Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-20Bitstream added on 2014-06-13T19:35:12Z : No. of bitstreams: 1 nogueira_ahc_me_araca.pdf: 2490069 bytes, checksum: 714344d8f3e4f1f5ba08fcf82344d992 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A língua azul é uma doença viral, cujo agente etiológico pertence à família Reoviridae, gênero Orbivírus, transmitida por um vetor (artrópode) hematófago, do gênero Culicoides. Por se tratar de doença confundível com Febre Aftosa está incluída na lista de diagnóstico diferencial juntamente com Estomatite Vesicular, Varíola Ovina, Ectima Contagioso. O estudo teve como objetivo detectar a presença de anticorpos para língua azul em ovinos da região de Araçatuba, por ser esta uma região com rebanho expressivo e condições climáticas favoráveis à multiplicação de insetos. As amostras foram colhidas ao longo do ano de 2006, de ovinos adultos, em fase reprodutiva, (acima de 12 meses e com pelo menos uma parição, ou em caso de machos sexualmente maduros) e sem sintomas característicos da doença, de ambos os sexos, cadastrados no Núcleo de Produtores de Ovinos da Região de Araçatuba, distribuídas nos municípios da Região administrativa de Araçatuba. O tamanho da amostras foi calculado, considerando-se distribuição normal, prevalência de 50%, nível de confiança de 95% e precisão absoluta de 3%. Foram analisadas 1002 amostras de soros ovinos adultos, provenientes de 31 cabanhas, pelas provas de imunodifusão dupla em gel de agar (IDGA) e ELISA (Enzyme Linked immunosorbent Assay) de competição da fase sólida (ELISA CFS), provenientes do Centro Panamericano de Febre aftosa. Dessas amostras, 744 (74,3%) foram reagentes ao vírus da língua azul , pelo teste de ELISA–CFS e 651 (65,1%), pela técnica de IDGA. Não houve associação significante entre prevalência da doença e o sexo dos animais. Esses resultados revelam que o Vírus da Língua Azul encontra-se disseminado nessas regiões, sugerindo a ocorrência de infecções inaparente. / Bluetongue (BT) is an infectious, non-contagious, insect-born viral disease of Ruminants. The causative agent of BT is bluetongue virus (BTV) that belongs to the family Reoviridae genus Orbivirus. Insect vectors in the genus Culicoides transmit this virus. BT affects domestic and wild ruminants, however small ruminants are considered the most affected specie. BT is included in the OIE list based on the differential diagnosis with Foot and Mouth Disease (FMDV), Vesicular Stomatitis Virus (VSV) and Sheep Pox Virus (SPV). The aim of the study was to detect antibodies against BTV in commercial sheep farms, of the Northeastern region of Sao Paulo State, Brazil. The size of the samples was calculated, considering normal distribution, prevalence of 50%, confidence level of 95% and absolute precision of 3%.A total of 1002 sera samples collected from adult sheep (above 1 year-old), comprising a total of 31 farms, were screened for the presence of BTV antibodies, by agar gel immunodiffusion test (AGID) and ELISA-CFS (Enzyme Linked Immunosorbent Assay – competitive solid phase), both produced by Pan American Center of FMDV. From a total of 744 samples 74,3% were positive by ELISA – CFS and 651 (65,1%) were positive by AGID. There was no significant association between prevalence of the disease and sex of animals.These results suggest that the BTV is widespread among farms, probably causing subclinical infections, with high level of antibodies.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-07-04Bitstream added on 2014-06-13T18:31:25Z : No. of bitstreams: 1 luciano_rl_me_jabo.pdf: 288271 bytes, checksum: 77640cc158f0c12048ecdaf245801057 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Um método de diagnóstico baseado na associação entre as técnicas de RT-PCR e ELISA foi desenvolvido para a detecção do vírus da bronquite infecciosa das aves (VBI). Inicialmente, a especificidade e a sensibilidade analíticas dessa técnica, bem como dos métodos de RT-PCR e Nested-RT-PCR, foram determinadas, tendo-se demonstrado, para o primeiro parâmetro, apenas a detecção do VBI, enquanto que outros vírus heterólogos aviários testados, tais como pneumovírus aviário (APV / estirpe do grupo B), vírus da doença de Newcastle (NDV / estirpe La Sota) e vírus da doença de Gumboro (GDV - estirpe Lukert), não foram detectados. Quanto à avaliação da sensibilidade analítica dos métodos empregados neste estudo foi constatado que o RT-PCR-ELISA demonstrou ser 10 vezes mais sensível do que a RT-PCR, enquanto que a reação de Nested-PCR foi 100 vezes mais sensível que a RT-PCR e 10 vezes mais sensível que o RT-PCR-ELISA. A técnica de RT-PCR-ELISA, juntamente com os outros dois métodos de biologia molecular, foram aplicadas para a detecção das estirpes H-120 e A034 do VBI, em amostras de pulmão e traquéia obtidas de aves experimentalmente infectadas com essas duas estirpes virais. Os resultados obtidos nos diferentes métodos de biologia molecular foram comparados entre si e com a técnica padrão de isolamento viral em ovos embrionados, verificando-se que o RT-PCR-ELISA revelou-se tão específico quanto as técnicas de isolamento viral e Nested-PCR, porém foi menos sensível do que esses mesmos métodos na detecção do VBI. A técnica de RT-PCR-ELISA, utilizada pela primeira vez para o VBI, demonstrou o potencial de se constituir uma alternativa viável para um diagnóstico direto mais rápido e específico do VBI. / A molecular biology method for the detection of avian infectious bronchitis virus (IBV) was developed combining the reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) with the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Firstly, the analytical specificity and sensitivity of RT-PCR-ELISA, RT-PCR and Nested-RT-PCR were assessed. The specificity of these methods were confirmed since only IBV was detected, while other heterologous avian viral pathogens such as pneumovirus (Group B), Newcastle disease virus (LaSota strain) and gumboro disease virus (Lukert strain) were not detected by these techniques. The sensitivity of these methods was established, indicating that the RT-PCR-ELISA was about ten times more sensitive than conventional RT-PCR, while Nested-PCR was a hundred more sensitive than RT-PCR and ten times more sensitive than PCR-ELISA. The RT-PCR-ELISA and the two molecular biology methods were also applied for the detection of IBV strains H-120 and A034, in lung and tracheal tissue samples collected from experimentally infected chickens. The results of these different methods were also compared with the standard diagnostic technique, the virus isolation in chicken embryonated eggs, showing that RT-PCR-ELISA was as specific as virus isolation and Nested-PCR, however it was less sensitive than these methods for the IBV detection. The RT-PCR-ELISA, applied for the first time for IBV detection and direct diagnosis in tissue samples, can be potentially applied as an useful alternative for the rapid and specific diagnosis of IBV.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-20Bitstream added on 2014-06-13T20:29:04Z : No. of bitstreams: 1 lima_fpa_me_ilha.pdf: 1444962 bytes, checksum: f814ed07710ed9ad108eae8a90aec20d (MD5) / Neste trabalho apresenta-se um método para detecção e classificação de distúrbios de tensão em sistemas de distribuição de energia elétrica. A partir das oscilografias de tensão, medidas na subestação, aplica-se o algoritmo de seleção negativa de um sistema imunológico artificial para diferenciar os sinais entre próprios e não-próprios. Os sinais classificados como próprios representam a operação normal do sistema, isto é, alimentador sem a presença de distúrbio, e os classificados como não-próprios são sinais onde há a presença de uma anormalidade. A análise dos sinais é realizada através do janelamento das oscilografias onde são realizadas comparações entre os sinais e os detectores previamente criados, avaliando a afinidade entre as janelas. Caso a afinidade entre os sinais ultrapasse um limiar preestabelecido pelo operador, é encontrado um casamento, e o sinal é classificado. Com esta proposta busca-se a concepção de um método que possa ser modificado facilmente, para atender a permanente evolução das tecnologias das subestações. Para validar e avaliar o desempenho do método foram realizados testes com quatro sistemas de distribuição de energia elétrica, sendo três sistemas testes de 5, 33 e 84 barras e um sistema real de 134 barras / This work presents a method to detect and classify voltage disturbances in electrical distribution systems. The Negative Selection Algorithm of an artificial immunological system is applied to the voltage oscillographs, measured on the substation, to distinguish the signals as self or nonself. The signals classified as self represent the normal operation of the system, i.e. the feeder without disturbance, and those classified as nonself are the signals where there are some abnormalities. The signal analysis is performed by windowing the oscillographs comparing the signals and the detectors previously created, evaluating the affinity with the windows. If the affinity with the signals overpasses a predefined limit a matching is found and the signal is classified. This proposal is a method that can be easily modified to attend the fast evolution of the substation technologies. To validate the performance tests were done to four different distribution systems, including one real system

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-31Bitstream added on 2014-06-13T19:49:41Z : No. of bitstreams: 1 lima_cf_me_sjc.pdf: 420343 bytes, checksum: f66334babfa9962515aaa95832c83900 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho avaliou quantitativamente micronúcleos (MN) na citologia esfoliativa da mucosa bucal de pacientes com dependência química. Os MN contêm material genético perdido durante a mitose em eventos clastogênicos e aneugênicos e ocorrem antes de qualquer mudança histopatológica pré-neoplásica tornar-se evidente. Foram triados 24 pacientes dependentes químicos, do CAPSAD (Centro de Apoio Psicosocial Álcool Drogas) da Prefeitura de São José dos Campos e 24 pacientes não fumantes, ou que não fumassem há 10 anos, com ingestão semanal inferior a 03 doses de bebidas alcoólicas e não usuários de drogas ilícitas, nas clínicas da FOSJCUNESP. O critério de inclusão para os grupos foi ausência de lesões bucais. Foi realizada citologia esfoliativa do bordo lingual lateral esquerdo e aplicado teste de MN com coloração de Feulgen. A análise de 600 células/paciente foi realizada por microscopia óptica e a estatística utilizou os testes Kruskal-Wallis e Mann-Whitney para freqüência de MN e células micronucleadas, e correlação de Spearman para a quantidade e anos de consumo (IC 95%, nível de significância 5%). No grupo CAPSAD a freqüência média de MN foi de 3,08 l 3,20 e a média do grupo controle foi 2,08 l 1,93; e para células micronucleadas foi 2,38 l 2,57 para o grupo CAPSAD e de 1,42 l 1,25 no grupo controle. Os resultados mostram que a freqüência de MN e células micronucleadas para o grupo CAPSAD foi numericamente superior mas a diferença entre os grupos não foi significativa estatisticamente. A quantidade diária ingerida de cigarro, álcool e drogas ilícitas mostrou maior influência na freqüência de MN que os anos de ingestão. / The aim of the present study was to evaluate quantitative micronuclei (MN) in the lining oral mucosa from chemical dependent patients. The MN originated from small extranucleus separated from the main one during cellular division. MN may appear before any clinical change is evident. Patients were divided in two groups: 24 chemical dependent patients, from CAPSAD (Centro de Apoio Psicosocial Álcool Drogas) São José dos Campos city and 24 control group patients from FOSJC-UNESP. Inclusion criterion for control group was nonsmoking for last 10 years, alcoholic beverages consumption of 03 units maximum per week, no drugs and no visible clinical alteration of the oral mucosa. Exfoliative cytology from the left side of the border of the tongue and MN test were performed. Feulgen staining was used and 600 cells were evaluated for each subject and analyzed under optical microscopies. To determinate the frequency of MN and micronucleated cells the statistical analysis used Kruskal-Wallis and Mann- Whitney tests, and Spearman correlation to determinate quantity and years of consumption (IC 95%). The incidence of MN in the CAPSAD group was 3,08 l 3,20 and in the control group was 2,08 l 1,93. The frequency of micronucleated buccal cells was 2,38 l 2,57 to CAPSAD and 1,42 l 1,25 to control group. The results showed that the micronuclei frequency and micronucleated buccal cells of CAPSAD group was increased but not statistically significant different from control group. The daily quantity consumption of cigarrete, alcohol and drugs presented effect of MN frequency higher than years of consumption.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-06Bitstream added on 2014-06-13T20:11:35Z : No. of bitstreams: 1 bicalho_sr_me_jabo.pdf: 151294 bytes, checksum: 550621907917717519898ec20c136186 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Tendo em vista a alta incidência das neoplasias mamárias e metástases em cadelas e objetivando contribuir com a oncologia veterinária na padronização de um teste simples, eficaz e acessível no diagnóstico precoce destas metástases, esse estudo teve como meta avaliar o marcador tumoral CA 15.3 no soro de cadelas saudáveis e investigar a viabilidade da quimioluminescência e do kit de reagentes desenvolvido para a espécie humana como ferramenta neste processo. Numa primeira etapa avaliou-se o soro de 100 cadelas saudáveis, de raças e idades variadas. Numa segunda etapa o soro de 10 cadelas saudáveis foi submetido ao processo de concentração de proteínas e posteriormente avaliado. Nas amostras não concentradas os níveis do marcador ficaram abaixo do limiar de detecção do kit. Nas amostras concentradas, o valor médio e respectivo desvio padrão observados foram 0,4140 ± 0,25 U/mL nas amostras com o dobro da concentração inicial e 0,5170 ± 0,25 U/mL nas amostras quatro vezes mais concentradas. Com base nos resultados obtidos neste estudo concluiu-se que o método empregado, ensaio imunoluminométrico por quimioluminescência e o kit de reagentes desenvolvido para a detecção do CA 15.3 na espécie humana mostram-se viáveis para utilização na espécie canina, necessitando entretanto de adequação da técnica / Given the high incidence of mammary tumors and metastases in female dogs and trying to contribute with the veterinary oncology in standardization of a simple, effective and affordable technique in the early diagnosis of these metastases, this study was aimed to evaluate the tumor marker CA 15.3 in serum of healthy dogs and to investigate the feasibility and the chemiluminescence reagent kit designed for the human species as a tool in this process. In a first step we evaluated the serum of 100 healthy female dogs of different breeds and ages. In a second step, the serum of 10 healthy female dogs was subjected to the process of proteins concentration and subsequently evaluated. In samples not concentrated, the levels were below the detection of the kit. In concentrated samples, the average value and its standard deviation observed were 0.4140 ± 0.25 U/mL in the samples with at double the initial concentration, and 0.5170 ± 0.25 U/mL in samples four times more concentrated. Based on the results of this study it is concluded that the method employed, chemiluminescent immunoluminometric assay, and the reagents kit designed for detection of the CA 15.3 in humans appear to be viable for use in dogs, however requiring adjustment of the technique

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Mariella Vieira Pereira Leão / Banca: Elizabete Brasil dos Santos / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Cristiane Yumi Koga-Ito / Resumo: Superinfecção resulta no desenvolvimento de patógenos residentes prejudiciais ou oportunistas em conseqüência de alteração da microbiota benéfica e pode representar uma complicação na terapia antimicrobiana. O presente estudo avaliou a presença de leveduras, estafilococos, enterobactérias e Pseudomonas na cavidade bucal e sulco gengival de indivíduos submetidos à terapia antibiótica para tratamento de tuberculose pulmonar e indivíduos controle. Foram incluídos cinqüenta indivíduos diagnosticados com tuberculose pulmonar e que estivessem sob antibioticoterapia por um período mínimo de 45 dias e máximo de seis meses. Para controle foram incluídos indivíduos sistemicamente saudáveis. A coleta de material da cavidade bucal foi realizada pela técnica de enxágüe bucal e do sulco gengival utilizando-se cones de papel absorvente esterilizados. As amostras coletadas foram semeadas em duplicata em placas de Petri contendo ágar Sabouraud dextrose com cloranfenicol, ágar Manitol e ágar MacConkey. As amostras de Candida spp. e de estafilococos coagulase-positivas foram identificadas por provas bioquímicas específicas e as amostras de estafilococos coagulase-negativas, enterobactérias e Pseudomonas foram identificadas utilizando-se o sistema API. Os resultados foram analisados pelo teste estatístico de Mann-Whitney (p<0,05). Candida spp. foram detectadas em número significativamente maior na cavidade bucal de indivíduos com tuberculose pulmonar em relação aos controles, sendo C. albicans mais prevalente em ambos os grupos. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre os grupos para Staphylococcus spp., enterocatérias e Pseudomonas. Concluiu-se que os indivíduos sob antibioticoterapia para tratamento de tuberculose pulmonar apresentaram maior prevalência de Candida spp. na cavidade bucal em relação aos controles. / Abstract: Superinfection results an overgrowth of potentially harmful resident or other opportunistic pathogens and can further represent a complication of an antimicrobial therapy that alters a beneficial microbiota. The present study evaluated the presence of yeasts, staphylococci, enteric rods and pseudomonads in the oral cavity and gingival sulcus of individuals with pulmonary tuberculosis undergoing antibiotic treatment and controls individuals. There were included 50 individuals diagnosed with pulmonary tuberculosis that were submitted to antibiotic therapy during a minimal period of 45 days and maximum 6 months. Systemically health individuals were included in the control group. Samples from oral cavity were collected through oral rinses and subgingival samples were taken using sterile paper points. Samples were cultured in duplicate onto Sabouraud dextrose agar with chloramphenicol, manitol agar and MacConkey agar. The isolates of Candida spp. and coagulase-positive staphylococci were identified by phenothypic characterization and the isolates of coagulase-negative staphylococci, enteric rods and pseudomonads were identified by API system. Data were analyzed statistically by Mann-Whitney test (p<0.05). Candida spp. were detected in the oral cavity of pulmonary tuberculosis individuals in a significant higher number when compared to controls, and C. albicans was the most prevalent specie found in both groups. No significant statistical differences were observed between the groups related to Staphylococcus spp., enteric rods and pseudomonads. It was concluded that individuals with pulmonary tuberculosis showed significant increase in the quantity of Candida spp. concerning controls. / Doutor

Orientador: Luis Antonio Mathias / Banca: Anna Monteiro Correia Lima / Banca: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Banca: Raphaella Barbosa Meirelles Bartoli / Banca: Samir Issa Samara / Resumo: A tuberculose causada pelo Mycobacterium bovis é uma importante doença dos bovinos e constitui um grande problema de saúde animal, podendo também atingir humanos. Para o diagnóstico da infecção, e para desencadear as medidas sanitárias decorrentes desse diagnóstico, o Programa Nacional de Controle e Erradicação de Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) estabelece a utilização de testes intradérmicos de tuberculinização. O objetivo deste estudo foi avaliar as respostas à tuberculina (PPD) aviária e à tuberculina bovina apresentadas por animais sensibilizados com inóculos inativados de M. bovis e de M. avium, e comparar os resultados do teste da prega caudal (TPC), do teste cervical simples (TCS) e do teste cervical comparativo (TCC) para diagnóstico da tuberculose bovina nos animais sensibilizados e em animais não sensibilizados. Os resultados mostraram que: a repetição dos testes não influiu na proporção de resultados positivos; houve animais sensibilizados com M. bovis que apresentaram reação até 500 dias após a sensibilização; em animais sensibilizados com M. avium, a especificidade do TCC foi superior à do TCS e à do TPC, e o TCC mostrou-se efetivo para discriminar reações induzidas pelo inóculo desse microrganismo; em animais sensibilizados com M. bovis, o TCC apresentou menor sensibilidade do que os outros dois testes; o ponto de corte do TCS e do TCC com melhor combinação de sensibilidade e especificidade foi inferior ao ponto adotado pelo PNCEBT para diagnóstico em animais n... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Tuberculosis caused by Mycobacterium bovis is an important disease in cattle e a great problem for animal health that can reach humans. For the diagnosis of the infection and the consequent sanitary measures, the National Program for Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis (PNCEBT) establish the use of intradermal tuberculin tests. The aim of this study was to analyze the response to the avian and bovine tuberculin (PPD) developed by cattle sensitized with inactivated inoculum of M. avium and M. bovis. Another aim was to compare the results of the caudal fold test (CFT), the comparative cervical test (CCT), and the simple cervical test (SCT) for tuberculosis diagnosis in the sensitize animals and in animals that have not been sensitized. Repetition of the tests did not influence the proportion of positive results. There were animals sensitized with M. bovis showing reaction up to more than 500 days post sensitization. In animals sensitized with M. avium, the specificity of the CCT was higher than that of CFT and SCT, and CCT was able to discriminate the unspecific reaction induced by M. avium inoculum. In animals sensitized with M. bovis, CCT had lower sensitivity than the other two tests. The SCT and CCT cut-off with the best combination of sensitivity and specificity was lower than that adopted by the PNCEBT for the tuberculosis diagnosis in naturally infected animals. SCT hat good agreement with the other two tests, but the agreement between CFT and CCT was... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Beatriz Bojikian Matsubara / Coorientador: Luis Cuadrado Martin / Banca: João CArlos Hueb / Banca: Roberto Jorge da Silva Franco / Banca: Fábio Villaça Guimarães Filho / Banca: Alexandre Rodrigues / Resumo: A utilização de índices eletrocardiográficos que associam a duração do QRS e do tempo de ativação ventricular melhorou a sensibilidade do exame no diagnóstico de hipertrofia ventricular esquerda, sobretudo em pacientes com doença arterial coronariana. Em pacientes com hipertensão arterial sistêmica as informações são escassas. Os objetivos deste estudo foram: avaliar a acurácia de critério que usa a duração do QRS e o tempo de ativação ventricular para detectar hipertrofia ventricular esquerda; comparar essa acurácia com critérios utilizados na prática médica; verificar quais variáveis clínicas se associam com modificações da acurácia do eletrocardiograma. O estudo foi retrospectivo, incluindo pacientes hipertensos assintomáticos, cadastrados de forma consecutiva nos ambulatórios de atendimento primário de hipertensão arterial do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu, que realizaram eletrocardiograma e ecocardiograma no mesmo dia, no período entre 2004 e 2006 para detecção de hipertrofia ventricular esquerda. Foram excluídos: portadores de valvopatia, cardiopatia congênita, infarto do miocárdio e insuficiência cardíaca, os que apresentassem no eletrocardiograma bloqueio do ramo direito, bloqueio do ramo esquerdo, fibrilação atrial, pré-excitação ventricular, ritmo de marcapasso e áreas eletricamente inativas, pacientes com fração de ejeção menor que 0,50 no ecocardiograma. Os critérios eletrocardiográficos foram: Sokolow-Lyon, Cornell, Framingham, Cornell-strain, critério de massa pelo eletrocardiograma indexada a superfície corpórea (ImECG), escore de Romhilt-Estes e de Perugia. O eletrocardiograma foi analisado por médico experiente que não conhecia o resultado do ecocardiograma. A massa ventricular esquerda indexada pela superfície corpórea, detectada ao ecocardiograma... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: not available / Doutor

Orientador: Maria Cecília Rui Luvizotto / Co-orientador: Vasco Ariston de Carvalho Azevedo / Banca: Antonio Carlos Paes / Banca: Cáris Maroni Nunes / Resumo: A tuberculose bovina é uma enfermidade infectocontagiosa granulomatosa crônica de carácter zoonótico causada pelo Mycobacterium bovis. Essa bactéria pertence ao complexo Mycobacterium tuberculosis que corresponde a um grupo de micobactérias filogeneticamente relacionadas, que apresentam considerável dificuldade no diagnóstico direto em amostras teciduais. O objetivo do presente trabalho foi avaliar linfonodos por meio de diagnóstico histopatológico e molecular, visando à detecção direta do agente em tecido. Durante a linha de inspeção de abate em frigorífico, foram selecionados 150 linfonodos com lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose. Na análise histológica pela coloração de Hematoxilia-Eosina (HE), 100% das amostras apresentaram lesões microscópicas compatíveis com tuberculose. A coloração de Zielh-Neelsen (ZN) evidenciou a presença de bacilos álcool ácido resistentes (BAAR) em 6 (4%) amostras. O método de extração para a análise molecular apresentou bons resultados, mas a amplificação dos fragmentos de DNA dos genes hsp65 e IS6110 resultaram em baixa sensibilidade. Contudo a reamplificação do gene IS6110, resultou em positividade de 63,3%, indicando que a dificuldade do diagnóstico molecular em amostras teciduais esta relacionada a quantidade reduzida de bactérias presentes nas amostras. Palavras-chave: diagnóstico, histopatologia, Mycobacterium, reação em cadeia da polmerase, tecidos / Abstract: The Bovine tuberculosis is a chronic granulomatous infectious disease of zoonotic nature caused by Mycobacterium bovis. This bacterium belongs to the Mycobacterium tuberculosis complex which corresponds to a group of phylogenetically related mycobacteria, which have considerable difficulty in diagnosing directly in tissue samples. The objective of this study was to evaluate lymph nodes through histopathologic diagnosis and molecular targeting the direct detection of the agent in tissue. During the inspection line slaughter in a fridge, we selected 150 nodes with macroscopic lesions suggestive of tuberculosis. In histological analysis by staining Hematoxilia-eosin (HE), 100% of the samples had microscopic lesions compatible with tuberculosis. The coloring Zielh-Neelsen (ZN) revealed the presence of acid- resistant bacilli (AFB) in 6 (4%) samples. The extraction method for molecular analysis showed good results, but the amplification of DNA fragments of hsp65 genes and IS6110 resulted in low sensitivity. However, the reamplification of IS6110 gene resulted in 63.3% positivity, indicating the difficulty of tissue samples for molecular diagnosis related to this reduced amount of bacteria present in samples / Mestre

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Banca: Maria Angélica Dias / Banca: Marcia Ferreira da Rosa Sobreira / Resumo: Tendo em vista a alta incidência das neoplasias mamárias e metástases em cadelas e objetivando contribuir com a oncologia veterinária na padronização de um teste simples, eficaz e acessível no diagnóstico precoce destas metástases, esse estudo teve como meta avaliar o marcador tumoral CA 15.3 no soro de cadelas saudáveis e investigar a viabilidade da quimioluminescência e do kit de reagentes desenvolvido para a espécie humana como ferramenta neste processo. Numa primeira etapa avaliou-se o soro de 100 cadelas saudáveis, de raças e idades variadas. Numa segunda etapa o soro de 10 cadelas saudáveis foi submetido ao processo de concentração de proteínas e posteriormente avaliado. Nas amostras não concentradas os níveis do marcador ficaram abaixo do limiar de detecção do kit. Nas amostras concentradas, o valor médio e respectivo desvio padrão observados foram 0,4140 ± 0,25 U/mL nas amostras com o dobro da concentração inicial e 0,5170 ± 0,25 U/mL nas amostras quatro vezes mais concentradas. Com base nos resultados obtidos neste estudo concluiu-se que o método empregado, ensaio imunoluminométrico por quimioluminescência e o kit de reagentes desenvolvido para a detecção do CA 15.3 na espécie humana mostram-se viáveis para utilização na espécie canina, necessitando entretanto de adequação da técnica / Abstract: Given the high incidence of mammary tumors and metastases in female dogs and trying to contribute with the veterinary oncology in standardization of a simple, effective and affordable technique in the early diagnosis of these metastases, this study was aimed to evaluate the tumor marker CA 15.3 in serum of healthy dogs and to investigate the feasibility and the chemiluminescence reagent kit designed for the human species as a tool in this process. In a first step we evaluated the serum of 100 healthy female dogs of different breeds and ages. In a second step, the serum of 10 healthy female dogs was subjected to the process of proteins concentration and subsequently evaluated. In samples not concentrated, the levels were below the detection of the kit. In concentrated samples, the average value and its standard deviation observed were 0.4140 ± 0.25 U/mL in the samples with at double the initial concentration, and 0.5170 ± 0.25 U/mL in samples four times more concentrated. Based on the results of this study it is concluded that the method employed, chemiluminescent immunoluminometric assay, and the reagents kit designed for detection of the CA 15.3 in humans appear to be viable for use in dogs, however requiring adjustment of the technique / Mestre