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Estudio del proceso de sensibilidad colateral en células leucémicas murinas y humanas con fenotipo de resistencia a múltiples fármacos (MDR).Cerezo Fernández, David 19 September 2013 (has links)
INTRODUCCIÓN: La adquisición del fenotipo de resistencia a múltiples fármacos (MDR) en células tumorales las convierte en resistentes a fármacos antineoplásicos y es una de las principales causas del fracaso de la quimioterapia en algunos tumores. La expresión de glicoproteína P (MDR-1, P-gp, ABCB1) contribuye a esta resistencia expulsando los fármacos o regulando la muerte celular programada. Por otro lado, la sobreexpresión de miembros anti-apoptóticos de la familia Bcl-2 observada en tumores sanguíneos se ha asociado a la resistencia a quimioterapia en varios cánceres humanos. También es importante estudiar alteraciones en las rutas de señalización de MAPKs y la secreción de citocinas en las células con fenotipo MDR. OBJETIVOS: El propósito de este trabajo fue encontrar un estímulo capaz de inducir sensibilidad colateral en células leucémicas murinas y humanas con fenotipo MDR, y caracterizar el tipo de muerte celular inducida. El segundo propósito fue estudiar la contribución de MDR-1, caspasas, proteínas de la familia Bcl-2, MAPKs y citocinas al proceso de sensibilidad colateral. MATERIALES Y MÉTODOS: Para alcanzar nuestros objetivos, usamos células leucémicas murinas L1210 y su sublínea celular resistente L1210R, así como una línea celular procedente de la línea L1210 transfectada con un plásmido que contenía el gen MDR-1 (CBMC-6). Se realizó western-blot para estudiar la expresión de proteínas, inhibición de MAPKs y caspasas y silenciamiento de ARN de MDR-1, Bcl-xL, Bcl-2 y Bax para estudiar el papel de estas proteínas. RESULTADOS: Se encontró que las células leucémicas resistentes con sobreexpresión de P-gp, pero no sus parentales sensibles, son hipersensibles a estrés hipotérmico produciéndose apoptosis a temperaturas por debajo de 4ºC. La transfección de la línea celular parental con un plásmido que contiene P-gp las convierte en sensibles a estrés hipotérmico, demostrando la asociación entre la expresión de P-gp y la muerte celular provocada por el frío. También observamos un incremento de la expresión basal y actividad del fragmento activo de caspasa 3 a temperatura fisiológica (37ºC) en las células MDR. La inhibición de caspasa 3 rescató parcialmente a las células leucémicas MDR de la apoptosis inducida por el frío, lo que sugiere que el mecanismo de muerte celular depende de caspasa 3. Esto demuestra que la expresión de P-gp juega un papel importante en la supervivencia de las células MDR y es acompañada por un proceso de sensibilidad colateral a estrés hipotérmico. Se observó que la línea parental leucémica (L1210) y la línea celular CBMC-6 presentan una alta expresión de la proteína anti-apoptótica Bcl-xL, mientras que la expresión de Bcl-2 es baja. Por el contrario, en las células L1210R se observó una disminución de la expresión de Bcl-xL y un aumento de Bcl-2. La inhibición de dirigida de proteínas anti-apoptóticas confirma que la expresión de Bcl-xL es un regulador clave de la supervivencia de las células leucémicas. En contraste, el silenciamiento de Bcl-2 muestra que la supervivencia de las células L1210R no depende del nivel de expresión de Bcl-2. Así, nuestros datos demuestran que la supervivencia de la línea celular parental depende de la expresión de Bcl-xL, pero la adquisición del fenotipo MDR elimina esta dependencia y podría depender de varios miembros anti-apoptóticos de la familia Bcl-2. Además, los resultados obtenidos en las células CBMC-6 demuestran que P-gp tiene poca influencia sobre las proteínas de la familia Bcl-2. Resultados similares se obtuvieron bajo condiciones de estrés hipotérmico y exposición al fármaco daunomicina. En relación a la ruta de señalización de MAPKs, demostramos su importancia en el desarrollo del fenotipo MDR, así como en el desarrollo de sensibilidad colateral a estrés hipotérmico, demostrando que la inhibición de ERK y JNK puede proteger, parcialmente, de la muerte celular inducida por el frío en las células L1210R y CBMC-6. CONCLUSIONES: El proceso de sensibilidad colateral a estrés hipotérmico está asociado al fenotipo MDR en células murinas, y ocurre a través de un proceso de apoptosis dependiente de caspasas. La expresión y funcionalidad de MDR-1 está asociada a la sensibilidad a hipotermia en células murinas. El desarrollo del fenotipo MDR está acompañado de cambios en la expresión de proteínas Bcl-2, pero éstas no influyen en la sensibilidad colateral. La señalización a través de ERK y JNK está implicada en la sensibilidad colateral observada en las células MDR. La señalización a través de citocinas podría tener un papel importante en la respuesta a estrés de las células MDR. / INTRODUCTION: The acquisition of a multidrug-resistant (MDR) phenotype by tumor cells that renders them unsusceptible to anti-neoplasic agents is one of the main causes of chemotherapy failure in human malignancies. The increased expression of P-glycoprotein (MDR1, P-gp, ABCB1) in tumor cells contributes to drug resistance by extruding chemotherapeutic agents or by regulating programmed cell death. In the other hand, over-expression of anti-apoptotic Bcl-2 family members has been reported in hematologic malignancies and has been associated with chemotherapy resistance in various human cancers. As these findings, it is important to study alterations in MDR cells on MAPKs pathway and citokines secretion. OBJECTIVES: The aim of this work was to find a stimulus able to induce collateral sensitivity in murine and human leukemic MDR cells, and to characterize the type of death induced. The second aim was to study the contribution of MDR-1, caspases, family Bcl-2 proteins, MAPKs and citokines to this collateral sensitivity process. MATERIALS AND METHODS: To reach our objectives we used L1210 murine leukemia cells and its resistant derived cell line L1210R, as well as a transfected with a plasmid containing MDR-1 cell line obtained from L1210 (CBMC-6). It was used western-blot to study proteins expression, inhibition of MAPKs and caspases and RNAm silencing of MDR-1, Bcl-xL, Bcl-2 and Bax family to study the role of this proteins. RESULTS: It was found that resistant leukemic cells with P-gp over-expression, but not their sensitive counterparts, are hypersensitive to cold-induced cell death when exposed to temperatures below 4ºC. Transfection of parental cells with a P-gp-expressing plasmid makes these cells sensitive to cold stress, demonstrating an association between P-gp expression and cell death at low temperatures. Furthermore, we observed increased basal expression and activity of effector caspase-3 at physiological temperature (37ºC) in MDR cells. Treatment with a caspase-3 inhibitor partially rescues MDR leukemic cells from cold-induced apoptosis, which suggests that the cell death mechanism may require caspase-3 activity. Taken together, these findings demonstrate that P-gp expression plays a role in MDR cell survival, and is accompanied by a collateral sensitivity to cold stress. We demonstrate that parental leukemic (L1210) and CBMC-6 cells display high constitutive expression of anti-apoptotic Bcl-xL protein, while Bcl-2 protein expression was very low. By contrast, leukemic cells L1210R display a decrease of Bcl-xL and up-regulation of Bcl-2 protein expression levels. Furthermore, targeted inhibition of individual anti-apoptotic proteins by RNA silencing confirms that Bcl-xL expression is a key regulator of leukemic cells survival. In contrast, the silencing of Bcl-2 shows that L1210R survival doesn’t depend on Bcl-2 expression level. Together, our data demonstrate that parental leukemic cells survival are largely dependent on Bcl-xL protein expression, but acquisition of MDR phenotype by such cells abrogate such survival dependence and suggests that resistant cells became probably dependent on more than one anti-apoptotic protein for survival at physiological conditions. Additionally, the results obtained with CBMC-6 cells demonstrate that P-gp exert slight influence in the expression level of Bcl-2 family members. Similar results were obtained under cold stress and drug exposure. Related to MAPKs signaling pathway, we have addressed it importance in MDR phenotype development, as well as in hypothermia collateral sensitivity, showing that ERK and JNK inhibition can protect, partially, against stress-cold induced-death in L1210R and CBMC-6 cell lines. CONCLUSIONS: Collateral sensitivity to cold stress is associated to MDR phenotype in murine cells, and it occurs by a caspase-dependent apoptosis process in murine cells. Expression and functionality of MDR-1 is strongly associated to hypothermia sensitivity in murine cells. MDR phenotype development is accompanied by changes in Bcl-2 family proteins expression, but it is not shown an association with collateral sensitivity. ERK and JNK signaling pathways are implicated in collateral sensitivity process observed in MDR cells. Citokines signaling could play an important role on MDR cells stress response.
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Evaluación de la ansiedad por separación y prevención escolar de las dificultades emocionalesOrenes Martínez, Aurora M. 23 July 2015 (has links)
La tesis incluye dos investigaciones: I) evaluación de la ansiedad por separación en la infancia y II) prevención escolar de las dificultades emocionales. Los objetivos de la primera investigación fueron adaptar y validar las versiones para el niño y para los padres de la Escala de Evaluación de la Ansiedad por Separación (Separation Anxiety Assessment Scale, SAAS; Eisen y Schaefer, 2005) con población infantil española. Esta escala fue la primera que se desarrolló para evaluar específicamente la frecuencia de las características clínicas de la ansiedad por separación en la infancia. Consta de cuatro subescalas sobre dimensiones sintomáticas de la ansiedad por separación: Miedo a la soledad (MS), Miedo al abandono (MA), Malestar físico (MF) y Preocupación por los desastres (PD), más aparte dos subescalas complementarias sobre Señales de seguridad y Frecuencia de Desastres (FD). Esta investigación comprendió dos estudios independientes con sendas muestras de niños, de 8 a 11 años, de ambos géneros en proporción equivalente. En el primer estudio participaron 1.281 escolares y 910 padres; el análisis factorial exploratorio identificó los cuatro factores sugeridos por los creadores de la escala: MS, MA, MF y PD. En el segundo estudio participaron 4.628 escolares y 4.127 padres. El análisis factorial confirmó la estructura tetradimensional de la ansiedad por separación, con un porcentaje de varianza explicada satisfactorio. La consistencia interna, la estabilidad temporal, la validez convergente, la validez discriminante, la sensibilidad y la especificidad de las cuatro dimensiones sintomáticas fueron buenas. Las propiedades psicométricas de las subescalas complementarias fueron adecuadas aunque con algunas carencias; ambas clasificaron correctamente un alto porcentaje de casos con trastorno de ansiedad por separación, especialmente la subescala Señales de seguridad. El acuerdo niño-padres fue pobre. En conclusión, la SAAS es una escala válida, fiable y clínicamente útil, puesto que permite obtener perfiles del trastorno de ansiedad por separación que ayudan a planificar el tratamiento psicológico. Los objetivos de la segunda investigación fueron adaptar y valorar el programa Fortius (Méndez, Llavona, Espada y Orgilés, 2013), con población adolescente. Participaron 443 escolares del primer ciclo de Educación Secundaria Obligatorio, edad media 12,59 años, de ambos géneros en la misma proporción, de los que 307 recibieron el programa (grupo experimental) y 136 no (grupo control). El programa Fortius combina el enfoque de la psicología clínica dirigido a solucionar dificultades emocionales con el de la psicología positiva orientado a potenciar competencias personales. Sus principales componentes son relajación, respiración y visualización (fortaleza emocional), actividades agradables y habilidades sociales (fortaleza conductual), reestructuración cognitiva, resolución de problemas y autoinstrucciones (fortaleza cognitiva). Se aplicó colectivamente en el aula en doce sesiones, de 50-60 minutos, por psicólogos con una formación específica en el programa. El programa consiguió reducir a los doce meses después la sintomatología ansiosa en los adolescentes de menos edad, el número de casos con elevada sintomatología ansiosa (población de riesgo), la sintomatología depresiva y los problemas de comportamiento en las chicas; también mejoró la salud percibida. Los adolescentes del grupo experimental y los aplicadores valoraron positivamente el programa Fortius; los últimos consideraron también que el grado de dificultad para implementarlo es bajo. / This thesis includes two researches: I) assessment of separation anxiety in children, and II) school prevention of emotional difficulties. The objectives of the first research were to adapt and validate the versions for the child and parents of the Separation Anxiety Assessment Scale (SAAS; Eisen y Schaefer, 2005) for Spanish child population. It was first developed to specifically assess the frequency of clinical symptoms of separation anxiety in children. It includes the four symptom dimensions of separation anxiety: Fear of Being Alone (FBA), Fear of Abandonment (FAb), Fear of Physical Illness (FPI), and Worry about Calamitous Events (WCE), more two complementary subscales Safety Signals Index (SS) and Frequency of Calamitous Events (FCE). This research included two independent studies with individual samples of children from 8-11 years, of both genders in equal proportion. The first study involved 1,281 school children and 910 parents; exploratory factor analysis identified four suggested factors by the creators of the scale: FBA, FAb, FPI and WCE. The second study involved 4,628 school children and 4,127 parents. Factor analysis confirmed the four dimensional structure of separation anxiety, with a satisfactory percentage of variance explained. Internal consistency, temporal stability, convergent validity, discriminant validity, sensitivity and specificity of the four symptom dimensions were adequate. The psychometric properties of the complementary subscales were adequate with certain deficiencies; both subscales correctly classified a high percentage of cases with separation anxiety disorder, especially Safety Signals Index (SS). The child-parent agreement was poor. In conclusion, SAAS is a valid, reliable and clinically useful scale, which enables to obtain profiles of separation anxiety disorder that help scale psychological treatment plan. The objectives of the second study were to adapt and evaluate the program Fortius (Méndez, Llavona, Espada y Orgilés, 2013), for adolescent population. In this study 443 children of lower Compulsory Secondary Education participated, mean age 12.59 years, of both genders in the same proportion; 307 out of 443 received the program (experimental group) and 136 did not (control group). The Fortius program combines a clinical psychology approach aimed of solving emotional difficulties with positive psychology oriented to promote personal skills. Its main components are relaxation, breathing and visualization (emotional strength), pleasant activities and social skills (behavioral strength), cognitive restructuring, problem solving and self-instructions (cognitive strength). It was applied collectively in the classroom in twelve sessions, during 50-60 minutes, by psychologists with specific training in the program. After twelve months, the program reduced anxiety symptoms in younger adolescents, the number of cases with high anxiety symptoms (risk population), depressive symptoms and behavioral problems in girls; also improved perceived health. Teenagers within experimental group and group leaders made a positive assessment of the Fortius program; group leaders also considered the degree of difficulty to implement it is low.
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Actitud hacia la donación de órganos de los adolescentes y del profesorado de Educación Secundaria en la Comunidad Autónoma de la Región de MurciaFebrero Sánchez, Beatriz 27 July 2015 (has links)
OBJETIVOS: a) Respecto a la población adolescente (1ª parte de la tesis): Analizar: 1) la actitud hacia la donación de órganos propios de los adolescentes de la Región de Murcia y 2) las variables psico-sociales influyentes en la actitud; 3) Definir el perfil psico-social favorable y desfavorable hacia la donación de órganos. b) Respecto al profesorado (2ª parte de la tesis): Analizar: 1) la actitud hacia la donación de órganos propios del profesorado de Educación Secundaria (E.S.) de la Región de Murcia y 2) las variables psico-sociales influyentes en la actitud; 3) Definir el perfil psico-social favorable y desfavorable; y 4) Determinar el flujo de información sobre donación y trasplante de órganos (D.T.O.) entre profesorado y alumnado. MATERIAL Y MÉTODOS: a) Población adolescente: La población a estudio corresponde a los adolescentes entre 12 y 16 años de la Región de Murcia. Se selecciona una muestra estratificada por localización geográfica, sexo y edad (n=4.117), utilizando los centros educativos de E.S. para el muestreo. La actitud se valora mediante un cuestionario validado sobre D.T.O. Cumplimentación anónima y auto-administrada. Estadística: Test de la t de Student y de Chi Cuadrado. Análisis multivariante. b) Profesorado: La población a estudio corresponde al profesorado de E.S. Se utiliza el muestreo de centros educativos del proyecto de los adolescentes, obteniendo una muestra de 328 profesores. La actitud se evalúa mediante un cuestionario validado sobre D.T.O. Cumplimentación anónima y auto-administrada. Estadística: Test de la t de Student y de Chi Cuadrado. Análisis multivariante. RESULTADOS. a) Población adolescente: Grado de cumplimentación: 87% (n=3.572), con un 46% a favor de donar sus órganos y un 40% de indecisos. Variables influyentes en la actitud: edad (OR 1.904), sexo (OR 1.364), información recibida por conversaciones con amigos (OR 2.169), valorar que se tiene una buena información sobre D.T.O. (OR 1.706), conocer a algún donante (OR 1.562), comentar el tema de la D.T.O. con la familia (OR 1.543) y con los amigos (OR 1.818), realizar actividades pro-sociales (OR 1.642), aceptación de la incineración (OR 1.466) y de la autopsia (OR 1.470) tras la muerte, y no tener miedo a las cicatrices tras donar los órganos (OR 4.184). b) Profesorado: Grado de cumplimentación: 88% (n=288), con un 75% a favor de donar sus órganos. Variables que influyen en la actitud: conocimiento del concepto de muerte encefálica (p=0.006), confianza en el sistema sanitario (p=0.01), opinión de la pareja hacia la donación de órganos (OR 3.194), ser donante de sangre (OR 8.264), y aceptación de la incineración (OR 3.003) y de la autopsia (OR 4.716) tras la muerte. El 7% (n=20) de los profesores indican que los alumnos les han solicitado información sobre D.T.O., y el 16% (n=47) que la han proporcionado. CONCLUSIONES: 1.-La actitud favorable hacia la donación de órganos de los adolescentes de la Región de Murcia es baja, no alcanzando el 50% de los encuestados, y, además, también se evidencia un alto porcentaje de indecisos. 2.-El perfil psico-social del adolescente con una actitud desfavorable se caracteriza por no haber recibido información ni formación sobre donación de órganos, no haber tratado el tema en el ámbito socio-familiar, no aceptar la manipulación del cadáver, ni estar implicado en actividades pro-sociales. 3.-A pesar de que dos tercios de los profesores de E.S. de la C.A. de la Región de Murcia tienen una actitud favorable hacia la donación de órganos, todavía existe un 25% de profesorado que no está claramente a favor, y estos profesores no transmiten una información adecuada a su alumnado. 4.-El perfil psico-social de los profesores que no están a favor de la donación de órganos se caracteriza por asociar un desconocimiento importante de los aspectos relevantes del donante de órganos, como por ejemplo, el concepto de muerte encefálica, además de mostrar prejuicios sobre la manipulación del cadáver, desconfianza con el sistema sanitario, y no relacionarse con un núcleo familiar favorable hacia la donación de órganos. / OBJECTIVES: a) Regarding the adolescent population (1st part of the thesis): 1) to analyze the attitude of adolescents from the Region of Murcia toward the donation of their own organs; 2) to analyze the psychosocial variables affecting attitude; and 3) to define the psychosocial profile of those in favor and against organ donation. b) Regarding teachers (2nd part of the thesis): 1) to analyze the attitude of Secondary School (S.S.) teachers in the Region of Murcia to the donation of their own organs; 2) to analyze the psychosocial variables affecting attitude; 3) To define the psychosocial profile of those in favor and against; and 4) to determine the flow of information about organ donation and transplantation (O.D.T.) among teachers and students. MATERIALS AND METHODS: a) Adolescent population: The study population consisted of adolescents aged between 12 and 16 years in the Region of Murcia. A sample was selected from secondary schools (S.S.) and stratified by geographical location, sex and age (n=4.117). Attitude was assessed through a validated self-administered questionnaire about O.D.T. Statistical analysis: Student's T-test and the X2 test. Multivariate analysis. b) Teachers: The study population consisted of S.S. teachers. A sample was taken from the schools where the adolescent project was being carried out, obtaining a sample of 328 teachers. Attitude was assessed using a validated questionnaire on O.D.T. which was self-administered and completed anonymously. Statistical analysis: Student's T-test and the X2 test. Multivariate analysis. RESULTS. a) Adolescent population: Questionnaire completion rate by the adolescents: 87% (n=3.572), with 46% in favor of donating their organs and 43% undecided. Variables affecting attitude: age (OR 1.904), sex (OR 1.364), information received through conversations with friends (OR 2.169), a belief in having good information about O.D.T. (OR 1.706), knowing a donor (OR 1.562), having discussed the subject of O.D.T. with one's family (OR 1.543) and with one's friends (OR 1.818), participating in pro-social activities (OR 1.642), acceptance of cremation (OR 1.466) and autopsy (OR 1.470) after death, and not being afraid of scars being left after organ donation (OR 4.184). b) Regarding the teachers: Questionnaire completion rate: 88% (n=288), with 75% in favor of donating their organs. Variables affecting attitude: knowledge of the concept of brain death (p=0.006), trust in healthcare system (p=0. 01), their partner's attitude towards organ donation (OR 3.194), being a blood donor (OR 8.264), and acceptance of cremation (OR 3.003) and autopsy (OR 4.716) after death. 7% (n=20) of the teachers stated that their students had requested information from them about O.D.T., and 16% (n=47) indicated that they had provided information to students. CONCLUSIONS: 1.-The number of adolescents from the Region of Murcia with a favorable attitude toward organ donation is low, not reaching 50% and, a high number of undecided cases have been reported. 2.-The psycho-social profile of an adolescent with an unfavorable attitude toward the matter is characterized by not having received information or training about organ donation, not having discussed the subject with friends or family, non-acceptance of manipulation of the body, and not being involved in pro-social activities. 3.-In spite of two thirds of S.S. teachers from the Region of Murcia having a favorable attitude toward organ donation, 25% of the teachers are clearly not in favor, and these teachers did not provide adequate information to their students. 4.-The psychosocial profile of teachers who are not in favor of organ donation is characterized a lack of understanding of a number of relevant aspects related to organ donation, such as, not understanding the concept of brain death, a bias against the manipulation of the body, a lack of trust in the healthcare system, and not having a relationship with a family that is in favor of organ donation.
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Caracterización de la microbiota intestinal mediante "NGS" en patología neoplásica de colónGalán Ros, Jorge 27 July 2015 (has links)
Objetivos: Nuestro objetivo consistió en caracterizar, mediante secuenciación de próxima generación (NGS), la microbiota colónica en muestras de mucosa normal y tumoral de pacientes con cáncer colorrectal (CCR), así como en muestras de heces de pacientes sanos y enfermos, además de estudiar las diferencias en la composición microbiana según el tipo, estadío y localización tumoral, con el fin de sugerir qué tipo de bacterias podrían estar previsiblemente involucradas en la localización, desarrollo y evolución del CCR. Material y métodos: En este estudio se analizaron 59 muestras de tejido de pacientes con CCR, donde n=39 correspondían a tejido tumoral (TT) y n= 20 a tejido normal (TN), 9 muestras de tejido adenomatoso (TA) y 7 muestras de heces, donde n=3 procedían de pacientes sanos y n=3 de pacientes con CCR. El estudio de NGS se llevó a cabo en 38 muestras, donde n= 10 correspondían a TN, n=19 a TT, n=2 a TA y n=7 a heces. Posteriormente, escogimos aquellos grupos bacterianos que resultaran de interés y mostraran diferencias significativas entre las comparaciones objeto de estudio para cuantificarlos y validarlos por qPCR, tanto en esta serie de pacientes como en otra serie independiente de pacientes con 37 muestras, donde n=10 correspondía a TN, n=20 a TT y n=7 a TA. Las muestras de tejido tumoral se clasificaron según el tipo (convencional o serrado), localización (distal o proximal) y el estadío mediante el sistema TNM. Tras la extracción del DNA, la amplificación por PCR se llevó a cabo empleando cebadores 27F y 533R que amplifican la región V1-V3 del gen rRNA 16S con los adaptadores A y B de la química Titanium correspondientes a los kits tipo “shot-gun” Lib-L, empleando el equipo 454-Junior de Roche. La qPCR se realizó mediante el uso de cebadores genéricos y específicos de especie/género del gen 16S RNA, con la sonda inespecífica SybrGreen (QuantiTec-Qiagen). El estudio bioinformático para el análisis de calidad, filtrado de secuencias, búsqueda de quimeras y clasificación taxonómica se realizó mediante los programas “FAST QC”, “prinseq-lite.pl script”, “USEARCH” y “RDP classifier” respectivamente. El análisis estadístico relativo a los resultados obtenidos mediante NGS y qPCR se llevó a cabo mediante el empleo del test de Wilcoxon (R-Studio y SPSS 21.0). Resultados: El tejido tumoral se encontraba representado fundamentalmente por el género Fusobacterium (p=0.033) además de otros géneros bacterianos estrechamente relacionados al tejido tumoral, tales como Porphyromonas, Streptococcus y Enterococcus. En el tejido normal observamos un predominio del género Akkermansia (p=0.039). Según el tipo de carcinoma, encontramos que los géneros Fusobacterium, Aeromonas, Streptococcus y Enterobacter fueron más frecuentes en adenocarcinoma serrado (CS) (p=0.045, p=0.033, p=0.013 y p=0.009, respectivamente), a diferencia del género Enterococcus el cual fué más frecuente en adenocarcinoma convencional (CC) (p=0.045). En cuanto al estadío del tumor, solamente encontramos diferencias significativas para el género Faecalibacterium, el cual mostró una asociación con estadíos tumorales avanzados (T3-4) (p=0.042). Según la localización del tumor, los géneros Haemophilus, Prevotella, y Blautia (p=0.029, p=0.044 y p=0.008) se asociaron a tumores de localización proximal, mientras que Enterococcus (p=0.027) mostró una asociación a tumores de zona distal. Del mismo modo, encontramos una mayor presencia de géneros pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae en la zona proximal. Tras el análisis mediante qPCR en ambas series de pacientes, observamos de forma significativa la misma tendencia de resultados para Fusobacterium nucleatum, Akkermansia muciniphila, Faecalibacterium prausnitzii y Enterococcus. En cuanto a las muestras de heces, encontramos un importante predominio de A. muciniphila en pacientes con CCR a diferencia de lo observado en muestras de heces de pacientes sanos donde predominó F. prausnitzii. Conclusiones: F. nucleatum fue una bacteria asociada no sólo con el desarrollo del CCR en general como había sido descrito con anterioridad sino específicamente con el subtipo del adenocarcinoma serrado, siendo la primera vez que se demuestra que la histología del CCR tiene relación con el tipo de microbiota. En tumores con estadíos T3-T4 se asoció un perfil microbiano caracterizado fundamentalmente por bacterias de tipo passengers, ya sea con actividad proinflamatoria como F. nucleatum o de actividad antiinflamatoria como F. prausnitzii. Del mismo modo, la localización anatómica se asoció con diferentes perfiles microbianos cuando se comparó el colon distal y proximal. Nuestro estudio demuestra que la caracterización de la microbiota en el desarrollo del CCR es fundamental para conocer la participación de la misma en las distintas localizaciones y rutas patogénicas implicadas en este tumor. Además los perfiles bacterianos pueden constituir interesantes biomarcadores para la detección temprana y el diagnóstico del CCR así como para el diseño de estrategias preventivas basadas en la administración de cepas probióticas capaces de corregir la disbiosis. / Objectives: The aim of this work was to characterize, through next-generation sequencing (NGS), the colonic microbiota in samples from normal and tumor mucosa of patients with colorectal cancer (CRC) and also in stool samples of healthy and affected patients, so we could establish the differences in microbial composition according to the type, stage and location of the tumor. Material and methods: In our study, 59 tissue samples from CRC patients were analyzed, n= 39 corresponded to tumor (TT) and n= 20 to normal tissue (TN), 9 adenomatous tissue samples (TA) and 7 stool samples, where n= 3 were from healthy patients and n= 3 from patients with CRC. The study of NGS, was carried out on 38 samples, corresponding to TN (n=10), TT (n=19), TA (n=2) and feces (n=7). Subsequently, those bacterial groups that were found of interest by showing significant differences between the study comparisons, were validated by quantitative PCR (qPCR) in this patient series and in an independent set of patients consisting of 37 samples, where n= 10 corresponded to TN (n=10), TT (n=20) and TA (n=7). The samples of tumor tissue were classified according to the histological type (conventional or serrated), location (distal or proximal) and stage by TNM system. After DNA extraction, PCR amplification was performed using primers 27F and 533R, that amplify the V1-V3 region form the 16S rRNA gene with adapters A and B corresponding to the kits Titanium "shot-gun" chemical type Lib-L, and the 454-Junior pyrosequencer by Roche. The validation by qPCR was performed using 16S RNA gen primers specific for species or genus and the SybrGreen probe chemistry (QuantiTec-Qiagen). The bioinformatic study for quality analysis, filtering sequences, chimeras withdrawal and taxonomic classification was performed using the "FAST QC", "prinseq-lite.pl script", "USEARCH" and "RDP classifier" programs, respectively. The statistical analysis of the NGS and qPCR results was carried out by applying the Wilcoxon test (R -Studio and SPSS 21.0). Results: The genus Fusobacterium was singnifncantly more abundant in the tumor tissue (p = 0.033) and others bacterial genera closely related, such as Porphyromonas, Streptococcus and Enterococcus. In normal tissue, we observed a predominance of Akkermansia (p = 0.039) and regarding the histological type of carcinoma, we found that Fusobacterium Aeromonas, Streptococcus and Enterobacter were more common in serrated adenocarcinoma (CS) (p= 0.045, p= 0.033, p= 0.013 and p= 0.009, respectively) than conventional (CC), unlike the genus Enterococcus, which was more common in CC (p= 0.045). Concerning tumor stage, we found significant differences for Faecalibacterium, which showed an association with advanced tumor stages (T3-4) (p= 0.042). According to tumor location, Haemophilus, Prevotella, and Blautia (p= 0.029, p= 0.044, p= 0.008) were associated with proximal location tumors, while Enterococcus (p= 0.027) showed a relationship with distal area tumors. Similarly, we observed a higher presence of genera belonging to the family Enterobacteriaceae in the proximal area. After qPCR analysis in both sets of patients, we observed significantly the same trend of results for Fusobacterium nucleatum, Akkermansia muciniphila, Faecalibacterium prausnitzii and Enterococcus. As for the stool samples, we found a significant prevalence of A. muciniphila in patients with CRC, unlike that observed in stool samples from healthy patients predominated F. prausnitzii. Conclusions: F. nucleatum was identified as a bacteria asociated with not only the CRC development in general, as was previously described, but also specifically with the CRC subtype of serrated adenocarcinoma, being the first study reporting that CRC histology could be related with a microbiota type. In tumors with stages T3-T4, we observed a microbial profile characterized essentially by passenger bacteria, either with proinflammatory activity as F. nucleatum or antiinflammatory activity as F. prausnitzii. Regarding the anatomical location, we found different microbial profiles between the distal and proximal colon. Our study shows that microbiota characterization in CRC development is crucial for knowing the bacteria participation in the different locations and pathogenic pathways implicated in this tumor. Besides, bacteria profiles could be interesting biomarkers for the early detection and diagnose of CRC, as well as important elements for the design of preventive strategies based on probiotic treatments which could restore normal microbiota.
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Control de la aberración esférica en la cirugía de la miopía con láser excímerHigueras Esteban, Alejandro 14 March 2014 (has links)
Introducción La corrección de la miopía mediante queratomileusis in situ asistida por láser (LASIK) modifica las aberraciones y en especial la aberración esférica. Esto se manifiesta en condiciones de baja iluminación como una pérdida de calidad visual en forma de halos y condiciona la satisfacción de los pacientes intervenidos. Este deterioro en la calidad de visión nocturna es proporcional al número de dioptrías (D) que son corregidas. El incremento de aberración esférica tras la técnica LASIK se debe a la modificación de la asfericidad (Q) de la cara anterior de la córnea. Sin embargo factores como la cicatrización, la zona óptica eficaz y el perfil de ablación utilizado también han demostrado su influencia. El perfil de ablación Custom Q de Allegretto permite programar asfericidades personalizables que pueden ayudar a mejorar los resultados de este tipo de cirugía. Material y métodos En el análisis retrospectivo, estudiamos 106 pacientes intervenidos de miopía con distintos perfiles de ablación. Cuantificamos como influyen las variables en la aberración esférica ocular inducida a 5mm de diámetro. En el análisis prospectivo comparamos dos grupos de pacientes con miopía elevada (n=71). A un primer grupo le programamos una asfericidad fija de -0,5 y al segundo le programamos una asfericidad personalizada a partir de sus datos topográficos y de aberrometría. Analizamos los resultados refractivos, la aberración esférica inducida, la asfericidad y parámetros de calidad visual. Por último, estudiamos la precisión del topógrafo Pentacam en la medida de la asfericidad postoperatoria. Resultados El perfil de ablación esférica (tipo Munnerlyn) para un defecto refractivo medio de -4,60 D mostró un incremento de aberración esférica de 0,362 ± 0,247 µm. En el perfil de ablación estándar de Allegretto, encontramos un incremento de 0,006 µm en miopes <-3,00 D; 0,105 µm en miopes medios y 0,243 µm en >-5,00 D. El perfil de ablación asférico Custom Q demostró un mayor control de la aberración esférica en todos los grupos de dioptrías. En miopes <-3,00 D el incremento de aberración esférica fue de -0,002 µm; en miopes medios 0,054 µm y en >-5,00 D fue de 0,045 µm. Al programar una asfericidad personalizada obtuvimos un menor incremento de aberración esférica comparado con una Q fija de -0,5. El incremento de aberración esférica en el grupo con asfericidad personalizada fue de 0,019 µm y en el grupo con Q fija fue de 0,039 µm; esta diferencia no fue estadísticamente significativa. En el grupo de Q personalizada obtuvimos una asfericidad postoperatoria de -0,12 mientras que en el grupo con Q fija fue de 0,012; esta diferencia fue estadísticamente significativa. La asfericidad postoperatoria medida con Pentacam y la asfericidad final calculada mostraron diferencias estadísticamente significativas (p<0,001). El error cometido por Pentacam se correlacionó con el tratamiento de miopías altas (p<0,001) y con corneas planas (p<0,016). Conclusiones El perfil de ablación esférica (tipo Munnerlyn) produce incrementos muy notables de aberración esférica. El perfil de ablación estándar de Allegretto es eficaz en el control de la aberración esférica cuando se intervienen miopías bajas. La utilización de una asfericidad personalizada en el tratamiento de miopes >-3,00 D ha demostrado ser un método eficaz en el control de la aberración esférica. El topógrafo Pentacam no mide con precisión la asfericidad postoperatoria especialmente en córneas operadas de miopías elevadas y en sujetos con queratometrías bajas. / Introduction Refractive surgery for myopia correction with in situ laser keratomileusis (LASIK) induces a shift in ocular aberrations and specifically in spherical aberration wich affects in low luminosity environments, creating halos around the lights that can be frustrating postoperative phenomena. Vision quality deterioration is proportional to the amount of corrected diopters (D) LASIK refractive surgery tends to increase spherical aberration due to changes in asphericity (Q) of the anterior corneal surface. However a correlation has also been found between high rates of spherical aberrations and high myopic corrections, cornea wound healing, biomechanical tissue changes and LASIK ablation profile may contribute. Custom Q ablation profile (Allegretto) can be used for customized aspheric treatments achieving better outcomes when performing this surgery. Methods A retrospective review of 106 patients who underwent successful LASIK with different ablation profiles was firstly studied. Statistical analysis was made to quantify how spherical aberration is influenced by the amount of refractive correction, keratometric and ashpericity changes. A second prospective phase of the study was performed with two consecutive groups of patients with moderate and high myopia (n=71). One group would have a fixed programmed asphericity of -0,5 and the second group would have a customized asphericity based on topographic data and aberrometry. We would analyze refractive results, induced spherical aberration, asphericity and visual quality parameters. Finally we study the precision of Pentacam topographic measure of the postoperative asphericity. Results Conventional ablation profile with a mean -4,60 D of preoperative sphere correction registered an increase in spherical aberration of 0,362 ± 0,247 µm. Wavefront optimized algorithm demostrated inconsiderable induction of spherical aberration (0,006 µm) when <-3,00 D were treated. Significant induction was detected in moderate (0,105 µm) and >-5,00 D (0,243 µm). Custom Q algorithm did not induced clinically significant aberrations in any group. Spherical induction in <-3,00 D was 0,002 µm; 0,054 µm in moderate myopia and 0,045 µm in >-5,00 D. Customization of an ideal and individualized asphericity demonstrated lower rates of spherical aberration in comparison with a fixed -0,5 target. Increase in spherical aberration for customized asphericity group was 0,019 µm and 0,039 µm in fixed Q group, this difference was not statistically significant. Customization of asphericity maintained postoperative asphericity at negative values, while fixed programming resulted in positive values wich was a significant statistical difference. Statistically significant differences (p<0,001) were found between postoperative asphericity measured using Pentacam and calculated final asphericity. Pentacam deviation was correlated to the treatment of high myopia (p<0,001) and flat postoperative corneas (p<0,016) Conclusions Conventional ablation (Munnerlyn profile) induces high rates of spherical aberration. Wavefront-optimized algorithm is effective for spherical aberration control when treating low myopia errors. Customized Q profile achieved excellent postoperative spherical aberration outcomes when high myopia was treated. Customized Q profile maintains postoperative asphericity at negative rates. Pentacam does not provide a precise measurement of postoperative asphericity specially in cases with high myopia treated or flat corneas.
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Arte y psicobiografía : un estudio de la obra gráfica de Hans Christian AndersenMatrán Bea, Casilda 30 June 2015 (has links)
Esta investigación aborda por primera vez la psicobiografía de Hans Christian Andersen, desde su obra gráfica. La metodología empleada también es inédita en este tipo de estudios: análisis panofskyano contextualista y hermenéutica psicoanalítica. Los resultados nos han arrojado, a través del significado otorgado a las seis categorías elaboradas ad hoc: Complejo de Edipo, Eros, Thanatos, Represión, Sublimación y Fantasía, que nuestro autor tenía una personalidad egocéntrica y ególatra y de afectividad ciclotímica .Se ha concluido que existe en él una omnipresencia obsesiva de la muerte, frustración amorosa, y “temeroso servilismo” como "mediador" entre su "realidad traumática" y su "obra artística". Toda su obra es un egregio “retorno de lo reprimido” con un “reiterado empleo de la antropomorfización”. Existe un preámbulo del surrealismo. Aparece la catatimia del recuerdo y la pseudología fantástica como elementos que permiten a Andersen "fabular" y contrapesar el complejo de inferioridad que experimenta en sus relaciones sociales. / This research addresses for the first time psychobiography of Hans Christian Andersen, from his graphic work. The methodology is also unpublished in this type of study: panofskyano contextual analysis and psychoanalytic hermeneutical.The results have thrown us through the meaning given to the six categories elaborated ad hoc: Oedipus complex, Eros, Thanatos, Repression, Sublimation and Fantasy, that our author had a sel-centered personality and egotistical and cyclothymic affectivity. It has been concluded that there is in hi an obsessive omnipresence of death,loving frustration,and “fearful servility” as a mediator between his traumatic reality and his artistic work. All his work is an eminent “return of the repressed” with a “repeated use of the anthropomorphization”.There is a preamble of surrealism. It appears the catatimia of keepsake and the fantastic pseudologia as elements that allow Andersen “fabulate” and counterbalance the inferiority complex which experiences i their social relations.
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Evaluación clínica de la salud oral en pacientes con implantes dentales osteointegrados y su impacto en la calidad de vidaParra Pérez, Francisco 27 June 2014 (has links)
Objetivo: el objetivo de nuestro estudio fue comprobar el efecto de la colocación de implantes dentales y su posterior rehabilitación prostodóntica en los distintos aspectos de la salud del paciente odontológico, incluyendo el impacto en la calidad de vida, citotoxicidad y corrosión de los metales que conforman el implante y la prótesis dental y su relación con el tiempo que llevan los mismos en boca. También comprobamos y valoramos su impacto en los tejidos blandos adyacentes y la salud oral. Material y método: se realizó un estudio prospectivo sobre 42 pacientes que en total sumaban 153 implantes. A los pacientes se les sometió a una exploración clínica y radiológica, así como un frotis para obtener células de la mucosa oral el cual usamos para evaluar la presencia de micronucleos en el epitelio gingival y determinar analíticamente mediante el IPCM los iones metálicos. El mismo operador llevó a cabo todas las tareas. Resultados: no se encontraron diferencias significativas entre los pacientes que llevaban los implantes menos de cuatro años y los que los llevaban más en ninguno de los campos, salvo en el marcador de la tensión/ansiedad en el apartado de calidad de vida. Conclusiones: el tiempo transcurrido desde que se llevan los implantes en boca, no influye en el daño genético ni en el IPC masas de los sujetos de nuestro estudio. / Aim: the aim of this study was to check the effect of the placement of dental implants and it subsequent prosthetic rehabilitation in the different aspects of the heath of the dental patient, including the impact on life quality, cytotoxicity and metals corrosion that form the implant and the metal prothesis and it relationship with the time it takes for them in mouth . Also will check and value its impact on the adjacent soft tissues and oral health. Material and methods: A prospective study of 42 patients were performed, the total amount of implants were 153. Patients were subjected to a clinical and radiographic examination and a swab to obtain cells from the oral mucosa which we use to assess the presence of micronuclei in the gingival epithelium and analytically determined by metal ions IPCM. The same operator performed all tasks. Results: no significant differences between patients who had implants less than four years and those who had more in any of the fields except the marker of stress / anxiety in the section on quality of life were found. Conclusions: the time elapsed since the implants were carried in the mouth, does not influence the genetic damage or CPI mases of our study
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Eficacia de un plan de autotratamiento en pacientes con EPOC en la reducción de exacerbacionesAndújar Espinosa, Rubén 16 July 2015 (has links)
Introducción y Justificación: La Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica (EPOC) presenta un incremento de prevalencia y morbi-mortalidad, además se estima que será la tercera causa de muerte en el mundo y la quinta en años de vida perdidos con discapacidad. La EPOC presenta una importante carga asistencial, impacto sociosanitario y económico, deterioro de la calidad de vida y discapacidad. El actual modelo asistencial necesita una profunda revisión para incorporar elementos como educación sanitaria, rehabilitación, promoción del automanejo e implicación del paciente en la toma de decisiones. Los planes de automanejo están dirigidos a la enseñanza de habilidades para optimizar el control de la enfermedad, la carga asistencial y la calidad de vida. En la EPOC, el automanejo se ha estudiado menos que en otras enfermedades crónicas y los beneficios en la práctica general son todavía inconcluyentes. Objetivo: Valorar si un programa de automanejo en pacientes con EPOC frágiles, multicomponente y multidisciplinar reducía la tasa de exacerbaciones graves frente a los cuidados habituales. Material y métodos: Estudio prospectivo, multicéntrico, controlado, aleatorizado y ciego simple. Seguimiento de 12 meses. Se reclutaron pacientes mayores de 50 años diagnosticados de EPOC con al menos un ingreso hospitalario o atención en urgencias por agudización en el año previo. Se excluyeron pacientes con deterioro cognitivo y físico avanzado, comorbilidades severas e imposibilidad de leer textos. Se aleatorizaron en dos grupos: Intervención (GI), al que se les proporcionó un plan de autotratamiento que consistía en un plan escrito de cómo actuar ante los síntomas de agudización y para el manejo del tratamiento en la fase estable, adiestramiento en el uso de inhaladores y se les impartió una sesión educativa grupal por personal experto; y Control (GC) al que se le entregó un manual de autoayuda para la EPOC y se les aplicaron las medidas habituales de la práctica clínica. El seguimiento del GI estuvo compuesto por cuatro visitas y el del GC constó de dos visitas. Se recogieron variables demográficas, espirométricas y de tratamiento. La variable de resultado principal fue la tasa de exacerbaciones graves, las secundarias fueron hospitalizaciones, atenciones urgentes, días de hospitalización, consumo de fármacos durante las exacerbaciones y mortalidad. Resultados: De 250 pacientes reclutados, se aleatorizaron 96 con asignación de 45 al GC y 51 pacientes al GI. Completaron el seguimiento 38 en GC y 47 en GI. La mayoría fueron hombres (78 casos (91,76%) con edad media 67,6 ± 6,9 años. No hubo diferencias significativas en cuanto a las características basales. Tampoco en función pulmonar, número de pacientes con exacerbaciones, atenciones en urgencias por cualquier causa, hospitalizaciones, días hasta el ingreso hospitalario, estancias hospitalarias, calidad de vida, ni uso de medicamentos durante las exacerbaciones. Existe una tendencia en la reducción del número de pacientes con atenciones urgentes por agudización de la EPOC en GI: (4 casos (36,8%) en el GC vs 9 pacientes (19,1%) en el GI (p=0,068)). Se observó una reducción significativa de la tasa de exacerbaciones graves en el GI: (1,37 (1,02 – 1,79) en el GC y 0,89 (0,64 – 1,21) en el GI (p=0,049), con una razón de tasas de 1,53 (1,01 – 2,29). No existieron diferencias en la mortalidad, observándose 2 casos (5,4%) en el GC y ningún caso en el GI (p=0,191). Conclusiones: El plan de autotratamiento (PAT-EPOC) en pacientes con EPOC frágiles redujo significativamente la tasa de exacerbaciones graves al año de su aplicación. El PAT pudo aplicarse en menos de la mitad de la población seleccionada, lo que sugiere que sólo una subpoblación de pacientes con EPOC frágil puede beneficiarse de este tipo de intervenciones. / Introduction and rationale: Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD) is displaying an increased prevalence and increased morbidity and mortality, in addition to which it is estimated that it will be the third leading cause of death worldwide and the fifth in terms of years of life lost due to disability. COPD is associated with a major care burden, an economic, social and health care impact, a deterioration in the quality of life and disability. The current management model needs to be thoroughly revised to incorporate aspects such as health education, rehabilitation, encouragement of self-management and involvement of the patient in decision-taking. Self-management plans are geared to teaching skills to optimise disease control, care burden and quality of life. Self-management has been less studied in COPD than in other chronic diseases and the benefits in general practice are still unclear. Objective: To evaluate whether a multicomponent and multidisciplinary self-management programme in frail patients reduces the rate of severe exacerbations compared with usual care. Material and methods: Prospective, multicentre, controlled, randomised, single-blind study. Twelve-month follow-up. Patients over 50 years of age diagnosed with COPD with at least one hospital admission or emergency department visit due to exacerbation in the previous year were recruited. Patients with advanced cognitive and physical impairment, severe comorbidities and an inability to read texts were excluded. They were randomised to two groups: Intervention (IG), which was issued with a self-treatment plan consisting of a written plan of what to do in the event of symptoms of exacerbation and how to manage the treatment in the stable phase, instructed in the use of inhalers and given a group education session by expert staff; and Control (CG), which was handed a self-help manual for COPD and administered the usual clinical practice measures. Follow-up of the IG comprised four visits and that of the CG consisted of two visits. Demographic, spirometric and treatment variables were collected. The primary outcome variable was the rate of severe exacerbations and the secondary outcome variables were hospitalisations, emergency management, days of hospitalisation, consumption of drugs during exacerbations and mortality. Results: Of 250 patients recruited, 96 were randomised, with 45 being assigned to the CG and 51 patients to the IG. Thirty-eight in the CG and 47 in the IG completed the follow-up. The majority were men (78 cases (91.76%)) with a mean age of 67.6 ± 6.9 years. There were no significant differences in terms of baseline characteristics, nor in lung function, number of patients with exacerbations, emergency management for any reason, hospitalisations, days until hospital admission, hospital stays, quality of life or use of medication during exacerbations. There is a tendency to a reduction in the number of patients with emergency management due to exacerbation of COPD in IG: 4 cases (36.8%) in the CG vs 9 patients (19.1%) in the IG (p = 0.068). A significant reduction in the rate of severe exacerbations was observed in the IG: 1.37 (1.02 – 1.79) in the CG and 0.89 (0.64 – 1.21) in the IG (p = 0.049) with a rate ratio of 1.53 (1.01 – 2.29). There were no differences in mortality, two cases (5.4%) being observed in the CG and none in the IG (p = 0.191). Conclusions: The self-treatment plan (STP-COPD) in frail patients with COPD significantly reduced the rate of severe exacerbations in the year of its application. The STP could be applied in less than half the selected population, which suggests that only a subpopulation of frail patients with COPD can benefit from this type of intervention.
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Eficacia de sugammadex en la reversión del bloqueo neuromuscular profundo inducido por rocuronio en pacientes con enfermedad renal terminal sometidos a trasplante renalNavarro García, Natalia 02 May 2014 (has links)
Eficacia de sugammadex en la reversión del bloqueo neuromuscular profundo inducido por rocuronio en pacientes con enfermedad renal terminal sometidos a trasplante renal. Sugammadex antagoniza el bloqueo neuromuscular (BNM) inducido por rocuronio, encapsulando las moléculas de rocuronio en plasma originando un complejo que se excreta principalmente por los riñones. Nuestro objetivo es comparar la eficacia y seguridad de sugammadex en la reversión del BNM profundo, después de cirugía para trasplante renal en pacientes con enfermedad renal terminal (ERT) y compararlo con pacientes con función renal normal. Estudio multicéntrico, prospectivo, aleatorizado, grupos paralelos con reclutamiento competitivo. Se seleccionaron de forma consecutiva veinte pacientes con ERT programados para trasplante renal de donante cadáver (GT) y veinte controles con función renal normal (CG). Anestesia: propofol TCI, remifentanyl, rocuronio para mantener un nivel de BNM profundo (PTC<3) durante todo el procedimiento, medido por aceleromiografía (Tof Watch). Sugammadex 4 mg / kg al finalizar sutura de piel Variable de eficacia primaria: tiempo desde sugammadex hasta alcanzar TOF ratio > 0,9 (segundos). Variables secundarias: tiempo hasta TOF ratio > 0,8, tiempo hasta TOF > 0,7, tiempo hasta obtener bloqueo máximo (onset time), condiciones de intubación (escala), tiempo quirúrgico (minutos). Los cambios en intervalo QTc (Holter), SatO2, frecuencia respiratoria y otros signos clínicos se midieron de forma continua durante las dos horas siguientes de administrar sugammadex La calidad de recuperación se midió mediante pruebas clínicas, recurrencia de BNM (definida como un valor de TOF < 0,9), ECG continuo (Holter) y por medio de una escala de recuperación (PQRS) 15 minutos y dos horas después de administrar sugammadex. Para calcular el tamaño de muestra, estimando una diferencia máxima previsible del tiempo en alcanzar un TOF > 0.9 entre grupos, de 120 segundos, con error de probabilidad tipo I, (α= 0.05), probabilidad de error tipo II (ß= 0.10) y potencia del 90% (1-ß), con desviación estándar máxima de 130 segundos, se necesita una muestra de al menos de 18 pacientes. Los datos se trataron con el SSPS vs 17, se utilizó test de Levene para comprobar la homogeneidad de varianzas. Para comparar las medias se utilizó la t de Student para muestras independientes. Los datos se expresan como media (desviación estándar [max- min]), considerado significativo valores de p < 0,05. Todos los pacientes completaron el estudio. No hubo diferencias significativas entre grupos con respecto a edad, sexo, altura o tiempo de duración de la cirugía. El peso en el GT: 66 (10 [45-79]) fue menor que en el GC: 73 (13 [52-96 ]) kg (p < 0,05) . Todos los pacientes en GT estaban en diálisis al menos tres meses antes. El tiempo medio de tratamiento con diálisis fue de 55,1 (31,1 [17-132]) meses. El Cl Cr fue significativamente menor en GT: 9,7 (4,1 [4,2 a 19,5] ) vs en GC: 126 ( 34 [75-188] ) ml.min - 1 ( * p < 0,05 ). El onset time y las condiciones de intubación no fueron significativamente diferentes entre grupos. La variable principal: tiempo hasta alcanzar un TOF > 0,9 en GT: 315 (190 [33-668]) segundos, fue significativamente mayor (* p < 0,05) que en el GC: 165 (79 [63-382]. No se registraron eventos adversos relacionados con el fármaco ni evidencia clínica ni monitorizada de parálisis residual, recurrencia de BNM, o cambios en la repolarización cardiaca en ningún paciente. Sugammadex 4 mg/kg permite una reversión completa, rápida y segura del BNM profundo y sin eventos adversos en pacientes con enfermedad renal terminal al final de la cirugía para el trasplante renal.
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Pérdida ósea y remodelación de tejidos blandos en implantes : propuesta de investigación para disminuirla en el proceso de osteointegración del implanteLópez López, Patricia-Jara 05 December 2014 (has links)
Objetivos: Nuestro trabajo realizado perros American Fox Hound pretende valorar el comportamiento de los implantes de titanio, dependiendo de su colocación en el hueso a nivel vertical, dependiendo del diseño del implante, y dependiendo del diseño del aditamento en su etapa de cicatrización, para su utilización en la práctica odontológica. Para ello planteamos los siguientes objetivos: 1- Evaluar la pérdida ósea crestal según la posición crestal o subcrestal del implante (posición más idónea en sentido apico-coronal). 2- Evaluar la pérdida ósea crestal y los tejidos blandos periimplantarios según el diseño del cuello del implante. 3- Evaluar la influencia de los diseños de los aditamentos de cicatrización inmediatos en tejidos duros y blandos periimplantarios. Material y métodos: Se realizó un estudio piloto en perros. A los cuáles se les extrajeron segundo, tercer y cuarto premolar y primer molar mandibulares colocando implantes inmediatos. Se colocaron implantes en posición crestal y subcrestal, se colocaron dos tipos de diseño de implantes (con un diseño con microroscas en su parte coronal y otro con un diseño con cuello pulido en su parte coronal) y se colocaron 2 tipos de aditamentos de cicatrización(uno con un diseño recto y otro con un diseño anatómico). Los perros se sacrificaron a las 8 y 12 semanas y se obtuvieron las muestras. Las biopsias serán procesadas para el análisis. Se relizaron análisis histométricos(con medidas relativas) para comparar los diferentes objetivos mencionados anterioremente. En orden a cumplimentar los objetivos propuestos para este trabajo de tesis doctoral, la investigación se aborda desde una triple perspectiva: En primer término, compara 24 implantes colocados en posición crestal y 24 implantes colocados en posición subcrestal, en segundo término, se comparan 24 implantes con un diseño a nivel coronal de superfície pulida del implante, con 24 implantes con un diseño de microroscas a nivel coronal del implante y por último se compararan los aditamentos de cicatrización inicial, 24 implantes con un aditamento con forma anatómica y 24 implantes con un aditamento con forma recta cóncava. Conclusión Las conclusiones de nuestro estudio fueron: - Con la colocación de implantes 2 mm subcrestales en sentido vertical, en vez de en una posición crestal, podemos esperar menos reabsorción ósea, y más contacto de hueso con el implante, en colocación de implantes inmediatos post-extracción. - El diseño a nivel del cuello del implante puede influir en la reabsorción ósea y en la predisposición de los tejidos blandos, siendo mejor un diseño con microroscas en la parte cervical del implante. - La utilización de un aditamento de cicatrización con diseño anatómico en implantes inmediatos post-extracción protege tejidos blandos y duros, pudiendo producir menos reabsorción ósea y mayor rígidez de la mucosa periimplantaria. / Our work in American Fox Hound Dogs aims to assess the behavior of titanium implants, depending on its placement in the bone vertically and on the design of the implant and abutment at the stage of healing, for use in dental practice. For this purpose we propose the following objectives: 1- Evaluate crestal bone loss according to the position of the implant, crestal or subcrestal (most suitable position in apico-coronal direction). 2- Evaluate the crestal bone loss and peri-implant soft tissue according to the design of the implant neck. 3- Evaluate the influence of designs abutments on immediate healing in peri-implant hard and soft tissues. Material and methods: A pilot study was conducted in dogs. They were extracted second, third and fourth premolar and first molar placing immediate implants. The implants were placed crestal and subcrestally with two types of implant design (with a microthreated design in the coronal part and one with a polished design in the coronal part. And two types of healing abutments were placed (one with a straight concave design and one with an anatomical design). The dogs were sacrificed at 8 and 12 weeks and the samples were obtained. The biopsies will be processed for analysis. Perform the histomorphometric analysis (with relative measurements) to compare the different objectives of previously mentioned. In order to fulfill the objectives for this doctoral thesis, research is approached from three perspectives: Firstly, compared 24 implants placed in crestal position and 24 implants placed subcrestally , secondly compared 24 implants with a microtheared design in the coronal part (neck of the implant) and 24 implants with a polished surface in the coronal part, and finally compared healing abutments, 24 implants with anatomical shaped and 24 implants with concave straight shape. Conclusion The findings of our study were: - With implants placed 2 mm subcrestally, we can expect less bone resorption and more bone contact with the implant, placing implants immediate post-extraction. - The design of the implant neck may influence in bone resorption and in the remodeling of the soft tissues, being better the design with microthreated in the cervical part of the implant. - The use of a healing abutment with anatomical design in immediate post-extraction implant protects hard and soft tissues and can produce less bone resorption and increased stiffness of the peri-implant mucosa.
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