MAIA FILHO, P. A. Genotoxicidade e mutagenicidade em pacientes com leucemia mieloide crônica tratados com inibidores de tirosino-quinase. 2017. 64 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-03-24T13:51:01Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_pamaiafilho.pdf: 1620056 bytes, checksum: b8fde4a5c189ab98dfc52d58490d9eb1 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-03-24T13:51:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_pamaiafilho.pdf: 1620056 bytes, checksum: b8fde4a5c189ab98dfc52d58490d9eb1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-24T13:51:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_pamaiafilho.pdf: 1620056 bytes, checksum: b8fde4a5c189ab98dfc52d58490d9eb1 (MD5) Previous issue date: 2017-02-15 / Chronic myelogenous leukemia (CML) is a myeloproliferative disease of hematopoietic stem cells, characterized by the presence of the Philadelphia (Ph) chromosome, originating from a reciprocal translocation between the long arms of chromosomes 9 and 22, forming the gene BCR-ABL, which encodes a BCR-ABL oncoprotein with constitutive tyrosine kinase activity. The clinical course of CML is often divided into three phases: chronic, accelerated, and blast. The treatment of choice for the chronic phase is the first-generation tyrosine kinase inhibitor (TKI), imatinib mesylate, and for refractory patients, second-generation TKIs (dasatinib or nilotinib) are used. Studies have shown that residual leukemia may persist even in the best responders to TKI, since therapy is not curative. In this context, the present study aimed to evaluate the genotoxicity and mutagenicity of TKI in patients with CML followed at the hematology clinic of the Walter Cantídio University Hospital (HUWC). It is a cross-sectional study with 44 patients with clinical and molecular diagnosis of CML. Patients were stratified into three groups: diagnosis (CML D) (n = 5), use of first generation TKI (CML) (n = 31) and use of second generation TKI (CML) (n = 8). The control group (CG) consisted of apparently healthy individuals. Genotoxicity and mutagenicity were analyzed by the comet assay and micronucleus test. Statistical analysis of the data was performed using the GraphPad Prism 6.0 program using the Kruskal-Wallis or ANOVA, Mann Whitney or T-student tests, depending on the normality of the data and the level of significance was 5% (p < 0.05). Patients with CML had a statistically higher ADN damage index (DI) compared to CG (p < 0.0001). When the patients were stratified, a progressive increase of the DNA ID was verified in the groups: CML D, CML G1 and CML G2, respectively, relative to GC (p < 0.05). Patients with CML had a statistically higher micronucleus index (NMI), nucleoplasmic bridge index (NPI) and nuclear bud index (NBI) compared to the CG (p < 0.05). By stratifying patients with CML, it was found that patients in the G1 and G2 CML groups had statistically higher NMI and NPI compared to CG (p <0.001). NMI was also elevated in the CML G2 group in relation to the patients in the CML D group (p <0.01). The nuclear bud index (NBI) did not present statistical difference in the analyzes performed after the stratification of the groups. The TKI revolutionized CML therapy, improving patient survival. However, these results point to the relevance of studies that evaluate the possible genotoxic and mutagenic effects of this therapy in the long term. The mechanisms involved should be elucidated for the purpose of improving treatment as well as assessing the clinical impact this harm may cause. / A leucemia mielóide crônica (LMC) é uma doença mieloproliferativa das células-tronco hematopoéticas, caracterizada pela presença do cromossomo Philadelphia (Ph), originado a partir de uma translocação recíproca entre os braços longos dos cromossomos 9 e 22, formando o gene BCR-ABL, que codifica uma oncoproteína BCR-ABL com atividade tirosino-quinase constitutiva. O curso clínico da LMC é frequentemente dividido em três fases: crônica, acelerada e blástica. O tratamento de escolha para a fase crônica é o inibidor de tirosino-quinase (ITK) de primeira geração, mesilato de imatinibe, e para os pacientes refratários, utiliza-se os ITK de segunda geração (dasatinibe ou nilotinibe). Estudos têm demonstrado que a leucemia residual pode persistir mesmo nos melhores respondedores aos ITK, uma vez que a terapia não é curativa. Nesse contexto, o presente estudo objetivou avaliar a genotoxicidade e mutagenicidade dos ITK em pacientes com LMC acompanhados no ambulatório de hematologia do Hospital Universitário Walter Cantídio (HUWC). Trata-se de um estudo transversal com 44 pacientes com diagnóstico clínico e molecular de LMC. Os pacientes foram estratificados em três grupos: ao diagnóstico (LMC D) (n=5), em uso de ITK de primeira geração (LMC G1) (n=31) e em uso de ITK de segunda geração (LMC G2) (n=8). O grupo controle (GC) foi composto por indivíduos aparentemente saudáveis. A genotoxicidade e mutagenicidade foram analisadas através do ensaio cometa e teste de micronúcleos. A análise estatística dos dados foi realizada através do programa GraphPad Prism 6.0 utilizando-se os testes de Kruskal–Wallis ou ANOVA, Mann Whitney ou T-student, dependendo da normalidade dos dados e o nível de significância foi de 5% (p < 0,05). Pacientes com LMC apresentaram índice de dano (ID) no DNA estatisticamente mais elevado em comparação ao GC (p < 0,0001). Quando os pacientes foram estratificados, foi verificado um aumento progressivo do ID no DNA nos grupos: LMC D, LMC G1 e LMC G2, respectivamente, em relação ao GC (p < 0,05). Pacientes com LMC apresentaram índice de micronúcleos (IMN), índice de pontes nucleoplasmáticas (IPN) e índice de buds nucleares (IBN) estatisticamente mais elevados em comparação com o GC (p < 0,05). Ao se estratificar os pacientes com LMC, foi verificado que pacientes dos grupos LMC G1 e G2 apresentaram IMN e IPN estatisticamente mais elevados em comparação ao GC (p < 0,001). O IMN também foi elevado no grupo LMC G2 em relação aos pacientes do grupo LMC D (p < 0,01). O índice de bud nuclear (IBN) não apresentou diferença estatística nas análises realizadas após a estratificação dos grupos. Os ITK revolucionaram a terapia da LMC, melhorando a sobrevida dos pacientes. No entanto esses resultados alertam para a relevância de estudos que avaliem os possíveis efeitos genotóxicos e mutagênicos dessa terapia a longo prazo. Os mecanismos envolvidos devem ser elucidados com a finalidade de aprimorar o tratamento, bem como avaliar o impacto clínico que esse dano pode causar.

Made available in DSpace on 2014-08-26T17:14:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 118.pdf: 1479796 bytes, checksum: 7be776b745146d3167dcfef16b0d38d0 (MD5) Previous issue date: 2007 / Os preservantes de madeira são todas e quaisquer sustâncias usadas para evitar o apodrecimento da madeira por microorganismos tornando-a resistente ao ataque e desenvolvimento de organismos xilófagos. Neste trabalho estudou-se como substâncias de interesse o pentaclorofenol e o cobre-8-quinolinolato, substâncias potencialmente tóxicas ao homem. Este trabalho visa avaliar a situação dos materiais de madeira em contato com alimentos em relação aos seus preservantes. Através do desenvolvimento de uma metodologia analítica capaz de determinar os preservantes de madeira e estimar a exposição do ser humano a essas substâncias e seus efeitos toxicológicos. Utilizamos o ensaio de migração para verificação da transferência destas substâncias contidas nas amostras para o solvente simulante, e a eletroforese capilar para determinação e quantificação das substâncias. Além do ensaio Cometa usado para verificar e identificar se substâncias estudadas tiveram atividade genotóxica, identificando possíveis carcinógenos humanos. Nos resultados pôde-se constatar a presença do pentaclorofenol e quantificá-lo nas amostras de palitos de picolé, mas não foi possível determinar a presença do cobre-8-quinolinolato nas amostras. Nos ensaios toxicológicos podemos verificar o efeito genotóxico somente para o cobre-8-quinolinolato, apresentando resultados estatisticamente significativos em relação ao controle, porém este mesmo efeito não pode ser observado para o pentaclorofenol. Com a realização deste projeto, mediante a identificação, determinação quantitativa e avaliação toxicológica das substâncias utilizadas como preservantes de madeira pode-se contribuir através de um estudo interdisciplinar, para atuação eficaz da vigilância sanitária no Brasil. / The wood preservatives are all substances used to avoid the rottenness of wood by microorganisms, turn it resistant to attack and development xylophagous microorganisms. In this work studied like substance of interest the pentachlorophenol and copper-8-quinolinolate, substances potentially toxic. This work aim to evaluate the situation of the wood materials in contact with foodstuff in relation at yours preservatives. It through development of an analytical methodology to be able determine the wood preservative and to estimate human being exposure these substances and your toxicology effects. We use the migration assay to check by transfer these substances contained in the sample to food through simulated solvent and capillary electrophoresis to determine and quantification of the substances. Moreover the Comet assay was used to check and identify genotoxic effect these substances, identifying possible humans carcinogens. The results could it see the presence of the pentachlorophenol and quantify it in the samples popsicle stick, it was not possible to determine the presence of the copper-8-quinolinolate in the samples. In the toxicology assay could check the genotoxic effect only to Copper-8-Quinolinolate, presenting results statistically significant in relation control however this same effect was not observed to pentachlorophenol. With the realization this project, by means of identification through capillary electrophoresis and toxicological evaluation of the PCP can be donating through of a interdisciplinary study for effective actions of the Sanitary Surveillance in the Brazil.

Made available in DSpace on 2016-01-13T13:27:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-31. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-13T13:32:29Z : No. of bitstreams: 1 000856013.pdf: 1820037 bytes, checksum: e81bdc11a8a2cf1bd10aa727667c0182 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A vinhaça, um dos principais resíduos gerados na transformação da cana-de-açúcar em etanol, possui potencial poluidor, frente ao alto volume subproduzido e por suas características físicoquímicas. A contaminação de lagos e rios, por infiltração de resíduos dispostos no solo, como a vinhaça e fertilizantes, por exemplo, merece destaque. Com o intuito de amenizar tais efeitos, o tratamento prévio desses resíduos constitui uma alternativa viável para diminuir os impactos ao meio ambiente. Portanto, este estudo teve por objetivo verificar a efetividade na redução da toxicidade da vinhaça de cana-de-açúcar por meio da correção de seu pH para um valor neutro (7,0), pela adição de cal (CaO), avaliando o seu potencial tóxico em peixes (Oreochromis niloticus). As análises foram realizadas por meio do ensaio do cometa e teste do micronúcleo para avaliação do potencial genotóxico, e análise histopatológica das brânquias, órgão de contato direto com o meio aquático. Após exposição das tilápias às diluições de vinhaça quimicamente tratada com cal, houve mortalidade de 30% dos peixes na diluição de 10%; em ensaios anteriores com vinhaça não tratada, a mortalidade na mesma diluição foi de 100%. O pH neutro (7,0) não permaneceu estável ao longo do bioensaio. Em relação ao ensaio do cometa, foram obtidos valores de escore de danos e cometas classe 3 com diferenças significativas em relação ao controle negativo para todas as diluições, com exceção da diluição de 1%. Não houve diferenças significativas entre os valores de micronúcleo e anormalidades nucleares entre as diluições e o controle negativo; comparando esses resultados com os de ensaios anteriores com diluições de vinhaça não tratada, foi observada uma diminuição da quantidade de micronúcleos. Por meio de analise histopatológica de brânquias, foi observado um aumento nas células clorídricas, principalmente na diluição de 5% / The vinasse, a major waste generated in the processing of sugarcane into etanol, has a polluter potential in front off the volume generated and its physiochemical features. Contamination of lakes and rivers by infiltration of waste disposed in the soil, such as vinasse and fertilizers, deserves atention. In order to mitigate these effects, the pretreatment of this waste is a viable alternative to reduce the environmental impacts. Despite many studies about vinasse, only a few investigates their toxic potential. Therefore, this study aimed to verify the effectiveness in reducing sugarcane vinasse toxicity by pH correction to a neutral value (7.0), by adding lime (CaO), assessing their potential toxicity in fish (Oreochromis niloticus). Analyses were performed using the comet assay and micronucleus test to assess the genotoxic potential, and histopathological analysis of gills, organ that has direct contact with water. After exposure of tilapia to vinasse dilutions chemically treated with lime, 30% of fish in the dilution of 10% died; in earlier bioassays with untreated vinasse, at the same dilution the mortality was 100%. The neutral pH (7.0) has not remained stable during the bioassay. Regarding the comet assay, score damage and class 3 comets had significant differences when compared to the negative control for all dilutions, except for the dilution of 1%. There were no significant differences on the values of micronuclei and nuclear abnormalities between dilutions and negative control; comparing these results with those obtained in previous bioassays, with untreated vinasse dilutions, a decrease was observed in the number of micronuclei. For histopathologic analysis in gills, a slight increase was observed in clorídricas cells number, especially in the dilution of 5%, possibly in response to the presence of zinc in the vinasse samples. Diferents types of histologic changes were observed. The epithelial detachment, the epithelium ... / FAPESP: 13/13228-0

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-20Bitstream added on 2015-05-14T16:59:34Z : No. of bitstreams: 1 000828685_20180220.pdf: 84586 bytes, checksum: d84934c54c4c7bf16f944037a7e4f907 (MD5) Bitstreams deleted on 2018-02-23T13:06:31Z: 000828685_20180220.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2018-02-23T13:07:23Z : No. of bitstreams: 1 000828685.pdf: 508291 bytes, checksum: 0e40447e1566f7e0b0193e5b7f93a678 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As indústrias têxteis têm contribuído para a contaminação dos corpos d’água, por descartar seus efluentes no meio ambiente. Essas indústrias utilizam uma grande diversidade de corantes em seus processos de tingimento, dentre eles, os azocorantes. Estes corantes azóicos, pela sua característica molecular de difícil remoção ou degradação, somado ao seu amplo uso, são considerados altamente detrimentais ao ambiente. O corante Acid Red 114, pertencente a classe dos azocorantes, é o agente químico alvo deste trabalho. Este estudo tem como proposta, investigar a possibilidade de degradação por microrganismos isolados do lodo de uma indústria têxtil e avaliar as toxicidades do corante Acid Red 114 e dos subprodutos gerados na sua biodegradação. Para avaliação da toxicidade deste corante, foram considerados os parâmetros de genotoxicidade e mutagenicidade. Para análise da genotoxicidade, foram utilizados o ensaio do cometa em cultura de hepatoma humano (HepG2). Para avaliar o potencial mutagênico, foram realizados os testes do micronúcleo (MN) em cultura de células HepG2 e o teste de Salmonella/microssoma. A comprovação da biodegradação foi feita por meio do método físico-químico de Espetrofotometria UV-Vis e FTIR. De acordo com os resultados obtidos, o corante Acid Red 114 mostrou-se genotóxico e também mutagênico para as células HepG2, mas não mutagênico para Salmonella typhimurium. O biodegradado gerado pelas bactérias Enterococcus faecalis e Alcaligenes faecalis foi genotóxico e mutagênico para a cultura celular HepG2, mas não foi mutagênico no teste com Salmonella/microssoma. O biodegradado gerado pela bactéria Achromobacter nitridificans apresentou, em células HepG2, potencial genotóxico, mas não foi mutagênico para HepG2 nem para o teste de Salmonella/microssoma. Estes resultados de toxicidade mostraram que o uso deste corante requer bastante cautela, pois ele pode ter ação adversa nos... / Textile industries have contributed to the contamination of water bodies by disposing their effluents into the environment. These industries use a wide variety of dyes in dyeing processes, among them, the azo dyes. These azo dyes due to their molecular characteristics of difficult removal or degradation and their extensive use, are considered highly detrimental to the environment. The dye Acid Red 114, is included in the class of azo dyes, and it is the chemical agent target of this study. This study is proposed to investigate the possibility of degradation by microorganisms isolated from the sludge of a textile industry and evaluate the toxicity of the Acid Red 114 dye and by-products generated in its biodegradation. To evaluate the toxicity of this dye parameters of genotoxicity and mutagenicity were considered. For the genotoxicity analysis, the comet assay in cultured human hepatoma (HepG2) was used. To evaluate the mutagenic potential, the micronucleus test (MN) in HepG2 cultured cells and Salmonella/microsome test were performed. Evidence of biodegradation was taken by physicochemical method of spectrophotometry UV-Vis and FTIR. According to the results, the Acid Red 114 dye showed to be genotoxic and mutagenic to HepG2 cells but not mutagenic to Salmonella typhimurium. The biodegraded generated by the bacteria Enterococcus faecalis and Alcaligenes faecalis was genotoxic and mutagenic to HepG2 cells, but not mutagenic to Salmonella/microsome test. The biodegraded generated by the bacterium Achromobacter nitridificans showed in HepG2 cells, genotoxic potential, but was not mutagenic to HepG2 or Salmonella/microsome test. These toxicity results showed that the use of this dye requires great caution, as it can have adverse action in living beings, including humans, either by direct contact to the dye (e.g. occupational via or use of confectioned products) or by the inadequate treatment of textile effluents or water treatments that use... / FAPESP: 2012/01616-2

Orientador: Daisy Maria Fávero Salvadori / Banca: Elza Tieme Sakamoto Hojo / Banca: Raquel Alves dos Santos / Banca: Camila Correa / Banca: Débora Damasceno / Resumo: Nas últimas décadas, a incidência de indivíduos com sobrepeso ou obesos vem aumentando exponencialmente. Hoje, a obesidade é considerada pela Organização Mundial da Saúde como uma epidemia mundial, com graves consequências que podem levar à morte. A obesidade é uma desordem multifatorial que envolve fatores hereditários, ambiente e estilo de vida, e suas consequências não são apenas sociais ou psicológicas, mas estão principalmente relacionadas à presença de co-morbidades como a hipertensão arterial, diabetes tipo II, doenças cardiovasculares e vários tipos de câncer. Portanto, o controle da obesidade é um desafio para a manutenção da saúde humana, atraindo o interesse de inúmeros pesquisadores que buscam o entendimento dos mecanismos associados ao seu desenvolvimento, bem como novos métodos terapêuticos e de prevenção. Com base nessas premissas, o presente estudo objetivou avaliar a associação entre alterações genéticas e a obesidade, com especial foco para a presença de danos no DNA e para o perfil de expressão e polimorfismos gênicos. A casuística do estudo incluiu 300 mulheres cadastradas na lista de espera para a realização de cirurgia bariátrica e 300 mulheres saudáveis, eutróficas, pareadas por idade. O teste do cometa foi utilizado para avaliação de danos primários no DNA de células sanguíneas; os polimorfismos dos genes da grelina (GHRL)e leptina (LEP)e dos seus receptores (GHSR e LEPR), da interleucina 6(IL-6) e da serotonina (5-HT2C) foram analisados pela técnica de RT-PCR; o perfil de expressão gênica em linfócitos foi avaliado pela metodologia do DNA microarray e a expressão dos genes adiponectina (ADIPOQ) e leptina (LEP) em adipócitos foi avaliada pela técnica de qRT-PCR. Os resultados mostraram que a frequência dos polimorfismos dos genes GHRL(rs26802), GHRS(rs572169), LEP(rs7799039), LEPR(rs 1137101), IL-6 (rs1800796) e 5-HT2C ... / Abstract: In the last decades, the incidence of overweight and obesity has increased worldwide. Nowadays, obesity is considered by the World Health Organization as a global epidemic with severe consequences that can lead to death. Obesity is a multifactorial disorder which involves different factors such as genetic, environment and life style, and its consequences are not only social or psychological, but are also related to the presence of comorbidities such as hyperthension, type 2 diabetes, heart diseases and many types of cancer. Therefore, obesity control has become a challenge for the human health maintenance, catching the attention of researchers that are trying to understand the mechanisms associated to its development, as well as therapeutical and preventive methods. Based on the information above, the present study aimed to evaluate the association between genetic alterations and obesity, with special focus on the presence of DNA damage, gene expression profiling and genetic polymorphisms. Our study included 300 morbid obese women registered for the bariatric surgery and 300 healthy eutrophic women, matched by age. The comet assay was used to assess primary DNA damage in blood cells; the genetic polymorphisms of ghrelin (GHRL), leptin (LEP) and their receptors (GHSR and LEPR), interleukin-6 (IL-6) and serotonin receptor (5-HT2C) were evaluated by the RT-PCR; gene expression profiling in lymphocytes was assessed by DNA microarrays; and adiponectin (ADIPOQ) and leptin (LEP) gene expression in adipocytes were evaluated by qRT-PCR. Our results showed that the frequencies of GHRL (rs26802), GHRS (rs572169), LEP (rs7799039), LEPR (rs 1137101), IL-6 (rs1800796) and 5-HT2C (rs 3813929) polymorphisms were not different between obese and control groups. However, obese presented higher levels of primary DNA damage (single and double strand breaks, alkali-labile sites and oxidative damage) than eutrophic women, indepedent on ... / Doutor

Orientador: José Roberto Fioretto / Banca: Rossano Cesar Bonatto / Banca: Mário Ferreira Carpi / Banca: Marcelo Barciela Brandão / Banca: Regina Gricolli César / Resumo: Não disponível / Abstract: Not available / Doutor

Made available in DSpace on 2016-06-07T17:12:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-21. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:16:59Z : No. of bitstreams: 1 000863929.pdf: 203027 bytes, checksum: 220c4264c28c1c6311dcf10433c1c3d3 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Orientador: Maria Aparecida Marin Morales / Coorientador: Carlos Renato Corso / Banca: Daniela Morais Leme / Banca: Dejanira de Franceschi de Angelis / Resumo: As indústrias têxteis têm contribuído para a contaminação dos corpos d'água, por descartar seus efluentes no meio ambiente. Essas indústrias utilizam uma grande diversidade de corantes em seus processos de tingimento, dentre eles, os azocorantes. Estes corantes azóicos, pela sua característica molecular de difícil remoção ou degradação, somado ao seu amplo uso, são considerados altamente detrimentais ao ambiente. O corante Acid Red 114, pertencente a classe dos azocorantes, é o agente químico alvo deste trabalho. Este estudo tem como proposta, investigar a possibilidade de degradação por microrganismos isolados do lodo de uma indústria têxtil e avaliar as toxicidades do corante Acid Red 114 e dos subprodutos gerados na sua biodegradação. Para avaliação da toxicidade deste corante, foram considerados os parâmetros de genotoxicidade e mutagenicidade. Para análise da genotoxicidade, foram utilizados o ensaio do cometa em cultura de hepatoma humano (HepG2). Para avaliar o potencial mutagênico, foram realizados os testes do micronúcleo (MN) em cultura de células HepG2 e o teste de Salmonella/microssoma. A comprovação da biodegradação foi feita por meio do método físico-químico de Espetrofotometria UV-Vis e FTIR. De acordo com os resultados obtidos, o corante Acid Red 114 mostrou-se genotóxico e também mutagênico para as células HepG2, mas não mutagênico para Salmonella typhimurium. O biodegradado gerado pelas bactérias Enterococcus faecalis e Alcaligenes faecalis foi genotóxico e mutagênico para a cultura celular HepG2, mas não foi mutagênico no teste com Salmonella/microssoma. O biodegradado gerado pela bactéria Achromobacter nitridificans apresentou, em células HepG2, potencial genotóxico, mas não foi mutagênico para HepG2 nem para o teste de Salmonella/microssoma. Estes resultados de toxicidade mostraram que o uso deste corante requer bastante cautela, pois ele pode ter ação adversa nos... / Abstract: Textile industries have contributed to the contamination of water bodies by disposing their effluents into the environment. These industries use a wide variety of dyes in dyeing processes, among them, the azo dyes. These azo dyes due to their molecular characteristics of difficult removal or degradation and their extensive use, are considered highly detrimental to the environment. The dye Acid Red 114, is included in the class of azo dyes, and it is the chemical agent target of this study. This study is proposed to investigate the possibility of degradation by microorganisms isolated from the sludge of a textile industry and evaluate the toxicity of the Acid Red 114 dye and by-products generated in its biodegradation. To evaluate the toxicity of this dye parameters of genotoxicity and mutagenicity were considered. For the genotoxicity analysis, the comet assay in cultured human hepatoma (HepG2) was used. To evaluate the mutagenic potential, the micronucleus test (MN) in HepG2 cultured cells and Salmonella/microsome test were performed. Evidence of biodegradation was taken by physicochemical method of spectrophotometry UV-Vis and FTIR. According to the results, the Acid Red 114 dye showed to be genotoxic and mutagenic to HepG2 cells but not mutagenic to Salmonella typhimurium. The biodegraded generated by the bacteria Enterococcus faecalis and Alcaligenes faecalis was genotoxic and mutagenic to HepG2 cells, but not mutagenic to Salmonella/microsome test. The biodegraded generated by the bacterium Achromobacter nitridificans showed in HepG2 cells, genotoxic potential, but was not mutagenic to HepG2 or Salmonella/microsome test. These toxicity results showed that the use of this dye requires great caution, as it can have adverse action in living beings, including humans, either by direct contact to the dye (e.g. occupational via or use of confectioned products) or by the inadequate treatment of textile effluents or water treatments that use... / Mestre

Orientador: Carmem Silvia Fontanetti Christofoletti / Banca: Paula Suares Rocha / Banca: Sarah Arana / Banca: Elaine Cristina Mathias da Silva Zacarin / Banca: Thaisa Cristina Roat / Resumo: A aplicação indiscriminada de agrotóxicos constitui uma das maiores preocupações na atualidade, sendo o Brasil um dos países que mais uso faz destes produtos. O imidacloprido (IMI) é um dos inseticidas mais utilizados no mundo, principalmente nas culturas de cana-de-açúcar, citros, algodão e café. Apesar de seus benefícios, pode apresentar potencial tóxico e genotóxico em organismos não alvo. O uso de bioindicadores permite o estudo dos possíveis riscos destas substâncias nos organismos. Entre estes, plantas superiores e organismos aquáticos são considerados excelentes para avaliar efeitos de agrotóxicos no ambiente. Neste estudo, foram avaliados os efeitos de IMI em organismos não alvos (Allium cepa, Tradescantia pallida e Oreochromis niloticus) expostos a diferentes concentrações, baseadas na aplicação deste inseticida na cultura de cana-de-açúcar, por meio de ensaios celulares e moleculares. Foram testadas concentrações equivalentes à dose do produto recomendada para esta cultura (400 g/ha), a metade (200 g/ha) para simulação da diluição natural e o dobro (800 g/ha) para simulação do uso indiscriminado. O teste de aberrações cromossômicas e de micronúcleos (MN) em A. cepa e T. pallida foram utilizados para avaliar a toxicidade e genotoxicidade. Ensaio do cometa e teste do MN em eritrócitos de O. niloticus, avaliaram danos em nível primário e cromossômico. Análise das alterações histopatológicas no fígado de O. niloticus e localização in situ das proteínas de choque térmico... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The indiscriminate application of pesticides is a major concern nowadays, and Brazil is one of the countries which use these products heavily on agriculture. The imidacloprid (IMI) is an insecticide sold worldwide, being widely used on sugar cane, citrus, cotton and coffee crops. Despite its benefits, IMI may have potential for inducing genetic changes in non-target organisms. In this sense, the use of bioindicators like higher plants and fishes allow the assessment of possible effects and risks to the environment derived from the use of this insecticide in agriculture. In this study, we evaluated the effects of IMI on non-target organisms (Allium cepa, Tradescantia pallida and Oreochromis niloticus) exposed to different concentrations, based on the application of this insecticide in the sugarcane culture, through cellular and molecular assays. A concentration equivalent to the recommended dose of the product for this culture (400 g/ha), the half (200 g/ha) for simulation of natural dilution and double (800 g/ha) that simulates the indiscriminate use. Chromosomal aberrations and micronucleus test (MN) in A. cepa and T. pallida were analyzed for toxicity and genotoxicity study. Comet assay and MN test in O. niloticus erythrocytes assess damage to primary and chromosomal level. Analysis of histopathological changes in the O. niloticus liver and in situ localization of heat shock protein (HSP70) were analyzed by light microscopy and immunohistochemistry, respectively, were perfo... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Aparecida Marin-Morales / Banca: Silvia Tamie Matsumoto / Banca: Maria Izabel Souza Camargo / Banca: Grasiela de C. S. Aguiar / Banca: Mario Sergio Palma / Resumo: A exposição do homem às substâncias danosas, sejam estas substâncias de origem natural ou sintética, vem crescendo durante as últimas décadas. Esta exposição é capaz de induzir diversos efeitos deletérios nos organismos expostos, provocando diversas doenças e até mesmo a morte. Da mesma forma que aumenta a quantidade de substâncias promotoras de impactos ambientais, também crescem as pesquisas que buscam por novas substâncias que sejam capazes de proteger os organismos destes efeitos deletérios. Esse trabalho tem como objetivo avaliar a atividade citotóxica, genotóxica e antigenotóxica, mutagênica e antimutagênica de venenos de Hymenoptera (especificamente da abelha Apis mellifera e da vespa Polybia paulista), em diferentes concentrações, utilizando para essa avaliação o sistema teste de HepG2. Foi utilizado o ensaio do MTT para se avaliar a citotoxicidade tanto do veneno de A. mellifera como de P. paulista. As concentrações consideradas não citotóxicas (1, 5 e 10μg/mL de veneno de vespa e 0,1, 0,05 e 0,01 μg/mL do veneno de abelha) foram utilizadas para se avaliar o potencial genotóxico (ensaio do cometa) e mutagênico (teste do micronúcleo). Estas concentrações não citotóxicas mostraram-se genotóxicas e mutagênicas para o sistema teste utilizado. Foram utilizadas outras concentrações, mais baixas que as utilizadas nos testes de genotoxicidade e mutagenicidade (1ng/mL, 100pg/mL e 10pg/mL de veneno de vespa e 10pg/mL, 1pg/mL e 0,1pg/mL para o veneno de abelha), para a realização dos testes de antigenotoxicidade e antimutagenicidade com células HepG2. As concentrações utilizadas nesses ensaios mostraram que ambos os venenos, ao invés de inibirem e/ou diminuirem o efeito genotóxico e mutagênico da substância metilmetano sulfonato, aumentaram ainda mais os danos causados por esta substância... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Human exposure to harmful substances, natural or synthetic, is increasing in the last decades. This exposure is able to induce several deleterious effects on the exposed organisms, causing several diseases and even death. As the amount of substances that promote environmental impacts increases, researches seeking for new substances that are able to protect the organisms against these deleterious effects have also increased. This study aimed to evaluate the cytotoxic, genotoxic and antigenotoxic, mutagenic and antimutagenic of Hymenoptera venoms (specifically of the bee Apis mellifera and the wasp Polybia paulista), in different concentrations, using for this evaluation the HepG2 test system. The MTT assay was used to assess the cytotoxicity the venom of A. mellifera and P. paulista. The concentrations considered non cytotoxic (1, 5 and 10μg/mL of the wasp venom and 0.1, 0.05 and 0.01 μg/mL of the bee venom) were used to evaluate the genotoxic (comet assay) and mutagenic potential (micronucleus test). These non cytotoxic concentrations were genotoxic for the test system used. Other concentrations were used, lower than the ones used in the genotoxicity and mutagenicity tests (1ng/mL, 100pg/mL and 10pg/mL of the wasp venom and 10pg/mL, 1pg/mL and 0,1pg/mL for the bee venom), in order to perform the antigenotoxicity and antimutagenicity tests with HepG2 cells. The concentrations used in these assays showed that both venoms, instead of inhibiting and/or decreasing the gentoxic and mutagenic effects of the substance methylmethane sulfonate, increased even more the damages caused by this substance. In order to verify which would be the compound responsible for the effects registered for the venoms, it was also evaluated the effect of phospholipase A2 (PLA2 from A. mellifera)... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor