Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-08T05:23:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jacinto_RogeriodeCastilho_D.pdf: 1193443 bytes, checksum: cc178c0781498658e7784945f13b0757 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Os objetivos deste estudo foram analisar a microbiota de canais radiculares com necrose e com lesão periapical de dentes sintomáticos e assintomáticos; quantificar a presença de endotoxinas; correlacionar a presença de bactérias específicas e a quantidade de endotoxinas com os sinais e sintomas de origem endodôntica; e investigar a suscetibilidade antimicrobiana de bactérias anaeróbias estritas isoladas dos canais radiculares contra 8 antibióticos, usando o E-test. Amostras microbiológicas foram coletadas de 90 canais radiculares com polpa necrosada e processadas por meio de técnicas microbiológicas. Outras 50 amostras foram obtidas de canais radiculares necrosados, sintomáticos e assintomáticos para realização do teste cromogênico para quantificação das endotoxinas. Análise estatística foi feita pelos testes x2 de Person ou de Fisher. Um total de 400 isolados clínicos foi encontrado, os quais pertenciam a 69 diferentes espécies e 22 diferentes gêneros. Oitenta por cento das bactérias eram anaeróbias estritas e F. nucleatum foi a espécie predominante. Canais radiculares de dentes sintomáticos apresentaram uma predominância de anaeróbios estritos e um número maior de espécies por canal radicular em relação aos dentes assintomáticos. Foi observada uma relação entre grupos microbianos específicos, principalmente anaeróbios Gram-negativos e a presença de dor espontânea ou dor prévia, dor à percussão, dor à palpação e edema. Endotoxinas foram encontradas em altas concentrações em canais radiculares de dentes sintomáticos e houve uma correlação positiva entre os sinais e sintomas e a concentração de endotoxinas. Amoxicilina, amoxicilina associada ao ácido clavulânico e cefaclor foram efetivos contra todas as cepas testadas. Os resultados sugerem que bactérias específicas e endotoxinas estão associadas aos sinais e sintomas de dentes com canais infectados e lesão periapical e que, a maioria das espécies anaeróbias testadas foi suscetível aos antibióticos estudados / Abstract: The aim of this study was to analyse the microflora isolated from infected root canals of symptomatic or asymptomatic teeth, to quantify the presence of endotoxins; to correlate the presence of specific bacteria and the amount of endotoxins with endodontic symptomatology; and to investigate the antibiotic susceptibility of anaerobic bacteria isolated from infected teeth with periapical lesions against 8 antibiotics through the E-test. Microbial samples were taken from 90 root canals of teeth with necrotic dental pulp, and analysed using rigorous culture procedures. Other 50 samples were collected from infected symptomatic or asymptomatic root canals in order to be analysed by a chromogenic test for the endotoxin quantification. Statistical analysis used a Pearson x2 test or a one-sided Fisher's Exact test, as appropriate. A total of 400 cultivable isolates were recovered from 69 different microbial species and 22 different genera. Eight per cent of the bacteria were were strict anaerobes and F. nucleatum was the most frequently isolated species. Root canals from symptomatic teeth harboured more obligate anaerobes and a larger number of bacterial species than the asymptomatic teeth. Relationships were found between specific microorganisms, especially Gram-negative anaerobes and the presence of pain or history of pain, tenderness to percussion, pain to palpation and swelling. High concentrations of endotoxins were found in root canals of symptomatic teeth and there was a positive correlation between endodontic signs and symptoms and the concentration of endotoxins in infected root canals. Amoxicillin, amoxicillin + clavulanate and cephaclor were effective against all the strains tested. Our results suggested that specific bacteria and endotoxins are associated with endodontic symptoms of infected teeth and that the majority of the anaerobic species tested was susceptible to all antibiotics studied. / Doutorado / Endodontia / Doutor em Clínica Odontológica

O objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, a influência da radioterapia na resistência de união (RU) do material obturador à dentina e na interface adesiva de caninos superiores obturados com cimento AH Plus e MTA Fillapex, por meio de teste de cisalhamento por extrusão (push-out) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Trinta e dois caninos superiores foram selecionados e distribuídos em 2 grupos (n=16) de acordo com a irradiação: Grupo I - Não irradiados e Grupo II - Irradiados, submetidos à radioterapia com raios-X com 6 MV em frações de 2 Gy, por 5 dias consecutivos, com 30 ciclos, durante 6 semanas, perfazendo 60 Gy. Após a irradiação, o preparo biomecânico dos dentes foi realizado utilizando o sistema Reciproc (R50) e irrigação com hipoclorito de sódio a 1%. Cada grupo foi subdividido de acordo com o cimento endodôntico utilizado (n=8): Subgrupo A - AH Plus; e Subgrupo B - MTA Fillapex e obturados com a técnica do cone único. Decorrido o tempo de endurecimento dos cimentos, os dentes foram transversalmente seccionados em slices de 1 mm de espessura, obtendo-se 3 slices de cada terço da raiz. O primeiro slice no sentido coroa-ápice de cada terço foi selecionado para avaliar a RU por meio do teste de push-out com velocidade de 0,5 mm/min e posterior análise do padrão de falhas por meio de estereomicroscópio. Para análise por MEV, foram selecionados aleatoriamente dois dentes de cada grupo, cujos slices (um de cada terço) foram preparados utilizando-se dois protocolos previamente à metalização. Para a análise da interface dentina/material obturador foi utilizado o protocolo de desidratação e para análise da penetrabilidade do cimento foi utilizado o protocolo de descalcificação superficial. Após metalização, os slices foram avaliados qualitativamente com aumentos de 75, 100 e 500x. Os dados (MPa) foram submetidos à análise estatística pelos testes de ANOVA e Tukey (p<0,0001). Os espécimes irradiados (0,71±0,20) apresentaram os menos valores de RU (p<0,0001) independente do cimento utilizado, e, quando comparados os cimentos, os espécimes obturados com MTA Fillapex (0,70±0,18) apresentaram valores menores que os obtidos com o AH Plus (1,00±0,27) (p<0,0001). O terço cervical apresentou valores superiores entre os terços das regiões analisadas dentro de cada grupo diminuindo em direção apical (p<0,0001). Houve maior ocorrência de falhas adesivas para o cimento AH Plus em todos os terços avaliados nos espécimes irradiados. Na análise qualitativa em MEV, observou-se maior quantidade de gaps na interface cimento/dentina nos espécimes irradiados quando comparados aos não irradiados. De modo geral, para os espécimes obturados com cimento AH Plus, foi possível observar a presença de densas áreas de tags resinosos, longos, contínuos e regularmente distribuídos, diferentemente dos obturados com MTA Fillapex que se apresentaram menores, menos numerosos e dispostos de forma irregular. Concluiu-se que a radioterapia diminuiu a RU dos cimentos à dentina, independente do cimento obturador utilizado, sendo que o MTA Fillapex propiciou RU menor que o AH Plus, tanto nos dentes irradiados como nos não irradiados, com formação de gaps na interface cimento/dentina e menor formação de tags resinosos / The purpose of this in vitro study was to evaluate the influence of the radiotherapy on the bond strength (BS) of the filling material to dentin and the adhesive interface of superior canines filled with AH Plus and MTA Fillapex using the bond strength test (push-out) and the scanning electron microscopy (SEM). Thirty-two superior canines were selected and divided into 2 groups (n=16) according to the irradiation: Group I - Non-irradiated and Group II - Irradiated, submitted to a X-Ray of 6 MV regimen in fractions of 2 Gy, for 5 consecutive days, 30 cycles during 6 weeks, totalizing 60 Gy. After the irradiation, biomechanical preparation of the teeth was performed with the Reciproc system (R50) irrigated with 1% sodium hypochlorite. Each group was then subdivided according the sealer (n=8): Subgroup A - AH Plus; and Subgroup B - MTA Fillapex and the single-cone technique was used. Elapsed the setting time of the sealers, the teeth were transversally sectioned in slices of ±1 mm thickness, obtaining 3 slices from each root third. The first slice in the crown-apex direction of each third was selected for the BS evaluation at a speed of 0.5 mm/min and the posterior analysis of the pattern failure with a stereomicroscope was performed. For the SEM analysis, two teeth of each group were randomly selected, in which, a slice of each third was prepared using two different protocols prior the metallization. For the dentin/filling material interface analysis a protocol of dehydration was used and for the sealer penetrability a superficial decalcification protocol was performed. After the metallization, the slices were qualitatively evaluated at 75, 100 and 500x magnifications. Data (MPa) was submitted to the statistical analysis by the ANOVA and Tukey tests (p<0.0001). The irradiated specimens (0.71±0.20) had lower BS values (p<0.0001) independently of the used sealer, and when compared, the sealers of the specimens filled with MTA Fillapex (0.70±0.18) showed lower values than the ones filled with AH Plus (1.00±0.27) (p<0.0001).The cervical third had higher values between the analysed regions of the thirds in each group, decreasing towards apical direction (P<0.0001). There was a higher occurrence of adhesive failures for the AH Plus sealer in every evaluated third of the irradiated specimens. In the qualitative analysis of the SEM, a higher amount of gaps was observed in the dentin/filling material interface of the irradiated specimens compared to the non-irradiated specimens. In general, for the specimens filled with AH Plus, it was possible to notice the presence of extensive areas with long and regularly distributed resin tags, them being, different from the specimens filled with MTA Fillapex, which were less frequent and irregularly disposed. It can be concluded that radiotherapy decreased the BS values of the sealers to the dentin, independently of the sealer, with lower values in the teeth filled with MTA Fillapex compared to AH Plus, both for the irradiated as well as for the non-irradiated teeth with formation of gaps in the interface sealer/dentin and the decrease formation of resin tags

>Magister Scientiae - MSc / The aim of this study was to compare the sealing ability of AH Plus sealer to the canal wall in the presence and absence of the smear layer.

Este trabalho teve como objetivo preparar e caracterizar um compósito de colágeno com silicato e hidroxiapatita a ser possivelmente utilizado para capeamento pulpar direto e em pulpotomia como material endodôntico em prevenção ao tratamento radical de canais radiculares que em virtude de suas anatomias dificultam a utilização de biomateriais no interior dos mesmos. Embora materiais para este fim estejam disponíveis no mercado, na maioria dos casos não são isentos de agressão na zona do reparo. O colágeno utilizado foi do tipo I na forma aniônica que foi misturado com silicato (cimento Portland branco) e hidroxiapatita em proporções variadas. Os materiais obtidos foram caracterizados por técnicas de calorimetria exploratória diferencial (DSC), termogravimetria (TG), microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectrometria de dispersão de energia de Raios-X (EDX) e espectroscopia na região do infravermelho (FTIR). A presença de colágeno no compósito foi demonstrada por transições térmicas típicas daquelas encontradas para o colágeno do tipo I ('APROXIMADAMENTE' 48 graus Celsius), independentemente da proporção utilizada, e também por MEV, onde as fibras colagênicas também puderam ser observadas interligando as partículas de silicato. Em função das quantidades de colágeno utilizadas, a composição química dos compósitos foi praticamente aquela descrita para o silicato inicial utilizado. Estes resultados mostraram que a estrutura da matriz colagênica nos compósitos estudados não foi alterada, uma característica importante para a utilização dos materiais propostos na endodontia objetivando uma reparação dos tecidos envolvidos de uma forma “mais natural” / In this work was prepared and characterized collagen composites with silicate and hydroxyapatite for pulp capping; post pulpotomy usage, as endodontic material. Even though materials for this purpose are available, in most case they suffer degradation in the repair zone when. Was used type I collagen in the form anionic mixed with silicate (white Portland cement) and hydroxyapatite in various proportions. The materials were characterized by standard differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetry (TG), scanning electronic microscopy (SEM) and infrared spectroscopy (FTIR), energy dispersion X-Ray (EDX). The presence of the collagen in the composite was checked via the thermal transitions typical for collagen type I ('APPROXIMATE' 48 Celsius degrees), independently of the proportion used and also via MEV, in which the collagenic fibers could also be seen interconnecting the silicate particles. For the amounts of collagen used, we find the chemical composition of the composites is essentially the same as that of the silicate we started with. This results showed that the structure of the collagenic matrix in the composite studied is not altered – an important feature for the use of the proposed materials in endodontic applications aiming at repairing the relevant tissues in a “more natural way”

Este estudo teve como objetivo avaliar a citotoxicidade, biocompatibilidade e perfil osteoindutor de um novo material a base de MTA (MTA Flow) comparado ao AH plus e MTA fillapex. A viabilidade celular foi avaliada em células-tronco do ligamento periodontal pelo teste MTT. A resposta inflamatória e o perfil osteoindutor foram avaliados em tecido conjuntivo de 24 ratos machos (Rattus norvegicus albinus, Rodentia, Mammalia da linhagem Wistar), pesando entre 300 e 350g. Os animais foram divididos em 4 grupos experimentais. Foram implantados 4 tubos de polietileno no dorso de cada animal, sendo um vazio e outros três preenchidos com um dos materiais. Após 7, 30 e 60 dias, 8 animais foram mortos com anestésico inalatório. O tubo e o tecido subcutâneo adjacente foram removidos e fixados em solução de formalina a 10%. O material foi analisado histológicamente quanto ao processo inflamatório, condensação fibrosa e presença de abscesso. Posteriormente, realizou-se a análise imunoistoquímica para identificação de colágeno I, osteopontina, sialoproteina óssea e proteína morfogentica óssea-4 (BMP-4). Os dados foram analisados estatisticamente pela ANOVA, complementado pelo teste de Tukey usando SPSS 15.0. O MTA Flow mostrou não ser citotóxico e ter excelente biocompatibilidade com menor reação inflamatória no tecido subcutâneo de ratos em comparação com AH Plus e MTA Fillapex. Além disso, o MTA Flow mostrou ser capaz de estimular o processo mineralização, sendo uma vantagem em relação aos outros materiais testados. / This study aimed to evaluate the cytotoxicity, biocompatibility and osteoinductive profile of a new MTA based material (MTA Flow) compared to AH plus and MTA fillapex. Cell viability was evaluated in periodontal ligament stem cells by the MTT test. The inflammatory response and the osteoinductive profile were evaluated in the connective tissue of 24 male rats (Rattus norvegicus albinus, Rodentia, Mammalia of the Wistar line) weighing between 300 and 350g. The animals were divided into 4 experimental groups. Four polyethylene tubes were implanted on the back of each animal, one empty and another three filled with one of the materials. After 7, 30 and 60 days, 8 animals were killed with inhaled anesthetic. The tube and adjacent subcutaneous tissue were removed and fixed in 10% formalin solution. The material was analyzed histologically for the inflammatory process, fibrous condensation and presence of abscess. Subsequently, the immunohistochemical analysis was performed to identify collagen I, osteopontin, bone sialoprotein and bone morphogenetic protein-4 (BMP-4). Data were analyzed statistically by ANOVA, complemented by the Tukey test using SPSS 15.0. MTA Flow was shown to be non-cytotoxic and to have excellent biocompatibility with lower inflammatory reaction in rat subcutaneous tissue compared to AH Plus and MTA Fillapex. In addition, the MTA Flow showed to be able to stimulate the mineralization process, being an advantage over the other materials tested.

Background: The regenerative function of stem cells from the apical papilla (SCAPs) is affected by the presence of bacteria from infected root canals. Living microorganisms influence SCAP function but the effect of inactive bacteria and its components on SCAPs needs further investigation. Aim: To investigate the effect of residual bacterial products on the proliferation of SCAP under anaerobic conditions. Methods: Five opportunistic bacterial strains from infected dental root canals namely Fusobacterium nucleatum, Enterococcus faecalis, Actinomyces gerensceria, Slackia exigua, and Peptostreptococcaceae yuri, and two probiotic strains Lactobacillus gasseri, Lactobacillus reuteri were used in this study. SCAPs collected from three healthy young patients were exposed to UV-inactivated bacteria or bacterial DNA. Real-Time Cell Analyzer (RTCA) was used to determine real-time proliferation of SCAPs after 80 hours exposure of inactivated bacteria or their DNA. Results: UV killed Fusobacterium nucleatum and Enterococcus Faecalis DNA affects proliferation of stem cells from dental apical papilla as monitored in real-time. Inactivated probiotic species do not affect SCAPs in terms of proliferation. Conclusion:  Inactivated bacteria can affect SCAP function by modulating their proliferation. Further investigations studying SCAP modulation and differentiation are warranted to understand and improve regenerative endodontic procedures.

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Dans le service d'odontologie du Centre Hospitalier Universitaire de Toulouse les patients présentant une pulpopathie consultent spontanément le service et sont pris en charge dans le cadre de la formation initiale des étudiants. Les patients peuvent aussi être référés par des praticiens de ville ou par d'autres services hospitaliers et sont alors pris en charge soit par des praticiens experts en endodontie ou des étudiants en formation continue. Dans tousles cas, le traitement endodontique engagé doit apporter au patient un bénéfice par rapport à la situation initiale en limitant les risques de comorbidité et les risques d'échecs. La lésion inflammatoire périapicale d'origine endodontique a une étiologie bactérienne et elle est, en terme de prévalence, très fréquemment associée au traitement endodontique. L'apparition, la persistance ou l'accroissement de cette lésion inflammatoire est consécutif à une exposition à un facteur favorisant ou risque et signe l'échec du traitement. Ce travail rassemble les données bibliographiques qui justifient qu'une attention particulière soit apportée au risque d'échec en endodontie. Deux études de recherche clinique et trois études expérimentales ont été développées dans ce cadre pour limiter le risque d'échec et sont intégrées dans cette synthèse qui établit un descriptif détaillé des risques d'échecs lié au traitement endodontique en fonction du patient, de l'opérateur et du geste. L'état général et les conditions bucco-dentaires du patient permettent de poser les indications du geste endodontique et les modalités de prise en charge. Les compétences de l'opérateur et le respect des procédures centré sur la désinfection et l'étanchéité sont les garants d'un traitement de qualité. / No abstract available