Made available in DSpace on 2016-06-02T19:32:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4598.pdf: 21229190 bytes, checksum: 17f7b7e0658d91da0cfc8b83c76230cd (MD5) Previous issue date: 2012-05-30 / Financiadora de Estudos e Projetos / Recent studies have shown that since 1990, there was an abrupt and substantial increase in the concentrations of phenanthrene in the aquatic environment, due mainly to the increase of activities including petroleum derivatives. This study determined the acute toxicity (LC50;96h) of phenanthrene to Prochilodus lineatus and investigated its effects on gills and kidneys of this species when exposed to sublethal concentrations of phenanthrene (corresponding to 1/100 to 1/50 and 1/5 of LC50;96h) for 24 and 96h, using biochemical, morphological, osmo-ionic, hematological and genetics biomarkers. After the experimental periods, blood samples were obtained via caudal punction for analysis of plasma, haematological and genetics variables, and samples of gills and kidneys were collected and fixed for morphological analysis or frozen for biochemical analysis. Phenanthrene can be considered moderately toxic to P. lineatus because the estimated LC50;96h was 1.013 mg L-1. Sublethal exposure to phenanthrene (200μg.L-1; LC50/5), especially after 96 hours, caused significant changes in almost all parameters: morphological, biochemical, genotoxic, osmo-ionic and heamatological. The osmo-ionic changes (increase of osmolality and ion Na+, and no variation of ion Cl-) suggested a osmo-ionic unbalance, which was confirmed by the results observed in the activity of enzymes involved in osmoregulation (NKA and AC) on gills and kidneys (increase of NKA in gills and kidneys, and increase of AC in kidneys), and also by the changes in the number of chloride cells mainly in kidneys, wich showed an increase. Furthermore, histopathological changes were found in the gills and kidneys.The responses of the heamatological variables evidenced an attempt to improve the oxygen uptake by the gills and inflammatory processes caused by the contaminant. In the enzymes of oxidative stress analyzed, both the inhibition in CAT and SOD activities, and the lack of changing in mechanisms of GPx, GSH and GST in the gills of these animals, led to an unbalance between the antioxidants and pro-oxidant levels and then, a lipid peroxidation. In conclusion, the changes observed in these animals (200μg.L-1) can have adverse affects on your health, once there will be an energetic deviation to restore the normal conditions of the organism, to detriment of other functions such as growth and reproduction, besides the possibility of exhaustion occurs in these animals if environment remain contaminated, thereby increasing the risk of disease and thus the mortality in these individuals. / Estudos recentes têm mostrado que, a partir de 1990, houve um aumento abrupto e substancial das concentrações de fenantreno no ambiente aquático, em consequência, principalmente, do aumento das atividades com derivados de petróleo. Neste estudo foi determinada a toxicidade aguda (CL50;96 h) do fenantreno para a espécie Prochilodus lineatus (Teleostei, Prochilodontidae) e investigado o seu efeito sobre as brânquias e rins posteriores desta espécie quando exposta a concentrações subletais (correspondentes a 1/100, 1/50 e 1/5 da CL50;96h) durante 24 e 96 h, utilizando biomarcadores bioquímicos, morfológicos, osmo-iônicos, hematológicos e genéticos. Após os períodos experimentais, amostras de sangue foram obtidas, via punção caudal, para análise de variáveis plasmáticas, hematológicas e genotóxicas, e amostras de brânquias e rins foram coletadas e fixadas para análises morfológicas ou congeladas para análise bioquímica. O fenantreno pode ser considerado moderadamente tóxico para o P. lineatus, pois a CL50;96h estimada foi 1,013 mg.L-1. A exposição subletal ao fenantreno na concentração de 200 μg.L-1 (CL50/5), principalmente no período de 96 horas, provocou alterações significativas nos parâmetros morfológicos, bioquímicos, genotóxicos, osmo-iônicos e hematológicos. As alterações osmo-iônicas (aumento da osmolalidade e do íon Na+, e íon Cl- sem variação) sugeriram um desequilíbrio osmo-iônico, o qual foi confirmado com os resultados observados na atividade das enzimas envolvidas na osmorregulação (NKA e AC) em brânquias e rins (aumento da NKA em brânquias e rins, e aumento da AC nos rins ), e com as alterações no número de células-cloreto principalmente nos rins, os quais apresentaram um aumento. Além disso, ocorreram alterações histopatológicas branquiais e renais. As respostas hematológicas evidenciaram uma tentativa do organismo de melhorar a captação de oxigênio nas brânquias, além de respostas a processos inflamatórios provocados pelo contaminante. Quanto as enzimas de estresse oxidativo analisadas, tanto a inibição nas enzimas CAT e SOD, quanto a não alteração dos mecanismos das GPx, GST e GSH nas brânquias destes animais, levaram a um desequilíbrio entre os níveis de antioxidantes e próoxidantes e então a uma peroxidação lipídica. Em conclusão, as alterações observadas podem provocar efeitos adversos à saúde dos animais deste grupo (200 μg.L-1) de modo que, ocorrerá um desvio energético para restaurar as condições normais do organismo em detrimento de outras funções como crescimento e reprodução, além da possibilidade de ocorrer exaustão nestes animais se o ambiente permanecer contaminado, aumentando assim o risco de doenças e consequentemente a mortalidade dos indivíduos.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:31:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 970.pdf: 592712 bytes, checksum: e6f35685131e115d74ca1fd6ef27e678 (MD5) Previous issue date: 2006-02-22 / Universidade Federal de Minas Gerais / "Curimbatá-pióa ", Prochilodus costatus (Valenciennes, 1850), is an endemic species from São Francisco river basin, with migratory habits, with important ecological role and of fishing importance. The present study aimed to assess the genetic variation in Prochilodus costatus in order to verify the occurrence of population genetic structure and to produce knowledge that contributes to the conservation of the species. Genetic variation was studied at three sites downstream of the Três Marias dam (MG) through six specific microsatellites loci, isolated and characterized in this study. The loci were amplified through PCR (polymerase chain reaction) and the individuals were genotyped in an automated sequencer. The statistical analyses were accomplished through the softwares GENEPOP 3.3 and FSTAT 2.9.3.2. Fish from the three sites had quite similar genetic diversity levels and they did not show genetic differentiation to each other, suggesting that P. costatus might represent a single reproductive unit in the high-middle São Francisco River. These findings are comparable to those previously obtained in the sister-species P. argenteus and should be important for futures management plans that seek the conservation of this species. / O curimbatá-pióa , Prochilodus costatus (Valenciennes, 1850), é uma espécie endêmica da bacia do Rio São Francisco, de hábitos migratórios, de importante função ecológica e importância pesqueira. O presente estudo propôs-se a estudar a variação genética em Prochilodus costatus para verificar a ocorrência de estruturação genética populacional e produzir conhecimentos que contribuam para a conservação da espécie. A variação genética foi estudada em três localidades à jusante da barragem de Três Marias (MG), utilizando-se seis loci de microssatélites específicos, isolados e caracterizados neste trabalho. Os loci foram amplificados via PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) e os indivíduos genotipados em seqüenciador automático. As análises estatísticas foram realizadas através dos programas computacionais GENEPOP 3.3 e FSTAT 2.9.3.2. Os peixes das três localidades apresentaram níveis de diversidade genética bastante similares, e não apresentaram diferenciação genética entre si, sugerindo que P. costatus possa representar uma simples unidade reprodutiva na região do alto-médio Rio São Francisco. Esses achados são comparáveis ao observado em estudos prévios na espécie-irmã P. argenteus e devem ser importantes para futuros planos de manejo que visem à conservação dessa espécie.

Todos os agrupamentos humanos que se organizam para o trabalho usam rios, lagos ou lagoas como depósitos para a decomposição de matéria indesejável. A contaminação do meio aquático por herbicidas e agrotóxicos derivados de práticas agrícolas se tornou, faz tempo, um problema de importância mundial. Precisamos de informações detalhadas sobre a bioquímica da intoxicação de peixes nativos para avaliarmos quais os efeitos de agrotóxicos sobre os processos bioquímicos que mantêm o ciclo de vida dos peixes em águas do Brasil. Organofosfatos, que são agrotóxicos de uso disseminado, podem interagir com as B-esterases butirilcolinesterase (EC 3.1.1.8) e carboxilesterase (EC 3.1.1.1) presentes no fígado e no plasma. Tanto a butirilcolinesterase (BChE) como a carboxilesterase (CarbE), se presentes em concentrações relativamente elevadas, agem como limpadores estequiométricos (scavengers moleculares) por ligarem o átomo de fósforo do grupo P=O com a hidroxila de uma serina presente nos seus sítios ativos. Em nossos resultados observamos que curimbatá possui a CarbE plasmática (IC50 74 ηM) mais sensível ao organofosfato metilparaoxon quando comparado ao pacu (IC50 691 ηM). Isolamos CarbE dos plasmas de curimbatá e pacu. Piavussu não possui uma atividade expressiva de CarbE no sangue, por isso não a isolamos. O tipo e a distribuição das esterases nos tecidos são particulares da espécie. Curimbatá tem alta atividade de CarbE no fígado (237,8 U.g-1) e no sangue (29,85 U.mL-1), pacu é dotado de alta atividade de BChE (134,0 U.g-1) e CarbE (149,6 U.g-1) no fígado, mas o piavussu conta apenas com a BChE do sangue (17,87 U.g-1). Este arsenal enzimático foi suficiente para proteger as AChE de cérebro, músculo e coração das três espécies e evitar a sua intoxicação leve por 0,2 mg metilparation/L. A abordagem cinético-bioquímica para conhecer a inibição das esterases presentes nos tecidos de diferentes espécies de peixes por / Every human group who organizes to work together uses rivers, lakes or ponds as places in which undesirable substances are deposited for decomposition. Contamination of the aquatic environment with herbicides and pesticides derived from agricultural practices has become a problem of global importance since a long ago. We need detailed information on the biochemistry of the poisoning of native fish to assess the effects of pesticides on the biochemical processes that maintain fishes life cycle in waters of Brazil. Organophosphates, which are widely used pesticides, can interact with the B-esterases butyrylcholinesterase (EC 3.1.1.8) and carboxylesterase (EC 3.1.1.1) in plasma and liver. Butyrylcholinesterase (BChE) and carboxylesterase (CarbE) in relatively high concentrations act as stoichiometric scavengers by linking the phosphorus atom of the P=O group with the serines hydroxyl they have in their active site. Our results show that the CarbE of curimbata plasma (IC50 74 ηm) is more sensitive to the organophosphate metilparaoxon than CarbE of pacu plasma (IC50 691 ηm). We isolated CarbE from curimbata and pacus plasma. Piavussu does not have an expressive activity of CarbE in plasma, so we did not isolate it. The type and distribution of esterases in tissues are peculiar to a species. Curimbata has high CarbE activity in the liver (237.8 U.g-1) and blood (29.85 U.mL-1), pacu is equipped with high activities of BChE (134.0 U.g-1) and CarbE (149.6 U.g-1) in the liver and piavussu relies only on BChE of blood (17.87 U.g-1). This enzymatic arsenal was sufficient to protect AChE from brain, muscle and heart of the three species and protect them against mild intoxication by methylparathion (0.2 mg / L). The biochemical kinetic approach that allows understanding of the inhibition of the esterases in tissues of different fish species is a good tool capable of anticipating the harmful consequences of these drugs.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseTAC.pdf: 758340 bytes, checksum: 75f2768e3c1fcebb7f4cfe61b0b5aade (MD5) Previous issue date: 2005-12-19 / The present study anlyzed the in vivo and in vitro responses of the myocardium obtained from Prochilodus lineatus acclimated at 25 ºC and tested at 25 and 35 ºC. The in vivo heart rate (fH bpm) was measured during acute transitions in temperature and subsequent return to 25º C. ECG recordings (lead DI of the electrocardiography) were obtained of electrodes at cardiac region. Recordings of the isometric contraction force (Fc %) and time-dependent parameters (TPT time to peak tension; THR time to half relaxation) were obtainded in vitro from ventricle rings electrically paced in response to stimulation frequency, temperature, extracelular Ca2+, adrenaline and ryanodine (blocker of the sarcoplasmic reticulum SR). The species showed a significant increase in the fH during the transition from 25 to 35º C, showing the importance of the chronotropic adjustments in response to thermal alterations and a great tolerance and adaptation to different thermal conditions. The species did show significant decreases in the twitch force (Fc) development by the ventricular strips during the increases of temperature. The addition of crescent Ca2+ concentrations to the medium evidenced the importance of the extracellular Ca2+ as showed by the Fc increases at both 25 and 35º C. Concomitant increases in in TPT and THR here recorded at 25 ºC while at 35º C, such increases were observed only in TPT. Adrenaline caused positive inotropism only at 35º C, without effect on time-dependent parameters. The post rest tension was conducted with and without 10 µM ryanodine in the medium. A significant post rest potentiation was recorded for at 25 and 35o C These post rest potentiations were inhibited by ryanodine. The impact of increases in the imposed contraction frequency caused a decline of the force and an increase in resting tension (RT) at both temperatures. In conclusion, an important fraction of the activator Ca2+ in P. lineatus seems to derive from intracellular stores (RS). However, this species also depends on extracellular sources of Ca2+, which provide more flexibility to modulate the contraction force. / O presente estudo teve por objetivo analisar as respostas in vivo (freqüência cardíaca) e in vitro (Força Fc) do miocárdio ventricular de curimbatá, Prochilodus lineatus, aclimatados a 25º C e testados a 25 e 35º C. Os registros de freqüência cardíaca (fH bpm) após elevação gradual da temperatura, e seu retorno subseqüente a 25º C, foram feitos através de implantes de eletrodos de ECG na região cardíaca. Adicionalmente foram feitos registros das respostas inotrópicas (Fc %) e dos parâmetros tempo-dependentes (TPT tempo para o pico de força e THR tempo para 50% do relaxamento) de anéis ventriculares estimulados eletricamente a diferentes freqüências em função da temperatura, concentração extracelular de Ca2+, adrenalina e rianodina (bloqueadora da função do reticulo sacoplasmático RS). In vivo, o aumento da temperatura elevou a fH de 49 bpm a 25º C para 115 bpm a 35º C, recuperando os valores iniciais com o retorno a 25º C. A elevação da temperatura desencadeou inotropismo negativo, sendo que o TPT e o THR variaram de maneira inversa a temperatura. A adição de concentrações crescentes Ca2+ (de 1,25 até 11,25 mM) ao banho causou aumento da Fc, demonstrando a importância do Ca2+ extracelular. A 25 ºC, tanto o TPT quanto o THR foram prolongados em função das elevações nas concentrações de Ca2+ enquanto que a 35º C, apenas o TPT aumentou. A adição de adrenalina só causou efeito inotrópico positivo a 35º C, sendo que os parâmetros tempodependentes não sofreram alterações em nenhuma das temperaturas experimentais. A análise da tensão pós-pausa, com e sem 10 µM de rianodina, revelou uma significante potenciação da força tanto a 25 quanto a 35º C, sendo esta abolida pela rianodina. Com o aumento da freqüência de estimulação, observou-se redução progressiva na Fc e significativo aumento da tensão de repouso (RT). O tratamento com rianodina provocou uma diminuição na Fc independente da temperatura. Os resultados revelaram que o Ca2+ responsável pela ativação dos miofilamentos deve derivar de pelo menos duas fontes: os espaços extracelulares (evidenciado pelo aumento de Fc durante incrementos na concentração de Ca2+ extracelular) e uma fração significativa fornecida por fontes internas, ou seja, o RS.

Todos os agrupamentos humanos que se organizam para o trabalho usam rios, lagos ou lagoas como depósitos para a decomposição de matéria indesejável. A contaminação do meio aquático por herbicidas e agrotóxicos derivados de práticas agrícolas se tornou, faz tempo, um problema de importância mundial. Precisamos de informações detalhadas sobre a bioquímica da intoxicação de peixes nativos para avaliarmos quais os efeitos de agrotóxicos sobre os processos bioquímicos que mantêm o ciclo de vida dos peixes em águas do Brasil. Organofosfatos, que são agrotóxicos de uso disseminado, podem interagir com as B-esterases butirilcolinesterase (EC 3.1.1.8) e carboxilesterase (EC 3.1.1.1) presentes no fígado e no plasma. Tanto a butirilcolinesterase (BChE) como a carboxilesterase (CarbE), se presentes em concentrações relativamente elevadas, agem como limpadores estequiométricos (scavengers moleculares) por ligarem o átomo de fósforo do grupo P=O com a hidroxila de uma serina presente nos seus sítios ativos. Em nossos resultados observamos que curimbatá possui a CarbE plasmática (IC50 74 ηM) mais sensível ao organofosfato metilparaoxon quando comparado ao pacu (IC50 691 ηM). Isolamos CarbE dos plasmas de curimbatá e pacu. Piavussu não possui uma atividade expressiva de CarbE no sangue, por isso não a isolamos. O tipo e a distribuição das esterases nos tecidos são particulares da espécie. Curimbatá tem alta atividade de CarbE no fígado (237,8 U.g-1) e no sangue (29,85 U.mL-1), pacu é dotado de alta atividade de BChE (134,0 U.g-1) e CarbE (149,6 U.g-1) no fígado, mas o piavussu conta apenas com a BChE do sangue (17,87 U.g-1). Este arsenal enzimático foi suficiente para proteger as AChE de cérebro, músculo e coração das três espécies e evitar a sua intoxicação leve por 0,2 mg metilparation/L. A abordagem cinético-bioquímica para conhecer a inibição das esterases presentes nos tecidos de diferentes espécies de peixes por / Every human group who organizes to work together uses rivers, lakes or ponds as places in which undesirable substances are deposited for decomposition. Contamination of the aquatic environment with herbicides and pesticides derived from agricultural practices has become a problem of global importance since a long ago. We need detailed information on the biochemistry of the poisoning of native fish to assess the effects of pesticides on the biochemical processes that maintain fishes life cycle in waters of Brazil. Organophosphates, which are widely used pesticides, can interact with the B-esterases butyrylcholinesterase (EC 3.1.1.8) and carboxylesterase (EC 3.1.1.1) in plasma and liver. Butyrylcholinesterase (BChE) and carboxylesterase (CarbE) in relatively high concentrations act as stoichiometric scavengers by linking the phosphorus atom of the P=O group with the serines hydroxyl they have in their active site. Our results show that the CarbE of curimbata plasma (IC50 74 ηm) is more sensitive to the organophosphate metilparaoxon than CarbE of pacu plasma (IC50 691 ηm). We isolated CarbE from curimbata and pacus plasma. Piavussu does not have an expressive activity of CarbE in plasma, so we did not isolate it. The type and distribution of esterases in tissues are peculiar to a species. Curimbata has high CarbE activity in the liver (237.8 U.g-1) and blood (29.85 U.mL-1), pacu is equipped with high activities of BChE (134.0 U.g-1) and CarbE (149.6 U.g-1) in the liver and piavussu relies only on BChE of blood (17.87 U.g-1). This enzymatic arsenal was sufficient to protect AChE from brain, muscle and heart of the three species and protect them against mild intoxication by methylparathion (0.2 mg / L). The biochemical kinetic approach that allows understanding of the inhibition of the esterases in tissues of different fish species is a good tool capable of anticipating the harmful consequences of these drugs.

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:48:51Z : No. of bitstreams: 1 000823249_20160226.pdf: 321622 bytes, checksum: 13d4329bc1bf2a468d357433e7c47727 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-26T14:03:50Z: 000823249_20160226.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-26T14:04:47Z : No. of bitstreams: 1 000823249.pdf: 1158257 bytes, checksum: 26b0b4dbe3120dc0624caa0518cc7cfb (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A intensificação do uso de recursos aquáticos tem produzido um grande impacto sobre as comunidades de peixes. Dentre as ações antrópicas mais impactantes destacamse a construção de barragens, a sobrepesca, o mau uso do solo na agricultura, o descarte de esgoto sem tratamento prévio nos rios, a construção de hidrovias e a introdução de espécies exóticas. O futuro das populações selvagens depende grandemente da variação genética das populações naturais. A variação genética dentro de uma espécie é um conceito fundamental para a genética aplicada à ecologia e diversos autores sugerem pelo menos três razões biológicas para a preservação da variabilidade genética das populações naturais como objetivos da biologia da conservação: a perda da variabilidade pode aumentar a probabilidade de extinção através de um declínio na fecundidade e viabilidade; populações com baixos níveis de variação genética, sobre as quais a seleção natural pode operar, podem ter oportunidades reduzidas para futuras adaptações frente a mudanças evolutivas; e a preservação da variabilidade genética pode ter papel chave na identificação de unidades evolutivas significativas para a formulação de programas de conservação. Assim, o estudo da variação genética é fundamental para o desenvolvimento de projetos de manejo sustentável. Um dos marcadores moleculares mais eficazes para o estudo populacional são os microssatélites e a região controladora da DNA mitocondrial (D-loop), que tem revelado diferenças significativas mesmo entre populações separadas por pequenas distâncias geográficas. Neste contexto, o presente estudo, teve como objetivo caracterizar a diversidade genética de populações de curimbatá coletados ao longo da Bacia do Prata (Prochilodus lineatus) e da Bacia Amazônica (Prochilodus nigricans) utilizando esses marcadores moleculares. Com base nos resultados obtidos, a ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-08-15Bitstream added on 2014-06-13T19:48:40Z : No. of bitstreams: 1 machado_mrf_me_jabo.pdf: 349142 bytes, checksum: 7ea843f05c11d971d486081daa92b71e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A espécie Prochilodus lineatus é de grande importância comercial na região dos rios Grande, Pardo e Mogi-Guaçu e tem como característica a formação de grandes cardumes, apta a desenvolver amplos deslocamentos migratórios. O presente trabalho objetivou avaliar, por meio das características morfométricas e etária, se os curimbatás (P. lineatus) dos diferentes estoques migradores e residentes constituem uma única população, havendo interação entre as sub-populações no período de piracema (migração reprodutiva). Utilizou-se um delineamento experimental inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 2, com quatro tipos de estoques (um residente e três migradores) e dois sexos (macho e fêmea) com trinta repetições, considerando cada peixe como unidade experimental. Foi observada variação de 80,19% para o primeiro componente principal e 8,09% do segundo componente principal fornecida pelas dez variáveis morfométricas dos estoques residentes e migradores. O estoque residente correspondeu aos maiores valores para todas as variáveis morfométricas. Houve sobreposição dos escores individuais das mesmas características entre os estoques migradores. Observou-se predominância de machos entre os estoques residentes e migrador I e II. As semelhanças morfométricas verificadas entre os estoques migradores indicam tratar-se de uma única população, com pequenas variações interpopulacional. / The species Prochilodus lineatus have a great commercial importance in the area of the Grande, Pardo and Mogi-Guaçu rivers, having as characteristics the formation of great shoal, able to develop wide migratory displacements. The present work focused to evaluate, by means of the morphometrics characteristics and age, if the curimbatás (P. lineatus) of the different stocks migratories and residents constitute an only population, having interaction among the sub-populations in the piracema period (reproductive migration). To compare the morphometrics values of the analyses, the using the plotting was completely randomized by 4 x 2 factorial scheme, having as factors four stocks (one resident and three migratories) and two genders (male and female) with thirty replicates, considering each fish as an experimental unit.Variation of 80.19% was observed for the first main component and 8.09% of the second main component supplied by the ten morphometrics variable of the resident and migratories stocks. The resident stock corresponded the biggest values for the whole morphometrics variable. There was superposition of individual scores of the same characteristics among the migratories stocks. Significant predominance of males was observed between the resident stocks and migratories I and II. The morphometrics similiarity verified among the migratories stocks, facilitates to suppose to be an only population, with small variations interpopulation.