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Riqueza e alterações morfofisiológicas associadas à infecção por vírus de RNA de fita dupla no fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae / Richness and morphophysiological changes associated with infection by double-stranded RNA virus in the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae

Viviane Santos 11 April 2013 (has links)
O Brasil é o país líder no uso do fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae para o controle pragas agrícolas. Pouco se conhece sobre a diversidade e o impacto dos micovírus em M. anisopliae sensu stricto. Este trabalho mostra a riqueza dos micovírus associados a isolados de M. anisopliae da coleção de entomopatógenos da Universidade de São Paulo, usinas sucroalcooleiras e produtos microbianos à base do entomopatógeno. RNAfd foram encontrados em 55% dos 36 isolados de Metarhizium e apresentaram 16 diferentes padrões eletroforéticos consistindo de 3 a 18 bandas de RNAfd em gel de poliacrilamida. RNAfd não foram detectados em nenhum dos produtos comerciais utilizados no presente estudo. Os diferentes padrões de vírus encontrados nos isolados aqui estudados, aparentemente, não têm relação com os locais onde foram coletados. O inibidor de síntese protéica ciclohexamida não foi eficiente na eliminação dos vírus de RNAfd em nenhum dos isolados de fungos testados. Colônias dos isolados de M. anisopliae ESALQ 866, M. anisopliae ESALQ 1256 e M. anisopliae CTC F8 foram curadas por meio do cultivo monoconidial ou isolamento de ponta de hifas. Alguns segmentos do isolado M. anisopliae PL26 foram perdidos após o subcultivo de ponta das hifas. Colônias de M. anisopliae ESALQ PL26 obtidas por meio do cultivo monoconidial ou subcultivo de ponta de hifas apresentaram grande variabilidade morfológica, no entanto, essa variação não foi correlacionada com a presença de micovírus. Colônias isogênicas de M. anisopliae ESALQ 1256 mostraram diferenças no crescimento, na produção de conídios e na virulência, no entanto, essas diferenças não foram associadas à presença de RNAfd. Não foram observadas diferenças na tolerância aos raios ultravioleta e ao calor entre as colônias de M. anisopliae ESALQ 1256, com e sem vírus de RNAfd. Colônias oriundas de setores formados no isolado M. anisopliae PL26 produziram menor quantidade de conídios e apresentaram menor quantidade de vírus RNAfd em comparação com as colônias oriundas de outras regiões da colônias originais com características normais. A repicagem sucessiva dos isolados de M. anisopliae ESALQ PL26, ESALQ 1256, CTC F8 e CTC F15, infectados por diferentes vírus de RNAfd, nos meios de cultura BDA, SDAY e meio de arroz, bem como a passagem dos fungos em larvas de Tenebrio molitor, em geral, não afetaram a replicação dos micovírus. / Brazil is the leading country in the use of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae against agricultural pests. Little is known about the diversity and the impact of mycovirus in M. anisopliae sensu stricto. This study shows the richness of mycovirus associated with M. anisopliae isolates from the collections of entomopathogens of the University of São Paulo, from sugar-alcohol factories and microbial based products. dsRNA were found in 55% of the 36 Metarhizium isolates and showed 16 different electrophoretic patterns consisting of 3 to 18 dsRNA bands in polyacrylamide gels. dsRNA was not detected in any of the commercial products used in this study. The different viral patterns found in the isolates studied here apparently have no relation to the locations where they were collected. The inhibitor of protein synthesis cycloheximide culture was efficient in eradicating dsRNA virus from fungi. Colonies of isolates of M. anisopliae ESALQ 866, M. anisopliae ESALQ 1256 and M. anisopliae F8 were cured by monoconidial or by hyphal tip isolation of. Some segments of the M. anisopliae PL26 isolate were lost following hyphal tip subculture. Colonies both from monoconidial culture and hyphal tip subculture of M. anisopliae ESALQ PL26 showed great morphological variability; however, this variation was not correlated with the presence of mycoviruses. Isogenic colonies of M. anisopliae ESALQ 1256 showed differences in growth, conidia production and virulence; however, these differences were not associated to the presence of the dsRNA. No difference was observed regarding tolerance to ultraviolet rays and heat among the colonies of M. anisopliae ESALQ 1256, with and without the dsRNA virus. Sectors formed in the isolate M. anisopliae PL26 produced a smaller number of conidia and fewer dsRNA virus in comparison to the original colonies with normal characteristics. The repeated subculture of isolates of M. anisopliae ESALQ PL26, ESALQ 1256, CTC F8 and CTC F15, infected by different virus of dsRNA, in the PDA, SDAY culture media and in rice, as well as the fungi passage in larvae of Tenebrio molitor, in general, did not affect the replication of the mycovirus.
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Estudo de três lepidópteros pragas e suas interações em cana-de-açúcar / Lepdopteran pests stydy of three and interactions in sugarcane

Carvalho, Lucyo Wagner Torres de 20 December 2011 (has links)
The Telchin licus licus (Drury, 1773) (Lepdoptera: Castniidae) and the Hyponeuma taltula (Schaus, 1904) (Lepidoptera: Noctuidae, Herminiinae) have become important sugarcane puts due to the rapid growth of their populations and the difficulties in controlling both of them. Due to the small amount of information available in literature and to study the interaction between them and other Lepidoptera and natural enemies, a research of a diet for rearing the T.licus licus insect adults was conducted to be able to understand better these two species. Some biological aspects were also observed and the influence of plants attacked by the T. licus licus, the H. taltula and the Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) with the preference of D. saccharalis oviposition and attraction of Cotesia flavipes (Cameron, 1891) (Hymenoptera: Braconidae). The investigation of the pathogenicity of Baculovirus Spodoptera isolates was studied in D. flavipennella. The effect of five diets (D1, D2, D3, D4 and D5) on the development of T. licus licus was evaluated, and the characterization of the chemicals substances released by virgin females with 24 and 48 hours old after the emergence. The D1 and D5 diets were disregarded because they promoted high mortality in the larval stage. After the statistical analysis at 5% probability, it was observed that the D3 and D4 diets were well accepted. The larvae fed with these diets showed greater weight gain and shorter duration in days (p <0.05). When the D2 diet was compared to the D4 and D3 diets, it showed higher mortality in the larvae stage. The D3 and D4 diets favored the production of a greater number of pupae and adults (p <0.05). The adults from the D2, D3 and D4 diets fed with 5% sucrose solution showed an average increase of three days in their life. The D3 and D4 diets were considered appropriate for production of adult T. licus licus. The volatile compounds present in the last three segments of the abdomen of virgin females from D3 and D4 diets were similar to those coming from the field virgin females (p <0.05). While evaluating the oviposition preference for D. saccharalis and the attraction of C. flavipes for canes in relation to sugarcane plants infested by different lepidopteran pests, it was possible to observe that D. saccharalis females have oviposition preference for the non-infested sugarcane (p <0.05), while C. flavipes females are attracted by volatile compounds emitted by sugarcane plants infested by D. saccharalis and in a smaller scale by H. taltula (p <0.05). Moreover, it was found that the use of volatile compounds emitted directly by the plants is more efficient than the extracts obtained from the plants (p <0.05). The effectiveness of three isolates (I-6, I-18 and I-19) of the Baculovirus spodoptera in D. flavipennella neonate larvae was verified because there is no information about the use of baculovirus isolated from the biological control of D. flavipennella. Fifty-six D. flavipennela neonate larvae were used per treatment, which were grouped in four repetitions with 14 larvae. The percentage of efficiency of the I-18 and I-6 isolates were the best differing from the I-19 (p <0.05). The I-18 and I-6 isolates can be used as bio-insecticide for D. flavipennella (p <0.05). With the results obtained in this thesis, it can be concluded that the giant borer can be raised in a laboratory to extract the pheromone glands from the adults. There is interaction between healthy plants and oviposition preference by D. saccharalis in relation to plants infested by lepidopterans. There is attraction of the natural enemy C. flavipes by plants attacked by D. saccharalis and in a smaller scale by H. taltula. There is B. spodoptera isolates with potential for being used in the biological control of D. flavipennella. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Telchin licus licus (Drury, 1773) (Lepidoptera: Castniidae) e Hyponeuma taltula (Schaus, 1904) (Lepidoptera: Noctuidae, Herminiinae) são pragas da cana de açucar cuja importância vem aumentando devido ao rápido crescimento de suas populações e a dificuldades no controle de ambas. Devido ao pequeno número de informações disponíveis na literatura sobre estes insetos, e para estudar a interação entre elas, e outros lepidópteros e inimigos naturais, realizamos o estudo de uma dieta para a criação de insetos adultos de T. licus licus. Alguns aspectos biológicos também foram observados e a influencia de plantas atacadas por T. licus licus, H. taltula e Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) sobre a preferência de oviposição de D. saccharalis e na atração de Cotesia flavipes (Cameron, 1891) (Hymenoptera: Braconidae). A investigação da patogenicidade de isolados do Baculovirus spodoptera foi estudada em D. flavipennella. Avaliou-se o efeito de cinco dietas (D1, D2, D3, D4 e D5) sobre o desenvolvimento de T. licus licus, e a caracterização das substâncias químicas liberadas por fêmeas virgens com idade entre 24 e 48 horas após a emergência. As dietas D1 e D5 foram desconsideradas, pois promoveram alta mortalidade na fase larval. Observou-se que as dietas D3 e dieta D4 foram bem aceitas, as lagartas alimentadas com essas dietas apresentaram maior ganho de peso e menor duração em dias (p<0,05). Para a dieta D2, quando comparada às dietas D4 e D3, proporcionou maior mortalidade na fase de lagartas. As dietas D4 e D3 favoreceram a produção de um maior número de pupas e adultos (p<0,05). Os adultos provenientes das dietas D2, D3 e D4 alimentados com solução de sacarose a 5% apresentaram um aumento médio de três dias na longevidade. As dietas D4 e D3 foram consideradas apropriadas para produção de adultos de T. licus licus. Os compostos voláteis presentes nos três últimos segmentos do abdome de fêmeas virgens provenientes da dieta D3 e D4 foram semelhantes aos provindos de fêmeas virgens do campo (p<0,05). Ao avaliar a preferência de oviposição por D. saccharalis e a atração de C. flavipes por canas em relação a plantas de cana-de-açúcar infestadas por diferentes lepidópteros-praga, observou-se que fêmeas de D. saccharalis têm preferência de oviposição pela cana isenta de infestação (p<0.05), enquanto que fêmeas de C. flavipes são atraídas por compostos voláteis emitidos por plantas de cana-de-açúcar infestadas por D. saccharalis e em menor escala por H. taltula (p<0.05). Além disso, foi constatado que a utilização dos compostos voláteis emitidos diretamente pelas plantas é mais eficiente que os extratos hexânicos obtidos das mesmas (p<0.05). Por não existir informações sobre a utilização de isolados de baculovírus no controle biológico de D. flavipennella verificou-se a eficiência de três isolados (I-6, I-18 e I-19) do Baculovirus spodoptera em lagartas neonatas de D. flavipennella. Foram utilizadas 56 lagartas neonatas de D. flavipennela por tratamento, sendo essas agrupadas em 4 repetições de 14 lagartas; as porcentagens de eficiência dos isolados I-18 e I-6 foram às melhores diferindo do I-19 (p<0,05); o isolado I-18 e o isolado I-6 podem ser utilizados como bioinseticida para D. flavipennella (p<0,05). Com os resultados obtidos nesta tese, pode-se concluir que a broca gigante pode ser criada em laboratório a fim de obtenção de adultos para extração de glândulas feromonais; existe interação entre plantas sadias e preferência de oviposição por D. saccharalis em relação a plantas infestadas por lepidópteros; há atração do inimigo natural C. flavipes por plantas atacadas por D. saccharalis e em menor escala por H. taltula; há isolados de Baculovirus spodoptera com potencial de serem utilizados no controle biológico de D. flavipennella.
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Atualização dos conhecimentos sobre o percevejo de cama Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae): proposta para um guia de vigilância e controle / Update of the knowledge about bed bug Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae): proposal for a guide of surveillance and control

Figueiredo, Júlia Vono Alvarez 13 November 2018 (has links)
Percevejos de cama são insetos de importância em saúde pública pela sua hematofagia obrigatória em todos os estágios de vida em que se alimenta. Cimex lectularius é a espécie mais comum, cosmopolita e antropofílica. Apesar de não serem considerados vetores comprovados de patógenos, suas características biológicas podem torná-los potenciais vetores. Esses insetos residem próximo ao hospedeiro e geram grandes infestações. Desde a década de 1990, observa-se aumento nos relatos de infestações em diversas regiões do mundo. No Brasil a literatura sobre esta praga é muito escassa e a ocorrência de infestações não tem sido sistematicamente registradas. Objetivou-se neste estudo atualizar os conhecimentos sobre percevejos de cama, com enfoque na espécie Cimex lectularius e propor um Guia de Vigilância e Controle. Recorrendo-se a uma busca bibliográfica sobre percevejos de cama nas publicações de 1990 a 2017, atualizaram-se dados de sistemática, distribuição, morfologia, bioecologia, infestação e importância médica. Baseando-se em guias e manuais de vigilância de percevejos de cama de programas de vigilância operantes em outras cidades do mundo e em relatos de casos de infestações, foi elaborado o conteúdo para um Guia de Vigilância e Controle de percevejos de cama, a fim de nortear as ações dos órgãos de vigilância em saúde e subsidiar a instalação de um programa de vigilância entomológica desses insetos. / Bedbugs are insects of importance in public health due to their obligatory hematophagy in all stages of life in which they are fed. Cimex lectularius is the most common, cosmopolitan and anthropophilic species. Although they are not considered proven vectors of pathogens, their biological characteristics may make them potential vectors. These insects live near the host and generate large infestations. Since the 1990s, there has been an increase in reports of infestations in several regions of the world. In Brazil the literature on this pest is very scarce and the occurrence of infestations has not been systematically recorded. The objective of this study was to update the knowledge about bedbugs, focusing on the species Cimex lectularius and to propose a Guide for Surveillance and Control. Using a bibliographical search about bed bugs in the publications from 1990 to 2017, systematics, distribution, morphology, bioecology, infestation and medical importance data were updated. Based on guides and manuals for bedbug surveillance of surveillance programs operating in other cities around the world and in reports of cases of infestations, the contents of a Guide to Bedbug Surveillance and Control were developed in order to guide the actions of health surveillance agencies and subsidize the installation of an entomological surveillance program for these insects.
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Inibidores de proteinase do tipo Bowman-Birk: evolução molecular, expressão na superfície de fagos filamentosos e seu papel na interação planta-inseto. / Bowman-birk proteinase inhibitors: molecular evolution, phage-display and its role on plant-insect interactions.

José, Márcia Ometto de Mello Alves 27 November 2002 (has links)
Os inibidores inibidores de serino proteinases do tipo Bowman-Birk (BBI) possuem dois sítios ativos e são encontrados em plantas das famílias Fabaceae e Poaceae. Neste trabalho foi apresentada a estrutura primária e o padrão de expressão de 14 seqüências expressas (EST, expressed sequence tags) de BBI putativos encontradas no banco de dados do "Projeto Transcriptoma da Cana-de-açúcar" (SUCEST). Estas quatorze seqüências foram utilizadas em conjunto com outras 87 seqüências de BBI previamente descritas e depositadas no banco de dados "GenBank" para a construção de árvores filogenéticas da família BBI. A análise filogenética mostrou que os BBI de monocotiledôneas e dicotiledôneas podem ser claramente separados em diferentes grupos e a topologia das árvores filogenéticas sugere um padrão evolutivo diferente das famílias de BBI em plantas. Os inibidores de dicotiledôneas são bem conservados e acumularam diferenças sutis durante a evolução. Em contrapartida, os inibidores de monocotiledôneas são altamente variáveis, indicando a ocorrência de um processo evolutivo interessante, baseado em eventos de duplicação intragênica e mutação. Dois inibidores de serino proteinases, um de tripsina e outro de quimotripsina, derivados do gene que codifica o inibidor Bowman-Birk de soja, foram expressos na superfície do fago filamentoso M13 e utilizados para a construção de bibliotecas de variantes. Para tal foram feitas mutações em quatro aminoácidos do sítio ativo destes inibidores e duas bibliotecas de expressão na superfície de fagos filamentosos foram construídas. Posteriormente, estas bibliotecas foram utilizadas para a seleção de variantes que melhor interagiam com a tripsina bovina e de Diatraea saccharalis e com as enzimas digestivas presentes no extrato intestinal desta praga. Os variantes selecionados foram seqüenciados, analisados e caracterizados. Os resultados mostraram que a técnica de expressão na superfície de fagos filamentosos foi eficiente para selecionar novos inibidores. Além disto, com as mutações realizadas, foi possível transformar a alça de inibição de quimotripsina em uma alça de inibição de tripsina. / The Bowman-Birk inhibitors (BBIs) are double headed inhibitors of serine proteinase found in plants from Fabaceae and Poaceae families. We describe the primary structure and the gene expression profile of 14 putative BBIs from the sugarcane expressed sequence tag (SUCEST) database and show how we used these newly discovered sequences together with 87 previously described BBI sequences from the "GenBank" database to construct phylogenetic trees for the BBI family. Phylogenetic analysis revealed that BBI-type inhibitors from monocotyledonous and dicotyledonous plants could be clearly separated into different groups, while the overall topology of the BBI tree suggests a different pattern of evolution for BBI families in flowering plants. We also found that BBI proteinase inhibitors from dicotyledonous plants were well conserved, accumulating only slight differences during their evolution. In addition, we found that BBIs from monocotyledonous plants were highly variable, indicating an interesting process of evolution based on internal gene duplications and mutation events. Two serine-type proteinase inhibitors, a trypsin and a chymotrypsin, both derived from the soybean Bowman-Birk inhibitor, were expressed on the surface of a filamentous phage. Site mutations were made in four positions of the reactive sites of these inhibitors and two phage-display libraries were constructed. Later, these libraries were used to select better ligands to the bovine and Diatraea saccharalis trypsin and to the midgut enzymes of this insect pest. The selected variants were sequenced, analyzed and characterized. The results showed that the phage-display technique is efficient to select new proteinase inhibitors. Furthermore, it was possible to modify the chymotrypsin loop into a trypsin loop using the library constructed by the insertion of a degenerated primer.
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Bioecologia e manejo da cigarrinha-das-raízes, Mahanarva fimbriolata (Stal, 1854) (Hemiptera: Cercopidae), em cana-de-açúcar / Bioecology and management of the sugarcane spittlebug, Mahanarva fimbriolata (Stål, 1854) (Hemiptera: Cercopidae) on sugarcane

Garcia, José Francisco 13 December 2006 (has links)
Os objetivos deste trabalho com Mahanarva fimbriolata foram estudar a influência de fatores abióticos (temperatura, umidade e fotoperíodo) sobre sua biologia, avaliar a flutuação populacional, sistema de amostragem de ninfas e adultos e os métodos de controle, biológico com o fungo Metarhizium anisopliae, químico com thiamethoxam (Actara® 250WG) e por resistência varietal. As condições térmicas influem na duração das fases do ciclo, não havendo desenvolvimento embrionário a 32°C. As temperaturas constantes de 30 e 32°C são letais para ninfas, sendo 25°C a temperatura ideal. Os limites térmicos inferiores de desenvolvimento e as constantes térmicas são 11,2°C e 318,2 graus-dias para a fase de ovo e 11,8°C e 468,0 graus-dias para a fase de ninfa. Condições térmicas flutuantes influem na duração das fases do inseto, mas não são letais a nenhuma delas. A umidade influi na duração e viabilidade do período embrionário. O menor período ocorre na umidade de contato, seguido pela UR de 100%. Nas UR de 80, 60 e 40%, não há desenvolvimento embrionário. Ovos expostos a essas umidades por 120 dias e, então, submetidos à umidade de contato, continuam inviáveis ou com baixas viabilidades (9,6; 6,3 e 0%, respectivamente). Indivíduos expostos à fotofase de 10 horas colocam ovos inférteis ou em aparente diapausa. Para sugarem a seiva, as ninfas inserem os estiletes na epiderme da raiz, atravessam todo o córtex e atingem o cilindro vascular, alimentando-se no xilema e no tubo crivado do floema primário. Na lâmina foliar, os adultos introduzem os estiletes, preferencialmente, pelos estômatos, atravessam as células do parênquima clorofiliano e atingem o metaxilema nos feixes vasculares. O aparecimento da cigarrinha está condicionado ao excedente hídrico e à temperatura. É possível se amostrarem adultos, com armadilhas adesivas amarelas e determinar o momento para controlar ninfas de mesma geração. Não há diferença em relação ao número de conídios depositados por ninfa em concentrações que variam de 1,6 a 5,3; 2,9 a 4,9 e 0,7 a 3,6 conídios/ninfa, respectivamente. As maiores mortalidades acumuladas, total e confirmada, de M. fimbriolata pulverizada com M. anisopliae, oito dias após a inoculação, são constatadas na dosagem de 5,0 x 108 conídios.ml-1, sendo de 57,5 e 62,3% (total) e 42,7 e 45,2% (confirmada) com pulverização sobre ninfa e espuma, respectivamente. M. anisopliae apresenta maior potencial para controle da cigarrinha quando pulverizado sobre a ninfa ou a espuma e sem a lavagem de conídios após a aplicação. Dentre as variedades estudadas, SP81-3250 é a mais suscetível à cigarrinha, possibilitando maior longevidade de machos e fêmeas, maior período de oviposição e elevada fecundidade. A variedade RB72454 reduz em 50% a população de ninfas nas raízes. A aplicação de thiamethoxam, a 1,0 kg p.c./ha, na base das plantas, proporciona controle superior a 90% até 60 DAA e residual de 105 dias (0,02 mg.kg-1) nas raízes. A eficiência de controle na pulverização foliar diminui para 34%, 15 DAA, com resíduos de 2,61 mg.kg-1 nas raízes. Pulverizações dirigidas ao colmo apresentam resíduos inferiores a 0,02 mg.kg-1 nas raízes, sem controle da praga. / The objectives of this work were to study the influence of abiotic factors (temperature, moisture, and photoperiod) on Mahanarva fimbriolata biology, and to evaluate population fluctuation, sampling system for nymphs and adults, and biological control with the fungus Metarhizium anisopliae, chemical control with thiamethoxam (Actara® 250 WG), and control by varietal resistance. The temperature conditions influence life cycle stage duration; no embryonic development is observed at 32°C. Constant temperatures of 30 and 32°C are lethal to nymphs, whereas 25°C is the ideal temperature. The lower temperature development thresholds and thermal constants are 11.2°C and 318.2 degree-days for the egg stage and 11.8°C and 468.0 degree-days for the nymphal stage. Fluctuating temperature conditions influence stage duration but are not lethal to any of the stages. Humidity influences the duration and viability of the embryonic period. The shortest period occurs at contact humidity, followed by 100% RH No embryonic development occurs at RH values of 80, 60, and 40%. Eggs exposed to these humidity values for 120 days and then submitted to contact humidity remain unviable or present low viability (9.6; 6.3, and 0%, respectively). Individuals exposed to a 10-hour photophase lay infertile or apparently-diapausing eggs. In order to suck sap, the nymphs insert their stylets into the root epidermis, passing through the entire cortex and reaching the vascular cylinder, feeding on the xylem and on the sieve tube of the primary phloem. On the leaf blade, the adults introduce their stylets preferentially through the stomata, passing through the chlorophyll-bearing parenchyma cells and reaching the metaxylem on the vascular bundles. Spittlebug occurrence is conditioned to water surplus and temperature. Adults can be sampled by means of yellow sticky traps, allowing the control of same-generation nymphs to be synchronized. There are no differences with regard to the number of conidia deposited per nymph at concentrations ranging from 1.6 to 5.3; 2.9 to 4.9; and 0.7 to 3.6 conidia/nymph, respectively. The highest cumulative, total, and confirmed mortalities of M. fimbriolata sprayed with M. anisopliae eight days after inoculation are verified at a dose of 5.0 × 108 conidia.ml-1, with values of 57.5 and 62.3% (total), and 42.7 and 45.2% (confirmed) when sprayed on the nymphs and on the spittle, respectively. M. anisopliae has a greater potential to control spittlebugs when sprayed on nymphs or on the spittle without washing off the conidia after application. Among the varieties studied, SP81-3250 is the most susceptible to the spittlebug, allowing greater longevity of males and females, a longer oviposition period, and high fecundity. Variety RB72454 reduces the nymphal population on roots by 50%. The application of thiamethoxam at 1.0 kg c.p./ha at the base of plants provides control rates higher than 90% until 60 DAA and a residual control of 105 days (0.02 mg.kg-1) on the roots. Leaf spray control effectiveness decreases to 34% at 15 DAA, with residues of 2.61 mg.kg-1 in roots. Sprays directed at the stalk show residues lower than 0.02 mg.kg-1 in roots, without controlling the pest.
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Investigação da ocorrência de infestação por Cimidae (Heteroptera: Cimicomorpha) na região metropolitana de São Paulo, no período de 2004 a 2009 / Investigation of occurrence of infestation by Cimicidae (Heteroptera: Cimicomorpha) in the metropolitan region of São Paulo, in the period 2004-2009

Nascimento, Luis Gustavo Grijota 08 October 2010 (has links)
Introdução: Os percevejos de cama são insetos hematófagos pertencentes à família Cimicidae e à ordem Hemiptera. Algumas das espécies desse grupo despertam interesse em Saúde Pública por apresentarem comportamento antropofílico. Atualmente verifica-se uma reemergência das infestações de percevejos de cama em diversas localidades do mundo, principalmente em grandes cidades, já que estas constituem ambientes propícios para sua instalação e proliferação, pois recebem ou abrigam grande número de indivíduos que atuam como fontes de alimentação. Objetivos: Descrever a atual situação das infestações por insetos da família Cimicidae na região Metropolitana de São Paulo, no período de 2004 a 2009. Métodos: estudo descritivo baseado em registros de ocorrência de cimicídeos fornecidos por empresas privadas de controle de pragas e por órgãos públicos de vigilância, pesquisa e controle sediados na Região Metropolitana de São Paulo. Identificação de espécies de cimicídeos recebidas no Laboratório de Entomologia em Saúde Pública da Faculdade de Saúde Pública, em decorrência de coletas realizadas na região estudada. Resultados: Foram recebidos 369 registros de ocorrência de cimicídeos, sendo 325 provenientes do município de São Paulo e o restante dos municípios vizinhos à capital. As residências somaram 181 registros ou 68,04 por cento dos casos, enquanto as infestações ocorridas em estabelecimentos comerciais e/ou de serviço foram responsáveis por 85 registros (31,95 por cento). Cimex lectularius foi a espécie predominante, sendo responsável por 262 registros (92,25 por cento), enquanto Cimex hemipterus foi apontado em apenas um registro (0,35 por cento). Os registros do município de São Paulo mostraram uma correlação positiva significativa entre padrões socioeconômicos mais elevados e alto número de ocorrências registradas. Um total de 354 espécimes coletados na região metropolitana de São Paulo foi recebido pelo laboratório entre abril de 2008 e dezembro de 2009. Todas as amostras recebidas foram identificadas como sendo de C. lectularius. Conclusões: Ficou evidenciado que ocorrem infestações regulares por cimicídeos na Região Metropolitana de São Paulo. Os registros de ocorrência de infestações estão, no entanto, concentrados às regiões socioeconomicamente mais favorecidas do município de São Paulo. A subnotificação das infestações é uma realidade, o que minimiza a gravidade do quadro apresentado / Introduction: The bed bugs are hematophagous insects belonging to the family Cimicidae and to the order Hemiptera. Some of the species of this group draw attention in Public Health because they have anthropophilic behavior. We observe the resurgence of bed bug infestations in many different places all over the world, especially in big cities, once they are very propense environment for its installation and proliferation due to the fact that there are many individuals living there. Aims: The aim of this research is to describe the real situation of infestations by Cimicidae insects in the metropolitan region of São Paulo from 2004 to 2009. Methodology: this is a descriptive study based on the registries of occurrences provided by private companies specialized in pest control and public departments of control and research in the metropolitan region of São Paulo. Identification of the Cimicidae insects received, resulting from collections in the region. Results: Were received 369 registries of bed bug occurrences in the period, 325 of those belonging to the city of São Paulo. Registries of infestations in houses were 181, corresponding to 68,04per cent of the cases. Registries of infestations in business organizations were 85, corresponding to 31,95per cent. Cimex lectularius was the predominant species with 262 registries, corresponding to 92,25per cent. Cimex hemipterus was mencioned only once (0,35per cent). Registries in São Paulo show a very positive correlation between high social and economical standards and a high number of registries of occurrences. LESP received 354 samples collected in RMSP from April 2008 to December 2009, all of them identified as C. lectularius. Conclusion: It was evident that there are very regular bed bug infestations in the metropolitan region of São Paulo. Registries are concentrated in the high social and economical standards regions of the city of São Paulo. Social and behavior patterns influence the notifications. Lack of notification happens and that minimizes the problemThe bed bugs are hematophagous insects belonging to the family Cimicidae and to the order Hemiptera. Some of the species of this group draw attention in Public Health because they have anthropophilic behavior. We observe the resurgence of bed bug infestations in many different places all over the world, especially in big cities, once they are very propense environment for its installation and proliferation due to the fact that there are many individuals living there. Aims: The aim of this research is to describe the real situation of infestations by Cimicidae insects in the metropolitan region of São Paulo from 2004 to 2009. Methodology: this is a descriptive study based on the registries of occurrences provided by private companies specialized in pest control and public departments of control and research in the metropolitan region of São Paulo. Identification of the Cimicidae insects received, resulting from collections in the region. Results: Were received 369 registries of bed bug occurrences in the period, 325 of those belonging to the city of São Paulo. Registries of infestations in houses were 181, corresponding to 68,04% of the cases. Registries of infestations in business organizations were 85, corresponding to 31,95%. Cimex lectularius was the predominant species with 262 registries, corresponding to 92,25%. Cimex hemipterus was mencioned only once (0,35%). Registries in São Paulo show a very positive correlation between high social and economical standards and a high number of registries of occurrences. LESP received 354 samples collected in RMSP from April 2008 to December 2009, all of them identified as C. lectularius. Conclusion: It was evident that there are very regular bed bug infestations in the metropolitan region of São Paulo. Registries are concentrated in the high social and economical standards regions of the city of São Paulo. Social and behavior patterns influence the notifications. Lack of notification happens and that minimizes the problem.
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Dípteros frugívoros e seus parasitoides associados à mangueira em ambiente semiárido / Frugivorous flies and their parasitoids associated with mango in semiarid environment

Santos, Wigna Gabriela Nunes 12 February 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 WignaGNS_DISSERT.pdf: 513215 bytes, checksum: 78dc5f47f01abd85a7757079de7ad67a (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Brazil is one of the largest fruit producers in the world, however part of its production is not exported due to phytosanitary barriers imposed by importing countries. The incidence of frugivorous flies in orchards cause depreciation in fruits and serious damage to the producer, an alternative for the control of these pests, are parasitoids. The objective of this study was know to frugivorous flies and their parasitoids, associated with mango fruits in two maturity stages and the fruit of ripe guava. Mango fruits were harvested at physiological maturity stage and mature on the plant, and fruit ripe guava in the states of Rio Grande do Norte (Polo Açu-Mossoró) and Ceará. After harvest, the fruits were taken to the of laboratory of applied entomology of UFERSA, where they were weighed and placed in plastic containers containing vermiculite and closed with voile fabric. After 10 to 15 days vermiculite was sieved and pupae obtained counted and placed in Petri dishes until the emergence of adults. Also were placed traps types of McPhail and Jackson, containing hydrolyzed corn protein 5% and Trimedilure, respectively, in four orchards with products intended to export. Weekly (McPhail) and fortnightly (Jackson), the traps were monitored and insects captured sent to the laboratory. We collected 400 mango fruits and 1.331 guava fruits. The mango fruits in physiological maturity stage were not infested by any insect, since the ripe fruit on the plant were infested by C. capitata (34.4%) and Z. indianus (65.6%), the guava fruits were obtained only pupae of Z. indianus. Besides the flies were found collected figitídeos parasitoids of Z. indianus. Only, C. capitata was captured in traps and contacted that non infestation of the fruits in physiological maturity stage, for this tefritídeo is not associated with its population density in the orchard, but the inherent fruit factors / O Brasil é um dos maiores produtores de frutas do mundo, no entanto a incidência de dípteros frugívoros nos pomares causa sérios prejuízos a produção, devido ao fato de suas larvas alimentarem-se dos frutos tornando-os impróprios para o consumo in natura, além de algumas espécies, como as moscas-das-frutas, limitarem a exportação da produção. O controle desses dípteros é realizado basicamente utilizando produtos químicos, porém devido as exigências do mercado consumidor, métodos alternativos de controle estão sendo cada vez mais utilizados, como por exemplo, os parasitoides. Este trabalho teve como objetivos: a) Conhecer os dípteros frugívoros associados a frutos de manga e qual estádio de maturação (maturação fisiológica ou maduro na planta) é mais suscetível a infestação pelos dípteros frugívoros, em pomares comerciais localizados no Polo Açu-Mossoró (RN) e b) relatar a ocorrência de figitídeos parasitoides de drosofilídeos em frutos maduros de manga e goiaba, nos estados do Rio Grande do Norte e Ceará, respectivamente. Os frutos coletados eram encaminhados ao laboratório de Entomologia Aplicada da UFERSA, onde eram pesados, acondicionados em recipientes plásticos contendo vermiculita e fechados com tecido voile. Decorridos 10 a 15 dias a vermiculita era peneirada e os pupários obtidos contados e colocados em placas de Petri até a emergência dos adultos. Os frutos de manga no estádio de maturação fisiológica não estavam infestados por diptero, já os frutos de manga maduros estavam infestados por C. capitata (34,4%) e Z. indianus (65,6%). Verificou-se também que a não infestação de C. capitata nos frutos de manga no estádio de maturação fisiológica está relacionado com as características dos frutos e não a densidade populacional da praga no campo. Associados aos frutos maduros de manga e goiaba foram encontrados exemplares de Dicerataspis grenadensis e Leptopilina boulardi, respectivamente, e este é o primeiro relato de D. grenadensis no estado do Rio Grande do Norte e de L. boulardi no Ceará
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Dípteros frugívoros e seus parasitoides associados à mangueira em ambiente semiárido / Frugivorous flies and their parasitoids associated with mango in semiarid environment

Santos, Wigna Gabriela Nunes 12 February 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 WignaGNS_DISSERT.pdf: 513215 bytes, checksum: 78dc5f47f01abd85a7757079de7ad67a (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Brazil is one of the largest fruit producers in the world, however part of its production is not exported due to phytosanitary barriers imposed by importing countries. The incidence of frugivorous flies in orchards cause depreciation in fruits and serious damage to the producer, an alternative for the control of these pests, are parasitoids. The objective of this study was know to frugivorous flies and their parasitoids, associated with mango fruits in two maturity stages and the fruit of ripe guava. Mango fruits were harvested at physiological maturity stage and mature on the plant, and fruit ripe guava in the states of Rio Grande do Norte (Polo Açu-Mossoró) and Ceará. After harvest, the fruits were taken to the of laboratory of applied entomology of UFERSA, where they were weighed and placed in plastic containers containing vermiculite and closed with voile fabric. After 10 to 15 days vermiculite was sieved and pupae obtained counted and placed in Petri dishes until the emergence of adults. Also were placed traps types of McPhail and Jackson, containing hydrolyzed corn protein 5% and Trimedilure, respectively, in four orchards with products intended to export. Weekly (McPhail) and fortnightly (Jackson), the traps were monitored and insects captured sent to the laboratory. We collected 400 mango fruits and 1.331 guava fruits. The mango fruits in physiological maturity stage were not infested by any insect, since the ripe fruit on the plant were infested by C. capitata (34.4%) and Z. indianus (65.6%), the guava fruits were obtained only pupae of Z. indianus. Besides the flies were found collected figitídeos parasitoids of Z. indianus. Only, C. capitata was captured in traps and contacted that non infestation of the fruits in physiological maturity stage, for this tefritídeo is not associated with its population density in the orchard, but the inherent fruit factors / O Brasil é um dos maiores produtores de frutas do mundo, no entanto a incidência de dípteros frugívoros nos pomares causa sérios prejuízos a produção, devido ao fato de suas larvas alimentarem-se dos frutos tornando-os impróprios para o consumo in natura, além de algumas espécies, como as moscas-das-frutas, limitarem a exportação da produção. O controle desses dípteros é realizado basicamente utilizando produtos químicos, porém devido as exigências do mercado consumidor, métodos alternativos de controle estão sendo cada vez mais utilizados, como por exemplo, os parasitoides. Este trabalho teve como objetivos: a) Conhecer os dípteros frugívoros associados a frutos de manga e qual estádio de maturação (maturação fisiológica ou maduro na planta) é mais suscetível a infestação pelos dípteros frugívoros, em pomares comerciais localizados no Polo Açu-Mossoró (RN) e b) relatar a ocorrência de figitídeos parasitoides de drosofilídeos em frutos maduros de manga e goiaba, nos estados do Rio Grande do Norte e Ceará, respectivamente. Os frutos coletados eram encaminhados ao laboratório de Entomologia Aplicada da UFERSA, onde eram pesados, acondicionados em recipientes plásticos contendo vermiculita e fechados com tecido voile. Decorridos 10 a 15 dias a vermiculita era peneirada e os pupários obtidos contados e colocados em placas de Petri até a emergência dos adultos. Os frutos de manga no estádio de maturação fisiológica não estavam infestados por diptero, já os frutos de manga maduros estavam infestados por C. capitata (34,4%) e Z. indianus (65,6%). Verificou-se também que a não infestação de C. capitata nos frutos de manga no estádio de maturação fisiológica está relacionado com as características dos frutos e não a densidade populacional da praga no campo. Associados aos frutos maduros de manga e goiaba foram encontrados exemplares de Dicerataspis grenadensis e Leptopilina boulardi, respectivamente, e este é o primeiro relato de D. grenadensis no estado do Rio Grande do Norte e de L. boulardi no Ceará
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Plantas espontâneas favorecem crisopídeos em plantio de pimenta malagueta / Non-crop plants favour lacewings in chili pepper crops

Diaz, Natália Salgado 21 February 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:30:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1487940 bytes, checksum: d95d0412987e018a2d5fe79a3afee5f1 (MD5) Previous issue date: 2014-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Habitat diversification in agroecosystems by mantaining non-crop plants is a strategy which allows the increase of beneficial arthropods since it makes the environment more suitable for natural enemies, due to the availability of food resources, oviposition sites and refuge areas. Chili pepper Capsicum frutescens is a very important crop in Brasil, because of its profitability and social value. However, this crop needs phytosanitary stand and the growers use inadequate practices in attempt to control pests. Among the several beneficial arthropods, lacewings are highlighted by their natural occurrence in various agroecosystems and by their predatory ability. From this perspective, I carried out assessments in areas of chili pepper cultivation to determine: i) the influence of noncrop plants integrated to the field in the abundance of lacewings and of aphids compared to chili pepper crops without non-crop plants, ii) the identification of non-crop plants, present in the crop, associated to lacewings (food source, oviposition and/or refuge site) and to the absence or presence of aphids, and iii) intraguild predation in eggs of C. externa in the presence and in the absence of non-crop plants. Posteriorly, in chapter 2, I studied in laboratory the role of non-crop plant flowers of common occurrence in chili pepper crops (Bidens pilosa, Ageratum conyzoides and Sonchus oleraceus) in the survivor, development, fecundity and fertility of C. externa and Ceraeochrysa cubana. According to the results found in field, the abundance of lacewings in chili pepper crop areas was favoured by the presence of non-crop plants and there was no significant difference in the presence of aphids on chili pepper plants in the areas with or without non crop vegetation. Emilia sp. (average = 1 egg/plant) and Pennisetum sp. (average = 0.54 egg/plant) were the species with the greatest presence of lacewing eggs. In Pennisetum sp., Conyza bonariensis, Marsypianthes chamaedrys, Solanum lycocarpum, and Solanum americanum it was found the greatest presence of adults with average of 1.21, 1, 0.90, 0.85 and 0.83 adults/plant, respectively. Six out of 16 non-crop plants identified in chili pepper crops had aphids on them. Intraguild predation on eggs of C. externa was higher in the areas of chili pepper crops without non-crop plants (average = 2.91 predated eggs/card/plant) compared to the chili pepper crop areas with non-crop plants (average = 2.19 eggs/card/plant). In the laboratory assessments, both C. externa and C. cubana larvae survived for a longer time in the diets of A. conyzoides and B. pilosa with flowers compared to the remaining diets in which I offered non-crop plants without flowers. Larvae development was significantly affected by the offered diets, eight C. cubana larvae pupated in the diet of B. pilosa and two C. externa larvae pupated in the diet of S. oleraceus, the higher number of pupae being formed in the diets with flowers for each lacewing species. The diet with A. kuehniella eggs was the only treatment where more than 70% of the larvae survived, pupated and emerged as adults. The average survivorship of adults in all diets with non-crop plants was five days, with no oviposition. In the diet with yeast and honey, survivorship was higher than 60 days for both lacewing species tested, with total oviposition of 775.35 (±207.8) and 1108.12 (±106.8) eggs/female for C. externa and C. cubana, respectively. Maintaining non-crop vegetation in chili pepper crop areas favours the presence of lacewings and decreases the intraguild predation. The use of plant flowers as food for larvae of C. externa and C. cubana favours their survivorship and may be useful as complementary food in the diet of these predators. Therefore, maintaining non-crop plants in crop fields may improve natural enemy survivorhip e development. / A diversificação do habitat em agroecossistemas através da manutenção de plantas espontâneas é uma estratégia que permite aumentar populações de artrópodes benéficos ao tornar o ambiente mais adequado para os inimigos naturais, devido à disponibilidade de recursos alimentares, lugares para oviposição e áreas de refúgio em condições adversas. A pimenta-malagueta Capsicum frutescens é uma cultura de grande importância no Brasil, por sua rentabilidade e importância social. No entanto, a cultura carece de suporte fitossanitário e os agricultores incorrem em práticas inadequadas na tentativa de controle de pragas. Dentre os diferentes artrópodes benéficos, os crisopídeos (Neuroptera: Chrysopidae) se destacam pela ocorrência natural em diferentes agroecossistemas e por sua capacidade predatória. A partir desta perspectiva foram realizadas avaliações em áreas de cultivo de pimenta-malagueta para estabelecer: i) a influência de plantas espontâneas integradas no campo de cultivo na abundância de crisopídeos e de pulgões comparada com plantios de pimenta-malagueta sem vegetação espontânea; ii) a identificação das plantas espontâneas presentes na cultura, sua associação com crisopídeos (fonte de alimento, lugar oviposição e/ou refúgio) e a presença de pulgões; e iii) a predação intraguilda em ovos de C. externa na presença e na ausência de plantas espontâneas. Posteriormente, no capítulo 2, estudou-se em laboratório o papel das inflorescências das plantas espontâneas de ocorrência comum em cultivos de pimenta (Bidens pilosa, Ageratum conyzoides e Sonchus oleraceus) na sobrevivência, no desenvolvimento, na fecundidade e fertilidade de C. externa e Ceraeochrysa cubana. De acordo com os resultados obtidos em campo, a abundância de crisopídeos nas áreas de pimenta-malagueta foi favorecida pela presença de plantas espontâneas e não houve diferença significativa na presença de pulgões em plantas de pimenta nas áreas com e sem vegetação espontânea. Emilia sp. (média= 1 ovo/planta) e Pennisetum sp. (média= 0,54 ovos/planta) foram as espécies com maior presença de ovos. Pennisetum sp., Conyza bonariensis, Marsypianthes chamaedrys, Solanum lycocarpum, e Solanum americanum foram as espécies com maior presença de adultos com médias de 1,21, 1, 0,90, 0,85 e 0,83 adultos/planta, respectivamente. Das 16 espécies de plantas espontâneas que foram identificadas no plantio de pimentamalagueta, seis tinham presença de pulgões. A predação intraguilda em ovos de C. externa foi maior nas áreas de pimenta sem vegetação espontânea (média= 2,9 ovos predados/cartão/planta) do que nas áreas de pimenta com vegetação espontânea (média= 2,2 ovos/cartão/planta). Nos experimentos em laboratório, tanto as larvas de C. externa como as de C. cubana sobreviveram mais tempo nas dietas A. conyzoides e B. pilosa com inflorescência do que nas outras dietas onde foram oferecidas plantas espontâneas sem inflorescência. O desenvolvimento das larvas foi significativamente afetado pelas dietas oferecidas, oito larvas de C. cubana empuparam na dieta B. pilosa e duas de C. externa na dieta de S. oleraceus, sendo o maior numero de pupas formadas nas dietas com inflorescências para cada uma das espécies de crisopídeos. A dieta com ovos de A. kuehniella foi o único tratamento onde mais do 70% das larvas sobreviveram, empuparam e os adultos emergiram. A sobrevivência média dos adultos em todas as dietas com plantas espontâneas foi de cinco dias por tanto não houve oviposição. Na dieta de levedo e mel a sobrevivência foi superior aos 60 dias para as duas espécies de crisopídeos testadas, com oviposição total de 775,35 (±207,8) e 1108,12 (±106,8) ovos/fêmea para C. externa e C. cubana, respectivamente. A manutenção da vegetação espontânea na cultura da pimenta-malagueta favorece a presença de crisopídeos e reduz a predação intraguilda. O uso das inflorescências como alimento para larvas de C. externa e C. cubana favorece a sua sobrevivência e pode ser útil como alimento complementar na dieta destes predadores. Assim, a manutenção de plantas espontâneas no campo de cultivo pode incrementar a sobrevivência e o desenvolvimento destes inimigos naturais.
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Cálculo da eficiência na prestação de serviço usando o método de fronteira estocástica para a atividade de imunização e controle de pragas 2005-2008

Costa, Paulo Henrique Ventura Neves da 29 May 2009 (has links)
Submitted by Paulo Costa (paulohenriquecosta@phcfoco.com.br) on 2011-08-18T20:22:07Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Cálculo econométrico 20110812 1323 _2_.pdf: 899729 bytes, checksum: 93ce3239b2ca7df3af97567de1fe9f94 (MD5) / Approved for entry into archive by Vitor Souza (vitor.souza@fgv.br) on 2011-08-29T13:19:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Cálculo econométrico 20110812 1323 _2_.pdf: 899729 bytes, checksum: 93ce3239b2ca7df3af97567de1fe9f94 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-11-01T10:53:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Cálculo econométrico 20110812 1323 _2_.pdf: 899729 bytes, checksum: 93ce3239b2ca7df3af97567de1fe9f94 (MD5) Previous issue date: 2009-05-29 / The organizations lack of efficiency affects the long-term development of the whole economics. Regarding environmental health issues, greater coordination between public and private programs would increase the endemic control services globalization towards society. The lack of technology mastering (such as production; how to reach a consumer's preference; how to obtain scale profit; how to coordinate and motivate the involved public and how to strengthen the long-term institutions) generates losses up to 49% according to this rough calculation. In order to contribute with the above hypothesis and to encourage and promote the companies efficiency in this sector, this paper calculates the services efficiency through the stochastic frontier production method using data reports (2005-2008) on immunization and pest control activity. The production frontier collapsed in this meantime. The company age, focus on the leaders graduation and the profitability target variables were significant to the sample efficiency. / A falta de eficiência das organizações compromete no longo prazo o desenvolvimento de toda a economia. No caso do mercado de saúde ambiental, uma maior coordenação entre os programas públicos e privados aumentaria a universalização do serviço de controle de endemias para a sociedade. A falta do domínio da tecnologia (como produzir; como atender à preferência do consumidor; como obter ganho de escala; como coordenar e motivar os públicos envolvidos e como fortalecer as instituições de longo prazo) gera perdas de até 49% segundo esta estimativa. Para contribuir com a hipótese acima e para incentivar e promover a eficiência das empresas deste setor, este trabalho calcula a eficiência na prestação de serviço com o método de fronteira estocástica de produção com dados em painel (2005-2008) para a atividade de imunização e controle de pragas. A fronteira de produção retraiu-se neste período. As variáveis: idade da empresa, foco da formação do líder e meta de lucratividade mostram-se significativas para a eficiência da amostra.

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