CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Estudar o efeito do OECN e do 1.8 cineol, componentes do CrÃton nepetaefolius, planta do Nordeste usada na medicina popular para distÃrbios do trato gastrintestinal (TGI), sobre o comportamento motor do TGI de ratos Wistar. Para tanto,foram utilizados 121 animais machos, pesando entre 200 a 350g, distribuÃdos nos dois seguintes grupos de estudo: i) esvaziamento gÃstrico (EG), trÃnsito gastrintestinal (GI) de lÃquido e pressÃo arterial (PA) em ratos acordados, ii) complacÃncia gÃstrica, PA, pressÃo venosa central (PVC) e freqÃÃncia cardÃaca (FC) de ratos anestesiados. Foram avaliados, em 106 ratos acordados sob jejum e livre acesso à Ãgua por 24h, o efeito da injeÃÃo (0,2mL; e.v.) de OECN (3  g/Kg) e do 1.8 cineol (1, 3, 10 e 30 Âg/Kg) ou veÃculo (salina 0,9%) sobre o EG e o trÃnsito GI de lÃquido, bem como sobre a PA. Mediante gavagem, 1,5mL da refeiÃÃo-teste (vermelho de fenol - 0,5mg/mL em glicose a 5%) foi injetada no estÃmago. Depois de 10min,foram sacrificados os animais e, apÃs laparotomia, obstruÃmos o piloro, o cÃrdia e o Ãleo terminal. Removeu-se e dividiu-se o TGI em: estÃmago e segmentos consecutivos do intestino delgado (40% iniciais; 30% mediais e 30% terminais). A retenÃÃo fracional de vermelho fenol em cada segmento, medida por espectrofotometria à 560nm, permitiu o cÃlculo do EG e trÃnsito GI. Em um grupo separado de animais, a PA foi monitorada continuamente por meio de um sistema digital de aquisiÃÃo de dados durante 20min antes e 30min apÃs o tratamento com 1.8 cineol ou diluente. Comparado ao grupo controle, observou-se aumento da retenÃÃo gÃstrica (p<0,05) de 43,9Â34% (grupo controle salina) para 54,9Â4,7; 61,3Â3,3; 56,2Â1,7 e 55,8Â2,1% nos animais tratados com 1.8 cineol nas doses de 1, 3, 10 e 30  g/Kg, respectivamente sacrificados 10 min apÃs a gavagem. Observou-se tambÃm diminuiÃÃo significativa do trÃnsito gastrintestinal neste grupo de animais. O 1.8 cineol induziu diminuiÃÃo (p<0,05) da PA em relaÃÃo ao perÃodo basal (de 124Â5,2 para 119Â5,2; 100,2Â4,3; 99,8Â0,5 e 88,6Â2,7mmHg) nas doses de 1, 3, 10 e 30 Âg/Kg. Este efeito foi fugaz para a dose de 1 e 3 Âg/Kg em relaÃÃo ao perÃodo basal. Entretanto, nas doses de 10 e 30 Âg/Kg , os animais nÃo apresentaram recuperaÃÃo da PA. O tratamento com OECN aumentou significativamente a retenÃÃo gÃstrica (53,1Â2,4 vs 43,9Â3,4) enquanto diminui o trÃnsito gastrintestinal quando comparamos aos animais que receberam tratamento com salina. O prÃ-tratamento cirÃrgico por vagotomia subdiafragmÃtica, mas nÃo a esplancnotomia, inibiu os efeitos do 1.8 cineol sobre os EG e trÃnsito gastrintestinal de lÃquidos. Os estudos de complacÃncia gÃstrica foram conduzidos em 15 ratos anestesiados, sob jejum de 24h. As variaÃÃes do volume gÃstrico (VG), foram medidas por pletismografia, enquanto a PA, FC e PVC foram monitoradas continuamente por um sistema digital de aquisiÃÃo de dados. Observou-se diminuiÃÃo do VG, o qual foi significativo aos 30, 40, 50 e 60min apÃs o tratamento com 1.8 cineol (3Âg/Kg) quando comparado ao perÃdo basal (2,0Â0,1; 1,9Â0,1; 1,8Â0,1 e 1,7Â0,1mL, vs 2,1Â0,2mL â p<0,05). A PA apresentou queda significativa apÃs a administraÃÃo de 1.8 cineol (3Âg/Kg), mantendo-se assim durante os 60min de monitoraÃÃo (87,9Â7,7; 87,6Â7,1; 87,9Â6,4; 87,8Â5,7; 86,0Â5,5 e 87,7Â6,0mmHg, respectivamente vs 94,4Â6,2; mmHg), bem como a FC (366,3Â13,4; 361,7Â11,5; 357,3Â10,4; 353,0Â10,4; 348,3Â11,1 e 350,4Â13,7bpm respectivamente vs 395,2Â11,1bpm). Jà a PVC nÃo sofreu variaÃÃes significativas durante o tratamento. Em conclusÃo o OECN e o 1.8 cineol diminuem a motilidade gastrintestinal, retardando o EG e o trÃnsito GI de lÃquido em ratos acordados; diminui a complacÃncia gÃstrica em ratos anestesiados alÃm de apresentar efeitos hipotensor e bradicÃrdico; provavelmente por aÃÃo direta sobre a musculatura lisa gastrintestinal e vascular e modulaÃÃo do sistema nervoso parassimpÃtico / It was studied the effect of EOCN and 1,8 cineol, components of the Croton nepetaefolius - plant of North-East of Brasil, used in the popular medicine for riots of the gastrointestinal sistem - on the motor behavior of the gut of Wistar rats. We used 121 male animals, weighing 200-350g, distributed in the two following groups of study: effect of the OECN and the 1,8 cineol on: i) the gastric empyting (GE), the gastrointestinal (GI) transit of liquid and the arterial pressure (AP) in awake rats and ii) the gastric compliance, the AP, the central venous pressure (CVP) and the cardiac frequency (FC) of anaesthetized rats. It was evaluated, in 106 awake rats under starvation for 24h with free access to water, the effect of injection (0,2mL; i.v.) of OECN (3 Âg/Kg) or 1,8 cineol (1, 3, 10 and 30 Âg/Kg) or vehicle (saline 0.9%) on GE and GI transit of liquid, as well as on AP. A test meal (1,5mL of phenol red - 0,5mg/mL in glucose 5%) was injected in the stomach by gavagem. After 10min,it was sacrificed the animals and obstruct the pyloro, cardia and terminal Ãleo. It was removed and divide the gut in: stomach and consecutive segments of small intestine (40% proximal; medial 30% and 30% distal). After homogenization of these visceral portions, it was determined the absorbance of the samples at 560nm. The fracional dye retention in each segment allowed the calculation of the GE and GI transit. In a separate group of animals, the AP was monitored continuously by digital system of acquisition data during 20min before and 30min after the treatment with 1.8 cineol or diluente. Treatment with 1,8 cineol (3 Âg/Kg) was evaluated also in animals after sacrifice 20 or 30min after gavagem. Compared with control, the gastric retention increase (p<0,05) of 43,9Â34% for 54,9Â4,7; 61,3Â3,3; 56,2Â1,7 and 55.8Â2.1% in the treated (1.8 cineol 1, 3, 10 and 30 Âg/Kg, respectively) animals, sacrificed 10 min after gavage.It was also observed significant reduction on the GI transit in this group. The 1,8 cineol (1, 3, 10 and 30 Âg/Kg) induced reduction (p<0,05) of the AP (of 124Â5,2 for 119Â5,2; 100,2Â4,3; 99,8Â0,5 and 88,6Â2,7mmHg, respectivelly). This effect was, however, fugaz, for dose 1 and 3 Âg/Kg, however the doses of 10 and 30 Âg/Kg, the animals had not presented recovery of the AP. Treatment with EOCN also increases gastric retention (53,1Â2,4 versus 43,9Â3,4, p<0,05) while reduces GI transit. The surgical pre-treatment by sub-diafragmatic vagotomy, but not it splancnotomy, inhibited the 1,8 cineol effect on the GE and GI transit of liquid. ii) The effect of 1.8 cineol (1 or 3 Âg/Kg) on gastric compliance had been lead in 15 anaesthetized rats, under jejun of 24h. The variations of the gastric volume (GV), had been measured by plethysmography, while the AP, FC and CVP had been monitored continuously by a digital system of data acquisition. We observe reduction of the GV (p<0.05), which was significant on 30, 40, 50 and 60min after treatment (2,0Â0,1; 1,9Â0,1; 1,8Â0,1 and 1,7Â0,1mL, versus 2,1Â0,2mL) 1 or 3Âg/Kg of 1.8 cineole. The AP presented significant fall after the administration of 1.8 cineol, remaining thus during 60min of monitorization (87,9Â7,7; 87,6Â7,1; 87,9Â6,4; 87,8Â5,7; 86,0Â5,5 and 87,7Â6,0mmHg, respectively versus 94,4Â6,2; mmHg), as well as the FC (366,3Â13,4; 361,7Â11,5; 357,3Â10,4; 353,0Â10,4; 348,3Â11,1 and 350,4Â13,7bpm, respectively versus 395,2Â11,1bpm). The CVP did not suffer significant variations after treatment. In summary, it was observed the OECN and the 1,8 cineol treatments diminish the gut motility, delaying the GE and GI transit of liquid in awake rats; it reduces the gastric complaciance in anaesthetized rats besides presenting effect hipotensor and bradicardic; probably for direct action on the gastrointestinal and vascular smooth muscel and moduling the parassimpatic nervous system

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Biofilmes sÃo comunidades de cÃlulas microbianas incluÃdas em uma matriz de material polimÃrico constituÃdo principalmente por polissacarÃdeos que se formam sobre uma superfÃcie biÃtica ou abiÃtica. A busca de agentes fitoquÃmicos com potencial anti-biofilme tornou-se uma Ãrea ativa na pesquisa cientifica. Lectinas sÃo proteÃnas que se ligam a carboidratos de forma especÃfica e reversÃvel, sendo capazes de aglutinar cÃlulas e/ou precipitar glicoconjugados. Devido à sua capacidade de ligar e reconhecer carboidratos especÃficos, as lectinas podem ser uma potente ferramenta para estudos de biofilmes. Estas proteÃnas podem se ligar Ãs bactÃrias ou impedir a interaÃÃo com a superfÃcie e, conseqÃentemente, diminuir a formaÃÃo de biofilme. Outras classes de biomolÃculas com grande aplicabilidade nesse tipo de comunidades bacterianas sÃo os metabÃlitos secundÃrios isolados de tecidos vegetais. A classe dos diterpenos, substancias bastante comuns em plantas, corresponde a uma classe de molÃculas naturais com propriedades antimicrobianas bem estabelecidas. Com isso, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antibacteriana âin vitroâ de lectinas vegetais e do diterpeno casbano (DC), um metabÃlito secundÃrio isolado de Croton nepetaefolius, uma planta nativa do Nordeste brasileiro, contra diferentes microrganismos patogÃnicos. A concentraÃÃo mÃnima inibitÃria do crescimento planctÃnico foi realizado pela tÃcnica padrÃo de microdiluiÃÃo determinada atravÃs da densidade Ãptica a 640nm. Os ensaios de adesÃo inicial e formaÃÃo de biofilme foram realizados utilizando placas de microtitulaÃÃo de poliestireno com quantificaÃÃo da biomassa pelo mÃtodo de coloraÃÃo com cristal de violeta. Os ensaios foram realizados com diferentes concentraÃÃes dos produtos testados. Os resultados demonstraram que a lectina de Canavalia ensiformis apresentou um efeito antibacteriano, inibindo o crescimento planctÃnico de bactÃrias Gram- positivas. Outras lectinas apresentaram uma inibiÃÃo da adesÃo inicial, assim como na inibiÃÃo da formaÃÃo do biofilme de alguns microrganismos. O DC teve uma atividade biocida e bioestÃtica para a maioria das espÃcies testadas, sendo capaz de prejudicar tambÃm a formaÃÃo do biofilme. Em conclusÃo, estes resultados mostraram que as lectinas e diterpeno casbano, importantes classes de produtos naturais, podem desempenhar atividade antibacteriana promissora, sugerindo um possÃvel potencial terapÃutico para o tratamento farmacolÃgico de infecÃÃes associadas a diferentes agentes infecciosos. / Biofilms are communities of microbial cells embedded in a matrix of polymeric material consists mainly of polysaccharides that form on biotic or abiotic surface. The search for phytochemicals agents with potential anti-biofilm became an active area in scientific research. Lectins are proteins that bind carbohydrates of form specifically and reversibly, being able to agglutinate and precipitate cells and/or glycoconjugates. Due to their capacity to bind and recognize specific carbohydrates, lectins can be a potent toolin biofilm studies. These proteins can bind to the bacteria or prevent the interaction with the surface and consequently decrease biofilm formation. Other classes of biomolecules with applicability in this type of bacterial communities are the secondary metabolites isolated from plant tissues. The class of diterpenes, substances very common in plants, corresponds to a class of natural molecules with antimicrobial properties well established. T hus, the present study was to evaluate the antibacterial activity "in vitro" of plant lectins and diterpene casbano(CD), a secondary metabolite isolated from Croton nepetaefolius, aplant native to northeastern Brazil, against different pathogens microorganisms. The minimum inhibitory concentration, MIC, of planktonic growth was made by the standard techinique of microdilution determined by optical density at 640nm. Analisys of initial adhesion and biofilm formation were performed using polystyrene microtiter plates with quantification of biomass by the method of staining with crystal violet. The tests were performed with different concentrations of the products tested. The results showed that the lectin from Canavalia ensiformis had an antibacterial effect, inhibiting the planktonic growth of gram-positive bacteria. Other lectins showed an inhibition of initial adhesion and an inhibition of biofilm formation of some microorganisms. The CD had a biocidal activity and biostatic for most species tested, being able to affect also the formation of biofilm. In conclusion, these results showed that the lectins and casbane diterpene have a promising antibacterial activity, suggesting a possible application therapeutic for pharmacological treatment of infections associated with different infectious agents.

CARNEIRO, Victor Alves. Efeito do metabólito bioativo e de lectinas vegetais sobre o crescimento de micro-organismos patogênicos. 2011. 144 f. Tese (Doutorado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2011. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-07-28T14:20:26Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_vacarneiro.pdf: 5022871 bytes, checksum: 86384f0abc8798b9c8b5ca8856ae2d84 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T14:44:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_vacarneiro.pdf: 5022871 bytes, checksum: 86384f0abc8798b9c8b5ca8856ae2d84 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T14:44:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_vacarneiro.pdf: 5022871 bytes, checksum: 86384f0abc8798b9c8b5ca8856ae2d84 (MD5) Previous issue date: 2011 / Biofilms are communities of microbial cells embedded in a matrix of polymeric material consists mainly of polysaccharides that form on biotic or abiotic surface. The search for phytochemicals agents with potential anti-biofilm became an active area in scientific research. Lectins are proteins that bind carbohydrates of form specifically and reversibly, being able to agglutinate and precipitate cells and/or glycoconjugates. Due to their capacity to bind and recognize specific carbohydrates, lectins can be a potent toolin biofilm studies. These proteins can bind to the bacteria or prevent the interaction with the surface and consequently decrease biofilm formation. Other classes of biomolecules with applicability in this type of bacterial communities are the secondary metabolites isolated from plant tissues. The class of diterpenes, substances very common in plants, corresponds to a class of natural molecules with antimicrobial properties well established. T hus, the present study was to evaluate the antibacterial activity "in vitro" of plant lectins and diterpene casbano(CD), a secondary metabolite isolated from Croton nepetaefolius, aplant native to northeastern Brazil, against different pathogens microorganisms. The minimum inhibitory concentration, MIC, of planktonic growth was made by the standard techinique of microdilution determined by optical density at 640nm. Analisys of initial adhesion and biofilm formation were performed using polystyrene microtiter plates with quantification of biomass by the method of staining with crystal violet. The tests were performed with different concentrations of the products tested. The results showed that the lectin from Canavalia ensiformis had an antibacterial effect, inhibiting the planktonic growth of gram-positive bacteria. Other lectins showed an inhibition of initial adhesion and an inhibition of biofilm formation of some microorganisms. The CD had a biocidal activity and biostatic for most species tested, being able to affect also the formation of biofilm. In conclusion, these results showed that the lectins and casbane diterpene have a promising antibacterial activity, suggesting a possible application therapeutic for pharmacological treatment of infections associated with different infectious agents. / Biofilmes são comunidades de células microbianas incluídas em uma matriz de material polimérico constituído principalmente por polissacarídeos que se formam sobre uma superfície biótica ou abiótica. A busca de agentes fitoquímicos com potencial anti-biofilme tornou-se uma área ativa na pesquisa cientifica. Lectinas são proteínas que se ligam a carboidratos de forma específica e reversível, sendo capazes de aglutinar células e/ou precipitar glicoconjugados. Devido à sua capacidade de ligar e reconhecer carboidratos específicos, as lectinas podem ser uma potente ferramenta para estudos de biofilmes. Estas proteínas podem se ligar às bactérias ou impedir a interação com a superfície e, conseqüentemente, diminuir a formação de biofilme. Outras classes de biomoléculas com grande aplicabilidade nesse tipo de comunidades bacterianas são os metabólitos secundários isolados de tecidos vegetais. A classe dos diterpenos, substancias bastante comuns em plantas, corresponde a uma classe de moléculas naturais com propriedades antimicrobianas bem estabelecidas. Com isso, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antibacteriana “in vitro” de lectinas vegetais e do diterpeno casbano (DC), um metabólito secundário isolado de Croton nepetaefolius, uma planta nativa do Nordeste brasileiro, contra diferentes microrganismos patogênicos. A concentração mínima inibitória do crescimento planctônico foi realizado pela técnica padrão de microdiluição determinada através da densidade óptica a 640nm. Os ensaios de adesão inicial e formação de biofilme foram realizados utilizando placas de microtitulação de poliestireno com quantificação da biomassa pelo método de coloração com cristal de violeta. Os ensaios foram realizados com diferentes concentrações dos produtos testados. Os resultados demonstraram que a lectina de Canavalia ensiformis apresentou um efeito antibacteriano, inibindo o crescimento planctônico de bactérias Gram- positivas. Outras lectinas apresentaram uma inibição da adesão inicial, assim como na inibição da formação do biofilme de alguns microrganismos. O DC teve uma atividade biocida e bioestática para a maioria das espécies testadas, sendo capaz de prejudicar também a formação do biofilme. Em conclusão, estes resultados mostraram que as lectinas e diterpeno casbano, importantes classes de produtos naturais, podem desempenhar atividade antibacteriana promissora, sugerindo um possível potencial terapêutico para o tratamento farmacológico de infecções associadas a diferentes agentes infecciosos.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Estudo farmacolÃgico do Ãleo essencial de Croton nepetaefolius Baill. sobre o mÃsculo liso traqueal e vascular e sobre as propriedades eletrofisiolÃgicas de neurÃnios fÃsicos de gÃnglio celÃaco. Pedro Jorge Caldas MagalhÃes, Tese de Doutorado em Farmacologia, UFC, 2002. Croton nepetaefolius Baill à um arbusto aromÃtico do Nordeste brasileiro, conhecido como âmarmeleiro sabiÃâ, utilizado na medicina popular como antiespasmÃdico e carminativo. Os principais constituintes do seu Ãleo essencial sÃo 1,8-cineol, metil-eugenol, xantoxilina e terpineol. Recentemente, demonstraram-se propriedades antiespasmÃdica intestinal, hipotensiva, antiinflamatÃria e analgÃsica para o Ãleo essencial do Croton nepetaefolius (OECN). Neste trabalho, caracterizamos os efeitos farmacolÃgicos do OECN sobre o mÃsculo liso respiratÃrio e vascular de rato e cobaio e sobre o funcionamento elÃtrico de neurÃnios de gÃnglio celÃaco de cobaio. Usamos preparaÃÃes in vitro de vasos sanguÃneos de ratos e cobaios machos (aorta e vasos mesentÃricos) e anÃis de traquÃia, mantidos em soluÃÃo nutridora, aerada, pH 7,4, a 37 oC, para registro isomÃtrico das contraÃÃes musculares. Usamos tambÃm gÃnglios celÃacos intactos de cobaios, mantidos em temperatura ambiente in vitro, para os registros eletrofisiolÃgicos pela tÃcnica do microeletrodo intracelular. In vivo, avaliamos as aÃÃes do OECN sobre a pressÃo arterial mÃdia e alguns parÃmetros cardÃacos, respiratÃrios e hematolÃgicos em ratos. O OECN (0,1 - 1000 microgrma/ml) relaxou o tÃnus basal (5 mM [K+]) e o tÃnus aumentado por K+ (60 mM) em traquÃia de cobaio, de maneira dependente de concentraÃÃo (CE50 de 4 e 63 micrograma/ml, respectivamente). Em tecidos de cobaios previamente sensibilizados, o OECN (300 e 600 micrograma/ml), reduziu a contraÃÃo induzida pela apresentaÃÃo do antÃgeno sensibilizante (ovalbumina). Na faixa de concentraÃÃo de 100 a 400 micrograma/ml, bloqueou as contraÃÃes induzidas por histamina e PGF2 alfa. O OECN inibiu as contraÃÃes induzidas por histamina, carbacol e KCl com CI50 na faixa de 100 - 130 micrograma/ml. Em aorta de rato e cobaio, relaxou a contraÃÃo induzida por 60 mM de K+ (CI50 de 32 e 200 micrograma/ml, respectivamente). Em rato, mas nÃo em cobaio, este relaxamento foi parcialmente inibido pela retirada do endotÃlio vascular ou pela adiÃÃo de 100 micrograma M de L-NAME. Em aorta de cobaio, o OECN inibiu as contraÃÃes independentes de Ca2+, induzidas por dibutirato de forbol e por K+ hiperosmolar na soluÃÃo nutridora. O OECN diminuiu preferencialmente a pressÃo arterial em ratos DOCA-sal do que em ratos nefrectomizados e, bloqueou mais potentemente as contraÃÃes induzidas pela fenilefrina em aorta de rato DOCA do que dos animais nefrectomizados. O OECN, metil-eugenol e terpineol, aumentam o fluxo de lÃquido pela circulaÃÃo mesentÃrica de rato, sendo este efeito parcialmente inibido pela presenÃa de L-NAME. Em nenhuma dessas preparaÃÃes o OECN produziu hiperpolarizaÃÃo do potencial transmembrana. Em neurÃnios fÃsicos de gÃnglio celÃaco de cobaio, o OECN diminuiu significativamente o aumento da excitabilidade produzido pela histamina sem alterar as propriedades passivas e ativas dos neurÃnios. Em conclusÃo, o OECN relaxa o mÃsculo liso das vias aÃreas, à um agente hipotensor e vasorelaxante e diminui a excitabilidade induzida por histamina em neurÃnios autonÃmicos. Seus efeitos sÃo, provavelmente, intracelulares ou mediados por proteÃna quinase C. / Croton nepetaefolius is an aromatic bush found in brazilian Northeast region, called âmarmeleiro sabiÃâ, and it is used in folk medicine as an antispasmodic and carminative agent. Its essential oil is comprised of 1,8-cineole, methyl-eugenol, xanthoxylin, terpineol and others constituents. Recent studies showed some pharmacological activities of the essential oil of Croton nepetaefolius (EOCN) as an intestinal antispasmodic, hypotensive, anti-inflammatory and analgesic agent. Our aim in this work was to evaluate the effects of EOCN on airway and vascular smooth muscle and also on autonomic neurons. We used in vitro models of rat and guinea-pig isolated vessels and guinea-pig tracheal rings for isometric recording of the smooth muscle contractions. Guinea-pig celiac ganglion, was used for intracellular microelectrode recording of electricophysiological signals. Moreover, mean arterial pressure, cardiovascular, respiratory and hematologic parameters were measured in vivo in rats. EOCN (0,1 â 1000 microgram/ml) relaxed basal and K+-increased guinea-pig tracheal tonus (EC50 = 4 and 63 microgram/ml, respectively), in a concentratation-dependent manner. In ovalbumin-sensitized guinea-pig tissues, EOCN inhibited the antigen-induced contraction. EOCN (100 - 400 microgram/ml) blocked the histamine- and PGF2alpha -induced contractions. The contractions induced by histamine, carbacol and KCl were inhibited by EOCN with IC50s between 100-130 microgram/ml. In rat and guinea-pig aortic rings, EOCN relaxed the 60 mM K+-induced contractions (IC50 = 32 and 200 microgram/ml, respectively). Only in rat tissues, this EOCN-induced relaxation was partially inhibited by both L-NAME (100 microgram M) or endothelium lack. In guinea-pig aortic rings, EOCN inhibited the Ca2+-independent phorbol esther- and hyperosmotic K+- induced contractions. EOCN, preferably, diminished the mean arterial pressure and inhibited the aortic rings phenylephrine-induced contractions in DOCA-salt treated rats rather than uninephrectomized rats. Both EOCN, methyl-eugenol and terpineol increased the flow through rat mesenteric bed. This effect was partially blocked by L-NAME (50 microgram M). EOCN did not produce hyperpolarization of the transmembrane potential. In celiac ganglion phasic neurons, EOCN signicantly inhibited the histamine-induced increase of the neuronal excitability. In conclusion, EOCN is an airway smooth muscle relaxant, hypotensor and vasorelaxant agent, and it is a blocker of the stimulant histamine activity on autonomic neurons. Its effects are, probably, mediated by an intracellular action or protein C kinase modulation.

Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-06-15T16:49:37Z No. of bitstreams: 1 2002_tese_pjcmagalhães.pdf: 2851963 bytes, checksum: 107dcad6c267bffa4fdf3d8d86941aac (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-06-15T16:53:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2002_tese_pjcmagalhães.pdf: 2851963 bytes, checksum: 107dcad6c267bffa4fdf3d8d86941aac (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-15T16:53:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2002_tese_pjcmagalhães.pdf: 2851963 bytes, checksum: 107dcad6c267bffa4fdf3d8d86941aac (MD5) Previous issue date: 2002 / Croton nepetaefolius is an aromatic bush found in brazilian Northeast region, called “marmeleiro sabiá”, and it is used in folk medicine as an antispasmodic and carminative agent. Its essential oil is comprised of 1,8-cineole, methyl-eugenol, xanthoxylin, terpineol and others constituents. Recent studies showed some pharmacological activities of the essential oil of Croton nepetaefolius (EOCN) as an intestinal antispasmodic, hypotensive, anti-inflammatory and analgesic agent. Our aim in this work was to evaluate the effects of EOCN on airway and vascular smooth muscle and also on autonomic neurons. We used in vitro models of rat and guinea-pig isolated vessels and guinea-pig tracheal rings for isometric recording of the smooth muscle contractions. Guinea-pig celiac ganglion, was used for intracellular microelectrode recording of electricophysiological signals. Moreover, mean arterial pressure, cardiovascular, respiratory and hematologic parameters were measured in vivo in rats. EOCN (0,1 – 1000 microgram/ml) relaxed basal and K+-increased guinea-pig tracheal tonus (EC50 = 4 and 63 microgram/ml, respectively), in a concentratation-dependent manner. In ovalbumin-sensitized guinea-pig tissues, EOCN inhibited the antigen-induced contraction. EOCN (100 - 400 microgram/ml) blocked the histamine- and PGF2alpha -induced contractions. The contractions induced by histamine, carbacol and KCl were inhibited by EOCN with IC50s between 100-130 microgram/ml. In rat and guinea-pig aortic rings, EOCN relaxed the 60 mM K+-induced contractions (IC50 = 32 and 200 microgram/ml, respectively). Only in rat tissues, this EOCN-induced relaxation was partially inhibited by both L-NAME (100 microgram M) or endothelium lack. In guinea-pig aortic rings, EOCN inhibited the Ca2+-independent phorbol esther- and hyperosmotic K+- induced contractions. EOCN, preferably, diminished the mean arterial pressure and inhibited the aortic rings phenylephrine-induced contractions in DOCA-salt treated rats rather than uninephrectomized rats. Both EOCN, methyl-eugenol and terpineol increased the flow through rat mesenteric bed. This effect was partially blocked by L-NAME (50 microgram M). EOCN did not produce hyperpolarization of the transmembrane potential. In celiac ganglion phasic neurons, EOCN signicantly inhibited the histamine-induced increase of the neuronal excitability. In conclusion, EOCN is an airway smooth muscle relaxant, hypotensor and vasorelaxant agent, and it is a blocker of the stimulant histamine activity on autonomic neurons. Its effects are, probably, mediated by an intracellular action or protein C kinase modulation. / do farmacológico do óleo essencial de Croton nepetaefolius Baill. sobre o músculo liso traqueal e vascular e sobre as propriedades eletrofisiológicas de neurônios fásicos de gânglio celíaco. Pedro Jorge Caldas Magalhães, Tese de Doutorado em Farmacologia, UFC, 2002. Croton nepetaefolius Baill é um arbusto aromático do Nordeste brasileiro, conhecido como “marmeleiro sabiá”, utilizado na medicina popular como antiespasmódico e carminativo. Os principais constituintes do seu óleo essencial são 1,8-cineol, metil-eugenol, xantoxilina e terpineol. Recentemente, demonstraram-se propriedades antiespasmódica intestinal, hipotensiva, antiinflamatória e analgésica para o óleo essencial do Croton nepetaefolius (OECN). Neste trabalho, caracterizamos os efeitos farmacológicos do OECN sobre o músculo liso respiratório e vascular de rato e cobaio e sobre o funcionamento elétrico de neurônios de gânglio celíaco de cobaio. Usamos preparações in vitro de vasos sanguíneos de ratos e cobaios machos (aorta e vasos mesentéricos) e anéis de traquéia, mantidos em solução nutridora, aerada, pH 7,4, a 37 oC, para registro isométrico das contrações musculares. Usamos também gânglios celíacos intactos de cobaios, mantidos em temperatura ambiente in vitro, para os registros eletrofisiológicos pela técnica do microeletrodo intracelular. In vivo, avaliamos as ações do OECN sobre a pressão arterial média e alguns parâmetros cardíacos, respiratórios e hematológicos em ratos. O OECN (0,1 - 1000 microgrma/ml) relaxou o tônus basal (5 mM [K+]) e o tônus aumentado por K+ (60 mM) em traquéia de cobaio, de maneira dependente de concentração (CE50 de 4 e 63 micrograma/ml, respectivamente). Em tecidos de cobaios previamente sensibilizados, o OECN (300 e 600 micrograma/ml), reduziu a contração induzida pela apresentação do antígeno sensibilizante (ovalbumina). Na faixa de concentração de 100 a 400 micrograma/ml, bloqueou as contrações induzidas por histamina e PGF2 alfa. O OECN inibiu as contrações induzidas por histamina, carbacol e KCl com CI50 na faixa de 100 - 130 micrograma/ml. Em aorta de rato e cobaio, relaxou a contração induzida por 60 mM de K+ (CI50 de 32 e 200 micrograma/ml, respectivamente). Em rato, mas não em cobaio, este relaxamento foi parcialmente inibido pela retirada do endotélio vascular ou pela adição de 100 micrograma M de L-NAME. Em aorta de cobaio, o OECN inibiu as contrações independentes de Ca2+, induzidas por dibutirato de forbol e por K+ hiperosmolar na solução nutridora. O OECN diminuiu preferencialmente a pressão arterial em ratos DOCA-sal do que em ratos nefrectomizados e, bloqueou mais potentemente as contrações induzidas pela fenilefrina em aorta de rato DOCA do que dos animais nefrectomizados. O OECN, metil-eugenol e terpineol, aumentam o fluxo de líquido pela circulação mesentérica de rato, sendo este efeito parcialmente inibido pela presença de L-NAME. Em nenhuma dessas preparações o OECN produziu hiperpolarização do potencial transmembrana. Em neurônios fásicos de gânglio celíaco de cobaio, o OECN diminuiu significativamente o aumento da excitabilidade produzido pela histamina sem alterar as propriedades passivas e ativas dos neurônios. Em conclusão, o OECN relaxa o músculo liso das vias aéreas, é um agente hipotensor e vasorelaxante e diminui a excitabilidade induzida por histamina em neurônios autonômicos. Seus efeitos são, provavelmente, intracelulares ou mediados por proteína quinase C.