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Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-30Bitstream added on 2014-06-13T20:21:26Z : No. of bitstreams: 1 teixeira_gr_dr_botib.pdf: 723691 bytes, checksum: eef20f91963f33fb45c90b84a0e28737 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O consumo de etanol está associado a alterações metabólicas e reprodutivas, causando doenças, como o câncer de próstata. Umas das medidas que pode amenizar a manifestação do câncer, incluindo o da próstata, é o exercício físico regular. Nosso trabalho tem o objetivo de avaliar a influência do exercício físico resistido e do etanol no metabolismo da próstata ventral de ratos adultos. Vinte ratos Wistar sem a preferência ao etanol, 20 ratos UChB, consumo alto de etanol e 20 ratos UChB abstinentes foram divididos em seis grupos. Tres grupos foram submetidos ao treinamento físico com uma semana de adaptação e 13 semanas de treinamento, realizando quatro séries de 10 saltos com sobrecarga crescente de 50-70% do peso corporal preso ao tórax, com 60 segundos de descanso entre cada série, três vezes por semana. Os demais grupos permaneceram sedentários. Dois dias após a última sessão de treinamento, os animais foram submetidos à eutanásia por decaptação, o sangue e as regiões intermediária e distal da próstata ventral foram coletados e processados para análises imunohistoquímicas, Western Blot, hormonais e bioquímicas. Nossos resultados sugerem que o exercício físico altera o metabolismo prostático através das interações parácrinas prevenindo as lesões prostáticas / Ethanol consumption is associated with reproductive and metabolic changes, causing diseases such as prostate câncer. The ethanol chronic consumption of is associated with prostate cancer. One of the measures that can lessen the manifestation of cancer, including prostate, is regular exercise. Our work aims to evaluate the influence of resistive exercise and metabolism of ethanol in the ventral prostate of adult rats. Twenty rats without preference to ethanol, 20 UChB rats, ethanol high consumption and 20 UChB abstinent rats were divided into six groups. Three groups were subjected to physical training consisted of one week for adaptation and 13 weeks of physical training, performing four sets of 10 jumps with increasing overload of 50-70% body weight attached to the chest with 60 seconds rest between each series, three times per week. The other groups remained sedentary. Two days after the last training session, rats were euthanized by decapitation, blood and the intermediate and distal ventral prostate regions were collected and processed for immunohistochemical, western blot, biochemical and hormonal analysis. Our results suggest that exercise alters the metabolism of the prostate through paracrine interactions preventing prostate lesions

Ο σχηματισμός του νευρικού συστήματος επιτυγχάνεται από αναπτυξιακούς μηχανισμούς που ελέγχουν τις διαδικασίες του κυτταρικού πολλαπλασιασμού και της κυτταρικής διαφοροποίησης. Το χαρακτηριστικό αυτό υποδεικνύει ότι μόρια που συμμετέχουν και στις δύο παραπάνω διαδικασίες ενδεχομένως διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο στην πορεία της νευρογένεσης. Η Geminin είναι μία πρωτεΐνη που εμπλέκεται στους δύο προαναφερόμενους μηχανισμούς. Η Geminin ελέγχει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό ρυθμίζοντας τον παράγοντα αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA Cdt1. Επίσης, η Geminin εμφανίζει και νευροεπαγωγική δράση, καθώς προάγει το σχηματισμό νευρικού ιστού στα έμβρυα του Xenopus laevis. Επιπρόσθετα, η Geminin αλληλεπιδρά με μεταγραφικούς παράγοντες και παράγοντες αναδιαμόρφωσης της δομής της χρωματίνης, όπως είναι τα μόρια Six3, Hox, Brg1, Brahma και Polycomb, επηρεάζοντας με αυτόν τον τρόπο την ισορροπία μεταξύ πολλαπλασιασμού και διαφοροποίησης. Μελετήσαμε το πρότυπο έκφρασης των πρωτεϊνών Geminin και Cdt1 στο αναπτυσσόμενο κεντρικό νευρικό σύστημα (ΚΝΣ) εμβρύων ποντικού με τις τεχνικές του in situ υβριδισμού και της ανοσοϊστοχημείας. Η παρουσία της Geminin ανιχνεύτηκε στην κοιλιακή ζώνη του αναπτυσσόμενου ΚΝΣ, όπου εδρεύουν τα πρόδρομα νευρικά κύτταρα. Το πρότυπο έκφρασης της Cdt1 ήταν παρόμοιο με αυτό της Geminin. Τα κύτταρα που εκφράζουν τις Geminin και Cdt1 κατανέμονται μεταξύ των κυττάρων που εκφράζουν τον παράγοντα Sox2, έναν μοριακό δείκτη πρόδρομων νευρικών κυττάρων. Ανιχνεύσαμε ένα μερικώς αλληλεπικαλυπτόμενο πρότυπο έκφρασης των δύο πρωτεϊνών με το αντίστοιχο του μορίου Mash1, το οποίο καταδεικνύει πρόδρομα κύτταρα που έχουν αρχίσει να διαφοροποιούνται προς νευρώνες. Τέλος, η κατανομή των Geminin και Cdt1 είναι τελείως διακριτή από την κατανομή της πρωτεΐνης Τουμπουλίνη βΙΙΙ που εκφράζεται μόνο από τους ώριμους νευρώνες. Τα αποτελέσματά μας υποδεικνύουν ότι οι πρωτεΐνες Geminin και Cdt1 εκφράζονται από τα πρόδρομα αδιαφοροποίητα κύτταρα του αναπτυσσόμενου νευρικού συστήματος. / Nervous system formation is accomplished through developmental mechanisms which integrate tight control of proliferation and differentiation. This feature indicates that molecules participating in both of these processes may have prominent roles during neurogenesis. Geminin is a protein involved in both of these mechanisms. It controls proliferation by negatively regulating the DNA replication licensing factor Cdt1 and, in addition, it acts as a neuralizing factor during early gastrulation of Xenopus embryos, defining in dorsal ectoderm a future nervous territory. Moreover, Geminin’s interaction with transcription and chromatin remodeling factors such as Six3, Hox, Brg1, Brahma and Polycomb proteins affects the balance between proliferation and differentiation. We performed a detailed analysis of the expression patterns of Geminin and Cdt1 in the central nervous system of mouse embryos by in situ hybridization and immunohistochemistry. We detected Geminin at the ventricular zone (VZ) of the developing CNS, where the proliferating progenitors reside, and its expression pattern overlapped that of Cdt1. Geminin and Cdt1 expressing cells defined a subpopulation of the Sox2 positive cells, which is a marker of neural progenitor cells. A partial co-localization was seen with Mash1, a marker of precursor cells committed towards a neuronal phenotype, whereas no overlap was detected with the neuronal marker TubulinβIII. Our results indicate that Geminin and Cdt1 are localized in progenitors/stem cells of the developing CNS.

OBJETIVO: avaliar através da citopatologia, associada a técnica AgNOR, o reflexo da cessação do fumo sobre a velocidade de proliferação das células epiteliais descamadas de borda de língua (BL) e assoalho de boca (AB), ao longo do tempo. MÉTODOS: Foram incluídos na amostra inicial 138 indivíduos. As coletas foram realizadas em um momento inicial (T1), após 8-15 meses (T2) e após 16-30 meses (T3). Os participantes foram divididos em três grupos de acordo com os seguintes critérios: Grupo Controle (GC) (n=71): indivíduos atendidos na Faculdade de Odontologia da UFRGS, que nunca fumaram, e que ingeriam até 30g de álcool por semana. Grupo Abandono de Fumo (GAF) (n=26): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do Hospital de Clínicas de Porto Alegra (HCPA), que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que ao longo do tempo cessaram o hábito tabágico. Alcoolistas ou não. Grupo Fumo (GF) (n=41): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do HCPA, que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que não cessaram o hábito tabágico ao longo da pesquisa. Alcoolistas ou não. As amostras foram submetidas à técnica de AgNOR e quantificadas por três examinadores previamente calibrados. A média de AgNOR por núcleo (mAgNOR) e a porcentagem de células com mais de 1, 2 E 3 AgNORs (pAgNOR>1, pAgNOR>2 e pAgNOR>3) foram calculados nas 50 primeiras células, nucleadas, não sobrepostas, e bem distendidas. RESULTADOS: ao final dos tempos experimentais os grupos tinham 9 individuos em cada. Não foram observada diferença estatística do mAgNOR e pAgNOR>3 entre os grupos avaliados, nos diferentes tempos em ambos os sítios. Foi observada uma tendência à diminuição na velocidade de proliferação, no tempo intermediário, e uma tendência a aumentar no tempo final, em todos os grupos Em T1, os grupos expostos ao fumo (GAF e GF) apresentavam velocidade de proliferação mais elevada, se comparados ao GC no BL. No AB o GC apresenta valores maiores que GAF. Em T2, os indivíduos do GAF apresentaram uma redução da taxa de proliferação celular, em ambos os sítios analisados, maior do que GC e GF. Em T3 os valores retornam ao equilíbrio, exibindo valores maiores que os em T1. No BL o pAgNOR>1 e 2 mostrou uma diferença estatística entre os grupos em T1 e T2. O sítio AB apresentou diferença estatística no pAgNOR>1, em T2, mostrando que indivíduos do GC e GAF apresentam velocidade de proliferação menor quando comparados ao GF. CONCLUSÕES: O estudo mostrou que o GAF apresenta maior flutuação, de mAgNOR, que o GC e GF, ao longo do tempo. Estudo futuros ampliando o tempo de controle, controlando os agentes carcinógenos, e observando indivíduos com características populacionais seriam convenientes para buscar a padronização deste modelo de prevenção de câncer. / OBJECTIVE: evaluate, through cytopathology associated with AgNOR technique, the reflection of smoking cessation on the speed of proliferation of desquamated epithelial cells of tongue edge (TE) and mouth floor (MF) over time. METHODS: We included in the initial sample 138 individuals. Samples were collected at an early time (T1), after 8-15 months (T2) and after 16-30 months (T3). Participants were divided into three groups, according to the following criteria: control group (CG) (n = 71): patients seen at the Faculty of Dentistry at UFRGS, who had never smoked and who drank till 30g of alcohol a week. Abandonment group Smoke (AS) (n = 26): individuals in monitoring the Group of Smokers of Hospital de clínicas dePorto Alegre (HCPA), who smoked at the time of the initial work, and that over time ceased the smoking habit. Alcoholic or not. Tobacco group (TG) (n = 41): follow-up individuals in the group of smokers HCPA, who smoked at the time of the initial work, and that did not stop the smoking habit during the research. Alcoholic or not. Samples were subjected to AgNOR technique and quantified for three calibrated examiners. The average AgNOR per core (Magnor) and the percentage of cells with 1, 2 and 3 AgNOR (pAgNOR> 1, pAgNOR> 2 and pAgNOR> 3) were calculated on the first 50 cells, nucleated, nonoverlapping, and well- distended. RESULTS: At the end of the experimental time groups had 9 individuals in each. There were no statistical difference of mAgNOR and pAgNOR> 3 between the groups in different times on both sites. A tendency to decrease in the proliferation rate was observed, at the intermediate time, and a trend of increase in the end time for all groups in T1, the smoke exposed groups (AS and TG) showed higher proliferation rate, compared the CG in the TE. MF in the CG presents values greater than AS. In T2, AS individuals showed a reduction in cell proliferation rate in both sites evaluated greater than TG and CG. In T3 values return to equilibrium, exhibiting values greater than the T1. TE in the pAgNOR> 1 and 2 showed a statistical difference between groups in T1 and T2. The site MF showed statistical difference in pAgNOR> 1, T2, showing that CG and the AS show less proliferation of speed when compared to the TG. CONCLUSIONS: The study showed that the AS has greater fluctuation mAgNOR that CG and TG, over time. Future study extending the time control, controlling carcinogens, and observing individuals with population characteristics would be convenient to seek standardization of this cancer prevention model.

OBJETIVO: avaliar através da citopatologia, associada a técnica AgNOR, o reflexo da cessação do fumo sobre a velocidade de proliferação das células epiteliais descamadas de borda de língua (BL) e assoalho de boca (AB), ao longo do tempo. MÉTODOS: Foram incluídos na amostra inicial 138 indivíduos. As coletas foram realizadas em um momento inicial (T1), após 8-15 meses (T2) e após 16-30 meses (T3). Os participantes foram divididos em três grupos de acordo com os seguintes critérios: Grupo Controle (GC) (n=71): indivíduos atendidos na Faculdade de Odontologia da UFRGS, que nunca fumaram, e que ingeriam até 30g de álcool por semana. Grupo Abandono de Fumo (GAF) (n=26): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do Hospital de Clínicas de Porto Alegra (HCPA), que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que ao longo do tempo cessaram o hábito tabágico. Alcoolistas ou não. Grupo Fumo (GF) (n=41): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do HCPA, que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que não cessaram o hábito tabágico ao longo da pesquisa. Alcoolistas ou não. As amostras foram submetidas à técnica de AgNOR e quantificadas por três examinadores previamente calibrados. A média de AgNOR por núcleo (mAgNOR) e a porcentagem de células com mais de 1, 2 E 3 AgNORs (pAgNOR>1, pAgNOR>2 e pAgNOR>3) foram calculados nas 50 primeiras células, nucleadas, não sobrepostas, e bem distendidas. RESULTADOS: ao final dos tempos experimentais os grupos tinham 9 individuos em cada. Não foram observada diferença estatística do mAgNOR e pAgNOR>3 entre os grupos avaliados, nos diferentes tempos em ambos os sítios. Foi observada uma tendência à diminuição na velocidade de proliferação, no tempo intermediário, e uma tendência a aumentar no tempo final, em todos os grupos Em T1, os grupos expostos ao fumo (GAF e GF) apresentavam velocidade de proliferação mais elevada, se comparados ao GC no BL. No AB o GC apresenta valores maiores que GAF. Em T2, os indivíduos do GAF apresentaram uma redução da taxa de proliferação celular, em ambos os sítios analisados, maior do que GC e GF. Em T3 os valores retornam ao equilíbrio, exibindo valores maiores que os em T1. No BL o pAgNOR>1 e 2 mostrou uma diferença estatística entre os grupos em T1 e T2. O sítio AB apresentou diferença estatística no pAgNOR>1, em T2, mostrando que indivíduos do GC e GAF apresentam velocidade de proliferação menor quando comparados ao GF. CONCLUSÕES: O estudo mostrou que o GAF apresenta maior flutuação, de mAgNOR, que o GC e GF, ao longo do tempo. Estudo futuros ampliando o tempo de controle, controlando os agentes carcinógenos, e observando indivíduos com características populacionais seriam convenientes para buscar a padronização deste modelo de prevenção de câncer. / OBJECTIVE: evaluate, through cytopathology associated with AgNOR technique, the reflection of smoking cessation on the speed of proliferation of desquamated epithelial cells of tongue edge (TE) and mouth floor (MF) over time. METHODS: We included in the initial sample 138 individuals. Samples were collected at an early time (T1), after 8-15 months (T2) and after 16-30 months (T3). Participants were divided into three groups, according to the following criteria: control group (CG) (n = 71): patients seen at the Faculty of Dentistry at UFRGS, who had never smoked and who drank till 30g of alcohol a week. Abandonment group Smoke (AS) (n = 26): individuals in monitoring the Group of Smokers of Hospital de clínicas dePorto Alegre (HCPA), who smoked at the time of the initial work, and that over time ceased the smoking habit. Alcoholic or not. Tobacco group (TG) (n = 41): follow-up individuals in the group of smokers HCPA, who smoked at the time of the initial work, and that did not stop the smoking habit during the research. Alcoholic or not. Samples were subjected to AgNOR technique and quantified for three calibrated examiners. The average AgNOR per core (Magnor) and the percentage of cells with 1, 2 and 3 AgNOR (pAgNOR> 1, pAgNOR> 2 and pAgNOR> 3) were calculated on the first 50 cells, nucleated, nonoverlapping, and well- distended. RESULTS: At the end of the experimental time groups had 9 individuals in each. There were no statistical difference of mAgNOR and pAgNOR> 3 between the groups in different times on both sites. A tendency to decrease in the proliferation rate was observed, at the intermediate time, and a trend of increase in the end time for all groups in T1, the smoke exposed groups (AS and TG) showed higher proliferation rate, compared the CG in the TE. MF in the CG presents values greater than AS. In T2, AS individuals showed a reduction in cell proliferation rate in both sites evaluated greater than TG and CG. In T3 values return to equilibrium, exhibiting values greater than the T1. TE in the pAgNOR> 1 and 2 showed a statistical difference between groups in T1 and T2. The site MF showed statistical difference in pAgNOR> 1, T2, showing that CG and the AS show less proliferation of speed when compared to the TG. CONCLUSIONS: The study showed that the AS has greater fluctuation mAgNOR that CG and TG, over time. Future study extending the time control, controlling carcinogens, and observing individuals with population characteristics would be convenient to seek standardization of this cancer prevention model.

OBJETIVO: avaliar através da citopatologia, associada a técnica AgNOR, o reflexo da cessação do fumo sobre a velocidade de proliferação das células epiteliais descamadas de borda de língua (BL) e assoalho de boca (AB), ao longo do tempo. MÉTODOS: Foram incluídos na amostra inicial 138 indivíduos. As coletas foram realizadas em um momento inicial (T1), após 8-15 meses (T2) e após 16-30 meses (T3). Os participantes foram divididos em três grupos de acordo com os seguintes critérios: Grupo Controle (GC) (n=71): indivíduos atendidos na Faculdade de Odontologia da UFRGS, que nunca fumaram, e que ingeriam até 30g de álcool por semana. Grupo Abandono de Fumo (GAF) (n=26): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do Hospital de Clínicas de Porto Alegra (HCPA), que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que ao longo do tempo cessaram o hábito tabágico. Alcoolistas ou não. Grupo Fumo (GF) (n=41): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do HCPA, que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que não cessaram o hábito tabágico ao longo da pesquisa. Alcoolistas ou não. As amostras foram submetidas à técnica de AgNOR e quantificadas por três examinadores previamente calibrados. A média de AgNOR por núcleo (mAgNOR) e a porcentagem de células com mais de 1, 2 E 3 AgNORs (pAgNOR>1, pAgNOR>2 e pAgNOR>3) foram calculados nas 50 primeiras células, nucleadas, não sobrepostas, e bem distendidas. RESULTADOS: ao final dos tempos experimentais os grupos tinham 9 individuos em cada. Não foram observada diferença estatística do mAgNOR e pAgNOR>3 entre os grupos avaliados, nos diferentes tempos em ambos os sítios. Foi observada uma tendência à diminuição na velocidade de proliferação, no tempo intermediário, e uma tendência a aumentar no tempo final, em todos os grupos Em T1, os grupos expostos ao fumo (GAF e GF) apresentavam velocidade de proliferação mais elevada, se comparados ao GC no BL. No AB o GC apresenta valores maiores que GAF. Em T2, os indivíduos do GAF apresentaram uma redução da taxa de proliferação celular, em ambos os sítios analisados, maior do que GC e GF. Em T3 os valores retornam ao equilíbrio, exibindo valores maiores que os em T1. No BL o pAgNOR>1 e 2 mostrou uma diferença estatística entre os grupos em T1 e T2. O sítio AB apresentou diferença estatística no pAgNOR>1, em T2, mostrando que indivíduos do GC e GAF apresentam velocidade de proliferação menor quando comparados ao GF. CONCLUSÕES: O estudo mostrou que o GAF apresenta maior flutuação, de mAgNOR, que o GC e GF, ao longo do tempo. Estudo futuros ampliando o tempo de controle, controlando os agentes carcinógenos, e observando indivíduos com características populacionais seriam convenientes para buscar a padronização deste modelo de prevenção de câncer. / OBJECTIVE: evaluate, through cytopathology associated with AgNOR technique, the reflection of smoking cessation on the speed of proliferation of desquamated epithelial cells of tongue edge (TE) and mouth floor (MF) over time. METHODS: We included in the initial sample 138 individuals. Samples were collected at an early time (T1), after 8-15 months (T2) and after 16-30 months (T3). Participants were divided into three groups, according to the following criteria: control group (CG) (n = 71): patients seen at the Faculty of Dentistry at UFRGS, who had never smoked and who drank till 30g of alcohol a week. Abandonment group Smoke (AS) (n = 26): individuals in monitoring the Group of Smokers of Hospital de clínicas dePorto Alegre (HCPA), who smoked at the time of the initial work, and that over time ceased the smoking habit. Alcoholic or not. Tobacco group (TG) (n = 41): follow-up individuals in the group of smokers HCPA, who smoked at the time of the initial work, and that did not stop the smoking habit during the research. Alcoholic or not. Samples were subjected to AgNOR technique and quantified for three calibrated examiners. The average AgNOR per core (Magnor) and the percentage of cells with 1, 2 and 3 AgNOR (pAgNOR> 1, pAgNOR> 2 and pAgNOR> 3) were calculated on the first 50 cells, nucleated, nonoverlapping, and well- distended. RESULTS: At the end of the experimental time groups had 9 individuals in each. There were no statistical difference of mAgNOR and pAgNOR> 3 between the groups in different times on both sites. A tendency to decrease in the proliferation rate was observed, at the intermediate time, and a trend of increase in the end time for all groups in T1, the smoke exposed groups (AS and TG) showed higher proliferation rate, compared the CG in the TE. MF in the CG presents values greater than AS. In T2, AS individuals showed a reduction in cell proliferation rate in both sites evaluated greater than TG and CG. In T3 values return to equilibrium, exhibiting values greater than the T1. TE in the pAgNOR> 1 and 2 showed a statistical difference between groups in T1 and T2. The site MF showed statistical difference in pAgNOR> 1, T2, showing that CG and the AS show less proliferation of speed when compared to the TG. CONCLUSIONS: The study showed that the AS has greater fluctuation mAgNOR that CG and TG, over time. Future study extending the time control, controlling carcinogens, and observing individuals with population characteristics would be convenient to seek standardization of this cancer prevention model.

Many animals, including zebrafish (Danio rerio), form social hierarchies as a result of competition for limited resources. Socially subordinate fish experience chronic activation of the hypothalamic-pituitary-interrenal (HPI) axis, leading to prolonged elevation of plasma cortisol, the glucocorticoid end-product of HPI axis activation. Elevated cortisol levels can reduce cellular proliferation and neurogenesis in the brain. Thus, the present study tested the hypothesis that social stress suppresses cellular proliferation in the brain of subordinate zebrafish via a cortisol-mediated mechanism. Cellular proliferation was assessed using the incorporation of 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU), a thymidine analogue, as a marker. After 48 and 96 h of social interaction, significantly lower numbers of BrdU-positive cells were present in the forebrain of subordinate male zebrafish compared to dominant or control fish, suggesting a suppression of cellular proliferation in fish experiencing chronic social stress. Treatment of interacting male zebrafish with metyrapone, a cortisol synthesis inhibitor, attenuated the suppression of cellular proliferation in subordinate fish. Subordinate female zebrafish did not experience elevation of plasma cortisol or suppression of cellular proliferation in the forebrain. Collectively, these data provide evidence that cortisol plays a role in regulating cellular proliferation in the forebrain of male zebrafish during social interactions.

The present study was designed to determine the effect of skin-temperature-biofeedback training on cellular proliferation in three psoriasis patients. It was hypothesized that (a) psoriasis patients would be able to consciously decrease skin temperature of psoriatic tissue, and (b) there would be a positive correlation between rate of cellular proliferation and temperature change. Results obtained indicated biofeedback training to be effective in decreasing the surface temperature of psoriatic tissue. A 2 X 7 analysis of variance for two repeated measures indicated the change in skin temperatures as a function of sample period to be significant, F (6,26) = 3.29, p < .02. Generalization of temperature-training effects from the biofeedback to the no-feedback condition were observed. Rate of proliferation decreased from pretraining to posttraining biopsies.

Le facteur d'initiation de la traduction eIF3f est une des sous-unités constituant le facteur d'initiation de la traduction eIF3. Au niveau musculaire la surexpression de eIF3f dans les myotubes induit une hypertrophie associée à une augmentation de la synthèse protéique. A l'inverse, l'inhibition de l'expression de eIF3f entraîne une atrophie associée à une diminution de la synthèse protéique. Ce travail de thèse a permis (i) in vitro de mettre en évidence les fonctions inhibitrices du facteur eIF3f au cours de la prolifération des myoblastes C2C12 et par une étude transcriptomique sur les fractions polysomales de caractériser les ARNm recrutés par eIF3f dans des conditions hypertrophiques; et (ii) de créer des lignées de souris inactivées pour eIF3f (souris KO eIF3f) et surexprimant eIF3f dans le muscle (souris transgénique eIF3f K5-10R) afin d'étudier in vivo l'impact de la modification de l'expression de eIF3f sur la régulation de la masse musculaire. / The eukaryotic initiation factor eIF3f is one of the subunits of the translation initiator complex eIF3 required for several steps in the initiation of mRNA translation. In skeletal muscle, recent studies have demonstrated that eIF3f overexpression in myotubes exerts a hypertrophic activity associated to an increase in protein synthesis. This thesis shed light on muscle eIF3f functions by (i) characterizing in vitro the antiproliferative activity of this factor in C2C12 myoblasts and the RNAs recruited by eIF3f on polysomal fractions in hypertrophied myotubes and (ii) generating mice strains inactivated for eIF3f (eIF3f KO mice) and overexpressing eIF3f specifically in muscle (eIF3f K5-10R transgenic mice) to study in vivo the impact of eIF3f modulation on the muscular mass homeostasis

O bFGF (fator de crescimento fibroblástico básico) é um dos fatores envolvidos na organogênese placentária. O fator participa da regulação dos processos de angiogênese, de crescimento e desenvolvimento placentário e de proliferação e diferenciação das células placentárias. A homeostase tecidual requer balanço entre proliferação e morte celular. A identificação de células em atividade proliferativa pode ser feita pela detecção do antígeno Ki-67 presente no núcleo das células em proliferação. Objetivou-se estudar a distribuição espaço-temporal do bFGF e dois de seus receptores, FGFR1 e FGFR2, na placenta bubalina correlacionando-a à proliferação celular. Foram utilizadas treze placentas de fêmeas da espécie bubalina em diferentes fases da gestação, divididas em quatro grupos. Grupo 1 (n=4), placentas de 3 meses; grupo 2 (n=4), 5 meses; grupo 3 (n=1), 8 meses e grupo 4 (n=4), 9,5 meses. Para a detecção da proteína do bFGF, FGFR1 e FGFR2 bem como do antígeno Ki-67 foram realizados testes de imuno-histoquímica. Para tal, bloqueou-se a peroxidase endógena com peróxido de hidrogênio PA a 1% em metanol e as reações inespecíficas com soro eqüino. A incubação com os anticorpos primários anti-Ki-67, anti-bFGF, anti-FGFR1 e anti-FGFR2 foi feita a 4°C por vinte e quatro horas e a incubação com o anticorpo secundário universal por vinte minutos em temperatura ambiente. Foi utilizado um complexo avidina-biotina para amplificar a reação e para revelação utilizou-se Nova Red&reg;. A análise dos resultados foi feita em microscópio óptico em aumento de 400 vezes através do sistema de imagens KS-400. Utilizou-se o programa Graph Prism 4 para análise estatística dos resultados. Foi detectada a expressão da proteína do bFGF e seus receptores no núcleo e citoplasma de células do estroma e epitélio maternos e fetais da placenta bubalina de maneira tempo-dependente ao longo da gestação. A atividade proliferativa apresentou perfil decrescente do início até o final da gestação. A correlação observada entre a expressão do bFGF e do Ki-67 nas células do epitélio materno e fetal e estroma materno foi positiva (r = 0,282, r = 0,313 e r = 0,469, respectivamente; p < 0.05); entre FGFR1 e Ki-67 a correlação foi mais elevada para as células do estroma e epitélio maternos e estroma fetal (r = 0,739, r = 0,511 e r = 0,358; p<0,0001) e negativa para o epitélio fetal (r = -0.211); FGFR2 e Ki-67 a correlação foi negativa para as células epitélio materno (r = -0,027) e positiva para o epitélio e estroma fetal (r = 0,384 e r = 0,268; respectivamente; p < 0.05). Pode-se concluir a partir dos resultados obtidos que existe uma correlação positiva entre a expressão da proteína do bFGF de seus receptores 1 e 2 e o antígeno Ki-67. No entanto, essa correlação é dependente do tipo celular e da fase de gestação analisadas, e aponta para um possível envolvimento do bFGF e seu receptor 2 na proliferação do trofoblasto enquanto o receptor 1 modularia a ação de outro agente proliferativo no epitélio materno e estromas materno e fetal. / The bFGF (basic Fibroblast Growth Factor) is involved in the placental organogesis as a potent angiogenic molecule and is related to the growing and development of the placenta and proliferation of placental cells. Tissue homeostasis requires a balance between cell proliferation and cell death. The identification of proliferating cells can be made through the detection of Ki-67 nuclear antigen, present in these cells. The aim of this study was to evaluate the space-temporal expression of bFGF and two of its receptors, FGFR1 and FGFR2, in buffalo placenta in correlation to proliferative activity. In this study 13 buffalo placentas in different gestational phases were collected and divided into four groups. Group 1 (n=4), three moth-old placentas; group 2 (n=4), five month-old; group 3 (n=1), eight month-old and group 4 (n=4), 9.5 month-old. For the localization of bFGF, FGFR1, FGFR2 proteins and Ki-67 antigen, immunohistochemical assays were carried out. For that purpose, endogenous peroxidase activity was blocked with 1% Hydrogen Peroxide PA in methanol and non-specific binding with equine serum (1:10). Incubations with primary antibodies anti-Ki-67, anti-bFGF, anti-FGFR1 and anti-FGFR2 were made for 24 hours at 4°C. Incubation with universal secondary antibody (1:200) was made for 20 minutes in moist chamber at room temperature. Avidin/biotinylated horseradish ABC Elite Kit was used to amplify and Nova Red&reg; to develop the immunostaining. Slides were observed under a light microscope at 400 times magnification and photographed with KS-400 image program. Graph Prism 4.0 program was used for statistical analysis. Expression of the bFGF and its receptors proteins was detected in the nucleus and cytoplasm of buffalo placental cells during gestation. Placental proliferative activity was evaluated through the expression of Ki-67 antigen. The correlation observed between bFGF and Ki-67 expression in the maternal and fetal epithelium and maternal stroma cells was positive (r = 0,282, r = 0,313 e r = 0,469, respectively; p < 0.05). Between FGFR1 and Ki-67 the correlation was higher for maternal epithelial and stroma and fetal stroma cells (r = 0,739, r = 0,511 e r = 0,358, respectively; p<0,0001) and negative for fetal epithelium (r = -0.211). FGFR2 and Ki-67 correlation observed was negative for maternal epithelium cells (r = -0,027) and positive for fetal epithelium and stroma cells (r = 0,384 e r = 0,268; respectively; p < 0.05). We conclude that bFGF and its receptors 1 and 2 are positively correlated to the expression of the Ki-67 antigen, depending on cell type and gestational period. The results suggest that bFGF and its receptor 2 may be involved in the modulation of trophoblast proliferation, whereas FGFR1 may modulate proliferation in the maternal epithelium and fetal and maternal stroma, probably through the binding to another growth factor (s).