Thesis (M.S.)--University of Michigan, 1975.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:44:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / Objetivos: Estudar em ratos albinos portadores de diabetes melito induzido por estreptozotocina: 1. Valores plasmáticos de homocisteína. 2. Concentrações plasmáticas de fator von Willlebrand. 3. Valores séricos de colesterol total e frações e triglicérides. 4. Possíveis correlações entre valores plasmáticos de homocisteína, fator von Willebrand, colesterol total e frações e triglicérides. Métodos: 35 ratos (rattus norvegicus albinus), machos, adultos (peso 180-200g), com glicemias aferidas foram randomizados em três grupos: 1. Controle (n=10) - não receberam droga ou veículo; 2. “Sham” (n=10) - receberam solução (tampão citrato 0.1M, pH4.5) veículo da estreptozotocina e 3. Diabetes (n=15) - receberam estreptozotocina (Sigma® ) para indução do diabetes melito (60 mg/kg de peso) em dose única; via intraperitoneal, diluída em 0.3mL de solução veículo. Foram considerados diabéticos todos os ratos cujos valores de glicemia foram iguais ou superiores a 250mg/dL. Após 08 semanas de indução do diabetes melito os ratos foram pesados, as glicemias aferidas e anestesiados com ionembutal (Sigma® ) via intraperitoneal (50mg/kg peso). Colheu-se sangue da artéria aorta abdominal para determinação dos valores de homocisteína plasmática total seguindo metodologia descrita, através de ensaio HPLC (Shimadzu® ). O sangue restante foi centrifugado e o soro e o plasma aliquotados e congelados até determinação do fator von Willebrand (técnica de ELISA) e concentrações séricas de glicose de jejum final, colesterol total e frações HDL-, LDL- e VLDL-colesterol, triglicérides e creatinina. Os resultados foram expressos em média + desvio padrão. Para análise estatística utilizou-se a análise de variância (ANOVA), seguido do teste de comparações múltiplas de Tukey e quando necessário o teste Brown Forsythe, seguido do procedimento de comparações múltiplas de Dunnett. Para a construção dos diagramas de dispersão das variáveis calculou-se os coeficientes de correlação de Pearson. Resultados: O modelo foi reprodutível em 100% dos animais. A média dos valores de glicemia inicial foi: 88,7±5,9mg/dL (controle); 88,9±8,2mg/dL (“sham”) e 85,1±5,2mg/dL (diabetes). Através da ANOVA não houve diferença das médias de glicemia inicial entre os grupos (p=0,24). A média da glicemia final foi: 85,0±7,1mg/dL (controle); 80,9±5,0mg/dL (”sham”) e 353,5±98,2mg/dL (diabetes). Houve diferença estatisticamente significante entre o grupo diabetes e os demais (p<0,01). A média das concentrações plasmáticas de homocisteína foi: 7,9±2,3µmol/L (controle); 8,6±2,2µmol/L (“sham”) e 6,1±1,3µmol/L (diabetes), com diferença entre os grupos (p<0,01). A média dos valores do fator von Willebrand foi 0,15±0,3U/L (controle), 0,16±0,2U/L (“sham”) e 0,18±0,4U/L (diabetes), com diferença entre os grupos (p<0,05). Os valores de colesterol total tiveram médias de: 123,9±40,8mg/dL (controle); 107,0±38,6mg/dL (“sham”) e 87,5±5,9mg/dL (diabetes). A ANOVA mostrou diferença entre os grupos (p<0,05). No grupo diabetes houve correlação inversa entre glicemia final e ganho de peso, homocisteína e colesterol total, homocisteína e fração VLDL-colesterol e homocisteína e triglicérides. Conclusões: Neste estudo, utilizando como modelo biológico o diabetes melito induzido por estreptozotocina em ratos albinos, nas condições de experimento apresentadas, torna-se lícito concluir: 1. Os ratos diabéticos apresentaram valores menores de homocisteína. 2. O grupo diabetes apresentou valores maiores de fator von Willebrand. 3. Houve correlação inversa entre homocisteína e colesterol total, homocisteína e fração VLDL-colesterol e homocisteína e triglicérides. 4. Não houve correlação entre glicemia final e homocisteína, glicemia final e fator von Willebrand e homocisteína e fator von Willebrand nos ratos diabéticos. 5. Houve correlação inversa entre ganho de peso e glicemia final nos ratos diabéticos. / Purpose: To determine plasma levels of homocysteine, von Willebrand factor, triglycerides and total cholesterol and fractions, in rats with diabetes induced by streptozotocin and evaluate possible correlations among these parameters. Methods: Adult male norvegicus albino rats (n=35), weigh (180-200g) were randomized into three groups: treated group (n=15), with diabetes induced by streptozotocin; sham group (n=10), treated with saline solution and normal control group (n=10), no treated. Initial fasting glucose was determinated before diabetes induction. Diabetes was induced by a single bolus intraperitoneal injection of streptozotocin, 60mg/kg/dose, diluted in citrate buffer (0.1M, pH4.5). Diabetes was confirmed by blood glucose levels ≥250mg/dL. Eight weeks after diabetes induction, animals were weighted and blood samples were collected from abdominal aorta for plasma levels of total homocystein, von Willebrand factor, final fasting glucose, total cholesterol and fractions (HDL-, LDL- and VLDL-cholesterol), triglycerides and creatinin. The results were expressed as the mean+SD. Data were analyzed using analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey test or Brown Forsythe test followed by Dunnett test. Pearson test was used to correlate the parameters. The level of significance was set at p<0.05. Results: Disease model reproducibility was observed in 100% of tested animals. Mean plasma levels of initial fasting glucose according to animal group were: 85.1±5.2mg/dL for treated group, 88.9±8.2mg/dL for sham and 88.7±5.9mg/dL for control group. Statistical analysis (ANOVA) showed no significant difference among the three groups (p=0.24). Mean plasma levels of final fasting glucose, according to animal group were: 353.5±98.2mg/dL for treated group, 80.9±5.0mg/dL for sham and 85.0±7.1mg/dL for normal control. Statistical analysis showed that the difference between the treated group and the two other groups was statistically significant (p<0.01). Mean plasma concentration of homocystein according to animal groups was: 6.1±1.3µmol/L for treated group, 8.6±2.2µmol/L for sham and 7.9±2.3µmol/L for control group. Statistical analysis showed a significant difference in the three groups (p<0.01). Mean values for von Willebrand factor were: 0.18±0.4U/L for treated group, 0.16±0.2U/L for sham group and 0.15±0.3U/L for control group. Significant statistical difference was found among the three groups (p<0.05). Mean plasma levels of total cholesterol according to animal groups were: 87.5±5.9mg/dL for treated group, 107.0±38.6mg/dL for sham and 123.9±40.8mg/dL for control group. Significant statistical difference was found among the three groups (p<0.05). There was no statistical significant difference in the mean values of cholesterol fraction (LDL, HDL, VLDL), triglycerides and creatinin among the three groups. A negative correlation between final plasma glucose and weight gain, homocystein and total cholesterol, homocystein and VLDL-cholesterol and homocystein and triglycerides was found in the treated (diabetes) group. Conclusions: In this study, results from streptozotocin-induced diabetes rats showed: 1. Lower levels of homocystein; 2. Higher levels of von Willebrand factor; 3. Negative correlation between homocystein and total cholesterol; 4. No correlations between final fasting glucose and homocystein, final fasting glucose and von Willebrand factor and homocystein and von Willebrand factor; 5. Negative correlation between weight gain and final fasting glucose. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-04T21:20:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Juliana Netto Maia.pdf: 2355288 bytes, checksum: e41ae604b644e595fe398f1cdcf22915 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-04T21:20:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Juliana Netto Maia.pdf: 2355288 bytes, checksum: e41ae604b644e595fe398f1cdcf22915 (MD5) Previous issue date: 2012-06-22 / Neste estudo avaliou-se o efeito do treinamento físico aeróbico de moderada intensidade sobre a instalação da neuropatia periférica em ratos com diabetes experimental. Foram utilizados 40 ratos machos, adultos, da linhagem Wistar. Estes foram divididos em 4 grupos: controle sedentário (CS), controle treinado (CT), diabético sedentário (DS), diabético treinado (DT). A indução do diabetes foi realizada nos animais, com 70 dias de vida, através da administração intraperitoneal de estreptozotocina, dose única de 60 mg/kg. O protocolo de exercício constou de treino em esteira rolante por 8 semanas. Na primeira semana, adaptação, os animais correram por 10 minutos diariamente. Nas sete semanas seguintes a velocidade e o tempo foram aumentados gradativamente. O treino foi realizado cinco vezes por semana. Antes da indução e na semana seguinte após o término do protocolo do exercício, foi realizada a velocidade de condução nervosa (VCN). Após 10 semanas da indução, os animais foram anestesiados com solução de Cloridato de ketamina (50 mg) e de Xilasina a 2% (20 mg) (0,2 mL/100g), em seguida o nervo isquiático, foi dissecado e cortado proximalmente, seguindo para uma pré-fixação realizada com solução Karnowisky por 24h a 4°C, depois pós-fixado com solução de tetróxido de ósmio e processado para obtenção de cortes semi-finos (0,5μm), corados com azul de toluidina. Foram avaliados: a VCN, o diâmetro das fibras mielínicas (DFM) e do axônio mielínico (DAM), espessura da bainha de mielina (EBM), razão ―g‖ (RZG), área de secção transversa do nervo isquiático, quantidade e densidade de fibras nervosas mielínicas, percentual de fibras finas e grossas e quantidade de vasos endoneurais de 4 animais de cada grupo, escolhidos aleatoriamente. A análise estatística foi realizada através da análise de variância (ANOVA) e havendo interação foi realizado o Post Hoc (Tukey HSD), sendo p < 0,05. Ao final do experimento observou-se que os animais diabéticos apresentaram peso inferior quando comparados aos seus grupo controle (p=0,0001). Não houve diferença entre os valores glicêmicos dos animais dos grupos DS e DT. A DFM e a DAM foi maior nos animais submetidos ao treinamento (p= 0,0226; 0= 0,0110, respectivamente). A EBM não apresentou diferença entre os grupos. Os animais dos grupo DS apresentaram valores de RZG de 0,58, classificando-os em extramielinizados, os demais grupos apresentaram valores dentro na normalidade. Em relação à VCN, houve uma interação pelo ANOVA (p=0,0124; TUKEY: p=0,0004) mostrando que o grupo DS apresentou queda neste parâmetro. Houve uma diminuição na área e na quantidade de fibras mielínicas nos grupos diabéticos (p<0,007; p=0,005, respectivamente). No entanto o percentual de fibras grossa foi maior nos DT que no DS (p=0,04). Apesar de não haver diferença significativa, o número de vasos endoneurais foi melhor preservados nos animais DT que nos animais do grupo DS. Pode-se perceber que os animais do grupo DT apresentou valores dos parâmetros avaliados mais e próximos aos dos grupos controle. Diante destes resultados, pode-se observar que o treinamento físico parece melhorar/preservar a estrutura nervosa dos animais diabéticos. / This study evaluated the effect of moderate intensity aerobic exercise training on the peripheral neuropathy installation among rats with experimental diabetes. This experiment was conducted in 40 male mice, adult, Wistar breed. The experiment used 4 groups: sedentary control (SC), trained control (TC), sedentary diabetic (SD), trained diabetic (TD). The induction of diabetes was performed in 70 days old animals by intraperitoneal administration of streptozotocin, in a single dose of 60 mg/kg. The exercise protocol consisted of treadmill training for 8 weeks. In the first week, adaptation week, animals ran for 10 minutes daily. In the following seven weeks, speed and time were increased gradually. The training was performed five times per week. Before the induction and after the exercise protocol, the nerve conduction velocity (NCV) was performed. After 10 weeks of induction, animals were anesthetized with ketamine hydrochloride solution (50mg) and xylazine 2% (20mg) (0,2ml/100g), then the sciatic nerve was dissected and proximal cut, then it was conducted a pre-setting with Karnowisk solution for 24h at 4°C, after that a postfixed was conducted with osmium tetroxide for obtaining semi-thin sections (0,5μm), stained with toluidine blue. Thus, it were evaluated: NCV, the diameter of myelinated fibers (DMF) and myelin axon (DMA), thickness of the myelin sheath (TMS), "g" ratio (RZG), cross-sectional area of the sciatic nerve, quantity and density of myelinated nerve fibers, the percentage of fine and coarse fibers and endoneural vessels amount of 4 animals of each group randomly selected. The statistical analysis was performed using analysis of variance (ANOVA) method and in cases of interaction detected, it was performed Post Hoc test (Tukey HSD), p <0.05. At the end of the experiment, it was observed that diabetic animals presented lower weight when compared to their control group (p = 0.0001). There was no difference between the glycemic values of SD and TC groups. The DMF and DMA were higher in animals exposed to training (p = 0.0226; 0 = 0.0110, respectively). There were no TMS difference between the groups. The animals of the DS group had RZG values of 0.58, ranking them in extramielinizados, the other groups presented their values within the normal range. Regarding the NCV, there was an interaction by ANOVA (p = 0.0124; Tukey: p = 0.0004) presenting a SD decrease in this parameter. There was a decrease in the area and in the quantity of myelinated fibers in diabetic groups (p <0.007; p = 0.005, respectively). However, the percentage of coarse fibers was higher in TD than in SD (p = 0.04). Even though no significant difference were found, the vessels endoneurial was better preserved in TD animals than in SD animals. Animals in TD group presented values of their evaluated parameters more closer to the control group. Considering those results, physical training seems to improve / maintain nerve structure in diabetic animals.

The objective of these studies was to investigate mechanisms whereby cardiac sarcoplasmic reticulum (SR) calcium transport activity may be influenced by changes in the lipid environment of the SR membrane in the experimental endocrine disease states hypothyroidism and insulin-dependent diabetes mellitus. These endocrine disease states were studied to determine, respectively, if SR function is influenced by endogenous acylcarnitine associated with the SR membrane and if SR phospholipid acyl composition plays a role in diabetes-induced cardiomyopathy. The effects of endogenous acylcarnitines on SR calcium transport in hypothyroidism were of interest since it has previously been implicated that acyl carnitines play a regulatory role in SR function. SR calcium transport was not affected at two weeks, but was significantly reduced at four, six and eight weeks following thyroidectomy. Endogenous acyl carnitines were detectable in the SR membrane fraction isolated from both euthyroid control and thyroidectomized animals. The level of acyl carnitine associated with the SR did not correlate with calcium transport activity. Since acylcarnitine did not appear to play a role in the reduced SR calcium transport, SR calcium pump protein was quantified. The reduced SR calcium transport of thyroidectomized animals, manifest at four weeks, was shown to correlate with a reduction in SR acylphosphoprotein level. Therefore the reduced SR calcium transport activity of hypothyroidism is not related to the level of SR acyl carnitine, but rather a hypothyroid-induced reduction in SR calcium pump sites. Since omega-3 fatty acids affect parameters relevant to diabetes-induced cardiomyopathy, it was of interest to determine the cardiac effects of omega-3 fatty acid treatment of streptozocin (STZ)-induced diabetic animals. Omega-3 fatty acid treatment significantly reduced the development of diabetic cardiomyopathy and improved isolated cardiac SR calcium transport activity of STZ-induced diabetic animals. To determine if the cardiac and SR changes were related to membrane changes induced by omega-3 fatty acids, the fatty acyl composition of phospholipid was determined. Phospholipid analysis of cardiac phosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine, and total SR phospholipid indicated modest changes in the omega-3 fatty acid component. Omega-3 fatty acid treatment produced slight (statistically insignificant) changes in SR cholesterol levels. Therefore a change in membrane phospholipid acyl composition may not account for the observed cardiac and SR functional changes. / Pharmaceutical Sciences, Faculty of / Graduate

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-30Bitstream added on 2014-06-13T19:01:27Z : No. of bitstreams: 1 coutinho_ccc_dr_araca.pdf: 2553460 bytes, checksum: 3452236f6d7b2eaf564065c254e191ca (MD5) / Este trabalho teve como objetivo analisar a dinâmica da reparação de alvéolos preenchidos com coágulo sanguineo e com vidro bioativo (Perioglass®) em ratos não diabéticos, diabéticos controlados e não controlados através de técnica histológica, histométrica e imunoistoquímica. Para tanto foram utilizados 90 ratos Wistar, machos, com peso entre 230-310g que foram divididos em 3 grupos: Grupo I (grupo controle), Grupo II (grupo diabético não controlado) e Grupo III (grupo diabético controlado); os animais dos Grupos II e III foram induzidos a diabetes através da administração de Streptozotocina (STZ) dissolvida em tampão citrato a 0,01M via veia peniana na concentração de 35mg/Kg de peso do animal enquanto os animais do grupo I receberam apenas a administração de tampão citrato a 0,01M. Os animais do Grupo III receberam diariamente a partir do 4º dia da indução do diabetes a administração de insulina NPH via subcutânea. No 12º após administração do diabetogênico ou tampão citrato os animais foram induzidos a anestesia geral e tiveram o incisivo superior direito extraídos. Metade dos animais de cada grupo tiveram o alvéolo preenchido com coágulo sanguineo e a outra metade teve o alvéolo preenchido parcialmente com Perioglass®; todos os animais foram suturados com o fio de poliglactina 910. Os períodos experimentais foram aos 7, 14 e 28 dias pós-operatórios. Foram realizadas análise histológica qualitativa em lâminas coradas pela HE e análise histométrica em dois campos de tamanhos idênticos localizados na porção lingual do terço médio alveolar utilizando o Software Imagelab 2000 (Diracon 3) em lâminas coradas pelo Tricrômico de Masson; as médias percentuais de tecido ósseo neoformado foram submetidos ao teste estatístico de Análise de Variância e o pós teste de Holm Sidak... / The present study has the aim to evaluate the dynamics of the bone repair in dental sockets filled with blood clot and with bioactive glass (Perioglass®) in non diabetics, controlled diabetics and non controlled diabetics rats through a histological, histometric and immunohistochemistry approach. To perform this study, 90 Wistar rats, male, wheighing between 230-310g were divided in three groups: Group I (Control Group), Group II (Non controlled diabetic Group) and Group III (Controled Diabetic Group); the animals of Groups II and III were induced to diabetics disease through the administration of Streptozotocin (STZ) dissolved in 0,01M citrate buffer in penis vein in concentration of 35mg/kg corporal weigh while the animals of Group I received the administration of 0,01M citrate buffer. The animals of Group III received daily, since the 4th day after the diabetics induction, the administration of NPH insuline in a subcutaneous way. In the 12th day after the administration of STZ or citrate buffer, the animals were induced to general anesthesia and had the upper right incisive extracted. Half of the animals of each group had the dental socket filled with blood clot and the other animals had the dental socket partially filled with Perioglass®. All of the animals were sutured with 910 poliglactine thread. The experimental periods were at 7, 14 and 28 pos extraction days. It was performed a qualitative histological analysis in slices stained with HE and the histometric analysis in two sites with same size localized in the lingual portion of the middle third of the dental socket was performed using the Imagelab 2000 Software (Diracon 3) in slices stained with Masson’ s Tricromic; the percentual mean values of neoformed bone tissue were submitted to the statistical test of Variance Analysis and the post test of Holm Sidak... (Complete abstract click electronic access below)

Orientadores: Juliana Trindade Clemente Napimoga, Maria Cláudia Gonçalves de Oliveira Fusaro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-24T17:04:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MuzilliJunior_Augusto_M.pdf: 554884 bytes, checksum: 13ac41d2adee82f2e294fb0a65c5bb5e (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A doença diabetes em sua fase inicial é conhecida por induzir dor neuropática, como resultado de complicações neurovasculares mediada pela via diacilglicerol/ Proteinoquinase C (DAG/PKC). Considerando que a neuropatia induzida pelo diabetes está associada com diferentes isoformas da PKC, o objetivo deste estudo foi avaliar a expressão de diferentes isoformas da PKC nas condições dolorosas induzidas pelo diabetes tipo 1 na articulação temporomandibular (ATM) de ratos. Ratos Wistar (± 150 g, 2 meses de idade, n=4-6/grupo) foram tratados com uma injeção intraperitoneal de tampão citrato (veículo; normoglicêmicos ¿ NG) ou Estreptozotocina 75 mg/kg (diabéticos ¿ DB). As alterações dolorosas induzidas pelo diabetes tipo 1 foram avaliadas através da mensuração do comportamento nociceptivo dos animais induzido por uma injeção intra-articular de formalina 1,5% ou capsaicina 1,5% nos dias 7, 14, 21, 28, 35 ou 42 dias após a indução do diabetes ou veículo. Após a avaliação dos comportamentos nociceptivos, os animais foram mortos por anestesia e o tecido periarticular removido para análise de Western Blot. A fase inicial do diabetes tipo 1 induziu uma hiponocicepção na ATM dos ratos 7, 14, 21, 28, 35 e 42 dias depois da indução do diabetes (p<0.05: Two-way ANOVA, Bonferroni¿s test). Os animais diabéticos tratados com uma injeção intra-articular de capsaicina demonstraram hiponocicepção 7, 14, 21 e 28 dias depois da indução do diabetes (p<0.05: Two-way ANOVA, Bonferroni¿s test). A análise por Western Blot demonstrou que a expressão das proteinoquinases PKC-?1, PKC-?2, PKC-delta e PKC-epsilon no tecido periarticular foi significativamente maior nos ratos DB em comparação aos animais NG (p<0.05: Two-way ANOVA, Bonferroni¿s test), enquanto a expressão da PKC-? no tecido periarticular foi significativamente menor nos ratos DB em comparação aos animais NG (p<0,05). Os resultados sugerem que a hiponocicepção induzida pelo diabetes na ATM de ratos está associada à variação da expressão das diferentes isoformas da PKC: -?, -?1, -?2, -delta e -epsilon / Abstract: Diabetes in early phase is known to result in painful neuropathy as a result of neurovascular complications mediated by the activation of Diacylglycerol/Protein kinase C pathway (DAG/PKC). Considering that diabetes-induced neuropathy is associated with different PKC isoforms, the aim of this study was to evaluate the expression of PKC in diabetes type 1-induced pain condition in the temporomandibular joint (TMJ) of rats. Wistar rats (± 150 g, 2 month-old, n=4-6/group) were treated with an intraperitoneal injection of citrate buffer (vehicle; normoglycemic ¿ NG) or Streptozotocin 75 mg/kg (diabetic ¿ DB). Diabetes-induced pain conditions were assessed by the animals¿ nociceptive behavior induced by an intra-articular injection of 1.5% formalin or 1.5% capsaicin 7, 14, 21, 28, 35 or 42 days after the diabetic induction or vehicle. After behavioral assays, animals were terminally anesthetized and their periarticular tissue removed for Western Blot analysis. Early phase of diabetes type 1 induced hyponociception into TMJ of rats 7, 14, 21, 28, 35 and 42 days after the diabetic induction (p<0.05: Two-way ANOVA, Bonferroni¿s test). DB animals treated with an intra-articular injection of capsaicin demonstrated hyponociception 7, 14, 21 and 28 days after diabetes induction (p<0.05: Two-way ANOVA, Bonferroni¿s test). Western Blot analysis demonstrated that the expression of PKC-?1, PKC-?2, PKC-delta and PKC-epsilon into periarticular tissue was significantly higher in the DB rats than in the NG rats (p<0.05: Two-way ANOVA, Bonferroni¿s test), whereas the expression of PKC-? into periarticular tissue was significantly higher in the DB rats than in the NG rats (p<0.05). Early phase of diabetes type 1 induce hyponociception into rats TMJ that involves changes in the expression of different kinds of PKC isoforms: -?, -?1, -?2, -delta and -epsilon. OBSERVAÇÃO Tanto no resumo como no abstract, os símbolos equivalentes à "delta" e "epsilon" haviam ficado como um quadrado, sendo assim, eu escrevi por extenso o nome do símbolo, mas o ideal seria ficar como os símbolos ? e ? / Mestrado / Fisiologia Oral / Mestre em Odontologia

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karolinska institutet, 2006. / Härtill 4 uppsatser.

El objetivo de esta tesis fue determinar las propiedades antihiperglicemiantes del liofilizado del extracto acuoso de alta temperatura de la corteza del tronco de Mangifera indica (EMI), en ratas hiperglicémicas agudas. Determinamos el efecto antihiperglicemiante utilizando tres concentraciones (50, 250 y 750 mg/Kg/ml.) de EMI en un modelo de hiperglicemia aguda in vivo en ratas normoglicémicas. Se midió la evolución temporal de la glicemia tras la administración de EMI (30 minutos antes de la glucosa) por vo, utilizando un sistema de bioamperometría. / The objective of this thesis was to determine the antihyperglycemic properties of the lyophilization of the aqueous extract of high temperature of the crust of the trunk of Mangifera indica (EMI) in acute hyperglycemic rats. We determined the antihyperglycemic effect using three concentrations (50, 250 and 750 mg/Kg/ml.) of EMI in an acute model of hyperglycemia in live normoglycemic rats. The temporary evolution of glycemia mediated after the administration of EMI (30 minutes before the glucose) orally, using a bioamperometry system.

Neste trabalho, foi avaliado a participação dos osteoclastos bem como a ação das citocinas RANKL, OPG e TNF-&#x3B1; durante a formação e remodelação óssea em defeitos ósseos de tamanho crítico em ratos normoglicêmicos e diabéticos tratados ou não com a MAOD. Para isso, foram utilizados 250 ratos machos Wistar. Trinta ratos foram utilizados para coleta dos fêmures e tíbias, os quais foram processados para obtenção da MAOD. Os demais 220 ratos foram divididos em Grupo Não Diabétido (CTL, n=110) e Grupo Diabético (DIAB, n= 110) induzido pela aplicação de uma dose única de 47 mg/Kg de massa corporal de estreptozotocina. Um defeito transósseo de 8 mm de diâmetro foi realizado nos ossos parietais dos ratos, sendo que, nos subgrupos CTL MAOD e DIAB MAOD, os defeitos foram preenchidos com MAOD e nos grupos CTL COAG e DIAB COAG apenas com coágulo sanguíneo. Após 0, 7, 14, 21 e 42 dias, as calotas cranianas foram coletadas para determinação da densidade de volume, número de osteoclastos/mm2 na área do defeito, quantificação por imunoistoquimica e expressão do RNAm para as proteínas RANKL, OPG e TNF-&#x3B1;. Os resultados para volume do tecido ósseo neoformado foi maior nos grupos CTL COAG e CTL MAOD, bem como no grupo DIAB MAOD quando comparado com DIAB COAG (CTL MAOD > CTL COAG e DIAB MAOD > DIAB COAG). O número de osteoclastos nos grupos CTL aumentaram significantemente (3,69 osteoclasto/mm2), enquanto que nos grupos MAOD aumentaram gradualmente até os 42 dias (2,8 osteoclasto/mm2). Os resultados para imunomarcação mostraram que a MAOD promove 1,28 vezes maior expressão de OPG, bem como de TNF-&#x3B1; tanto no grupo CTL (1,59 vezes) como no DIAB (1,76 vezes). Os resultados para expressão do RNAm para OPG mostrou que a média dos valores do grupo COAG comparado com a do grupo MAOD foi 1,91 vezes maior no grupo COAG. Já os valores para expressão de RANKL permaneceram constantes no grupo DIAB MAOD, com aumento significativo de 2,57 vezes aos 42 dias, sendo 4,3 vezes maior, quando comparado com a média dos outros grupos no mesmo período. Conclui-se que nos animais normoglicemicos, o tratamento com a MAOD aumenta a expressão de OPG, RANKL e TNF-&#x3B1;, assim como a atividade osteoclástica, promovendo reabsorção da MAOD e formação de tecido ósseo, enquanto que nos animais diabéticos, a atividade osteoclástica foi reduzida, sem alteração nos níveis de OPG e RANKL, reduzindo a reabsorção da MAOD e consequentemente da formação óssea. / Participation of osteoclasts was evaluated in reabsorption process of demineralized allogenic bone matrix (DABM) as well as the activity of cytokines RANKL, OPG and TNF- &#x3B1; during formation and bone remodeling in critial size defect of normoglycemic and diabetic rats treated or not with DABM. Therefore, 250 male Wistar rats were used. Thirty rats had femurs and tibias collected and processed to obtain DABM. 220 rats were divided into control group (CTL, n=110) and diabetic group (DIAB, n= 110) injected by a single dose of 47 mg/Kg of body weight streptozotocin. Were made 8mm bone defect on skulls of rats, in subgroups CTL DABM and DIAB DABM, defects were filled with DABM and subgroups CTL CLOT and DIAB CLOT were filled with blood clot. After 0, 7, 14, 21 and 42 days, the skulls were collected to determine the volume density, number of osteoclasts/mm2 into defects area, quantification by immunohistochemistry and RNAm expression of RANKL, OPG and TNF-&#x3B1; cytokines. The results of volume density of newly formed bone was higher in CTL CLOT and CTL DABM, as well as in DIAB DABM compared to DIAB CLOT (CTL DABM > CTL CLOT and DIAB DABM > DIAB CLOT). The number of osteoclasts in CTL groups increased to 3,69 osteoclasts/mm2, while in subgroups treated with DABM gradually increased up until 42 days (2,8 osteoclasts/mm2). Immunohistochemistry showed that DABM promotes an increase of 1.28-fold of OPG expression, as well as TNF-a expression in CTL group (1.59-fold) and DIAB group (1.76-fold). The results of RNAm expression of OPG showed that the average values of the CLOT subgroup compared to the average values of DABM subgroup was 1.91- fold higher in CLOT subgroup. The values of RANKL RNAm expression increase 2.57-fold at 42 days, being 4.3-fold higher than the average os the other groups in the same period. In conclusion, in the normoglicemic animals (CTL group), the treatment with DABM increase the expression of OPG, RANKL and TNF-&#x3B1; as the activity of osteoclasts, leading to DABM resorption and bone tissue formation, while in diabetic animals, the osteoclast activity was reduced, without changes in the leves of OPG and RANKL, decreasing DABM resorption and bone formation.

O Tranforming Growth Factor-d (TGF-^) é uma citocina cuja principal ação é a de estimular a síntese de matriz extra-celular por diversos tipos celulares. A nefropatia diabética caracteriza-se pelo acúmulo de matriz extra-celular no glomérulo, especialmente ao nível da região mesangial. Estudos recentes têm demonstrado que o TGF-fy é produzido no glomérulo de modelos experimentais de ratos com diabete mélito de início recente, mas o seu papel na patogênese e na evolução da glomerulosclerose diabética não está totalmente estabelecido. O objetivo do presente trabalho foi o de investigar a produção e a distribuição do polipeptídio do TGF-fc-, no rim de ratos durante a evolução da nefropatia diabética experimental e as possíveis correlações entre a produção deste polipeptídio e a glomerulosclerose diabética. Foi avaliada a distribuição intra-renal do polipeptídio do TGF-^ através de imunohistoquímica e a sua produção renal através dos níveis de mRNA-TGF-li-, no córtex e no glomérulo de ratos Wistar com diabete mélito induzido pela estreptozotocina antes e após o início da nefropatia diabética. Estudou-se ainda, seriadamente, a excreção urinária de albumina, a taxa de filtração glomerular, a medida do volume glomerular, lrnunohistoquímica para colágeno tipo I e a histologia renal com coloração para colágeno total. Os resultados mostraram a presença de marcada reação 'rnunohistoquímica para TGF-G^, sendo que esta foi progressivamente ^ais intensa nos glomérulos de ratos com 24 e 40 semanas de diabetes a qual se correlacionou com a albuminúria (r=0.905, p<0.01). e associou-se temporalmente à presença de colágeno total e tipo I nos glomérulos. O conteúdo glomerular de mRNA-TGF-^ foi maior em ratos diabéticos 20 semanas após o início da hiperglicemia, enquanto que o 'TiRNA-TGF-(i1 no córtex foi 30% menor nestes ratos, quando comparado a seus respectivos controles de 1 semana (p<0.01), 8 e 40 semanas (p<0.05). Estes dados sugerem que o polipeptídio TGF-R., Possa ter um papel importante na patogênese da glomerulosclerose diabética. / TGF-U-, (Transforming Growth Factor-íli) is a citokine which has been demonstrated to increase extra-cellular matrix synthesis by many cells. Diabetic nephropathy is essentially characterized by extra-cellular matrix deposition in mesangial region. Recent studies have shown that the polypeptide TGF-li1 is produced in glomeruli of experimental models of rats with untreated diabetes mellitus of recent onset, but its role in the genesis of diabetic glomerulosclerosis has not been stablished. The aim of the present study was to investigate the production and distribution of TGF-ft., peptide in the kidney of rats during the evolution of experimental diabetic nephropathy and to evaluate the possible relationship of TGF-&, peptide and diabetic glomerulosclerosis. We evaluated the intrarenal distribution of TGF-fy polypeptide and the mRNA-TGF-Rilevels 'n glomeruli and renal cortex in Wistar rats with streptozotocin-induced diabetes before and after the onset of diabetic nephropathy. Serial urinary albumin excretion, glomerular filtration rate, glomerular volume, renal histology with total collagen staining and immunohistochemical reaction for type I collagen were also studied. The results showed progressively higher glomerular immunohistochemical reaction for TGF-G.-, staining in the rats with diabetes of 24 and 40 weeks duration. It was correlated with albuminuria (r=0.905, p<0,01) and was temporally associated with the appearance of glomerular deposition of total and type I collagen. Glomerular content of 10 TGF-fc-, mRNA was increased in diabetic rats 20 weeks after injection, while cortical TGF-I^ mRNA levei was about 30% lower in diabetic rats when compared with time-paired controis at 1 week (p<0.01)I 8 and 40 weeks (p<0.05). These data suggest that TGF-&, is an important mediator of diabetic glomerulosclerosis.