Mutantes respiratórios de Saccharomyces cerevisiae podem apresentar uma ampla variedade de instabilidade do mtDNA. Nós analisamos diferentes classes de mutantes e observamos uma elevada instabilidade nos mutantes que não possuem a coenzima Q (CoQ) funcional. O objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos das alterações no estado redox da coenzima Q sobre a estabilidade do mtDNA de diferentes linhagens de S. cerevisiae. No mutante <font face=\"Symbol\">Dcoq10, que sintetiza CoQ não funcional, a inativação das NADH desidrogenases individuais Ndi1p e Nde1p, resultou numa menor instabilidade do mtDNA, acompanhada por uma diminuição na taxa de liberação de peróxido de hidrogênio (H2O2). Por outro lado, a super-expressão de Nde1p aumentou a instabilidade do mutante <font face=\"Symbol\">Dcoq10. A inativação das NADH desidrogenases na linhagem <font face=\"Symbol\">Dcoq4, deficiente na síntese da CoQ, não reduziu a instabilidade do mtDNA. Juntos, os resultados indicam que alterações no estado de oxido-redução da coenzima Q influenciam a estabilidade do mtDNA, provavelmente através da produção de espécies reativas de oxigênio. / Saccharomyces cerevisiae respiratory mutants can show a wide range of mtDNA instability. We analyze different classes of mutants and observed a higher instability among mutants lacking a functional coenzyme Q (CoQ). The aim of this study was to evaluate the effects of alterations in the redox state of coenzyme Q on the stability of mtDNA mitochondrial in different strains of Saccharomyces cerevisiae. In <font face=\"Symbol\">Dcoq10 mutant, which synthesizes CoQ nonfunctional, inactivation of individual NADH dehydrogenases Ndi1p Nde1p has shown a decreased mtDNA instability, which was accompanied by a decrement in the rate of hydrogen peroxide (H2O2) release. Moreover, overexpression of Nde1p increased instability <font face=\"Symbol\">Dcoq10 mutant. The inactivation of individual NADH dehydrogenases in <font face=\"Symbol\">Dcoq4 strain which is deficient in the synthesis of CoQ, did not reduce the instability of the mtDNA. All the results indicate that changes in the redox state of coenzyme Q influence the stability of mtDNA, probably by the production of reactive oxygen species.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T12:03:21Z No. of bitstreams: 1 Flavia Camila Siqueira Pereira Ramalho.pdf: 838412 bytes, checksum: e92375da22d319dd80763723a0bdbfbf (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T12:03:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Flavia Camila Siqueira Pereira Ramalho.pdf: 838412 bytes, checksum: e92375da22d319dd80763723a0bdbfbf (MD5) Previous issue date: 2015-02-09 / In vitro embryo production (IVP) in cattle became an important commercial tool in genetic improvement programs of the world herd, being widely used for this purpose. However in vitro fertilization (IVF) can cause generation of reactive oxygen species that can affect embryo viability. Coenzyme Q10, an important cofactor in the transport chain of mitochondria has antioxidant function on lipid membrane and it was proved a direct correlation between the presence of Coenzyme Q10 and normal spermatozoa parameters such as density, motility, morphology and volume. The objective of this study was to evaluate the effect of Coenzyme Q10 on sperm function in IVF using conventional or sexed semen; also if the addition of this cofactor can improve embryo IVP in bovine oocytes. In experiment 1 was evaluated the effect of sperm function during incubation periods of sexed and conventional semen samples. In experiment 2, IVF medium was supplemented with 0 (control group), 5 μM, 10 μM, 20 μM of Coenzyme Q10. Bovine oocytes were collected from a slaughterhouse located 20 minutes from the lab. It was observed a negative effect of Coenzyme with significant differences in the rates of cleavage or in the production of blastocyst (p< 0.05) at a concentration of 20 μM when compared with all other groups with either sexed as conventional semen. These results demonstrate that supplementation of the Coenzyme Q10 in the IVF medium, do not alter spermatozoa function. We can also infer that there is a tendency to improve embryo production in the concentration of 5 μM in IVF medium. / A produção de embriões in vitro (PIV) em bovinos tornou-se importante ferramenta comercial nos programas de melhoramento genético do rebanho mundial como técnica de multiplicação, sendo amplamente utilizada para esse fim. Entretanto a Fertilização in vitro (FIV) provoca geração de espécies reativas de oxigênio que podem afetar a viabilidade embrionária. A Coenzima Q10, um cofator de importância na cadeia de transporte das mitocôndrias tem função antioxidante na membrana lipídica e foi verificado uma correlação direta entre a Coenzima e os parâmetros normais de sêmen tais como, densidade, motilidade, morfologia e o volume. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da Coenzima Q10 na função espermática em FIV utilizando-se sêmen convencional e sexado; e se a adição desse cofator pode melhorar a produção embrionária in vitro de oócitos bovinos. No Experimento o meio de FIV foi suplementado com 0 (grupo controle), 5 μM, 10 μM, 20 μM da Coenzima Q10. Os Oócitos foram coletados de um abatedouro localizado a 20 minutos do laboratório. Foi observado um efeito deletério da coenzima com diferença significativa nas taxas de clivagem ou na produção de blastocisto (p<0,05) na concentração de 20 μM quando comparado com os demais grupos tanto com sêmen sexado como convencional. Estes resultados demonstram que a suplementação da Coenzima Q10 no meio FIV não altera a função espermática, entretanto tem um efeito deletério a partir da concentração de 20 μM. Podemos ainda inferir que na concentração de 5 μM no meio FIV há uma tendência na melhoria da produção embrionária.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / In Southern Brazil, the plant Campomanesia xanthocarpa Berg. (Myrtaceae), popularly known as guavirova , has been empirically used for its potential effect in reducing blood cholesterol levels. Since there are no scientific data confirming its popular use, the aim of the present study was to investigate the effect of C. xanthocarpa on biochemical, hematological, anthropometrical and oxidative stress parameters in hypercholesterolemic patients. Thirty three patients were selected according to total cholesterol (TC) levels: 200-240 mg/dL, undesirable level (UL), and >240 mg/dL, hypercholesterolemic level (HL). UL or HL patients were randomly divided into control group (CG), which received placebo capsules, and experimental group 250 (EG 250) or 500 (EG 500), which received either 250 or 500 mg of encapsulated C. xanthocarpa. All groups received a cholesterol restriction diet and capsules once a day. The biochemical (TC, triglycerides, HDL, LDL and VLDL), hematological (hematocrit and hemoglobin), anthropometrical (weight and abdominal circumference) and oxidative stress (protein carbonyl) parameters were measured before, 45 and 90 days after the treatment started. There was no alteration on biochemical, hematological, anthropometric or oxidative stress parameters in UL patients of all groups. However, a significant decrease in TC and LDL levels was observed in HL patients from EG 500 group (reduction of 28±3 and 45±4% to levels before treatment) in relation to CG group patients (reduction of 12±2 and 29±4%). Moreover, a significant reduction in oxidative stress was observed in HL patients of EG 250 (51±12%) and EG 500 groups (34±18%) when compared to levels before treatment. A positive correlation between plasma oxidative stress PC and TC levels was observed. Finally, was demonstrated that C. xanthocarpa extract possesses anti-oxidant properties and 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase inhibitory activity in vitro. Confirming its popular use, the treatment with C. xanthocarpa encapsulated reduced blood TC and LDL levels in hypercholesterolemic patients. Besides its effect on cholesterol levels, this plant reduced the oxidative stress in plasma of hypercholesterolemic patients as well. / No Sul do Brasil, a planta Campomanesia xanthocarpa Berg. (Myrtaceae), popularmente conhecida como guavirova , tem sido empiricamente usada por seu efeito potencial em reduzir os níveis de colesterol sanguíneo. Uma vez que não há dados científicos confirmando seu uso popular, o alvo do presente estudo foi investigar os efeitos da C. xanthocarpa nos parâmetros bioquímicos, hematológicos, antropométricos e de estresse oxidativo em pacientes hipercolesterolêmicos. Trinta e três pacientes foram selecionados de acordo com os níveis de colesterol total (CT): 200-240 mg/dL, níveis indesejáveis (NI), e > 240 mg/dL, níveis hipercolesterolêmicos (NH). Os pacientes NI e NH foram randomicamente divididos em grupo controle (GC), que recebeu cápsulas placebo, e grupo experimental 250 (GE 250) ou 500 (GE 500), que recebeu 250 ou 500 mg de C. xanthocarpa encapsulada. Todos os grupos receberam uma dieta com restrição a colesterol e cápsulas diariamente. Os parâmetros bioquímicos (CT, triacilgliceróis, HDL, LDL e VLDL), hematológicos (hematócrito e hemoglobina), antropométricos (peso e circunferência abdominal) e de estresse oxidativo (proteína carbonilada) foram mensurados antes, 45 e 90 dias depois do tratamento. Não houve nenhum alteração significativa nos parâmetros bioquímico, hematológico, antropométrico e de estresse oxidativo em pacientes NI de todos os grupos. Entretanto, uma redução significativa nos níveis de CT e LDL foi observada em pacientes NH do GE 500 (redução de 28±3 e 45±4% para os níveis antes do tratamento) em relação aos pacientes do GC (redução de 12±2 e 29±4%). Além disso, uma redução significante no estresse oxidativo foi observada em pacientes NH do GE 250 (51±12%) e GE 500 (34±18%) quando comparado com os níveis antes do tratamento. Uma correlação positiva entre os níveis de proteína carbonilada e CT foi observada. Finalmente, foi demonstrado que o extrato de C. xanthocarpa possui propriedade antioxidante e atividade inibitória da 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A redutase in vitro. Confirmando seu uso popular, o tratamento com C. xanthocarpa reduziu os níveis de CT e LDL sanguíneos em pacientes hipercolesterolêmicos. Além dos seus efeitos nos níveis de colesterol, esta planta reduziu o estresse oxidativo no plasma de pacientes hipercolesterolêmicos.