Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-18T18:08:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) biblioteca central.pdf: 4054998 bytes, checksum: 00c4a7ffb902283c81b233cc5cfcc56b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-18T18:08:43Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) biblioteca central.pdf: 4054998 bytes, checksum: 00c4a7ffb902283c81b233cc5cfcc56b (MD5) Previous issue date: 2014-02-12 / OBJETIVO. Analisar a participação de citocinas, quimiocinas e fatores de crescimento em endoftalmite infecciosa aguda pós-facectomia. MÉTODOS. Amostras de humor vítreo de 18 pacientes com endoftalmite foram coletadas e armazenadas a -80oC. IL-1ra, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12 (p70), IL-13, IL-15, IL-17, FGF básico, Eotaxina, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, MCP-1, MIP-1a, MIP-1b, PDGF-BB, RANTES, TNF-α e VEGF foram dosadas pela técnica de Bioplex e comparadas com 39 pacientes submetidos a vitrectomia por doença não-infecciosa (controle). RESULTADOS. As concentrações de IL-1ra, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-9, IL-10, IL-15, IL-17, eotaxina, FGF Básico, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, MCP-1, MIP-1a, MIP-1b, PDGF-bb, RANTES e TNF-α foram significantemente maiores (p<0.05) em olhos com endoftalmite. Não houve diferença significante entre os grupos em relação à concentração de IL-5, IL-12 (p70), IL-13 e VEGF. A concentração de IL-7 foi superior no grupo controle (p=0.0229). Considerando-se os diferentes diagnósticos do grupo controle, apenas IL-5 não apresentou diferença significante entre os grupos (p=0.1764). Foi observada correlação positiva entre TNF-α e eotaxina, IL-8, MIP-1a, MIP1b e RANTES. Observou-se correlação positiva moderada entre TNF-α e acuidade visual inicial (r=0.59, p=0.0096). Não se encontrou correlação entre acuidade visual inicial ou final entre os demais fatores dosados. CONCLUSÕES. A endoftalmite infecciosa pós-facectomia estimula a produção de citocinas, quimiocinas e fatores de crescimento. Os níves de TNF-α podem estar relacionados com a gravidade do processo inflamatório inicial. Não foi encontrado fator inflamatório preditivo para a acuidade visual final. / Purpose. To analyze the involvement of cytokines, chemokines and growth factors in acute infectious endophthalmitis following cataract extraction surgery. Methods. Vitreous humor samples were collected from 18 patients with infectious endophthalmitis. The Bio-Plex technique was used to measure IL-1ra, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12 (p70), IL-13, IL-15, IL-17, basic FGF, eotaxin, GCSF, GM-CSF, IFN-γ, MCP-1, MIP-1a, MIP-1b, PDGF-BB, RANTES, TNF-α and VEGF for comparison with levels in 39 patients undergoing vitrectomy for a noninfectious disease (control). Results. IL-1ra, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-9, IL-10, IL-15, IL-17, eotaxin, bFGF, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, MCP-1, MIP-1a, MIP-1b, PDGF-BB, RANTES and TNF-α levels were significantly higher (p <0.05) in eyes with endophthalmitis. There were no significant differences between groups for IL-5, IL-12 (p70), IL-13 and VEGF levels. IL-7 levels were higher in the control group (p = 0.0229). Considering the different diagnosis in the control group, only IL-5 was not significantly different between groups (p = 0.1764). There were positive correlations between TNF-α and eotaxin, IL-8, MIP-1a, MIP1b and RANTES, and a moderate positive correlation between TNF-α and the initial visual acuity (r = 0.59, p = 0.0096). There was no correlation with the initial or final visual acuity for the other factors measured. Conclusions. Infectious endophthalmitis following cataract extraction stimulates the production of cytokines, chemokines and growth factors. Levels of TNF-α may be related to the severity of the initial inflammatory processes. No inflammatory factor that could predict the final visual acuity was evident.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-06-01T19:49:04Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Kaline Sandrelli Amorim Ferreira.pdf: 1526807 bytes, checksum: ab0a7e500a7c3f5cda1ad7a0aec8e656 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-01T19:49:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Kaline Sandrelli Amorim Ferreira.pdf: 1526807 bytes, checksum: ab0a7e500a7c3f5cda1ad7a0aec8e656 (MD5) Previous issue date: 2016-12-28 / O objetivo foi estudar o perfil de liberação do moxifloxacino encapsulado em lipossomas, no humor aquoso, como um sistema de liberação controlada para aplicação intracameral. Lipossomas contendo moxifloxacino (MFLX-Lipo) foram obtidos através do método de hidratação do filme lipídico e foram caracterizados de acordo com o tamanho das partículas e sua eficiência de encapsulação. Quinze coelhas foram utilizadas para o estudo do perfil de liberação in vivo. MFLX-Lipo foi injetado na câmara anterior do olho direito de cada animal. As coelhas foram divididas em 5 grupos e uma amostra de humor aquoso (HA) foi coletada após 2, 4, 8, 24 e 48 horas após a administração de MFLX-Lipo. As concentrações de moxifloxacino (MFLX) no HA foram analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). MFLX-Lipo exibiu um tamanho médio de 60.5 ± 0.72 nm e uma distribuição do tamanho da partícula de 0.307. A eficiência de encapsulação do MFLX nos lipossomas foi de 92.24 ± 0.24%. No estudo de liberação in vivo do MFLX-Lipo, a concentração máxima de MFLX foi alcançada nas primeiras 2 horas após administração (4.16 ± 2.07 μg/mL) e foi seguida por um decréscimo na concentração intracameral, atingingo a concentração de 0.34 ± 0.05 μg/mL após 48 horas.A formulação lipossomal obtida exibe propriedades que a tornam adequada para a administração intraocular e oferece estabilidade e elevada eficiência de encapsulação. No estudo in vivo, MFLX-Lipo exibiu um perfil de liberação satisfatório no humor aquoso, o que sugere que se trata de uma opção para a profilaxia de patógenos frequentemente envolvidos na endoftalmite. / The purpose wasto study the release profile of moxifloxacin encapsulated in liposomes in the aqueous humor as a controlled release system for intracameral application. Liposomes containing moxifloxacin (MFLX-Lipo) were obtained using the lipid film hydration method and were characterized by particle size and encapsulation efficiency. Female rabbits were used for the in vivo profile release study. MFLX-Lipo was injected into the anterior chamber of each animal’s right eye. The rabbits were divided into 5 subgroups, and a sample of aqueous humor (AH) was collected 2, 4, 8, 24, and 48 hours after MFLX-Lipo administration. Moxifloxacin (MFLX) concentrations in the AH were analyzed using high performance liquid chromatography. MFLX-Lipo exhibited an average size of 60.5 ± 0.72 nm and a particle size distribution of 0.307. The encapsulation efficiency of MFLX in liposomes was 92.24 ± 0.24%. In the in vivo release study of MFLX-Lipo, the maximum concentration of MFLX was achieved within the first 2 hours after administration (4.16 ± 2.07 μg/mL) and was followed by a decrease in intracameral concentration (0.34 ± 0.05 μg/mL) until the 48-hour mark.The liposomal formulation obtained exhibits properties that make it suitable for intraocular administration and offers stability and high encapsulation efficiency. In the in vivo study, MFLX-Lipo exhibited a satisfactory aqueous humor release profile, which suggests that it is an option for the prophylaxis of frequent endophthalmitis pathogens.

Submitted by Rafael Santana (rafael.silvasantana@ufpe.br) on 2017-12-04T19:36:01Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) COLACAO DE GRAU - VERONICA 23.01.17.pdf: 1975816 bytes, checksum: 1debf40e1e8f3e90bd041fe2b5065263 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-04T19:36:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) COLACAO DE GRAU - VERONICA 23.01.17.pdf: 1975816 bytes, checksum: 1debf40e1e8f3e90bd041fe2b5065263 (MD5) Previous issue date: 2015-01-06 / CAPES / Introdução: Infecções intraoculares (endoftalmites) embora raras, quando ocorrem podem causar sérias complicações visuais, podendo culminar com a perda da visão. Com o propósito de minimizar este tipo de infecção, cirurgiões de todo o mundo têm se preocupado cada vez mais com qual método de assepsia e antissepsia seria o melhor a ser utilizado no pré-operatório das cirurgias oftalmológicas. Objetivo: Analisar dois métodos de redução da microbiota conjuntival em indivíduos submetidos à facectomia. Métodos: Ensaio clínico, com amostra de conveniência de 57 pacientes, com diagnóstico de catarata senil (57 olhos), submetidos à facoemulsificação com implante de lente intraocular em Recife entre 2011 a 2013. Os pacientes foram alocados em dois grupos: ATB (27 olhos) no qual foi instilado colírio antibiótico (Gatifloxacino a 0,3%) e ASS (30 olhos) no qual foi instilado colírio antisséptico (Iodopovidona a 5%); ambas as medicações foram utilizadas três vezes (uma gota a cada 20 minutos, uma hora previamente à cirurgia). Os grupos foram avaliados a partir de duas coletas de material conjuntival: a primeira antes de instilar algum colírio e a segunda imediatamente após a cirurgia. Foi realizada bacterioscopia, cultura e antibiograma. Resultados: Tanto a iodopovidona a 5% como o gatifloxacino a 0,3%, usados como profiláticos para a endoftalmite reduzem a microbiota conjuntival. Comparando-se a redução nas unidades formadoras de colônias patogênicas patogênicas encontradas nas lâminas no pré e no pós-operatório, não se verificou diferença estatística significativa entre os dois grupos. Em relação ao material presente no tubo de BHI, no pré-operatório observou-se que em 12 (21,1%) tubos o resultado foi negativo e que em 45 (78,9%) houve positividade. Já nos tubos do pósoperatório 27 (47,4%) apresentaram-se negativos e 30 (52,6%) apresentaram-se positivos. Conclusão: Esta pesquisa não demonstrou diferença estatisticamente significativa entre esses dois métodos de redução da microbiota conjuntival em indivíduos que foram submetidos à facoemulsificação. Houve diferença estatisticamente significante em relação à redução da positividade das culturas no grupo que fez uso do antisséptico. / Background: Intraocular infection (endophthalmitis) although rare, when it occurs can cause serious visual complications, and may lead to vision loss. In order to minimize this type of infection, surgeons worldwide have been increasingly concerned with what aseptic and antiseptic method would be the best to be used preoperatively in ophthalmologic surgery. Objective: To analyze two methods of reduction of the ocular conjunctival flora in patients undergoing cataract surgery. Methods: Clinical trial, with a convenience sample of 57 patients diagnosed with senile cataract (57 eyes) who underwent phacoemulsification surgery with intraocular lens implantation. The study was run in Recife from 2011 to 2013. Patients were divided into two groups: (ATB) ( 27 eyes) in which was instilled antibiotic eye drops (Gatifloxacin 0,3%) and ASS (30 eyes) in which was instilled antiseptic eye drops (Povidone-iodine 5%); Both medications were used three times (one drop every 20 minutes, one hour before surgery) . The groups were evaluated from two collections of conjunctival material: the first evaluation before instilling eye drops and the second one immediately after surgery. Gram stain, culture and sensitivity tests were performed. Results: Both gatifloxacin 0.3% and povidone-iodine 5% eye drops when used as prophylactics for endophthalmitis can reduce conjunctival microflora. Comparing the reduction in pathogenic bacterial colonies, found in the slides in the pre and postoperative period, there was no significant statistical difference between the two groups . Regarding the material present in BHI tube preoperatively, there was observed that in 12 (21.1%) the result was negative and in 45 (78.9%) it was positive. Considering the postoperative tubes, in 27 (47.4%) of them the result was negative and in 30 (52.6%) it was positive. Conclusion: This study showed no statistically significant difference between these two methods of reducing conjunctival microbiota in individuals undergoing cataract surgery. There was a statistically significant difference in reducing the number of positive cultures in the group that used the antiseptic eyedrops.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-22 / Objetivos: I- Relatar a incidência de endoftalmite bacteriana e a frequência dos microorganismos identificados numa instituição brasileira. II- Avaliar a frequência de microorganismos isolados de pacientes com endoftalmite bacteriana e sua suscetibilidade antimicrobiana. III- Determinar a aplicabilidade da reação em cadeia de polimerase em tempo real (PCR em tempo real) no diagnóstico de endoftalmite bacteriana pós-operatória em casos diagnosticados clinicamente, e avaliar a presença de DNA bacteriano em amostras-controles. Métodos: I- Todos os casos com diagnóstico clínico de endoftalmite pós-operatória de 2002 a 2008 foram incluídos nesta análise retrospectiva. Foram avaliados: número de cirurgias de catarata, incidência de endoftalmite, positividade dos exames laboratoriais de bacterioscopia e cultura de aquoso e vítreo e os resultados dos antibiogramas. II- Foi feita análise retrospectiva de prontuários de pacientes com suspeita diagnóstica de endoftalmite bacteriana. As seguintes informações foram avaliadas: número de casos com diagnóstico clínico de endoftalmite e com cultura positiva, fatores predisponentes para a infecção, bacterioscopia e cultura (aquoso e/ou vítreo), caracterização microbiológica e sua frequência, bem como suscetibilidade antimicrobiana. III- Foram incluídas amostras de olhos de pacientes com diagnóstico clínico de endoftalmite, de provável origem infecciosa, após cirurgia de catarata, assim como amostras de vítreo e de aquoso de olhos sem infecção ou reação inflamatória para controle. Foi realizada PCR em tempo real universal e específica para Gram bem como foram determinados sensibilidade e limiar de ciclos (Ct) da reação. Também foram realizadas bacterioscopia e cultura para as amostras clínicas. Resultados: I- Setenta e três olhos de 73 pacientes (43 do sexo feminino e 30 do masculino) desenvolveram inflamação ocular de provável etiologia infecciosa após 24.590 cirurgias de catarata. A incidência reduziu-se de 0,49% em 2003 para 0,17% em 2006 e estabilizou-se nos anos subsequentes. Staphylococcus coagulase-negativa (SCoN) e Streptococcus viridans (56,5% e 15%, respectivamente) foram as bactérias mais comuns. Cultura e bacterioscopia foram negativas em 36,9%. SCoN apresentou taxas de sensibilidade de 80% à oxacilina, 90% às quinolonas de quarta geração e 100% à vancomicina. II- Cento e sete (46%) de 231 pacientes com endoftalmite bacteriana tiveram resultados positivos por bacterioscopia ou cultura. Desses, 97 (42%) pacientes tiveram positividade apenas na cultura. A maioria (62%) foi decorrente de procedimento cirúrgico (pós-operatório), 12% após trauma e 26% de fonte desconhecida. Foram isolados 100 micro-organismos (38 amostras de aquoso e 67 de vítreo) de 97 casos positivos na cultura. SCoN foram os mais frequentemente isolados (48%), seguidos por Streptococcus viridans (18%) e Staphylococcus aureus (13%). A suscetibilidade antimicrobiana para SCoN foi: vancomicina - 100%, cefalotina – 97,9%, cloranfenicol – 91,8%, amicacina – 91,6%, moxifloxacino – 89,5%, tobramicina – 85,4% gatifloxacino – 79,5%, gentamicina – 72,9%, ofloxacino – 70,8%, ciprofloxacino – 62,5%, oxacilina – 58,3%, ceftriaxona – 50% e penicilina – 33,3%. III- Onze pacientes com endoftalmite infecciosa (9 amostras de vítreo e 7 de aquoso) após cirurgia de catarata foram incluídos, assim como 12 amostras de vítreo e 50 de aquoso de olhos-controles. Foi possível identificar 80% e 70% dos pacientes com endoftalmite infecciosa por meio de bacterioscopia e cultura, respectivamente. PCR em tempo real foi positiva em 91% dos pacientes utilizando-se amostras de aquoso e/ou vítreo. Nenhum dos 12 vítreos-controles foi positivo por PCR em tempo real. Duas das amostras-controles de aquoso foram positivas. O ponto de corte do limiar de ciclos para PCR universal foi 36 (sensibilidade: 93,8%; especificidade: 100%) e 38 para PCR gram-específico (sensibilidade: 93,8%; especificidade: 100%). Micro-organismos gram-positivos predominaram e a acuidade visual variou de acordo com a bactéria causadora. Conclusões: I- A incidência de endoftalmite bacteriana, os micro-organismos isolados e a sensibilidade aos antibióticos estão em acordo com a literatura. Apesar do uso profilático de colírio antibiótico, casos de infecção foram identificados em bactérias sensíveis aos antibióticos usados topicamente. II- Bactérias gram-positivas foram as principais causas de endoftalmite infecciosa. SCoN foi o isolado mais comum e a suscetibilidade à oxacilina e às quinolonas de quarta geração foi menor do que relatado na literatura. III- PCR em tempo real é um método diagnóstico rápido e sensível nos casos de endoftalmite bacteriana. Sendo um método quantitativo, também pode servir para uma nova e distinta aplicação: diferenciação entre contaminação e infecção com base nos valores de limiar de ciclos. / Purpose: To report on the incidence, diagnostic technique, microbiological features of endophthalmitis at a university-setting in Brazil. Methods: All cases of presumed postoperative endophthalmitis from 2002 to 2008 at a teaching-hospital were included. Main data assessed were: number of cataract surgeries performed, incidence of endophthalmitis, microbiological outcome (aqueous and/or vitreous culture and Gram staining), and antimicrobial susceptibility testing of the positive cases. Results: Seventy-three eyes of 73 patients (43 females and 30 males) developed endophthalmitis after 24,590 cataract surgeries. The incidence decreased from 0.49% in 2003 to 0.17% in 2006 and stabilized afterwards. Coagulase negative Staphylococci (CoNS) and Streptococcus viridans (56.5% and 15%, respectively) were the most common bacterial isolates. Culture and Gram stain were negative in 36.9%. CoNS presented susceptibility rates of 80%-sensitivity to oxacillin, 90% to fourth-generation quinolones and 100% to vancomycin. Conclusions: The rate of endophthalmitis, diagnostic ability of conventional laboratory investigation, microbial isolates and antibiotic susceptibility are in accordance with other findings of the literature. Despite using prophylactic antibiotic drops, it was possible to identify organisms from infected cases that were susceptible to the antibiotics topically applied. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

As infecções adquiridas durante cirurgias oftalmológicas podem ter efeitos devastadores. O objetivo do presente estudo foi de comparar a proporção de culturas bacterianas negativas no fundo de saco conjuntival inferior após uma ou três gotas sequenciais de iodopovidona a 5% (PVPI). Os voluntários foram aleatoriamente designados para receber uma gota de PVPI (grupo PVPI) (no tempo 28 minutos) ou três gotas de PVPI (grupo PVPI+) (nos tempos 0, 20 e 28 minutos) no saco conjuntival inferior em olhos selecionados aleatoriamente. Um cotonete conjuntival foi identicamente obtido cinco minutos antes e 30 minutos após o tempo 0. A espessura corneana central foi medida da mesma maneira antes do tempo 0 e após o tempo 30 minutos. Os esfregaços conjuntivais foram incubados aerobicamente em meio líquido de tioglicolato enriquecido (caldo de carne) e em três meios de cultura sólidos (ágar chocolate, ágar de tripticase-soja com 5% de sangue de ovelha e ágar Sabouraud). No grupo PVPI (n=59), a proporção de olhos com culturas bacterianas negativas após o uso do PVPI (79,7%) não diferiu significativamente do valor basal (76,3%; p=0,7539). No grupo PVPI+ (n=61), a proporção de olhos com culturas bacterianas negativas após instilação de PVPI (85,3%) foi significativamente maior do que antes da intervenção (70,5%) (p=0,0177). No entanto, a análise estatística intergrupos não detectou esta diferença. Não houve diferença significativa na média da espessura corneana central antes e após a intervenção em ambos os grupos. A instilação de três gotas sequenciais de PVPI foi associada ao aumento na proporção de olhos com culturas conjuntivais negativas, enquanto que a instilação de uma única gota de PVPI não demonstrou este aumento. É necessário um estudo mais aprofundado para determinar se a diferença entre os regimes de administração da PVPI está associada a diferentes taxas de infecções oculares pós-operatórias. / Infections acquired during ophthalmic surgery can be devastating. The purpose of the current study is to compare the proportion of negative bacterial cultures after one versus three sequential drops of povidone-iodine (PI) 5% into the inferior conjunctival fornix. Patients were randomly assigned to receive 1 (PI group) drop (at time 28 minutes) or three (PI plus group) sequential drops (at time 0, 20 and 28 minutes) of PI 5% into the inferior conjunctival sac of one randomly selected eye. A conjunctival swab was identically obtained 5 minutes before and 30 minutes after time 0. Central corneal thickness (CCT) was measured in the same way before time 0 and after time 30. Conjunctival swabs were incubated aerobically in enriched Thioglycolate liquid medium (meat broth) and in three solid culture media (chocolate agar, trypticase soy agar with 5% sheep blood, and Sabouraud agar). In the PI group (n=59), the proportion of eyes with negative bacterial cultures after PI (79.7%) did not differ significantly from baseline (76.3%; p=0.7539). In the PI plus group (n=61), the proportion of eyes with negative bacterial cultures after PI (85.3%) was significantly higher than before PI (70.5%) (p=0.0177). However, the intergroup statistical analysis did not detect this difference.There was no significant difference in mean CCT before and after the intervention in both groups. Instillation of three sequential drops of PI was associated with an increase in the proportion of eyes with negative conjunctival cultures, while instillation of a single drop of PI did not demonstrate this increase.Further study is warranted to determine whether the difference between the PI administration regimens is also associated with differences in the rates of postoperative ocular infections.

As infecções adquiridas durante cirurgias oftalmológicas podem ter efeitos devastadores. O objetivo do presente estudo foi de comparar a proporção de culturas bacterianas negativas no fundo de saco conjuntival inferior após uma ou três gotas sequenciais de iodopovidona a 5% (PVPI). Os voluntários foram aleatoriamente designados para receber uma gota de PVPI (grupo PVPI) (no tempo 28 minutos) ou três gotas de PVPI (grupo PVPI+) (nos tempos 0, 20 e 28 minutos) no saco conjuntival inferior em olhos selecionados aleatoriamente. Um cotonete conjuntival foi identicamente obtido cinco minutos antes e 30 minutos após o tempo 0. A espessura corneana central foi medida da mesma maneira antes do tempo 0 e após o tempo 30 minutos. Os esfregaços conjuntivais foram incubados aerobicamente em meio líquido de tioglicolato enriquecido (caldo de carne) e em três meios de cultura sólidos (ágar chocolate, ágar de tripticase-soja com 5% de sangue de ovelha e ágar Sabouraud). No grupo PVPI (n=59), a proporção de olhos com culturas bacterianas negativas após o uso do PVPI (79,7%) não diferiu significativamente do valor basal (76,3%; p=0,7539). No grupo PVPI+ (n=61), a proporção de olhos com culturas bacterianas negativas após instilação de PVPI (85,3%) foi significativamente maior do que antes da intervenção (70,5%) (p=0,0177). No entanto, a análise estatística intergrupos não detectou esta diferença. Não houve diferença significativa na média da espessura corneana central antes e após a intervenção em ambos os grupos. A instilação de três gotas sequenciais de PVPI foi associada ao aumento na proporção de olhos com culturas conjuntivais negativas, enquanto que a instilação de uma única gota de PVPI não demonstrou este aumento. É necessário um estudo mais aprofundado para determinar se a diferença entre os regimes de administração da PVPI está associada a diferentes taxas de infecções oculares pós-operatórias. / Infections acquired during ophthalmic surgery can be devastating. The purpose of the current study is to compare the proportion of negative bacterial cultures after one versus three sequential drops of povidone-iodine (PI) 5% into the inferior conjunctival fornix. Patients were randomly assigned to receive 1 (PI group) drop (at time 28 minutes) or three (PI plus group) sequential drops (at time 0, 20 and 28 minutes) of PI 5% into the inferior conjunctival sac of one randomly selected eye. A conjunctival swab was identically obtained 5 minutes before and 30 minutes after time 0. Central corneal thickness (CCT) was measured in the same way before time 0 and after time 30. Conjunctival swabs were incubated aerobically in enriched Thioglycolate liquid medium (meat broth) and in three solid culture media (chocolate agar, trypticase soy agar with 5% sheep blood, and Sabouraud agar). In the PI group (n=59), the proportion of eyes with negative bacterial cultures after PI (79.7%) did not differ significantly from baseline (76.3%; p=0.7539). In the PI plus group (n=61), the proportion of eyes with negative bacterial cultures after PI (85.3%) was significantly higher than before PI (70.5%) (p=0.0177). However, the intergroup statistical analysis did not detect this difference.There was no significant difference in mean CCT before and after the intervention in both groups. Instillation of three sequential drops of PI was associated with an increase in the proportion of eyes with negative conjunctival cultures, while instillation of a single drop of PI did not demonstrate this increase.Further study is warranted to determine whether the difference between the PI administration regimens is also associated with differences in the rates of postoperative ocular infections.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-04-29. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:26:21Z : No. of bitstreams: 1 Publico-178.pdf: 625763 bytes, checksum: bd311a8cd3f7ff010bc833233dd4c82b (MD5) / Objetivo: Desenvolvimento e aplicação de protocolos de Nested Multiplex PCR e PCR em Tempo Real para a detecção bacteriana e classificação de Gram em amostras de humor aquoso e vítreo coletadas de pacientes com suspeita clínica de endoftalmite. Métodos: Especificidade analítica foi estabelecida utilizando 31 microrganismos clinicamente importantes, 20 gram-positivos e 11 gram-negativos. Reação cruzada com DNA humano e DNA fúngico foi testada. Amostras controles de humor aquoso coletadas após facoemulsificação foram incluídas. Sensibilidade analítica para as metodologias de PCR foram determinadas utilizando diluição seriada 1:10 de DNA extraído de S. epidermidis e E. coli. As técnicas foram posteriormente aplicadas e testadas em amostras de humor aquoso e vítreo coletadas de pacientes com diagnóstico clínico de endoftalmite. Preparações comerciais de Taq DNA polimerase foram pré-tratadas com DNaseI. Resultados: Amplificação genérica do gene 16S rDNA foi positiva para todos os isolados bacterianos. Classificação de Gram pela técnica de Nested Multiplex PCR não foi possível apenas para isolados de Acinetobacter spp. Utilizando PCR Multiplex em Tempo Real, todos os isolados foram classificados por Gram, sendo que P. acnes exibiu um padrão misto de amplificação. Limite de detecção da metodologia de Nested Multiplex PCR foi de 1 fg/μl para S. epidermidis e E.coli. A sensibilidade de detecção para S. epidermidis e E. coli utilizando reação para detecção universal bacteriana por PCR em Tempo Real com SYBR Green foi de 100 fg/μl (E = 0,82 e 0,86; r2 = 0,99) e 1 pg/μl utilizando metodologia de PCR Multiplex em Tempo Real com Sondas TaqMan (E = 0,66 e 0,77; r2 = 0,99). A positividade da cultura para detecção bacteriana a partir de amostras de humor aquoso e vítreo foi de 47,6% e pelas metodologias de Nested Multiplex PCR e PCR em Tempo Real foi de 100% e 95,2% respectivamente. Entre as amostras negativas por cultura (n=10), a metodologia de Nested Multiplex PCR foi positiva para todas (100%) e PCR em Tempo Real em 90% dos casos (9/10). Entretanto, a proporção de falso-positivos pela metodologia de Nested Multiplex PCR (65,4%) foi superior aos valores obtidos por PCR em Tempo Real (7,7%). A classificação de gram foi obtida em 88,8% dos casos por Nested PCR e 100% por PCR em Tempo Real. A correlação entre a identificação clássica e classificação de Gram molecular foi 63,6% para ambas as técnicas. A identificação pelo sequenciamento dos produtos obtidos por Nested Multiplex PCR e PCR em Tempo Real apresentou correlação de 100% e 88,8%, respectivamente, quando comparada a identificação fenotípica. Conclusões: As metodologias de PCR apresentaram boa correlação quando comparadas com os resultados da cultura e a detecção passou de 47,6% por cultura para 100%, demonstrando serem testes viáveis e mais sensíveis para a caracterização laboratorial de endoftalmite. / Objective: Development and application of Nested Multiplex PCR and Real Time PCR assays for detection and Gram classification of bacteria using aqueous and vitreous humor collected from patients with suspected endophthalmitis. Methods: Analytical specificity was established using 31 clinically important pathogens, 20 gram-positive and 11 gram-negative. Specificity was also tested using human DNA and fungal DNA. Control samples of non-infected aqueous humor collected at the end of phacoemulsification surgery were included. Analytical sensitivity was determined using a 10-fold dilution of S. epidermidis and E. coli DNA. After, methodologies were tested in aqueous and vitreous humor collected from patients with clinical diagnosis of endophthalmitis. Comercial Taq polymersase preparations were DNA decontaminated using DNaseI pretreatment. Results: Universal amplification of 16S rDNA was achieved for all bacterial isolated. Nested Multiplex PCR failed only to determine the Gram status of Acinetobacter spp. Gram classification was achieved for every bacterial isolates using a Multiplex Gram-Specific TaqMan-based PCR, and only a P. acnes isolate showed a mixed signal. Limit of detection using Nested Multiplex PCR was 1 fg/μl for both S. epidermidis and E. coli. Sensitivity for detection of S. epidermidis and E. coli DNA using a SYBR Green 16S rDNA-based universal PCR was 100 fg/μl (E = 0.82 and 0.86; r2 = 0.99) and 1 pg/μl using a Multiplex Gram-Specific TaqMan-based PCR (E = 0.66 and 0.77; r2 = 0.99). Culture was positive in 47.6% of aqueous and vitreous humor analysis. Nested Multiplex PCR and Real Time PCR assays were positive in 100% and 95.2% of these cases, respectively. Among negative culture samples, Nested Multiplex PCR was positive for all (100%) and Real Time PCR assays in 90% of cases (9/10). Gram classification was completed for 88.8% and 100% samples using Nested Multiplex PCR and Real Time PCR methodologies, respectively. Correlation of 63.6% between microbiological and molecular Gram classification was observed using both molecular assays. 16S rDNA sequence-based identification using Nested Multiplex PCR and Real Time PCR products showed 100% and 88.8% correlation respectively when compared with phenotypic identification. Conclusions: Both PCR methodologies presented good correlation when compared with culture-proven results and bacterial detection was improved from 47.6%% to 100% showing to be feasible tests for laboratorial characterization of bacterial endophthalmitis. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Introdução: Entre os possíveis Eventos Adversos (EA) mais importantes após cirurgias de catarata estão a endoftalmite, termo que define a infecção intraocular e a Síndrome Tóxica do Segmento Anterior (TASS), que consiste na reação inflamatória aguda pós-cirúrgica. Contudo, um sistema de vigilância epidemiológica (VE) da ocorrência destes EA não é uma realidade no Brasil, o que dificulta o monitoramento da incidência, detecção precoce de surtos e as medidas de prevenção. Devido as especificidades no campo da oftalmologia, nem sempre o enfermeiro está suficientemente instrumentalizado para contribuir na detecção e monitoramento de casos. A identificação de marcadores destes EA factíveis de serem acompanhados por este profissional irá favorecer o desenvolvimento de um sistema de VE. Objetivo: Identificar os marcadores mais adequados para o diagnóstico epidemiológico de EA após cirurgias de catarata visando à instituição de um sistema de VE específico. Métodos: Trata-se de um estudo longitudinal de série de casos de pacientes submetidos a cirurgias de catarata, realizado em duas etapas. Etapa I: abordagem retrospectiva por meio de revisão de prontuários dos pacientes com diagnóstico de EA (21 casos) no período de abril/2010 a fevereiro/2013. Etapa II: abordagem prospectiva por meio de revisão de prontuários dos pacientes submetidos à cirurgia de catarata sem EA (309 controles) nos meses de maio e junho/ 2013. A amostra baseou-se em um teste de proporções entre duas amostras assumindo que a amostra de controles seria 15 vezes maior que a de casos para detectar uma diferença de pelo menos 35 pontos percentuais na incidência da apresentação de características clínicas entre os dois grupos com erro tipo I de 5% e poder do teste de 90%. As variáveis pesquisadas foram os sinais e sintomas característicos do pós-operatório de cirurgias de catarata bem como informações demográficas e clínicas destes pacientes. Foi realizada estatística descritiva por meio de frequências relativas e absolutas. Resultados: Pacientes com EA apresentaram o diagnóstico de endoftalmite e TASS, respectivamente, em 19 (90,5%) e dois casos (9,5%). Dentre os casos, os sinais mais observados foram: córnea nebulosa, reação de câmara anterior (RCA), edema de córnea (>70%) e hipópio, hiperemia conjuntival, turvação vítrea e dobras na membrana Descemet (>40%). Dor ocular foi o sintoma relatado por 14 (66,7%) dos pacientes. Dentre os controles, no primeiro dia após a cirurgia os sinais mais apresentados (>50%) foram: RCA, edema de córnea, hiperemia conjuntival e dobras na Descemet. Córnea nebulosa e edema palpebral em mais que 30% dos pacientes. Os sinais e sintomas que apresentaram diferença maior que 35% entre os casos e controles foram: presença de hipópio, vítreo turvo, córnea nebulosa. RCA, hiperemia conjuntival, edema de córnea e dor ocular. A incidência de aplicação de antibiótico intra-vítreo e número de retornos foram maiores entre os casos do que nos controles. Uma ferramenta para auxiliar no sistema de VE foi sugerida a partir dos resultados obtidos no presente estudo. Conclusões: Os marcadores clínicos e epidemiológicos considerados mais adequados para compor uma ferramenta para VE foram: dor, edema de córnea, hiperemia conjuntival, hipópio, RCA, vítreo turvo, aplicação de antibiótico intra-vítreo e número de retornos. A ferramenta proposta por este estudo tem potencialidade para subsidiar a atuação do enfermeiro no sistema de VE de EA para cirurgias de catarata. / Introduction: Amongst the most important possible Adverse Events (AE) after cataract surgeries, are the endophthalmitis, a term which defines the intraocular infection and the Toxic Anterior Segment Syndrome (TASS), which is the acute inflammatory post-surgical reaction. However, an epidemiological surveillance (ES) system of these AE isnt a reality in Brazil, which makes difficult the incidence monitoring and early detection of outbreaks and preventive measures. Due to specifics in ophthalmology, nurses are not always enable to detect and monitoring the cases. The identification of markers of these AE achievable to be monitored by nurses will facilitate the development of an epidemiological ES system. Objective: Identifying most suitable markers for epidemiological diagnosis of AE after cataract surgeries aiming at the establishment of a specific ES system. Methods: This is a longitudinal case series study of patients who underwent cataract surgery performed in two phases. Phase I: a retrospective approach through reviews of medical records of patients that were diagnosed with AE (21 cases) from April/2010 to February/2013. Phase II: prospective approach through reviews medical records of patients without AE (309 controls) in the months of May and June of 2013. The sample size was based on a test of proportion between 2 samples assuming that control sample would be 15 times greater than of the cases to detect a difference of at least 35 percentage points in the incidence of clinical characteristics between the two groups, with type I error of 5% and power of testing of 90%. The variables studied were signs and symptoms of the post-operative presentation of cataract surgeries as well as demographic information and clinics of these patients. A descriptive statistics was carried out by using relative and absolute frequencies. Results: Patients with EA were diagnosed with endophthalmitis and TASS, respectively, in 19 (90,5%) and two cases (9,5%). Among cases, the signs most frequently observed were: corneal nebulosity, anterior chamber reaction (ACR), corneal edema (>70%), and hypopyon, conjunctival hyperemia, vitreous haze e Descemet\'s membrane folds (DMF) (>40%). Ocular pain was reported by 14 (66,7%) of patients. Amongst controls, on the first day after surgery the most frequent signals (>50%) were: ACR, corneal edema, conjunctival hyperemia and DMF. Corneal nebulosity and eyelid edema in more than (30,0%) patients. The signs that showed a difference greater than 35% between the cases and controls were: hypopyon, vitreous haze, corneal nebulosity, ACR, conjunctival hyperemia, corneal edema, and eye pain. The incidence of intravitreal antibiotic injection and the number of medical consultation returns were bigger amongst the cases than in the controls. A tool to assist in the ES system was suggested from the results obtained in the present study. Conclusions: The clinical and epidemiological markers considered the most adequate to form a tool for ES is: ocular pain, corneal edema, conjunctival hyperemia, hypopyon, ACR, vitreous haze, intravitreal antibiotic injection and the number of returns. The tool suggested by this study has the potential to support the nurses roles related to ES system for monitoring EA in cataract surgeries.

Introdução: Entre os possíveis Eventos Adversos (EA) mais importantes após cirurgias de catarata estão a endoftalmite, termo que define a infecção intraocular e a Síndrome Tóxica do Segmento Anterior (TASS), que consiste na reação inflamatória aguda pós-cirúrgica. Contudo, um sistema de vigilância epidemiológica (VE) da ocorrência destes EA não é uma realidade no Brasil, o que dificulta o monitoramento da incidência, detecção precoce de surtos e as medidas de prevenção. Devido as especificidades no campo da oftalmologia, nem sempre o enfermeiro está suficientemente instrumentalizado para contribuir na detecção e monitoramento de casos. A identificação de marcadores destes EA factíveis de serem acompanhados por este profissional irá favorecer o desenvolvimento de um sistema de VE. Objetivo: Identificar os marcadores mais adequados para o diagnóstico epidemiológico de EA após cirurgias de catarata visando à instituição de um sistema de VE específico. Métodos: Trata-se de um estudo longitudinal de série de casos de pacientes submetidos a cirurgias de catarata, realizado em duas etapas. Etapa I: abordagem retrospectiva por meio de revisão de prontuários dos pacientes com diagnóstico de EA (21 casos) no período de abril/2010 a fevereiro/2013. Etapa II: abordagem prospectiva por meio de revisão de prontuários dos pacientes submetidos à cirurgia de catarata sem EA (309 controles) nos meses de maio e junho/ 2013. A amostra baseou-se em um teste de proporções entre duas amostras assumindo que a amostra de controles seria 15 vezes maior que a de casos para detectar uma diferença de pelo menos 35 pontos percentuais na incidência da apresentação de características clínicas entre os dois grupos com erro tipo I de 5% e poder do teste de 90%. As variáveis pesquisadas foram os sinais e sintomas característicos do pós-operatório de cirurgias de catarata bem como informações demográficas e clínicas destes pacientes. Foi realizada estatística descritiva por meio de frequências relativas e absolutas. Resultados: Pacientes com EA apresentaram o diagnóstico de endoftalmite e TASS, respectivamente, em 19 (90,5%) e dois casos (9,5%). Dentre os casos, os sinais mais observados foram: córnea nebulosa, reação de câmara anterior (RCA), edema de córnea (>70%) e hipópio, hiperemia conjuntival, turvação vítrea e dobras na membrana Descemet (>40%). Dor ocular foi o sintoma relatado por 14 (66,7%) dos pacientes. Dentre os controles, no primeiro dia após a cirurgia os sinais mais apresentados (>50%) foram: RCA, edema de córnea, hiperemia conjuntival e dobras na Descemet. Córnea nebulosa e edema palpebral em mais que 30% dos pacientes. Os sinais e sintomas que apresentaram diferença maior que 35% entre os casos e controles foram: presença de hipópio, vítreo turvo, córnea nebulosa. RCA, hiperemia conjuntival, edema de córnea e dor ocular. A incidência de aplicação de antibiótico intra-vítreo e número de retornos foram maiores entre os casos do que nos controles. Uma ferramenta para auxiliar no sistema de VE foi sugerida a partir dos resultados obtidos no presente estudo. Conclusões: Os marcadores clínicos e epidemiológicos considerados mais adequados para compor uma ferramenta para VE foram: dor, edema de córnea, hiperemia conjuntival, hipópio, RCA, vítreo turvo, aplicação de antibiótico intra-vítreo e número de retornos. A ferramenta proposta por este estudo tem potencialidade para subsidiar a atuação do enfermeiro no sistema de VE de EA para cirurgias de catarata. / Introduction: Amongst the most important possible Adverse Events (AE) after cataract surgeries, are the endophthalmitis, a term which defines the intraocular infection and the Toxic Anterior Segment Syndrome (TASS), which is the acute inflammatory post-surgical reaction. However, an epidemiological surveillance (ES) system of these AE isnt a reality in Brazil, which makes difficult the incidence monitoring and early detection of outbreaks and preventive measures. Due to specifics in ophthalmology, nurses are not always enable to detect and monitoring the cases. The identification of markers of these AE achievable to be monitored by nurses will facilitate the development of an epidemiological ES system. Objective: Identifying most suitable markers for epidemiological diagnosis of AE after cataract surgeries aiming at the establishment of a specific ES system. Methods: This is a longitudinal case series study of patients who underwent cataract surgery performed in two phases. Phase I: a retrospective approach through reviews of medical records of patients that were diagnosed with AE (21 cases) from April/2010 to February/2013. Phase II: prospective approach through reviews medical records of patients without AE (309 controls) in the months of May and June of 2013. The sample size was based on a test of proportion between 2 samples assuming that control sample would be 15 times greater than of the cases to detect a difference of at least 35 percentage points in the incidence of clinical characteristics between the two groups, with type I error of 5% and power of testing of 90%. The variables studied were signs and symptoms of the post-operative presentation of cataract surgeries as well as demographic information and clinics of these patients. A descriptive statistics was carried out by using relative and absolute frequencies. Results: Patients with EA were diagnosed with endophthalmitis and TASS, respectively, in 19 (90,5%) and two cases (9,5%). Among cases, the signs most frequently observed were: corneal nebulosity, anterior chamber reaction (ACR), corneal edema (>70%), and hypopyon, conjunctival hyperemia, vitreous haze e Descemet\'s membrane folds (DMF) (>40%). Ocular pain was reported by 14 (66,7%) of patients. Amongst controls, on the first day after surgery the most frequent signals (>50%) were: ACR, corneal edema, conjunctival hyperemia and DMF. Corneal nebulosity and eyelid edema in more than (30,0%) patients. The signs that showed a difference greater than 35% between the cases and controls were: hypopyon, vitreous haze, corneal nebulosity, ACR, conjunctival hyperemia, corneal edema, and eye pain. The incidence of intravitreal antibiotic injection and the number of medical consultation returns were bigger amongst the cases than in the controls. A tool to assist in the ES system was suggested from the results obtained in the present study. Conclusions: The clinical and epidemiological markers considered the most adequate to form a tool for ES is: ocular pain, corneal edema, conjunctival hyperemia, hypopyon, ACR, vitreous haze, intravitreal antibiotic injection and the number of returns. The tool suggested by this study has the potential to support the nurses roles related to ES system for monitoring EA in cataract surgeries.