Darbo tikslas – ištirti chromatografinės analizės sąlygas sirolimui ir takrolimui nustatyti HPLC-MS/MS metodu. Buvo išbandyti abu eliuavimo būdai (izokratinis ir gradientinis), mobiliosios fazės sudėtinėmis dalimis parinkus tirpiklius, remiantis literatūros duomenimis: metanolį ir vandeninį 0,2% acto rūgšties tirpalą. Gauti analizės chromatografiniai parametrai, esant izokratiniam eliuavimui, yra patenkinami, tačiau tolesni eksperimentai parodė gradientinio eliuavimo pranašumus. Išbandytas varijuojantis polinio tirpiklio parūgštinimas skruzdžių bei acto rūgštimis. Gauti rezultatai rodo, kad eliuento protonizacija analizės kokybei reikšmės neturi. Tačiau remiantis literatūros duomenimis nuspręsta palikti 0,1% skruzdžių rūgšties koncentraciją kraujo ekstraktų analizei. Taikant gradientinį eliuavimo būdą, buvo ištirtas analizės tiesiškumas: analizės jautrio priklausomybė nuo analitės koncentracijos mėginyje yra tiesinė tik vidinio etalono – askomicino ir takrolimo atvejais, o sirolimo atveju ši priklausomybė yra kvadratinė. Nustatyta, kad tai lemia chromatografinės sistemos nepusiausvyrumas esant naudotai mobiliajai fazei. Gauti geri analizės rezultatai, padidinus nepolinio eliuento hidrofobiškumą, pridedant į jį tetrahidrofurano (ypač esant gradientiniam eliuavimui). Pakeitus metanolį acetonitrilu, gauti nepalankūs rezultatai. / This study presents optimization of sirolimus and tacrolimus measurement in patients blood after renal transplantation by high–performance liquid chromatography with mass–spectrometry detection. In experiments with standart solutions of sirolimus and tacrolimus, using ascomycin as internal standart, chromatographical conditions were tested: type of eluation (isocratical and gradiental), properties of eluents (variable acidity of polar solvent and hydrophobity of nonpolar solvent), linearity of analysis. Patient blood extraction procedure was also tested. Sirolimus concentrations measured by HPLC-MS/MS method were 8-9 times lower as received by MEIA method. Both types of eluation were not sufficient for routine analysis in clinical laboratory, when eluents methanol and 0,2% acetic acid solvent were used. Gradiental eluation seamed to be better, but linearity analysis of sample series showed, that chromatographical system was not well-balanced. Methanol was changed to acetonitrile, but separation and retention time of analytes were even worse. Best results were obtained using mixture of methanol and tetrahydrofuran as nonpolar eluent.

Paveldimi kreatino biosintezės bei pernašos į ląstelę sutrikimai sukelia psichomotorinį atsilikimą, kalbos sutrikimus bei epilepsiją, nes nerviniame audinyje trūksta kreatino. Kreatinas yra azoto turintis organinis junginys, kuris natūraliai susidaro organizme ir yra naudojamas energijai išgauti audiniuose, ypač raumeniniame, nes skatina adenozintrifosfato (ATP) susidarymą. Organizme kreatinas visuomet yra pusiausvyroje su kreatininu. Yra išskiriami trys genetiškai paveldimi kreatino biosintezės ir pernašos sutrikimai: 1. Guanidinoacetato metiltransferazės stoka: kreatino ir kreatinino koncentracijų santykis šlapime sumažėjęs, guanidinoacetato koncentracija šlapime, kraujo plazmoje ir smegenų skystyje padidėjusi. 2. Arginino:glicino amidinotransferazės stoka: kraujo plazmoje ir šlapime guanidinoacetato koncentracija sumažėjusi, kreatino ir kreatinino koncentracijų santykis šlapime sumažėjęs. 3. Kreatino pernašos baltymo stoka: kreatino ir kreatinino koncentracijų santykis šlapime padidėjęs, guanidinoacetato koncentracija šlapime normali. Neįprastos kreatino ir kreatinino bei jų pirmtako guanidinoacetato koncentracijos nustatomos kraujo plazmoje bei šlapime. Dujų chromatografijos – masių spektrometrijos metodas leidžia atlikti kokybinę bei kiekybinę kreatino ir guanidinoacetato analizę šlapime greitai, patikimai ir be didelių finansinių išteklių. Diagnozavus pirmas dvi ligas, gali būti skirtas eksperimentinis gydymas kreatinu. Kreatino transportinio baltymo stokos atveju... [toliau žr. visą tekstą] / Creatine and phosphocreatine play an essential role in energy storage and transmission in several tissues. Two enzymes are involved in creatine biosynthesis: arginine:glycine amidinotransferase, which converts arginine and glicine to ornithine and guanidinoacetate, and S-adenosyl-lmethionine:N-guanidinoacetate methyltransferase, which converts guanidinoacetate to creatine. The latter is transported to tissues by the Cr transporter, and is non-enzymatically converted to creatinine. Creatine deficiency syndromes are a newly described group of inborn errors of creatine synthesis (arginine : glycine amidinotransferase (AGAT) deficiency and guanidinoacetate methyltransferase (GAMT) deficiency) and of creatine transport (creatine transporter (CrT) deficiency). The common clinical feature of creatine deficiency syndromes is mental retardation and epilepsy. Measurement of guanidinoacetate in body fluids may discriminate between the GAMT (high concentration), AGAT (low concentration) and CrT (normal concentration) deficiencies. Further biochemical characteristics include changes in creatine and creatinine concentrations in body fluids. GAMT and AGAT deficiency are treatable by oral creatine supplementation, while patients with CrT deficiency do not respond to this type of treatment. Creatine and guanidinoacetate analysis by GC-MS can be very informative and important method in diagnosing the inborn errors of creatine metabolism. In this work the urine samples of patients with... [to full text]

A hydrophilic interaction chromatography (HILIC) technique has been developed and validated for determination of common denaturants (denatonium benzoate, crystal violet and methylene blue) in denaturated alcohol formulations. Among the three different polar stationary phases (i.e., aminopropyl, cyanoethyl and silica) studied the cyanoethyl phase provided much stronger retention for the organic cations. It was shown that high efficiencies were reached only with anionic ion-pairing reagent that reduces the interactions with the silanol groups. The anion ion-pairing strength under HILIC conditions was: acetate < formate << trifluoroacetate < perchlorate. This study also investigated the effect of various experimental factors on the retention of the cyanoethyl stationary phase, such as acetonitrile content, pH, ionic strength, and ion-pairing anion concentration in the mobile phase. The separation of three denaturants was achieved in about 8 min with a mobile phase containing 60% (v/v) acetonitrile and 10 mmol/l HClO4. The proposed method was validated and applied to the determination of danaturating agents in various Lithuanian denaturated alcohol formulations.

The goal of our research was to optimize the conditions of chromatographic analysis of penicillin, to define minimal found analysis concentration, analyse contaminated milk samples with given certain concentration and establish resumption of penicillin G. Therefore, we aimed at analysing milk samples‘ contamination with penicillin of randomly selected cows from study farms. The research was performed in Lithuanian Academy of Veterinary which has a practical training and experiment centre in Muniskes cow farm, state enterprise „Pieno tyrimai“ and Food Institute of Kaunas Technological University. State enterprise „Pieno tyrimai“ used preparation LPT to define milk inhibitors. After the bacteriological milk samples analyses 8 out of 25 samples were found to portray remnants of inhibitory materials. Optimal chromatographic conditions were established by the use of experiment, in accordance with a thorough analysis of literature concentrating on chromatographic methods dealing with penicillin G determination. The following are defined conditions for the chromatographic examination of penicillin G: composition of a mobile phaze 0 – 10 min 5% ACN / 95% 0,125 M phosphate buffer (pH=3,5), 12-22 min 70 % ACN / 30% 0,125 M phosphate buffer, 24-30 min 5% ACN / 95% 0,125 M phosphate buffer (gradient flow mode). Period of assay suspention was about 17 minutes. Resumption of contaminated milk samples with penicillin G 500 mg/kg, 250 mg/kg, 50 mg/kg and 4 mg/kg varied from 45 to 76 %. The... [to full text]

The contribution of Cys17 and surface-exposed histidine residues in rhG-CSF interaction with Cu(II), Ni(II) and Hg(II) ions chelated by Light Resistant Yellow 2KT-polyethylene glycol derivative was evaluated in aqueous two-phase systems composed of polyethylene glycol (PEG) and dextran. It was determined that His43, His52, His156 and His170 residues are involved in protein interaction with chelated Cu(II) ions. Protein interaction with chelated Ni(II) is governed by His52 and His170 residues, though Cys17 is also involved. The contribution of Cys17 side chain is dominant in the interaction between rhG-CSF and chelated Hg(II) ions. The direct interaction between chelated Hg(II) ions and the –SH group of protein was determined for the first time. Based on the study of the interaction between rhG-CSF and chelated metal ions, rhG-CSF was successfully refolded from inclusion bodies in aqueous two-phase systems PEG-dextran containing chelated Ni(II) or Hg(II) ions for the first time. The refolding of rhG-CSF (C17S) in these systems was more effective compared to that of intact rhG-CSF. The dependence of refolding efficiency of rhG-CSF (C17S) in two-phase systems containing chelated metal ions on the number of histidine mutations was evaluated. It was determined that the refolding efficiency of protein in the systems containing chelated Ni(II) is inversely proportional to the number of histidine mutations. The affinity of purified rhG-CSF (C17S) and its histidine mutants for... [to full text]

Skystosios trąšos yra laikomos, gaminamos ir transportuojamos plieninėse talpose, kurios visiškai surūdytų, jei nebūtų pridedama korozijos inhibitorių. Korozijos inhibitoriai yra sudaryti iš cheminių junginių, kurie apsaugo plieno paviršių formuodami apsauginį sluoksnį. Šis sluoksnis apsaugo plieno paviršių nuo reakcijos su skystųjų trąšų komponentėmis ir taip galima sutaupyti milijonines lėšas, nesant būtinybės keisti ar taisyti plienines talpas. Lietuvoje AB „Achema“ per metus pagamina apie 1 milijoną tonų skystųjų trąšų. Dažniausiai korozijos inhibitorius sudaro riebiosios rūgštys, aminai, paviršiaus aktyvios medžiagos, glikoliai ir kt. Korozijos inhibitoriai plačiai analizuojami dujų ir skysčių chromatografijos - masių spektrometrijos metodais. Šiame darbe bus pristatyti dujų chromatografijos - masių spektrometrijos, efektyviosios skysčių chromatografijos - elektropurkštuvinės jonizacijos - skrydžio laiko masių spektrometrijos ir matrica skatinamos lazeriu sužadinamos - skrydžio laiko masių spektrometrijos metodai komercinių korozijos inhibitorių sudėties nustatymui ir indentifikavimui. Šio darbo tikslas buvo optimizuoti chromatografijos ir masių spektrometrijos metodikas skirtas korozijos inhibitorių analizei ir nustatyti komercinių korozijos inhibitorių kiekybinę ir kokybinę sudėtį. Darbo rezultatai. Ištirti trys skirtingų gamintojų komerciniai korozijos inhibitoriai: Cordon 99, Galoryl Ic 22, Ixonol-5. Dujų chromatografijos - masių spektrometrijos metodu nustatyta... [toliau žr. visą tekstą] / Liquid fertilizers are stored, manufactured, and transported in metallic tanks which can completely corrode if corrosion inhibitor will not be added. Corrosion inhibitors are chemical compounds which protect metallic surface by forming a protection layer. This layer protects metallic surface from reaction with liquid fertilizers compounds and can save millions of dollars, since there are no need to replace or repair the tanks. In Lithuania Achema corporation is producing about 1 million tons of liquid fertilizers in the year. Usual ingredients of corrosion inhibitors are fatty acids, amines, surfactants, glycols etc. Corrosion inhibitors are widely analyzed by gas and liquid chromatographic mass spectrometry methods. In this work will be presented gas chromatography- mass spectrometry, high performance liquid chromatography - electrospray ionization – time-of-flight - mass spectrometry and matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry, methods for commercial corrosion inhibitors determination and identification. The aim of this work is optimize chromatographic and mass spectrometry methods for corrosion inhibitors analysis and determinate quantitative and qualitative composition of commercial corrosion inhibitors. Results. Analyses of corrosion inhibitors: Cordon 99, Galoryl Ic 22, Ixonol-5 from three different manufacturers were performed. The main compound determined in all the corrosion inhibitors samples by gas chromatography mass... [to full text]

Plants have many useful substances – and one of them is flavonoids with other phenolic compounds. This is a very big group of biological active compounds. Flavonoids have been referred to as "nature's biological response modifiers" because of their ability to modify the body's reaction to other compounds such as allergens, viruses, and carcinogens. They show anti-allergic, anti-inflammatory, and anti-cancer activity. In addition, flavonoids act as powerful antioxidants, providing remarkable protection against oxidative and free radical damage. As a result, consumers and food manufacturers have become increasingly interested in flavonoids for their healthful properties, especially their potential beneficial role in the prevention of cancer and cardiovascular diseases. Phenolic acids are interesting of their protective role against oxidative damage diseases (coronary heart disease, stroke, and cancers). One of possible sources of flavonoids and phenolic acids – Canadian thick-trefoil (showy trefoil) – Desmodium canadense (L) DC. This plant is not researched as good as many other plants, but there are some works on it. In Lithuania, KUM, there were some research works on Desmodium canadense (L.) DC. There was performed analysis of grass, collected in different phase of vegetation. Also was researched influence of mineral fertilising to amounts of flavonoids and phenolic acids.

Paprastasis rapontikas (Rhaponticum carthamoides (DC.) Iljin) – tai daugiametis, vaistinis, astrinių (Asteraceae) šeimos augalas. Rapontiko preparatai pasižymi antioksidacinėmis, antistresinėmis bei antivėžinėmis savybėmis, normalizuoja nervų ir kraujagyslių bei širdies sistemas, stiprina imunitetą, gerina baltymų sintezę, atmintį, skatina raumenų augimą, didina ištvermę bei darbo našumą. Paprastojo rapontiko šaknys ir stiebai naudojami medicinos tikslais kaip vaistinė žaliava. Flavonoidų kiekis rapontiko žaliavoje yra vienas iš žaliavos kokybės požymių. Tikslas: paprastojo rapontiko (Rhaponticum carthamoides (DC.) Iljin) flavonoidų analizė skirtingais augalo vegetacijos tarpsniais. Tyrimo medžiaga ir metodai: analizei naudota paprastojo rapontiko antžeminė dalis ( lapai ir stiebai) , paruošta VDU Kauno Botanikos sode, 2006-2007 metais, skirtingu augalo vegetacijos tarpsniu. Šaknys ir žiedai analizėje naudojami nebuvo. Bandiniai buvo ekstrahuojami 100% ( 1 bandinio paruošimo būdas ) bei 75% ( 2 bandinio paruošimo būdas ) metanoliu, naudota kietafazė ekstrakcija bei superkritinių skysčių ekstrakcija. Flavonoidų kiekis nustatomas naudojant spektrofotometrinį metodą, kapiliarinę skysčių chromatografiją bei efektyviąją skysčių chromatografiją. Rezultatai: 2006m metanoliniuose rapontiko bandiniuose flavonoidų rasta nuo 0,002 iki 0,05%. Augalui augimo pradžioje jame esantis flavonoidų kiekis didėja, žydėjimo periodu ir vaisių brendimo periodu pasiekia maksimumą ir prasidėjus lapų... [toliau žr. visą tekstą] / Rhaponticum carthamoides (DC.) Iljin is a large perennial herb in the Asteraceae family. Rhaponticum carthamoides (DC.) Iljin extract has demonstrated normalizing effect on the central nervous and cardiovascular systems. Actions like antioxidant, antidepressant, anticancer, improve adaptivity to cold climates, increase protein synthesis, build muscle mass, increase stamina and work productivity. The roots and rhizomes are the medicinal parts, with the biological activity compounds. Amount of flavonoids accumulated in dried material of rhaponticum is a parameter of quality. Objective: analysis of flavonoids of Rhaponticum carthamoides (DC.) Iljin at different vegetation periods. Materials and methods: for analysis Rhaponticum carthamoides (DC.) Iljin stems and leaves were used. Plants from the collection of medicinal plants at Kaunas Botanical Garden (Vytautas Magnus University, Lithuania) were collected at different vegetation periods during 2006 – 2007. Dried raw material samples were extracted with 100% and 75% methanol, used solid phase extraction and supercritical fluid extraction. Flavonoids were analysed by means of spectrophotometric method, capillary liquid chromatography and high performance liquid chromatography. Results: from 0.002% to 0.05% of flavonoids are determined in the methanolic extracts of raw material of R.carthamoides of 2006. Maximum content of flavonoids was determined in R.carthamoides samples at flowering and maturation stage. Comparing 2007 II... [to full text]

In natural dendroflora of Lithuania willow genus (Salix L.) is abundant in species amount. Its bark contains active materials which are known as possessing anti-inflammatory properties since former times. Bark extracts are contained in analgesic as well as antirheumatic preparations. Its therapeutic effectiveness is associated with salicine which turns into salicylic acid. Willow bark is a know phytotherapeutic precursor of aspirin. To use more natural and not synthetic materials in the 21st century the methods for extraction of active materials for medicine are being sought. Thus, the studies on plant groups possessing the most intense anti-inflammatory properties became urgent. The amount of salicin varies among different species. Acording to the European Pharmacopoea, minimal amount of 1,5% of salicin is required in Willow bark. The aim of the study was to investigate salicylates amount variation in willow bark of different Salix species growing in Lithuania. The studies were carried out using the routine methods of pharmacopeia. After extraction analysis was performed by high performance liquid chromatography (HPLC) method. The first step of study was made among 3 samples of each plant, colected at different growing period (1-st year autumn, 2-nd year autumn and 2-nd year spring). Comparison of the quantities of the salicylic derivatives depending upon age of the plant and time of collection shows, that plants at two years of growth and collected in autumn accumulate... [to full text] / Natūralioje Lietuvos floroje gluosnių (Salix L.) rūšys yra plačiai paplitusios. Gluosnio žievė – nuo seno žinoma kaip priešuždegiminiu poveikiu pasižyminti vaistinė augalinė žaliava. Jos ekstraktai įeina į priešreumatinių ir analgezinių preparatų sudėtį. Terapinis veikimas yra susijęs su salicinu, kuris organizme virsta salicilo rūgštimi. Gluosnio žievė yra fitoterapinis aspirino pirmtakas. XXI amžiuje vis didesnis dėmesys krypsta į natūralius, o ne sintetinius preparatus. Tokiu būdu, augalų, pasižyminčių terapinėmis savybėmis tyrimai įgyja didelę reikšmę. Skirtingų rūšių gluosnių žievėje, kaupiamas salicino kiekis skiriasi. Europos farmakopėjoje reglamentuojamas minimalus salicino kiekis yra 1,5%. Šio tyrimo tikslas buvo Ištirti Lietuvoje augančių gluosnio rūšių salicilatų kiekio įvairavimą vaistinėje augalinėje žaliavoje (žievėje). Darbo uždaviniai- atlikti įvairių Lietuvoje augančių gluosnio rūšių salicilatų kiekio analizę, palyginti salicilatų kiekį gluosnio žievėje, atsižvelgiant į augalo amžių bei rinkimo laiką bei įvertinti gautus rezultatus, numatomą terapinį veikimą. Tyrimai atlikti naudojant farmakopėjinius analizės metodus. Žievės ekstraktai buvo tiriami efektyviosios skysčių chromatografijos metodu.Šio tyrimo pirmo etapo metu išanalizuota 12 gluosnių taksonų. Buvo ištirti vienerių ir dviejų metų, taip pat pavasarį ir rudenį rinkti žievės pavyzdžiai. Didesni kiekiai aktyvių medžiagų rasta rudenį ir 2 metų amžiaus gluosnių žievės pavyzdžiuose. Antrajame tyrimo... [toliau žr. visą tekstą]

The aim of this work was to investigate and apply new DLLME systems coupled with LA-ICP-MS and ultra-performance liquid chromatography (UPLC) techniques for the preconcentration and determination of Cr(VI), Co(II), Cu(II) ir Ni(II) ions. / Šioje daktaro disertacijoje apibendrintų mokslinių tyrimų tikslas – ištirti ir pritaikyti naujus Cr(VI), Co(II), Cu(II) ir Ni(II) koncentravimo ir nustatymo metodus apjungiant dispersinę skystafazę mikroekstrakciją (DSME) su lazerinio išgarinimo induktyviai sužadintos plazmos masių spektrometrijos (LA-ICP-MS) bei ultraefektyviosios skysčių chromatografijos (UESCh) metodais.