Erythromycin, a macrolide antibiotic used mainly against gram-positive bacteria has been in clinical use since 1952 (1). Previous pharmacokinetic data published on this antibiotic have been derived predominantly from microbiological assay techniques. However, these techniques are relatively imprecise as well as being non-specific and extremely tedious to perform. A novel high performance liquid chromatographic analysis of erythromycin in human serum and urine using U.V. detection at 200 nm and/or electrochemical detection using both an amperometric and a coulometric electrochemical detector is presented. The method involves a solid phase extraction procedure followed by a simple phase separation step and chromatography on a reverse phase column. In order to select the optimum U.V. detector for this analysis, five "state of the art" detectors were compared in terms of their signal-to-noise ratios at U.V. wavelengths between 200 and 210 nm. A known metabolite des-N-methylerythromycin is readily detectable using U.V. detection, whilst another metabolite/degradation product anhydroerythromycin is not seen using U.V. detection but is readily observable using an electrochemical detector. The method has a limit of sensitivity of 0.25 μg/mL and 1.00 μg/mL in serum and urine respectively (U.V. detection) and is sufficiently sensitive to monitor serum and urine concentrations of erythromycin in man after administration of a single 500 mg erythromycin stearate tablet. / KMBT_363 / Adobe Acrobat 9.53 Paper Capture Plug-in

Co-trimoxazole, a combination of a 5-to-l ratio of Sulphamethoxazole (SMZ) and Trimethoprim (TMP) , is a highly effective, broad-spectrum antibacterial agent. Since its introduction in 1968, it has been extensively used in infections of the respiratory and urinary tracts. Co-trimoxazole was developed by the systematic investigation of a series of compounds whose mechanism of action was already known. As early as 1950 synergy between sulphonamides and 2,4-diaminopyrimidines was reported. This was to be expected as both groups of drugs exert their antibacterial activity by interfering with the same biochemical pathway in bacteria. TMP was chosen from among many 2,4-diaminopyrimidines tested because of its good antibacterial activity and low toxicity. SMZ was chosen from the sulphonamides available for combination with TMP because of similarity of their biological half-lives. The widespread use of the combination coupled with the fact that monitoring of the levels of all drugs in the body is becoming increasingly important has stimulated research into rapid and efficient methods for the analysis of TMP and SMZ in biological fluids. Another consequence of the immense popularity of the combination is the appearance on the market of several generic preparations of Co-trimoxazole. It is now generally recognized that drug products from different manufacturers which are chemically equivalent may not be therapeutically equivalent. This is due to the fact that the absorption rate and/or bioavailability (extent of absorption) of a poorly soluble drug may be markedly affected by its release rate from the product and by its subsequent dissolution rate in gastrointestinal fluids. Hence bioequivalence of these various products should be established

177f. / Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2013-04-03T15:12:44Z No. of bitstreams: 1 Tese - José Tiago P. Barbosa - Versão Digital.pdf: 2697646 bytes, checksum: 8a6596b96acedc91d9eedf51d2ff97e2 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Hilda Fonseca(anahilda@ufba.br) on 2013-04-23T15:43:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - José Tiago P. Barbosa - Versão Digital.pdf: 2697646 bytes, checksum: 8a6596b96acedc91d9eedf51d2ff97e2 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-23T15:43:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - José Tiago P. Barbosa - Versão Digital.pdf: 2697646 bytes, checksum: 8a6596b96acedc91d9eedf51d2ff97e2 (MD5) Previous issue date: 2011 / CAPES / A soja é uma leguminosa que possui notável relevância no cenário internacional essencialmente em função de suas características funcionais e nutracêuticas. O consumo da soja é considerado benéfico não somente pela potencialidade nutricional associada, como também pelo efeito preventivo contra inúmeras doenças crônicas principalmente em virtude da presença de isoflavonas em sua constituição. O objetivo do trabalho consistiu no desenvolvimento de estratégias para a determinação da composição multielementar e do teor das isoflavonas daidzeína e genisteína em amostras de soja em grãos e derivados comercializadas/cultivadas nas cidades de Salvador e Barreiras, Bahia e Uberlândia, Minas Gerais. Para a avaliação multielementar foram propostos dois procedimentos: decomposição por via úmida assistida por radiação micro-ondas empregando ácidos diluídos (PAD) e decomposição utilizando combustão induzida por micro-ondas (MIC), empregando técnicas espectrométricas (ICP OES e ICP-MS) para detecção dos analitos. O procedimento de análise cromatográfica foi desenvolvido para a determinação de daidzeína e genisteína nas amostras estudadas empregando a técnica HPLC-DAD. Para o procedimento PAD foram avaliadas diferentes concentrações de HNO3 (2,1 – 14,5 mol L-1) utilizando H2O2 como agente oxidante auxiliar para a decomposição de aproximadamente 250 mg de amostra. A eficiência de decomposição para as diferentes concentrações ácidas foi avaliada considerando os parâmetros acidez e teor de carbono residual e percentual de recuperação dos analitos, de modo que a concentração de 2,1 mol L-1 em HNO3 foi selecionada. O procedimento de decomposição empregando MIC permitiu a decomposição de uma massa de amostra de 400 mg, utilizando como solução absorvedora HNO3 a 6,0 mol L-1 para a determinação multielementar. Para a determinação dos halogênios Cl, Br e I, foi utilizada como solução absorvedora NH4OH a 100 mmol L-1. A exatidão dos procedimentos PAD e MIC foi avaliada com material de referência certificado (NIST-1568a) e o desempenho quanto à precisão e LOQ foi também avaliado. Estes procedimentos se mostraram adequados para a determinação multielementar nas amostras sendo considerados alternativas promissoras, devido à minimização do consumo de reagentes e de geração de efluentes, de acordo com os princípios da química verde. Na determinação das isoflavonas, foi proposto um procedimento de análise cromatográfica empregando-se extração acelerada (ASE) com solvente (metanol) e posterior separação e detecção destes analitos por HPLC-DAD utilizando os solventes acetonitrila e ácido acético em eluição isocrática. Para a validação do método foram considerados os parâmetros: seletividade, linearidade, precisão, limites de detecção e quantificação. Os resultados obtidos estiveram nas faixas: daidzeína (10,3 a 34,0 μg g-1) e genisteína (18,5 a 77,8 μg g-1). Este procedimento se mostrou adequado para a identificação e quantificação destas isoflavonas nas amostras. O presente trabalho contribuiu para traçar um perfil preliminar das amostras de soja em grãos e derivados em termos de micronutrientes, contaminantes e as isoflavonas daidzeína e genisteína. / Salvador

OIRAM FILHO, F. Isolamento em escala preparativa de ácidos anacárdicos provenientes do líquido da casca da castanha do caju (LCC). 2017. 64 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Química)-Centro de Tecnologia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by pgeq ufc (pgeq@ufc.br) on 2017-10-26T17:27:44Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_foiramfilho.pdf: 2261095 bytes, checksum: 44ef008226fa11ae68fc6ea4d6a09d08 (MD5) / Rejected by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br), reason: Prezado Oiram, Existe uma orientação para que normalizemos as dissertações e teses da UFC, em suas paginas pré-textuais e lista de referencias, pelas regras da ABNT. Por esse motivo, sugerimos consultar o modelo de template, para ajudá-lo nesta tarefa, disponível em: http://www.biblioteca.ufc.br/educacao-de-usuarios/templates/ Vamos agora as correções sempre de acordo com o template: 1. Na folha de dedicatória nenhuma informação deve ficar em negrito e as dedicatórias devem iniciar no centro da folha na parte inferior, com alinhamento a esquerda. Veja modelo no template. 2. Na folha de agradecimentos coloque parágrafos ao iniciar as frases. 3. A citação também deve iniciar no centro da folha na parte inferior, com alinhamento a esquerda. Veja modelo no template. 4. A ABNT não orienta a fazer lista de Apêndices. Estes devem ser inseridos no sumário. 5. No sumário não dê recuo na margem, para não caracterizar divisão em capítulos. No sumário, observe o alinhamento da margem dos títulos, de modo que ao aumentar o número de dígitos estes fiquem no mesmo alinhamento de quando tinham apenas um dígito. Quando o título não couber na mesma linha, sua continuação deve ficar na mesma margem da primeira letra da linha de cima e não voltar para a margem do numeral. Ex. 1 INTRODUÇÃO 3.13.1 Extração da lignina 3.13.2.1 Microscopia Eletrônica de Varredura 4.6 Avaliação de estratégias.... sacarificação e fermentação simultâneas 5 CONCLUSÃO REFERÊNCIAS APÊNDICE A - PERFIL CROMATOGRÁFICO.... ATENÇÃO! Colocar a palavra CONCLUSÃO no singular. Use a palavra REFERÊNCIAS e não referencias bibliográficas. Corrigir e reenviar arquivo para o secretário de seu curso. Att. Marlene Rocha 3366-9620 mmarlene@ufc.br on 2017-11-03T12:01:27Z (GMT) / Submitted by pgeq ufc (pgeq@ufc.br) on 2017-11-06T17:46:57Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_foiramfilho.pdf: 2261032 bytes, checksum: 269a0f76af7bd7648c411c4a819df137 (MD5) / Approved for entry into archive by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br) on 2017-11-07T13:23:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_foiramfilho.pdf: 2261032 bytes, checksum: 269a0f76af7bd7648c411c4a819df137 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-07T13:23:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_foiramfilho.pdf: 2261032 bytes, checksum: 269a0f76af7bd7648c411c4a819df137 (MD5) Previous issue date: 2017-08-29 / The shells of cashew nut are raw material for obtaining cashew nut shell liquid (CNSL) , a brownish viscous substance with important applications in the chemical and pharmaceutical industry . Several compounds are found in CNSL, such as cardol, cardanol, methyl - cardol and anacardic acids (AnAc). The A nAc are compounds considered as phenolic lipids, due they have a long carbonic chain with different degrees of instauration. Studies in several sc ientific areas show positive results of A nAc for the treatment and prevention of some diseases and their vectors. Therefore, there is a need for more specific studies to monitor, quantify and isolate these compounds in the CNSL. In this work a chromatograp hic separation method was developed, able to isolate the A nAc present in the CNSL . A fractionation of the CNSL was also performed to obtain a fraction containing only A n A c . Samples of CN SL were solubilized in methanol, injected into a high performance liquid chromatograph coupled a diode array detector (HPLC – DAD), monitored at 280 nm, equipped with C 18 column , using as the mobile phase acetonitrile, H 2 O, acetic acid in isocratic mode . The chromatographic method developed showed adequate selectivity to be able to separate anacardic acids triene (15:3 ) , diene ( 15:2 ) and monoene ( 15:1) efficiently presents in the CNSL at the retention times 7.68, 11.09 and 17.85 min, respectively. For the preparative scale chromatographic conditions was used a HPLC – DAD mon itored at wavelength 280 nm, equipped with a C 18 column , using as the mobile phase methanol, H 2 O, acetic acid in isocratic mode . The method was mathematically adjusted to obtaining a greater similarity with the analytical method. The calibration curve w ith linear interval (50 to 1000 μg.mL - 1 ) and validation of the analytical method were made from the external anacardic acid standard (15: 3). The results obtained for method validation were satisfactory for intra - day (CV = 0.60 %) and inter - day (CV = 0.67 %) precision, linearity (y = 2670.8x - 26949, r 2 > 0.9998), repeatability for the retention time (CV = 1.02 %) and area (CV = 0.24 %), selectivity and limits of detection (19,8 μg.mL - 1 ) and quantification (60.2 μg.mL - 1 ). The recovery results obtained by th e purification of the anacardic acid on a preparative scale were 94.02, 87.63 and 97.35 %, for the triene, dieno and monoene, respectively . The data for purity were 99.11, 95.56 and 92.59 % , for the triene, diene and monoene, respectively. The s olvent consumption was 60.52 and 11.09 mL.mg - 1 for analytical and preparative scale, respectively. The productivity was 0.06 and 1.63 g.h - 1 by each g of adsorbent to analytical and preparative scale, respectively. The chromatographic method developed and i ts respecti ve scale - up were adequate for the quantification, monitoring and isolation of the an acardic acids present in the CNSL. The method was validated according to the required standards and the isolation of the analytical standard s was obtained with a n high degree of purity, recovery, low solvent consumption and good productivity. / A casca da castanha de caju é matéria-prima para obtenção do líquido da casca da castanha (LCC), uma substância viscosa de coloração amarronzada, com importantes aplicações na indústria química e farmacêutica. Diversos compostos são encontrados no LCC, tais como, cardol, cardanol, metil-cardol e os ácidos anacárdicos (AcAn). Os AcAn são compostos considerados lipídeos fenólicos, pois possuem uma cadeia carbônica longa com diferentes graus de instauração. Estudos em diversas áreas da ciência mostram resultados positivos dos AcAn para tratamento e prevenção de algumas doenças e seus vetores. Portanto, há uma necessidade de estudos mais específicos para monitorar, quantificar e isolar esses compostos no LCC. Nesse trabalho foi desenvolvido um método de separação cromatográfica, capaz de isolar os AcAn presentes no LCC. Também foi executado um fracionamento do LCC para obter uma fração contendo apenas AcAn. Amostras de LCC natural foram solubilizadas em metanol, injetadas em um cromatógrafo líquido de alta eficiência acoplado a um detector de arranjo de diodo (CLAE-DAD) monitorado a um comprimento de onda de 280 nm, equipado com uma coluna C18, utilizando como fase móvel acetonitríla, H2O e ácido acético, em modo isocrático. O método cromatográfico desenvolvido apresentou seletividade adequada, sendo capaz de separar os ácidos anacárdicos trieno (15:3), dieno (15:2) e monoeno (15:1) de maneira eficaz, presentes no LCC nos tempos de retenção de 7,68, 11,09 e 17,85 min, respectivamente. Para as condições cromatográficas em escala preparativa, foi usado um CLAE-UV/VIS monitorado à um comprimento de onda de 280 nm, equipado com uma coluna C18 em escala preparativa, utilizando como fase móvel metanol, H2O e ácido acético, em modo isocrático. O método em escala preparativa foi ajustado matematicamente para obter maior similaridade com o método analítico. A curva de calibração com intervalo linear (50 a 1000 µg.mL-1) e validação do método analítico, foram feitos a partir do padrão externo do ácido anacárdico (15:3). Os resultados obtidos para validação do método foram satisfatórios, para precisão intra-dia (CV = 0,60 %) e inter-dia (CV = 0,67 %), linearidade (y = 2670,8x - 26949, r2 > 0,9998), repetibilidade para o tempo de retenção (CV = 1,02 %) e área (CV = 0,24 %), seletividade e limites de detecção (19,8 µg.mL-1) e quantificação (60,2 µg.mL-1). Os resultados da recuperação do isolamento em escala preparativa dos AcAn foram 94,02, 87,63 e 97,35 %, para os AcAn trieno, dieno e monoeno, respectivamente. Os valores de pureza foram 99,11, 95,56 e 92,59 %, para treino, dieno e monoeno, respectivamente. O consumo de solvente foi de 60,52 e 11,09 mL.mg-1, para escala analítica e preparativa, respectivamente. A produtividade foi de 0,06 e 1,63 g.h-1 por cada g de adsorvente para escala analítica e preparativa, respectivamente. O método cromatográfico desenvolvido e sua respectiva ampliação de escala foram adequados para a quantificação, monitoramento e isolamento dos ácidos anacárdicos presentes no LCC. O método foi validado de acordo com as normas exigidas e o isolamento dos padrões analíticos foi obtido com elevado grau de pureza, recuperação, baixo consumo de solvente e boa produtividade.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-30 / Procuramos neste projeto de tese de Doutorado, manter a estratégia de anos, relacionado com o objetivo duplo de aquisição de autonomia na síntese de alguns tipos de materiais poliméricos e ao mesmo tempo, de aprimoramento da metodologia da síntese peptídica nestes suportes sólidos. Dentre os sub-tópicos ainda não desenvolvidos, a tecnologia da síntese de copolímeros de partida para a obtenção de derivados e posterior emprego em síntese de peptídeos e outras aplicações foi escolhida como item principal desta tese. Copolímeros com base em estruturas de poliestireno mas, alterando-se os grupos responsáveis pelo intercruzamento da matriz polimérica [divinilbenzeno (DVB), diacrilato de tetraetilenoglicol (TEG) ou diacrilato de 1,6-hexanodiol (HD)], foram estudados quanto à sua parte sintética e de algumas propriedades estruturais e físico-químicas. Fixando-se uma determinada condição de polimerização, obtiveram-se diversos lotes de copolímeros denominados respectivamente de DVB, TEG e HD, variando-se o grau de intercruzamento ou a condição de síntese (sem solvente, com tolueno, n-heptano ou a mistura 1:1 de ambos). Grãos dos copolímeros observados por microscopia, indicaram a obtenção de tamanhos na faixa de 125 a 600 μm e com variadas porcentagens de estruturas rompidas. Dos três, o TEG se mostrou no geral, o mais frágil, principalmente quando sintetizado em n-heptano, com ausência quase total de grãos íntegros em diferentes situações sintéticas. Por outro lado, o DVB e o HD apresentaram resultados sintéticos razoavelmente equivalentes, embora grãos maiores (de 600 μm) tenham surgido mais durante a síntese do primeiro em tolueno. Não se observou uma clara influência do grau de intercruzamento no tamanho ou integridade dos grãos das resinas obtidas. Mas no geral, grãos menores foram observados mais em copolímeros com teor de intercruzamento maiores. Alterações específicas em algumas condições de polimerização deverão ser futuramente testadas para um conhecimento mais claro das regras que governam a obtenção de copolímeros com diferentes tamanhos ou integridade de sua estrutura. A fase seguinte desta tese envolveu a síntese, estudos de alguns derivados destes copolímeros e suas aplicações biológicas. A partir do DVB de 2% de intercruzamento, obtiveram-se quatro lotes de benzidrilamino-resina (BAR), após inserção de grupamentos XIV fenilmetilamínicos. Estes quatro lotes apenas se distinguiram quanto ao tipo de solvente eluente utilizado para a obtenção dos copolímeros correspondentes. Surpreendentemente, apenas o lote de BAR proveniente do DVB sintetizado com a mistura 1:1 de tolueno e nheptano apresentou um ótimo rendimento da síntese de um octapeptídeo-modelo (cerca de 90%). Ainda do DVB, um derivado contendo grupamento sulfônico também foi obtido e ensaios iniciais de matriz como trocadora catiônica em cromatografia em coluna foram efetuados. A partir de um dos lotes de BAR anteriormente obtido, assimilamos também a técnica de introdução do grupamento polietilenoglicol (50 e 70% de acoplamento dos grupos amínicos da resina). Avaliação do grau de solvatação, efetuada por microscopia dos grãos, indicaram alterações significativas, com mudança do perfil de inchamento, de solventes mais apolares para polares, em função da inserção de grandes quantidades destes grupos polihidroxilados na estrutura da resina. Quanto aos copolímeros de TEG e HD, também foram alterados quimicamente em protocolos que introduziam inicialmente, grupamentos clorometílicos e posteriormente, aminometílicos. As respectivas resinas derivadas (ATEG e AHD) também foram, comparativamente à BAR, avaliadas em termos de grau de solvatação de suas matrizes, dependente do sistema de solvente empregado. Esta investigação foi efetuada, via acoplamento de uma marcador paramagnético do tipo aminoácido (9- fluorenilmetiloxicarbonil-2,2,6,6-tetrametilpiperidina-1-oxil-4-amino-4-carboxílico ou abreviadamente, Fmoc-TOAC) nos sítios amínicos destas resinas. Posterior investigação, via ressonância paramagnética eletrônica (RPE), indicaram uma diferenciação da ATEG em relação às outras resinas. Esta resina apresentou ótima solvatação (maior mobilidade de sua estrutura polimérica) tanto em solvente apolar (DCM) quanto nos polares (DMF e DMSO). Como aplicação prática destas duas resinas, o octapeptídeo modelo testado com os quatro lotes de BAR também foi sintetizado em ambas e o rendimento do material bruto obtido ficou ao redor de 70%. Em suma, o escopo deste projeto objetivando a aquisição da tecnologia de síntese de copolímeros e alguns de seus derivados foi o de aumentarmos o grau de autonomia de nosso grupo neste campo, evitando-se a importação dos mesmos. Por outro lado, fica em aberto a possibilidade de diferentes tipos de estudos físico-químicos e de aplicações tecnológicas dos mesmos, não somente restrito à síntese de peptídeos mas de XV outras moléculas de interesse biológico e também com inserções no campo da cromatografia em coluna. Um tópico final, aparentemente dissociado dos demais mas ainda relacionado com o uso alternativo de derivados poliméricos, envolveu a aplicação da resina comercial de troca aniônica DEAE-Macroprep (BioRad Co.). Baseado em estudos prévios de nosso grupo, esta resina de uso cromatográfico foi empregada para a síntese de um pentadecapeptídeo e o derivado obtido (peptidil-DEAE-Macroprep) foi posteriormente utilizado para a purificação de heparinas e outros glicosaminoglicanos, através da cromatografia de afinidade. Os dados iniciais desta estratégia cromatográfica diferenciada e inovadora, mostraram-se promissores para a separação deste tipo de macromoléculas complexas, ainda não totalmente estabelecido na literatura. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

A atropina é um alcaloide conhecido pela inibição da acetilcolina e como substância antimuscarínica e está presente em folhas de algumas espécies da família Solanaceae, e, em especial, da Atropa belladonna L. A importância da produção de fitoterápicos na indústria farmacêutica tem impulsionado estudos científicos no sentido de desenvolver metodologias analíticas para quantificação de marcadores químicos, presentes em drogas vegetais, e que atendam os parâmetros de controle de qualidade da legislação vigente. Assim, neste trabalho, diferentes metodologias para quantificação da atropina (marcador químico predominante nas folhas de A. belladonna) foram desenvolvidas e validadas. Os métodos propostos por Cromatografia em Camada Delgada de Alta Eficiência (CCDAE), Cromatografia a Líquido de Alta Eficiência (CLAE) e Cromatografia a Líquido de Ultra Eficiência (CLUE) foram validados comprovando ter especificidade/seletividade, linearidade, precisão, exatidão e robustez e adequando-se à legislação vigente. Além disso, diferentes métodos de extração foram propostos. Para o primeiro método de análise (CCDAE), uma extração com ácido diluído (H2SO4 0,5 mol/L), seguida de extração líquido-líquido foi utilizada, resultando em teor médio de 0,2913 % de atropina. Para o segundo (CLAE), uma extração com solvente apolar (metanol p.a.) foi proposta, seguida também de extração líquido-líquido e com teor médio de 0,2660 % do ativo. No terceiro (CLUE), otimização de extração foi realizada através de Desenho Fatorial Fracionado, seguido de Desenho Box-Behnken, resultando em extração realizada pela mistura de solvente apolar e água (metanol 47 %), seguido de uma extração em fase sólida (sílica) e um teor de atropina médio de 0,3343 %. Um extrato otimizado foi analisado nos três métodos, resultando em teores de atropina iguais a 0,2905, 0,3598 e 0,3343 % para CCDAE, CLAE e CLUE, respectivamente. A revisão da monografia do material vegetal, com ensaios de identificação e físico-químicos, juntamente com a metodologia de doseamento por Cromatografia a Líquido de Alta Eficiência foi proposta com o objetivo de atualizar as metodologias que hoje compõe o roteiro de controle de qualidade da espécie na Farmacopeia Brasileira, que está em sua 5° edição. / Atropine is an alkaloid known for acetylcholine inhibition and as antimuscarinic substance and is present in leaves of some species of the family Solanácea, and especially of Atropa belladonna L. The importance of the production of herbal medicines in the pharmaceutical industry has driven scientific studies to develop analytical methods for quantification of chemical markers, present in herbal drugs, and that meet the quality control parameters of the current legislation. Thus, in this work, different methodologies for quantification of atropine (chemical marker predominant in the leaves of A. belladonna) were developed and validated. The methods proposed by High Performance Thin-layer Chromatography (HPTLC), High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Ultra Performance Liquid Chromatography (UPLC) were validated proving to have specificity/selectivity, linearity, precision, accuracy and robustness, and conforming to legislation. In addition, different extraction methodologies were proposed. For the first method of analysis (CCDAE), extraction with dilute acid (H2SO4 0.5 mol/L) followed by liquid-liquid extraction was used, resulting in an average content of 0.2913% atropine. For the second (HPLC), extraction with apolar solvent (methanol p.a.) was proposed, followed also by liquid-liquid extraction and with an average content of 0.2660% of the active. In the third (CLUE), optimization of extraction was done through Fractional Factorial Design, followed by Box-Behnken Design resulting in extraction by the apolar solvent mixture and Water (47% methanol), followed by solid phase extraction (silica) and an average atropine content of 0.3343%. An optimized extract was analyzed in three methods, resulting in atropine levels equal to 0.2905, 0.3598 and 0.3334 % for HPTLC, HPLC and UPLC, respectively. The review of the monograph of the plant material, with identification and physicochemical tests, together with the methodology of determination by HPLC was proposed with the objective of updating the methodologies that today compose the roadmap of quality control of specie in Brazilian Pharmacopoeia, which is in its 5th edition.

This diploma thesis deals with acidic proteins contained in the potato (Solanum tuberosum) tubers, or rather about their separation with chromatography techniques. For the analysis were chosen tubers of two czech potato varieties, Adéla and Westamyl. From the concentrated potato juice were eliminated basic and most of the patatin proteins with the gravity column chromatography. In the next step were applied the chromatography techniques on the anion and hydroxyapatite columns by the fast protein liquid chromatography (FPLC) system. On the anion column were separated protein fractions which contained proteins of molecular weight in the range of 15 kDa to 60 kDa (Adéla) and 15 kDa to 100 kDa (Westamyl). The most abundant were the proteins with molecular weight 15 kDa a 20 kDa. In the last step was used the mass spectrometry for the identification of chosen protein fractions.

Made available in DSpace on 2016-03-07T19:20:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-09-17. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T19:24:13Z : No. of bitstreams: 1 000854411_20170917.pdf: 427684 bytes, checksum: 6328427be3c7e3bb317d47f40312ec19 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-09-22T12:16:27Z: 000854411_20170917.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-09-22T12:17:17Z : No. of bitstreams: 1 000854411.pdf: 2712482 bytes, checksum: 2c6ff9e2456e5f600eb3ac6e153b3a9b (MD5) / Apesar dos recentes avanços em cromatografia líquida monodimensional, a complexidade de algumas amostras exige o emprego de técnicas de separação capazes de oferecer maior poder de resolução e capacidade de picos. Como consequência, o desenvolvimento de técnicas cromatográficas bidimensionais abrangentes (LC×LC, GC×GC, LC×GC) tem recebido atenção crescente nos últimos anos. A principal vantagem dessas técnicas comparadas às técnicas tradicionais é a maior capacidade de picos e possiblidade de se empregar diferentes mecanismos de separação em cada dimensão. O maior desafio relacionado à otimização de métodos desta natureza está relacionado à seleção de complexos parâmetros experimentais, frequentemente baseada na experiência do analista ao invés de rigorosamente estruturada em estratégias teoricamente embasadas. A primeira e mais importante etapa no processo de otimização de métodos LC×LC é a seleção do par cromatográfico (fase estacionária e fase móvel, 1D e 2D). Quando a amostra é precisamente conhecida, algumas características podem servir como um guia qualitativo na seleção destes parâmetros; em outros casos, padrões representativos podem ser empregados para avaliar a correlação entre os sistemas 1D e 2D, porém, quando pouca ou nenhuma informação é disponível, esta continua sendo uma tarefa difícil. Este trabalho apresenta uma nova estratégia de seleção do par cromatográfico empregando amostras reais de extrema complexidade e cálculos de recobrimento da superfície de separação, além da otimização de métodos em cromatografia líquida bidimensional abrangente baseada em planejamentos estatísticos. A amostra selecionada para o desenvolvimento do método foi uma mistura de extratos vegetais previamente estudados pelo grupo de pesquisa, contendo uma vasta diversidade de metabólitos com diferentes características estruturais e... / Despite recent advances in monodimensional liquid chromatography, the complexity of some samples requires the use of separation techniques that can provide greater resolving power and peak capacity. As a consequence, the development of comprehensive two-dimensional chromatographic techniques (LC×LC, GC×GC, LC×LC) has received increasing attention in recent years. The main advantage of these techniques compared to traditional techniques is the largest peak capacity and possibility to employ different separation mechanisms in each dimension. The biggest challenge related to method optimization of this kind of techniques is related to the selection of complex experimental parameters, often based on the analyst's experience rather than theoretically based strategies. The first and most important step in the method optimization process in LC×LC is the selection of the chromatography pair (stationary phase and mobile phase, 1D and 2D). When the sample is precisely known, some features may serve as qualitative guidance in the selection of these parameters; in other cases, representative standards can be used to evaluate the correlation between 1D and 2D systems, however, when little or no information is available, this remains a difficult task. This work presents a new strategy for the selection of the chromatographic pair using real and extremely complex samples and fractional coverage surface calculations, besides the method optimization in comprehensive two-dimensional liquid chromatography based on statistical designs. The sample selected for the method development was a mixture of plant extracts previously studied by the research group and containing a wide diversity of metabolites with distinct structural characteristics and therefore different challenges to be overcome in the chromatographic separation. Employing such strategy and comprehensive elution conditions, it was possible to select the...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-17Bitstream added on 2014-06-13T20:02:19Z : No. of bitstreams: 1 goncalves_je_dr_botfca.pdf: 4162560 bytes, checksum: 2fca33c2f151fb46cd2ee8664865be71 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este trabalho avaliou energéticamente e ambientalmente briquetes para a geração de energia. Os materiais utilizados para a fabricação dos briquetes foram Rejeitos de Resíduos Sólidos Urbanos (RRSU) com resíduos madeireiros Eucalyptus grandis e aglutinantes: resíduo lignocelulósico de mandioca e finos de carvão vegetal. As amostras dos RRSU foram coletadas na Usina de Triagem e Compostagem de Lixo de Lençóis Paulista, atualmente descartados em aterro sanitário municipal e os resíduos madeireiros em serrarias do município de Botucatu-SP. Esse estudo teve o objetivo de gerar alternativas para minimizar a quantidade de material destinado aos aterros com responsabilidade social e ambiental. Os briquetes foram fabricados com 15, 16, 17, 18 e 20% de RRSU na mistura com resíduos madeireiros e aglutinantes. Os resultados da análise do Poder Calorífico Superior (PCS) realizadas nos briquetes mostraram que este valor do PCS aumenta na medida em que a porcentagem dos RRSU aumenta. Briquetes de resíduos de madeira apresentaram Poder Calórico Inferior (PCI) de 19544,20 kJ/kg, valor significativamente menor ao encontrado para briquetes com 20% RRSU, o qual foi de 21617,66 kJ/kg. Este fato anterior se deve a influência dos produtos derivados do petróleo que estão presentes nos RRSU, como por exemplo, os termoplásticos, com PCS médio na ordem de 34039,67 kJ/kg. É preciso pesquisar o efeito da porcentagem de RRSU sobre a resistência mecânica dos briquetes. Análises cromatográficas foram realizadas para analisar os vapores produzidos na pirólise dos briquetes, visando caracterizar os produtos formados durante a sua decomposição térmica e avaliar preliminarmente o efeito que poderá causar ao meio ambiente. Os resultados evidenciaram a presença de compostos poluidores provenientes da composição dos RRSU como foi o caso do estireno e outros produtos de alta massa molecular... / This Work evaluates the energy and environmental optimization of briquettes for power generation. The materials used for the production of briquettes were rejects from municipal solid waste (RMSW) wood waste with Eucalyptus grandis and binders: residue lignocellulosic cassava and thin charcoal. Samples of RMSW were collected in the recycling and composting plant waste Lençóis, currently discarded in the municipal landfill and waste wood sawmills in the municipality of Botucatu-SP. This study was to generate alternatives to minimize the amount of material destined for landfills with social and environmental responsibility. Briquettes are manufactured with 15, 16, 17, 18 and 20% RMSW in mixture with waste wood and binders. The results of Higher Caloric power analysis (HCP) held in briquettes showed that the value of HCP increases insofar as the percentage of RMSW increases. Waste wood Briquettes made Lower Calorific Power (LCP) 19544.20 kJ/kg significantly lower the value found for briquettes with 20%, which was RMSW 21617.66 kJ/kg. The fact earlier due to influence of oil-derived products that are present in RMSW, as for example, thermoplastics, which have CPs middle 34039.67 kJ/kg. This result can be improved by adjusting the conditions of operation of briquetting machine such as pressure and temperature. The percentage of RMSW effect on the mechanical strength... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-29Bitstream added on 2014-06-13T20:46:00Z : No. of bitstreams: 1 carvalho_apa_dr_araiq.pdf: 1244248 bytes, checksum: c31c8ba9a10569c696642941b0232500 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Em 2005, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) através do Programa de Análise de Resíduos em Alimentos (PARA) indicou que a população brasileira está exposta aos resíduos de pesticidas. Considerando este contexto, foi proposto um projeto temático, coordenado pelo Prof. Dr. João Lauro Viana de Camargo (Faculdade de Medicina de Botucatu-UNESP), com o apoio da Fapesp. Para investigar o efeito da exposição a baixas doses de misturas de pesticidas quanto à carcinogenicidade e alteração do sistema endócrino em ratos machos de Lewis, foram escolhidos quatro pesticidas dentre os mais encontrados pela ANVISA (2005) em frutas e vegetais consumidos no país: diclorvos, dicofol, permetrina (cis-trans), dieldrin e endosulfan (α- ß). Na avaliação da toxicidade destes pesticidas e sua eventual importância para a saúde humana foram utilizados modelos com ratos machos da linhagem de Lewis expostos a esses agentes por via oral durante 8 semanas alimentados com uma ração basal enriquecida com os pesticidas nas concentrações NOEL e LOEL. Como parte do referido projeto temático, o desenvolvimento deste trabalho contempla a otimização e validação de métodos analíticos para a quantificação dos pesticidas selecionados em amostras de ração e tecidos provenientes dos animais de experimentação (fígado e cérebro). É parte fundamental deste projeto, a garantia da dose que estará sendo ingerida pelo animal, por isso foi desenvolvido e validado um método para análise dos pesticidas na ração animal. 0,5 g da amostra de ração triturada e homogeneizada foi extraída com 5 mL de acetato de etila em banho de ultrassom por 20 minutos seguido de centrifugação. O sobrenadante foi concentrado até à secura sob suave corrente de nitrogênio, redissolvido em 1,0 mL de isooctano e 1µL foi analisado por GC/ECD. Os parâmetros de validação... / In 2005, the National Health Surveillance Agency through the program for the analysis of residues in foods indicated that the Brazilian population was exposed to pesticide residues. Considering this context, a thematic project was proposed, under Prof. Dr. João Lauro Viana de Camargo (Faculdade de Medicina de Botucatu-UNESP), with FAPESP financial support. In order to investigate the carcinogenic and endocrine effect of exposure to low doses of pesticide mixtures in Lewis male mice, were chosen four types of pesticides found in fruits and vegetables by ANVISA survey in 2005. The selected pesticides were: dichlorvos, dicofol, permethrin (cis-trans), dieldrin and endosulfan (α- β). The toxicity evaluation of these pesticides was carried out in Lewis male mice fed for 8 weeks with a basal ration enriched with pesticides at concentrations NOEL and LOEL. The main purpose of this work was to optimize and validate analytical methods for determination pesticides in samples of feed and tissue from the experimental animals (liver and brain). The security of dose in animal feed was also developed and validated; 0.5 g sample of feed was triturated, homogenized and extracted with 5 mL of ethyl acetate in ultrasonic bath for 20 minutes followed by centrifugation. The supernatant was concentrated to dryness in a gentle stream of nitrogen, dissolved in 1.0 mL of isooctane and 1 µL was analyzed by GC / ECD. The validation parameters of the method were: recovery of 70 to 99 %, accuracy of less than 10 % (coefficient of variation) and quantification limits LQ between 0.4 and 0.8 mg/g. The proposed method for analysis of mice liver samples was the extraction of pesticides with ethyl acetate in ultrasonic bath followed by cleanup on florisil cartridges (500 mg). The triturated and homogenized liver sample was initially transferred to a glass tube with lid containing 5 mL of ethyl... (Complete abstract click electronic access below)