Orientador: Maricilda Palandi de Mello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T11:30:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Assumpcao_JulianaGodoy_D.pdf: 8364048 bytes, checksum: b6c70c59eb25e713fc08a610654f688d (MD5) Previous issue date: 2002 / Doutorado

Orientador: Gil Guerra Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-29T05:42:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Scolfaro_MarciaRibeiro_D.pdf: 14734881 bytes, checksum: deb593e73bb78c3c7756ecfcf443971b (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Justificativa: A Disgenesia Gonadal Parcial (DGP) é um distúrbio da diferenciação sexual caracterizado por testículos disgenéticos bilaterais, derivados dos duetos de Müller e criptorquidismo em pacientes com cariótipo 46,XY. Entretanto, os critérios histológicos diagnósticos são pouco utilizados. Objetivo: Avaliar as alterações histológicas das gônadas de crianças com DGP. Casuística e Metodologia: Entre 1996 e 1998, 13 crianças com DGP foram avaliadas em nosso serviço. O diagnóstico clínico de DGP baseou-se na presença de cariótipo 46,XY, ambigüidade genital, altas concentrações séricas de FSH e baixas de hormônio anti-Mülleriano, e baixa produção de testosterona após teste de estímulo com gonadotrofina coriônica humana, sem acúmulo dos seus precursores, e presença de derivados dos duetos de Müller. Foram realizadas biópsias de 22 das 26 gônadas (a idade na época da biópsia foi de 11 meses a 10 anos). Foi realizada a análise hist01ógica microscópica convencional para avaliar o diâmetro tubular médio, o indice de fertilidade tubular e o número de células de Sertoli por corte tubular. Resultados: Todas as 26 gônadas estavam localizadas fora das saliências labioescrotais. Os achados histológicos variaram desde apenas uma redução no tamanho tubular até achados de uma gônada "em fita". Cinco das 22 gônadas grosseiramente lembravam gônadas "em fita". O diâmetro tubular médio estava gravemente reduzido (> 30% de redução em relação ao normal para pacientes da mesma idade) em 4 gônadas, marcadamente reduzido (10% - 30%) em 11, levemente reduzido « 10%) em uma e normal em outra gônada. O indice de fertilidade tubular, expresso em % de túbulos que contêm pelo menos uma célula germinativa,estava gravementereduzido « 30% dos valores normais) em 9 gônadas, marcadamente reduzido (50% - 30%) em duas, e normal em 6 gônadas. O número de células de Sertoli por corte tubular estava elevado em 16 gônadas e normal em uma. Túbulos finos rodeados por tecido fibroso foram ocasionalmente observados. Conclusão: Os achados histológicos confirmaram o diagnóstico clínico de DGP em todos os pacientes desta amostra. Devido a variabilidade da análise histológica gonadal, um estudo morfométrico cuidadoso torna-se necessário para o estabelecimento do diagnóstico de DGP / Abstract: Background: Partial Gonadal Dysgenesis (pGD) is a sexual differentiation disorder characterized by bilateral dysgenetic testes, persistent Müllerian structures, and cryptorchidism in individuaIs with 46,XY karyotype. However, the histologic criteria for the diagnosis of PGD are poorly established. Objective: To determine gona dal histology in children with PGD. Patients and methods: Between 1996 and 1998, 13 patients with PGD were evaluated on our service. The clinical diagnosis of PGD was based on a 46,XY karyotype, sex ambiguity, high levels of FSH and low levels of AMH, a decreased testosterone response to hCG stimulation without accumulation of testosterone precursors, and the presence of Müllerian structures. Biopsies were performed for 22 of 26 gonads (patient age at the time of biopsy, 11 months to 10 years). Conventional microscopy was used to evaluate mean tubular diameter, tubular fertile index and number of Sertoli cells per tubular profile. Results: Ali 26 gonads were located outside of the labioscrotal folds. Their histologic features varied from only a reduction in tubular size to features of a streak gonad. Five of the 22 gonads grossly resembled a streak gonad. The mean tubular diameter was severely reduced (> 30% reduction relative to the normal tubular diameter for the patient's age) in 4 gonads, markedly reduced (10% - 30%) in 11, slightly reduced « 10%) in one, and normal in one gonad. The tubular fertile index, expressed in percentage of tubular profiles containing germ cells,was severely reduced « 30%of normal values)in 9 gonads, markedly reduced (50% -30%) in 2 gonads, and normal in 6 gonads. The number of Sertoli cells per tubular profile was elevated in 16 gonads and normal in one gonad. Thin tubules surrounded by fibrous tissue were occasionally observed. Conclusion: The histologic findings confirmed the clinical diagnosis of PGD in every patient in the present series. However, gonadal histology is variable, and careful morphometric evaluation may be necessary to establish the diagnosis / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Andre Moreno Morcillo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-22T03:19:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GuerraJunior_Gil_D.pdf: 3777181 bytes, checksum: edf20d9563a5de9a38131670b09b936a (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Os portadores de distúrbios da diferenciação sexual podem ser detectados ao nascimento por apresentarem ambigüidade genital, ou na puberdade por hipogonadismo. Trata-se de questões médicas urgentes e complexas, necessitando o envolvimento de vários profissionais da área da saúde para agilização e precisão na conduta diagnóstica e terapêutica desses casos. O atendimento interdisciplinar surge como alternativa para a resolução desses distúrbios. É essa a proposta do Grupo Interdisciplinar de Estudos da Determinação e Diferenciação do Sexo (GIEDDS) do Hospital das Clínicas (HC) da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Os objetivos deste trabalho foram caracterizar a população portadora de ambigüidade genital atendidada no GIEDDS; analisar a evolução e resolução dos casos; e identificar centros universitários nacionais que realizam essa avaliação. Foram analisados retrospectivamente os prontuários de 163 pacientes com diagnóstico" de ambigüidade genital acompanhados no ambulatório do GIEDDS entre janeiro de 1989 e dezembro de 1995. Realizou-se também uma pesquisa por meio de questionário padronizado enviado pelo correio a todas as faculdades de medicina do Brasil, para averiguar e caracterizar os centros nacionais universitários ligados ao atendimento de portadores de ambigüidade genital. A maioria desses 163 pacientes apresentavam, à primeira consulta, sexo social, previamente definido, predominantemente masculino; idade superior a 2 anos; baixo 'nível sócio-econômico, e pertenciam à região de Campinas (SP). Verificou-se associação entre a maior escolaridade materna e a procura pelo serviço médico em idades mais precoces e entre as classes sociais mais favorecidas e a definição prévia à primeira consulta do sexo social. O achado de maior número de casos de sexo social masculino previamente definido relacionou-se à maior freqüência de pacientes com genitália externa de aspecto mais virilizado e à presença de gônadas palpáveis. Quanto aos diagnósticos sindrômicos, 40% dos pacientes apresentavam pseudo-hermafroditismos masculinos (PHM), e os outros 60% divididos, de modo praticamente equitativo, entre pseudo-hermafroditismos femininos (PHF), distúrbios da diferenciação gonadal (DDG), e outras patologias não relacionadas a alterações cromossômicas, gonadais ou hormonais. Entre os pacientes com genitália de aspecto feminino com gônada palpável houve um predomínio de casos de insensibilidade total aos andrógenos; naqueles com genitálias de aspecto grau 1 e 2 de PRADER, os casos de PHF; nos grau 3 não ocorreu predomínio de qualquer patologia; nos grau 4 e 5 com gônadas palpáveis, os PHM; e nestes sem gônadas palpáveis, os PHF. Entre os PHM houve um predomínio dos casos idiopáticos, devido à falta de realização de exames de biologia molecular para diagnóstico principalmente de deficiência de 5-o:-redutase 2 e insensibilidade parcial aos andrógenos. A grande maiori3: dos pacientes passam a ter sexo de. criação e diagnóstico etiológico definidos antes de 12 meses de acompanhamento no GIEDDS; e procedimento cirúrgico corretivo realizado antes de 24 meses, períodos considerados ideais se todos os pacientes fossem encaminhados no período neonatal. Os centros universitários brasileiros de atendimento a esses paci'entes concentram-se nas regiões Sudeste e Sul; com predomínio do atendimento multidisciplinar, e apresentam dificuldades na resolução desses casos devido a procura tardia desses pacientes, bem como na realização de exames citogenéticos e d.e biologia molecular. Os resultados obtidos com o atendimento interdisciplinar do GIEDDS devem ~stimular a mudança de abordagem de alguQ.s desses centros existentes, a criação de outros, bem como a integração entre todos eles. POJ;ém, todos esses esforços na melhoria do atendimento dos pacientes com ambigüidade genital não alcançarão seu objetivo principal se os mesmos continuarem a ser encaminhados tardiamente. Finalmente, sugere-se que os hospitais públicos universitários possam se beneficiar com a implantação de serviços de atendimento interdisciplinar na agilização do diagnóstico e conduta de casos complexos / Abstract: Anomalies in sex differentiation can be detected at birth, due to sex ambiguity or at puberty, because of hypogonadism. These are urgent and complex problems which need several medical professionals to make diagnosis and therapy agile and accurate. The interdisciplinary approach arises as an alternative to the resolution of these anomalies. This is the aim of the Interdisciplinary Group of Study of Sex Determination and Differentiation (GIEDDS) of the Clinical Hospital (HC) of the State University of Campinas (UNICAMP). The aims of this work were to characterize the group of patients with sex ambiguity referred to the GIEDDS; to evaluate the evolution and progress of these cases; and to situate and characterize other national universitary centers that perform this evaluation. ambiguity, who were attended at GIEDDS between January, ] 989 and December, ] 995, were analysed retrospectivelly. Simultaneously, we mailed a standard questionnaire to ali faculties of medicine in Brazil, to identify and characterize these national universitary centers which care for the attendance of patients with sex ambiguity. ln the majority of the cases examined the sex of rearing was defined prior to the first consultation. The subjects were predominantely males, more than 2 years old, who had a low socio-economic standing and lived in the region of Campinas (SP). In general.' the better the level of maternal education, the earlier medical assistence was sought. Similàrly, the higher the standard of living, the more frequently was the individual's sex defined pI-ior to the first consultation. The predominance of male cases reflected the greater frequency of more virilized external genitalia and palpable gonads. Forty percent of the subjects were male pseudo-hermaph rodites (MPH), while the remaining 60% were equally divided among female pseudo-hermaphrodites (FPH), gonadal differentiation anomalies, and other disorders unrelated to chromosomes, gonads or hormones. Among patients with female external genitalia and palpable gonads, there was a predominance of cases of complete androgen resistance~ among those with grades] and 2 genitalia based on the criteria of PRADER, there were cases of FPR. In grade 3 genitalia, no disorder predominated, while in grades and 5 with palpable gonads, MPH was the most common. In the abscence of palpable gonads, FPH cases were the most common. The predominance of idiopathic MPH cases reflected the lack of molecular biology proccedures needed to the diagnosis of 5-o:-reductase 2 deficiency as well as partial androgen resistance. Most of the patients received a definition of the sex of rearing and a correct etiologic diagnosis within 12 months after the start of consultations. Surgery was performed within 24 months. These intervals represent the ideal time-scale for patients evaluated during the neonatal period. The majority of the national universitary centers offering this form of attendment are located in Southeastern and Southern Brazil. In most cases, form of multidisciplinary approach is adopted for the treatment and diagnosis. The principal difficultles encountered include the delayed seeking of medical care by the patients and a lack of facilities for performing cytogenetic and molecular tests. The results obtained by the interdisciplinary approach at the GIEDDS rnay stimulate changings in many national centers, the establishment of others, as well as the integration of ali of them. However, these efforts to improve of the care of patients with sex ambiguity will not reach the expected results if there continues to exist a delayed referral. It is suggested that university hospitais would benefit from the implantation of an interdisciplinary approach for improve the diagnosis and treatment of complex cases / Doutorado / Doutor em Pediatria

Orientador: Andrea Trevas Maciel-Guerra / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T12:16:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_JulianaGabrielRibeirode_M.pdf: 1561649 bytes, checksum: 09036be185a1beed5a46ce3cdf196d4e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Introdução: A disgenesia gonadal (DG) parcial XY, caracterizada por disgenesia testicular e genitais internos e externos ambíguos em indivíduos com cariótipo 46,XY, é uma causa rara de distúrbio da diferenciação do sexo, de prognóstico ainda não completamente elucidado e etiologia ainda desconhecida. No entanto, o conhecimento a respeito de sua evolução clínica, da ocorrência de puberdade espontânea e de anomalias associadas é fundamental para definição do sexo de criação e orientação das famílias. Além disso, como genes responsáveis pela diferenciação testicular agem como promotores do crescimento, é possível haver associação dessa afecção com distúrbios do crescimento pré e pós-natal. Objetivo: Avaliar características clínicas associadas a esse distúrbio da diferenciação gonadal: antecedentes gestacionais e familiares, crescimento, puberdade espontânea e anomalias associadas. Sujeitos e Métodos: Análise retrospectiva dos dados contidos nos prontuários de 11 pacientes com DG Parcial XY criados no sexo masculino e com ao menos um dos testículos situado na bolsa escrotal. Estes pacientes haviam sido objeto de extensa avaliação clínica, histopatológica e molecular entre 1996 e 1998. Resultados: A maioria dos pacientes atingiu altura final dentro do canal de crescimento, e todos tiveram puberdade espontânea, apesar de níveis elevados de LH em alguns casos; apenas um necessitou de reposição de andrógenos para completar o desenvolvimento puberal. Havia níveis elevados de FSH e grave oligospermia; deficiência mental foi observada em três casos e hipotireoidismo em dois. Discussão: Portadores de DG parcial XY criados no sexo masculino e que tenham ao menos um testículo tópico têm bom prognóstico quanto à puberdade espontânea, embora haja possibilidade de falência secundária das células de Leydig; já o prognóstico quanto á função reprodutora é reservado. Não há indicações de que haja distúrbios do crescimento pré e pós-natal associados à disgenesia testicular. Apesar do pequeno número amostral, a maior freqüência de déficit cognitivo e hipotireoidismo observada nesta amostra indica que é necessário haver especial atenção a estas possíveis anomalias associadas / Abstract: Introduction: XY partial gonadal dysgenesis (GD), characterized by ambiguous internal and external genitália in 46,XY subjects, is a rare cause of disorder of sex development. Both prognosis and etiology are still unknown. However, knowledge regarding natural history, spontaneous puberty and associated anomalies is essential to define sex of rearing and to discuss the prognosis with the parents. In addition, as genes responsible for testicular differentiation act as growth promoters, there may be an association of this disorder with pre and postnatal growth deficiency. Aim: To evaluate the clinical features associated with this disorder of gonadal differentiation: gestational and family history, growth, spontaneous puberty and associated anomalies. Subjects and Methods: Retrospective analysis of data from the clinical files of 11 patients with XY partial GD reared as males and who had at least one testis located in the scrotum. These patients had been subject to careful clinical, histopathological and molecular evaluation between 1996 and 1998. Results: Most patients attained final height within the limits of their growth channel, and all had spontaneous pubertal development, though some had high levels of LH. Only one needed androgen replacement to complete puberty. There were high levels of FSH and severe oligospermia. Mental deficiency was observed in three cases and hypothyroidism in two. Discussion: Patients with XY partial GD with at least one topic testis have good prognosis regarding spontaneous puberty, though there is a possibility of secondary Leydig cells' failure; there is no good prognosis regarding reproductive function. There are no indications on pre or postnatal growth deficiency associated with testicular dysgenesis. Despite the small sample size, the higher frequency of cognitive deficit and hypothyroidism indicates that there must be special attention to these associated disorders / Mestrado / Saude da Criança e do Adolescente / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Orientadores: Maricilda Palandi de Mello, Fernanda Caroline Soardi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T23:13:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Calais_FlaviaLeme_D.pdf: 3150924 bytes, checksum: 99894eda3007d837aade56d7e03bfcd4 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O estudo da relação entre erros no processo de splicing e a ocorrência de doenças se tornou uma questão importante no campo da pesquisa médica. As alterações que afetam o mecanismo de splicing podem ser a causa direta de doença, podem também modificar a gravidade fenotípica, assim como podem estar ligadas a uma maior susceptibilidade de desenvolver doenças. As mutações de splicing, que em muitos casos originam transcritos não funcionais, têm sido identificadas na grande maioria dos genes envolvidos nos distúrbios da diferenciação do sexo em humanos. A presença de alterações ou mutações em alguns destes genes, pode comprometer a biossíntese correta de proteínas essenciais para o desenvolvimento adequado das gônadas ou dos genitais externos. Através da técnica de minigene, foram estudadas mutações presentes em regiões intrônicas, em três genes essenciais para a correta diferenciação sexual humana: SRD5A2, HSD17B3 e CYP21A2 . O objetivo era verificar se alteravam o mecanismo de splicing normal ou criariam sítios alternativos de splicing. Para o gene SRD5A2, foram estudadas duas alterações: c.548-44T>G, próxima à região aceptora de splicing do intron 3; e, a alteração c.278delG, dentro da região doadora de splicing do intron 1. Os minigenes mutante e controle produziram transcritos com splicing normal, splicing alternativo produzindo um transcrito com 112 nucleotídeos deletados e um transcrito com o skipping do exon 4, porém em quantidades diferentes, o que sugere que esta alteração pode causar um desbalanceamento entre os transcritos normalmente produzidos. A mutação c.278delG, por sua vez, fez com que o spliceossomo reconhecesse um sítio 5¿ de splicing alternativo dentro do exon 1 do gene SRD5A2, produzindo um transcrito com a deleção de 38 nucleotídeos. Este transcrito apresenta um códon de parada de síntese proteica prematuro na posição 121. No gene HSD17B3 foi estudada a alteração c.277+2T>G, que se localiza na região doadora de splicing no intron 3. Neste caso o único transcrito observado como resultado do minigene mutante apresentava o skipping do exon 3 do gene HSD17B3. No gene CYP21A2 foram analisadas duas alterações: a primeira alteração é a c.939+5G>A, localizada na região doadora de splicing do intron 7, e a segunda é a c.289+127T>G, no intron 2. De forma semelhante à observada para a alteração c.548-44T>G do gene SRD5A2, tanto os minigenes controles quanto os mutantes produziram os mesmos transcritos, mas em proporções quantitativamente diferentes. Estes resultados indicam que o sistema de minigene foi adequado para o estudo, embora os resultados tenham sido mais conclusivos para as alterações localizadas nas sequências consenso de splicing, isto é para as c.278delG no gene SRD5A2 e c.277+2T>G no gene HSD17B3. Os resultados das demais alterações sugerem que a transcrição dos genes em questão produzam normalmente diferentes transcritos, mas mediante as trocas nucleotídicas, as proporções entres eles se alteram, podendo assim, afetar a função gênica correta em alguma fase crucial do desenvolvimento. Estes achados colaboraram para o esclarecimento e compreensão do fenótipo dos pacientes portadores das mutações aqui descritas, além de propiciar um melhor entendimento dos efeitos biológicos na transcrição de genes quando na presença das mutações intrônicas. Portanto, o estudo de alterações em sítios de splicing através da análise de minigenes torna-se fundamental tanto para o esclarecimento do diagnóstico clínico, como também para uma melhor comprenssão dos efeitos das mutações sobre os mecanismos moleculares de splicing / Abstract: The relation between RNA splicing and occurrence of disease in humans has been an important issue in the field of medical research. Nucleotide changes that affect the splicing mechanism can be the direct cause of disease or modulate the phenotypic severity, and also they can be linked to an increase of disease susceptibility. Splicing mutations have been identified in the vast majority of genes responsible for disorders of sex development in humans. The presence of sequence variations in some of these genes may compromise the correct biosynthesis of proteins involved in the normal development of gonads and external genitalia. Using minigene technique, mutations identified in intronic regions of three essential genes for human sexual differentiation have been studied: SRD5A2, HSD17B3 and CYP21A2. The purpose was to verify whether such mutations would abolish the normal mechanism of splicing or would create alternative splice sites. For SRD5A2 gene, two nucleotide changes have been evaluated: c.548-44T>G, located near the acceptor splice site of intron 3; and c.278delG change within intron 1 donor splice site consensus sequence. Both control and mutant minigenes produced transcripts corresponding to a normal splicing and an alternative splicing showing a transcript with the deletion of 112 nucleotides and a transcript with the exon 4 skipping. However, they differed in the amount of each transcript, suggesting that this nucleotide substitution may result in an imbalance of transcripts normally produced. The c.278delG mutation, in turn, favored the spliceosome to recognize a 5' site for an alternative splicing within exon 1 of the SRD5A2 gene yielding a transcript with the deletion of 38 nucleotides. This transcript has a premature stop codon at position 121. The c.277+2T>G nucleotide change in HSD17B3 gene is located at the splicing donor site of intron 3. In this case the only transcript seen as a result of mutant minigene showed the skipping of exon 3 of the HSD17B3 gene. For the CYP21A2 gene, two nucleotide changes were analyzed: the first is the c.939+5 G>A, located in the donor splice site of intron 7, and the second is the c.289+127T>G, which is located in intron 2. Similarly to the observed for c.548-44T>G in SRD5A2 gene, both control and mutant CYP21A2 minigenes showed transcripts that differed only in the amount produced in each construction. The results described here indicate that the chosen minigene system was adequate for the study, although the results have been more conclusive for changes localized in the consensus splicing sequences, i.e. for c.278delG in SRD5A2 gene and c.277+2T>G in HSD17B3 gene. Results for the other changes suggest that gene transcription usually involve the production of different transcripts. Upon changes in the nucleotide sequence the ratio between each transcript may alter affecting the gene function in critical stages of the development. These findings contributed to understand the phenotype of patients bearing the mutations described here, in addition provided a better understanding of the biological effects on gene transcription caused by intronic mutations. Therefore, the study of nucleotide changes in splicing sites by analyzing minigenes is fundamental both to clarify the clinical diagnosis and also for a better comprehension of the effects of mutations on the molecular mechanisms of splicing, extending our understanding of the endocrine regulation in sexual differentiation / Doutorado / Genetica Animal e Evolução / Doutora em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Marcilda Palandi de Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T17:47:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabbri_HelenaCampos_M.pdf: 5693726 bytes, checksum: f3da0b3f4f94d25ac46393e9f831a748 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O termo Distúrbio da Diferenciação do Sexo (DDS) caracteriza-se pelo desenvolvimento genital ou gonadal incompleto ou desordenado. Os DDS com cariótipo 46,XY são caracterizados por genitália externa ambígua ou feminina, em alguns casos com gônadas disgenéticas, e presença ou ausência de derivados de Müller. Os mais frequentes são a insensibilidade androgênica, deficiência da 5-alfa-redutase tipo 2, disgenesia gonadal e DDS ovário-testicular. Vários são os genes que participam dos processos de determinação e diferenciação do sexo. Alterações no gene NR5A1, que codifica o fator de transcrição SF- 1, é responsável por diferentes fenótipos de DDS. A proteína SF-1 é expressa principalmente em tecidos esteroidogênicos (gônadas, adrenais e placenta), nas células de Sertoli, nas células de Leydig e nos ovários; é o principal regulador do metabolismo do colesterol nas células esteroidogênicas. Além disso, regula a atividade de outros genes, como os CYPs, HSD3B, StAR, SOX9, DAX1, entre outros. Na literatura são descritas alterações no gene NR5A1 associadas à DDS 46,XY, anorquia bilateral, amenorréia primária, falência ovariana precoce, hipospádia, infertilidade masculina, e alguns casos de tumores adrenais e endometrioses. Neste trabalho foi realizada a análise molecular do gene NR5A1 em 86 pacientes com DDS 46,XY, incluindo-se disgenesia gonadal completa (n = 7), disgenesia gonadal parcial (n = 18), DDS 46,XY idiopático (n = 41) e outros (n = 20). Doze alterações foram identificadas neste trabalho, sendo: sete na região codificante (p.Ser32Asn, p.Arg39Cis, p.Lis38*, p.Cis65Tir, p.L80Wfs*8, p.Cis247*, and p.Asp364Trefs*18), uma em sítio de splicing (c.1138+1G>T), duas no exon 1 nãocodificante (c.-133G>A e c.-156_-136ins18pb), três na região 5'UTR (c.-413G>A, c.- 208C>A, e c.-762C>T) e uma na região 3'UTR (c.*1286C>T). As variações aqui descritas, não foram identificadas em controles saudáveis. As análises in silico demonstraram o possível efeito deletério de cada alteração e, suas relações com o fenótipo dos indivíduos. Embora estes resultados demonstrem a importância de cada alteração para o fenótipo, haverá ainda a necessidade de se investigar os efeitos funcionais in vitro. As alterações com potencial deletério foram identificadas em maior frequência nos casos dos distúrbios da diferenciação gonadal (20%) e DDS 46,XY idiopático (22%) / Abstract: The term Disorders of Sex Differentiation (DSD) characterize incomplete or disorganized genital or gonadal development. The DSD with 46, XY karyotype may present either ambiguous or female genitalia and also dysgenetic gonads in some cases, with presence or absence of Müllerian derivatives. The most frequent are androgen insensitivity, 5-alpha-reductase type 2 deficiency, gonadal dysgenesis and ovarian-testicular DSD. There are several genes that participate in both sex determination and differentiation processes. Mutations in NR5A1 gene, which encoding SF-1, a transcription factor, are responsible for different phenotypes of DSD. The protein SF-1, which is expressed mainly in steroidogenic tissues (gonads, adrenal glands and placenta), is also express in Sertoli and Leydig cells, in the ovaries, and is the major regulator of cholesterol metabolism in steroidogenic cells. Moreover, it regulates the activity of other genes, such as CYPs, HSD3B, StAR, SOX9, DAX1, among others. The literature describes the association of changes in NR5A1 gene with 46, XY DSD, bilateral anorchia, primary amenorrhea, premature ovarian failure, hypospadias, male infertility, and some cases of adrenal tumors and endometriosis. The present work involved the molecular analysis of NR5A1 gene in 86 patients with 46, XY DSD including complete gonadal dysgenesis (n = 7), partial gonadal dysgenesis (n = 18), idiopathic 46, XY DSD (n = 41) and others (n = 20). Twelve variations had been identified: seven in the coding region (p.Ser32Asn, p.Arg39Cis, p.Lis38*, p.Cis65Tir, p.L80Wfs*8, p.Cis247*, and p.Asp364Trefs*18), one at a splice site (c.1138+1 G>T), two in the noncoding exon 1 (c.-133G>A and c.-156_-136ins18pb), three in the 5'UTR region (c.- 413G>A, c.-208C>A and c.-762C>T) and one in the 3'UTR (c.*1286C>T). The variations herein described, have not been identified in healthy controls. In silico analysis showed possible deleterious effects for each change and its correlations to individual phenotypes. Although those results demonstrate the importance of each change for the phenotype, there in vitro functional effects must be investigated. The potentially deleterious changes were identified more frequently in cases of disorders of gonadal development (20%) and idiopathic 46, XY DSD (22%) / Mestrado / Genetica Animal e Evolução / Mestra em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Maria Tereza Matias Baptista / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-23T19:21:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bley_AdrianoMorad_M.pdf: 1619593 bytes, checksum: f90c6c69583af2428222da611c8342cf (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A história do diagnóstico e tratamento do indivíduo com Distúrbio da Diferenciação Sexual (intersexo) é relativamente recente dentro da história médica. A testosterona foi descoberta e disponibilizada para uso clínico no final da década de 1940 e os corticosteróides em 1950. As linhas gerais de diagnóstico e tratamento foram estabelecidos no Hospital Johns Hopkins, pela equipe do psicólogo John Money e do endócrinopediatra Lawson Wilkins, permanecendo basicamente as mesmas até hoje. Alguns aspectos destas recomendações têm sido questionados por alguns autores. Diamond e Sigmundson, inspirados em casos relatados de mudanças da genitália e de registro civil, cuja demanda partiu dos próprios pacientes organizados em grupos (Sociedade Intersexo da América do Norte; Associação de Suporte à Hiperplasia Adrenal Congênita; Grupo de Suporte à Síndrome da Insensibilidade a Andrógenos dos Estados Unidos, etc.), requerem maior participação nas decisões feitas pelos pais e médicos em fase tenra de suas vidas. Neste estudo, foram entrevistados 16 pacientes, de julho de 2004 a abril de 2007. As entrevistas ocorreram no ambulatório do GIEDDS (Grupo Interdisciplinar de Estudos da Determinação e Diferenciação do Sexo), na Universidade Estadual de Campinas, UNICAMP. As entrevistas duraram, no mínimo, uma hora e todas foram gravadas e digitadas após. Foram selecionados trechos do discurso dos pacientes e, a partir de sua escuta e leitura, foi realizada discussão de seus possíveis significados. Após exposição do desenvolvimento embriológico e das principais entidades etiológicas dos Distúrbios da Diferenciação Sexual, segue-se uma revisão de literatura que mistura genes, hormônios, receptores hormonais, masculinidade, feminilidade, sexo social e práticas sexuais. Uma vez que se propõe uma mudança de olhar em relação a este tipo de pesquisa, incluindo uma perspectiva qualitativa, precedendo a exposição e discussão dos discursos dos pacientes apresentam-se as bases filosóficas e científicas desse método. A identidade constitui-se pela somatória das metáforas e metonímias que o sujeito produz sobre si mesmo / Abstract: The management of the Disorders of Sex Development (intersex) has a relatively recent history within medical data. It follows the same guidelines established by John Money and Lawson Wilkins and cols. at Johns Hopkins since 1950. Testosterone was first synthesized and market for clinical use by the end of 1940s and corticosteroids at 1950s. Some aspects of these guidelines are being recently questioned by Diamond, Sigmundson and others, based on case reports of late sex reassignments and Intersex Groups, which demand more personal participation in decisions made for them by their parents and doctors during their first years of life. In this study 16 patients were interviewed, from July 2004 to April 2007. These interviews took place at GIEDDS - Interdisciplinary Study Group on Determination and Differentiation of Sex, at State University of Campinas - UNICAMP. They had duration of one hour each, at least. All of them were tape recorded and keyed in later. Slices of patients' speeches were selected and, from their listening and reading onwards, discussion of possible meanings of patients' words was made. An exposition of normal embryological development and the main etiological entities of Disorders of Sex Development are followed by a revision of vast material mixing genes, hormones, endocrine receptors, masculinity, femininity, social sex and sex practices. Once this study proposes a turn of mind in relation to this kind of research, including a qualitative point of view, a presentation of the bases of this method precede the exposure and discussion of patients' speeches. Identity may be constituted by the total of metaphors and metonymies the subject products from its own / Mestrado / Saude da Criança e do Adolescente / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Orientadores: Christine Hackel, Gil Guerra Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:35:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tagliarini_EduardoBecker_M.pdf: 4606034 bytes, checksum: 761d7b170dba4ff101f9c542b2f2ce1a (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Em seres humanos, a detenninação do sexo masculino dá-se pela presença de um cromossomo Y que, por meio da expressão do gene SRY, fará com que os primórdios gonadais se diferenciem em testículos. Além do SRY há outros genes envolvidos na detenninação e diferenciação masculina, tal como o WTI, que codifica um fator de transcrição do tipo "zinc-finger", essencial para o desenvolvimento gonadal e renal em mamíferos. Sabe-se que mutações germinativas do gene WTI estão relacionadas à formação de tumor de Wilms, distúrbios da diferenciação gonadal e malformações geniturinárias, encontradas nas síndromesWAGR, de Denys-Drash e de Frasier. No presente estudo avaliou-se a presença de mutações no gene WTI em 11 pacientes pré-púberes com ambigüidade genital, cariótipo 46,XY e disgenesia gonadal parcial, dois dos quais com diagnóstico clínico de síndrome de Denys-Drash (SDD). Em todos os casos foram excluídas alterações moleculares no gene SRY...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Male sex detennination in humans depends on the presence of one Y chromosome, which by SRY gene expression leads to the differentiation of the gonadal primordia into testes. Other genes are involved in male sex determination and differentiation, such as the WTl, that codes a "zinc finger" transcription factor essential to the gonadal and renal development in mammals. It is known that germinal WTl mutations are related to Wilms tumor formation, gonadal differentiation disorders and urogenital malformations, which are seen in the WAGR, Denys-Drash and Frasier syndromes. In the present study, we evaluated the presence of WTl gene mutations in eleven pre-pubertal patients with sex ambiguity, 46,XY karyotype and gonadal dysgenesis, two of them with clinical diagnosis of Denys-Drash syndrome (DDS). In all cases, molecular alterations in the SRY gene have been excluded...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas