Orientador: Juliana Campos Junqueira / Banca: Silvana Soléo Ferreira dos Santos / Banca: Renata de Oliveira Mattos Graner / Resumo: Estudos prévios demonstraram que algumas cepas de Lactobacillus podem inibir Streptococcus mutans. Assim, cepas de Lactobacillus pertencentes à microbiota oral residente de indivíduos saudáveis precisam ser investigadas como possíveis estratégias de prevenção para a cárie dentária e outras infecções bucais. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de cepas do gênero Lactobacillus isoladas de indivíduos livres de cárie sobre S. mutans utilizando modelos de estudo in vitro e in vivo. No estudo in vitro, trinta cepas de Lactobacillus isoladas da cavidade bucal foram avaliadas quanto à atividade antibacteriana contra S. mutans em crescimento planctônico. A seguir, as cinco cepas que apresentaram maior atividade antibacteriana foram selecionadas para o estudo dos efeitos antimicrobianos sobre biofilmes de S. mutans em discos de hidroxiapatita. Para estudo in vivo, foi selecionada a cepa de Lactobacillus com maior efeito inibitório sobre biofilme de S. mutans, procurando-se avaliar seus efeitos no desenvolvimento de cárie experimental em ratos. Os resultados demonstraram que a maioria das cepas de Lactobacillus testadas foi capaz de inibir as células de S. mutans em crescimento planctônico, alcançando percentual de redução de até 99 %. As cepas, com maior percentual de inibição, selecionadas para os testes em biofilme foram uma de L. fermentum e quatro de L. paracasei. Todas as cinco cepas foram capazes de inibir a formação do biofilme de S. mutans, entretanto diferenças estati... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Previous studies have demonstrated that certain strains of Lactobacillus can inhibit Streptococcus mutans. Thereby, Lactobacillus strains belonging to the oral microbiota resident from healthy subjects need to be investigated as possible strategies to prevent dental caries and other oral infections. The aim of this study was to evaluate the effect of Lactobacillus spp. strains isolated from caries-free subjects on S. mutans using study models in vitro and in vivo. In the in vitro study, thirty Lactobacillus strains recovered from the oral cavity of caries-free subjects were evaluated for antibacterial activity against S. mutans in planktonic culture. Next, the five strains that showed higher antibacterial activity were selected for the study of antimicrobial effects on biofilm of S. mutans formed on hydroxyapatite disks. For in vivo study, we selected the Lactobacillus strain with greater inhibitory effect on S. mutans biofilm, in order to evaluate its effects on the development of experimental caries in rats. The results showed that most of the tested Lactobacillus strains were able to inhibit S. mutans cells in planktonic culture, reaching a percentage reduction up to 99 %. The strains with higher percentage of inhibition selected for biofilm tests were one strain of L. fermentum and four of L. paracasei. All five of these strains were able to inhibit biofilm formation of S. mutans, however statistically significant differences were only observed for three strains. Thus, fo... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

O objetivo deste estudo foi comparar a concentração de flúor do biofilme dental de indivíduos residenteste em áreas com água fluoretada (AF) ou sal fluoretado (SF) e determinar o efeito do dentifrício fluoretado na concentração de flúor [F] do biofilme dental destes indivíduos. Dezesseis indivíduos resendentes em Montevidéu (SF) e dezesseis indivíduos residentes em Porto Alegre (AF) participaram deste estudo randomizado, cruzado e duplo-cego. Profilaxia dental e raspagem supragengivel foram realizaras antes de cada fase experimental. Durante as fases experimentais (14 dias/cada), os indivíduos escovaram os dentes, 2x/dia, com dentifrício fluoretado (DF) ou dentifrício não-fluoretado (DNF). As amostras de biofilme dental foram coletadas 8 horas após a última escovação. As análises de [F] no biofilme dental foram realizadas com um íon epecífico e as leituras foram convertidas em μgF¯/g de biofilme. Equações de estimativas generalizadas foram aplicadas para analisar a variância de medidas repetidas e as diferenças em cada desfecho. Uma maior [F] no biofilme foi observada na área com SF(2.69±0.10 IC 2.48–2.89) em comparação a área com AF (2.44±0.06 IC 2.32-2.57) quando do uso regular de DNF (p = 0.047). Entretanto, não houve diferença significativa na [F] no biofilme entre as áreas com SF (2.60±0.12 IC 2.37-2.83) e AF (2.81±0.10 CI 2.62-3.01) quando do uso de FD (p = 0.153). Adicionalmente, não foi observada diferença siginifcativa na [F] do biofilme quando DF e DNF foram usados nas áreas com SF (p = 0.294) e AF (p = 0.320). A maior [F] no biofilme observada na área com SF, sob uso regular DNF, pode não ter significância clínica, uma vez que ela desapareceu quando o DF foi usado. / The aim of this study was to compare the fluoride concentration in dental biofilm of subjects living in fluoridated- salt (FS) or water (FW) areas and to determine the effect of fluoride dentifrice on the fluoride concentration [F] in dental biofilm of these subjects. Sixteen individuals residing in Montevideo (FS) and sixteen individuals living in Porto Alegre (FW) participated in this randomized, double-blind, crossover study. Dental prophylaxis and scaling were performed prior to each experimental phase. During the experimental phases (14d/each) subjects brushed their teeth, 2x/day, with fluoridated dentifrice (FD) or non-fluoridated fluoride (NFD). Dental biofilm samples were collected 8 hours after the last toothbrushing. Analyses were performed with a fluoride ion-specific electrode and the reading was transformed into μgF¯/g biofilm. Generalized estimating equations were used to analyze the variance for repeated measures and the differences in each outcome. Higher biofilm [F] was found in FS (2.69±0.10 CI 2.48–2.89) compared to FW (2.44±0.06 CI 2.32-2.57) areas under regular use of NFD (p = 0.047). However, no significant differences were found on dental biofilm [F] between FW (2.60±0.12 CI 2.37-2.83) and FS (2.81±0.10 CI 2.62-3.01) areas under FD use (p = 0.153). Furthermore, no significant difference was observed in the biofilm [F] when FD or NFD were used in the FS (p = 0.294) and FW (p = 0.320) areas. The higher dental biofilm [F] was found in FS areas under NFD use may not have clinical significance once it disappeared when FD was used.

Embora diferentes estudos indiquem que há um aumento da resistência dos microrganismos aos agentes antimicrobianos prescritos, pouco se sabe a respeito da sua distribuição na cavidade oral. A presente dissertação está dividida em dois capítulos, representados por dois diferentes manuscritos. No manuscrito I, uma revisão sistemática foi realizada e teve como objetivo determinar quais genes de resistência a antimicrobianos foram pesquisados em saliva (S), no biofilme supragengival (SB) e canal radicular (RC). Os termos foram usados em várias combinações nas seguintes bases de dados eletrônicas (MEDLINE, EMBASE, ISI, SCOPUS e OPENGREY). Após seleção dos títulos e análise dos resumos, o texto integral de cada estudo foi obtido. Foram estabelecidos critérios de inclusão e exclusão. Dados epidemiológicos, características metodológicas e os resultados foram obtidos a partir dos estudos. Devido à falta de padronização da metodologia entre os trabalhos, não foi possível realizar uma meta-análise. Realizou-se análise descritiva dos dados. Um total de 151 títulos foram identificados para análise preliminar. Quarenta e nove resumos foram selecionados e 22 textos completos foram obtidos. Sete artigos contemplavam aos critérios de inclusão (S = 2; SB = 0 , e RC = 5). Vinte e seis diferentes genes-alvo foram avaliados. Os genes de resistência mais frequentemente descritos foram os relacionados às tetraciclinas e lactâmicos (5/7). Observa-se que poucos artigos foram selecionados pela estratégia de busca adotada para esta revisão sistemática. Este fato demonstra a falta de padronização nas metodologias dos estudos que utilizam técnicas moleculares para a detecção de genes de resistência bacteriana, tanto em condições de saúde ou doença. No manuscrito II, um estudo de observação clínica e laboratorial foi desenvolvido para detectar a presença de espécies-alvo de Prevotella e o gene cfxA/cfxA2 em amostras de saliva (S), biofilme supragengival (SB) e canais radiculares infectados (RC). Amostras pareadas de S, SB e RC foram coletadas de 42 indivíduos. Os pacientes foram divididos em três grupos: Grupo I - sem infecção aguda/crônica primária do canal radicular (n = 15), Grupo II - presença de infecção aguda primária no canal radicular (n = 12 ) e Grupo III - presença de infecção crônica no canal radicular (n = 15). Foram coletadas amostras de RC apenas para os Grupos II e III. Após o isolamento do DNA, a presença de Prevotella intermedia, Prevotella nigrescens, Prevotella tannerae e do gene cfxA/cfxA2 foi detectada através de PCR. Comparou-se a frequência das espécies e do gene de resistência, considerando diferentes ambientes e condições clínicas. A análise estatística foi realizada. Todas as amostras de S, SB e RC foram positivos para a detecção de DNA bacteriano. As taxas de detecção para espécies de Prevotella foram: S= 53,97%; SB=47,62%, e RC=34,56%. O gene cfxA não foi detectado simultaneamente em três ambientes do mesmo paciente. A presença ou ausência de sintomas espontâneos não influenciou as taxas de detecção para as espécies-alvo e para o gene cfxA/A2 em amostras de RC (teste exato de Fisher , P> 0,05). Espécies de Prevotella e o gene cfxA/cfxA2 foram frequentemente detectados na saliva, placa dental e amostras de canais radiculares. / Although different studies indicate that there is an increased resistance of microorganisms to antimicrobial agents prescribed in Endodontics, little is known about their distribution in the oral cavity. The present dissertation was divided into two chapters, represented by two different manuscripts. In manuscript I, a systematic review was conducted and aimed to determine which antimicrobial resistance genes were investigated in saliva (S), the supragingival biofilm (SB) and root canal (RC). The terms were used in various combinations in the following electronic databases (MEDLINE, EMBASE, ISI, SCOPUS and OPENGREY). After title screening and abstract analysis, the full text of each study was obtained. The relevance of each study to the question of interest was determined through inclusion and exclusion criteria. Epidemiologic data, methodological characteristics and results were collected from the studies. Due to lack of methodology standardization among the papers, it was not possible to perform a meta-analysis. Descriptive data analysis was performed. A total of 151 titles were identified for preliminary analysis. Forty-nine abstracts were selected, and full texts of 22 studies were obtained. Seven articles matched the inclusion criteria (S=2; SB= 0; and, RC=5). Twenty-six different targeted genes have been evaluated. The most frequently investigated groups of resistance genes were related to tetracycline and lactamics (5/7). Few articles in the literature fit in the search strategy adopted by this systematic review, demonstrating the lack of standardization in the methodologies of studies using molecular techniques for the detection of bacterial resistance genes to antibiotics in oral cavity, either in health or disease conditions. In the manuscript II, an observational clinical and laboratorial study was developed to identify the presence of targeted Prevotella species and the cfxA/cfxA2 gene in samples from saliva (S), supragingival biofilm (SB) and infected root canals (RC). Paired samples of S, SB and RC were collected from 42 subjects. Patients were divided into three groups: Group I - no acute or chronic root canal infection (n = 15); Group II - presence of acute root canal infection (n = 12), and Group III - presence of chronic root canal infection (n=15). RC samples were collected for Groups II and III. After DNA isolation, the presence of Prevotella intermedia, Prevotella nigrescens, Prevotella tannerae and the cfxA/cfxA2 gene was detected through gene-specific PCR. The frequency of the species and of the resistance was compared, considering different environments and clinical conditions. Statistical analysis was carried out. All samples from S, SB and RC were positive for the presence of bacteria. The overall detection rates for Prevotella species were: S = 53.97%; SB = 47.62%; and, RC = 34.56%. The cfxA gene was not detected simultaneously in the three environments from the same patient. The presence of absence of spontaneous symptoms had not influenced the detection rates for the targeted species and for the cfxA/A2 gene in RC samples (Fisher Exact Test, P>.05). Prevotella species and the gene cfxA/cfxA2 were frequently detected in saliva, dental plaque and root canal samples.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Over the past few years, the involvement between oral pathogens and vascular disease has been investigated, with growing attention to the pathogenesis and progression of atherosclerosis. Oral bacteria have been detected in atherosclerotic plaques at a variable frequency; however, the connection between oral health and vascular and oral bacterial profiles of these patients is not clearly established. The aim of this study was to evaluate the presence of oral bacteria DNA in the mouth and atherosclerotic plaques, in addition to assess the patientâs caries and periodontal disease history. Thirty samples of supragingival and subgingival plaque, saliva and atherosclerotic plaques of 13 patients with carotid stenosis or aortic aneurysm were evaluated, through Real Time Polymerase Chain Reaction, for the presence/absence of Streptococcus mutans, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis and Treponema denticola. For edentulous patients, the variables of supragingival and subgingival plaques were not considered. All patients were submitted to oral exams using the DMTF (decayed, missing and filled teeth) and PSR (Periodontal Screening and Recording) indexes for dental and periodontal evaluation, respectively, and histopathological analysis of the atherosclerotic plaques was performed. Most of the patients were edentulous (76.9%). Streptococcus mutans, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis and Treponema denticola were detected in 100.0%, 92.0%, 15.3% and 30.7% of the oral samples, respectively. Streptococcus mutans was the most prevalent targeted bacteria in atherosclerotic plaques (p<0,05), detected in 100% of the samples, followed by Prevotella intermedia (7.1%), and the vascular samples were negative for Porphyromonas gingivalis and Treponema denticola. There was a statistically significant difference (p<0,05) between the presence of Porphyromonas gingivalis and Treponema denticola in the oral cavity and vascular samples. In conclusion, Streptococcus mutans was found at a high frequency in oral and vascular samples, even in edentulous patients, and its presence in atherosclerotic plaques suggests the possible involvement of this bacteria with the disease progression. / Nos Ãltimos anos, a relaÃÃo entre patÃgenos orais e doenÃa vascular tem sido investigada, com crescente atenÃÃo para a etiopatogÃnese e progressÃo da aterosclerose. BactÃrias orais tÃm sido detectadas em placas aterosclerÃticas, com variÃvel frequÃncia, porÃm, a relaÃÃo entre saÃde bucal e perfis bacterianos vasculares e orais dos pacientes nÃo està claramente estabelecida. Foi objetivo deste estudo avaliar a presenÃa de DNA de bactÃrias orais na boca e placas aterosclerÃticas, alÃm de avaliar histÃrico de cÃrie e doenÃa periodontal dos pacientes. Trinta amostras de placa dental supragengival, subgengival, saliva, e placas aterosclerÃticas de 13 pacientes com estenose de carÃtida ou aneurisma de aorta foram avaliadas, atravÃs de ReaÃÃo em Cadeia da Polimerase em Tempo Real, para presenÃa/ausÃncia de Streptococcus mutans, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis e Treponema denticola. Para pacientes desdentados totais, nÃo foram consideradas as variÃveis de placa supragengival e subgengival. Todos os pacientes foram submetidos a exames de CPO-D (dentes permanentes cariados, perdidos e obturados) e PSR (registro periodontal simplificado) para avaliaÃÃo dentÃria e periodontal, respectivamente, bem como anÃlise histopatolÃgica das placas aterosclerÃticas. A maioria dos pacientes eram edÃntulos (76,9%). Streptococcus mutans, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis e Treponema denticola foram detectados em 100,0%, 92,0%, 15,3% e 30,7% das amostras orais, respectivamente. O micro-organismo mais prevalente em placas aterosclerÃticas foi o Streptococcus mutans (p<0,05), presente em 100,0% das amostras, seguido de Prevotella intermedia (7,1%), e as amostras vasculares foram negativas para Porphyromonas gingivalis e Treponema denticola. Observou-se diferenÃa estatisticamente significante (p<0,05) com relaÃÃo à presenÃa de Porphyromonas gingivalis e Treponema denticola em cavidade oral e amostra vascular. Em conclusÃo, Streptococcus mutans foi encontrado em alta frequÃncia em amostras orais e vasculares, mesmo de pacientes desdentados, e sua presenÃa em placas aterosclerÃticas sugere o possÃvel envolvimento desse patÃgeno na progressÃo da doenÃa.

O objetivo deste estudo foi comparar a concentração de flúor do biofilme dental de indivíduos residenteste em áreas com água fluoretada (AF) ou sal fluoretado (SF) e determinar o efeito do dentifrício fluoretado na concentração de flúor [F] do biofilme dental destes indivíduos. Dezesseis indivíduos resendentes em Montevidéu (SF) e dezesseis indivíduos residentes em Porto Alegre (AF) participaram deste estudo randomizado, cruzado e duplo-cego. Profilaxia dental e raspagem supragengivel foram realizaras antes de cada fase experimental. Durante as fases experimentais (14 dias/cada), os indivíduos escovaram os dentes, 2x/dia, com dentifrício fluoretado (DF) ou dentifrício não-fluoretado (DNF). As amostras de biofilme dental foram coletadas 8 horas após a última escovação. As análises de [F] no biofilme dental foram realizadas com um íon epecífico e as leituras foram convertidas em μgF¯/g de biofilme. Equações de estimativas generalizadas foram aplicadas para analisar a variância de medidas repetidas e as diferenças em cada desfecho. Uma maior [F] no biofilme foi observada na área com SF(2.69±0.10 IC 2.48–2.89) em comparação a área com AF (2.44±0.06 IC 2.32-2.57) quando do uso regular de DNF (p = 0.047). Entretanto, não houve diferença significativa na [F] no biofilme entre as áreas com SF (2.60±0.12 IC 2.37-2.83) e AF (2.81±0.10 CI 2.62-3.01) quando do uso de FD (p = 0.153). Adicionalmente, não foi observada diferença siginifcativa na [F] do biofilme quando DF e DNF foram usados nas áreas com SF (p = 0.294) e AF (p = 0.320). A maior [F] no biofilme observada na área com SF, sob uso regular DNF, pode não ter significância clínica, uma vez que ela desapareceu quando o DF foi usado. / The aim of this study was to compare the fluoride concentration in dental biofilm of subjects living in fluoridated- salt (FS) or water (FW) areas and to determine the effect of fluoride dentifrice on the fluoride concentration [F] in dental biofilm of these subjects. Sixteen individuals residing in Montevideo (FS) and sixteen individuals living in Porto Alegre (FW) participated in this randomized, double-blind, crossover study. Dental prophylaxis and scaling were performed prior to each experimental phase. During the experimental phases (14d/each) subjects brushed their teeth, 2x/day, with fluoridated dentifrice (FD) or non-fluoridated fluoride (NFD). Dental biofilm samples were collected 8 hours after the last toothbrushing. Analyses were performed with a fluoride ion-specific electrode and the reading was transformed into μgF¯/g biofilm. Generalized estimating equations were used to analyze the variance for repeated measures and the differences in each outcome. Higher biofilm [F] was found in FS (2.69±0.10 CI 2.48–2.89) compared to FW (2.44±0.06 CI 2.32-2.57) areas under regular use of NFD (p = 0.047). However, no significant differences were found on dental biofilm [F] between FW (2.60±0.12 CI 2.37-2.83) and FS (2.81±0.10 CI 2.62-3.01) areas under FD use (p = 0.153). Furthermore, no significant difference was observed in the biofilm [F] when FD or NFD were used in the FS (p = 0.294) and FW (p = 0.320) areas. The higher dental biofilm [F] was found in FS areas under NFD use may not have clinical significance once it disappeared when FD was used.

Embora diferentes estudos indiquem que há um aumento da resistência dos microrganismos aos agentes antimicrobianos prescritos, pouco se sabe a respeito da sua distribuição na cavidade oral. A presente dissertação está dividida em dois capítulos, representados por dois diferentes manuscritos. No manuscrito I, uma revisão sistemática foi realizada e teve como objetivo determinar quais genes de resistência a antimicrobianos foram pesquisados em saliva (S), no biofilme supragengival (SB) e canal radicular (RC). Os termos foram usados em várias combinações nas seguintes bases de dados eletrônicas (MEDLINE, EMBASE, ISI, SCOPUS e OPENGREY). Após seleção dos títulos e análise dos resumos, o texto integral de cada estudo foi obtido. Foram estabelecidos critérios de inclusão e exclusão. Dados epidemiológicos, características metodológicas e os resultados foram obtidos a partir dos estudos. Devido à falta de padronização da metodologia entre os trabalhos, não foi possível realizar uma meta-análise. Realizou-se análise descritiva dos dados. Um total de 151 títulos foram identificados para análise preliminar. Quarenta e nove resumos foram selecionados e 22 textos completos foram obtidos. Sete artigos contemplavam aos critérios de inclusão (S = 2; SB = 0 , e RC = 5). Vinte e seis diferentes genes-alvo foram avaliados. Os genes de resistência mais frequentemente descritos foram os relacionados às tetraciclinas e lactâmicos (5/7). Observa-se que poucos artigos foram selecionados pela estratégia de busca adotada para esta revisão sistemática. Este fato demonstra a falta de padronização nas metodologias dos estudos que utilizam técnicas moleculares para a detecção de genes de resistência bacteriana, tanto em condições de saúde ou doença. No manuscrito II, um estudo de observação clínica e laboratorial foi desenvolvido para detectar a presença de espécies-alvo de Prevotella e o gene cfxA/cfxA2 em amostras de saliva (S), biofilme supragengival (SB) e canais radiculares infectados (RC). Amostras pareadas de S, SB e RC foram coletadas de 42 indivíduos. Os pacientes foram divididos em três grupos: Grupo I - sem infecção aguda/crônica primária do canal radicular (n = 15), Grupo II - presença de infecção aguda primária no canal radicular (n = 12 ) e Grupo III - presença de infecção crônica no canal radicular (n = 15). Foram coletadas amostras de RC apenas para os Grupos II e III. Após o isolamento do DNA, a presença de Prevotella intermedia, Prevotella nigrescens, Prevotella tannerae e do gene cfxA/cfxA2 foi detectada através de PCR. Comparou-se a frequência das espécies e do gene de resistência, considerando diferentes ambientes e condições clínicas. A análise estatística foi realizada. Todas as amostras de S, SB e RC foram positivos para a detecção de DNA bacteriano. As taxas de detecção para espécies de Prevotella foram: S= 53,97%; SB=47,62%, e RC=34,56%. O gene cfxA não foi detectado simultaneamente em três ambientes do mesmo paciente. A presença ou ausência de sintomas espontâneos não influenciou as taxas de detecção para as espécies-alvo e para o gene cfxA/A2 em amostras de RC (teste exato de Fisher , P> 0,05). Espécies de Prevotella e o gene cfxA/cfxA2 foram frequentemente detectados na saliva, placa dental e amostras de canais radiculares. / Although different studies indicate that there is an increased resistance of microorganisms to antimicrobial agents prescribed in Endodontics, little is known about their distribution in the oral cavity. The present dissertation was divided into two chapters, represented by two different manuscripts. In manuscript I, a systematic review was conducted and aimed to determine which antimicrobial resistance genes were investigated in saliva (S), the supragingival biofilm (SB) and root canal (RC). The terms were used in various combinations in the following electronic databases (MEDLINE, EMBASE, ISI, SCOPUS and OPENGREY). After title screening and abstract analysis, the full text of each study was obtained. The relevance of each study to the question of interest was determined through inclusion and exclusion criteria. Epidemiologic data, methodological characteristics and results were collected from the studies. Due to lack of methodology standardization among the papers, it was not possible to perform a meta-analysis. Descriptive data analysis was performed. A total of 151 titles were identified for preliminary analysis. Forty-nine abstracts were selected, and full texts of 22 studies were obtained. Seven articles matched the inclusion criteria (S=2; SB= 0; and, RC=5). Twenty-six different targeted genes have been evaluated. The most frequently investigated groups of resistance genes were related to tetracycline and lactamics (5/7). Few articles in the literature fit in the search strategy adopted by this systematic review, demonstrating the lack of standardization in the methodologies of studies using molecular techniques for the detection of bacterial resistance genes to antibiotics in oral cavity, either in health or disease conditions. In the manuscript II, an observational clinical and laboratorial study was developed to identify the presence of targeted Prevotella species and the cfxA/cfxA2 gene in samples from saliva (S), supragingival biofilm (SB) and infected root canals (RC). Paired samples of S, SB and RC were collected from 42 subjects. Patients were divided into three groups: Group I - no acute or chronic root canal infection (n = 15); Group II - presence of acute root canal infection (n = 12), and Group III - presence of chronic root canal infection (n=15). RC samples were collected for Groups II and III. After DNA isolation, the presence of Prevotella intermedia, Prevotella nigrescens, Prevotella tannerae and the cfxA/cfxA2 gene was detected through gene-specific PCR. The frequency of the species and of the resistance was compared, considering different environments and clinical conditions. Statistical analysis was carried out. All samples from S, SB and RC were positive for the presence of bacteria. The overall detection rates for Prevotella species were: S = 53.97%; SB = 47.62%; and, RC = 34.56%. The cfxA gene was not detected simultaneously in the three environments from the same patient. The presence of absence of spontaneous symptoms had not influenced the detection rates for the targeted species and for the cfxA/A2 gene in RC samples (Fisher Exact Test, P>.05). Prevotella species and the gene cfxA/cfxA2 were frequently detected in saliva, dental plaque and root canal samples.

Orientadores: Marinês Nobre dos Santos Uchôa, Regina Célia Rocha Peres / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-17T19:37:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Frasseto_Fernanda_M.pdf: 2583603 bytes, checksum: 24da915e364fd5a9767488a99e21f068 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Este estudo teve como objetivos determinar a atividade da anidrase carbônica VI (ACVI) na saliva de pré-escolares com cárie e investigar a relação entre a experiência cárie (dmfs) e a atividade da ACVI, o fluxo salivar e pH do biofilme antes e após o bochecho com sacarose a 20% em pré-escolares. Trinta pré-escolares com idade entre 45,3 e 80,3 meses foram divididos em 2 grupos: grupo livres de cárie (LC) e grupo com cárie (C). Exames clínicos foram realizados por um examinador de acordo com os critérios da OMS + lesões iniciais de cárie. Em cada individuo, foi determinada a atividade da ACVI, o fluxo salivar e o pH do biofilme dental tanto antes quanto após o bochecho com sacarose. Os resultados foram submetidos aos testes de Wilcoxon, Mann-Whitney e correlação de Spearman (?=0,05). Os resultados mostraram que a atividade da ACVI antes do bochecho e a variação da atividade da ACVI foram maiores na saliva do grupo com cárie que do livres de cárie. Não houve diferença significativa entre os dois grupos após o bochecho. Porém, após o bochecho, a variação do pH do biofilme foi menor em ambos os grupos (p=0,0012 e p=0,0037 para C e LC, respectivamente). E, após o bochecho, houve um aumento significativo do fluxo salivar nos dois grupos (p=0,0003 e p=0,0037 para C e LC, respectivamente). Houve uma correlação negativa da variação entre a atividade da ACVI e a cárie (r=-0,501 e p=0,005). E uma correlação positiva entre a idade das crianças e a experiência de cárie (r=0,456 e p=0,011). Assim, os resultados sugerem que a variação da atividade da ACVI e a idade das crianças está associada com a cárie dentária em pré-escolares / Abstract: This study aimed to determine the activity of the carbonic anhydrase isoenzyme VI (CAVI) in saliva of preschool children with caries and investigate the relationship between caries and the salivary CAVI activity, salivary flow rate (SFR) and biofilm pH before and after a 20% sucrose mouthrinse in preschool children with caries. Thirty preschool children aging from 45.3 to 80.3 months were divided into two groups: caries-free group (CF) and caries group (C). Clinical examinations were conducted by one examiner (kappa=0.95) according to WHO criteria (dmfs) + early caries lesions. From each subject, CAVI activity, SFR and plaque pH were determined before and after a sucrose rinse. The results were submitted to Wilcoxon and Spearman correlation tests (?=0.05). The results showed that the pre-rinse CAVI activity and its variation were higher in saliva from caries children than from CF children. No difference was found between the two groups in the post- rinse salivary CAVI activity. After mouthrinse, the biofilm pH difference were lower in both groups (p=0.0012 and p=0.0037 for the C and CF group respectively). Also, after the sucrose rinse, SFR significantly increased in C and CF groups, (p=0.0003 and p=0.0037). The variation of salivary CA VI activity was negatively correlated with caries (r= -0.501 p=0.005). Child's age showed a positive correlation with caries (r=0.456 and p=0.011). These results suggest that variation of salivary CA VI activity and child's age are associated with dental caries of preschool children / Mestrado / Odontopediatria / Mestre em Odontologia

Orientadores: Cínthia Pereira Machado Tabchoury, Jaime Aparecido Cury / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-18T04:57:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Calvo_AnaFlaviaBissoto_M.pdf: 1396917 bytes, checksum: b8c5a3655f41edf445559e43973f005c (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Embora o efeito de flúor fosfato acidulado em gel (FFA-gel) na redução da cárie dental em dentes permanentes esteja baseado em evidência, prévio estudo in situ realizado sob baixo desafio cariogênico sugere que a aplicação profissional de FFA-gel por 4 minutos não promove maior resistência a desmineralização ao esmalte permanente do que 1 minuto, porém sob maior desafio cariogênico o resultado poderia ser diferente. Além disso, apesar dos dentes decíduos serem mais susceptíveis há cárie do que os permanentes não há estudos na literatura que comparem o tempo de aplicação de FFA-gel no esmalte decíduo. Desta forma, foi realizado um estudo in situ com o objetivo de avaliar o efeito do tempo de 1 e 4 minutos de aplicação profissional de FFA 1,23% F em gel na desmineralização de esmalte decíduo e permanente, assim como na formação e retenção de F no esmalte e a concentração de F no biofilme dental formado, numa condição de acúmulo de biofilme dental e alta freqüência de exposição à sacarose. Em três fases experimentais, 16 voluntários adultos utilizaram dispositivo palatino, no qual foram fixados 4 blocos de esmalte decíduo de um lado e 4 de permanente do outro. No início da primeira fase, os voluntários foram divididos aleatoriamente pelo tratamento que iriam iniciar o estudo: Controle negativo: nenhum tratamento; FFA-1 min: aplicação de FFA por 1 minuto, realizada no primeiro dia de cada fase experimental; FFA-4 min: aplicação de FFA por 4 minutos, sendo que ao final dos cruzamentos todos os voluntários foram submetidos a todos os tratamentos. Adicionalmente, um bloco decíduo e um permanente foram fixados, com cera, na região anterior do dispositivo para determinação de flúor (F) tipo fluoreto de cálcio ("CaF2") formado no esmalte e, após 30 minutos, uma tela plástica foi fixada no dispositivo de acrílico sobre os outros blocos dentais. Durante as fases experimentais, solução de sacarose a 20% foi gotejada extraoralmente sobre os blocos 8x/dia e os voluntários utilizaram dentifrício não fluoretado. Após 14 dias do início de cada fase, o biofilme formado foi coletado e analisado quanto à concentração de F no fluido e na parte sólida. Nos blocos de esmalte foi determinado o "CaF2" retido e a perda mineral foi avaliada pela dureza do esmalte dental seccionado transversalmente. Aplicação de FFA-gel reduziu a desmineralização em ambos os substratos dentais (p<0,05), independente do tempo de aplicação (p>0,05). A concentração de "CaF2" formado e retido foi significativamente maior nos grupos que receberam aplicação de FFA-gel (p<0,05), porém sem diferença entre os tempos de aplicação (p>0,05) tanto para esmalte decíduo quanto para o permanente. Os resultados do presente estudo sugerem que, mesmo sob um alto desafio cariogênico, um menor tempo de aplicação profissional de FFA-gel, isto é, 1 minuto, apresenta o mesmo efeito anticárie que o tempo de 4 minutos, tanto para o esmalte decíduo quanto para o permanente / Abstract: Although the effect of acidulated phosphate fluoride gel (APF-gel) on caries reduction in permanent teeth is based on evidence, previous in situ study, conducted under low cariogenic challenge suggests that the professional application of APF-gel for 4 minutes does not promote greater resistance to demineralization for permanent enamel than 1 minute, however under higher cariogenic challenge the result could be different. Moreover, although deciduous teeth are more susceptible to caries than permanent ones, there are no studies in the literature that compare the application time of APF in deciduous enamel. Thus, an in situ study was conducted with the aim of evaluating the effect of application time for 1 and 4 minutes of professional APF gel with 1.23% F on demineralization of deciduous and permanent enamel, as well as on F formed and retained on enamel and F concentration of dental biofilm formed, in a condition of dental biofilm accumulation and high frequency of sucrose exposure. In three experimental phases, 16 adult volunteers wore palatal appliances, containing 4 deciduous enamel slabs in one side and 4 permanent ones in the other side. At the beginning of the first phase, the volunteers were randomly assigned by the treatment they would start the study: Negative control: no treatment; APF-1 min: APF application for 1 min, performed on the first day of each experimental phase; APF-4 min: APF application for 4 min, and at the end of the experimental phases all volunteers had been submitted to all treatments. Additionally, a deciduous and a permanent slab were fixed with wax in anterior position on appliance for determination of fluorine (F) as calcium fluoride ("CaF2") formed on enamel and, after 30 minutes, a plastic mesh was fixed in the acrylic appliance over the other dental slabs. During the experimental phases, 20% sucrose solution was dripped extraorally over the slabs 8 x/day and the volunteers used non-fluoridated dentifrice. After 14 days of the beginning of each phase, dental biofilm formed was collected and analyzed with regard to F concentration in the fluid and the solids. On the slabs was determined "CaF2" retained on enamel and mineral loss was evaluated by enamel cross- sectional hardness. APF-gel application reduced demineralization in both dental substrates (p<0.05), independent of the application time (p>0.05). The concentration of "CaF2" formed and retained was significantly higher in the groups treated with APF-gel (p<0.05), however without difference between the application periods (p>0.05) either for deciduous or permanent enamel. The results of the present study suggest that, even under a high cariogenic challenge, a shorter time of professional application of APF-gel, that is, 1 min, presented the same anticaries effect as the time of 4 minutes, either in deciduous or permanent enamel / Mestrado / Cariologia / Mestre em Odontologia

Orientador: Jaime Aparecido Cury / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-05T09:01:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tenuta_LiviaMariaAndalo_D.pdf: 3073546 bytes, checksum: e24c70c215a3d40daed4235833fee35c (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O biofilme dental formado na presença de sacarose apresenta matriz com alta concentração de polissacarídeos extracelulares (PEC) insolúveis e baixa concentração de cálcio (Ca), fósforo inorgânico (Pi) e fluoreto (F). O objetivo deste estudo foi avaliar a concentração desses íons no fluido do biofilme, onde ocorrem as trocas iônicas entre o biofilme e o mineral do dente, bem como sua cinética após a ingestão de açúcar ou após a interrupção dos desafios cariogênicos. Dezesseis voluntários utilizaram em 3 fases cruzadas de 15 dias, um dispositivo palatino contendo 8 blocos de esmalte humano, que foram expostos 8 vezes ao dia a água destilada deionizada (ADD), solução de glicose a 10% + frutose a 10% (GF) ou solução de sacarose a 20% (S). Após 14 dias os tratamentos com ADD ou os carboidratos foram invertidos. As variáveis analisadas foram acidogenicidade do biofilme (pH), Ca, Pi e F no fluido e no biofilme total (após 10 h de jejum, 5 min após desafio acidogênico por solução de glicose a 20% ou após a inversão dos tratamentos), e PEC insolúveis e polissacarídeos intracelulares (IP) no biofilme total. O pH do biofilme em repouso foi significativamente menor e a concentração de IP significativamente maior (p<0,05) para os grupos GF e S em comparação com o grupo ADD. Após o desafio cariogênico, uma diminuição significante (p<0,05) no pH foi observada para todos os grupos, sem diferença entre o pH5min para os grupos GF e S (p>0,05). As concentrações de Ca, Pi e F no biofilme total foram menores para os grupos GF e S do que para o grupo ADD (p<0,05), mas esse efeito não foi observado no fluido. Após o desafio cariogênico, Ca aumentou e Pi diminuiu significativamente no fluido (p<0,05), mas o F não se alterou (p>0,05). Ca, Pi e F no biofilme total aumentaram significativamente 24 h após a suspensão do tratamento com GF (p<0,05), e o mesmo efeito foi observado para o Ca após a suspensão do tratamento S, mas essas alterações não foram observadas no fluido (p>0,05). A concentração de PEC insolúveis foi significativamente maior para o grupo S em relação aos demais grupos (p<0,05). Os resultados sugerem que as mudanças induzidas pela sacarose ou seus monossacarídeos constituintes no biofilme total não se refletem no fluido do biofilme / Abstract: Dental biofilm formed in presence of sucrose presents in its matrix high concentration of insoluble extracellular polysaccharides (EPS) and low concentration of calcium (Ca), inorganic phosphorus (Pi) and fluoride (F). However, in the fluid of the biofilm formed in presence of sucrose, either the concentration of these ions or their mobilization soon after sugar ingestion or time after the interruption of sugar exposure are unknown. Sixteen volunteers wore, for 3 crossover phases of 15 days, a palatal appliance with 8 enamel blocks, which were exposed 8 times/day to deionized water (DW), 10% glucose + 10% fructose (GF) or 20% sucrose (S) solutions. After 14 days, treatments with DW or the carbohydrates were inverted. Variables analyzed were biofilm acidogenicity (pH), Ca, Pi and F, in the fluid and in whole biofilm (after 10-h fasting, 5 min after an acidogenic challenge by 20% glucose, or after inversion of treatments), and insoluble EPS and intracellular polysaccharides (IP) in whole biofilm. Resting biofilm pH was significantly lower and IP was significantly higher (p<0.05) for GF and S groups in comparison with DW group. After the sugar challenge a significant decrease (p<0.05) in pH was observed for all groups, without significant differences between GF and S groups in the pH5min (p>0.05). Ca, Pi and F in the whole biofilm were lower in the groups GF and S than in DW (p<0.05) but this effect was not observed in the fluid. After the cariogenic challenge, Ca in the fluid increased and Pi decreased significantly (p<0.05), but F did not change (p>0.05). Ca, Pi and F in whole biofilm increased significantly 24 h after suspending the GF treatment, and Ca increased after suspending the S treatment (p<0.05), but this was not observed in the fluid (p>0.05). The insoluble EPS were significantly higher in the group S than in groups GF and DW (p<0.05). The findings suggest that the changes induced by sucrose or its component monosaccharides in the whole biofilm do not reflect in the biofilm fluid / Doutorado / Cariologia / Doutor em Odontologia

Orientador: Angelica Maria Bicudo Zeferino / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T19:04:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barros_CristianeNunes_M.pdf: 1355184 bytes, checksum: 6160066e2e0d4a19c1e6a6cb7836d550 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Os dois maiores problemas de Saúde Pública em Odontologia são a cárie dental e a doença periodontal, sendo a placa bacteriana, biofilme dental, a etiologia principal de tais doenças. O objetivo do estudo foi baseado no uso de duas linhas pedagógicas (Skinner e Vygotsky), verificando se a motivação estimularia a prevenção de placa bacteriana, provocando mudanças de hábitos bucais inadequados. A amostra contou com a participação de 111 escolares, de ambos os sexos, com idades de 06 a 08 anos, matriculados em uma Escola Municipal localizada na Zona Norte de São Paulo. Foram divididos em três grupos: A- baseado na linha pedagógica de Vygotsky; B- baseado na linha pedagógica de Skinner e C- controle. Como fatores essenciais para avaliação desta pesquisa, foram realizados três levantamentos epidemiológicos nos grupos. Para que as crianças participassem efetivamente do estudo, os pais/responsáveis aceitavam e autorizavam o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Foi aplicada a técnica de escovação de Fones e o índice de placa bacteriana foi estimado pelo método simplificado, Índice de Higiene Oral Simplificado - IHO-S. Com os resultados, notamos que a prevalência de placa bacteriana diminuiu devido à motivação obtida por meio das duas linhas pedagógicas e pela aquisição do kit de escovação / Abstract: The two biggest problems of Public Health in Odontology are the dental caries and the periodontal illness, being dental the bacterial plaque, biofilm, and the main etiology of such illnesses. The objective of the study was based on the use of two pedagogical lines (Skinner and Vygotsky), verifying if the motivation would stimulate the prevention of bacterial plaque, provoking changes of inadequate oral habits. The sample counted on the participation of 111 pertaining to school, the both sex, with ages from 06 to 08 years old, registered in a Municipal School located in the North Zone of Sao Paulo city. They had been divided in three groups: A- Based in the pedagogical line of Vygotsky; B- based in the pedagogical line of Skinner and C- control. As essential factors for evaluation of this research, three surveys had been carried through epidemiologists in the groups. So that the children participated effectively of the study, the responsible parents/accepted and authorized the Term of Free and Clarified Assent. The brushing technique of Phones was applied and the index of bacterial plaque was esteem by the simplified method, Oral Index of Hygiene Simplified - OHI-S. With the results, we noticed that the prevalence of bacterial plaque decreased due to motivation achieved by means of the two pedagogical lines and for the acquisition of the brushing kit / Mestrado / Saude da Criança e do Adolescente / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente