The diploma thesis deals with the use of meristem cultures in garlic (Allium sativum) breeding. The source material was used variety Tantalum of garlic. The using material, before the isolation of meristem, was tested for the occurrence of viral diseases by immunological tests ELISA (Enzyme-Linked Immuno-Sorbent Assay), also known as EIA (Enzyme Immunoassay). The method used to detect antibodies and antigens. The material was tested for viruses onion yellow dwarf (OYDV - Onion Yellow Dwarf Virus) and virus genus Carlavirus (GCLV - Common Garlic Latent Virus). Then the sound material was sterilized, cultured and then it was obtained meristem. Cultivation of preparation meristem was realised according available methodologies. After preparation meristem put on MS medium with vitamins and growth regulator IAA, NAA and BAP.

Resumo não disponível.

AN ABSTRACT OF THE THESIS OF Katherine E. Strain, for the Master's degree in Zoology, presented on October 21, 2014, at Southern Illinois University Carbondale. TITLE: FATE AND TRANSPORT OF CRY1AB FROM TRANSGENIC BACILLUS THURINGIENSIS CORN IN AN AGRICULTURAL FIELD AND AQUATIC MICROCOSMS MAJOR PROFESSOR: Dr. Michael Lydy, Ph.D. Genetically-modified crops expressing insecticidal crystalline proteins derived from a soil bacterium, Bacillus thuringiensis (Bt), were commercialized almost two decades ago as a means to combat agricultural pests. The Bt proteins are highly specific and only lethal upon ingestion, limiting the scope of toxicity to target insects. However, evidence for risk to non-target organisms and negative public perceptions on the use of Bt crops has caused controversy surrounding their use. The objective of this research was to monitor the fate and transport of a Bt protein, Cry1Ab, in a large-scale agricultural field and in aquatic microcosms. Quantitative methods were validated using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and then used to evaluate field and laboratory samples. The highest environmental concentrations of the Cry1Ab protein were found in runoff water and sediment, up to 130 ng/L and 143 ng/g dry weight, respectively, with the Cry1Ab protein detected in both Bt and non-Bt fields. As surface runoff and residual crop debris can transport Bt proteins to waterways adjacent to agricultural fields, a series of laboratory experiments were conducted to determine the potential risk to non-target aquatic organisms. The results showed that sediment type and temperature can influence the degradation of the Cry1Ab protein in an aquatic system and that the Cry1Ab protein can persist for two months. While Cry1Ab protein concentrations measured in the field soil indicate little risk to terrestrial organisms, the consistent input of Bt-contaminated runoff and crop debris into agricultural waterways impart chronic risk to non-target aquatic species.

O alfaherpesvírus bubalino 1 (BuHV1) e os alfaherpesvírus bovinos 1 (BoHV1), 5 (BoHV5) e são membros da ordem Herpesvirales, família Herpesviridae, subfamília Alphaherpesvirinae, gênero Varicellovirus. O BoHV1 e o BoHV5 são subdivididos em subtipos (BoHV1.1, 1.2a, 1.2b; BoHV5a, b, c). No Brasil circulam BoHV1 e BoHV5 de todos os subtipos até o presente reconhecidos. Em vista dessa variedade de alfaherpesvírus potencialmente infecciosos para bovinos e bubalinos, o conhecimento sobre estes agentes é essencial para a implementação de medidas de controle ou erradicação. Com o objetivo de permitir algumas comparações entre estes agentes e as respostas por eles induzidas em seus hospedeiros, primeiramente foi realizado o sequenciamento do genoma completo de uma amostra de BuHV1 (b6), isolada a partir de prepúcio de búfalos (Bubalus bubalis) em 1972, na Austrália. O objetivo foi disponibilizar a primeira sequência completa de um alfaherpesvírus bubalino e avaliar o grau de similaridade entre o genoma desse vírus e os alfaherpesvírus de bovinos. O genoma sequenciado compreende 137.452 pares de bases (pb), com um nível de similaridade nucleotídica de 92,2% com BoHV5 (SV507/99) e 76,7% com BoHV1 (NVSL). Estes resultados permitirão estudos futuros buscando reconstruir a história evolutiva destes vírus, a importância de infecções interespécies na geração de variantes destes agentes e possíveis associações entre tais infecções e patogenicidade. Na segunda etapa dos estudos, foram realizados diversos testes sorológicos buscando definir uma metodologia de diagnóstico adequada para a identificação de anticorpos contra BuHV1 e todos os diferentes subtipos de BoHV1 e BoHV5. Inicialmente, 600 amostras de soros de bovinos de campo foram testadas através do teste de soroneutralização (SN), realizada frente aos sete alfaherpesvírus em estudo. Os resultados da SN foram influenciados pela escolha do vírus desafio utilizado no ensaio. Para obter a sensibilidade máxima do teste (259/600), foi necessário combinar resultados positivos frente a pelo menos cinco diferentes amostras virais. Em seguida, foram preparados ensaios do tipo “ELISA” para detecção de anticorpos utilizando antígenos preparados com cada um dos diferentes tipos/subtipos desses vírus (BuHV1; BoHV1.1, 1.2a, 1.2b; BoHV5a, b, c), individualmente (chamado “single ELISA” ou “sAgELISA”). Os resultados obtidos foram comparados com os resultados da soroneutralização (SN). A sensibilidade do sAgELISA variou significativamente conforme a amostra viral utilizada no preparo dos antígenos. Considerando os resultados frente a apenas um antígeno, a maior sensibilidade foi de 96,1% (249/259), obtida com apenas uma amostra de BoHV5c. Foram necessários pelo menos seis antígenos (BuHV1; BoHV1.2a, 1.2b; BoHV5a, b, c) para atingir a sensibilidade máxima do teste (263/259). Assim, foi desenvolvido um ELISA combinando vários antígenos em um mesmo teste (chamado “multiple ELISA” ou “mAgELISA”). O mAgELISA detectou 263 amostras positivas, resultando em uma concordância ótima entre sAgELISA e mAgELISA (κ=0,99). Frente a SN, o mAgELISA apresentou uma sensibilidade de 96,5% e especificidade de 96,1% (κ=0,93; VPP=95,0%; VPN=97,3%). Essas diferenças não foram estatisticamente significativas. Os resultados obtidos com a SN e mAgELISA foram comparados também a um ELISA comercial para a detecção de anticorpos contra BoHV1. O ELISA comercial utilizado nas comparações não apresentou resultados significativamente diferentes dos demais testes realizados, no entanto, revelou o maior número de resultados discrepantes em relação ao SN, considerado padrão-ouro. Estes resultados revelam que o mAgELISA aqui relatado é adequado para a detecção de anticorpos para BuHV1, BoHV1 e BoHV5, com sensibilidade e especificidade significativamente comparáveis às da SN. / Bubaline alphaherpesvirus 1 (BuHV1), Bovine alphaherpesviruses 1 (BoHV1) and 5 (BoHV5) are members of the order Herpesvirales family Herpesviridae, subfamily Alphaherpesvirinae, genus Varicellovirus. The BoHV1 and BoHV5 are divided into subtypes (BoHV1.1, 1.2a, 1.2b; BoHV5a, b, c). In Brazil, circulates BoHV 1 and BoHV 5 from all subtypes known to the present. In view of this variety of potentially infectious alphaherpesviruses for bovines and buffaloes, knowledge about these agents is essential for the implementation of control or eradication measures. In order to gain a deeper understanding about these agents and the responses induced by them in their hosts, initially, the complete genome sequence of BuHV1-b6, one of the first BuHV1 viruses isolated in Australia in 1972, is reported. The objective was to provide the first complete sequence of a buffalo alphaherpesvirus and to evaluate the degree of similarity between BuHV1 and bovine alphaherpesviruses genomes. The BuHV1-b6 genome is a linear double-stranded DNA molecule, 137,452 bp long, with overall sequence of the 92.2% similarity at the nucleotide level to the reference BoHV5 (SV507/99) strain and 76.7% with BoHV1 (NVSL) strain. These results are expected to be valuable for further studies involving evolutionary chain of these viruses, the interspecies infections importance in generation of variants and possible associations between such infections and pathogenicity. In the second stage of the study, several serological tests were performed in order to define a appropriate diagnostic methodology for the identification of antibodies against BuHV1 and all different subtypes of BoHV1 and BoHV5. Initially, 600 bovine field serum samples were screened in serum neutralization tests (SN) performed against all seven virus types/subtypes. The SN results were influenced by the choice of the challenge virus. The maximum number of positive sera (259/600) was detected by adding the positive results obtained with at least five different viruses. Seven enzyme linked immunoassays were prepared with each of the seven antigens (BuHV1; BoHV1.1, 1.2a, 1.2b; BoHV5a, b, c), individually (single antigen ELISAs; sAgELISAs). The results obtained were compared to the SN. The sensitivity of the sAgELISAs was also influenced by the choice of antigen. Considering the results against only one of them, the best sensitivity was 96.1% (249/259), obtained with BoHV5c. Maximum sAgELISA sensitivity (263/259) was achieved when positive results of at least six viruses (BuHV1; BoHV1.2a, 1.2b; BoHV5a, b, c) were combined. A multiple antigen ELISA (mAgELISA) was then prepared by combining of different viral antigens in the same test. The mAgELISA detected 263 positive samples, resulting an optimum concordance between sAgELISA and mAgELISA (κ=0.99). When compared to SN, the mAgELISA revealed 96.5% sensitivity and 96.1% specificity (κ=0.93; PPV=95.0%; NPV=97.3%). These differences were not statistically significant. The results of both SN and mAgELISA were compared to a commercially available (IBRgB) ELISA. The results of the commercial ELISA did not vary significantly in relation to others tests performed, however, revealed the highest number of discrepant results in relation to SN, taken as the gold standard. These results reveal that the mAgELISA reported here is suitable for the detection of antibodies to BuHV1, BoHV1 and BoHV5 with sensitivity and specificity significantly comparable to those of SN.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2015-02-19T18:54:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Kelly Cristine Moura Costa Pedroza.pdf: 5288656 bytes, checksum: a1a25bd51a585cdef1f51b03e0c54342 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-19T18:54:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Kelly Cristine Moura Costa Pedroza.pdf: 5288656 bytes, checksum: a1a25bd51a585cdef1f51b03e0c54342 (MD5) / Aspergilose invasiva (AI) é uma importante causa de morbidade e mortalidade entre pacientes neutropênicos com câncer hematológico. O diagnóstico desta doença fúngica invasiva (DFI) permanece um desafio, especialmente devido a seus sintomas inespecíficos e falta de sensibilidade e especificidade de testes que utilizam metodologia não invasiva. A detecção de galactomanana (GM) em amostras de fluidos biológicos foi recentemente incluída como um critério micológico para AI “provável” em consenso para disgnóstico de DFI elaborado pela European Organization for Research and Treatment of Cancer/ Invasive Fungal Infection Cooperative Group and the National Institute of Allergy and Infectious Diseases Mycoses Study Group (EORTC/MSG). A GM é um antígeno solúvel liberado durante o crescimento da hifa no tecido. O teste de detecção é um ELISA sanduíche (ELISAGM) que tem um excelente valor preditivo negativo no diagnóstico da AI em pacientes de alto risco e pode apresentar índices positivos antes das manifestações clínicas da doença. O objetivo deste estudo foi investigar a incidência da AI em pacientes neutropênicos com doenças hematológicas malignas acompanhados pelo serviço de hematologia do Hospital Universitário Professor Edgard Santos, Universidade Federal da Bahia, Brasil. Foram feitos monitoramentos com testes seriados para detecção de GM em amostras de soro em episódios de neutropenia e os resultados foram associados com dados clínicos dos pacientes. Um total de 102 episódios foi incluído de maio de 2011 a julho de 2012, 48 dos quais com neutropenia prolongada (< 500 neutrófilos/mm3 por mais que 10 days). Um caso com critérios para AI “provável” e quatro com critérios para AI “possível” foram detectados. Um caso com índices positivos seriados em teste de GM sem critério radiológico foi observado; este episódio pode ter representado um estágio inicial da infecção. Os dados obtidos foram condizentes com as descrições sobre a utilidade do ELISA-GM como ferramenta para diagnóstico da AI; entretanto, a associação com outros testes não invasivos pode melhorar sua aplicação na prática clínica.

No description available.

Resumo não disponível.

A Salmonella permanece um importante problema na avicultura mundial e considerando os patógenos transmitidos por alimentos, a Salmonella aparece como um dos agentes principais em surtos de toxinfecções alimentares. Existem vários relatos de isolamento de Salmonella em frangos vivos e surtos alimentares, porém em carcaças de frangos e cortes a disponibilidade de dados é menor, assim como estudos de determinação do número de Salmonella presentes nas amostras, também são poucos. No presente estudo, foram analisadas 180 carcaças de frangos resfriadas, adquiridas em varejos, para determinação da ocorrência de contaminação por Salmonella pelo método de microbiologia convencional, ensaio imunoenzimático (ELISA) e determinação do número de células da bactéria pelo método do número mais provável (NMP) nos ágares para isolamento verde brilhante com novobiocina (BGN) e xilose-lisina tergitol 4 (XLT4). Neste mesmo estudo, foi determinado o perfil de resistência a antimicrobianos de 13 amostras de Salmonella isoladas das carcaças de frangos, e analisados 101 suabes de arrasto de camas aviárias, pelo método microbiológico convencional, para a presença do agente. Os resultados mostraram 15,8% de ocorrência de Salmonella nos suabes de arrasto e 12,2% de ocorrência nas carcaças de frangos resfriadas, pelo método de microbiologia convencional. O teste de ELISA detectou 11,3% de positividade para Salmonella nas carcaças de frangos resfriadas. A média de NMP de Salmonella por mL, na leitura pelo ágar XLT4 foi de 2,674 células e BGN foi de 1,282 células. As cepas de Salmonella apresentaram resistência aos antimicrobianos lincomicina, penicilina e estreptomicina (100%), josamicina e enrofloxacina (69,23%), amoxicilina (30,76%), clortetraciclina (23,07%), estreptomicina e estreptomicina + penicilina (15,83%) e 7,69% de resistência a doxiciclina e polimixina B. Os sorovares de Salmonella isolados no estudo foram Enteritidis, Agona, Risssen, Heidelberg e Livingstone, nas carcaças de frangos, e, Enteritidis, Agona, Ohio, Rissen, Tennessee, entérica O: 3,10 e entérica O: 6,71 nos suabes de arrasto. A análise dos resultados apresentou contaminação por Salmonella nas camas aviárias e presença de cepas de Salmonella, isoladas das carcaças, multiresistentes a antimicrobianos. Também demonstrou existir um número variável de células de Salmonella contaminando as carcaças de frango resfriadas que estão à venda ao consumidor.

Que corpo é esse? é o título desta dissertação, que encontra uma poética referenciada nos meus desenhos. É o resultado da investigação realizada no mestrado, tendo como objeto de estudo a minha produção plástica do período entre 2001 e 2004. A utilização do desenho como meio para a realização das minhas intenções (idéias, vontades e desejos) foi o instrumento que permitiu a investigação do corpo nos seus mais diferentes aspectos: a representação e apresentação do corpo humano, o meu próprio corpo enquanto artista que realiza o gesto, a ação no desenho, e o corpo do trabalho, que é o desenho propriamente dito. Ressalto que essa reflexão encontrou subsídio teórico em autores como Flávio Gonçalves e Edith Derdyk, que abordam os processos fenomenológicos do desenho. Já para a temática do corpo, tive o embasamento teórico de autores como Paul Schilder, dentro de um viés da concepção de corpo mais holística, e Juan-David Nasio, numa vertente psicanalítica. Como referencial artístico, estabeleci relações da minha produção plástica com o trabalho de Louise Bourgeois e Kiki Smith.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MariaLSP_DISSERT_1-12.pdf: 307341 bytes, checksum: 501d00488698b866628dca8bc24c0c6e (MD5) Previous issue date: 2010-03-31 / Trata-se de um coorte prospectivo com amostras de leite de 28 m?es da zona rural da Para?ba, durante diferentes dias de amamenta??o exclusiva, com objetivo de avaliar atrav?s do ensaio imunoenzim?tico a presen?a de imunoglobulina A secretora (sIgA) total e espec?fica contra ant?genos de Escherichia coli enteropatog?nica (EPEC) e Shigella flexneri. A reatividade dos anticorpos foi analisada pelo Western blot . Os resultados mostram presen?a da sIgA em todas as amostras, com medianas no colostro de 8,092 g/L(4,546-17,252) e leite de 0,695g/L (0,020-2,830). As medianas nos t?tulos de colostro de IgA anti-EPEC foi 41 (1-659) e anti-Shigella flexneri de 18 (1-4727) enquanto no leite anti-EPEC foi de 8 (1-288) e anti-Shigella flexneri de 6 (1-450). Houve grandes varia??es entre as m?es e entre os dias de amamenta??o. No Western blot os anticorpos sIgA reagiram com prote?nas de EPEC e Shigella flexneri, destacando-se a fra??o antig?nica de 94kDa, correspondente a intimina. Os resultados mostram que a presen?a de sIgA total e de anticorpos IgA contra EPEC e Shigella flexneri no colostro e leite de m?es residentes em zona rural, com prec?rias condi??es s?cioecon?mica e sanit?rias, n?o diferem de estudos realizados com popula??es de ?rea urbana e refor?am a import?ncia do leite materno na defesa contra infec??es ent?ricas. Apesar da aus?ncia na literatura de estudos avaliando o perfil de anticorpos sIgA no leite de m?es residentes em zona rural do Brasil, os resultados demonstraram que a presen?a de sIgA total e de anticorpos IgA contra EPEC e Shigella flexneri no colostro e leite de m?es residentes em zona rural, com prec?rias condi??es s?cio-econ?mica e sanit?rias, n?o diferem de estudos realizados com popula??es de ?rea urbana e refor?am a import?ncia do leite materno na defesa contra infec??es ent?ricas