A produção de uvas é uma importante atividade econômica da região nordeste do estado do Rio Grande do Sul. Nesta atividade são utilizadas misturas complexas de pesticidas para a proteção da plantação, mas que representa um potencial risco à saúde humana dos indivíduos expostos. Os sistemas de metabolização e reparo de DNA são importantes moduladores dos efeitos da exposição a substâncias genotóxicas. O presente estudo teve como objetivo principal avaliar a influência dos seguintes polimorfismos em genes de reparo: OGG1*Ser326Cys, XRCC1*Arg194Trp, XPD*Ile199Met, XPD*Asp312Asn, Rad51*G135C e XRCC4*Ile401Thr, nos níveis de danos ao DNA em trabalhadores expostos a pesticidas. A genotipagem destes polimorfismos foi realizada utilizando a técnica de PCR/RFLP. Os danos no DNA foram avaliados pelas técnicas de Ensaio Cometa (Índice de Danos – ID e Freqüência de Danos – FD) e Teste de Micronúcleo (MN) em 107 trabalhadores expostos a pesticidas e em 65 indivíduos não expostos a pesticidas. Diferenças nos níveis de ID, FD e MN entre os indivíduos com os diferentes genótipos de reparo individualmente ou quando combinados com o genótipo PON1, cuja proteína codificada está envolvida na metabolização de pesticidas, foram testadas pelo teste U de Mann- Whitney, já que a distribuição desde dados desviou significativamente da normalidade. O polimorfismo XPD*Ile199Met apresentou uma freqüência baixa do alelo variante (0,03), o que não possibilitou a análise da influência deste polimorfismo. Os genótipos de XRCC1*Arg194Trp e de Rad51*G135C, tanto individualmente quanto na análise combinada com o genótipo de PON1*Gln192Arg, não apresentaram diferenças significativas estatísticas nos níveis dos biomarcadores, apesar de ambos apresentarem uma tendência de proteção à exposição a pesticidas (XRCC1*Trp/ – e Rad51*G/G). O genótipo de OGG1*Ser326Cys demonstrou influência nos níveis de ID e de FD nos indivíduos expostos, individualmente (P=0,032 e P=0,009), como também quando combinado com o genótipo de PON1*Gln192Arg, sendo que o genótipo selvagem apresentou menores níveis de dano. O genótipo selvagem do polimorfismo XRCC4*Ile401Thr apresentou, nos indivíduos expostos um efeito protetor na freqüência de MN (P=0,024). O polimorfismo XPD*Asp312Asn apresentou influência em ID e FD na análise do genótipo individualmente, quando o genótipo selvagem correspondeu aos menores níveis nos biomarcadores (P=0,028 e P=0,035). Assim, os resultados demonstram que os danos detectados pelo Ensaio Cometa, principalmente danos oxidativos, quebras de fita simples e dupla, crosslinks DNA-DNA e DNA–proteína, são reparados preferencialmente pela via BER, que é descrita como responsável pela reparação de pequenas lesões como bases oxidadas ou reduzidas. Enquanto que no reparo dos danos detectados no Teste de MN, clastogênese e aneugênese, são as vias HR e NHEJ que atuam no reparo de quebras de fita dupla, como também a via NER. / Grape production is an important economic activity in northeast region of Rio Grande do Sul State. In this activity, pesticides complex mixtures are constantly utilized to protect the grapevines, but represent a human health potential risk to exposes individuals. The metabolizing and repair systems are important exposure effects modulators. The present study had as objective to evaluate the repair gene polymorphisms (OGG1*Ser326Cys, XRCC1*Arg194Trp, XPD*Ile199Met, XPD*Asp312Asn, Rad51*G135C, XRCC4*Ile401Thr) influences in DNA damage levels of exposed pesticides workers. The genotyping of these polymorphisms was performed by PCR/RFLP method. The DNA damage was evaluated by Comet assay (Damage Index – DI and Damage Frequency – DF) and Micronuclei test (MN) in 107 exposed workers and 65 non-exposed to pesticides. Differences in ID, DF, MN and between the different repair genotypes individually or combined to PON1 genotype, of which protein are involved in pesticides metabolizing, having a significant deviation from normality, were tested by the non-parametric Mann-Whitney U test. The XPD*Ile199Met polymorphism present a lower frequencies of the variant allele (0,03), and it was not possible analyze the influence of this polymorphism in damage levels. The XRCC1*Arg194Trp and Rad51*G135C polymorphisms, individually and combined to PON1*Gln192Arg genotype, not demonstrated a statistical differences in biomarkers levels, even though both polymorphisms present a protection tendency to pesticides exposure (XRCC1*Trp/ – e Rad51*G/G). The OGG1*Ser326Cys genotype showed influence in DI and DF levels into exposed group, individually P=0,032 and P=0,009), and when combined to PON1*Gln192Arg, once that the wild type genotype presents lower DNA damage levels. In exposed individuals, the wilt type genotype XRCC4*Ile401Thr presents a protector effect to MN frequencies (P=0,024). The XPD*Asp312Asn polymorphism present influence in DI and DF in individually analyses, when the wild type genotype correspond to lower biomarkers levels (P=0,028 and P=0,035). Our results demonstrated that damage detected in Comet Assay, mainly the oxidative damage, single e double strand breaks, crosslink DNA-DNA e DNA-protein, are repaired principally by Base Excision Repair pathway, that are described as responsible for repair of small lesions as oxidized and reduced bases. While in the repair of damage detected in MN test, clastogênese and aneugênese, are the Recombination Homologous and Non Homologous End Joining that act in double strand break, as the Nucleotide Excision Repair also has a influence.

O uso de praguicidas cresceu no Brasil nos últimos anos e, consequentemente, cresceram também os quadros de intoxicação provenientes da exposição à essas substâncias, principalmente em trabalhadores rurais. A classe dos praguicidas organofosforados (OF) é uma das mais utilizadas, todavia sua toxicidade também é elevada colocando, consequentemente, essa população em risco. Em vista disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar a exposição de trabalhadores rurais aos praguicidas OF por meio da determinação de bioindicadores associados à avaliação clínica, visando dar subsídios ao poder público para a implantação de uma rede de atenção primária à saúde. O estudo foi transversal, de base populacional e natureza avaliativa e aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade José do Rosário Vellano (UNIFENAS) e da Universidade Federal de Alfenas (UNIFAL-MG), pareceres nº 149718 e 415856, respectivamente) com uma amostragem total de 1027 trabalhadores rurais da Regional de Saúde de Alfenas, MG, considerando-se variáveis epidemiológicas, clínicas e riscos ocupacionais. Foram aplicados dois questionários estruturados, um para levantamento de dados epidemiológicos e clínicos dos trabalhadores rurais e o Instrumento de Avaliação da Atenção Primária (PCATool), além da determinação das colinesterases plasmática, eritrocitária e total, bem como as provas de função hepática e renal. Posteriormente, dessa população, selecionou-se dois grupos expostos ocupacionalmente à mistura complexa de praguicidas, contendo OF, (n = 94) e expostos ocupacionalmente à mistura complexa de praguicidas, sem OF, (n = 94), para a aplicação dos bioindicadores dialquilfosfatos urinários, testes de genotoxicidade (ensaios do citoma e do cometa) e análise polimórfica da CYP2C9, comparando esses resultados com aqueles obtidos em um grupo de indivíduos não expostos ocupacionalmente aos praguicidas, habitantes de zona urbana (n = 50). A partir das respostas observadas no PCATool (n = 1027), pode ser verificado que a despeito de uma alta cobertura, o risco ocupacional e suas consequências não têm sido detectados, pelos serviços de saúde da família, que se apresentam como não orientados à atenção primária. Quando comparado aos demais grupos de estudo, os resultados obtidos, a partir do levantamento de dados clínicos, mostraram alterações significativas no sistema nervoso central, sistema respiratório e auditivo nos trabalhadores expostos à mistura contendo OF. No tocante à determinação dos bioindicadores propostos, no grupo exposto ocupacionalmente à mistura contendo OF, a atividade da colinesterase plasmática, eritrocitária e total, encontrou-se diminuída em 63,8%, 12,8% e 14,8%, respectivamente, detecção de dialquilfosfatos na urina de 92,6% dos voluntários desse grupo e mudança significativa em todos os parâmetros de ensaio do citoma, quando comparado com o grupo não exposto ocupacionalmente aos praguicidas. O ensaio do cometa mostrou danos ao DNA por meio da diferença significativa entre os grupos expostos e o grupo não exposto ocupacionalmente, por meio da análise do Tail moment. A análise polimórfica de CYP2C9 mostrou maior frequência dos alelos *1/*2 e *1/*3, nos grupos expostos aos praguicidas em relação ao grupo não exposto ocupacionalmente, todavia, não foram observadas relações significativas entre essa e a atividade das colinesterases, a concentração de dialquilfosfatos na urina e os testes de genotoxicidade. Os resultados obtidos nesse pioneiro estudo, com uma população rural brasileira, sugerem que esses trabalhadores estão expostos aos praguicidas de forma arriscada, fato este que associado ao baixo grau de escolaridade e à precariedade de ações programáticas, aumenta a probabilidade de aparecimento de quadros de intoxicação, demonstrando assim a importância do treinamento das equipes de saúde para a promoção, a prevenção e o tratamento dessa população. O emprego de bioindicadores de dose interna, de efeito, de genotoxicidade e de suscetibilidade, em combinação, como utilizado no presente trabalho, é primordial para a avaliação da população rural, diminuindo a probabilidade do aparecimento de doenças advindas da exposição ocupacional aos praguicidas. / The use of pesticides in Brazil has been growing recently, leading to an increase in the intoxication cases caused by the exposure, especially of farm workers, to these substances. Among all the pesticides, the organophosphates (OF) are one of the most used groups, although they present high toxicity, which is risky for population. Thus, the aim of this study was to evaluate the exposure of farm workers to organophosphates pesticides through the determination of clinical evaluation associated biomarkers, providing information for the implementation of a primary health care system by the Government. It was a cross-sectional and population-based evaluation study approved by the Ethics Committees in Research of UNIFENAS and UNIFAL-MG (Document numbers 415856 and 149718), allowing the use of a 1,027 rural workers sample from Alfenas-MG health regional, considering epidemiological, clinical and occupational risk variables. Two forms were applied, one for collection of rural workers epidemiological and clinical data, and the Primary Care Assessment Tool (PCATool), as well as the determination of plasma, erythrocyte and total cholinesterase, and the evidences of liver and kidney function. Subsequently, from this population, two groups were selected: the occupationally exposed to the complex mixture of pesticides with OF (n = 94), and the occupationally exposed to the complex mixture of pesticides without OF (n = 94). Both groups were evaluated through urinary dialkyl phosphates biomarkers, genotoxicity assays (cytome and comet), and polymorphism of CYP2C9, comparing these results with those obtained in a group of individuals not occupationally exposed to pesticides, urban residents (n = 50). From the PCATool responses (n = 1027), it was noticed that despite high coverage, the occupational risk and its consequences have not been detected by the family health services, referring to a non-oriented primary care. When compared to other study groups, the clinical evaluated data showed significant changes in the central nervous, respiratory and auditory systems in workers exposed to the mixture containing OF. In the biological monitoring of the occupationally exposed group, the plasma, erythrocyte, and total cholinesterase activities changed in 63.8%, 12.8% and 14.8%, respectively, with 92.6% of dialkyl phosphates detection in urine. Moreover, in this group it was a significant change in all the test parameters cytome when compared with the group not exposed occupationally. The comet assay showed DNA damage through significant difference between exposed and unexposed groups by Tail moment. CYP2C9 polymorphism presented a higher frequency of allele * 1 / * 2 and * 1 / * 3 in the exposed population in relation to the unexposed group. However, there was no significant correlation between this test and cholinesterase activities, nor with dialkyl phosphates concentration in urine and genotoxicity tests. The results obtained in this ascertained study, with a Brazilian rural population, suggested that these workers are exposed to pesticides in a risky way. In addition to this fact, low education levels and precarious primary care actions increase the probability of intoxication events, indicating the importance of health teams training for promoting, preventing and treating this population. The combination of internal dose, effect, genotoxicity and susceptibility biomarkers can be an important tool to assess the exposure of rural population, decreasing the emergence of diseases resulting from occupational exposure to pesticides.

Banca examinadora: Profº. Drº. Fernando Martins Carvalho (orientador); Profª. Drª. Rita de Cássia Pereira Fernandes - FAMED-UFBA; Profª. Drª. Marlene Silva - Fundação Bahiana para o Desenvolvimento das Ciências; Profº. Drº. Sergio Koifman - FIOCRUZ; Profº. Drº. Marco Antônio Vasconcelos Rêgo - FAMED-UFBA. Data de defesa 30 de abril 2009. / Submitted by Maria Creuza Silva (mariakreuza@yahoo.com.br) on 2012-09-26T14:05:51Z No. of bitstreams: 1 Tese. Paulo Conceição 2009.pdf: 1301033 bytes, checksum: 1a67b76718c754776cf9e4291681dc40 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Creuza Silva(mariakreuza@yahoo.com.br) on 2012-09-26T14:24:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese. Paulo Conceição 2009.pdf: 1301033 bytes, checksum: 1a67b76718c754776cf9e4291681dc40 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-26T14:24:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese. Paulo Conceição 2009.pdf: 1301033 bytes, checksum: 1a67b76718c754776cf9e4291681dc40 (MD5) Previous issue date: 2009 / O presente trabalho teve os objetivos de: descrever a tendência da taxa de mortalidade por tumores de cérebro no Estado da Bahia de 1980 a 2006; avaliar os resultados das investigações que direta ou indiretamente estudaram a associação entre a exposição a solventes orgânicos e o desenvolvimento dos tumores de cérebro; e, analisar a associação entre tumores do cérebro e a exposição a solventes orgânicos. Para a análise da tendência da mortalidade utilizou-se a base de dados de óbitos do Sistema de Informações sobre Mortalidade – SIM do Ministério da Saúde e utilizou-se a regressão de Poisson ou binomial negativa quando havia super-dispersão. A revisão de literatura sobre solventes e tumores de cérebro foi conduzida no MEDLINE/PubMed usando como termos para a localização: solventes, ocupacional, ambiental e tumor de cérebro. Para o teste da associação da exposição aos solventes e o desenvolvimento dos tumores de cérebro foi realizado um estudo caso-controle não pareado de casos incidentes de tumores primários benignos e malignos do cérebro na Região Metropolitana de Salvador (RMS), Bahia. Os resultados mostraram que de 1980 a 2006 a taxa padronizada de óbitos por tumores de cérebro na Bahia variou de 0,42/100.000 para 2,99/100.000, observando-se um crescimento médio anual de 1,7% da mortalidade de 1980 a 1995, sendo mais expressivo de 1996 a 2006, com aumento anual de 9,9%. Na revisão da literatura, embora houvesse resultados discordantes, verificaram-se cinco estudos com estimativa da exposição a solventes e que tiveram resultados estatisticamente significantes da associação com tumores de cérebro, variando de 1,1 a 8,5. No presente estudo, a exposição ocupacional a solventes esteve associada aos tumores de cérebro em geral, OR 2,64 (IC 83% 1,12-6,18) e particularmente aos tumores astrocíticos, OR 6,60 (IC 83% 2,05-21,24), mas, não se associou de forma significante com os meningeomas. Os solventes apareceram fortemente associados aos tumores de cérebro, embora a medida não tenha sido precisa devido ao pequeno número de casos expostos. Levando-se em conta o princípio da precaução, recomenda-se mais cautela na utilização dos solventes orgânicos e sua substituição por produtos de menor potencial de risco, sempre que possível. / Salvador

A poeira de grãos de cereais é composta por fragmentos protéicos, microrganismos, material inorgânico e produtos químicos que causam reações irritativas, tóxicas, alergênicas e inflamatórias crônicas nas vias aéres e pulmões. A exposição ocupacional à poeira de grãos está associada com alterações respiratórias agudas e crônicas e com alterações na função pulmonar. Vários estudos epidemiológicos controlados em trabalhadores de armazenagem de grãos demonstram uma prevalência elevada de sintomas respiratórios e uma perda da função pulmonar acentuada quando a exposição é prolongada e intensa. Realizamos a coleta de amostras de poeira respirável nas moegas de silos de grande porte que mostraram baixos níveis de concentração. Não foi analisado o teor de sílica livre das amostras. As partículas da fração respiratória microbiologicamente contaminadas foram coletadas através de um amostrador de Andersen de seis estágios identificando espécies como Aspergillus, Penicilium e Mucor que podem causar patologi respiratória. Foi estudada uma coorte longitudinal de 195 trabalhadores de grãos através de dois cortes transversais com um intervalo de aproximadamente nove anos entre eles. Os trabalhadores foram classificados em dois grupos, um de elevada exposição à poeira (n=102) e outro de baixa exposição (n=93), conforme a atividade ocupacional que desempenhavam. Um questionário de sintomas respiratórios e o teste espirométrico foram aplicados de forma padronizada. Os indivíduos que saíram da coorte (n=99) durante o estudo não apresentavam por ocasião do primeiro corte transversal características diferentes dos que permaneceram (sobreviventes). Foi encontrada uma prevalência aumentada de sintomas respiratórios e de baixos valores de VEF1 e CVF no grupo de alta exposição em comparação aos controles. O grupo de alta exposição apresentou também um declínio mais rápido da função pulmonar durante o período da coorte independente do hábito tabágico. Recomenda-se através de programas de saúde pública a prevenção primária e secundária dos efeitos respiratórios da exposição à poeira de grãos. / The cereal grain dust is composed by fractured grain kernels, microrganisms, inorganic matter and chemicals that induce irritant, toxical, allergenic and chronical inflammatory effects in the airways and the lungs. Grain dust exposure in occupational settings has been associated with both acute and chronic respiratory abnormalities. Several cross-sectional studies of grain elevator workers have shown a high prevalence of respiratory symptoms and pulmonary function loss. We did the sample collection of respirable dust in the receiving areas of grain elevators that showed low levels of respirable dust. The free silica content of those samples was not measured. The viable particles in the respiratory range were sampled by a six-stage Andersen sampler identifying fungi species potentially allergenic or pathogenic in the receiving areas of grain elevators. We studied a longitudinal cohort of 195 grain elevator workers by two cross-sectional surveys with a nine-year interval between them in 15 silos of Rio Grande do Sul, Brazil. Grain workers were classified in two populations: a highly exposed (n=102) and a low level exposed group (n=93) according to their job categories A questionnaire of respiratory symptoms and spirometry tests were applied in a standardized way. The individuals who dropped out (n=99) had not significantly different characteristics from the survivors at the end of the survey. We found more respiratory symptoms and low FEV1 and FVC values in the highly exposed group compared to the less exposed group. The highly exposed group had also a more rapid (annual) longitudinal decline of pulmonary function irrespective of smoking status The primary and secondary prevention of the respiratory effects of grain dust exposure are recommended.

A energia é um ingrediente essencial para o desenvolvimento econômico. Para a produção de energia são utilizadas diversas fontes, como o carvão mineral, que foi uma das primeiras fontes de energia utilizadas pelo ser humano em larga escala. O carvão consiste de uma mistura complexa de substâncias químicas orgânicas, constituída por carbono, hidrogênio e oxigênio, principalmente, e por quantidades menores de nitrogênio e enxofre. O Brasil apresenta a 10a maior reserva de carvão do mundo, com um total de 12 bilhões de toneladas. No Rio Grande do Sul ficam quase 90% das reservas nacionais, a Jazida de Candiota (RS) possui 38% de todo o carvão nacional. A exposição ao carvão e seus efeitos genotóxicos e mutagênicos vêem sendo estudados com diferentes enfoques e também em diferentes organismos. Considerando a composição do carvão, conhecida por apresentar componentes genotóxicos, e a falta de estudos em trabalhadores expostos deste setor produtivo, este trabalho tem como objetivo realizar biomonitoramento de uma amostra de trabalhadores deste setor, da região de Candiota- Rio Grande do Sul. Para isso, foram coletados sangue e mucosa oral de 57 indivíduos ocupacionalmente expostos ao carvão e de 71 indivíduos não expostos ao carvão. O Ensaio Cometa, o teste de MN em linfócitos binucleados e em mucosa oral, marcadores de estresse oxidativo bem como o conteúdo de elementos traço foram avaliados nas amostras. Os polimorfismos GSTT1 nulo, GSTM1 nulo, OGG1 Ser326Cys e XRCC1 Arg194Trp foram analisados para verificar a possível modulação destes genes de suscetibilidade nos resultados dos biomarcadores. Indivíduos expostos apresentaram maiores danos no DNA. Nossos resultados mostraram aumento significativo em Índice de Dano (P = 0,002) e FD (P < 0,001), parâmetros analisados no Ensaio Cometa, em frequência de MN (P < 0.001) e Pontes citoplasmática (P < 0,001), parâmetros do teste de MN em linfócitos binucleados, frequência de MN em células basais (P < 0,001) e em células diferenciadas (P < 0,001), frequência de células binucleadas (P < 0,05), no BMCyt em comparação com os indivíduos não-expostos. Observamos redução significativa da frequência de células com cromatina condensada (P < 0,001), no BMCyt, que é um parâmetro de morte celular. O grupo exposto apresentou aumento no estresse oxidativo, pelo aumento de SOD (P < 0,001), por outro lado, houve uma redução de CAT e TBARS (ambos com P < 0.001). As amostras dos trabalhadores apresentar quantidades de magnésio (Mg), alumínio (Al), cobre (Cu), e zinco (Zn), apesar de não terem diferenças significativas, já a análise do ambiente, o solo de Candiota mostrou maiores quantidades de fósforo (P), enxofre (S) e chumbo, quando comparado com o solo de Bagé, onde não há a atividade de mineração. A análise dos polimorfismos GSTT1 nulo, GSTM1 nulo, OGG1 Ser326Cys e XRCC1 Arg194Trp mostrou influência do polimorfismo GSTM1 nulo na frequência de brotos nucleares, dos indivíduos expostos, e do polimorfismo XRCC1 Arg194Trp na frequência de células cariorréticas e piquinóticas, dos indivíduos não-expostos. Indivíduos expostos com o genótipo GSTM1 nulo apresentaram aumento significativo na frequência de brotos em relação aos indivíduos com o genótipo GSTM1 não- nulo (P=0.023). Entre os indivíduos não expostos, o genótipo XRCC1 Arg/Trp apresentou menores frequências de células cariorréticas e piquinóticas quando comparados com indivíduos do mesmo grupo com o genótipo XRCC1 Arg/Arg (P=0,048 e P=0.004, respectivamente). Assim, o dano ao DNA observado nos indivíduos expostos pode ser consequência do dano oxidativo resultante da exposição aos resíduos do carvão, inclusive os metais. / Energy is an essential ingredient for economic development. For the production of energy are used various sources, as coal which was the first source of energy used by humans in large scale. The coal is a complex mixture of organic chemicals, comprising carbon, hydrogen and oxygen, especially, and minor amounts of nitrogen and sulfur. Brazil has the 10th largest coal reserves in the world with a total of 12 billion tons. In Rio Grande do Sul are almost 90% of national reserves, the Jazida Candiota (RS) has 38% of all coal national. Exposure to coal and its genotoxic and mutagenic effects has been studied with different approaches and also in different organisms. Considering the composition of coal known to have genotoxic components, and the lack of studies in exposed workers of this sector, the aim of this study was to conduct biomonitoring of a sample of workers in this sector, the region Candiota – Rio Grande do Sul For this, we collected blood and oral mucosa of 57 individuals occupationally exposed to coal and 71 individuals not exposed to coal. The Comet assay, the test of MN in binucleated lymphocytes and oral mucosa, oxidative stress markers and the content of trace elements were measured in the samples. The polymorphisms GSTT1 null, GSTM1 null, OGG1 Ser326Cys and XRCC1 Arg194Trp were analyzed to verify the possible modulation of these genes results in susceptibility biomarkers. Exposed individuals showed higher DNA damage. Our results showed a significant increase in DI (P = 0.002) and DF (P < 0.001) parameters analyzed in the Comet assay in frequencies of MN (P < 0.001) and cytoplasmic bridges (P < 0.001), parameters in MN test in binucleated lymphocytes, MN frequency in basal cells (P < 0.001) and in differentiated cells (P < 0.001), frequency of binucleated cells (P < 0.05) in BMCyt compared with unexposed individuals. Observed a significant decrease in the frequency of cells with condensed chromatin (P < 0.001) in BMCyt, which is a parameter of cell death. The exposed group showed an increase in oxidative stress by the increase in SOD (P <0.001) on the other hand, a reduction of CAT and TBARS (both P <0.001). Samples from workers present amounts of magnesium (Mg), aluminum (Al), copper (Cu), zinc (Zn), although no significant differences, the environmental analysis, soil Candiota showed higher amounts of phosphorus (P), sulfur (S) and lead compared to the soil Bagé, where there no mining. Exposed individuals with the GSTM1 null genotype showed a significant increase in the frequency of buds nuclear related to individuals with the GSTM1 non-null genotype (P = 0.023). Among the non-exposed individuals, the genotype XRCC1 Arg / Trp showed lower frequencies of Karyorrhetic and Pyknotic Cells when compared with individuals of the same group with the genotype XRCC1 Arg / Arg (P = 0.048 and P = 0.004, respectively). DNA damage observed in the exposed mining workers may be a consequence of oxidative damage resulting from coal residue mixtures, including metals. Besides, our results confirm the BMCyt assay as good biomarker to occupational exposure.

A produção de uvas é uma importante atividade econômica da região nordeste do estado do Rio Grande do Sul. Nesta atividade são utilizadas misturas complexas de pesticidas para a proteção da plantação, mas que representa um potencial risco à saúde humana dos indivíduos expostos. Os sistemas de metabolização e reparo de DNA são importantes moduladores dos efeitos da exposição a substâncias genotóxicas. O presente estudo teve como objetivo principal avaliar a influência dos seguintes polimorfismos em genes de reparo: OGG1*Ser326Cys, XRCC1*Arg194Trp, XPD*Ile199Met, XPD*Asp312Asn, Rad51*G135C e XRCC4*Ile401Thr, nos níveis de danos ao DNA em trabalhadores expostos a pesticidas. A genotipagem destes polimorfismos foi realizada utilizando a técnica de PCR/RFLP. Os danos no DNA foram avaliados pelas técnicas de Ensaio Cometa (Índice de Danos – ID e Freqüência de Danos – FD) e Teste de Micronúcleo (MN) em 107 trabalhadores expostos a pesticidas e em 65 indivíduos não expostos a pesticidas. Diferenças nos níveis de ID, FD e MN entre os indivíduos com os diferentes genótipos de reparo individualmente ou quando combinados com o genótipo PON1, cuja proteína codificada está envolvida na metabolização de pesticidas, foram testadas pelo teste U de Mann- Whitney, já que a distribuição desde dados desviou significativamente da normalidade. O polimorfismo XPD*Ile199Met apresentou uma freqüência baixa do alelo variante (0,03), o que não possibilitou a análise da influência deste polimorfismo. Os genótipos de XRCC1*Arg194Trp e de Rad51*G135C, tanto individualmente quanto na análise combinada com o genótipo de PON1*Gln192Arg, não apresentaram diferenças significativas estatísticas nos níveis dos biomarcadores, apesar de ambos apresentarem uma tendência de proteção à exposição a pesticidas (XRCC1*Trp/ – e Rad51*G/G). O genótipo de OGG1*Ser326Cys demonstrou influência nos níveis de ID e de FD nos indivíduos expostos, individualmente (P=0,032 e P=0,009), como também quando combinado com o genótipo de PON1*Gln192Arg, sendo que o genótipo selvagem apresentou menores níveis de dano. O genótipo selvagem do polimorfismo XRCC4*Ile401Thr apresentou, nos indivíduos expostos um efeito protetor na freqüência de MN (P=0,024). O polimorfismo XPD*Asp312Asn apresentou influência em ID e FD na análise do genótipo individualmente, quando o genótipo selvagem correspondeu aos menores níveis nos biomarcadores (P=0,028 e P=0,035). Assim, os resultados demonstram que os danos detectados pelo Ensaio Cometa, principalmente danos oxidativos, quebras de fita simples e dupla, crosslinks DNA-DNA e DNA–proteína, são reparados preferencialmente pela via BER, que é descrita como responsável pela reparação de pequenas lesões como bases oxidadas ou reduzidas. Enquanto que no reparo dos danos detectados no Teste de MN, clastogênese e aneugênese, são as vias HR e NHEJ que atuam no reparo de quebras de fita dupla, como também a via NER. / Grape production is an important economic activity in northeast region of Rio Grande do Sul State. In this activity, pesticides complex mixtures are constantly utilized to protect the grapevines, but represent a human health potential risk to exposes individuals. The metabolizing and repair systems are important exposure effects modulators. The present study had as objective to evaluate the repair gene polymorphisms (OGG1*Ser326Cys, XRCC1*Arg194Trp, XPD*Ile199Met, XPD*Asp312Asn, Rad51*G135C, XRCC4*Ile401Thr) influences in DNA damage levels of exposed pesticides workers. The genotyping of these polymorphisms was performed by PCR/RFLP method. The DNA damage was evaluated by Comet assay (Damage Index – DI and Damage Frequency – DF) and Micronuclei test (MN) in 107 exposed workers and 65 non-exposed to pesticides. Differences in ID, DF, MN and between the different repair genotypes individually or combined to PON1 genotype, of which protein are involved in pesticides metabolizing, having a significant deviation from normality, were tested by the non-parametric Mann-Whitney U test. The XPD*Ile199Met polymorphism present a lower frequencies of the variant allele (0,03), and it was not possible analyze the influence of this polymorphism in damage levels. The XRCC1*Arg194Trp and Rad51*G135C polymorphisms, individually and combined to PON1*Gln192Arg genotype, not demonstrated a statistical differences in biomarkers levels, even though both polymorphisms present a protection tendency to pesticides exposure (XRCC1*Trp/ – e Rad51*G/G). The OGG1*Ser326Cys genotype showed influence in DI and DF levels into exposed group, individually P=0,032 and P=0,009), and when combined to PON1*Gln192Arg, once that the wild type genotype presents lower DNA damage levels. In exposed individuals, the wilt type genotype XRCC4*Ile401Thr presents a protector effect to MN frequencies (P=0,024). The XPD*Asp312Asn polymorphism present influence in DI and DF in individually analyses, when the wild type genotype correspond to lower biomarkers levels (P=0,028 and P=0,035). Our results demonstrated that damage detected in Comet Assay, mainly the oxidative damage, single e double strand breaks, crosslink DNA-DNA e DNA-protein, are repaired principally by Base Excision Repair pathway, that are described as responsible for repair of small lesions as oxidized and reduced bases. While in the repair of damage detected in MN test, clastogênese and aneugênese, are the Recombination Homologous and Non Homologous End Joining that act in double strand break, as the Nucleotide Excision Repair also has a influence.

Made available in DSpace on 2016-02-26T13:26:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 152.pdf: 1771144 bytes, checksum: 6a95cb2ed93d4f39dcfc5139b7edaf91 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Um estudo caso-controle de base hospitalar foi realizado entre 1999-2003 com 210 casos de câncer de boca e orofaringe e de 251 controles. Casos foram pacientes com confirmação histopatológica de neoplasia da boca (C00-C10) e faringe (C14), excluídas o lábio externo, virgens de tratamento, com idade entre 15-79 anos e residentes na RMRJ. Os controles foram pacientes pareados por sexo e frequência de idade hospitalizados em dois centros da rede pública, residentes na RMRJ, com patologias não associadas ao consumo de fumo e álcool. Após assinatura de termo de consentimento, todos foram entrevistados respondendo sobre antecedentes de tabagismo, consumo de álcool, hábitos alimentares, prática de higiene oral e padrão alimentar pregresso. A história ocupacional ao longo da vida de cada participante foi obtida mediante o preenchimento de um questionário ocupacional geral, crescido questionários específicos de dezenove ocupações selecionadas quando mencionadas na entrevista. As exposições ocupacionais foram estratificadas e analisadas através de parâmetros de intensidade, frequência e confiabilidade da exposição. Foram coletadas amostras de material biológico para análise de polimorfismos genéticos e pesquisa de HPV. A análise dos dados visou a determinação das OR das variáveis analisadas, sendo também obtidas aquelas referentes à interação entre polimorfismos genéticos selecionados com fumo e com álcool através da metodologia de estudo caso-controle apenas em casos. (...) Os resultados obtidos neste estudo no Rio de Janeiro quanto às associações analisadas com o câncer de boca e orofaringe, sobretudo em relação à dieta e suscetibilidade genética, estão relativamente em acordo com os relatos da literatura científica. / A hospital-based case-control study was carried out between 1999-2003 collectingepidemiological data and biological samples from 210 oral and oropharynx cancer casesand 251 controls. Cases were defined as 15-79 yr. patients with histopathologicalconfirmation of oral (C00-C10) and oropharynx cancer (C14), external lip excluded,without treatment antecedents and living in Rio de Janeiro Metropolitan Area. Agefrequencyand sex matched controls were enrolled from hospitalized patients living in thesame area with several diseases unrelated to smoking and alcohol intake. Followingconsent term signature, enrolled patients were interviewed and a validated questionnairewas filled including data on smoking, alcohol intake, diet and oral hygiene. A detailedoccupational history was obtained for each participant by using a general occupationalquestionnaire and other nineteen specific-job questionnaires were available and filledwhenever mentioned by the interviewed. Occupational exposures were stratified andanalyzed according to reported exposure intensity, frequency and reliability. Afterinterview, biologic samples (blood and oral mucosa cells) were obtained to geneticpolymorphism and HPV infection analysis. Odds ratios between lifestyle variables and oralcancer were ascertained, likewise interaction odds ratios between genetic polymorphisms,smoking and alcohol intake by using case-only study approach. (...) The results obtained in this study carried out in Rio de Janeiro on the oraland pharynx cancer risk factors, mainly those related to diet and genetic susceptibility, arein a relative agreement with the scientific literature. (AU)^ien

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2014-10-17T20:10:07Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_ Rosangela Goes Rabelo.pdf: 4609437 bytes, checksum: 0e6102f9298679791e3aeadf372b0da3 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2014-10-20T15:12:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_ Rosangela Goes Rabelo.pdf: 4609437 bytes, checksum: 0e6102f9298679791e3aeadf372b0da3 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-20T15:12:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_ Rosangela Goes Rabelo.pdf: 4609437 bytes, checksum: 0e6102f9298679791e3aeadf372b0da3 (MD5) / O objetivo deste estudo foi mensurar a ocorrência de acidentes de trabalho e avaliar a percepção do estudante do curso de Odontologia quanto aos riscos inerentes à prática com pacientes durante a sua formação profissional, a sua vulnerabilidade em relação a doenças infectocontagiosas e o conhecimento desses alunos sobre condutas a serem adotadas frente à exposição ocupacional e ao calendário vacinal. Trata-se de um estudo de corte transversal, descritivo, que envolveu 186 alunos do curso de Odontologia de uma Instituição Federal de Ensino Superior, matriculados em disciplinas clínicas do 4º ao 11º semestre. A coleta de dados foi feita por meio de um questionário autoaplicável, mediante assinatura prévia de termo de consentimento livre e esclarecido. O questionário contemplava dados sociodemográficos, situação vacinal, aspectos da biossegurança, exposição ocupacional e acidente de trabalho. O banco de dados foi estruturado no programa Epi Info versão 2006 e os dados analisados por meio de estatística descritiva. Foram observados: baixa cobertura vacinal contra hepatite B (83,8%) e outras vacinas; conhecimento insuficiente e inadequado quanto ao cumprimento das precauçõespadrão (62,8%); e elevada ocorrência de acidentes (37%). O semestre em curso foi o único fator associado à ocorrência de acidentes (p-valor<0,001). Em relação aos protocolos pós-exposição, 56% referiram não ter conhecimento, embora 65,9% reconheçam que as medidas devem ser adotadas nas primeiras 02 horas. Foi significativa a resposta de todos sobre a mudança de atitude pós-exposição, principalmente entre estudantes do sexo feminino (95,6%).

Programa de Pós-Graduação em Engenharia Ambiental. PROÁGUA, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2014-12-11T16:26:50Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTACAO_AvaliaçãoInfluênciaEmissões.pdf: 2479192 bytes, checksum: 1c08c947065974190ec3534f0bd40fcb (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-12-14T12:46:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTACAO_AvaliaçãoInfluênciaEmissões.pdf: 2479192 bytes, checksum: 1c08c947065974190ec3534f0bd40fcb (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-14T12:46:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTACAO_AvaliaçãoInfluênciaEmissões.pdf: 2479192 bytes, checksum: 1c08c947065974190ec3534f0bd40fcb (MD5) Previous issue date: 2009 / O benzeno, substância comprovadamente carcinogênica, é um composto onipresente na natureza. Seus efeitos tóxicos crônicos envolvem principalmente alterações hematológicas, como leucemias, além de influenciar diversos tipos de danos ao DNA. Existem diferentes fontes antropogênicas de emissão de benzeno, além de fontes naturais, sendo as principais fumaça de cigarro, escapamentos de automóveis, processos de abastecimento em postos de combustíveis e emissões industriais, principalmente de indústrias siderúrgicas e petroquímicas. As emissões mais significativas de benzeno nas siderúrgicas ocorrem durante o processo de coqueificação e são oriundas principalmente nas coquerias, normalmente presentes nessas indústrias. Tanto estas emissões quanto as das petroquímicas, são previstas por leis ocupacionais que instituem limites de exposição aos trabalhadores desses setores. As emissões de benzeno em áreas ocupacionais são legalmente controladas em todo o mundo, mas, poucos países legislam sobre a exposição não ocupacional. O Brasil não apresenta regulamentação quanto às concentrações atmosféricas fora de ambientes ocupacionais. Devido a esses fatores, nesta pesquisa foi avaliada a ocorrência de diferenças estatísticas no teor de ácido trans, trans-mucônico (ATTM) urinário, indicador biológico de exposição ao benzeno, entre moradores de uma cidade que possui uma grande indústria siderúrgica na área urbana. O ATTM foi extraído da urina através de cartucho contendo trocador iônico forte (SAX) e foi determinado por cromatografia líquida de alta eficiência, utilizando coluna C18 e detecção por UV-vis com arranjo de diodos. O método foi otimizado e validado com relação à linearidade, faixa de trabalho, precisão e exatidão, que apresentou resultados entre 78% e 98%. O método apresentou os limites de detecção e de quantificação iguais a 1,0 e 3,5μg.L-1, respectivamente. Foram determinadas as concentrações de ATTM em 193 amostras de urina coletadas em quatro sítios em duas campanhas de amostragem durante períodos de chuvas e estiagem. A concentração média de ATTM urinário encontrada foi 59,2μg.g-1 de creatinina. Não foi encontrada diferença estatística significativa ao nível de 95% de confiança com relação ao teor de ATTM urinário entre as duas campanhas, mas, nesse nível de confiança constatou-se diferença entre os resultados de indivíduos residentes em locais sob influência direta das emissões das coquerias e os resultados daqueles residentes em locais sem essa influência. Também foi encontrada diferença estatisticamente significativa ao nível de 95% de confiança entre os voluntários fumantes e não fumantes. ______________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: Benzene, a confirmed human carcinogen, is a ubiquitous environmental substance. Its chronic toxic effects are mainly haematopoietic effects, like leukaemia, and DNA damages. Besides natural sources of benzene, there are many anthropogenics sources, that the principal are tobacco smoke, exhaust emissions and evaporation losses from motor vehicles, evaporation losses during the handling, distribution and storage of fuels and industrial discharge, mainly from petroleum industry and steel industry. The significant emissions of benzene in the steel industry occur during the coke production processes, in a coke oven plant, usually existing in this industry. Both petroleum industry and steel industry emissions are due to the occupational laws that establish exposure limits for its workers. Benzene’s emissions in occupational areas are lawfully supervised around the world, but few countries have determined non occupational laws. Brazil hasn’t benzene atmospheric emissions regulation for general places. Due to this facts, in this work was evaluated the occurrence of significant statistics difference in the trans,trans-muconic acid (TTMA) urinary contents, biomarker exposure from benzene, among inhabitants from a city that has a steel industry in the urban area. The TTMA was clean-up through ionexchange (SAX) cartridge and it was determined by HPLC using a C18 column and UVVis detection with arrays of diodes. The method was optimized and validated about linearity range, work range, precision and accuracies, that showed results between 78% and 98%. It showed too, detection and quantification limits of 1,0 e 3,5 μg.L-1, respectively. Altogether, the TTMA urinary concentration was determined in 193 samples collected in four different places in two different periods, rainy and dry seasons.The mean TTMA urinary concentration was 59,2μg.g-1 creatinine. No statistically significant difference at the 95% level confidence was found between TTMA urinary concentrations in both periods. A difference statistically significant at 95% confidence level was found between TTMA urinary concentrations of the one group of voluntary living in areas with direct influence from coke oven plants emission and another living in places without such influence. The difference between the TTMA urinary concentration of smokers and nonsmokers was statistically significant at 95% confidence level.

A produção de uvas é uma importante atividade econômica da região nordeste do estado do Rio Grande do Sul. Nesta atividade são utilizadas misturas complexas de pesticidas para a proteção da plantação, mas que representa um potencial risco à saúde humana dos indivíduos expostos. Os sistemas de metabolização e reparo de DNA são importantes moduladores dos efeitos da exposição a substâncias genotóxicas. O presente estudo teve como objetivo principal avaliar a influência dos seguintes polimorfismos em genes de reparo: OGG1*Ser326Cys, XRCC1*Arg194Trp, XPD*Ile199Met, XPD*Asp312Asn, Rad51*G135C e XRCC4*Ile401Thr, nos níveis de danos ao DNA em trabalhadores expostos a pesticidas. A genotipagem destes polimorfismos foi realizada utilizando a técnica de PCR/RFLP. Os danos no DNA foram avaliados pelas técnicas de Ensaio Cometa (Índice de Danos – ID e Freqüência de Danos – FD) e Teste de Micronúcleo (MN) em 107 trabalhadores expostos a pesticidas e em 65 indivíduos não expostos a pesticidas. Diferenças nos níveis de ID, FD e MN entre os indivíduos com os diferentes genótipos de reparo individualmente ou quando combinados com o genótipo PON1, cuja proteína codificada está envolvida na metabolização de pesticidas, foram testadas pelo teste U de Mann- Whitney, já que a distribuição desde dados desviou significativamente da normalidade. O polimorfismo XPD*Ile199Met apresentou uma freqüência baixa do alelo variante (0,03), o que não possibilitou a análise da influência deste polimorfismo. Os genótipos de XRCC1*Arg194Trp e de Rad51*G135C, tanto individualmente quanto na análise combinada com o genótipo de PON1*Gln192Arg, não apresentaram diferenças significativas estatísticas nos níveis dos biomarcadores, apesar de ambos apresentarem uma tendência de proteção à exposição a pesticidas (XRCC1*Trp/ – e Rad51*G/G). O genótipo de OGG1*Ser326Cys demonstrou influência nos níveis de ID e de FD nos indivíduos expostos, individualmente (P=0,032 e P=0,009), como também quando combinado com o genótipo de PON1*Gln192Arg, sendo que o genótipo selvagem apresentou menores níveis de dano. O genótipo selvagem do polimorfismo XRCC4*Ile401Thr apresentou, nos indivíduos expostos um efeito protetor na freqüência de MN (P=0,024). O polimorfismo XPD*Asp312Asn apresentou influência em ID e FD na análise do genótipo individualmente, quando o genótipo selvagem correspondeu aos menores níveis nos biomarcadores (P=0,028 e P=0,035). Assim, os resultados demonstram que os danos detectados pelo Ensaio Cometa, principalmente danos oxidativos, quebras de fita simples e dupla, crosslinks DNA-DNA e DNA–proteína, são reparados preferencialmente pela via BER, que é descrita como responsável pela reparação de pequenas lesões como bases oxidadas ou reduzidas. Enquanto que no reparo dos danos detectados no Teste de MN, clastogênese e aneugênese, são as vias HR e NHEJ que atuam no reparo de quebras de fita dupla, como também a via NER. / Grape production is an important economic activity in northeast region of Rio Grande do Sul State. In this activity, pesticides complex mixtures are constantly utilized to protect the grapevines, but represent a human health potential risk to exposes individuals. The metabolizing and repair systems are important exposure effects modulators. The present study had as objective to evaluate the repair gene polymorphisms (OGG1*Ser326Cys, XRCC1*Arg194Trp, XPD*Ile199Met, XPD*Asp312Asn, Rad51*G135C, XRCC4*Ile401Thr) influences in DNA damage levels of exposed pesticides workers. The genotyping of these polymorphisms was performed by PCR/RFLP method. The DNA damage was evaluated by Comet assay (Damage Index – DI and Damage Frequency – DF) and Micronuclei test (MN) in 107 exposed workers and 65 non-exposed to pesticides. Differences in ID, DF, MN and between the different repair genotypes individually or combined to PON1 genotype, of which protein are involved in pesticides metabolizing, having a significant deviation from normality, were tested by the non-parametric Mann-Whitney U test. The XPD*Ile199Met polymorphism present a lower frequencies of the variant allele (0,03), and it was not possible analyze the influence of this polymorphism in damage levels. The XRCC1*Arg194Trp and Rad51*G135C polymorphisms, individually and combined to PON1*Gln192Arg genotype, not demonstrated a statistical differences in biomarkers levels, even though both polymorphisms present a protection tendency to pesticides exposure (XRCC1*Trp/ – e Rad51*G/G). The OGG1*Ser326Cys genotype showed influence in DI and DF levels into exposed group, individually P=0,032 and P=0,009), and when combined to PON1*Gln192Arg, once that the wild type genotype presents lower DNA damage levels. In exposed individuals, the wilt type genotype XRCC4*Ile401Thr presents a protector effect to MN frequencies (P=0,024). The XPD*Asp312Asn polymorphism present influence in DI and DF in individually analyses, when the wild type genotype correspond to lower biomarkers levels (P=0,028 and P=0,035). Our results demonstrated that damage detected in Comet Assay, mainly the oxidative damage, single e double strand breaks, crosslink DNA-DNA e DNA-protein, are repaired principally by Base Excision Repair pathway, that are described as responsible for repair of small lesions as oxidized and reduced bases. While in the repair of damage detected in MN test, clastogênese and aneugênese, are the Recombination Homologous and Non Homologous End Joining that act in double strand break, as the Nucleotide Excision Repair also has a influence.