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Propriedades bioativas e caracterizaÃÃo bioquÃmica de uma lectina purificada a partir de sementes de Clitoria fairchildiana R. A. Howard / Bioactive properties and biochemical characterization of a lectin purified from seeds of R. fairchildiana A. Howard

Joana Filomena MagalhÃes Leite 20 June 2012 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Lectinas sÃo proteÃnas que tem a capacidade de se ligar especificamente e reversivelmente a carboidratos e glicoconjugados, sem alterar a estrutura do ligante. Elas sÃo encontradas em organismos tais como vÃrus, bactÃrias, plantas e animais, e tem sido demonstrado que possuem atividades biolÃgicas importantes. Clitoria fairchildiana R. A. Howard à uma espÃcie pertencente à famÃlia Fabaceae, nativa da AmÃrica do Sul. O objetivo deste estudo foi isolar e caracterizar uma lectina presente em sementes de Clitoria fairchildiana, avaliar o potencial fitoterÃpico e farmacolÃgico (antinociceptivo, prà e antiinflamatÃrio, hemolÃtico, antibacteriano e antifÃngico) desta lectina. Os resultados indicaram a presenÃa de uma lectina (CFAL) na fraÃÃo proteica glutelina Ãcida, que aglutina eritrÃcitos de coelho nativos, a qual nÃo foi inibida por monossacarÃdeos e glicoproteÃnas testadas, foi purificada por cromatografia em coluna de troca-iÃnica, DEAE-Sephacel. AnÃlise da lectina em SDS-PAGE indicou duas bandas com massa molecular de aproximadamente 100 e 116 kDa. As anÃlises em DLS apresentam uma amostra monomodal com raio hidrodinÃmico (RH) de 4,5 nm, indicando uma conformaÃÃo dependente de alta concentraÃÃo salina. A CFAL à uma glicoproteÃna PAS (+) capaz de ser inativada pelo tratamento com metaperiodato de sÃdio, porÃm resistente ao efeito de β-mercaptoetanol e urÃia. Esta lectina nÃo apresentou citotoxicidade significativa nÃo alterou a fragilidade osmÃtica, bem como nÃo apresentou efeitos oxidante/antioxidante significativos frente a hemÃcias humanas. A lectina apresentou atividade antiinflamatÃria em modelo de edema da pata induzido por carragenina, com diminuiÃÃo de 71% do edema. Efeitos antinociceptivos dose dependentes foram observados para CFAL no teste de contorÃÃes abdominais induzida por Ãcido acÃtico, com reduÃÃo do nÃmero de contorÃÃes em atà 72%. A lectina de C. fairchildiana foi capaz de reduzir o crescimento de Bacillus subtilis e nÃo afetou o crescimento dos fungos testados. Concluiu-se que a lectina purificada e caracterizada a partir das sementes de Clitoria fairchildiana à uma glicoproteÃna desprovida de pontes dissulfeto com atividade antiinflamatÃria e antinociceptiva e nÃo à citotÃxica para eritrÃcitos humanos. / Lectins are proteins that have the ability to bind specifically and reversibly to carbohydrates and glycoconjugates, without changing the structure of binder. They are found in organisms such as virus, bacterias, plants and humans, and has been shown to possess important biological activities. Clitoria fairchildiana R. A. Howard is a species belonging to the Fabaceae family, native to South America. The purpose of this study was to isolate and to characterize a lectin present in seeds of Clitoria fairchildiana, evaluate the herbal and pharmacological potential (antinociceptive, pro-and antiinflammatory, hemolytic, antibacterial and antifungal) of this lectin. The results indicated the presence of a lectin (CFAL) on protein fraction acid glutelin, CFAL binds native rabbit erythrocytes, was not inhibited by monosaccharides and glycoproteins tested and was purified by ion exchange chromatography, DEAE-Sephacel. Analysis of the lectin in SDS-PAGE showed two bands with molecular mass approximately 100 and 116 kDa. In DLS analyzes have a monomodal sample with hydrodynamic radius (RH) of 4.5 nm, showing a conformation high salt concentration dependent. The CFAL is a glycoprotein PAS (+) capable of being inactivated by treatment with sodium metaperiodate, but resistant to the effect of β-mercaptoethanol and urea. This lectin did not show significant cytotoxicity, did not change the osmotic fragility and not showed oxidant/antioxidant significant effects, compared to human erythrocytes. The lectin showed anti-inflammatory activity in models of paw edema induced by carrageenan, decreasing 71% of edema. Dose dependent antinociceptive effects were observed for CFAL on abdominal writhing test induced by acetic acid, reducing the number of writhes in up to 72%. The C. fairchildiana lectin was able to reduce the growth of Bacillus subtilis and did not affect growth of the fungi tested. It was concluded that the lectin purified and characterized from the seeds of Clitoria fairchildiana is a glycoprotein lacks disulfide bonds with antinociceptive and antiinflammatory activity, and is not cytotoxic to human erythrocytes.
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Propriedades bioativas e caracterização bioquímica de uma lectina purificada a partir de sementes de Clitoria fairchildiana R. A. Howard / Bioactive properties and biochemical characterization of a lectin purified from seeds of R. fairchildiana A. Howard

Leite, Joana Filomena Magalhães January 2012 (has links)
LEITE, Joana Filomena Magalhães. Propriedades bioativas e caracterização bioquímica de uma lectina purificada a partir de sementes de Clitoria fairchildiana R. A. Howard. 2012. 88 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-20T14:33:05Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_jfmleite.pdf: 924415 bytes, checksum: 45e56fd8e929b8124a3f9caf10098395 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T20:36:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_jfmleite.pdf: 924415 bytes, checksum: 45e56fd8e929b8124a3f9caf10098395 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T20:36:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_jfmleite.pdf: 924415 bytes, checksum: 45e56fd8e929b8124a3f9caf10098395 (MD5) Previous issue date: 2012 / Lectins are proteins that have the ability to bind specifically and reversibly to carbohydrates and glycoconjugates, without changing the structure of binder. They are found in organisms such as virus, bacterias, plants and humans, and has been shown to possess important biological activities. Clitoria fairchildiana R. A. Howard is a species belonging to the Fabaceae family, native to South America. The purpose of this study was to isolate and to characterize a lectin present in seeds of Clitoria fairchildiana, evaluate the herbal and pharmacological potential (antinociceptive, pro-and antiinflammatory, hemolytic, antibacterial and antifungal) of this lectin. The results indicated the presence of a lectin (CFAL) on protein fraction acid glutelin, CFAL binds native rabbit erythrocytes, was not inhibited by monosaccharides and glycoproteins tested and was purified by ion exchange chromatography, DEAE-Sephacel. Analysis of the lectin in SDS-PAGE showed two bands with molecular mass approximately 100 and 116 kDa. In DLS analyzes have a monomodal sample with hydrodynamic radius (RH) of 4.5 nm, showing a conformation high salt concentration dependent. The CFAL is a glycoprotein PAS (+) capable of being inactivated by treatment with sodium metaperiodate, but resistant to the effect of β-mercaptoethanol and urea. This lectin did not show significant cytotoxicity, did not change the osmotic fragility and not showed oxidant/antioxidant significant effects, compared to human erythrocytes. The lectin showed anti-inflammatory activity in models of paw edema induced by carrageenan, decreasing 71% of edema. Dose dependent antinociceptive effects were observed for CFAL on abdominal writhing test induced by acetic acid, reducing the number of writhes in up to 72%. The C. fairchildiana lectin was able to reduce the growth of Bacillus subtilis and did not affect growth of the fungi tested. It was concluded that the lectin purified and characterized from the seeds of Clitoria fairchildiana is a glycoprotein lacks disulfide bonds with antinociceptive and antiinflammatory activity, and is not cytotoxic to human erythrocytes. / Lectinas são proteínas que tem a capacidade de se ligar especificamente e reversivelmente a carboidratos e glicoconjugados, sem alterar a estrutura do ligante. Elas são encontradas em organismos tais como vírus, bactérias, plantas e animais, e tem sido demonstrado que possuem atividades biológicas importantes. Clitoria fairchildiana R. A. Howard é uma espécie pertencente à família Fabaceae, nativa da América do Sul. O objetivo deste estudo foi isolar e caracterizar uma lectina presente em sementes de Clitoria fairchildiana, avaliar o potencial fitoterápico e farmacológico (antinociceptivo, pró e antiinflamatório, hemolítico, antibacteriano e antifúngico) desta lectina. Os resultados indicaram a presença de uma lectina (CFAL) na fração proteica glutelina ácida, que aglutina eritrócitos de coelho nativos, a qual não foi inibida por monossacarídeos e glicoproteínas testadas, foi purificada por cromatografia em coluna de troca-iônica, DEAE-Sephacel. Análise da lectina em SDS-PAGE indicou duas bandas com massa molecular de aproximadamente 100 e 116 kDa. As análises em DLS apresentam uma amostra monomodal com raio hidrodinâmico (RH) de 4,5 nm, indicando uma conformação dependente de alta concentração salina. A CFAL é uma glicoproteína PAS (+) capaz de ser inativada pelo tratamento com metaperiodato de sódio, porém resistente ao efeito de β-mercaptoetanol e uréia. Esta lectina não apresentou citotoxicidade significativa não alterou a fragilidade osmótica, bem como não apresentou efeitos oxidante/antioxidante significativos frente a hemácias humanas. A lectina apresentou atividade antiinflamatória em modelo de edema da pata induzido por carragenina, com diminuição de 71% do edema. Efeitos antinociceptivos dose dependentes foram observados para CFAL no teste de contorções abdominais induzida por ácido acético, com redução do número de contorções em até 72%. A lectina de C. fairchildiana foi capaz de reduzir o crescimento de Bacillus subtilis e não afetou o crescimento dos fungos testados. Concluiu-se que a lectina purificada e caracterizada a partir das sementes de Clitoria fairchildiana é uma glicoproteína desprovida de pontes dissulfeto com atividade antiinflamatória e antinociceptiva e não é citotóxica para eritrócitos humanos.
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Estudo fitoquímico e avaliação biológica dos flavonoides isolados de clitoria fairchildiana R. A. Howard

Santos, Rauldenis Almeida Fonseca 14 February 2014 (has links)
Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2016-03-04T15:33:22Z No. of bitstreams: 1 Tese final Rauldenis Almeida Fonseca santos.pdf: 3830349 bytes, checksum: dfe9f70bff39e92647b12bb355c8c8f7 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2016-05-10T17:07:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese final Rauldenis Almeida Fonseca santos.pdf: 3830349 bytes, checksum: dfe9f70bff39e92647b12bb355c8c8f7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-10T17:07:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese final Rauldenis Almeida Fonseca santos.pdf: 3830349 bytes, checksum: dfe9f70bff39e92647b12bb355c8c8f7 (MD5) / A espécie Clitoria fairchildiana R. A. Howard., sinonímia Clitoria racemosa Benth., é popularmente conhecida como sombreiro e utilizada na arborização urbana, apresentando diversos relatos de isolamento de flavonoides com atividades antioxidante, citotóxica, anti- inflamatória e alelopática. O presente trabalho descreve o estudo químico das raízes e pétalas da Clitoria fairchildiana, permitindo o isolamento dos flavonoides clitoriacetal (2), 6- desoxiclitoriacetal (3), stemonal (4), stemonona (5), canferol (6), quercetina (7), vitexina (8), astragalina (9) e dos fitoesteroides β-sitosterol (1) e estigmasterol (1a), além da identificação por CG-EM de ácidos graxos e fitol. Também foram realizados ensaios biológicos, dos extratos e substâncias isoladas, tais como de atividade frente Artemia salina, antioxidante e de inibição da enzima acetilcolinesterase. As substâncias clitoriacetal (2) e 6-desoxiclitoriacetal (3) apresentaram moderada atividade frente Artemia salina, com valores de DL50=515,3μg.mL-1 e DL50=260,5μg.mL-1, respectivamente. Enquanto que a astragalina (9) apresentou uma maior atividade (DL50=77,1μg.mL-1). No teste antioxidante de sequestro do radical livre DPPH, a quercetina (6) e o canferol (5) apresentaram as maiores atividades antioxidante. Diferentes extratos da espécie vegetal foram analisados por CLAE-DAD, determinando que os rotenoides clitoriacetal (2) e o 6-desoxiclitoriacetal (3), são encontrados em maior quantidade nas raízes, contudo não são encontrados nas folhas e pétalas da espécie. As substâncias isoladas foram identificadas por métodos espectrométricos (IV, UV/Vis, EM, RMN de 1H e RMN de 13C) e por comparação com dados da literatura. Dessa forma, este trabalho contribui para a taxonomia da espécie Clitoria fairchildiana, descrevendo o primeiro estudo fitoquímico das pétalas dessa espécie, além de relatar o primeiro isolamento da stemonona (5), obtido anteriormente apenas por modificação estrutural. / The species Clitoria fairchildiana R. A. Howard., Synonymy Clitoria racemosa Benth., is popularly known as sombrero and used in urban forestry, with several reports of isolation of flavonoids with antioxidant, cytotoxic, anti-inflammatory and allelopathic activities. This work describes the chemical study of the roots and petals of Clitoria fairchildiana, allowing the isolation of flavonoids clitoriacetal (2), 6-deoxyclitoriacetal (3), stemonal (4), stemonone (5), kaempferol (6), quercetin (7), vitexin (8), astragalina (9) and fitoesteroides β-sitosterol (1) and stigmasterol (1a), besides the identification by GC-MS of fatty acids and phytol. Biological assays of the extracts and isolated substances, such as activity against, Brine shrimp, antioxidant and inhibition of acetylcholinesterase were also conducted. Biological assays of extracts and pure compounds such as facing activity Brine shrimp, antioxidant and inhibiting acetylcholinesterase enzyme were also performed. The substances clitoriacetal (2) and 6-deoxyclitoriacetal (3) showed moderate activity against Brine shrimp, with values LD50=515.3 μg.mL-1 and LD50=260.5 μg.mL-1, respectively. While astragalina (9) showed increased activity (LD50=77.1 μg.mL-1). In antioxidant test kidnapping of free radical DPPH, quercetin (6) and kaempferol (5) showed the highest antioxidant activities. Different extracts of the plant species were analyzed by HPLC-DAD, determining that the rotenoids clitoriacetal (2) and 6-deoxyclitoriacetal (3), are found in greater amounts in the roots, but are not found in the leaves and petals of the species. The compounds were identified by spectroscopic methods (IR, UV/Vis, MS, 1H NMR and 13C NMR) and by comparison with the literature data. Thus, this work contributes to the taxonomy of species Clitoria fairchildiana, describing the first phytochemical study of the petals of this species, in addition to reporting the first isolation of stemonone (5), obtained previously only by structural modification.
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Obten??o e caracteriza??o de comp?sito com PEAD reciclado e p? da casca da semente da planta Sombreiro (Clitoria fairchildiana)

Cabral, Isabel Cavalcanti 01 August 2016 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-02-20T22:32:00Z No. of bitstreams: 1 IsabelCavalcantiCabral_DISSERT.pdf: 3050113 bytes, checksum: 383bcdc049daf672f9e95cb2602b2eb2 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-02-23T22:39:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 IsabelCavalcantiCabral_DISSERT.pdf: 3050113 bytes, checksum: 383bcdc049daf672f9e95cb2602b2eb2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-23T22:39:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IsabelCavalcantiCabral_DISSERT.pdf: 3050113 bytes, checksum: 383bcdc049daf672f9e95cb2602b2eb2 (MD5) Previous issue date: 2016-08-01 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Atualmente vem crescendo a necessidade de aproveitamento dos res?duos gerados pela popula??o, como forma de criar materiais alternativos e de baixo custo, contribuindo assim para preserva??o do meio ambiente e aproveitamento dos recursos naturais. A fabrica??o de comp?sitos refor?ados com fibras vegetais e matriz polim?rica, tem sido uma alternativa para as ind?strias que buscam o aproveitamento de res?duos. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver um comp?sito polim?rico com rejeito de polietileno como matriz e carga do p? da casca da semente da planta Sombreiro (Clitoria fairchildiana) nas propor??es de 2,5% e 5%, mostrando que pol?meros p?s consumo podem ser novamente aproveitados. As misturas pol?mero/carga foram produzidas atrav?s de uma extrusora, e em seguida os corpos de prova foram moldados por inje??o. Para caracterizar o comp?sito foram realizadas an?lises t?rmicas, medida do ?ndice de fluidez, determina??o da densidade, ensaio de dureza Shore D, resist?ncia ? tra??o, resist?ncia ao impacto Izod, microscopia eletr?nica de varredura (MEV) e absor??o de ?gua. Para os resultados reol?gicos, a viscosidade do comp?sito PE_rec A (Polietileno com adi??o de 2,5% de carga) diminuiu, j? o PE_rec B (Polietileno com adi??o de 5% de carga) aumentou. A massa especifica se manteve constante para todas as amostras e concentra??es. Como esperado a dureza do comp?sito foi proporcional ao percentual de carga que foi acrescentado, j? na resist?ncia m?xima a tra??o o comp?sito PE_rec A obteve um valor 2,3% menor comparado ao PE_rec Puro, o ensaio de impacto Izod mostrou que o comp?sito PE_rec A apresentou 444,30 J/m de energia absorvida durante o ensaio. Na an?lise por MEV foram observados a presen?a de vazios na microestrutura do material e a falta de ades?o matriz/carga em algumas regi?es do comp?sito polim?rico. O ensaio de absor??o de ?gua mostrou que para as duas concentra??es de carga natural o p? se mostrou n?o muito hidrof?lico. Com isso os resultados obtidos mostraram que o Polietileno reciclado pode ser processado novamente e o acr?scimo de carga ao comp?sito promoveu um ganho de economia de material sint?tico. / Currently it has increased the need for recovery of waste generated by the population as a way to create alternative and low-cost materials, thus contributing to preserving the environment and use of natural resources. The manufacture of composites reinforced with natural fibers and polymer matrix, has been an alternative for industries seeking the recovery of waste. The aim of this study was to develop a polymeric composite tailings as polyethylene matrix and load powder seed bark Sombreiro plant (Clitoria fairchildiana) in the proportions of 2.5% and 5%, showing that post-consumer polymers can be again used. Mixtures polymer / load were produced through an extruder, and then the samples were injection molded. To characterize the composite were performed thermal analysis, measurement of flow rate, density determination, hardness testing Shore D, tensile strength, Izod impact strength, scanning electron microscopy (SEM) and water absorption. For the rheological results, the viscosity of the composite PE_rec (polyethylene with addition of 2.5% load) has decreased since the PE_rec B (Polyethylene with addition of 5% load) has increased. The bulk density was kept constant for all samples and concentrations. As expected the hardness of the composite was proportional to the load percentage that has been added since the maximum tensile strength the PE_rec The composite obtained a 2.3% lower compared to PE_rec Pure, the Izod impact test showed that the composite PE_rec The presented 444.30 J/m energy absorbed during the test. In the analysis by SEM were observed the presence of voids in the microstructure of the material and the lack of adhesion matrix / load in some regions of the polymer composite. The water absorption test showed that for both natural load concentrations powder proved not very hydrophilic. Thus the results showed that the recycled polyethylene can be processed again and the composite load increase promoted a gain of synthetic material economy.

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