A relação entre periodontite e doenças cardiovasculares (DCV) tem sido amplamente discutida, embora os mecanismos de interação não estejam claros. Foi sugerido que pacientes com periodontite apresentam inflamação sistêmica e um pequeno aumento no risco cardiovascular. Patógenos periodontais foram encontrados em placas de ateroma, mas a influência destes microrganismos na aterosclerose ainda não é compreendida. O objetivo primário deste estudo foi delinear o perfil inflamatório sistêmico de pacientes submetidos à endarterectomia carotídea. Os objetivos secundários foram associar o perfil inflamatório dos participantes à condição periodontal e à presença de patógenos orais encontrados na cavidade oral e em placas de ateroma. Trinta e cinco pacientes submetidos à endarterectomia carotídea foram incluídos neste estudo. Antes da cirurgia vascular, um exame clínico periodontal foi realizado e foram coletadas amostras de sangue, saliva e biofilme subgengival. Durante a endarterectomia, uma amostra da placa de ateroma foi coletada. As amostras de soro foram testadas com o ensaio imunoenzimático de alta sensibilidade Multiplex para dezessete marcadores de células Th17. Amostras de saliva, biofilme subgengival e placa de ateroma foram submetidas ao PCR quantitativo para avaliação de dez patógenos periodontais. Este estudo foi capaz de detectar vários marcadores inflamatórios circulantes, o que indica a presença de inflamação sistêmica como uma característica da população. T. forsythia foi o microrganismo mais frequentemente encontrado em amostras de ateroma (37% das amostras). Níveis de T. forsythia em amostras de ateroma foram positivamente correlacionados com os níveis séricos de IL-7, IL-6, IL-17, IL-13, IL-12p70, IFN-?, GCS-F (p<0,05) e IL-10 (p<0,01). Níveis séricos de IL-2 foram positivamente correlacionados com os concentrações salivares de P. intermedia, P. endodontalis (p<0,05) e T. denticola (p<0,01). Níveis séricos de TNF-? foram positivamente correlacionados com concentrações salivares de P. endodontalis (p<0,01). Concentrações de P. endodontalis em amostras subgengivais foram correlacionadas positivamente com IL-2 (p<0,05). A inflamação periodontal (PISA) foi positivamente correlacionada com IL-2 (p<0,05). A coexistência de patógenos periodontais comuns na cavidade oral e na placa de ateroma está associada a um estado inflamatório sistêmico, o que poderia ser relevante para a compreensão dos mecanismos que ligam periodontite com DCV. / The relationship between periodontitis and cardiovascular diseases (CVD) has been widely discussed, although the mechanisms of interaction are not clear. It has been suggested that patients with periodontitis exhibit systemic inflammation and mild increase in future cardiovascular risk. Periodontal pathogens have been found in atheromatous plaques, but their exact role in atherosclerosis are not yet undertstood. The primary aim of this study was to screen the systemic inflammation profile in patients undergoing carotid endarterectomy. The secondary aims were to associate participant\'s inflammatory profiles with periodontal status and the presence of periodontal pathogens found in oral cavity and atheromatous plaques. Thirty-five patients who underwent carotid endarterectomy were enrolled in this study. Prior to the vascular surgery, a clinical periodontal exam was conducted, and samples of blood, saliva and subgingival biofilm were collected. During endarterectomy, a sample of the atheromatous plaque was retrieved. Serum samples were assayed with high sensitivity Multiplex assay for seventeen Th17 biomarkers. Saliva, subgingival biofilm and atheromatous plaque samples were submited to quantitative PCR for ten periodontal pathogens. This study was able to detect several circulating inflammatory markers, indicating the systemic inflammatory burden as a characteristic of this population. T. forsythia was the more frequent microorganism found in atheromatous samples (37% of the samples). T. forsythia titres in atheromatous samples were positively correlated with serum levels of IL-7, IL-6, IL-17, IL-13, IL-12p70, IFN- ?, GCS-F (p<0.05) and IL-10 (p<0.01). Circulating levels of IL-2 were positively correlated with salivary titres of P. intermedia, P. endodontalis (p<0.05) and T. denticola (p<0.01). Circulating levels of TNF-? were positively correlated with salivary titres of P. endodontalis (p<0.01). Subgingival levels of P. endodontalis were positively correlated with IL-2 (p<0.05). Periodontal inflammation (PISA) was positively correlated with IL-2 (p<0.05). The co-existence of common periodontal pathogens in the oral cavity and in atheromatous plaque is associated with a systemic inflammatory state that could be relevant to understanding the mechanisms linking periodontitis to CVD.

OMP29 é uma das principais proteínas de membrana externa de Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) e está associada à invasão de célula epitelial gengival (CEG). Os objetivos deste estudo foram: analisar filogeneticamente omp29 e omp29 parálogo (omp29par), em cepas de Aa; determinar a interação de OMP29 com proteínas de matriz extracelular e o efeito da sua interação com CEG, pela avaliação da expressão gênica e produção de mediadores inflamatórios. Variações filogenéticas foram observadas para omp29 e omp29par, bem como para os seus promotores e estas relacionam-se com os sorotipos. A proteína recombinante OMP29his interagiu com fibronectina plasmática e celular (p<0,05), mas não com os domínios F30 e 45 ou com colágenos tipo I, III, IV e V, fibrinogênio, laminina e plasminogênio. A interação das mutantes de Aa deficientes em omp29 e/ou omp29par (obtidas pelo sistema LoxP/Cre) e OMP29his com CEG OBA-09 demonstrou que OMP29 regula positivamente il-18 e negativamente il-6r e il-8 (p<0,05). Os dados sugerem que OMP29 está envolvida na evasão do sistema imune. / OMP29 is one of the major outer membrane proteins of Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) and is associated with invasion into gingival epithelial cells (GEC). This study aimed to evaluate phylogenetically omp29 and omp29 paralogue (omp29par) in Aa strains; determine the interaction of OMP29 with extracellular matrix proteins and its effect on GEC by gene expression analysis and production of inflammatory mediators. Phylogenetic variations were observed for omp29 and omp29par as well as their promoters, and they were related to the serotypes. The recombinant protein OMP29his interacted with plasma and cellular fibronectin (p <0.05), but not to F30 and F45 domains, neither to collagens I, III, IV and V, fibrinogen, laminin and plasminogen. The interaction of Aa mutants defective in omp29 and/or omp29par (obtained by LoxP system/Cre) and OMP29his with CEG OBA-09 indicated that OMP29 regulates positively il-18 and negatively il-6r and il-8 (p <0.05). Data suggested that OMP29 is involved in bacterial evasion of the immune system.

Pontifícia Universidade Católica do Rio de Janeiro / Diabetes mellitus e doenças periodontais são altamente prevalentes na população mundial. Doenças periodontais (DPs) compreendem um grupo de condições crônicas inflamatórias induzidas por microorganismos que levam à inflamação gengival, à destruição tecidual periodontal e à perda óssea alveolar. Diabetes mellitus (DM) é o termo utilizado para descrever um grupo de desordens metabólicas associadas à intolerância à glicose e ao metabolismo inadequado de carboidratos. Uma vez que DPs poderiam agir de forma similar a outros estados infecciosos sistêmicos, aumentando a severidade do diabetes, uma possível relação entre ambas tem sido considerada em todo o mundo. Polimorfismos genéticos de um único nucleotídeo (SNPs) têm sido estudados em diversas doenças. Nas periodontites, acredita-se que possam estar envolvidos na exacerbação da resposta inflamatória frente ao desafio bacteriano, modificando a susceptibilidade do hospedeiro. Neste estudo, a prevalência de periodontite foi avaliada em portadores de diabetes mellitus tipo I. Posteriormente, o SNP localizado na região promotora do gene TNFA (-1031T>C) foi analisado e sua importância para a doença periodontal destrutiva foi avaliada. O grupo teste foi constituído por diabéticos tipo I (DGT, n=113) enquanto o grupo controle por indivíduos não diabéticos (ND, n=73). Para as análises dos polimorfismos genéticos, um subgrupo foi retirado do grupo teste (DG, n=58) e comparado ao grupo ND. Os seguintes parâmetros clínicos e demográficos foram avaliados: percentual de sítios com profundidade de bolsa &#61619; 6,0 mm (%PBS&#61619;6,0 mm); índice gengival (IG); perda óssea radiográfica (POR); fumo; duração do diabetes ; idade; índice de massa corpórea (IMC), n&#61616; de internações e n&#61616; de dentes presentes. Amostras de sangue e/ou esfregaço bucal foram colhidas de 58 pacientes do grupo teste e de 73 controles. Após a extração do DNA genômico e amplificação da região genômica de interesse por PCR (Polymerase Chain Reaction), o polimorfismo TNFA 1031T>C foi analisado por BbsI RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). A análise dos produtos de digestão foi feita por eletroforese em gel de poliacrilamida 8%. A análise estatística das freqüências alélica e genotípica juntamente com os dados clínicos e epidemiológicos entre os 2 grupos foi feita através do teste do Mann-Whitney e do Qui-quadrado. Os grupos de estudo obedecem ao princípio de Hardy-Weinberg. No grupo ND, as seguintes freqüências genotípicas foram encontradas: 78,1% (T/T); 20,5% (T/C) e 1,4% (C/C) enquanto no grupo D foram: 42,4%(T/T); 37,3% (T/C) e 20,3% (C/C). A frequência do alelo T no grupo diabético (D) foi de 0,610 ao passo que no grupo ND foi de 0,883. Não foi possível encontrar uma relação entre o polimorfismo -1031 T>C do gene TNFA e a presença de periodontite em diabéticos tipo I. Entretanto, o polimorfismo estudado se mostrou significativamente relacionado (p<0,0001 e OR= 4.85 95%IC 2,271-10,338) à presença do diabetes tipo I. / Diabetes mellitus and periodontal diseases are highly prevalent worldwide. Periodontal disease (PD) combines a group of chronic inflammatory conditions induced by microorganisms that leads to gingival inflammation, periodontal tissue destruction and alveolar bone loss. Diabetes mellitus (DM) is a term used to describe a group of metabolic disorders associated to glucose intolerance and inappropriate carbohydrate metabolism. Once PDs could act in a similar way to other systemic infectious states increasing diabetes severity, a possible correlation between both has been considerate around the world. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) have been studied in relation to several diseases. In periodontitis, it is believed to be involved in an exacerbated inflammatory response due to bacterial challenge, modifying the host susceptibility. In this study, the prevalence of periodontal disease was evaluated in type I diabetes patients (TIDM). Further on, the SNP in the promoter region of the TNFA gene (-1031T>C) was analyzed and its importance to destructive periodontal disease was considered. The test group was formed by type I diabetic patients (TDG, n=113) and the control group was composed by non-diabetic patients (ND, n=73). For the genetic polymorphism analysis a subgroup was taken from the test group (DG, n=58) and compared to the ND group. The following clinical and demographic parameters were assessed: percentage of sites with periodontal pocket depth (PPD) &#61619; 6.0mm; gingival index (GI); radiographic bone loss (RBL); smoking habits; diabetes duration; age; bone mass index (BMI); number of admissions and number of teeth. Blood samples and oral epithelial cells were collected from 58 patients of the test group and 73 controls. After genomic DNA extraction and amplification of the genomic region of interest by PCR (Polymerase Chain Reaction), the TNFA 1031T>C polymorphism was analyzed by BbsI RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). Analysis of the digestion products were performed by 8% polyacrylamide gel electrophoresis. The statistical analysis of the genotypes and allelic frequencies along with the clinical and epidemiological data between the two groups were done through the Mann-Whitney and Chi-square tests. The study groups are in Hardy-Weinberg equilibrium. In the ND group, the following genotypic frequencies were found: 78.1% (T/T); 20.5% (T/C) e 1.4% (C/C), while for the D group, they were: 42.4% (T/T); 37.3% (T/C) e 20.3% (C/C). The frequencies of T allele in the D and ND groups were 0.610 and 0.883, respectively. It was not possible to find any correlation between the -1031 T>C promoter polymorphism of the TNFA gene and the presence of periodontitis in type I diabetic patients. However the studied polymorphism showed to be significantly related (p<0.0001 and OR=4.85 95%CI 2.271-10.338) to the presence of type I diabetes mellitus.

Pontifícia Universidade Católica do Rio de Janeiro / Diabetes mellitus e doenças periodontais são altamente prevalentes na população mundial. Doenças periodontais (DPs) compreendem um grupo de condições crônicas inflamatórias induzidas por microorganismos que levam à inflamação gengival, à destruição tecidual periodontal e à perda óssea alveolar. Diabetes mellitus (DM) é o termo utilizado para descrever um grupo de desordens metabólicas associadas à intolerância à glicose e ao metabolismo inadequado de carboidratos. Uma vez que DPs poderiam agir de forma similar a outros estados infecciosos sistêmicos, aumentando a severidade do diabetes, uma possível relação entre ambas tem sido considerada em todo o mundo. Polimorfismos genéticos de um único nucleotídeo (SNPs) têm sido estudados em diversas doenças. Nas periodontites, acredita-se que possam estar envolvidos na exacerbação da resposta inflamatória frente ao desafio bacteriano, modificando a susceptibilidade do hospedeiro. Neste estudo, a prevalência de periodontite foi avaliada em portadores de diabetes mellitus tipo I. Posteriormente, o SNP localizado na região promotora do gene TNFA (-1031T>C) foi analisado e sua importância para a doença periodontal destrutiva foi avaliada. O grupo teste foi constituído por diabéticos tipo I (DGT, n=113) enquanto o grupo controle por indivíduos não diabéticos (ND, n=73). Para as análises dos polimorfismos genéticos, um subgrupo foi retirado do grupo teste (DG, n=58) e comparado ao grupo ND. Os seguintes parâmetros clínicos e demográficos foram avaliados: percentual de sítios com profundidade de bolsa &#61619; 6,0 mm (%PBS&#61619;6,0 mm); índice gengival (IG); perda óssea radiográfica (POR); fumo; duração do diabetes ; idade; índice de massa corpórea (IMC), n&#61616; de internações e n&#61616; de dentes presentes. Amostras de sangue e/ou esfregaço bucal foram colhidas de 58 pacientes do grupo teste e de 73 controles. Após a extração do DNA genômico e amplificação da região genômica de interesse por PCR (Polymerase Chain Reaction), o polimorfismo TNFA 1031T>C foi analisado por BbsI RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). A análise dos produtos de digestão foi feita por eletroforese em gel de poliacrilamida 8%. A análise estatística das freqüências alélica e genotípica juntamente com os dados clínicos e epidemiológicos entre os 2 grupos foi feita através do teste do Mann-Whitney e do Qui-quadrado. Os grupos de estudo obedecem ao princípio de Hardy-Weinberg. No grupo ND, as seguintes freqüências genotípicas foram encontradas: 78,1% (T/T); 20,5% (T/C) e 1,4% (C/C) enquanto no grupo D foram: 42,4%(T/T); 37,3% (T/C) e 20,3% (C/C). A frequência do alelo T no grupo diabético (D) foi de 0,610 ao passo que no grupo ND foi de 0,883. Não foi possível encontrar uma relação entre o polimorfismo -1031 T>C do gene TNFA e a presença de periodontite em diabéticos tipo I. Entretanto, o polimorfismo estudado se mostrou significativamente relacionado (p<0,0001 e OR= 4.85 95%IC 2,271-10,338) à presença do diabetes tipo I. / Diabetes mellitus and periodontal diseases are highly prevalent worldwide. Periodontal disease (PD) combines a group of chronic inflammatory conditions induced by microorganisms that leads to gingival inflammation, periodontal tissue destruction and alveolar bone loss. Diabetes mellitus (DM) is a term used to describe a group of metabolic disorders associated to glucose intolerance and inappropriate carbohydrate metabolism. Once PDs could act in a similar way to other systemic infectious states increasing diabetes severity, a possible correlation between both has been considerate around the world. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) have been studied in relation to several diseases. In periodontitis, it is believed to be involved in an exacerbated inflammatory response due to bacterial challenge, modifying the host susceptibility. In this study, the prevalence of periodontal disease was evaluated in type I diabetes patients (TIDM). Further on, the SNP in the promoter region of the TNFA gene (-1031T>C) was analyzed and its importance to destructive periodontal disease was considered. The test group was formed by type I diabetic patients (TDG, n=113) and the control group was composed by non-diabetic patients (ND, n=73). For the genetic polymorphism analysis a subgroup was taken from the test group (DG, n=58) and compared to the ND group. The following clinical and demographic parameters were assessed: percentage of sites with periodontal pocket depth (PPD) &#61619; 6.0mm; gingival index (GI); radiographic bone loss (RBL); smoking habits; diabetes duration; age; bone mass index (BMI); number of admissions and number of teeth. Blood samples and oral epithelial cells were collected from 58 patients of the test group and 73 controls. After genomic DNA extraction and amplification of the genomic region of interest by PCR (Polymerase Chain Reaction), the TNFA 1031T>C polymorphism was analyzed by BbsI RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). Analysis of the digestion products were performed by 8% polyacrylamide gel electrophoresis. The statistical analysis of the genotypes and allelic frequencies along with the clinical and epidemiological data between the two groups were done through the Mann-Whitney and Chi-square tests. The study groups are in Hardy-Weinberg equilibrium. In the ND group, the following genotypic frequencies were found: 78.1% (T/T); 20.5% (T/C) e 1.4% (C/C), while for the D group, they were: 42.4% (T/T); 37.3% (T/C) e 20.3% (C/C). The frequencies of T allele in the D and ND groups were 0.610 and 0.883, respectively. It was not possible to find any correlation between the -1031 T>C promoter polymorphism of the TNFA gene and the presence of periodontitis in type I diabetic patients. However the studied polymorphism showed to be significantly related (p<0.0001 and OR=4.85 95%CI 2.271-10.338) to the presence of type I diabetes mellitus.

O objetivo desta revisão sistemática foi analisar os estudos que relacionam doença periodontal e nascimento prematuro e baixo peso, verificando o efeito da doença periodontal materna no desfecho da gestação. Foi realizada pesquisa nas seguintes bases de dados: PubMed, Scielo e LILACS até Dezembro de 2007. A revisão sistemática foi conduzida de forma a identificar os estudos capazes de preencher os critérios de inclusão, apresentando aspectos clínicos, microbiológicos e radiográficos da doença periodontal, assim como os desfechos da gestação, ou seja, nascimento prematuro e baixo peso. Foram então selecionados 35 (trinta e cinco) artigos, sendo 9 (nove) coorte, 16 (dezesseis) casos controles, e 10 (dez) ensaios clínicos. A associação entre a doença periodontal materna e o nascimento de bebê prematuro com baixo peso foi encontrada em 26 (vinte e seis) estudos: 7 (sete) coorte, 11 (onze) casos controles e 8 (oito) ensaios clínicos. Não foi possível realizar uma meta-análise devido à grande heterogeneidade entre os estudos, particularmente no que se refere aos métodos de mensuração da doença periodontal. Um melhor controle em relação aos fatores de confusão também permitiria uma confiança maior nos resultados e conclusões apresentadas. Ainda não é possível ter conclusões adequadas do real efeito da doença periodontal sobre os desfechos da gestação devido a limitações nas metodologias dos presentes estudos. Portanto, a evidência da relação da doença periodontal com o nascimento de bebê prematuro e baixo peso é limitada. Ainda existe a necessidade de novos e bem desenhados estudos observacionais e de intervenção, que possam confirmar o que até agora é visto apenas como uma possível associação, explorando a validade dessas possíveis associações em diferentes populações e controlando adequadamente as variáveis de confusão. / The objective of this systematic review was to analyse the studies that relate the periodontal disease and the preterm and low birth weight deliveries, assessing the effect of the maternal periodontal disease in the pregnancy outcome. A research was conducted in the following databases: PubMed, Scielo and LILACS until December 2007. The systematic review was undertaken to identify the researches that met the inclusion criterias, addresssing aspects of periodontal disease: clinical, radiographic, microbiological and immunological, and pregnancy outcomes, like preterm low birth weight as well. In that case, 35 (thirty five) studies were selected, 9 (nine) cohort, 16 (sixteen) case controls, and 10 (ten) clinical trials. The association between maternal periodontal disease and preterm low birth weight was found in 26 (twenty six) studies: 7 (seven) cohort, 11 (eleven) case controls and 8 (eight) clinical trials. A meta-analysis was not performed due to the extensive and clear heterogenity of the studies, particulary regarding the periodontal disease measures. An adequate control for confounders would permit results and conclusions more reliable. It is not possible to know the real effect of the periodontal disease in the pregnancy outcomes until now, because of the methodology limitations of the current studies. Therefore, the evidence of the relation of the periodontal disease with the preterm low birth weight is limited. There is a need for new and well designed observational and interventional studies to confirm, what so far is only a possible association, to explore the validity of the association in different populations, correctly control for confounders.

A doença periodontal (DP) compreende um grupo de lesões que afetam os tecidos periodontais de proteção (gengivite) e suporte (periodondite), envolvendo a participação de células residentes, células estruturais e mediadores inflamatórios. Pesquisas recentes mostram a existência de um Sistema Renina Angiotensina (SRA) local no tecido gengival de ratos e sugeriram que o SRA está envolvido na iniciação da progressão da DP induzida experimentalmente em ratos. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar se o enalapril, inibidor da enzima conversora de angiotensina (ECA), reduz a perda óssea e a expressão de componentes do SRA no tecido gengival. Para tanto foi utilizado o modelo de indução da DP por colocação de ligadura ao redor do primeiro molar inferior de ratos e tratamento destes animais com enalapril (20 mg/kg/dia, gavage), sendo utilizado micro CT para análise do volume ósseo. Os grupos experimentais foram os seguintes (n = 5): Grupo 1 - pré-tratamento com enalapril por 14 dias, indução da DP e pós-tratamento por 14 dias; Grupo 2 pré-tratamento com enalapril por 14 dias, indução da DP e pós-tratamento por 7 dias; Grupo 3 - pré-tratamento com enalapril por 7 dias, indução da DP e pós-tratamento por 14 dias; Grupo 4 - pré-tratamento com enalapril por 7 dias, indução da DP e pós-tratamento por 7 dias. Para fins de comparação, em todos os grupos, além do tratamento com enalapril, outros animais receberam água (n = 5) e em outros (n = 5) foi realizada cirurgia fictícia para indução da DP (sham). Foram realizadas análises de perda óssea alveolar e reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) dos seguintes componentes do SRA como Angiotensinogênio (AGT), ECA, ECA-2 e dos receptores AT1a, AT1b, AT2 e Mas). Os dados foram devidamente analisados por meio de gráficos, sendo utilizado o teste t para comparação dos animais tratados com enalapril ou água com os respectivos sham, adotando-se o nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram que apenas no grupo com o menor tempo de pré-tratamento com o enalapril (Grupo 3) não houve bloqueio da perda óssea, porém nos demais grupos houve diminuição de forma estatisticamente significativa deste parâmetro (Grupos 1, 2 e 3). Em relação à análise molecular, de todos os alvos testados, apenas a expressão do AGT e receptor Mas foi alterada, com aumento estatisticamente significativo da expressão do RNAm para esta enzima identificado no grupo 4. Em conclusão, o pré-tratamento com enalapril, inibidor da ECA, pode prevenir a perda óssea alveolar no modelo de DP induzida experimentalmente em ratos. / Periodontal disease (PD) comprises a group of injuries affecting the periodontal tissue protection (gingivitis) and support (periodondite), involving the participation of resident cells, structural cells and inflammatory mediators. Recent research has shown the existence of a Renin Angiotensin System (RAS) site in the gingival tissue of rats and suggested that the SRA is involved in the onset of progression of PD experimentally induced in rats. Therefore, the aim of this study was to evaluate whether enalapril, angiotensin converting enzyme (ACE), bone loss and reduces the expression of RAS components in the gingival tissue. For this model was used for induction of PD placement of ligature around the mandibular first molar of rats and treatment of these animals with enalapril (20 mg / kg / day gavage) being used for micro-CT analysis of bone volume. The experimental groups were as follows (n = 5 each): Group 1 - the pre-enalapril treatment for 14 days, and DP induction of post-treatment for 14 days, Group 2 - the pre-enalapril treatment for 14 days, induction of DP and after treatment for 7 days and Group 3 - pre-enalapril treatment for 7 days, induction of PD-and post-treatment for 14 days, and Group 4 - the pre-enalapril treatment for 7 days, induction of post-treatment DP, and for 7 days. For comparison, all groups, and treatment with enalapril other animals received water (n = 5) and other (n = 5), sham surgery was performed to induce PD (sham). Analyses of alveolar bone loss and polymerase chain reaction quantitative (qPCR) of the following RAS components (angiotensinogen, ACE, ACE-2 receptor and AT1a, AT1b, AT2 and Mas). The data were properly analyzed by means of graphs, by using the t test for comparison of animals treated with enalapril or water with their sham, adopting a significance level of 5%. The results showed that only in the group with the shortest pre-treatment with enalapril (Group 3) showed no blocking of bone loss, but the other groups was statistically significant decrease in this parameter (Groups 1, 2 and 3). Regarding the molecular analysis of all targets tested, only the expression of angiotensinogen and Mas receptor was altered, with a statistically significant increase in the expression of mRNA for this enzyme identified in group 4. In conclusion, pre-treatment with enalapril ACE inhibitor can prevent bone loss in PD model experimentally induced in rats.

Trata-se de estudo comparativo para avaliar a atividade dos medicamentos nimesulida, Arnica TM, Arnica 6CH comparados com H2O no tratamento da Doença Periodontal experimental induzida por ligadura em ratos. Esta doença se caracteriza por processo inflamatório que pode evoluir até ao ligamento periodontal e tecido ósseo provocando perda óssea. Mediadores produzidos pelo hospedeiro e substâncias do biofilme são responsáveis pelos danos que podem levar até a perda do elemento dentário. O objetivo deste trabalho foi desenvolver estudo exploratório descritivo para analisar, aprofundar e comparar os efeitos das medicações citadas, investigando possíveis inovações no tratamento da doença periodontal. A metodologia consistiu em: 1) colocação, sob anestesia, da ligadura no primeiro molar inferior esquerdo. 2) administração diária por gavagem de H2O (controle) (1&#x3BC;l/g), nimesulida (1&#x3BC;l/g, de uma suspensão com 5mg/ml), Arnica TM (8&#x3BC;l/300g) ou Arnica 6CH (3,21&#x3BC;l/300g) durante 14, 21 e 28 dias a quatro grupos de ratos Wistar (n=30/ grupo); 3) eutanásia e coleta de material para análises histológica, da perda óssea e RT-PCR (alvos: TNF-&#x3B1;, COX-2, IL-6, OPG e RANKL); 4) análise estatística paramétrica realizada por ANOVA a um ou dois critérios, seguida do teste de Tukey, ou por análise não paramétrica por Kruskal-Wallis, seguido do método de Dunns, nível de significância de 5%. Quanto à perda óssea, não houve diferença estatística entre os grupos e nenhum dos tratamentos foi capaz de contê-la. Os escores para o infiltrado inflamatório não mostraram diferença significativa entre os grupos nos períodos estudados. Quanto ao escore geral, que envolve intensidade do infiltrado inflamatório, migração do epitélio juncional, integridade do cemento e da crista óssea alveolar, não houve diferença significativa entre os grupos nos períodos. Na expressão do RNAm para as citocinas vimos para o TNF-&#x3B1; não haver diferença significativa entre os grupos, quando se analisou isoladamente os períodos de 14 e 28 dias. No entanto, no período de 21 dias, houve redução significativa no grupo nimesulida comparado ao grupo Arnica 6CH (&#x2217;p<0,05). Para a COX-2, não houve diferença significativa quanto à expressão do RNAm entre os grupos, analisando isoladamente cada período de estudo, sendo nítida a redução desta expressão no grupo Arnica 6CH em todos os períodos; para a IL-6, OPG e RANKL não houve diferença significativa quanto à expressão do RNAm entre os grupos nos períodos estudados. No entanto, no grupo Arnica 6CH nota-se tendência nítida para o aumento da expressão do RNAm para OPG, ao longo do tempo. Comparando com o grupo H2O a ação de cada medicamento quanto à expressão do RNAm para todas as citocinas, considerando o conjunto dos 3 períodos, vê-se redução significativa para a expressão de RNAm para COX-2 e RANKL após o tratamento com Arnica 6CH (&#x2217;p<0,05). O mesmo pode ser visto para a nimesulida quando se estuda a expressão do RNAm para RANKL (&#x2217;p<0,05). No estudo ficaram destacados os efeitos biológicos da Arnica 6CH sobre a leitura e transcrição do DNA, notadamente sobre genes relacionados à perda óssea, o que vislumbra a possibilidade de sua utilização terapêutica. / This is a comparative study to evaluate the activity of nimesulide medicines, Arnica TM, Arnica 6CH compared with H2O in the treatment of experimental periodontal disease induced by ligation in rats. This disease is characterized by an inflammatory process that may progress to the periodontal ligament and bone tissue leading to bone loss. Mediators produced by the host and biofilm substances are responsible for the damage that can lead to tooth loss. The aim of this exploratory and descriptive study was to analyze, deepen and compare the effects of the mentioned medications, investigating possible innovations in the treatment of periodontal disease. The methodology consisted of: 1) placing under anesthesia ligature in the first lower left molar. 2) daily administration by gavage H2O (control) (1&#x3BC;l/g), nimesulide (1&#x3BC;l/g, a suspension of 5 mg / ml), Arnica TM (8&#x3BC;l/300g) or Arnica 6CH (3,21&#x3BC;l/300g) for 14, 21 and 28 days to four groups of Wistar rats (n = 30 / group); 3) euthanasia and collection of material for histological, bone loss and RTPCRanalysis (targets: TNF-&#x3B1;, COX-2, IL-6, OPG and RANKL); 4) parametric statistical analysis performed by ANOVA to one or two criteria, followed by Tukey test, or nonparametric analysis by Kruskal-Wallis, followed by Dunns method, 5% significance level. Regarding the bone loss, there was no statistical difference between the groups and none of the treatments was able to contain it. The scores for the inflammatory infiltrate showed no significant difference between the groups in the study periods. Regarding the general score, which involves intensity of the inflammatory infiltrate, migration of the junctional epithelium integrity of the cement and the alveolar bone crest, there was no significant difference between groups in the periods. At the mRNA expression for the cytokines we saw for TNF-&#x3B1; no significant difference between groups when analyzed separately periods of 14 and 28 days. However, in the 21day period, there was significant reduction in nimesulide group compared to the Arnica 6CH group (&#x2217; p <0.05). For COX-2, there was no significant difference in mRNA expression between the groups, separately analyzing each study period, being sharper reduction of this expression in Arnica 6CH group in all periods; for IL-6, OPG and RANKL no significant difference in mRNA expression between the groups in the study periods. However, it is noted in the Arnica 6CH group a clear tendency to increase of the mRNA expression for OPG over time. Comparing with H2O group action of each medicine on the mRNA expression for all cytokines, considering the set of three periods, we see a significant reduction in mRNA expression for COX-2 and RANKL after treatment with Arnica 6CH (&#x2217; p <0.05). The same can be seen for nimesulide when studying the mRNA expression for RANKL (&#x2217; p <0.05). In the study were highlighted the biological effects of Arnica 6CH about reading and transcription of the DNA, notedly about genes related to bone loss, which envisions the possibility of its therapeutic use.

O Sistema Renina-angiotensina (SRA), e um sistema capaz de gerar hormonios peptideos com grande impacto na regulacao cardiovascular e na patogenese das doencas cardiovasculares. Este sistema opera, por meio das acoes da Angiotensina II, tanto em nivel sistemico (endocrino) quanto tecidual (local, paracrino/autocrino) controlando importantes funcoes, varias delas relacionadas a facilitacao da instalacao e progressao do processo inflamatorio. Por este motivo, a producao desta proteina nos tecidos pode estar relacionada a patogenese de muitas doencas, dentre elas a doenca periodontal (DP), tendo em vista seu carater infeccioso-inflamatorio e os achados da literatura que mostram que a inibicao da formacao de Ang II, diminui a perda óssea da DP em animais. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivos: Avaliar in vitro, a) A expressao de componentes do SRA (ANGT, RENINA, ECA, ECA-2, AT1, AT2 e Mas) por fibroblastos de gengiva e ligamento periodontal humanos, por RT-qPCR; b) A producao de componentes do SRA (RENINA, ECA, ECA-2) no sobrenadante de culturas de fibroblastos de gengiva e ligamento periodontal humanos, por ELISA; c) A producao dos receptores do SRA (AT1, AT2 e Mas), nestes fibroblastos, por Imunofluorescencia e d) Se a expressao e a producao dos componentes do SRA por fibroblastos de gengiva e ligamento periodontal humanos, se alteram com a estimulacao por LPS de P. gingivalis e E. coli. Apos a coleta, os dados foram analisados com o auxilio do programa GraphPad Prism 5.0. por meio da analise de variancia a 2 criterios (ANOVA-two way) seguida do pos teste de Bonferroni, com nivel de significancia de 5% para a verificacao das possíveis diferencas. Foi detectada a expressao genica para alguns dos componentes do SRA (ANGT, RENINA, ECA, AT1) por fibroblastos tanto de gengiva quanto de ligamento periodontal. Foi detectada ainda uma expressao genica diferenciada entre fibroblastos de gengiva e ligamento periodontal para a ECA, sendo significativamente maior nos fibroblastos da gengiva. Houve imunomarcacao positiva tanto nos fibroblastos de gengiva quanto de ligamento periodontal compativel com a presenca dos receptores AT1 e Mas. Pode-se observar por fim que o contato com LPS de P. gingivalis e E. coli, na concentracao de 10 g/mL/24 h, nao alteram a expressão dos componentes do SRA. Portanto, pode-se concluir que os fibroblastos tanto de gengiva quanto de ligamento periodontal apesar de nao expressarem e produzirem todos oscomponentes do SRA necessarios para a formacao local de Ang II, poderiam contribuir, ainda que parcialmente, com outras celulas do microambiente dos tecidos periodontais para a formacao e acao locais da Ang II, e assim, para a instalacao e progressao da DP. / The Renin-angiotensin system (RAS) can generate hormones that have a high-impact on cardiovascular regulation as well as in the pathogenesis of cardiovascular disease. This system acts through both systemic (endocrine) and local (paracrine/autocrine) effects of Angiotensin II, controlling important functions related to the facilitation of installation and progression of the inflammatory process. For this reason, this proteins production in tissues can be associated to the pathogenesis of many diseases, including periodontal disease (PD). In the PD setting, a infectious-inflammatory characterized disease, the literature findings shows that inhibition of the Ang II formation can decrease the bone loss in animals. In this context, the aims of the present study were: to investigate in vitro: a) the expression of RAS components (ANGT, RENIN, ECA, ECA- 2, AT1, AT2 and Mas) by human gingival and periodontal ligament fibroblasts by RT-qPCR; b) the production of RAS receptors (AT1, AT2 and Mas) by human cultured gingival and periodontal ligament fibroblasts by Immunofluorescence and d) the production of RAS components (RENIN, ECA, ECA-2) if the expression and production of RAS components by gingival and periodontal ligament fibroblasts modify under P. gingivalis and E. coli LPS stimulation. After collected, the data were analysed using GraphPad Prism 5.0, by the two way ANOVA followed by Bonferroni post test with a significance level of 5%. Gene expression was detected for some of the RAS components (ANGT, RENIN, ECA, AT1) by both gingival and periodontal ligament fibroblasts. It was detected a differential gene expression between gingival and periodontal ligament fibroblasts for ECA, being significantly higher in gingival fibroblasts. There was a stain in Immunofluorescence compatible with the production of RAS receptors (AT1 and Mas). It must be noted that the stimulation with P. gingivalis and E. coli LPS, in a concentration of 10 g/mL/24 h, did not altered the expression of RAS components. In conclusion, despite of neither gingival or periodontal ligament fibroblasts express all components of RAS, needed to local formation of Ang II, they might also contribute to the local formation and action of Ang II and in consequence, to the installation and the progression of DP.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-22T17:48:50Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_KamilaCristianeDelagoRojai.pdf: 2423278 bytes, checksum: 49bdbeb03029b12ece58e9ba24bd80e0 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-22T17:48:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_KamilaCristianeDelagoRojai.pdf: 2423278 bytes, checksum: 49bdbeb03029b12ece58e9ba24bd80e0 (MD5) Previous issue date: 2018-02-08 / Introduction: Oral health care during the gestational period is an essential part of prenatal care, as it enables the prevention and treatment of oral diseases that may reflect on the health of both. Objective: The purpose of this study was to evaluate the possible association between periodontal disease, preterm birth and low birth weight in pregnant women attended at the Basic Health Units and Family Health Strategies, in the city of Santa Maria, Rio Grande do Sul. In addition, to create a virtual learning technology in the form of a website, serving as a strategy for educating the oral health of pregnant women and their future babies. Methodology: The study was a cross-sectional, with a convenience sample, composed of 60 pregnant women attending the public service in the municipality of Santa Maria, RS. Data related to biological characteristics, socioeconomic factors and related to medical history, odontology and oral hygiene habits were obtained through a semi-structured questionnaire. Data on oral conditions were obtained from periodontal exams and data on the delivery of babies were obtained through the Pregnant Woman's Book. Results: Through the descriptive analysis, it was observed that the majority of the pregnant women were non-smokers (60.0%), self-reported white race (56.6%) and had schooling above elementary school (65.0%). Regarding dental clinical conditions, the prevalence of periodontitis was 28.33% in pregnant women. The percentage of gingival bleeding index was 34.9% and the supragingival index was 40.4%. Bleeding the probing was found in 25.6% of the sites. The mean PS and NIC were similar (1.85 and 1.87, respectively). The majority of patients presented PS and NIC ranging from 1-3mm (94.3% and 95.68%, respectively). Most births were at term (88.3%) and the vast majority of infants presented weight> 2,500 kg (91.6%). Conclusion: There was no association between periodontitis, preterm birth and low birth weight. However, the results of this study reveal a high prevalence of periodontitis in pregnant women, and it is necessary to act in a way to prevent its occurrence. It is noteworthy that as a product of this master's thesis, a website about dental prenatal care, oral health care and its importance for the pregnant woman and her baby were built. / Introdução: Os cuidados com a saúde bucal durante o período gestacional consistem em uma parte essencial de cuidados pré-natal, pois possibilita a prevenção e tratamento de doenças bucais que podem refletir sobre a saúde de ambos. Objetivo: O presente estudo teve como propósito avaliar a possível associação entre doença periodontal, parto prematuro e baixo peso ao nascer em gestantes atendidas em Unidades Básicas de Saúde e Estratégias de Saúde da Família, do município de Santa Maria, Rio Grande do Sul. Além disso, criar uma tecnologia virtual de aprendizagem, na forma de um website, servindo como estratégia de educação sobre a saúde bucal de gestantes e seus futuros bêbes. Metodologia: O delineamento do estudo foi do tipo transversal, com amostra de conveniência, composta por 60 gestantes que frequentavam o serviço público no município de Santa Maria, RS. Dados relacionados às características biológicas, fatores socioeconômicos e relativos à história médica, odontológica e hábitos de higiene bucal foram obtidos mediante questionário semiestruturado. Os dados a respeito das condições bucais foram obtidos a partir de exames periodontais e os dados referentes ao parto dos bebês foram obtidos através da Caderneta da Gestante. Resultados: Através da análise descritiva observou-se que a maioria das gestantes era não fumante (60.0%), raça auto-relatada branca (56.6%) e possuíam escolaridade acima do ensino fundamental completo (65,0%). Sobre as condições clínicas dentárias, a prevalência de periodontite foi de 28.33% nas gestantes. Sendo que a percentagem de índice de sangramento gengival foi de 34.9% e de cálculo supragengival de 40.4%. Sangramento a sondagem foi encontrado em 25.6% dos sítios. A média de PS e NIC foi similar (1.85 e 1.87 respectivamente). A maioria das pacientes apresentou PS e NIC variando entre 1-3mm (94.3% e 95.68% respectivamente). A maior parte dos nascimentos foi a termo (88.3%) e a grande maioria dos bebês apresentaram peso > 2.500 kg (91.6%). Conclusão: Não houve associação entre a periodontite, parto prematuro e baixo peso ao nascer. Entretanto, os resultados desse estudo revelam alta prevalência de periodontite nas gestantes, sendo necessário atuar de forma a prevenir a sua ocorrência. Destaca-se que como produto desta dissertação de mestrado, foi construído um website sobre o pré-natal odontológico, cuidados com a saúde bucal e sua importância para a gestante e seu bebê.

O receptor tipo 2 ativado por protease (PAR2) é um receptor pro-inflamatório que pode ser ativado por tripsina, triptase, protease 3 produzida pelo neutrófilo e pela gingipaína (produzida por Porphyromonas gingivalis). Objetivo: o objetivo do presente estudo foi investigar a expressão do PAR2 na periodontite crônica em humanos, e avaliar se esta expressão está relacionada com a presença de atividade proteolítica no fluido crevicular. Metodologia: foram coletadas amostras de fluido crevicular gengival de indivíduos do grupo controle (sítios saudáveis com profundidade de sondagem &#8804; 3mm, ausência de sangramento à sondagem; n=40), grupo periodontite crônica com destruição de leve a moderada (n=40) e grupo periodontite crônica com destruição avançada (n=40). A expressão do PAR2 foi determinada por RT-PCR e a atividade proteolítica no fluido crevicular foi analisada utilizando-se o substrato BApNA. Resultados: observou-se um aumento significativo (p<0.001) da expressão do PAR2 no grupo periodontite em relação ao grupo controle, independentemente da severidade da doença. Além disso, no grupo periodontite houve um aumento significativo na atividade proteolítica (p<0.001) presente no fluido crevicular comparado com o grupo controle. Conclusões: concluiu-se que na periodontite crônica, há um aumento da expressão do PAR2 e um aumento da atividade proteolítica do fluido crevicular. Desta forma, sugere-se que o PAR2 pode estar envolvido com a inflamação periodontal em humanos. / Proteinase-activated receptor-2 (PAR2) is a pro-inflammatory receptor that can be activated by trypsin, tryptase, neutrophil-serine protease-3 (P3), and gingipain (produced by Porphyromonas gingivalis). Objectives: the objective of the present study was to investigate the expression of PAR2 in chronic periodontitis, and to evaluate whether its expression is related to the presence of proteolytic activity at the crevicular fluid. Methodology: gingival crevicular fluid (CF) samples were collected from subjects from control group (health sites with probing depth &#8804; 3mm, absence of bleeding on probing; n=40), chronic periodontitis group with slight to moderate destruction (n=40), and chronic periodontitis group with advanced destruction (n=40). PAR2 expression was determined by reverse transcriptase-PCR, and the proteolytic activity (PA) at the CF was quantified using the specific substrate BApNA. Results: PAR2 expression was significantly higher (p<0.001) in periodontitis compared to healthy individuals, independently of the diseases severity. In addition, in periodontitis group, there was a significantly increased proteolytic activity (p<0.001) compared with controls. Conclusions: we conclude that in chronic periodontitis there is an increased expression of PAR2 and an increased proteolytic activity at the crevicular fluid. Thus, it is suggested that PAR2 might be involved in human periodontal inflammation.