70% des mutations identifiées sur le gène responsable de la mucoviscidose correspondent à la délétion de la phénylalanine en position 508 du domaine NBD1 de la protéine CFTR. Cette mutation est responsable, à 37°C, d'un mauvais repliement, du blocage et de la dégradation rapide de CFTR au niveau du réticulum endoplasmique (RE). Plusieurs études ont montré que CFTR-F508del est dégradée au niveau du cytoplasme par le protéasome après translocation à travers le canal Sec61. Cependant cette dégradation n'est pas affectée par l'ATP et n'est inhibée que partiellement par les inhibiteurs les plus spécifiques du protéasome. Par ailleurs, une série d'observations a suggéré que la dégradation de CFTR-F508del est un processus impliquant d'autres voies protéolytiques dont la nature reste encore inconnue.<br />Au cours de mon doctorat, j'ai essayé de caractériser ces voies de dégradation en approfondissant le rôle de l'ATP et du protéasome et surtout en mettant en évidence l'implication de voies dépendantes du GTP. Mon travail a été réalisé en deux étapes. La première a porté sur l'étude de la dégradation de CFTR mutée au niveau microsomale, et la deuxième sur la caractérisation de cette voie au niveau cellulaire. L'ensemble des résultats montre, pour la première fois, qu'il n'y a pas de corrélation entre l'activité protéasomale et la dégradation de CFTR-F508del au niveau du RE. Cette dernière est dégradée par une voie GTP-dépendante impliquant les protéines G hétérotrimériques et localisée au niveau du RE.

Mutations in the gene encoding the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator protein (CFTR) cause cystic fibrosis (CF), the most common life-shortening genetic disease among Caucasians. Although general features of the structure of CFTR have been predicted from homology models, the conformational changes that result in channel opening and closing have yet to be resolved. We created new closed- and open-state homology models of CFTR, and performed targeted molecular dynamics simulations of the conformational transitions in a channel opening event. The simulations predict a conformational wave that starts at the nucleotide binding domains and ends with the formation of an open conduction pathway. Experimentally confirmed changes in side-chain interactions are observed in all major domains of the protein. We also identified unique-to-CFTR substitutions that may have led to channel activity in CFTR. Molecular modeling and simulations are used to compare the effects of these substitutions against a canonical ABC transporter, and suggest that gain of channel function in CFTR may have risen from loss of ATPase function at its NBDs. The models and simulation add to our understanding of the mechanism of ATP-dependent gating in this disease-relevant ion channel.

Class of 2012 Abstract / Specific Aims: The epithelial sodium channels (ENaC) found on the apical membranes of epithelial cells including those lining the respiratory tract are the rate limiting step of the absorption of excess fluid from the airspace of the alveoli. ENaC function is modulated by the effects of various physiologic signals such as the adrenergic and purinergic pathways, in addition to other local channels which control the flow of negatively charged ions such as the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR). We sought to determine the influence of genetic variation on the alpha subunit of ENaC at amino acid position 663 on baseline exhaled ions and pulmonary function in patients with CF. Methods: We assessed pulmonary function ( forced vital capacity[FVC], forced expiratory volume in one second [FEV1], forced expiratory flow maximum[FEFmax]) using a Medical Graphics cardiopulmonary testing device (Minneapolis, MN). Measures of exhaled sodium (Na+) and chloride (Cl-) were obtained using exhaled breathe condensate collected on a Jaeger Ecoscreen condenser unit (Cardinal Health, Yorba Linda, CA) with Na+ quantification using an atomic absorption spectrophotometer (Analyst 100; Perkin Elmer, Norwalk, CT) and Cl- anion quantification using a Dionex AS11 HC column. Healthy n=31 (n=18[58%], 9[29%], and 4[13%] subjects; Body mass index (BMI)=23±1, 25±2, and 25±2kg/ m2 for AA, AT and TT groups respectively). CF n= 42 (n=33[79%], 7[16%], and 2[5%] subjects; BMI equals 23±7, 19±0.4, and 20±2.2kg/m2 for AA, AT and TT groups respectively). Main Results: We found that the distribution of genotypes in CF differed from healthy subjects, with the AA genotype in 80% of CF and 59% in healthy. No significant difference were demonstrated in healthy subjects between genotype groups for pulmonary function and exhaled chloride while the genotypes did differ in exhaled Na (Na=2.9±0.4, 1.7±0.3, and 3.7±1.1mmol/L for AA, AT, and TT respectively, ANOVA p=0.07). CF subjects with the AA genotype had a higher baseline exhaled Cl-, FEV1, and FEFmax than those in the AA group (Cl=0.125±0.038,0.0 27±0.007, and 0.033±0.02 mmol/L ; FEV1=71±5, 68±11, and 40±22L; FEFmax=86±4, 72±7, and 44±24L/sec; for AA, AT, and TT respectively, ANOVA p<0.05, Tukey [AA vs. TT] p<0.05) while exhaled Na+ and FVC were similar between genotypes. Conclusions: Our results suggest that CF subjects with the AA genotype of the alpha subunit of the ENaC have a higher baseline exhaled Cl- and a resulting increase in pulmonary function when compared to the overactive TT groupCF patients with the TT αENaC genotype are likely candidates for early identification and treatment with inhaled ENaC inhibitors or other modulators of this pathway in order to improve survival.

Cystic Fibrosis (CF) is a degenerative disorder that is often associated with chronic lung disease. CF is caused by mutations in the gene encoding the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) chloride channel, which lead to defective chloride and sodium ion movement across epithelia. Subsequent dehydration of the airway surface liquid (ASL) on airway epithelia, is associated with poor mucociliary clearance and chronic lung infection. The monogenic nature of CF, along with the accessibility of the lung, makes the disease amenable to gene replacement therapy. Gene therapy clinical trials have focused on replacing the mutated CFTR with a functional copy, which has led to improved chloride transport, but has shown no significant effects on sodium transport. An alternative strategy for CF gene therapy therefore, could be to reduce the expression of the epithelial sodium channel (ENaC) in the lung, using RNA interference (RNAi), combined with CFTR delivery. Developing a dual-function gene transfer vector could potentially restore chloride and sodium levels in the ASL and help alleviate CF lung disease. The aim of this thesis was to develop a recombinant lentivirus delivery system capable of simultaneously delivering CFTR expression and knocking down ENaC expression in the airways. A modular HIV vector genome plasmid was developed to allow simple insertion of various promoter elements, transgenes and knockdown sequences, for subsequent virus production. Insertion of the CFTR transgene and a short-hairpin RNA (shRNA) sequence targeting the ENaC alpha subunit (ENaC&alpha;) resulted in significant knockdown of human ENaC&alpha; and simultaneous expression of CFTR in A549 (human lung carcinoma) cell culture. Replacement of the ENaC&alpha; shRNA with an shRNA targeting the transcription factor BACH1 resulted in target gene knockdown and concomitant HMOX1 up-regulation, confirming specific knockdown effects, and demonstrating that the dual-function rLV vector could mediate target gene knockdown irrespective of the target. Attempts were made to knock down BACH1 in primary cultures of human bronchial epithelial cells grown at the air-liquid interface (ALI), but improved transduction efficiencies from the apical surface will be required to generate successful knockdown in this experimental model. These studies provide proof-of-principle for the utility of this versatile dual-function prototype virus. The dual function vector not only has the potential for treatment of CF lung disease, but could be readily altered to target other lung diseases where combinations of prolonged target gene knockdown and gene expression/up-regulation could collectively provide an appropriate therapy. In conclusion, the focus on the rational design of gene transfer vectors for specific therapeutic effects will aid the development and translation of gene therapy approaches to human studies.

La maladie osseuse liée à la fibrose kystique (MOLFK) est une comorbidité qui se caractérise par une faible densité osseuse découlant d’une diminution de la formation osseuse et d’une augmentation de la résorption osseuse. Les ostéoblastes (Ob), les cellules responsables de la formation osseuse, sont principalement affectées par la MOLFK. Le Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR), dont le gène est muté chez les patients FK, est exprimé par les Ob. Des études réalisées sur des modèles murins FK ont démontré que l’expression du gène Cftr est importante pour la différenciation des cellules souches mésenchymateuses (CSM) en Ob matures et pour la fonction des Ob. Nous avons également montré que l’absence du CFTR affecte les cellules mâles et femelles de façon distincte. Or, les mécanismes par lesquels l’absence du CFTR entraine ces perturbations restent méconnus. Afin d’expliquer ces perturbations, nous avons ciblé l’hormone parathyroïdienne (PTH) dont la liaison à son récepteur PTHR1 active des voies de signalisation impliquées dans la régulation de la différenciation des Ob. Nous proposons que l'absence du CFTR mènera à une altération sexe spécifique de la réponse à la PTH des CSM et des Ob. En utilisant des cellules issues de souris mâles et femelles Cftr+/+ et Cftr-/- traitées ou non à la PTH, nous avons investigué: 1) les niveaux d’expression génique et protéique de PTHR1; 2) l’activation de l’une des voies de signalisation PTH/PTHR1 (ERK1/2); 3) les niveaux d’expression des gènes cibles ostéoblastiques (receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL), ostéoprotégérine (OPG), Runx2, phosphatase alcaline (ALP), ostéocalcine) et ostéocytaires (Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE) et sclérostine) et; 4) la fonction ostéoblastique (activité de l’ALP). Nos résultats montrent que les niveaux d’expression génique de PTHR1 sont similaires entre les cellules Cftr+/+ et Cftr-/- traitées ou non à la PTH mais que l’expression protéique basale de PTHR1 est abaissée chez les cellules Cftr-/- femelles. La PTH induit la phosphorylation de ERK1/2 dans les cellules Cftr+/+ (mâles et femelles) et Cftr-/- mâles alors que cet effet est absent chez les cellules Cftr-/- femelles. La PTH augmente le ratio RANKL/OPG et diminue l’expression des gènes ostéoblastiques et ostéocytaires des cellules Cftr+/+ alors que les cellules Cftr-/- femelles démontrent une absence complète de réponse à la PTH. L’activité de l’ALP ne diffère pas entre les cellules Cftr+/+ et Cftr-/- traitées ou non à la PTH. Ces résultats suggèrent que l’absence du CFTR est associée à des altérations de la réponse à la PTH des CSM et Ob murins plus marquées chez les femelles. Une meilleure compréhension de la physiopathologie de la MOLFK et de l’influence du sexe biologique, pourrait mener à une personnalisation des thérapies de la MOLFK. / Cystic fibrosis bone-related disease (CFBD) is a comorbidity characterized by the presence of low bone mass resulting from a decrease in bone formation and an increase in bone resorption. Osteoblasts (Ob), the cells responsible for bone formation, are primarily affected by CFBD. The Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR), the mutated gene in cystic fibrosis (CF), is expressed by Ob. Using CF mouse models, we and other have shown that the presence of Cftr is important for the differentiation of murine mesenchymal stem cells (MSCs) into mature Ob and for Ob function. Interestingly, we found that the loss of CFTR affected cells coming from males and females differently. However, the mechanisms by which the CFTR causes these alterations are poorly understood. In order to explain these alterations, we focused on the parathyroid hormone (PTH)-PTHR1 signaling pathways, which are involved in the regulation of Ob differentiation. We propose that the absence of CFTR leads to gender-specific alterations in the response of MSCs and Ob to PTH. Using cells isolated from Cftr+/+ and Cftr-/- males and females and treated or not with PTH, we investigated the : 1) gene and protein expression levels of PTHR1; 2) activation of one of the PTH-PTHR1 signaling pathways (ERK1/2); 3) expression levels of Ob (receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL), osteoprotegerin (OPG), Runx2, alkaline phosphatase (ALP), osteocalcin) and osteocyte target genes (Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE) and sclerostin) and; 4) osteoblast function (ALP activity). Our data show that gene expression levels of PTHR1 are similar between Cftr+/+ and Cftr-/- treated or not with PTH; however basal protein expression of PTHR1 is decreased in Cftr-/- female cells. PTH induces ERK1/2 phosphorylation in Cftr+/+ (males and females) and Cftr-/- (males), but this effect is absent in cells coming from Cftr-/- females. PTH increases the RANKL/OPG ratio and decreases the expression of Ob and osteocyte genes in Cftr+/+ cells. PTH fails to modulate the expression of these genes in Cftr-/- female cells. ALP activity is similar between Cftr+/+ and Cftr-/- cells treated or not with PTH. These results suggest that the absence of CFTR is associated with alterations in the response to PTH of murine MSCs and Ob that are more pronounced in cells coming from females. A better understanding of the pathophysiology of CFBD, and the influence of biological sex, may lead to better tailored therapies for CFBD.

Background: Cystic fibrosis (CF) is a hereditary disorder caused by genetic mutations, which affect the chloride ion channels, leading to disrupted salt balance in different organs. A lack of properly functioning chloride ion channels can lead to formation of thick mucus, which hinders organ function, especially in the lungs where repeated inflammation occurs. Early diagnosis is critical to prevent further deterioration of the patient's condition. Current method of analysis of CF diagnostics uses conductivity meters to measure sweat electrolytes. However, current guidelines suggest using a chloridometer to directly measure chloride concentration, is the most reliable marker of cystic fibrosis. The aim of this project was to conduct a comprehensive evaluation of the new instrument's safety, reliability, validity, and conformity of the reference range to international chloride meter guidelines. Additional aims were to investigate the effect of storage conditions on sweat chloride concentration levels and examine the effect of increased salt intake on sweat test results. The study recruited healthy participants and took samples of their sweat by inducing sweat gland secretion. The chloride ion concentration was determined using a coulometric method. The results of the study found that the new method was reliable and matched international protocols. It also revealed that an increased salt consumption can impact chloride concentration in sweat, but not to an extent that it can affect medical decisions. Additionally, the study demonstrated that sweat samples can be frozen for up to two weeks without affecting the outcome of the chloride determination.

Yes / Type II congenitalLong QT syndrome (LQT2) is due to genetic mutations in hERG channel. Genetic or pharmacological factors could potentially affect hERG channel biogenesis and contributes to LQTS, for example, disease mutations G601S and T473P result in hERG trafficking deficiency [1,2]. Various rescue strategies for hERG dysfuction are being developed. Some correctors for CFTR channel have been reported to act indirectly on proteostasis pathways to promote folding and correction on hERG trafficking deficiency [3]. In this study, we tested the hypothesis that the CFTR corrector KM-11060 and the potentiator PG-01 may correct hERG mutation trafficking diseases. We use HEK293 cell line expressing a well-studied trafficking disease mutation G601S-hERG channel [4]. We treated cells with CFTR potentiator PG-01and corrector KM-11060, which function through different cellular mechanisms, and assessed whether correction occurred via immunoblotting. Whole cell proteins from HEK 293 cells expressing hERG channels were used for analysis [5]. Proteins were separated on 8% SDS-polyacrylamide electrophoresis gels for 1 hour, transferred onto PVDF membrane, and blocked for 1 h with 5% nonfat milk. The blots were incubated with the primary antibody (Santa Cruz Biotechnology) for 12-16 h at 4C temperature and then incubated with a donkey antigoat horseradish peroxidase-conjugated secondary antibody( Santa Cruz Biotechnology). Actin expression was used for loading controls. The blots were visualized using the ECL detection kit (Genshare).Results were deemed significantly different from controls by a one-way ANOVA (p < 0.05). Our results show that both KM-11060 (5, 10, 20uM) and PG-01(5, 15 uM) can correct G601S mutant alleles of hERG protein trafficking (Fig 1, 2). KM-11060 (20uM) but not PG-01(15 uM) enhance protein expression of wild type hERG channel (Fig 2). Further treatment on cells at low temperature with different drug concentration will be tested. Functional studies are also needed to test whether the drugs can correct the function of hERG mutation channel. These results could potentially provide novel insight into the correction mechanism of CFTR potentiator and also help to develop new treatment for LQT2.

La Fibrose kystique (FK), causée par des mutations du canal Cl- CFTR, entraîne une dysfonction de la sécrétion de Cl- et un débalancement dans la sécrétion des fluides. La diminution de la clairance mucociliaire qui s’en suit occasionne une accumulation du mucus. Cet environnement est alors favorable à l’installation d’infections et d’inflammation chroniques, responsables de lésions au niveau de l’épithélium respiratoire. Le vieillissement de la population FK, suite à la prise en charge plus appropriée de la maladie, est accompagné par l’émergence de pathologies associées, telles que le diabète. Celui-ci, ainsi que plusieurs autres facteurs comme l’infection à Pseudomonas aeruginosa, contribuent au déclin progressif de la fonction pulmonaire, principale cause de mortalité et de morbidité des patients FK. Le maintien de la fonction pulmonaire est dépendant notamment du transport ionique et liquidien régulant la clairance mucociliaire ainsi que de la réparation épithéliale nécessaire à la génération d’un épithélium fonctionnel en réponse aux agressions. Nous avons donc évalué l’impact de l’hyperglycémie et des exoproduits de P. aeruginosa sur ces deux mécanismes. Nos résultats ont tout d’abord montré qu’un niveau de glucose élevé diminue les courants Cl- CFTR et potassique et altère la réparation de l’épithélium bronchique FK et non FK. Nous avons aussi observé que l’hyperglycémie limite l’impact bénéfique de la correction de CFTR sur la réparation épithéliale. Dans un second temps, nous avons évalué l’impact de l’infection à Pseudomonas aeruginosa sur le CFTR, qui tient un rôle important dans la fonctionnalité de l’épithélium des voies aériennes non-FK. Nous avons noté que l’expression du CFTR ainsi que sa fonction sont réduites par l’exposition aux produits bactériens dans les cellules non-FK. De plus, ces exoproduits compromettent la maturation du CFTR muté par les correcteurs ainsi que leur bénéfice sur la réparation de l’épithélium FK. Finalement, nous avons testé différentes combinaisons de composés correcteurs et potentiateurs de CFTR afin de déterminer quelle stratégie serait la plus efficace afin de favoriser la réparation épithéliale bronchique FK malgré la présence d’infection. / Cystic fibrosis (CF), caused by mutations in the CFTR gene, is characterized by dysfunctional Cl- secretion and an imbalance in ion/fluid transport resulting in a decrease in mucociliary clearance. Accumulation of mucus then occurs and this favors bacterial infection in the airways. Chronic infection and inflammation is then responsible for progressive injuries to the lung epithelium. These mechanisms are associated with a decline in lung function, the main cause of morbidity and mortality in CF. The recent improvement in clinical care of patients with CF has led to an increase in median life expectancy, which allows the emergence of comorbidities, such as CF-related diabetes (CFRD). Because Pseudomonas aeruginosa infection and CFRD have been associated with decreased lung function, we investigated their impact on ion transports and epithelial repair, two main functions of airway epithelia. First, our results showed a reduction in Cl- secretion by CFTR and total K+ currents through CF and non-CF airway epithelial cells in hyperglycemic conditions. Moreover, our data indicated a decrease in wound closure rates of airway cell monolayers after exposure to high glucose. We also demonstrated an impairment of the beneficial effect of CFTR correctors on repair rates. The second part of our studies reveals a deleterious impact of Pseudomonas aeruginosa diffusible material (PsaDM) on CFTR expression and function in non-CF airways cells. Importantly, we showed, for the first time, that the presence of PsaDM altered the functional rescue of mutated CFTR by correctors and dampened their beneficial effect on CF wound repair. Finally, we tested several different combinations of corrector and potentiators in order to identify the most efficient compounds to improve the repair rates of CF monolayers despite the presence of PsaDM. Overall, our research demonstrated a deleterious impact of CFRD and PsaDM on ion transports and wound closure. Moreover, the new therapies with correctors may also be impacted by these two components.

Les patients atteints de la fibrose kystique (FK) ont désormais un âge médian de survie dépassant la cinquantaine. Par contre, avec ce vieillissement surviennent de nouvelles complications dont l'une des plus prévalente est la maladie osseuse associée à la FK. Les souris dont le Cftr est invalidé génétiquement présentent une densité osseuse amoindrie qui découle d’un débalancement du remodelage osseux caractérisé par une diminution de la formation et une augmentation de la résorption osseuse. L'observation que plusieurs modèles murins FK ont un phénotype ostéopénique et ce, même en absence de certains facteurs étiologiques (inflammation chronique, prise de glucocorticoïdes, insuffisance pancréatique etc.) laisse croire que le Cftr, le gène muté dans la FK, joue un rôle non-négligeable dans le métabolisme osseux. Le présent projet étudiera l’impact de l’absence du CFTR, sur les ostéoblastes (Ob) et ostéoclastes (Oc) dans un modèle murin de FK, soit les souris Cftr-/- de souche BALB/c. De plus, les Ob, sont reconnus comme ayant un effet modulateur sur le microenvironnement leucocytaire de la moelle osseuse (MO). Ce projet visera également à investiguer l’impact de l’absence du CFTR sur la niche leucocytaire de la MO. Nos résultats de densitométrie osseuse et de microtomographie à rayons X ont confirmé que les souris Cftr -/- ont une densité osseuse et un contenu minéral osseux abaissé, une diminution du volume osseux trabéculaire, un nombre amoindri de travées osseuses et une plus grande séparation entre les travées comparé aux souris Cftr+/+. Afin de mieux comprendre ce phénotype osseux, nous avons vérifié et confirmé que l’expression génique et protéique du CFTR est présente chez des Ob dérivés de la MO, mais est absent au niveau des Oc dérivés de la MO. Ces observations corroborent nos résultats portant sur la différenciation des cellules osseuses où nous avons démontré que seule la différenciation et fonction ostéoblastique sont affectées par l'absence du CFTR. Ce défaut ostéoblastique semble influencer négativement la leucopoïèse puisque nous observons une quantité moindre de cellules T, de macrophages et de cellules dendritiques chez les souris Cftr -/- vs. Cftr +/+. À la lumière de ces résultats, l'absence du CFTR semble avoir un impact important sur les ostéoblastes et la moelle osseuse. / With cystic fibrosis (CF) patients now being able to live past fifty years of age come a multitude of secondary complications; one of the most important being cystic fibrosis-related bone disease (CFBD). In Cftr-null mice, this disease is caracterized by a low bone mineral density caused by an uncoupled bone remodeling. However, the observation that various models of CF mice display a bone phenotype despite the absence of the usual human confounders (i.e. inflammation, steroid hormone use, pancreatic insufficiency, etc.) led us to propose that CFTR, itself, plays a non-negligible role in the regulation of bone metabolism. This project will study the impact of the absence of CFTR on the osteoblasts (Ob) and osteoclasts (Oc) in a CF mouse model, namely the BALB/c Cftr-/- mice. In addition, Ob are recognized as having a modulating effect on the leukocyte microenvironment of the bone marrow (BM). This project will also investigate the impact of the absence of CFTR on the leukocyte niche in the BM. Our bone densitometry and X-ray microtomography results showed that Cftr -/- mice have lower bone density and bone mineral content vs. Cftr +/+ mice as well as a decrease in trabecular bone volume and trabecular number, and a greater trabecular separation. To further understand this bone phenotype, we confirmed that BM- derived Ob expressed CFTR at the gene and protein level, but not BM-derived osteoclasts. Such observations support our findings showing that only Ob differenciation and function were affected by the absence of CFTR. The osteoblastic defect appears to adversely affect the BM leukopoiesis as decreased numbers of T cells, macrophages and dendritic cells were observed in Cftr -/- mice vs. Cftr +/+. In light of these findings, we believe that the absence of CFTR has an important impact on the Ob and the bone marrow.

Face au phénomène de multi-résistance aux antibiotiques des souches de Pseudomonas aeruginosa chez les patients atteints de mucoviscidose, de nouvelles approches doivent être envisagées. L'utilisation des bactériophages pour cibler les bactéries semble être l'une des plus prometteuses. L'efficacité de la phagothérapie semble démontrée par son utilisation en Europe de l'Est depuis des décennies et par les récents résultats obtenus sur des modèles expérimentaux. Cependant, la possibilité de son utilisation chez des patients atteints de mucoviscidose n'a pas encore fait l'objet d'études approfondies. Nous avons démontré l'efficacité des bactériophages in vivo, lors d'une infection pulmonaire létale provoquée par une souche clinique de P. aeruginosa, mais aussi in vitro, pour réduire un biofilm formé par P. aeruginosa. Nous avons aussi étudié la réponse inflammatoire induite par les bactériophages, dans différents modèles in vitro et in vivo, qui s'est révélée quasiment négligeable. Nous avons également mis au point la technique de mesure de différence de potentiel nasale chez la souris pour étudier le transport ionique transépithélial, paramètre fondamental de la mucoviscidose. Les mesures obtenues en présence de bactériophages ne diffèrent pas significativement par rapport aux normes préalablement définies. Enfin, nous avons mis au point une méthode permettant d'évaluer la capacité des bactériophages à infecter des bactéries au sein d'expectorations de patients atteints de mucoviscidose. Nous apportons ainsi des résultats scientifiques concrets qui permettront de mieux appréhender les conditions nécessaires au développement de futurs essais cliniques chez ces patients.