Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-06T12:22:38Z No. of bitstreams: 1 Elizabeth Sampaio de Medeiros.pdf: 1026668 bytes, checksum: c3f8468fa38781ce0ffddc9e51ab6c38 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T12:22:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Elizabeth Sampaio de Medeiros.pdf: 1026668 bytes, checksum: c3f8468fa38781ce0ffddc9e51ab6c38 (MD5) Previous issue date: 2008-02-25 / The goal of this research was to evaluate the occurrence and the sensitivity of Staphylococcus spp to antibiotics and disinfectants used in the control of bovine mastitis. Fifteen dairy farms located in the Metropolitan Recife regions (A), Agreste (B) and Zona de Mata (C), of the state of Pernambuco were studied. A total of 1,080 milk samples were collected and submitted to microbiological culture in order to isolate and identify Staphylococcus spp. To study the sensitivity and resistance of Staphylococcus spp to antimicrobials the diffusion disk technique with the following antibiotics was used: amoxiciline (10 mcg), ampiciline (10 mcg), azitromicine (15 mcg), cefquinome (30 mcg), cephalonium (30 mcg), ciprofloxacine (5mcg), cloxacillin (25 mcg), danofloxacine (10 mcg), enrofloxacine (5 mcg), eritromicine (15 mcg),florfenicol (30mcg), gentamicine (10 mcg), penicillin + novobiocine (10 mcg), sulfa (25 mcg) + trimetoprim (5 mcg),tobramicine (10 mcg) e tetraciclina (30 mcg) + neomicine (30 mcg) + bacitracine (10 mcg). For the in vitro study of sensitivity and resistance of S. aureus and Staphylococcus coagulase positive to the disinfectants, the following products were used: iodine (0.5%), chlorine (2.5%), quaternary ammonium (4%), lactic acid and chlorhexidine (2.0%). Of the 1,080 samples analyzed, 740 (68.5%) were positive and 340 (31.5%) negative. From the positive samples, Staphylococcus were isolated in 291 (39.3%). Of these, 170 (58.4%) were classified as coagulase negative Staphylococcus (SCN), 84(28.9%) as Staphylococcus aureus (S. aureus), and 37(12.7%) as coagulase positive Staphylococcus (SCP). The most efficient antibiotic in vitro was the combination between neomicine (98.4%), and bacitracine (99.3%) and tetracycline (89.7%) for regions A, B e C, respectively. The least efficient was ampicillin, which only showed a resistance of 56.5% to the isolates from region A, 72.8% for region B e 71.8% for region C. With respect to the disinfectants, iodine proved to be the most effective for S. aureus and SCP. The least effective was chlorine. Based on the results, it can be concluded with the epidemiological importance of Staphylococcus spp in subclinical mastitis in dairy cows in the regions chosen and the need for periodic evaluation of the antibiotics and disinfectants used to control mastitis. / Objetivou-se com esse trabalho avaliar a ocorrência e a sensibilidade de bactérias do gênero Staphylococcus spp frente aos antibióticos e desinfetantes utilizados no controle das mastites bovinas. Foram estudadas 15 propriedades situadas em municípios da Região Metropolitana do Recife (A), Agreste (B) e Zona da Mata (C) do estado de Pernambuco. Foram coletadas 1080 amostras de leite de vacas com mastite subclínica que foram submetidas ao exame microbiológico para isolamento e identificação dos Staphylococcus spp. Para o estudo da sensibilidade e resistência dos Staphylococcus spp aos antimicrobianos foi empregada a técnica de difusão em discos frente aos seguintes antibióticos: amoxicilina (10 mcg), ampicilina (10 mcg), azitromicina (15 mcg), cefquinome (30 mcg), cephalonium (30 mcg), ciprofloxacina (5mcg), cloxacilina (25 mcg), danofloxacina (10 mcg), enrofloxacina (5 mcg), eritromicina (15 mcg), florfenicol (30mcg), gentamicina (10 mcg), penicilina + novobiocina (10 mcg), sulfa (25 mcg) + trimetoprim (5 mcg), tobramicina (10 mcg) e tetraciclina (30 mcg) + neomicina (30 mcg) + bacitracina (10 mcg). Para o estudo “in vitro” da sensibilidade e resistência dos Staphylococcus aureus e Staphylococcus coagulase positiva aos desinfetantes, foram utilizados o iodo (0,57%), cloro (2,5%), amônia quaternária (4%), ácido lático e clorexidine (2,0%). Das 1080 amostras analisadas, 740 (68,5%) foram positivas ao exame microbiológico e 340 (31,5%) negativas. Das amostras positivas, isolaram-se bactérias do gênero Staphylococcus em 291 (39,3%). Dos 291 isolados, 170(58,4%) foram classificados como Staphylococcus coagulase negativa (SCN), 84(28,9%) como Staphylococcus aureus (S.aureus) e 37(12,7%) como Staphylococcus coagulase positiva (SCP). A melhor eficácia in vitro foi obtida pela associação entre neomicina + bacitracina + tetraciclina com percentuais de 98,4%, 99,3%, 89,7% para as regiões A, B e C respectivamente. O menos eficaz foi a ampicilina que apresentou 56,5% de resistência para os isolados da região A, 72,8% para a região B e 71,8% na região C. Com relação aos desinfetantes, observou-se que o iodo foi o mais eficaz para os S. aureus e SCP e o menos eficaz foi o cloro. Conclui-se com este estudo a importância epidemiológica dos Staphylococcus spp nas mastites subclínicas em vacas leiteiras nas regiões estudadas e a necessidade da avaliação periódica dos antibióticos e desinfetantes utilizados no controle da mastite.

Os MÃtodos da DiluiÃÃo de Uso (MDU) e da SuspensÃo da AOAC sÃo oficialmente aceitos no Brasil na avaliaÃÃo da eficiÃncia antimicrobiana de desinfetantes, para fim de registro comercial. O estudo teve como objetivo determinar a eficiÃncia antimicrobiana das soluÃÃes de hipoclorito de sÃdio nas concentraÃÃes 5, 100 e 200mg/L e de cloreto de benzalcÃnio a 77 e 10.000mg/L e avaliar os processos de higienizaÃÃo das mÃos e botas dos manipuladores e das caudas de lagosta, como matÃria-prima, em um Entreposto de Pescado na cidade de Fortaleza-CE. Os testes aplicados aos desinfetantes foram MDU (INCQS/POP No65.3210.007) que utiliza as cepas padrÃo Staphylococcus aureus, Salmonella Choleraesuis e Escherichia coli e SuspensÃo (AOAC 960.09) que testa os desinfetantes contra S. aureus e E.coli. Foi verificada a eficÃcia dos procedimentos de higienizaÃÃo das mÃos e botas dos manipuladores e das caudas de lagostas atravÃs da reduÃÃo decimal (RD) das bactÃrias heterotrÃficas cultivÃveis (BHC), de amostras colhidas durante o processamento. Procedeu-se a contagem bacteriana atravÃs do mÃtodo de Contagem PadrÃo em Placas (CPP) pelas tÃcnicas pour plate (mÃos e botas) e spreadplate (caudas), utilizando-se Ãgar Extrato Glicose Triptona (TGEA), e os resultados foram expressos em UFC/mÃo, UFC/cm2 e UFC/cauda. As soluÃÃes de hipoclorito de sÃdio foram reprovadas pelo MDU nas concentraÃÃes 5, 100 e 200 mg/L e aprovadas (RD > 5 ciclos logarÃtmicos) em pelo menos uma repetiÃÃo para o teste da SuspensÃo. As soluÃÃes do cloreto de benzalcÃnio foram aprovadas nos dois testes apresentando melhor eficiÃncia microbiolÃgica para o teste de suspensÃo (RD >5 ciclos logarÃtmicos) na concentraÃÃo 10.000 mg/L. As RD das mÃos e das botas dos manipuladores e das caudas de lagosta foram respectivamente < 0,8,< 0,6 e < 0,6 ciclo logarÃtmico. O MDU e o MÃtodo da SuspensÃo mostraram concordÃncia parcial na aprovaÃÃo antimicrobiana das soluÃÃes tendo esse Ãltimo maior nÃmero de aprovaÃÃes. A carga microbiana inicial definiu a boa eficiÃncia do processo de higienizaÃÃo para a matÃria-prima e mÃos e a ineficiÃncia para as botas no Entreposto de Pescado. As RD encontradas para as cepas padrÃo (Staphylococcus aureus e Escherichia coli), analisadas pelo mÃtodo da SuspensÃo testando hipoclorito de sÃdio e cloreto de benzalcÃnio foram maiores do que aquelas RD encontradas para BHC apÃs o processo de higienizaÃÃo das mÃos, botas e caudas de lagosta. / The AOAC use-dilution method (UDM) and suspension method are officially accepted in Brazil for the evaluation of the antibacterial efficiency of disinfectants when applying for product registration. The purpose of this study was to determine the antibacterial efficiency of solutions of sodium hypochlorite at 5, 100 and 200mg/L and benzalkonium chloride at 77 and 10,000mg/L, and to evaluate the procedures employed to disinfect raw material (lobster tails) and the hands and boots of handlers at a seafood processing facility in Fortaleza city. The disinfectants were tested with UDM (INCQS/POP No65.3210.007) using standard strains of Staphylococcus aureus, Salmonella Choleraesuis and Escherichia coli, and with the suspension method (AOAC 960.09) using S. aureus and E. coli. The hygienization procedures for hands, boots and raw material were evaluated by decimal reduction (DR) of aerobic mesophiles in samples collected during processing. The bacteria were quantified by standard plate count (pour platefor hands and boots; spread plate for tails) in Tryptone Glucose Extract agar, and results were expressed as CFU/hand, CFU/cm2 and CFU/tail. The sodium hypochlorite solutions failed the UDM test at all concentrations, but were approved (DR >5) in the suspension test for at least one repetition. The benzalkonium chloride solutions were approved with both methods, with the best performance observed for the suspension method (DR >5log) at 10.000 mg/L. DR values were <0.8 (hands), <0.6 (boots) and <0.6 (tails). The two methods (UDM and Suspension) were in partial agreement regarding the approval of solutions, but the latter method yielded a greater number of approvals. Due to differences in the initial bacterial load, the hygienization procedures were efficient for hands and lobster tails but inefficient for boots. DR values were significantly higher for standard strains (S. aureus and E. coli) tested with the suspension method using sodium hypochlorite and benzalkonium chloride than for aerobic mesophiles following the hygienization of hands, boots and lobster tails sampled at the seafood processing facility.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2016-09-23T14:52:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_francine_souza.pdf: 890441 bytes, checksum: 8e77c3780d75f3009137594794500fc2 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-09-23T18:43:00Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_francine_souza.pdf: 890441 bytes, checksum: 8e77c3780d75f3009137594794500fc2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-23T18:43:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_francine_souza.pdf: 890441 bytes, checksum: 8e77c3780d75f3009137594794500fc2 (MD5) Previous issue date: 2014-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O uso de produtos naturais com fins medicinais, para tratamento, cura e prevenção de doenças é uma das formas mais antigas de prática medicinal da humanidade. A própolis é uma substância resinosa natural, produzida por abelhas melíferas a partir de exsudatos coletados em diferentes partes das plantas, que vem sendo utilizada desde a antiguidade na medicina popular, tanto humana quanto veterinária, devido as suas propriedades terapêuticas. A atividade antimicrobiana é relatada em diversos estudos que utilizam como modelo experimental diferentes gêneros de vírus, bactérias, fungos e parasitas, porém são raros os estudos utilizando-a como desinfetante. Avaliou-se um extrato etanólico de própolis verde (EEPV), em comparação com um desinfetante comercial à base de amônia quaternária, quanto à capacidade desinfetante in situ em bebedouros utilizados para frangos de corte até 28 dias de idade das aves. O EEPV também foi avaliado, in vitro, contra as bactérias isoladas a partir de suabes dos bebedouros utilizados no experimento. Aos 28 dias de idade dos frangos, quando o desafio microbiano foi maior, a ação do EEPV como desinfetante foi semelhante à ação do desinfetante comercial a base de amônia quaternária. Nesta mesma idade das aves, o EEPV, assim como o desinfetante comercial, inibiu por completo o crescimento fúngico nos bebedouros. O EEPV apresentou ação in vitro contra as bactérias gram positivas Staphylococcus sp. coagulase negativa, S. aureus, Corynebacterium sp., isoladas a partir de suabe coletado dos bebedouros, além da bactéria gram negativa Escherichia coli. / The use of natural products for medicinal purposes for treatment, cure and prevention of diseases is one of the most antique forms of medical practice of humanity. Propolis is a natural resinous substance produced by honeybees from exudates collected of different parts of the plant and has been used as a therapeutic compound since antiquity in the popular medicine both human and veterinary due to its therapeutics properties. The antimicrobial activity is mentioned in various studies applying different genus of viruses, fungus, bacterias and parasites as a experimental model. An ethanolic extract from green propolis was evaluated as to the sanitizer capacity in situ over drinking fountains used for broilers in comparison with a commercial disinfectant based on quaternary ammonia. The extract was also evaluated in vitro against bacterias isolated from the drinking fountains used in the experiment. At 28 days of broiler age when the microbial challenge was greater the action of the extract as a disinfectant was similar to the action of the commercial disinfectant based on quaternary ammonium. In the same age of the birds both the propolis extract as well as the commercial disinfectant the fungal growth was completely inhibited in the drinking fountains. The extract presented action in vitro against gram positive bacteria Staphylococcus sp. negative coagulase, S. aureus, Corynebacterium sp. isolated from swabs collected from the drinking fountains and also the gram negative bacteria Escherichia coli.

Bactérias multirresistentes (MRs) pertencentes ao grupo ESKAPE (i.e., Enterococcus faecium resistente à vancomicina, VRE; Staphylococcus aureus resistente à meticilina, MRSA; Klebsiella spp., e Escherichia coli produtoras de &#946;-lactamases de amplo espectro; Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter spp. resistentes aos carbapenêmicos) são importantes patógenos de infecções relacionadas à assistência à saúde (IRAS), onde a sua endemicidade e prevalência tem sido decorrente da seleção de linhagens clonais. Embora, o fenótipo MR decorra da expressão de mecanismos mediados por genes intrínsecos e/ou adquiridos, o crescimento bacteriano na forma de biofilme contribui para um importante fenômeno fisiológico de resistência, o qual é inespecífico quanto ao substrato antimicrobiano. O presente estudo teve como objetivo avaliar a eficácia de agentes físicos e químicos contra biofilmes produzidos por clones de bactérias MRs de importância clínica e epidemiológica no Brasil. Cerdas de poliamida foram utilizadas como modelo de superfície de adesão para o crescimento de biofilmes, os quais foram monitorados por microscopia eletrônica de varredura (MEV). In vivo, o modelo de biofilme foi avaliado pela inserção das cerdas na proleg de larvas de Galleria mellonella, enquanto que, diferentes tratamentos foram aplicados para inibir a formação do biofilme. Adicionalmente, mediante ao ensaio de bioluminescência, o modelo de biofilme produzido pela cepa de P. aeruginosa PAO1/lecA::lux foi avaliado na presença de soluções hipertônicas de cloreto de sódio (NaCl). In vitro, soluções hipertônicas de cloreto de sódio (> 6%) utilizadas de maneira profilática, apresentaram efeito bacteriostático (CIM90= 1,7 M) contra biofilmes produzidos por todos os isolados analisados. Além disso, através do uso profilático de soluções hipertônicas de NaCl, foi possível visualizar a inibição da motilidade dos isolados. Por outro lado, os compostos quaternários de amônio (CQAs) cloreto de benzalcônio (CBA) e cloreto de cetilpiridínio (CCP) apresentaram efeito bactericida (CBM90= 256 &#181;g/mL) contra biofilmes previamente formados em 24h. A atividade de ambos os CQAs foi potencializada na presença de soluções salinas hipertônicas, como avaliado pela metodologia de checkerboard, tendo um efeito sinérgico contra E. coli (ST10, ST101) MCR-1 (&#8721;FIC= 0,5); parcialmente sinérgico contra A. baumannii OXA-23 (ST79), E. cloacae CTX-M-8 (ST131), E. faecium VRE (ST478) e K. pneumoniae KPC-2 (ST340) (&#8721;FIC= 0,75); e indiferente contra cepas de P. aeruginosa SPM-1 (ST277) e S. aureus MRSA (ST5). Adicionalmente, a CIM de carbapenêmicos, fluoroquinolonas e aminoglicosídeos contra biofilmes de bactérias Gram-negativas MRs foi potencializada na presença de solução salina hipertônica resultando em uma queda da CIM >=2. Finalmente, in vivo, para todas as espécies MRs estudadas, biofilmes formados em 08, 12 e 24h resultaram em 100% de morte das larvas de G. mellonella em até 96 horas pós-infecção. O mesmo comportamento foi observado para a cepa PAO1/lecA::lux, sendo possível detectar sinais intensos de bioluminescência nas larvas infectadas com os biofilmes. Entretanto, para os biofilmes previamente tratados com solução salina hipertônica, observou-se a diminuição dos sinais de bioluminescência em até 60%. Já para biofilmes formados em 24, 12 e 08h, o tratamento prévio em solução salina hipertônica e posteriormente com antibióticos resultou em um aumento de até 40, 70 e 80% da sobrevida de G. mellonella, respectivamente. / ESKAPE pathogens (ie, vancomycin-resistant (VRE) Enterococcus faecium; methicillin-resistant (MRSA) Staphylococcus aureus; extended spectrum &#946;-lactamase-producing Klebsiella spp., and Escherichia coli; Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, and Enterobacter spp. Resistant to carbapenems), represents an important group of multidrug-resistant (MDR) bacteria related to healthcare-associated infections (HAIs), whereas endemicity have been associated with selection and predominance of clones. Although the MR phenotype derives from the expression of mechanisms mediated by intrinsic and/or acquired genes, bacterial growth in the biofilm form contributes to an important physiological phenomenon of resistance, which is non-specific to the antimicrobial substrate. The present study aimed to evaluate the efficacy of physical and chemical agents against biofilms produced by clones of MDR bacteria of clinical and epidemiological importance, in Brazil. Polyamide bristles were used as adhesion surface model for the growth of biofilms, which were monitored by scanning electron microscopy (SEM). In vivo, the biofilm model was evaluated by the insertion of the bristles into the proleg of larvae of Galleria mellonella, while different treatments and physicochemical conditions were applied to inhibit biofilm formation. Additionally, the biofilm model produced by the P. aeruginosa PAO1/lecA::lux strain was evaluated in the presence of hypertonic solutions of sodium chloride (NaCl). In vitro, hypertonic solutions of sodium chloride presented a bacteriostatic effect (MIC90 = 1.7 M) against biofilm formation of all the isolates analyzed. Moreover, through the prophylactic use of hypertonic solutions of NaCl, it was possible to observe the inhibition of the motility of the isolates. On the other hand, the ammonium quaternary compounds (QACs) benzalkonium chloride (BAC) and cetylpyridinium chloride (CPC) had a bactericidal effect (CBM90 = 256 &#181;g / mL) against previously formed biofilms in 24h. The activity of both QACs was potentiated in the presence of hypertonic saline solutions, as evaluated by the checkerboard methodology, having a synergistic effect against E. coli (ST10, ST101) MCR-1 (&#8721;FIC = 0.5); (ST340) (&#8721;FIC = 0.75), E. faecium VRE (ST478) and K. pneumoniae KPC-2 (ST340), E. cloacae CTX-M-8 (ST131); and indifferent effect against strains of P. aeruginosa SPM-1 (ST277) and S. aureus MRSA (ST5). Furthermore, the MIC of carbapenems, fluoroquinolones and aminoglycosides against biofilms of MDR Gram-negative bacteria was potentiated in the presence of hypertonic saline solution resulting in a decrease in MIC >=2-fold. Finally, for all MDR species studied, biofilms formed at 08, 12 and 24h resulted in 100% death of G. mellonella larvae within 96h post-infection. In fact, the same behavior was observed for the strain PAO1/lecA::lux, and it is possible to detect intense bioluminescence signals in the larvae infected with biofilms. However, for biofilms previously treated with hypertonic saline solution, bioluminescence signs decreased by up to 60%. As for biofilms formed at 24, 12 and 8h, pretreatment in hypertonic saline solution and later with antibiotics resulted in an increase of up to 40, 70 and 80% of the survival of G. mellonella, respectively.

MONTEZUMA, Artamizia Maria Nogueira. Avaliação da eficiência antimicrobiana das soluções sanitizantes usadas na higienização de um entreposto de pescado. 2013. 85 f. : Tese (doutorado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Engenharia de pesca, Fortaleza-CE, 2013 / Submitted by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-07-25T15:06:41Z No. of bitstreams: 1 2013_tese_amnmontezuma.pdf: 1140714 bytes, checksum: 2798a7f6c9df24d378ae8a3e175f3f42 (MD5) / Approved for entry into archive by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-07-25T15:06:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_tese_amnmontezuma.pdf: 1140714 bytes, checksum: 2798a7f6c9df24d378ae8a3e175f3f42 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-25T15:06:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_tese_amnmontezuma.pdf: 1140714 bytes, checksum: 2798a7f6c9df24d378ae8a3e175f3f42 (MD5) Previous issue date: 2013 / The AOAC use-dilution method (UDM) and suspension method are officially accepted in Brazil for the evaluation of the antibacterial efficiency of disinfectants when applying for product registration. The purpose of this study was to determine the antibacterial efficiency of solutions of sodium hypochlorite at 5, 100 and 200mg/L and benzalkonium chloride at 77 and 10,000mg/L, and to evaluate the procedures employed to disinfect raw material (lobster tails) and the hands and boots of handlers at a seafood processing facility in Fortaleza city. The disinfectants were tested with UDM (INCQS/POP No65.3210.007) using standard strains of Staphylococcus aureus, Salmonella Choleraesuis and Escherichia coli, and with the suspension method (AOAC 960.09) using S. aureus and E. coli. The hygienization procedures for hands, boots and raw material were evaluated by decimal reduction (DR) of aerobic mesophiles in samples collected during processing. The bacteria were quantified by standard plate count (pour platefor hands and boots; spread plate for tails) in Tryptone Glucose Extract agar, and results were expressed as CFU/hand, CFU/cm2 and CFU/tail. The sodium hypochlorite solutions failed the UDM test at all concentrations, but were approved (DR >5) in the suspension test for at least one repetition. The benzalkonium chloride solutions were approved with both methods, with the best performance observed for the suspension method (DR >5log) at 10.000 mg/L. DR values were <0.8 (hands), <0.6 (boots) and <0.6 (tails). The two methods (UDM and Suspension) were in partial agreement regarding the approval of solutions, but the latter method yielded a greater number of approvals. Due to differences in the initial bacterial load, the hygienization procedures were efficient for hands and lobster tails but inefficient for boots. DR values were significantly higher for standard strains (S. aureus and E. coli) tested with the suspension method using sodium hypochlorite and benzalkonium chloride than for aerobic mesophiles following the hygienization of hands, boots and lobster tails sampled at the seafood processing facility. / Os Métodos da Diluição de Uso (MDU) e da Suspensão da AOAC são oficialmente aceitos no Brasil na avaliação da eficiência antimicrobiana de desinfetantes, para fim de registro comercial. O estudo teve como objetivo determinar a eficiência antimicrobiana das soluções de hipoclorito de sódio nas concentrações 5, 100 e 200mg/L e de cloreto de benzalcônio a 77 e 10.000mg/L e avaliar os processos de higienização das mãos e botas dos manipuladores e das caudas de lagosta, como matéria-prima, em um Entreposto de Pescado na cidade de Fortaleza-CE. Os testes aplicados aos desinfetantes foram MDU (INCQS/POP No65.3210.007) que utiliza as cepas padrão Staphylococcus aureus, Salmonella Choleraesuis e Escherichia coli e Suspensão (AOAC 960.09) que testa os desinfetantes contra S. aureus e E.coli. Foi verificada a eficácia dos procedimentos de higienização das mãos e botas dos manipuladores e das caudas de lagostas através da redução decimal (RD) das bactérias heterotróficas cultiváveis (BHC), de amostras colhidas durante o processamento. Procedeu-se a contagem bacteriana através do método de Contagem Padrão em Placas (CPP) pelas técnicas pour plate (mãos e botas) e spreadplate (caudas), utilizando-se Ágar Extrato Glicose Triptona (TGEA), e os resultados foram expressos em UFC/mão, UFC/cm2 e UFC/cauda. As soluções de hipoclorito de sódio foram reprovadas pelo MDU nas concentrações 5, 100 e 200 mg/L e aprovadas (RD > 5 ciclos logarítmicos) em pelo menos uma repetição para o teste da Suspensão. As soluções do cloreto de benzalcônio foram aprovadas nos dois testes apresentando melhor eficiência microbiológica para o teste de suspensão (RD >5 ciclos logarítmicos) na concentração 10.000 mg/L. As RD das mãos e das botas dos manipuladores e das caudas de lagosta foram respectivamente < 0,8,< 0,6 e < 0,6 ciclo logarítmico. O MDU e o Método da Suspensão mostraram concordância parcial na aprovação antimicrobiana das soluções tendo esse último maior número de aprovações. A carga microbiana inicial definiu a boa eficiência do processo de higienização para a matéria-prima e mãos e a ineficiência para as botas no Entreposto de Pescado. As RD encontradas para as cepas padrão (Staphylococcus aureus e Escherichia coli), analisadas pelo método da Suspensão testando hipoclorito de sódio e cloreto de benzalcônio foram maiores do que aquelas RD encontradas para BHC após o processo de higienização das mãos, botas e caudas de lagosta.

Bactérias multirresistentes (MRs) pertencentes ao grupo ESKAPE (i.e., Enterococcus faecium resistente à vancomicina, VRE; Staphylococcus aureus resistente à meticilina, MRSA; Klebsiella spp., e Escherichia coli produtoras de &#946;-lactamases de amplo espectro; Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter spp. resistentes aos carbapenêmicos) são importantes patógenos de infecções relacionadas à assistência à saúde (IRAS), onde a sua endemicidade e prevalência tem sido decorrente da seleção de linhagens clonais. Embora, o fenótipo MR decorra da expressão de mecanismos mediados por genes intrínsecos e/ou adquiridos, o crescimento bacteriano na forma de biofilme contribui para um importante fenômeno fisiológico de resistência, o qual é inespecífico quanto ao substrato antimicrobiano. O presente estudo teve como objetivo avaliar a eficácia de agentes físicos e químicos contra biofilmes produzidos por clones de bactérias MRs de importância clínica e epidemiológica no Brasil. Cerdas de poliamida foram utilizadas como modelo de superfície de adesão para o crescimento de biofilmes, os quais foram monitorados por microscopia eletrônica de varredura (MEV). In vivo, o modelo de biofilme foi avaliado pela inserção das cerdas na proleg de larvas de Galleria mellonella, enquanto que, diferentes tratamentos foram aplicados para inibir a formação do biofilme. Adicionalmente, mediante ao ensaio de bioluminescência, o modelo de biofilme produzido pela cepa de P. aeruginosa PAO1/lecA::lux foi avaliado na presença de soluções hipertônicas de cloreto de sódio (NaCl). In vitro, soluções hipertônicas de cloreto de sódio (> 6%) utilizadas de maneira profilática, apresentaram efeito bacteriostático (CIM90= 1,7 M) contra biofilmes produzidos por todos os isolados analisados. Além disso, através do uso profilático de soluções hipertônicas de NaCl, foi possível visualizar a inibição da motilidade dos isolados. Por outro lado, os compostos quaternários de amônio (CQAs) cloreto de benzalcônio (CBA) e cloreto de cetilpiridínio (CCP) apresentaram efeito bactericida (CBM90= 256 &#181;g/mL) contra biofilmes previamente formados em 24h. A atividade de ambos os CQAs foi potencializada na presença de soluções salinas hipertônicas, como avaliado pela metodologia de checkerboard, tendo um efeito sinérgico contra E. coli (ST10, ST101) MCR-1 (&#8721;FIC= 0,5); parcialmente sinérgico contra A. baumannii OXA-23 (ST79), E. cloacae CTX-M-8 (ST131), E. faecium VRE (ST478) e K. pneumoniae KPC-2 (ST340) (&#8721;FIC= 0,75); e indiferente contra cepas de P. aeruginosa SPM-1 (ST277) e S. aureus MRSA (ST5). Adicionalmente, a CIM de carbapenêmicos, fluoroquinolonas e aminoglicosídeos contra biofilmes de bactérias Gram-negativas MRs foi potencializada na presença de solução salina hipertônica resultando em uma queda da CIM >=2. Finalmente, in vivo, para todas as espécies MRs estudadas, biofilmes formados em 08, 12 e 24h resultaram em 100% de morte das larvas de G. mellonella em até 96 horas pós-infecção. O mesmo comportamento foi observado para a cepa PAO1/lecA::lux, sendo possível detectar sinais intensos de bioluminescência nas larvas infectadas com os biofilmes. Entretanto, para os biofilmes previamente tratados com solução salina hipertônica, observou-se a diminuição dos sinais de bioluminescência em até 60%. Já para biofilmes formados em 24, 12 e 08h, o tratamento prévio em solução salina hipertônica e posteriormente com antibióticos resultou em um aumento de até 40, 70 e 80% da sobrevida de G. mellonella, respectivamente. / ESKAPE pathogens (ie, vancomycin-resistant (VRE) Enterococcus faecium; methicillin-resistant (MRSA) Staphylococcus aureus; extended spectrum &#946;-lactamase-producing Klebsiella spp., and Escherichia coli; Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, and Enterobacter spp. Resistant to carbapenems), represents an important group of multidrug-resistant (MDR) bacteria related to healthcare-associated infections (HAIs), whereas endemicity have been associated with selection and predominance of clones. Although the MR phenotype derives from the expression of mechanisms mediated by intrinsic and/or acquired genes, bacterial growth in the biofilm form contributes to an important physiological phenomenon of resistance, which is non-specific to the antimicrobial substrate. The present study aimed to evaluate the efficacy of physical and chemical agents against biofilms produced by clones of MDR bacteria of clinical and epidemiological importance, in Brazil. Polyamide bristles were used as adhesion surface model for the growth of biofilms, which were monitored by scanning electron microscopy (SEM). In vivo, the biofilm model was evaluated by the insertion of the bristles into the proleg of larvae of Galleria mellonella, while different treatments and physicochemical conditions were applied to inhibit biofilm formation. Additionally, the biofilm model produced by the P. aeruginosa PAO1/lecA::lux strain was evaluated in the presence of hypertonic solutions of sodium chloride (NaCl). In vitro, hypertonic solutions of sodium chloride presented a bacteriostatic effect (MIC90 = 1.7 M) against biofilm formation of all the isolates analyzed. Moreover, through the prophylactic use of hypertonic solutions of NaCl, it was possible to observe the inhibition of the motility of the isolates. On the other hand, the ammonium quaternary compounds (QACs) benzalkonium chloride (BAC) and cetylpyridinium chloride (CPC) had a bactericidal effect (CBM90 = 256 &#181;g / mL) against previously formed biofilms in 24h. The activity of both QACs was potentiated in the presence of hypertonic saline solutions, as evaluated by the checkerboard methodology, having a synergistic effect against E. coli (ST10, ST101) MCR-1 (&#8721;FIC = 0.5); (ST340) (&#8721;FIC = 0.75), E. faecium VRE (ST478) and K. pneumoniae KPC-2 (ST340), E. cloacae CTX-M-8 (ST131); and indifferent effect against strains of P. aeruginosa SPM-1 (ST277) and S. aureus MRSA (ST5). Furthermore, the MIC of carbapenems, fluoroquinolones and aminoglycosides against biofilms of MDR Gram-negative bacteria was potentiated in the presence of hypertonic saline solution resulting in a decrease in MIC >=2-fold. Finally, for all MDR species studied, biofilms formed at 08, 12 and 24h resulted in 100% death of G. mellonella larvae within 96h post-infection. In fact, the same behavior was observed for the strain PAO1/lecA::lux, and it is possible to detect intense bioluminescence signals in the larvae infected with biofilms. However, for biofilms previously treated with hypertonic saline solution, bioluminescence signs decreased by up to 60%. As for biofilms formed at 24, 12 and 8h, pretreatment in hypertonic saline solution and later with antibiotics resulted in an increase of up to 40, 70 and 80% of the survival of G. mellonella, respectively.