in tumor tissue and lymphatic vessel invasion was observed (p=0,005) and higher concentration of MIF in normal epithelium showed correlation of marginal significance with second primary tumor occurrence (p=0,072). The positive expression of the receptor CD74 did not presented association with clinical or histopathological variables. Serum MIF concentration presented inverse association with lymph node metastasis (p=0,018) and advanced pathological stage (p=0,040) and it was significantly reduced after the surgery (p=0,001). The salivary MIF concentration was not significantly reduced after the surgery, but it was associated with pT3 and pT4 stages (p=0,001) and advanced pathological findings (p=0,032). CONCLUSIONS. The results showing significant reduction of MIF concentration in post-surgical serum of patients suggest its potential role as a biomarker to early detection of oral squamous cell carcinoma recurrence. The MIF and CD74 expression presented controversial role, but the salivary concentration of MIF seems to develop a possible pro-tumoral role

INTRODUÇÃO: Quimiorradioterapia (QRT) concomitante adjuvante aumenta a sobrevida livre de doença (SLD) em pacientes portadores de carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço (CECCP) de alto risco operados com intenção curativa, porém está associada a toxicidade não desprezível e seu impacto na sobrevida global (SG) é incerto. ERCC1 (Excision Repair Cross Complementing Group 1) é uma proteína com função crítica no reparo de DNA por excisão de nucleotídeos (NER) e está envolvido na resistência à quimio- e radioterapia. Neste trabalho tivemos como objetivos determinar a expressão da proteína ERCC1, a expressão do RNA mensageiro (mRNA) de ERCC1 e a ocorrência do polimorfismo de nucleotídeo único T19007C de ERCC1 em pacientes portadores de CECCP de alto risco, operados e tratados com QRT adjuvante, bem como o valor prognóstico destes marcadores. MÉTODOS: Trata-se de um estudo retrospectivo em pacientes portadores de CEC de cavidade oral, orofaringe, hipofaringe ou laringe, operados com intenção curativa e portadores de doença de risco alto ou intermediário. Pacientes elegíveis haviam sido tratados com QRT adjuvante: 60-70 Gy e cisplatina concomitante (100 mg/m2, dias 1, 22 e 43), não apresentavam metástases a distância e nem sinais de recidiva após cirurgia. A expressão da proteína ERCC1 foi avaliada por imunohistoquímica, através de um escore H semiquantitativo, obtido pelo produto da intensidade da coloração nuclear (0-3) pelo escore proporcional atribuído à porcentagem estimada de núcleos corados (0;0,1;0,5;1). O método da transcrição reversa e reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real quantitativo foi utilizado para determinação da expressão do mRNA de ERCC1 em tecido de tumor primário, normalizada em relação à expressão da fração 18S do RNA ribossomal. Genotipagem de ERCC1 (códon 118) foi realizada por PCR - polimorfismo do tamanho do fragmento de restrição a partir de DNA genômico extraído de linfonodos normais destes pacientes, após digestão com BsrDI. RESULTADOS: 69 pacientes com idade mediana de 56a, sendo 81% homens, foram estudados. Em relação à neoplasia, os sítios primários observados foram: cavidade oral (41%), laringe (32%), hipofaringe (16%) e orofaringe (12%), com estadio III 14% e estadio IV 86%, sendo pT3-pT4 78% e pN2-pN3 58%. Quarenta e três pacientes apresentaram-se com pelo menos dois linfonodos positivos, 27 com extravazamento extracapsular da metástase linfonodal e 18 com margens positivas. Achados de alto risco foram detectados em 40 pacientes (58%). No seguimento mediano de 47 meses, observou-se 11 recidivas loco-regionais, sete recidivas a distância, 10 casos com segundo tumor primário (sendo quatro com primário em pulmão e quatro em esôfago) e 30 óbitos (22 pela doença). A taxa de SG em 5 anos foi 40% e a taxa de SLD em 5 anos foi 31%. Escore H superior a 1,5 foi encontrado em 32 pacientes (54%), os quais apresentaram melhor taxa de sobrevida global em 5 anos (50% versus 18%, HR 0,43, 95%CI 0,20-0,90, p=0,026). Quinze pacientes (33%), dos 45 analisados, apresentaram elevada expressão do mRNA de ERCC1 (> 3,1) e estes pacientes tiveram melhor taxa de sobrevida global em 5 anos em comparação com aqueles com baixa expressão (86% versus 31%, HR 0,26, 95%CI 0,14-1,01, p=0,052). A distribuição dos genótipos de ERCC1 no códon 118 em 49 pacientes foi 39% C/T, 37% C/C, e 24% T/T. Não foi encontrada associação significativa entre idade, sexo, estadiamento e achados anatomopatológicos de risco, e os polimorfismos genéticos no códon 118 de ERCC1 ou a expressão do mRNA de ERCC1. Não houve diferença entre os genótipos C/C, C/T e T/T seja em termos taxa de sobrevida global em 5 anos (45%, 46%, 46%; p=0,808), seja em termos de taxa de sobrevida livre de doença em 5 anos (31%, 34%, 20%, p=0,770, respectivamente). O escore H (> 1,5 versus 1,5; HR ajustado 0,20, 95%CI 0,07-0,57, p=0,003) e a expressão normalizada do mRNA de ERCC1 (> 3,1 versus 3,1; HR ajustado 0,12, 95%CI 0,03-0,59, p=0,009), permaneceram significantes do ponto de vista estatístico, como fatores prognósticos na análise multivariada. CONCLUSÕES: Alta expressão imunohistoquímica da proteína ERCC1 e alta expressão do mRNA de ERCC1 conferem melhor prognóstico em pacientes portadores de CECCP operados de alto risco tratados com QRT adjuvante baseada em cisplatina. O polimorfismo genético T19007C de ERCC1 não apresentou valor prognóstico nestes pacientes. / BACKGROUND: Adjuvant concurrent chemoradiation (CRT) improves diseasefree survival (DFS) in patients diagnosed with head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) presenting with high-risk features treated with surgery with curative intent, but treatment-related toxicity is not negligible and its impact on overall survival (OS) is uncertain. ERCC1 (Excision Repair Cross Complementing Group 1) is a protein with a critical role in the nucleotide excision repair (NER) pathway, associated with resistance to chemo- and radiation therapy. We aimed here to study ERCC1 protein expression, ERCC1 messenger RNA (mRNA) expression and the single nucleotide polymorphism T19007C of ERCC1 as prognostic markers in HNSCC patients presenting with high-risk features treated with surgery and adjuvant CRT. METHODS: It is a retrospective study in patients with oral cavity, oropharynx, hypopharynx or larynx SCC submitted to radical surgery with curative intent and presenting with pathologic features of high- or intermediate-risk. Eligible patients were treated with adjuvant CRT: 60-70 Gy and concurrent cisplatin (100 mg/m2, days 1, 22 and 43), with no distant metastasis and no relapsed disease after surgery. ERCC1 protein expression was evaluated by immunohistochemistry, using a semi-quantitative H-score, calculated by multiplying the nuclear staining intensity (0-3) by the proportion score attributed to the percentage of positive tumor nuclei (0;0,1;0,5;1). Quantitative real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction (PCR) assay was performed to determine ERCC1 mRNA expression in primary tumors tissue specimens. The ERCC1 mRNA expression was normalized using 18S fraction of ribosomal RNA expression as internal reference. ERCC1 (codon 118) genotypes were detected using PCR restriction fragment length polymorphism method carried out in genomic DNA extracted from normal lymph nodes. The PCR products were digested with BsrDI. RESULTS: 69 patients (median age 56 y, 81% male) were studied. Regarding tumor characteristics, primary sites were: oral cavity 41%, larynx 32%, hypopharynx 16%, oropharynx 12%, stage III 14%, stage IV 86%, pT3- pT4 78% and pN2-pN3 58%. Forty-three patients presented with two or more positive lymph nodes, 27 with extracapsular spread of nodal disease and 18 with positive margins. High-risk pathologic features were detected in 40 patients (58%). During the median follow-up of 47 months, we observed 11 locoregional relapses, seven distant relapses, 10 patients were diagnosed with secondary primary tumors (four in lungs and four in esophagus) and 30 deaths (22 disease-related). The 5-year overall survival rate was 40% and the 5-year disease-free survival rate was 31%. High H-score (> 1.5) was seen in 32 patients (54%), who presented better 5-year overall survival rate in comparison to those with lower H-scores (50% versus 18%, HR 0.43, 95%CI 0.20-0.90, p=0.026). Fifteen patients (out of 45, 33%) whose tumors presented normalized ERCC1 expression > 3.1 were classified as having high ERCC1 mRNA expression, and these patients presented better 5-year overall survival rate in comparison to those with lower ERCC1 mRNA expression (86% versus 30%, HR 0.26, 95%CI 0.14-1.01, p=0.052). Genotype distribution at ERCC1 codon 118 in 49 patients was 39% C/T, 37% C/C, and 24% T/T. No significant association was found between age, gender, stage, grading and pathological risk features and ERCC1 codon 118 genotypes or ERCC1 mRNA expression. No difference was detected among C/C, C/T and T/T genotypes, either in terms of 5-year overall survival rates (45%, 46%, 46%; p=0.808), or 5-year diseasefree survival rate (31%, 34%, 20%, p=0.770, respectively). H-score (> 1.5 versus 1.5; adjusted HR 0.20, 95%CI 0.07-0.57, p=0.003) and ERCC1 mRNA normalized expression (> 3.1 versus 3.1; adjusted HR 0.12, 95%CI 0.03-0.59, p=0.009), remained significant as favorable prognostic factors after adjusting for prognostic factors in a multivariate analysis. CONCLUSIONS: High immunohistochemical expression of ERCC1 protein and high ERCC1 mRNA expression, but not the T19007 single nucleotide polymorphism, were associated with better prognosis in HNSCC patients submitted to surgery and adjuvant cisplatin-based chemoradiation.

A expressão de Smads e de membros da família AP1/ jun-fos podem refletir alterações da via de TGFb, uma via importante para o câncer epidermóide de cabeça e pescoço (HNSCC). Encontramos expressão aumentada dos mRNAs das Smads1-8 em HNSCC em comparação com tecido normal adjacente, por RPA. Além disso, as curvas de sobrevida de Kaplan Meier e a análise multivariada mostraram que a Smad6+ parece ser um fator determinante de bom prognóstico em HNSCC. Quanto a família AP-1, mensurado por Northern blot, somente Fra-1 mostrou-se aumentado no tumor e associado à presença de linfonodos comprometidos. Nossos dados sugerem que a positividade de Smad6 possa ser marcador de bom prognóstico em HNSCC / Smad and AP1 messenger RNA expression may underlie disruptions affecting TGFb signaling in head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC). Analysis of Smads1-8 mRNA expression by RPA has shown Smad expression is globally increased in tumor as compared to adjacent normal tissue. Kaplan Meier survival curves and multivariate analysis revealed that Smad6 positivity in tumor was an independent good prognostic factor in HNSCC. In relation to AP-1, as measured by Northern blot, only Fra-1 was overexpressed in tumor and directly related to the presence of lymph node involvement. Our data suggest that Smad6 may be a marker of good prognosis in HNSCC

OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi analisar a concordância entre o esfregaço anal e a biópsia guiada por anuscopia de alta resolução no diagnóstico da displasia anal em pacientes infectados pelo HIV. MÉTODO: Conduzimos uma análise transversal de pacientes infectados pelo HIV submetidos a rastreamento de displasia anal rotineiro. A concordância entre mensurações foi estimada por índice de kappa ponderado através de sistema de avaliação citológica e histológica de três categorias (normal, displasia de baixo grau, e displasia de alto grau). Estimativas de sensibilidade, especificidade e valores preditivos foram calculados através de sistema de avaliação citológica e histológica de duas categorias (ausência de displasia e displasia de qualquer grau). Estimativas foram calculadas também para a detecção de displasia de alto grau. RESULTADOS: No decorrer de um ano, 222 pacientes foram submetidos a 330 esfregaços anais seguidos de biópsias guiadas por anuscopia de alta resolução. Trezentos e onze (311) esfregaços com biópsias concomitantes foram satisfatórios. Considerando-se a histologia como padrão, a freqüência de displasia anal foi de 46%. O índice kappa ponderado para concordância entre o esfregaço anal e a biópsia foi de 0,20. Para detecção de displasia anal de qualquer grau, o esfregaço anal demonstrou sensibilidade de 61%, especificidade de 60%, valor preditivo positivo de 56% e valor preditivo negativo de 64%. Para displasia de alto grau, o esfregaço anal demonstrou sensibilidade de 16% e especificidade de 97%. CONCLUSÃO: Os resultados obtidos no presente estudo, em que comparamos os achados da citologia dos esfregaços com os achados histológicos das biópsias dirigidas pela anuscopia de alta resolução em pacientes infectados pelo HIV permitiram concluir que houve baixa concordância entre eles / Purpose: To analyze the agreement between anal Pap smear and high resolution anoscopy guided biopsy to diagnose anal dysplasia in HIV-infected patients. Methods: Cross sectional analysis of HIV-infected patients receiving anal dysplasia screening as part of routine care. Agreement between measures was estimated by weighted kappa-statistics, using 3-tiered cytologic and histologic grading system (normal, low grade dysplasia, and high grade dysplasia). Estimates of sensitivity, specificity, and predictive values were calculated using a 2-tiered cytologic and histologic grading system (without dysplasia, and with dysplasia of any grade). Estimates were also calculated for the detection of high grade dysplasia. Results: Two hundred and twenty-two patients underwent 330 anal Pap smears followed by high resolution anoscopy guided biopsies in one year period. There were 311 satisfactory Pap smears with concurrent biopsy. Considering histology the standard, the frequency of anal dysplasia was 46 percent (95 percent confidence interval: 40-51 percent). Kappa-agreement between anal Pap smear and biopsy was 0.20 (95 percent confidence interval: 0.10 0.29). Anal Pap smear showed sensitivity of 61 percent, specificity of 60 percent, positive predictive value of 56 percent, and negative predictive value of 64 percent for detection of anal dysplasia of any grade. For high grade dysplasia, anal Pap smear showed sensitivity of 16 percent, and specificity of 97 percent. Conclusion: The present study showed a low concordance between anal Pap smears and high resolution anoscopy-guided biopsy

OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi analisar a concordância entre o esfregaço anal e a biópsia guiada por anuscopia de alta resolução no diagnóstico da displasia anal em pacientes infectados pelo HIV. MÉTODO: Conduzimos uma análise transversal de pacientes infectados pelo HIV submetidos a rastreamento de displasia anal rotineiro. A concordância entre mensurações foi estimada por índice de kappa ponderado através de sistema de avaliação citológica e histológica de três categorias (normal, displasia de baixo grau, e displasia de alto grau). Estimativas de sensibilidade, especificidade e valores preditivos foram calculados através de sistema de avaliação citológica e histológica de duas categorias (ausência de displasia e displasia de qualquer grau). Estimativas foram calculadas também para a detecção de displasia de alto grau. RESULTADOS: No decorrer de um ano, 222 pacientes foram submetidos a 330 esfregaços anais seguidos de biópsias guiadas por anuscopia de alta resolução. Trezentos e onze (311) esfregaços com biópsias concomitantes foram satisfatórios. Considerando-se a histologia como padrão, a freqüência de displasia anal foi de 46%. O índice kappa ponderado para concordância entre o esfregaço anal e a biópsia foi de 0,20. Para detecção de displasia anal de qualquer grau, o esfregaço anal demonstrou sensibilidade de 61%, especificidade de 60%, valor preditivo positivo de 56% e valor preditivo negativo de 64%. Para displasia de alto grau, o esfregaço anal demonstrou sensibilidade de 16% e especificidade de 97%. CONCLUSÃO: Os resultados obtidos no presente estudo, em que comparamos os achados da citologia dos esfregaços com os achados histológicos das biópsias dirigidas pela anuscopia de alta resolução em pacientes infectados pelo HIV permitiram concluir que houve baixa concordância entre eles / Purpose: To analyze the agreement between anal Pap smear and high resolution anoscopy guided biopsy to diagnose anal dysplasia in HIV-infected patients. Methods: Cross sectional analysis of HIV-infected patients receiving anal dysplasia screening as part of routine care. Agreement between measures was estimated by weighted kappa-statistics, using 3-tiered cytologic and histologic grading system (normal, low grade dysplasia, and high grade dysplasia). Estimates of sensitivity, specificity, and predictive values were calculated using a 2-tiered cytologic and histologic grading system (without dysplasia, and with dysplasia of any grade). Estimates were also calculated for the detection of high grade dysplasia. Results: Two hundred and twenty-two patients underwent 330 anal Pap smears followed by high resolution anoscopy guided biopsies in one year period. There were 311 satisfactory Pap smears with concurrent biopsy. Considering histology the standard, the frequency of anal dysplasia was 46 percent (95 percent confidence interval: 40-51 percent). Kappa-agreement between anal Pap smear and biopsy was 0.20 (95 percent confidence interval: 0.10 0.29). Anal Pap smear showed sensitivity of 61 percent, specificity of 60 percent, positive predictive value of 56 percent, and negative predictive value of 64 percent for detection of anal dysplasia of any grade. For high grade dysplasia, anal Pap smear showed sensitivity of 16 percent, and specificity of 97 percent. Conclusion: The present study showed a low concordance between anal Pap smears and high resolution anoscopy-guided biopsy