Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ROSANA CORREA DA SILVA.pdf: 1155135 bytes, checksum: a1c142c1de3c5263b64fc25cab61f452 (MD5) Previous issue date: 2012-03-28 / Papillary carcinomas are the most common tumors of the thyroid, corresponding to 80% of all tumors that affect the gland. In such tumors, a common mutation at the BRAF gene has been detected, comprising a nucleotide transversion, T1799A, at the exon 15 of gene. This mutation has been identified in about 50 % of the thyroid papillary carcinomas (TPC). Clinical and experimental studies have demonstrated important associations between BRAF mutations and different TPC clinical factors related to tumor progression, invasion and recurrence. The objective of this study was to analise BRAF protein expression, by using immunohistochemistry, and V600E BRAF mutations in a group of patients with thyroid papillary carcinoma. BRAF protein expression and V600E BRAF mutations were compared to TPC clinical and pathological aspects. The study group comprised 116 TPC patients that were selected at the Pathology Department of Hospital Araujo Jorge, in Goiânia. BRAF immunohistochemical analysis employed a labeled polymer peroxidase method and primary BRAF monoclonal antibody (clone F-7), Santa Cruz Biotechnology Inc. BRAF V600E molecular analysis was carried by PCR (Polimerase Chain Reaction) associated to RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). Statistical analysis was performed by using univariate analysis (Chi-square test with Yates correction, and Fischer). Our results indicated that BRAF overexpression was detected in 54 TPC cases (46.0%), while BRAF V600E mutation was detected in 74 TPC cases (63.8%). Significant associations were detected between BRAF overexpression with distant metastasis (p=0.001) and tumor extrathyroidal extensions (p=0.0183). BRAF V600E mutations were significantly associated with lymph nodes methastasis (p=0.0385) and BRAF protein overexpression (p=0.0063). / Os carcinomas papilíferos são os tumores mais comuns da tireóide, sendo responsáveis por 80% de todos os cânceres da glândula. Nesses tumores, uma mutação comum no gene BRAF tem sido observada, compreendendo a transversão do nucleotídeo T1799A, localizado no exon 15, verificada em 50% dos carcinomas papilíferos de tireóide (CPT). Essa mutação acarreta a substituição do aminoácido valina na posição 600 da proteína, por ácido glutâmico, sendo assim designada V600E. Estudos experimentais e clínicos têm mostrado uma associação entre a mutação do gene BRAF e diferentes parâmetros clínicos de progressão, invasão e recorrência no CPT. O objetivo deste estudo foi detectar os níveis da proteína BRAF utilizando o método de imuno-histoquímica, e avaliar a mutação V600E do gene BRAF em um grupo de pacientes com carcinoma papilífero de tireóide. A detecção imuno-histoquímica da proteína BRAF e a mutação V600E do gene BRAF, foram comparadas em relação aos aspectos clínico-patológicos dos tumores. O grupo de estudo incluiu 116 pacientes com carcinoma papilífero de tireóide, selecionados no Setor de Anatomia Patológica do Hospital Araújo Jorge, em Goiânia-GO. A análise imuno-histoquímica utilizou o método da imunoperoxidase associada a polímeros e o anticorpo BRAF (clone F-7) Santa Cruz Biotechnology Inc. A análise molecular da mutação V600E do gene BRAF foi realizada por meio de PCR (reação em cadeia da polimerase) e RFLP (polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição). As análises estatísticas incluiram o teste do Chi-quadrado com correção de Yates e o teste exato de Fisher. Nossos resultados mostraram que a hiperexpressão de BRAF foi detectada em 54 casos (46%) e a mutação V600E do gene BRAF em 74 casos (63,8%). Dentre as associações investigadas, resultados significativos foram observados entre a hiperexpressão da proteína BRAF e extensão extra-tireoideana do tumor (p=0,0183). A presença da mutação V600E do gene BRAF foi associada as metástases linfonodais (p=0,0385) e à hiperexpressão da proteína BRAF (p=0,0063).

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:39:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JANAINA STEGER DE OLIVEIRA COSTA PIRES.pdf: 1117981 bytes, checksum: f845b89570ca9e09aa37909b90cf688b (MD5) Previous issue date: 2013-06-28 / Thyroid câncer is the most common endocrine system malignant neoplasia. Although it is a relatively rare pathology, responsible for approximately 1% of new malignant disease cases, there has been recognized all over the world a tendency to increase its incidence. This study aimed to evaluate the expression of COX-2 and VEGF-C in patients diagnosed with Thyroid Papilary Carcinoma (TPC) in the city of Goiania, Goias State, Brazil, as well as the possible associations between this expression markers and the following factors: lymph node metastasis, distant metastasis, tumor size, age, adjacent tissue invasion and gender. In this regard, 165 thyroid papilary carcinoma cases diagnosed at the Araujo Jorge Hospital Patologic Anatomy Department in Goiania, Goias State, Brazil were analyzed. The molecular analysis was held by immunohistochemistry. Descriptive and comparative statistical analysis using Chi square test were held in this study. The study evaluated 165 patients who had documented histopathologic TPC diagnosis. The immunohistocemical analysis of the expression COX-2 e VEGF-C made possible to classify the expression COX-2 e VEGF-C in two groups, one of them with the expression &#8804; 50 % to COX-2 and VEGF-C (90 cases 54,5%; 102 cases 40,6%), and the other one with the expression > 50 % (50 cases 30,3%; 62 cases 37,6%). Significant statistical associations were observed between the size (p=0,0048; p<0,0001) and adjacent tissue invasion (p=0,0006; p<0,0001) with the expression of COX-2 and VEGF-C, and also between lymph node metastasis (p<0,0001) with expression VEGF-C. The collected data showed that the over expression COX-2 and VEGF-C in TPC cases can be important molecular biomarkers in thyroid papilary carcinoma prognosis. Our results corroborate to other studies that demonstrated the usability of these proteins to identify TPC patients, with a higher risk of disease progression because of its association with the presence of regional lymph node metastasis and with adjacent tissue invasion. / O câncer de tireóide é a neoplasia maligna mais comum do sistema endócrino. Embora seja uma patologia relativamente rara, responsável por aproximadamente 1% dos novos casos de doenças malignas, uma tendência no aumento de sua incidência tem sido reconhecida em várias partes do mundo. O objetivo desse estudo consistiu em avaliar a expressão de COX-2 e VEGF-C em pacientes diagnosticados com Carcinoma Papilífero da Tireóide (CPT) em Goiânia, bem como as possíveis associações entre a expressão desses marcadores e os seguintes fatores: metástase linfonodal, metástase à distância, tamanho do tumor, idade, extravasamento-invasão de tecidos adjacentes e gênero. Para isso foram analisados 165 casos de carcinomas papilíferos de tireoide diagnosticados no Setor de Anatomia Patológica do Hospital Araújo Jorge, em Goiânia, Goiás. A análise molecular foi feita por imuno-histoquímica. Análises estatísticas descritiva e comparativa com o teste Chi-quadrado foram usadas nesse estudo. O estudo avaliou 165 pacientes com diagnóstico histopatológico comprovado de CPT. A análise imuno-histoquímica da expressão de COX-2 e VEGF-C, possibilitou a classificação da expressão de COX-2 e VEGF-C em dois grupos, sendo um com expressão &#8804; 50 % para COX-2 e VEGF-C (90 casos 54,5%; 102 casos 40,6%), e outro com expressão > 50 % (50 casos 30,3%; 62 casos 37,6%). Associações estatisticamente significativas foram observadas entre o tamanho (p=0,0048; p<0,0001) e invasão de tecido adjacente (p=0,0006; p<0,0001) com a hiperexpressão de COX-2 e VEGF-C, e também entre metástase linfonodal (p<0,0001) com a expressão de VEGF-C. Os dados obtidos demonstraram que a superexpressão de COX-2 e VEGF-C nos CPT podem ser importantes biomarcadores moleculares no prognóstico do carcinoma papilífero de tireóide. Nossos resultados corroboram com outros estudos que demonstraram a utilidade dessas proteínas na identificação de pacientes com CPT, com maior risco de progressão da doença por sua associação com a presença de metástases para linfonodos regionais e com a invasão de tecido adjacente.

Made available in DSpace on 2015-04-20T12:31:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lesemky.pdf: 1202883 bytes, checksum: f8220049d5a1bd344120a49c3ed2500a (MD5) Previous issue date: 2012-12-12 / Cytokeratin 19 (CK 19) is a molecular marker that express cell replication and differentiation, and HER-2 oncogene (Human Epidermal Growth factor receptor-Type 2) is the second member of the human epidermal growth factor receptor (EGFR) family. Its overexpression can mean aggressiveness and poor prognostic in various kinds of tumors, as breast, lung and prostate. In last few decades the diagnostic of morphological changes of the thyroid gland was increased. When being diagnosed with ultrasound, the thyroid nodule prevalence reaches 20% to 30% in the general population. The aim of this prospective study is verify the presence of these markers in thyroid glands in operated non-coastal Amazon inhabitants, and its relationship with pathologic findings. We selected 34 samples of formalin-fixed, paraffin-embedded thyroid tumor tissues, from patients treated at Hospital Adriano Jorge, Manaus, Amazonas. The patients consisted of six men and 28 women, aged between 25 and 76 years, average 47 years. The tissues corresponded to nine multinodular goiter (MNG), seven colloid goiters (CG), five nodular hyperplasia (NH) four adenomatous goiters (AG), three papillary thyroid microcarcinoma (PTMC) and five papillary thyroid carcinomas (PTC). Immunohistochemistry (IHC) staining with CK 19 and HER-2 were performed using the labeled streptavidin biotin peroxidase complex system (LSAB2, DAKO, USA) on all tissues using monoclonal antibodies BA17 mab mouse (Dako M0772, USA) and SP3 rabbit mab (Spring M3034, USA) and inferential statistical analysis applying (Fisher exact test with 5% significance level). HER-2 IHC was not found in all samples. We found a strong positive reactivity for IHC CK19 in all 3 patients with PTMC, in four with PTC, one with MNG, and one with CG. We found focal positivity for CK 19 in one PTC, two MNG, 4 CG and one AG. Statistical significance was found only between CK 19 and histopathology. The results suggest thats HER-2 oncogene has no predictive or prognostic value in thyroid tissues and CK 19 marker showed affinity for PTC, although it is also found in benign tissues with less intensity. / A citoqueratina 19 (CK 19) é um marcador molecular que expressa diferenciação e replicação celular e o oncogene HER-2 (Human Epidermal Growth factor receptor-Type 2), membro da família Fator de Crescimento Epidérmico Humano (EGFR), uma proteína que quando sobre-expressa pode significar maior ploriferação celular e agressividade em vários tipos de tumores, dentre eles mama, pulmão e próstata. Nas últimas décadas vêm aumentando o diagnóstico de alterações morfológicas da glândula tireoide, sendo que quando diagnosticado à ultrassonografia a prevalência do nódulo tireoideano chega a 20% a 30% na população geral. Objetivamos neste estudo prospectivo verificar a presença destes marcadores em glândulas tireoideas operadas em pacientes habitantes em região amazônica não litorânea, e sua relação com as alterações morfológicas encontradas. Foram selecionadas 34 amostras de tecido tireoidiano preservados em formol e armazenados em parafina, de pacientes operados na Fundação Hospital Adriano Jorge, de Manaus, Amazonas. Os pacientes corresponderam a seis homens e 28 mulheres, com idade entre 25 e 76 anos e média de 47 anos. Os tecidos corresponderam a nove bócios multinodulares (BMN), sete bócios coloides (BC), cinco hiperplasias nodulares (HN) quatro bócios adenomatosos (BA), três microcarcinomas papilíferos (MCP) e cinco carcinomas papilíferos da tireóide (CPT). Exames de imuno-histoquímica em busca dos marcadores CK19 e HER-2 foram realizados em todos os tecidos usando anticorpos monoclonais BA17 (mab rato, Dako M0772, EUA) e SP3 (policlonal em coelho, Spring M3034, EUA) e o método esteptavidina-biotina-peroxidade (Kit LSAB, Dako, EUA) e análise estatística inferencial aplicando o teste Exato de Fisher com nível de significância de 5%. Não foi encontrada positividade para o marcador HER-2 em tecidos tireoidianos malignos ou benignos. Foram encontrados positividade média a forte intensidade para CK19 em todos os três pacientes com MCP, quatro CPT, um BMN e um BC. Foram encontrados positividade focal em um CPT, dois BMN, quatro BC e um BA. A análise estatística demonstrou significância estatística somente entre as variáveis CK 19 e tipo histopatológico. Os resultados da amostra analisada demonstraram que a pesquisa no oncogene HER-2 não apresentou presença deste marcador em nenhum dos tecidos tireoidianos, e o marcador CK 19 foi presente em maior intensidade nos casos de Carcinoma que nos tecidos benignos onde foi encontrado.