Made available in DSpace on 2014-06-12T23:15:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3318_1.pdf: 1751915 bytes, checksum: b1f2b13e084eb72dbb204cbfab9df2f3 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os liquens são organismos que degradam rochas pela ação química de suas substâncias e mecânica por incrustação no substrato, favorecendo o processo de formação do solo. Os liquens quando submetidos a diferentes doses de radiação, são estimulados a produzirem suas substâncias em quantidades diferenciadas daquelas que produziriam sem a intervenção das mesmas. Nesta pesquisa, objetivou-se determinar possíveis mudanças na produção do ácido barbático (BAR) pelo líquen Cladonia salzmannii, submetido a diferentes doses de radiação gama, e determinar se seus compostos lixiviados para o solo alterariam sua composição química. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado constituindo cinco tratamentos com cinco repetições. Amostras com 8g de C. salzmannii foram submetidas a doses de radiação gama de 5; 10; 60 e 100Gy, acondicionadas em bandejas plásticas contendo 1kg de solo. Durante todo o experimento, as amostras foram borrifadas com 20mL de água destilada em dias alternados. Amostras de liquens e de solo foram coletadas aos 7, 28, 71, 100 e 136 dias e, analisadas por espectrofotometria, Cromatografia em Camada Delgada (CCD) e Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Os resultados evidenciaram um aumento na produção do BAR na dose de 5Gy. Houve uma tendência de redução na produção, havendo uma biossíntese bastante reduzida aos 100Gy. Foram determinados os valores de pH, teores de carbono total e nitrogênio total de cada unidade experimental, sendo observados aumentos destes atributos químicos, principalmente nos tratamentos irradiados

Acid phosphatases (apase) are important hydrolytic enzymes that function in the acquisition, production; transport and recycling of inorganic phosphate (Pi), thus making a significant contribution towards nutrients dynamic of many ecological niches. The aim of this study was to characterize the apase enzyme found in the lichen Cladonia portentosa at the molecular level. The initial experiment entailed cloning the apase gene by PCR using degenerate primers designed from close relatives of C. portentosa from the Ascomycete family. The isolation of apase gene from Cladonia portentosa using PCR was not successful. Attempts were then made to purify the secreted apase and to determine its biochemical and molecular properties and to allow comparison with already characterized secreted phosphatases from other fungal sources existing in the NCBI database. It was anticipated that the partial sequence of the purified enzymes would provide a corresponding apase gene. The acid phosphatase enzyme was partial purified to 45 fold by a gel filtration with a yield of 18%. It gave a single, broad glycoprotein band on native PAGE and SDS-PAGE corresponding in size to 250 and 148 kDa, respectively. Under reducing conditions, the purified enzyme migrated as two bands of 116 and 32 kDa, indicating the heterodimer nature of this enzyme. Only one distinct band, (pI 6.4) was observed after electrofocusing. The optimum temperature for the enzyme was 65 °C where an optimal pH was detected at 2.5. The enzyme was inhibited by known acid phosphatase inhibitors (fluoride, molybdate, orthovanadate and tartrate) and the metals (Cu²⁺ and Zn²⁺). The purified enzyme demonstrated broad substrates selectivity and had a KM of 31.2±0.25 μM for phytic acid. Peptide analysis by Mass Spectrometry (MS) MALDI-TOF indicated the presence of two apase proteins. The amino sequences of purified apase/s from Cladonia portentosa were FLAETNPAPFGH, AVGLGYVEELLAR and AQGLGYVQEVLAR. Comparing the amino acids of the sequenced protein with that of already known proteins confirmed the enzyme to be a secreted histidine acid phosphatase, resembling other acid phosphatases and phytase from several filamentous fungi with respect to amino acid composition. To investigate the effect of phosphorus on C. portentosa apase, the mycelium was grown under different concentrations of Pi [0.05, 1.0, 3.0, 10 and 100 mM (KH₂PO₄)]. The aim was to localize the apase enzyme and to screen for the occurrence of the gene coding for the acid phosphatase enzyme. A treatment of 3.0 mM Pi induced high levels of apase compared to all other treatments. In addition, cultures of C. portentosa were grown in axenic cultures to study the effect of pH and Pi versus menadione on the production of acid phosphatase and mycelia growth. A culture media of pH 4.8 and 6.0 resulted in higher apase secretion than when compared with pH 2.5 medium. The presence of 2.0 μM menadione marginally increased levels of the apase compared to the control treatment. Apase was further localized cytochemically using fluorescent substrate-enzyme-labelled fluorescence (ELF-97) which forms a fluorescent crystalline precipitate at the site of phosphate activity. Fluorescent microscope revealed that the enzyme was present in all treatments, irrespective of Pi concentration, however, the fluorescence signals were intense in low Pi concentrations (0.05 and 1.0 and 3.0 mM Pi). Ultrastructure localization using live mycelium under confocal microscopy using Vector blue III substrate revealed that the enzyme was localized in the cytoplasm, cell membrane, vacuole and small organelles, presumed to be endosomes. Co-staining with FM4-64, confirmed the punctuate structure to be secretory vesicles or a vacuolar network. To investigate the effect of P starvation on C. portentosa at a molecular level, the effect of Pi on the gene expression profile was examined. The generation of a cDNA library from axenic grown mycelium treated with P provided a foundation for the identification and characterization of genes expressed in the P treated mycelium through expressed sequence tags (ESTs). Several genes were identified whose transcriptional profiles have been significantly changed by phosphorus treatment and menadione. They include genes required for signal transduction and vesicular transport, cell biosynthesis and protein metabolism and stress response. In conclusion, this study constitutes the first step towards understanding the molecular mechanism governing acid phosphatase in C. portentosa. / Thesis (Ph.D.)-University of KwaZulu-Natal, Pietermaritzburg, 2011.

Cladonia is one of the largest and widely distributed genera of lichen-forming fungi and some form the main winter diet for northern caribou and dominate the northern peatlands. Therefore, they are an ecologically important group of lichens. The ongoing climate change of the northern regions, impose challenges for lichen growth and algal interactions in these species. As in other organisms, genetic variability and phenotypic plasticity in the resynthesis of the lichen thallus will be important for their continued survival. The goal of my thesis is to better understand the variability of the reindeer lichens in an evolutionary and ecological context. Phylogenetic reconstruction (Chapter 2) together with genetic polymorphic studies with RAPD (Chapter 3) showed a lack of monophyly for 12 of 18 species of Cladonia and significant intraspecific genetic variation within the group. Genetic variation in the obligate fungal partner must also rely on the success of the symbiont interaction, which was further studied by resynthesis experiments. In vitro resynthesis experiments of C. rangiferina (Chapter 4) examined recognition- and defense-related genes of the symbionts of C. rangiferina using quantitative Polymerase Chain Reaction (qPCR) (Chapter 5) and suggested that the communication between partners occur and the survival and reestablishment of lichens in nature is affected by the presence of the compatible algal pool. This emphasizes the importance of finding the compatible algal partner for successful lichenization and suggests that parasitism and short-term interaction with incompatible algae may be a strategy allowing the fungus to survive until it finds a compatible algal partner. These studies also make parallels between the lichen symbiosis and plant pathogenic systems and provide molecular evidence for the parasitic nature of the lichen symbiosis. The collapse of the interaction between symbionts of C. rangiferina under varying temperature and pH conditions (Chapter 6) suggests the potential effect of habitat change on the reestablishment of lichens in nature. In summary, my Ph. D. research showed the importance of genetic and symbiotic versatility in an ecologically important species, using a model species in the group Cladonia and raised new questions for other lichen symbioses relevant to their life styles and habitats.

The thesis is dealing with biomonitoring of terrestrial lichens occurring in lichen pine forests L8.1A in the Česká Lípa district in northern Bohemia. Altogether, 57 species of terrestrial lichens were recorded based on excerption of historical literature. Field survey managed to find 33 species of terrestrial lichens. We succeed to find six new species for the area of study. Within the categories of endangerment of species have occurred primarily common species (LC), as well as nearly threatened (NT), but also vulnerable species (Cladonia cervicornis, C. ciliata, C. glauca, C. macrophylla, and C. strepsilis). Two species of endangered lichens EN (Cladonia crispata and C. portentosa) were also found. Based on the biodiversity research in 27 plots and comparison of vegetation plots and abundance of species in every plot, diagnostic (Dg) and dominant (Dm) species were found. Using restricted analysis of the RDA the variability of data is the best explained with relation of species to individual sites. Altitude and pH appeared marginally significant. Using unlimited linear PCA analysis and comparative dendrogram was found, in which plots are most abundant species and the plots of similar species composition. The result of the revision of habitat mapping segments L8.1, subunit L8.1A is finding that many segments should be amended quality and maintained or should be allocated to another habitat. Of the 55 segments the only one segment was correctly evaluated. Based on the habitat mapping in terms of coverage E0 was discovered 8 emblematic sites subunit L8.1A.

Submitted by Felipe Lapenda (felipe.lapenda@ufpe.br) on 2015-03-06T13:48:11Z No. of bitstreams: 2 TESE Herika Maria da Silva Barbosa.pdf: 5271997 bytes, checksum: f191ae7b9a0e5275b7cc9f864a18ac40 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-06T13:48:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Herika Maria da Silva Barbosa.pdf: 5271997 bytes, checksum: f191ae7b9a0e5275b7cc9f864a18ac40 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-10-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As rochas são degradadas física e quimicamente a partir do intemperismo. Neste processo têm grande importância os liquens, pois seus fenóis ao percolarem para os substratos promovem a quelação com íons dos minerais contidos nas rochas a eles subjacentes. Sabe-se que o nitrogênio tem marcada influência no metabolismo dos liquens, induzindo-os a uma maior produção de fenóis. Neste trabalho objetivou-se investigar a ação do ácido úsnico (USN) produzido pelo líquen Cladonia substellata Vainio sobre amostras de granito procedentes de Sirinhaém e Cabo de Santo Agostinho, bem como basalto procedente de Sirinhaém, Pernambuco, Brasil. Foram utilizados parâmetros de incremento do processo de intemperismo como o emprego de fonte nitrogenada, na forma de ureia, para aumento da biossíntese do USN por C. substellata e o aumento da temperatura (28°C±3 e 42°C±3) como acelerador da velocidade das reações químicas entre íons das rochas e USN. O ácido oxálico comercial (AOX) foi utilizado como controle positivo e as rochas borrifadas com água foram consideradas como controle negativo. Amostras de C. substellata foram coletadas em Mamanguape, Paraíba, Brasil e montados experimentos contendo líquen in natura depositado sobre as rochas trituradas. O material controle foi borrifado com água deionizada em dias alternados e o material tratado foi borrifado com ureia uma vez por semana, nas concentrações de 1%; 0,1% e 0,01% durante seis meses, sendo as amostras rochosas e liquênicas coletadas e avaliadas por Cromatografias em Camada Delgada (CCD), Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), Espectrofotometria, Teste de vitalidade celular com Azul de Evans e Vermelho Neutro. As rochas, antes e depois dos experimentos, foram avaliadas por microscopia petrográfica, Difratometria de Raios-X e Espectrometria de Emissão Atômica por Plasma Indutivamente Acoplado (ICP/ AES). Os resultados demonstraram que o líquen produziu compostos químicos e que estes foram repassados para as rochas, tendo sido incrementada sua biossíntese pela adição de ureia a 1% e 0,1%. Através do CLAE foi detectado USN nas amostras rochosas. Nos ensaios de vitalidade celular por Azul de Evans e Vermelho Neutro observou-se que nos experimentos borrifados com soluções de ureia a 1% o líquen sofreu maiores danos à sua estrutura e apresentou maior número de células mortas, porém mesmo assim continuou ativo e produzindo fenóis. Nas DRX-s das rochas testadas foram evidenciadas alterações principalmente na albita e no ortoclásio em contato com o USN e de maneira geral foi menos intensa no quartzo. Na maior parte dos experimentos a temperatura foi o fator que mais contribuiu para intensificar a interação entre as rochas com o USN e o AOX. Os dados mineralógicos (DR-X) foram complementados pelas análises químicas de ICP/ AES que comprovaram a quelação de íons rochosos, principalmente diante da temperatura elevada (T=42°C±3). Os íons mais facilmente quelados dos granitos e do basalto foram o Ca, Fe, K, Mg e Si. Foi possível concluir que o USN tem ação pedogenética comparável ao AOX e que fonte exógena de nitrogênio, bem como o aumento da temperatura, incrementam a ação dessa substância.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-14T17:23:49Z No. of bitstreams: 1 Denise Maria de Oliveira Monte.pdf: 637462 bytes, checksum: 88837ffe6b0dbe1dca832eda09cddd1f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-14T17:23:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Denise Maria de Oliveira Monte.pdf: 637462 bytes, checksum: 88837ffe6b0dbe1dca832eda09cddd1f (MD5) Previous issue date: 2012-12-17 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / During storage, grains, seeds and byproducts are subject to attack by pests, which cause qualitative and quantitative losses as reduces the nutritional value of the product and business. To avoid losses chemicals are used, many of which are showing failures in control, which has led to its widespread use. In search of new alternatives, research is being conducted with the goal of developing natural products. Given the diversity of substances extracted from lichens and knowledge about their biological activity, in this work the insecticidal potential of extracts of the lichen Cladonia substellata on beetles Callosobruchus maculatus and Zabrotes subfasciatus to evaluate the toxicity (repellent effect) and bioactivity on mortality, oviposition and emergence of insects in stored beans. For this, we used the meeting and ethereal extracts of C. substellata, which were obtained by successive extractions of exhaustion of the stem liquênico. The extracts were tested separately at rates of 0,02, 0,006 and 0,002 mg / mL on beans Vigna sp, to C. maculatus, and at doses of 0,02 and 0,002 mg / ml on Phaseolus sp beans to Z. subfasciatus. Analysis of thin layer chromatography (TLC) confirmed the presence of usnic acid as major compound. The extracts and ethereal meeting of C. substellata showed repellent effect and caused mortality with increasing dosages utilized in both insects. These results indicate that extracts of C. substellata act on the immature stages of C. maculatus and Z. subfasciatus, usnic acid being present in these extracts probably responsible for the effect ovicidal / larvicidal observed. Further studies with extracts of the lichen C. substellata should be conducted with other concentrations, to evaluate the selectivity and possible effects on the viability and germination of bean seeds. / Durante o armazenamento, os grãos, sementes e seus subprodutos estão sujeitos ao ataque de pragas, os quais ocasionam perdas qualitativas e quantitativas, como redução dos valores nutricionais e comerciais do produto. Para evitar perdas são utilizados produtos químicos, muitos dos quais vêm apresentando falhas no controle, o que tem levado ao seu uso indiscriminado. Em busca de novas alternativas, pesquisas vêm sendo realizadas com o objetivo de desenvolver produtos de origem natural. Tendo em vista a diversidade de substâncias extraídas de liquens e o conhecimento acerca de sua atividade biológica, no presente trabalho foi estudado o potencial inseticida de extratos obtidos do líquen Cladonia substellata sobre os coleópteros Callosobruchus maculatus e Zabrotes subfasciatus, avaliando a toxicidade (efeito repelente) e a bioatividade sobre a mortalidade, emergência e oviposição dos insetos em feijão armazenado. Para isso, foram utilizados os extratos reunido e etéreo de C. substellata, os quais foram obtidos através de extrações sucessivas por esgotamento do talo liquênico. Os extratos foram testados, separadamente, nas doses de 0,02, 0,006 e 0,002 mg/mL sobre os grãos de feijão Vigna sp, para C. maculatus, e nas doses de 0,02 e 0,002 mg/mL sobre os grãos de feijão Phaseolus sp, para Z. subfasciatus. A análise de cromatografia de camada delgada (CCD) confirmou a presença do ácido úsnico como composto majoritário. Os extratos reunido e etéreo de C. substellata mostraram efeito repelente e ocasionaram mortalidades com o aumento das dosagens utilizadas nos dois insetos. Estes resultados indicam que os extratos de C. substellata atuam sobre as fases imaturas de C. maculatus e de Z. subfasciatus, sendo o ácido úsnico presente nesses extratos, provavelmente, o responsável pelo efeito ovicida/larvicida observado. Novos estudos com os extratos do liquen C. substellata devem ser realizados com outras concentrações, para se avaliar a seletividade e possíveis efeitos sobre o poder germinativo e a viabilidade de sementes de feijão.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4546_1.pdf: 2187814 bytes, checksum: dcee2af32859e0ad3e71f0fffdde0979 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os liquens produzem substancias com atividade biológica, que podem ser lixiviadas ao solo e exercer ação alelopática sobre a microbiota. Objetivando estudar a influência do talo liquênico de Cladonia salzmannii sobre a atividade microbiana e sobre os fungos micorrízicos arbusculares (FMA) foram realizados dois experimentos. No 1º experimento avaliou-se o efeito do líquen na atividade microbiana em área de cerrado de Alhandra, estado da Paraíba. No 2º experimento foi avaliado o efeito do talo liquênico na associação micorrízica e no desenvolvimento de plântulas de Genipa americana. No campo, embora o solo sob o tapete liquênico apresentasse menor biomassa microbiana, evolução de CO2 e hidrólise do diacetato de fluoresceina (FDA), e maior colonização micorrízica e esporulação de FMA em relação ao solo com ausência de liquens, não houve diferença estatística entre os tratamentos, fato que pode ser atribuído ao ácido barbático em baixas concentrações no solo. Para o experimento em casa de vegetação, o delineamento experimental foi do tipo inteiramente casualizado, com 4 tratamentos (controle, líquen, líquen+FMA e FMA) em 5 repetições. Após 4 meses as plantas foram avaliadas quanto a altura, diâmetro do caule, biomassa seca e fresca da parte aérea e radicular, densidade de esporos de FMA e colonização micorrízica, avaliou-se também a quantidade de ácido barbático no solo. Não houve diferença entre os tratamentos para altura e diâmetro do caule. As plântulas com líquen+FMA possuíam maior biomassa seca e fresca, tanto da parte aérea quanto radicular. Embora o ácido barbático tenha sido encontrado em baixas concentrações no solo, os tratamentos com liquens apresentavam maior concentração desse ácido do que os com líquen+micorriza

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:54:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4878_1.pdf: 5535606 bytes, checksum: 61c9df9ae2d6c3a43b357521eaa27bab (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Este estudo teve como objetivo produzir os metabólitos de Cladonia substellata Vainio. através do uso de biorreatores com sistema em repouso (tradicional), com movimento e sob fluxo contínuo (inéditas). Os biorreatores foram montados utilizando caulinita como matriz de enclausuramento e acetato de sódio a 0,1; 1,0 e 10mM. No sistema em repouso observou-se a presença dos compostos fenólicos liquênicos nas três concentrações apresentando um pico máximo de produção nas primeiras 48h após a imobilização celular. Ao final de 720h (1mês) ocorreu sensível redução na produção fenólica e nenhuma após 1440 (2 meses). A concentração de 10mm foi a que mais se destacou. O sistema com movimento após 96h apresenta um pico de produção na concentração de 10mM, mantendo-se constante durante 600h (25 dias). A produção de 1,0mM mantêm-se apenas nos três primeiros dias. No sistema com fluxo contínuo, também foi observada produção máxima nas primeiras 96h, porém apenas 504h (21 dias). O mesmo resultado foi observado para concentração de 1,0 mM. As amostras resultantes foram analisadas por cromatografias em camada delgada (CCD), líquida de alta eficiência (HPLC) e espectrofotometria (UV). Observou-se a presença do ácido úsnico, além de outros fenóis nas amostras dos três sistemas. Foi possível concluir que o aumento na concentração do precursor influenciou na produtividade das células liquênicas e, que o sistema com fluxo contínuo mostrou-se mais eficiente que os demais

Submitted by Natalia de Souza Gonçalves (natalia.goncalves@ufpe.br) on 2016-09-19T13:30:21Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) KETSIA SABRINA DO NASCIMENTO MARINHO_PÓS-GRADUAÇÃO EM SAÚDE HUMANA E MEIO AMBIENTE_CENTRO ACADÊMICO DE VITÓRIA_2016.pdf: 1867724 bytes, checksum: ab27218d60feb94b0dc49adbdb83440b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-19T13:30:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) KETSIA SABRINA DO NASCIMENTO MARINHO_PÓS-GRADUAÇÃO EM SAÚDE HUMANA E MEIO AMBIENTE_CENTRO ACADÊMICO DE VITÓRIA_2016.pdf: 1867724 bytes, checksum: ab27218d60feb94b0dc49adbdb83440b (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / CAPES / O ácido úsnico, composto resultante do metabolismo secundário liquênico apresenta relevantes atividades biológicas e diversos casos de hepatotoxicidade já relatados. O desenvolvimento de alternativas inovadoras, a exemplo da encapsulação do ácido úsnico em microesferas, permite aumentar a eficiência terapêutica e diminuir os seus efeitos tóxicos. Ensaios pré-clínicos sobre o ciclo reprodutivo são necessários para a incorporação de novas moléculas na indústria farmacêutica, determinando as condições de uso seguro para a saúde. Em vista disto, este trabalho objetivou a investigação do potencial teratogênico do ácido úsnico encapsulado em microesferas de copolímero de ácido láctico e glicólico, como uma maneira de minimizar os seus efeitos tóxicos no organismo em desenvolvimento. As microesferas contendo ácido úsnico foram preparadas utilizando a técnica de emulsão múltipla (A/O/A), seguida de evaporação do solvente, e caracterizadas através da eficiência de encapsulação. No estudo experimental de toxicidade foram utilizadas 12 ratas Wistar, que foram submetidas ao estudo do ciclo estral no intuito de se determinar o período fértil, e em seguida, pareadas com machos (2:1). Após a confirmação da gestação, as fêmeas foram distribuídas aleatoriamente em grupos, controle (n=6) e tratado (n=6). As fêmeas do grupo controle receberam 1,0 mL de solução fisiológica; e as do grupo tratado receberam doses orais de 25 mg/kg/dia de ácido úsnico encapsulado em microesferas (MS-AU) durante o período da organogênese, pela via oral de administração (gavagem). Ao 20° dia de gestação as fêmeas foram sacrificadas e seus fetos retirados, analisados e pesados juntamente com sua respectiva placenta. O efeito causado pelo tratamento com as MS-AU foi avaliado através da variação de peso corpóreo, peso do fígado, análises bioquímicas e análises histomorfométricas do fígado. As microesferas contendo ácido úsnico apresentaram-se com uma eficiência de encapsulação de 99,0 ± 0,82 %. Foi observada uma redução (86,12 ± 20,69) de cerca de 22% no ganho de peso durante a gestação quando comparado às ratas prenhes não tratadas (110,85 ± 10,03). Não houve diferença no peso dos fígados em todos os grupos de animais. Não houve alterações significativas nas enzimas aspartato aminotransferase e alanina aminotransferase após o tratamento dos animais com o MS-UA. Os fetos provenientes dos animas tratados com MS-AU durante a prenhez, apresentou uma diminuição significativa no peso médio (4,65 ± 0,41) em relação aos não tratados (4,85 ± 0,35), no entanto, não foi observado nenhum tipo de malformação externa. A análise microanatomia do fígado das ratas prenhes do grupo controle e grupo experimental estavam dentro dos padrões de normalidade. Apesar disso, as análises histomorfométricas revelaram um aumento no número total de hepatócitos, com médias celulares entre o grupo experimental e o controle (37,56 ± 7,94; 35,48 ± 6,00, respectivamente). Como também uma diminuição significativa no tamanho médio do núcleo destes hepatócitos (55,89 ± 13,00 μm2), quanto aos demais animais do grupo controle (58,25 ± 13,00 μm2). Porém, nenhuma alteração foi observada para as células de kupffer e área celular dos hepatócitos. Na análise histomorfométrica do fígado dos fetos obtidos das ratas prenhes expostas as MS-AU foi observado um aumento significativo (43,31 ± 7,17) de aproximadamente 13% na quantidade de hepatócitos em relação aos animais não tratados; e uma diminuição (0,04 ± 0,26) de cerca de 56% no número de megacariócitos, comparado ao grupo controle (0,09 ± 0,37). Os dados aqui apresentados demonstram que a administração de MS-AU na dose de 25 mg/kg é capaz de induzir fetotoxicidade no período da organogênese. Porém, não sendo suficiente ao ponto de causar efeitos teratogênicos como foi evidenciado para o composto na sua forma livre em estudos anteriores. Estes resultados sugerem que a encapsulação do ácido úsnico ajuda a diminuir os efeitos tóxicos causados pela sua exposição em um período tão suscetível ao aparecimento de efeitos teratogênicos. / The usnic acid it is a compound resulting from lichen secondary metabolism presents relevant biological activity and several cases of hepatotoxicity have been reported. The development of innovative alternatives, such as the encapsulation of usnic acid microspheres can increase the therapeutic efficiency and decrease its toxic effects. Pre-clinical trials of the reproductive cycle are required for the incorporation of new molecules in the pharmaceutical industry, determining the safe use of health conditions. In view of this, this study aimed to investigate the teratogenic potential of usnic acid encapsulated into poly(lactide-co-glicolide) microspheres as a way to minimize its toxic effects in the developing organism. Microspheres containing usnic acid was prepared using the technique of multiple emulsion (w/o/w), followed by evaporation of the solvent, and characterized by encapsulation efficiency. In experimental toxicity study we used 12 Wistar rats, which were subjected to the study of the estrous cycle in order to determine the fertile period, and then paired with males (2: 1). Upon confirmation of pregnancy, females were randomly assigned to groups: control (n = 6) and treated (n = 6). The control group of females received 1.0 mL of saline solution; and the treated group received oral doses of 25 mg/kg/day of usnic acid encapsulated in microspheres (MS-AU) during the period of organogenesis, by oral administration (gavage). The 20th day of gestation the females were sacrificed and their fetuses removed, analyzed and weighed along with their respective placenta. The effect caused by the treatment with MS-AU was evaluated by body weight variation, liver weight, biochemical analysis and histomorphometric liver analysis. Microspheres containing usnic acid presented with an encapsulation efficiency of 99.0 ± 0.82%. Was observed a reduction (86.12 ± 20.69) of about 22% weight gain during pregnancy when compared to untreated pregnant rats (110.85 ± 10.03). There was no difference in liver weights in all groups of animals. There were no significant changes in enzymes aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase after treatment of the animals with MS-AU. Fetuses from animals treated with MS-AU during pregnancy showed a significant decrease in weight average (4.65 ± 0.41) compared to untreated (4.85 ± 0.35), however, it was not observed any external malformations. The microanatomy of the liver of pregnant rats in the control group and experimental group were within normal limits. Despite this, histomorphometric analyzes revealed an increase in the total number of hepatocytes, with cells average between the experimental group and the control group (37.56 ± 7.94 μm2; 35.48 ± 6.00 μm2, respectively). As well as a significant decrease in the average size of the nucleus of these hepatocytes (55.89 ± 13.00) how much the other control group (58,25 ± 13,00). However, no change was observed for cells and Kupffer cell area of hepatocytes. The histomorphometric analysis of the liver of fetuses obtained from pregnant rats exposed the MS-AU was observed a significant increase (43.31 ± 7.17) of approximately 13% in the amount of hepatocytes compared to untreated animals; and a decrease (0.04 ± 0.26) of about 56% in the number of megakaryocytes, compared to the control group (0.09 ± 0.37). The data presented herein demonstrate that administration of MS-AU at the dose of 25 mg/kg is capable of inducing Fetotoxicity the period of organogenesis. However, it is not enough as to cause teratogenic effects as was evidenced for the compound in its free form in previous studies. These results suggest that the encapsulation of usnic acid helps to reduce the toxic effects caused by their exposure in a period as susceptible to the onset of teratogenic effects.

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:02:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3463_1.pdf: 1126909 bytes, checksum: fdcffcb19c5e93cea604fcedd4c8c725 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Na natureza a ciclagem dos nutrientes tem papel imprescindível no equilíbrio e dinâmica dos ecossistemas. Nesse contexto, os liquens, sensíveis a mudanças ambientais, participam da rota de elementos no ecossistema, podendo ter a síntese de seus fenóis afetada pelo desequilíbrio desses nutrientes, tanto na atmosfera quanto no solo. Este trabalho objetivou avaliar se o incremento de fosfato de potássio, como nutriente exógeno, em diferentes concentrações, direta ou indiretamente, altera o metabolismo de Cladonia verticillaris (Raddi) Fr. em condições de laboratório. Além disso, foi avaliada a influência dos fenóis de C. verticillaris na modificação química do solo subjacente a ela. Solo e líquen foram coletados no município de Mamanguape-PB em tabuleiros costeiros. Foram montados três experimentos com sistemas de tratamento diferenciados. No primeiro 10g de líquen foram dispostos sobre 1,5kg de solo, o segundo possuiu apenas 7g de líquen e o terceiro teve apenas 1 kg de solo. Cada experimento continha quatro cúpulas, sendo uma delas o controle, com borrifo de água deionizada, e as outras três os tratamentos com solução de fosfato de potássio que foram borrifadas nas concentrações 0,1%, 1% e 10% a cada 15 dias. Amostras foram coletadas aos 15 dias e depois mensalmente até o quinto mês de experimento. Foram submetidas à extração com os solventes éter etílico, clorofórmio, acetona das amostras de líquen e de solo que, posteriormente passaram por análises em Cromatografias em Camada Delgada (CCD) e Líquida de Alta Eficiência (HPLC), fertilidade do solo, espectrofotometria nos comprimentos de onda 254nm, 310nm, 366nm. O líquen produziu suas substâncias principais durante todo o experimento, repassou-as para o solo em maior quantidade do que a encontrada no talo. No experimento 1 o fosfato adicionado provocou uma modificação no metabolismo da espécie, reduzindo a produção dos ácidos protocetrárico (PRO) e fumarprotocetrárico (FUM), o que está associado ao acúmulo de metabólitos intermediários do FUM. No experimento 2 com líquen, este produziu PRO e FUM em concentração superior quando sob influência do fosfato, sugerindo que o líquen absorve melhor este elemento quando em contato direto com talo. Maior quantidade de bases trocáveis foi encontrada em solo com líquen, e o pH deste solo manteve-se próximo à neutralidade. O fosfato adicionado ao solo no experimento 3 tornou-o mais básico e não alterou a disponibilidade de cátions, principalmente Ca, Mg e Na