Orientador: Diego Cunha Zied / Resumo: O fungo Lecanicillium fungicola é um importante patógeno no cultivo de Agaricus bisporus, apresentando diversos sintomas e perdas de produção. O objetivo do trabalho foi avaliar interações in vivo e in vitro dos fungos Lecanicillium fungicola e Agaricus bisporus. Os experimentos in vitro foram feitos utilizando discos de micélio do patógeno e composto colonizado pelo A. bisporus. O composto colonizado também foi utilizado para a frutificação de cogumelos tanto em tamanho menor em placas de petri como em maior quantidade. Foram aplicados quatro suspensões de esporos L. fungicola nos cogumelos em placas de petri, de acordo com o seu tratamento. Não ocorreu a paralisação do crescimento micelial in vitro no momento em que o patógeno e o hospedeiro se encontram. Após 36 horas a inoculação do patógeno foi possível a visualização de manchas no píleo e após 60 horas a visualização de hifas e esporos. A linhagem coloração creme apresentou maior massa e diâmetro do píleo e menor porcentagem de rompimento do véu. A linhagem de A. bisporus de coloração branca obteve maior produtividade do que a linhagem de coloração creme. O isolado LF 19/03 apresentou maior agressividade em ambas as linhagens de A. bisporus. Os diversos sintomas encontrados no decorrer da pesquisa possibilitaram a confecção de uma escala diagramática para auxiliar o produtor na comercialização dos cogumelos doentes. / Abstract: The fungus Lecanicillium fungicola is an important pathogen in the cultivation of Agaricus bisporus, presenting several symptoms and production losses. The objective of the work was to evaluate interactions in vivo and in vitro of the fungi Lecanicillium fungicola and Agaricus bisporus. The in vitro experiments were done using mycelium discs of the pathogen and compound colonized by A. bisporus. The colonized compost was also used for the fruiting of mushrooms both in smaller size in petri dishes and in greater quantity. Four suspensions of L. fungicola spores were applied to the boxes according to their treatment. Mycelial growth did not stop in vitro at the time the pathogen and host meet. After 36 hours the inoculation of the pathogen made it possible to see spots on the cap and after 60 hours, to view hyphae and spores. The cream-colored lineage showed greater mass and diameter of the cap and lesser percentage of rupture of the veil. The white colored A. bisporus strain obtained higher productivity than the cream colored strain. The isolate LF 19/03 showed greater aggressiveness in both strains of A. bisporus. The various symptoms found in the course of the research enabled the production of a diagrammatic scale to assist the producer in the sale of sick mushrooms. / Mestre

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-12T11:40:24Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1237400 bytes, checksum: 6d36a4f8cf8daa7846559164f0554f1d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-12T11:40:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1237400 bytes, checksum: 6d36a4f8cf8daa7846559164f0554f1d (MD5) Previous issue date: 2016-02-18 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Cogumelos são considerados alimentos saudáveis devido ao baixo teor calórico, além de possuir alto teor de proteínas e minerais, podendo, assim, serem utilizados como fontes de diversos nutrientes. As principais técnicas utilizadas para o preparo do substrato para o cultivo de cogumelos são a pasteurização e a esterilização. Entretanto, estas técnicas são onerosas. Neste estudo, visando criar alternativas para cultivo de cogumelos de seis espécies do gênero Pleurotus, avaliou-se a utilização de técnicas alcalinas, utilizando bagaço de cana, capim elefante, casca de café Conilon e Arabica e serragem com farelo de arroz. Esta técnica já vem sendo utilizada com sucesso no México, entretanto sem qualquer padronização. As técnicas alcalinas testadas permitiram boa produção de cogumelos, inclusive com composição nutricional similar aos substratos esterilizados, mostrando o potencial da utilização destas técnicas. Além disso, demonstramos que estas técnicas apresentam custo de implementação e manutenção bem menor que a esterilização. Os substratos mais adequados para o cultivo foram o capim elefante, bagaço de cana e serragem com farelo de arroz. A casca de café foi o substrato em que mais se observou o aparecimento dos contaminantes, mostrando a importância da escolha do substrato para a utilização destas técnicas. Em relação às técnicas alcalinas, observamos que a imersão em solução de cal hidratada 2% por 4 h é efetiva para evitar o aparecimento de contaminantes, com redução de até 99% da microbiota residente e a efetiva alcalinização do substrato. Por fim, algumas espécies de cogumelos não foram capazes de serem cultivadas utilizando técnicas alcalinas por inibição da formação dos corpos de frutificação ou do crescimento micelial. Dessa forma, as técnicas alcalinas, principalmente imersão em 2% da solução de cal hidratada, demonstram apresentar potencial para serem utilizadas para produção de diferentes espécies de cogumelos. Assim, os cogumelos podem se tornar fonte de renda e alimentar para as populações, melhorando a qualidade de vida, principalmente das regiões carentes, pois utilizando esta técnica pode-se produzir cogumelos em diferentes resíduos agrícolas com baixo investimento. Entretanto, deve ser salientado que a escolha do substrato e espécies de fungos adaptadas às condições alcalinas é fundamental para cultivo de cogumelos utilizando as técnicas alcalinas. / Mushrooms are health food due to low calories content and high level of minerals and proteins, thus it can be used as source of nutrients. The main techniques used to treat substrate for mushrooms growth are pasteurization and sterilization, however they are expensive. In this study, we evaluated the technical viability of alkaline techniques, which has been successfully used in Mexico, to cultivate mushrooms of six Pleurotus species using as substrates: sugar cane bagasse, elephant grass, sawdust/rice bran and Conilon and Arabica coffee husk. The alkaline techniques had productivity and produced mushroom with nutritional composition as well as sterilization method, showing the potential of these techniques. We also showed that the cost of implementation and maintenance were lower than sterilization method. The most suitable substrates were sugar cane bagasse, elephant grass and sawdust/rice bran. Coffee husk substrate was that present higher contamination, showing the importance of choosing the substrates for use alkaline method. Comparing the alkaline techniques, we observed that soaking in 2% lime solution for 4 h was efficient, avoiding avoid contaminants growth by reduction until 99% of resident microbiota found in the substrate and was also effective alkalization. Finally, some mushrooms species were not able to be cultivated using alkaline techniques, due to inhibition of fruiting bodies formation or mycelial growth. Therefore, alkaline techniques, mainly soaking in 2% lime solution, show potential to be used to mushrooms cultivation of different species of Pleurotus in deprived regions. So, mushrooms can be a good source of funds and food for the population, increasing their quality of life, mainly in deprived region, since these alkaline methods can use different agricultural residue with low investment. However, it should be pointed that the choosing of suitable substrate and mushrooms species adapted to alkaline conditions are essential to cultivate mushrooms using alkaline techniques.

Lentinula edodes é um cogumelo comestível que possui qualidades nutricionais, terapêuticas e medicinais. Além disso, muitos estudos na área médica têm comprovado que o cogumelo possui efeito antibiótico sobre microrganismos patogênicos ao homem. Na área agrícola, alguns trabalhos realizados com o cogumelo demonstraram possíveis efeitos no controle de fitopatógenos. O presente trabalho teve como objetivo demonstrar a produção de substâncias antimicrobianas por L. edodes ativas sobre Colletotrichum sublineolum, agente causal da antracnose em sorgo, Alternaria solani, responsável pela pinta preta do tomateiro, Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae, agente causal da mancha bacteriana em maracujazeiro e Tobacco mosaic virus (TMV), causador de mosaico foliar em fumo. Para os testes com C. sublineolum e A. solani foram utilizados extratos aquosos de L. edodes, obtidos a partir de basidiocarpos desidratados em pó, dos isolados LE JAB-K, LE 96/22, LE 96/17 e LE 95/01. Os resultados evidenciaram que o extrato aquoso de basidiocarpos do isolado LE 96/22 inibiu o crescimento micelial in vitro e a formação de apressórios por C. sublineolum. Já os extratos dos isolados LE JAB-K e LE 95/01 apresentaram efeito inibitório na germinação de conídios e na formação de apressórios do patógeno. Em contrapartida, os extratos aquosos de basidiocarpos dos diferentes isolados de L. edodes não apresentaram efeito inibitório na germinação dos conídios e no crescimento micelial de A. solani. Por sua vez, os extratos aquosos de basidiocarpos a 20% (v/v) e o filtrado do crescimento micelial de L. edodes, misturados à suspensão de X. axonopodis pv. passiflorae, exibiram redução na multiplicação bacteriana. Todos os extratos aquosos de basidiocarpos dos diferentes isolados testados na multiplicação da bactéria mostraram-se termolábeis, quando autoclavados a 121 °C por 20 min. Em experimentos com plantas de fumo, os extratos aquosos de basidiocarpos dos isolados LE 96/17 e LE 96/22 adicionados à suspensão contendo partículas do TMV reduziram significativamente a ocorrência de lesões locais nas folhas. O extrato aquoso do isolado LE 96/22 apresentou compostos antivirais de natureza termoestável. Finalmente, o extrato aquoso de basidiocarpos do isolado LE 96/22, o qual apresentou a maior atividade antimicrobiana, foi purificado parcialmente por cromatografia de troca aniônica (CTA). O pico V apresentou efeito inibitório no crescimento micelial de C. sublineolum. Por sua vez, a multiplicação de X. axonopodis pv. passiflorae foi inibida pelos picos IV, V e VII. Já os picos I, II e III, obtidos em CTA por gradiente linear de NaCl e o pico I obtido em CTA pelo método "step wise", reduziram significativamente a infectividade do TMV em plantas de fumo. Com base nesses resultados, evidencia-se a ação de preparações de L. edodes sobre fitopatógenos, o que demonstra o uso potencial do mesmo no controle de agentes causais de doenças infecciosas em plantas. / Lentinula edodes is an edible mushroom that has nutritious, therapeutical and medicinal qualities. Moreover, many studies in the medical area have shown that the mushroom exhibits antibiotic effects on pathogenic microorganism to the man. In the agricultural area, work carried out with the mushroom has demonstrated its possible effects to control phytopathogens. The objective of the present work was to demonstrate the productionof antimicrobial substances of L. edodes active on Colletotrichum sublineolum, causal agent of anthracnose in sorghum, Alternaria solani, responsible for the black spot of the tomato plants, X. axonopodis pv. passiflorae, causal agent of the bacterial spot in passion fruit plants and on Tobacco mosaic virus, causal agent of the mosaic in tobacco plants. For the test with C. sublineolum and A. solani aqueous extracts were obtained from dehydrated fruiting bodies from the shiitake isolates LE JAB-K, LE 96/22, LE 96/17 and LE 95/01. The results showed that the fruiting body aqueous extract from isolate LE 96/22 inhibited micelial growth and appressorium formation by C. sublineolum. The aqueous extracts of isolates LE JAB-K and LE 95/01 exhibited inhibitory effect on conidium germination and on formation of appressorium by the patogen. On the other hand, the extracts of the different isolates of L. edodes did not exhibit inhibitory effect on conidium germination and micelial growth of A. solani. The aqueous extracts of fruiting bodies at 20% (v/v) concentration and filtrate of the micelial growth of L. edodes, when mixed to the suspension of X. axonopodis pv. passiflorae, exhibited decreased on bacterial multiplication. All the aqueous extracts of fruiting bodies tested from the different isolates in the bacterial multiplication were thermobile, when heated at 121 °C for 20 min. In experiments with tobacco plants, the aqueous extracts of fruiting bodies of isolates LE 96/17 and LE 96/22 when added to the suspension of TMV reduced the amount of local lesions on the leaves. When the aqueous extracts of LE 96/22 were heated the antiviral nature was not lost. Finally, the aqueous extract of fruiting bodies from isolate LE 96/22 that presented major antimicrobial activity was partially purified by anion exchange chromatography (AEC). The peak V exhibited inhibitory effect on micelial growth of C. sublineolum. Multiplication of X. axonopodis pv. passiflorae was inhibited by peaks IV, V and VII. Regarding TMV infectivity, peaks I, II and III, obtained in CTA through linear gradient of NaCl, and peak I also obtained through CTA by the method "step wise", significantly reduced virus infectivity in tobacco plants. Based upon these results, it is shown that preparations of L. edodes can interfere whith phytopathogen multiplication, demonstrating its potential to control plant diseases.

Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2016-11-24T15:15:39Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Gabriela Chilanti.pdf: 146517 bytes, checksum: 726599ffeb264e820a8dd085b1ba55be (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-24T15:15:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Gabriela Chilanti.pdf: 146517 bytes, checksum: 726599ffeb264e820a8dd085b1ba55be (MD5) Previous issue date: 2016-11-24 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul, FAPERGS.

Cogumelos comestíveis de Pleurotus sajor-caju PS-2001 e Lentinula edodes LE-01 foram cultivados em substratos constituídos de serragem de Pinus sp ( para P. sajor-caju) ou Eucalyptus sp (para L. edodes) adicionados de resíduos de bagaços de Vitis labrusca e Malus domestica. Foram avaliados os parâmetros de produção produtividade (P), eficiência biológica e rendimento (R), atividade das enzimas (lacases, VAO, MnP and LiP), proteína solúvel total e a N-acetil glicosamina liberada do micélio como uma estimativa indireta do crescimento da biomassa. Os testes foram realizados com os bagaços dos dois frutos separadamente e em serragem de Pinus sp. (para P. sajor-caju) e Eucalyptus sp.. Foram utilizadas três combinações de substratos (S) e um controle, sendo eles, S1: somente bagaço; S2: 75% bagaço e 25% serragem (3:1); S3: 50% bagaço e 50% serragem (1:1); S4: 25% bagaço e 75% serragem (1:3) e S5: somente serragem (controle). Os resultados mostraram que os bagaços de V. labrusca e M. domestica e serragem de Pinus sp. foram adequados à produção de cogumelos de P. sajor-caju quando utilizados isolados ou em combinações, destacando-se a combinação S4 com V. labrusca, onde foram obtidos os melhores resultados de produtividade (P), eficiência biológica (EB) e rendimento (R), de 0,59 g.dia-1, 33% e 11%, respectivamente. O substrato que possibilitou melhor atividade de lacases (Lac) foi S1 com M. domestica (81.995 U.g-1 no 30º dia), bem como a maior atividade de lignina peroxidase (LiP - 26 U.g-1) e oxidases do álcool veratrílico (OAV - 20,9 U.g-1). A maior concentração de proteínas totais (PT - 2.803 U.g-1) foi obtida em S4 com V. labrusca. Em S3, com bagaço de M. domestica, P. sajor-caju apresentou maior atividade de manganês peroxidase (MnP - 636,4 U.g-1) e a maior biomassa foi obtida em S3 com V. labrusca (8,47 mg de N-acetilglicosamina/g de substrato no 24º dia). Para L. edodes somente V. labrusca (S4) mostrou produção de cogumelos com R de 12,8%, EB de 38,5% e P de 0,25 g.dia-1. Já o bagaço de M. domestica possibilitou a produção de cogumelos nas combinações S3, S4 e controle S5. S4 com V. labrusca possibilitou a maior atividade de Lac por L. edodes (2.932 U.g-1 no 4º dia de cultivo) e a mais alta atividade de LiP (2.73 U g-1). Como a maior biomassa foi obtida empregando o substrato S1 com V. labrusca no 16º dia (17,42 mg de N-acetilglicosamina/g de substrato) e em S4 ocorreu a mais alta atividade de lacases, isto mostra que o crescimento fúngico não está associado ao aumento na produção de Lac. S1 com V. labrusca também apresentou maiores níveis de OAV (25,94 U.g-1). Mais alta concentração de proteínas solúveis PT (6.858 U.g-1) foi obtida empregando S1 com M. domestica. MnP e peroxidases totais de L. edodes não foram detectadas nos substratos V. labrusca ou M. domestica. O bagaço de V. labrusca demonstrou ser mais adequado à atividade de Lac por L. edodes do que M. domestica. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2016-12-09T15:57:07Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Jane Maria Finimundi.pdf: 2306012 bytes, checksum: 9b748065880a8d067aa4ca4e2d374bd9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-09T15:57:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Jane Maria Finimundi.pdf: 2306012 bytes, checksum: 9b748065880a8d067aa4ca4e2d374bd9 (MD5) Previous issue date: 2016-12-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / Edible mushrooms Pleurotus sajor-caju PS-2001 and Lentinula edodes LE-01 were cultivated on substrates constituted of sawdust of Pinus sp. (for P. sajor-caju) or Eucalyptus sp. ( for L. edodes) added of Vitis labrusca and Malus domestica bagasse residues. The production parameters evaluated were: productivity (P), biological efficiency (BE) and yield (Y)), activities of enzymes (laccases, VAO, MnP and LiP), total soluble proteins and the N-acetyl glucosamine liberated from mycelia as a indirect estimative of biomass growth. There were three combinations of substrates (S) and a control, S1: only bagasse residues, S2: 75% bagasse residues and 25% sawdust (3:1), S3: 50% bagasse residues and 50% sawdust (1 : 1), S4: 25% bagasse residues and 75% sawdust (1:3) and S5: sawdust only (control). The results showed that bagasse residues of V. labrusca and M. domestica and sawdust of Pinus sp. were suitable for mushroom production of P. sajor-caju when used alone or in combinations, especially S4 with V. labrusca, which obtained the best results in productivity (P), biological efficiency (BE) and yield (Y) of 0.59 g day-1, 33% and 11% respectively. The substrate which showed the highest laccase activity (Lac) was S1 with M. domestica (81,995 U g-1) and the highest activity of lignin peroxidase (LiP - 26 U g-1) and also veratryl alcohol oxidase (VAO - 20.9 U g-1). The highest concentration of total protein (TP - 2803 mg g-1 of dry matter) was obtained in S4 with V. labrusca. In S3, with bagasse residues of M. domestica, P. sajor-caju showed higher activity of manganese peroxidase (MnP - 636.4 U g-1). The highest biomass was obtained in S3 with V. labrusca (8.47 mg N-acetyl glucosamine/g substrate on the 24 th day). To L. edodes, only V. labrusca ( S4) showed mushrooms production with a R of 12.8%, EB of 38.5% and Y of 0.25 g day-1. Only the bagasse M. domestica enabled the production of mushrooms in S3, S4 and S5. S4 with V. labrusca also showed the highest activity of Lac (2932 U g-1 on day 4 of culture) and the highest activity of LiP (2.73 U g-1). As the highest biomass was obtained in S1 with V. labrusca on the 16th day (17.42 mg N-acetyl glucosamine / g substrate) and S4 showed highest laccases secretion, this can show that fungal growth is not associated with increased production of Lac. S1 with V. labrusca also showed higher levels of VAO (25.94 U g-1). Higher concentration of TP (6858 mg g-1) was obtained from S1 with M. domestica. MnP and total peroxidases of L. edodes were not detected in V. labrusca or M. domestica. V. labrusca was more appropriate for laccase activity of L. edodes than M. domestica.

Os cogumelos têm vastas perspectivas como fontes de propriedades medicinais, pois são usados desde os tempos remotos para tratar doenças e promover a saúde em geral. Possuem uma quantidade de compostos bioativos interessantes o que despertou o interesse da área científica. O presente estudo tem como objetivo a avaliação das propriedades bioativas e da composição química e nutricional dos cogumelos Pleurotus sajor-caju e Lentinula edodes. A atividade antioxidante do extrato foi avaliada através de ensaios de DPPH, poder redutor, TBARS e betacaroteno. Foram realizadas atividade antitumoral nas células NCI-H460, HepG2, HeLa, MCF-7 PLP2 HCT-116 e MRC-5, e anti-inflamatória para o extrato etanólico de P. sajor-caju em Raw 264.7. A composição da amostra do P. sajor caju em tocoferóis foi determinada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) acoplada a um detector de arranjo de diodos (DAD). Os perfis em ácidos graxos e açúcares foram obtidos por cromatografia a gas acoplada a um detector de ionização de chama (CG-FID) e por CLAE acoplado a um detector de índice de refração (DIR). O P. sajor-caju mostrou ser fonte importante de antioxidantes principalmente fenóis (147,54 μg/g) e tocoferóis (615.9g/100g). β-tocoferol foi a forma encontrada em maiores quantidades. Este extrato apresentou atividade antioxidante, sendo esta mais significativa para os ensaios de inibição da peroxidação lipídica (valores de EC50 inferiores a 2,6 mg/mL). A determinação do perfil em macronutrientes demonstrou altos teores em proteínas (17,29 g/100 g) e carboidratos (76,18 g/100 g), apresentando baixos valores de lipídios (1,16 g/100 g). A análise da composição do ácidos graxos conduziu à quantificação de 22 moléculas, com predomínio dos ácidos graxos poli-insaturados, particularmente os ácidos oleico e linoleico, 17-61% e 20-54%, respectivamente. O ensaio de citometria de fluxo foi utilizado para a verificação do tipo de morte induzida, para ambos os cogumelos, que apresentaram resultados semelhantes, indicando morte por apoptose. Os estudos efetuados descrevem o potencial nutracêutico das espécies analisadas, bem como o docking molecular nos faz pensar em uma possível atividade pró-apoptótica e anti-inflamatória. O consumo de cogumelos in natura como em extratos podem exercer um efeito benéfico para a saúde e auxiliar no tratamento de determinadas doenças. / Submitted by cmquadros@ucs.br (cmquadros@ucs.br) on 2018-04-03T14:30:36Z No. of bitstreams: 1 Tese Tiane C Finimundy.pdf: 5212206 bytes, checksum: ca4d07dbacc3899085628cc06e5f33d3 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-03T14:30:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Tiane C Finimundy.pdf: 5212206 bytes, checksum: ca4d07dbacc3899085628cc06e5f33d3 (MD5) Previous issue date: 2018-04-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES / Mushrooms have vast prospects as sources of medicinal properties, since they have been used since ancient times to treat diseases and promote health in general. They have a number of interesting bioactive compounds which aroused the interest of the scientific area. The present study aims to evaluate the bioactive properties and the chemical and nutritional composition of the Pleurotus sajor-caju and Lentinula edodes mushrooms. The antioxidant activity of the extract was evaluated through DPPH, reducing power, TBARS and beta carotene assays. Antitumor activity was performed on NCI-H460, HepG2, HeLa, MCF-7, PLP2, HCT-116 and MRC-5 cells, and anti-inflammatory for the ethanolic extract of P. sajor-caju on Raw 264.7. The composition of the P. sajor caju sample in tocopherols was determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) coupled to a fluorescence detector (DAD). The fatty acid and sugar profiles were obtained by gas chromatography coupled to a flame ionization detector (GC-FID) and by HPLC coupled to a refractive index detector (RID). P. sajor-caju showed to be an important source of antioxidants mainly phenols (147.54 μg / g) and tocopherols (615.9g / 100g). β-tocopherol was the form found in higher amounts. This extract showed antioxidant activity, which is more significant for lipid peroxidation inhibition assays (EC 50 values below 2.6 mg / mL). Macronutrient profile determination showed high levels of protein (17.29 g / 100 g) and carbohydrates (76.18 g / 100 g), presenting low lipid values (1.16 g / 100 g). Analysis of the composition of fatty acids led to the quantification of 22 molecules, with predominance of polyunsaturated fatty acids, particularly oleic and linoleic acids, 17-61% and 20-54%, respectively. The flow cytometry assay was used to verify the type of induced death for both mushrooms, which showed similar results, indicating death by apoptosis. The studies carried out describe the nutraceutical potential of the analyzed species, as well as the molecular docking makes us think of a possible pro-apoptotic and anti-inflammatory activity. The consumption of mushrooms in nature as in extracts can have a beneficial effect on health and help in the treatment of certain diseases.

Os cogumelos têm vastas perspectivas como fontes de propriedades medicinais, pois são usados desde os tempos remotos para tratar doenças e promover a saúde em geral. Possuem uma quantidade de compostos bioativos interessantes o que despertou o interesse da área científica. O presente estudo tem como objetivo a avaliação das propriedades bioativas e da composição química e nutricional dos cogumelos Pleurotus sajor-caju e Lentinula edodes. A atividade antioxidante do extrato foi avaliada através de ensaios de DPPH, poder redutor, TBARS e betacaroteno. Foram realizadas atividade antitumoral nas células NCI-H460, HepG2, HeLa, MCF-7 PLP2 HCT-116 e MRC-5, e anti-inflamatória para o extrato etanólico de P. sajor-caju em Raw 264.7. A composição da amostra do P. sajor caju em tocoferóis foi determinada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) acoplada a um detector de arranjo de diodos (DAD). Os perfis em ácidos graxos e açúcares foram obtidos por cromatografia a gas acoplada a um detector de ionização de chama (CG-FID) e por CLAE acoplado a um detector de índice de refração (DIR). O P. sajor-caju mostrou ser fonte importante de antioxidantes principalmente fenóis (147,54 μg/g) e tocoferóis (615.9g/100g). β-tocoferol foi a forma encontrada em maiores quantidades. Este extrato apresentou atividade antioxidante, sendo esta mais significativa para os ensaios de inibição da peroxidação lipídica (valores de EC50 inferiores a 2,6 mg/mL). A determinação do perfil em macronutrientes demonstrou altos teores em proteínas (17,29 g/100 g) e carboidratos (76,18 g/100 g), apresentando baixos valores de lipídios (1,16 g/100 g). A análise da composição do ácidos graxos conduziu à quantificação de 22 moléculas, com predomínio dos ácidos graxos poli-insaturados, particularmente os ácidos oleico e linoleico, 17-61% e 20-54%, respectivamente. O ensaio de citometria de fluxo foi utilizado para a verificação do tipo de morte induzida, para ambos os cogumelos, que apresentaram resultados semelhantes, indicando morte por apoptose. Os estudos efetuados descrevem o potencial nutracêutico das espécies analisadas, bem como o docking molecular nos faz pensar em uma possível atividade pró-apoptótica e anti-inflamatória. O consumo de cogumelos in natura como em extratos podem exercer um efeito benéfico para a saúde e auxiliar no tratamento de determinadas doenças. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES / Mushrooms have vast prospects as sources of medicinal properties, since they have been used since ancient times to treat diseases and promote health in general. They have a number of interesting bioactive compounds which aroused the interest of the scientific area. The present study aims to evaluate the bioactive properties and the chemical and nutritional composition of the Pleurotus sajor-caju and Lentinula edodes mushrooms. The antioxidant activity of the extract was evaluated through DPPH, reducing power, TBARS and beta carotene assays. Antitumor activity was performed on NCI-H460, HepG2, HeLa, MCF-7, PLP2, HCT-116 and MRC-5 cells, and anti-inflammatory for the ethanolic extract of P. sajor-caju on Raw 264.7. The composition of the P. sajor caju sample in tocopherols was determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) coupled to a fluorescence detector (DAD). The fatty acid and sugar profiles were obtained by gas chromatography coupled to a flame ionization detector (GC-FID) and by HPLC coupled to a refractive index detector (RID). P. sajor-caju showed to be an important source of antioxidants mainly phenols (147.54 μg / g) and tocopherols (615.9g / 100g). β-tocopherol was the form found in higher amounts. This extract showed antioxidant activity, which is more significant for lipid peroxidation inhibition assays (EC 50 values below 2.6 mg / mL). Macronutrient profile determination showed high levels of protein (17.29 g / 100 g) and carbohydrates (76.18 g / 100 g), presenting low lipid values (1.16 g / 100 g). Analysis of the composition of fatty acids led to the quantification of 22 molecules, with predominance of polyunsaturated fatty acids, particularly oleic and linoleic acids, 17-61% and 20-54%, respectively. The flow cytometry assay was used to verify the type of induced death for both mushrooms, which showed similar results, indicating death by apoptosis. The studies carried out describe the nutraceutical potential of the analyzed species, as well as the molecular docking makes us think of a possible pro-apoptotic and anti-inflammatory activity. The consumption of mushrooms in nature as in extracts can have a beneficial effect on health and help in the treatment of certain diseases.

Cogumelos comestíveis de Pleurotus sajor-caju PS-2001 e Lentinula edodes LE-01 foram cultivados em substratos constituídos de serragem de Pinus sp ( para P. sajor-caju) ou Eucalyptus sp (para L. edodes) adicionados de resíduos de bagaços de Vitis labrusca e Malus domestica. Foram avaliados os parâmetros de produção produtividade (P), eficiência biológica e rendimento (R), atividade das enzimas (lacases, VAO, MnP and LiP), proteína solúvel total e a N-acetil glicosamina liberada do micélio como uma estimativa indireta do crescimento da biomassa. Os testes foram realizados com os bagaços dos dois frutos separadamente e em serragem de Pinus sp. (para P. sajor-caju) e Eucalyptus sp.. Foram utilizadas três combinações de substratos (S) e um controle, sendo eles, S1: somente bagaço; S2: 75% bagaço e 25% serragem (3:1); S3: 50% bagaço e 50% serragem (1:1); S4: 25% bagaço e 75% serragem (1:3) e S5: somente serragem (controle). Os resultados mostraram que os bagaços de V. labrusca e M. domestica e serragem de Pinus sp. foram adequados à produção de cogumelos de P. sajor-caju quando utilizados isolados ou em combinações, destacando-se a combinação S4 com V. labrusca, onde foram obtidos os melhores resultados de produtividade (P), eficiência biológica (EB) e rendimento (R), de 0,59 g.dia-1, 33% e 11%, respectivamente. O substrato que possibilitou melhor atividade de lacases (Lac) foi S1 com M. domestica (81.995 U.g-1 no 30º dia), bem como a maior atividade de lignina peroxidase (LiP - 26 U.g-1) e oxidases do álcool veratrílico (OAV - 20,9 U.g-1). A maior concentração de proteínas totais (PT - 2.803 U.g-1) foi obtida em S4 com V. labrusca. Em S3, com bagaço de M. domestica, P. sajor-caju apresentou maior atividade de manganês peroxidase (MnP - 636,4 U.g-1) e a maior biomassa foi obtida em S3 com V. labrusca (8,47 mg de N-acetilglicosamina/g de substrato no 24º dia). Para L. edodes somente V. labrusca (S4) mostrou produção de cogumelos com R de 12,8%, EB de 38,5% e P de 0,25 g.dia-1. Já o bagaço de M. domestica possibilitou a produção de cogumelos nas combinações S3, S4 e controle S5. S4 com V. labrusca possibilitou a maior atividade de Lac por L. edodes (2.932 U.g-1 no 4º dia de cultivo) e a mais alta atividade de LiP (2.73 U g-1). Como a maior biomassa foi obtida empregando o substrato S1 com V. labrusca no 16º dia (17,42 mg de N-acetilglicosamina/g de substrato) e em S4 ocorreu a mais alta atividade de lacases, isto mostra que o crescimento fúngico não está associado ao aumento na produção de Lac. S1 com V. labrusca também apresentou maiores níveis de OAV (25,94 U.g-1). Mais alta concentração de proteínas solúveis PT (6.858 U.g-1) foi obtida empregando S1 com M. domestica. MnP e peroxidases totais de L. edodes não foram detectadas nos substratos V. labrusca ou M. domestica. O bagaço de V. labrusca demonstrou ser mais adequado à atividade de Lac por L. edodes do que M. domestica. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / Edible mushrooms Pleurotus sajor-caju PS-2001 and Lentinula edodes LE-01 were cultivated on substrates constituted of sawdust of Pinus sp. (for P. sajor-caju) or Eucalyptus sp. ( for L. edodes) added of Vitis labrusca and Malus domestica bagasse residues. The production parameters evaluated were: productivity (P), biological efficiency (BE) and yield (Y)), activities of enzymes (laccases, VAO, MnP and LiP), total soluble proteins and the N-acetyl glucosamine liberated from mycelia as a indirect estimative of biomass growth. There were three combinations of substrates (S) and a control, S1: only bagasse residues, S2: 75% bagasse residues and 25% sawdust (3:1), S3: 50% bagasse residues and 50% sawdust (1 : 1), S4: 25% bagasse residues and 75% sawdust (1:3) and S5: sawdust only (control). The results showed that bagasse residues of V. labrusca and M. domestica and sawdust of Pinus sp. were suitable for mushroom production of P. sajor-caju when used alone or in combinations, especially S4 with V. labrusca, which obtained the best results in productivity (P), biological efficiency (BE) and yield (Y) of 0.59 g day-1, 33% and 11% respectively. The substrate which showed the highest laccase activity (Lac) was S1 with M. domestica (81,995 U g-1) and the highest activity of lignin peroxidase (LiP - 26 U g-1) and also veratryl alcohol oxidase (VAO - 20.9 U g-1). The highest concentration of total protein (TP - 2803 mg g-1 of dry matter) was obtained in S4 with V. labrusca. In S3, with bagasse residues of M. domestica, P. sajor-caju showed higher activity of manganese peroxidase (MnP - 636.4 U g-1). The highest biomass was obtained in S3 with V. labrusca (8.47 mg N-acetyl glucosamine/g substrate on the 24 th day). To L. edodes, only V. labrusca ( S4) showed mushrooms production with a R of 12.8%, EB of 38.5% and Y of 0.25 g day-1. Only the bagasse M. domestica enabled the production of mushrooms in S3, S4 and S5. S4 with V. labrusca also showed the highest activity of Lac (2932 U g-1 on day 4 of culture) and the highest activity of LiP (2.73 U g-1). As the highest biomass was obtained in S1 with V. labrusca on the 16th day (17.42 mg N-acetyl glucosamine / g substrate) and S4 showed highest laccases secretion, this can show that fungal growth is not associated with increased production of Lac. S1 with V. labrusca also showed higher levels of VAO (25.94 U g-1). Higher concentration of TP (6858 mg g-1) was obtained from S1 with M. domestica. MnP and total peroxidases of L. edodes were not detected in V. labrusca or M. domestica. V. labrusca was more appropriate for laccase activity of L. edodes than M. domestica.

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul, FAPERGS.

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No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2013-04-22 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Edible mushrooms are easily cultivable and its production from agro-industrial waste is a form of exploitation of these residues, reducing environmental pollution and creating economic opportunities, since that increases the values of solid wastes and produces new products. The aim of this study was to generate a product based on pineapple peel enriched with mycelial mass of Pleurotus albidus, Pleurotus florida and Lentinus citrinus that can be use in human food. Pleurotus albidus, Pleurotus florida and Lentinus citrinus were grown in Sabouraud medium at 25 º C for seven days. From these cultures, the inoculum [10, 15 and 20 mycelial disks (Ø10 mm)] was transferred to 50 ml medium banana cupuassu in three different concentrations, medium A: [CB banana pacovi 9.95% (w / v) added cupuassu 0.05% (w / v)]; medium B: [CB banana 9.9% (w / v) and cupuassu 0.1% (w / v)] ½ C: [CB banana 9.8 % (w / v) and cupuassu 0.2% (w / v)]. The submerged fermentation was conducted at 25 ° C, 150 rpm, for five days, followed by filtration to separate the biomass from the crude extract. The maximum yield of dry biomass was determined using the cultivation medium C and with 20 discs mycelial inoculum. Using this results, the solid-state fermentation was carried out using pineapple peel as substrate. The solid state fermentation was conducted at 25 ° C until complete substrate mycelium formation. The product enriched with mycelial mass was disintegrated and dried at 60 ° C. Pineapple peel and peel supplemented with mushrooms underwent determination of proximate composition, mineral content, amino acids content and determination of microbiological quality. The addition of the fungi residue resulted have increased protein and minerals content and reduced fiber and carbohydrates content. All essential amino acids were found on the enriched substrate, as well as nonessential zamino acids. The myceliation of pineapple peel by P. albidus, P. florida and L. citrinus nutritionally enriched this residue, providing a quality product that can be incorporated in the human diet and that works as a food supplement. / Cogumelos comestíveis são facilmente cultiváveis e sua produção a partir de resíduos agroindustriais é uma forma de aproveitamento destes resíduos, reduzindo a poluição ambiental e criando oportunidades econômicas, uma vez que valoriza os resíduos sólidos e origina novos produtos. O objetivo deste estudo foi gerar um produto a base de casca de abacaxi enriquecido com massa micelial de Pleurotus albidus, Pleurotus florida e Lentinus citrinus que possa ser utillizado na alimentação humana. Pleurotus albidus, Pleurotus florida e Lentinus citrinus foram cultivado em meio Sabouraud, a 25ºC, por sete dias. Destes cultivos, o inóculo [10, 15 e 20 discos miceliais (Ø10 mm)] foi transferido para 50 mL de meio banana-cupuaçu em três diferentes concentrações, meio A: [BC banana pacovi 9,95%(p/v) adicionado de cupuaçu 0,05% (p/v) ]; meio B: [BC banana 9,9% (p/v) e cupuaçu 0,1% (p/v)] e meio C: [BC banana 9,8% (p/v) e de cupuaçu 0,2% (p/v)]. A fermentação submersa foi conduzida a 25º C, 150 rpm, por cinco dias, seguindo-se a filtração para separar a biomassa do extrato bruto. O rendimento máximo de biomassa seca foi determinado no cultivo utilizando o meio C e com inóculo de 20 discos miceliais. A partir deste resultado foi realizada a fermentação semi-sólida na casca de abacaxi. A fermentação semi-sólida foi conduzida a 25 °C até completa miceliação do substrato. O produto enriquecido com massa micelial foi desintegrado e desidratado a 60ºC. A casca do abacaxi e a casca suplementada com cogumelos foram submetidas à determinação de composição centesimal, teor de minerais e aminoácidos e determinação da qualidade microbiológica. A adição dos fungos no resíduo ocasionou o aumento do teor de proteínas e minerais e a redução do conteúdo de fibras e carboidratos. Todos os aminoácidos essenciais foram observados no substrato enriquecido com cogumelo, assim como os aminoácidos não essenciais. A miceliação da casca do abacaxi por P. albidus, P. florida e L. citrinus enriqueceu nutricionalmente este resíduo, proporcionando um produto com qualidade para ser incorporado na dieta humana e que funcione como suplemento alimentar.